CN107648297A - 一种黄褐毛忍冬提取物、含有该提取物的制剂及在医药领域的应用 - Google Patents
一种黄褐毛忍冬提取物、含有该提取物的制剂及在医药领域的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107648297A CN107648297A CN201711102084.XA CN201711102084A CN107648297A CN 107648297 A CN107648297 A CN 107648297A CN 201711102084 A CN201711102084 A CN 201711102084A CN 107648297 A CN107648297 A CN 107648297A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- honeysuckle flower
- application
- medicine
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/35—Caprifoliaceae (Honeysuckle family)
- A61K36/355—Lonicera (honeysuckle)
Abstract
本发明公开了一种黄褐毛忍冬提取物、含有该提取物的制剂及在医药领域的应用,该黄褐毛忍冬提取物以黄褐毛忍冬为原料提取富集得到,其中,Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于50%。根据本发明提供的制备方法实施例和药效实施例可知,本发明提供的Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于50%的黄褐毛忍冬提取物具有多种药理作用,可以开发成防治不同疾病的药物;该黄褐毛忍冬提取物的药效强度与黄褐毛总提取物基本等效,但主要药效成分更加明确,可以极大降低患者的服药量,同时便于进行质量控制,符合中药现代化的要求。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,涉及提取物,具体一种黄褐毛忍冬提取物、含有该提取物的制剂及在医药领域的应用。
背景技术
黄褐毛忍冬为忍冬科植物黄褐毛忍冬(L.fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng)的干燥花蕾或带初开的花,首载于《植物分类学报》1979年17卷,2010年之前为贵州省地方药品标准收载,2010年版《中国药典》将黄褐毛忍冬定为山银花药材基源植物之一。
虽然黄褐毛忍冬出现在多种中药方剂中,但是众所周知,中药材整体入药不仅用药量大、增加病人服药负担,还存在成分复杂、有效成分不明确、质量难以控制的问题。随着中药现代化的推进,黄褐毛忍冬的现代化开发迫在眉睫。
申请人在对黄褐毛忍冬的现代化开发中,发现一种以三种常春藤皂苷为主要成分(含量之和不低于50%)的黄褐毛忍冬提取物,该提取物具有多种药效强度与黄褐毛忍冬总提取物相当的药理作用,且主要药效成分明确。现有技术未曾报道过黄褐毛忍冬提取物。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种黄褐毛忍冬提取物,该提取物以三种常春藤皂苷为主要成分(含量之和不低于50%),主要药效成分明确;本发明的第二目的在于提供该黄褐毛忍冬提取物在制备多种疾病的药物中的用途;本发明还提供了该提取物的药物制剂及应用。
本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的:
一种黄褐毛忍冬提取物,以黄褐毛忍冬为原料提取富集得到,其中,DecaisosideE、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于50%。
优选地,上述黄褐毛忍冬提取物中,Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于70%。
优选地,上述黄褐毛忍冬提取物中,Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于90%。
上述任一黄褐毛忍冬提取物在制备防治脑卒中的药物中的应用,或在制备治疗冠心病的药物中的应用,或在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用,或在制备治疗骨质疏松的药物中的应用,或在制备抗病毒的药物中的应用,或在制备抗菌药物中的应用,或在制备抗炎抗氧化的药物中的应用,或在制备保肝利胆的药物中的应用。
一种药物制剂,含有上述任一黄褐毛忍冬提取物,还含有药学上可以接受的载体或赋形剂,制成药学上可以接受的剂型。
优选地,所述药学上可以接受的载体或赋形剂包括一种或多种固体、半固体或液体辅料。
优选地,所述药学上可以接受的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、丸剂、糖浆剂、散剂、膏剂、液体制剂。
上述任一药物制剂在制备防治脑卒中的药物中的应用,或在制备治疗冠心病的药物中的应用,或在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用,或在制备治疗骨质疏松的药物中的应用,或在制备抗病毒的药物中的应用,或在制备抗菌药物中的应用,或在制备抗炎抗氧化的药物中的应用,或在制备保肝利胆的药物中的应用。
本发明提供了一种Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于50%的黄褐毛忍冬提取物,该提取物具有多种药理作用,可以开发成防治不同疾病的药物;该黄褐毛忍冬提取物的药效强度与黄褐毛总提取物基本一致,但主要成分更加明确,可以极大降低患者的服药剂量;本发明还提供了该黄褐毛忍冬提取物的医药用途。
附图说明
图1为HPLC-ELSD分析色谱图,其中A为Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙混合对照品溶液的色谱图,B为黄褐毛忍冬药材70%甲醇总提取物的色谱图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容,但并不以此限定本发明的保护范围。
下述实施例中,提取物中Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙(fulvotomentosideB)和川续断皂苷乙(dipsacoside B)的测定采用HPLC-ELSD法。
实验仪器包括:Agilent 1100型HPLC(Agilent,USA),配备二元泵,自动进样器,柱温箱,ChemStation色谱工作站,Alltech ELSD2000检测器(Alltech,USA),KH500DB型超声波提取器(昆山超声仪器有限公司),十万分之一电子天平(Sartorius,Germany)。
试剂与药材来源:Decaisoside E(S1)、川续断皂苷乙(dipsacoside B,S2)、黄褐毛忍冬皂苷乙(fulvotomentoside B,S3)对照品由本课题组自制,并经MS、1H NMR、13C NMR等波谱手段确证结构,化学结构式如下,经HPLC-ELSD分析,纯度均大于98%。
No. | 皂苷名称 | R1 | R2 | 参考文献序号 |
S1 | DecaisosideE | Xyl1-3Rha1-2Ara | Glc1-6Glc | 2,6 |
S2 | DipsacosideB | Rha1-2Ara | Glc1-6Glc | 1,3,4,5 |
S3 | FulvotomentosideB | Xyl1-3Rha1-2Ara | Xyl1-6Glc | 6 |
Glc:glucoside;Rha:rhamnose;Xyl:xylose;Ara:arabinose.
参考文献:
[1]Kawai H,Kuroyanagi M,K U,et al.Studies on the saponinsofLonicerajaponica Thunb.[J].Chem Pharm Bull,1988,36(12):4769-4775.
[2]茅青(Mao Q),贾宪生(Jia XS).黄褐毛忍冬化学成分的研究[J].药学学报(Acta Pharm Sin),1989,24(4):269-274.
[3]茅青(Mao Q),曹东(Cao D),贾宪生(Jia XS).灰毡毛忍冬化学成分的研究[J].药学学报(Acta Pharm Sin),1993,28(4):273-281.
[4]柴兴云(Chai XY),李萍(Li P),窦静(Dou J),等.山银花中皂苷类成分研究[J].中国天然药物(Chin JNat Med),2004,2(2):83-87.
[5]贾宪生(Jia XS).吊子银花的品质研究[J].贵阳中医学院学报(J GuizhouColl Tradit Chin Med),1997,19(4):58.
[6]汤丹(Tang D等.黄褐毛忍冬中主皂苷成分的结构解析[J].高等学校化学学报(Chem J Chin Univ),2008,29(3):551-553.
乙腈为色谱纯(ROE,USA),超纯水由Milli-Q系统制备(Millipore,Bedford,MA,USA),其余试剂均为分析纯。黄褐毛忍冬药材均购自药材市场,经齐炼文教授鉴定为忍冬属黄褐毛忍冬L.fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng.的干燥花蕾。
HPLC色谱条件:色谱柱,Agilent Zorbax Extend C18(250×4.6mm I.D.,5μmparticle size),SB-C18预柱;流速,1.0mL/min;柱温,30℃;进样量,10μL;流动相为纯水(A)和乙腈(B);洗脱程序:0-20min,27-32.5%B。ELSD参数(参考文献:Quality evaluationofFlos Lonicerae through a simultaneous determination of seven saponins byHPLC with ELSD.J ChromatogrA,2005):漂移管温度,106℃;载气流速,2.6L/min。
样品溶液的制备及含量测定:取提取物适量,精密称定,置容量瓶中,用70%甲醇(v/v)溶解,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,取续滤液,按上述HPLC色谱条件进行HPLC-ELSD分析,使用外标法计算出各提取物中上述三种单体的含量。
色谱分离效果如图1所示,图1中A为Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙(fulvotomentoside B)和川续断皂苷乙(dipsacoside B)混合对照品溶液的色谱图,图1中B为黄褐毛忍冬药材70%甲醇总提取物的色谱图,色谱分离效果优异。
实施例1:黄褐毛忍冬提取物的制备
制备方法一:干燥的黄褐毛忍冬药材5kg,用70%乙醇回流提取3次,每次2h,过滤,合并滤液,减压回收溶剂得到浸膏(取部分干燥得总提取物1),加适量水混悬,过滤,上样于D101大孔树脂,从10%、30%、50%、70%、90%乙醇开始梯度洗脱,根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙,三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从树脂上洗脱完停止收集,将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物1。
制备方法二:干燥的黄褐毛忍冬药材5kg,用90%乙醇浸泡24h,过滤,收集滤液,减压回收溶剂得到浸膏(取部分干燥得总提取物2),加适量水混悬,过滤,上样于AB-8大孔树脂,从10%、30%、50%、70%、90%乙醇开始梯度洗脱,根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙,三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从树脂上洗脱完停止收集,将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物2。
制备方法三:干燥的黄褐毛忍冬药材5kg,水煮6h,过滤,收集滤液,减压浓缩得到浸膏(取部分干燥得总提取物3),过滤,上样于LX-38大孔树脂,从10%、30%、50%、70%、90%乙醇开始梯度洗脱,根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙,三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从树脂上洗脱完停止收集,将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物3。
制备方法四:干燥的黄褐毛忍冬药材5kg,用70%乙醇回流提取3次,每次2h,过滤,合并滤液,减压回收溶剂得到浸膏(取部分干燥得总提取物4),加适量水混悬,依次以石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取。正丁醇部位浸膏进行正相硅胶柱层析(200-300目),以氯仿-甲醇梯度洗脱(20:1、10:1、5:1、2:1),根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙,三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从硅胶上洗脱完停止收集,将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物4。
制备方法五:干燥的黄褐毛忍冬药材5kg,用70%乙醇回流提取3次,每次2h,过滤,合并滤液,减压回收溶剂得到浸膏(取部分干燥得总提取物5),加适量水混悬,依次以石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取。正丁醇部位浸膏进行ODS反相硅胶柱层析,依次用20%、30%、40%、50%甲醇水梯度洗脱,根据薄层板TLC显色法监控洗脱液中是否含有Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙或川续断皂苷乙,三者任一出现在洗脱液中开始收集至三者全部从ODS上洗脱完停止收集,将这部分洗脱液浓缩干燥得黄褐毛忍冬提取物5。
用上述HPLC-ELSD法分别测定上述5种不同制备方法制备的总提取物1-5以及富含Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的黄褐毛忍冬提取物1-5中的Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙总质量百分含量,结果如下表。
由此可见,制备方法一至五可以有效对Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙进行富集,得到富含Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙这三种常春藤皂苷的黄褐毛忍冬提取物1-5。在下述药理作用实施例中,为了便于黄褐毛忍冬提取物1-5药效强度的比较,给药剂量均以其中所含三种皂苷总和进行换算。
实施例2:黄褐毛忍冬提取物的防治脑卒中作用
1、对双侧结扎颈总动脉及迷走神经致小鼠脑缺血后存活时间的影响
将昆明种小鼠60只,按体重和性别随机均分为6组:模型组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组。给药组小鼠分别灌胃给予含50mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,模型组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,连续灌胃2周。于末次灌胃后0.5h,用乙醚浅表麻醉,迅速结扎双侧颈总动脉和迷走神经,观察并记录小鼠存活时间,比较各组小鼠存活时间的差异。
实验结果:模型组小鼠的存活时间为128.6±31.5s;黄褐毛忍冬提取物1-5给药组小鼠的存活时间均在200s以上,显著优于模型组(P<0.05),但是各给药组的存活时间无显著性差异(P>0.05)。该结果证明黄褐毛忍冬提取物1-5均能延长小鼠脑缺血后的存活时间。
各组小鼠具体存活时间如下表。
组别 | 存活时间(s) | 组别 | 存活时间(s) |
模型组 | 128.6±31.5 | 提取物3给药组 | 231.5±30.4 |
提取物1给药组 | 230.7±35.7 | 提取物4给药组 | 234.8±35.1 |
提取物2给药组 | 234.3±33.9 | 提取物5给药组 | 232.9±33.2 |
2、对线栓法致局灶性脑缺血再灌注大鼠模型的影响
将SD大鼠70只,按体重和性别随机均分为7组:正常对照组、模型组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组。给药组大鼠分别灌胃给予含50mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,正常对照组、模型组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,连续灌胃4周。末次给药后1h,ip 30mg/kg10%戊巴比妥钠麻醉大鼠,仰卧位固定,于颈部正中切口,分离并暴露左侧颈总动脉及颈内、外动脉,结扎颈总动脉及颈外动脉近心端,于颈总动脉远心端剪一V形切口,插入MCAO栓线并固定插线,缝合皮肤。阻断血流2h后,拔线实现再灌注,大鼠在脑缺血再灌注48h断头处死大鼠,迅速取出大脑置-20℃冰箱中速冻约15min,取冠状面均匀切成2mm厚的脑片,迅速放入2%TTC溶液中,于37℃避光孵育15min,染色后取出脑片并摄片,采用ImagePlus 6.0测量梗死面积并计算梗死体积与大脑总体积比。
实验结果:模型组大鼠脑缺血体积比为35.5±8.2%,正常对照组大鼠未见明显脑缺血区,证明脑缺血造模成功。与模型组相比,黄褐毛忍冬提取物1-5给药组大鼠脑缺血体积比均在5%左右,各给药组之间无显著性差异(P>0.05),证明黄褐毛忍冬提取物1-5均对大鼠局灶性脑缺血均具有良好的保护作用。各组大鼠脑缺血体积比具体如下表。
组别 | 脑缺血体积比(%) | 提取物2给药组 | 4.8±1.3 |
正常对照组 | 未见明显脑缺血区 | 提取物3给药组 | 5.0±1.1 |
模型组 | 35.5±8.2% | 提取物4给药组 | 4.7±1.3 |
提取物1给药组 | 5.3±1.2 | 提取物5给药组 | 5.1±1.0 |
给予黄褐毛忍冬提取物1-5处理的小鼠经双侧结扎颈总动脉及迷走神经致全脑缺血后,小鼠的存活时间比模型组显著延长;在线栓法MCAO模型中,用黄褐毛忍冬提取物1-5干预后大鼠脑缺血体积比显著改善,结果显示:黄褐毛忍冬提取物1-5对小鼠全脑缺血和大鼠局灶性脑缺血均具有良好的保护作用,可以开发成防治脑卒中的药物。
实施例3:黄褐毛忍冬提取物的治疗冠心病作用
1、动物模型的制备方法
经典冠心病模型:高质饮食喂养造成大鼠动脉硬化,再对大鼠注射大剂量脑垂体后叶素造成急性缺血进行叠加。高脂饮食配方:蛋黄粉(10%)、胆固醇(2%)、猪油(10%)、丙硫氧嘧啶(0.2%)、胆酸钠(0.5%)、正常饲料(77.3%)。每只大鼠(SPF级雄性健康SD大鼠)每天使用35g高脂食物喂养,连续喂养8周,最后一次喂养前72h,模型组大鼠注射垂叶后体素(35U/kg),每天1次,连续注射3天。
2、动物分组与给药
将SPF级雄性健康SD大鼠120只,按体重和性别随机均分为12组:正常对照组、模型组、黄褐毛忍冬提取物1-5给药组、总提取物1-5给药组。模型组和给药组按照上述方法造模,正常对照组始终给予标准饮食。造模结束后,给药组大鼠灌胃给予含50mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,正常对照组、模型组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,连续灌胃4周。
3、指标检测
大鼠处死前,采集颈动脉血,以2500r/min离心15min,然后取上清液,采用ELISA法按照试剂盒说明书测定血浆TXB2、6-K-PGF1α、CK-MB、TroponinⅠ水平。检测结果应用SPSS16.0统计软件分析,数据以(x±s)表示,组间比较用t检验。
二、实验结果
各组大鼠血浆TXB2、6-K-PGF1α、CK-MB、TroponinⅠ比较结果如下表所示:
冠心病是人类发病率和死亡率很高的疾病之一,冠心病主要的病理是冠状动脉粥样硬化,从而导致心肌缺血,产生心肌细胞的损伤。CK-MB和TroponinⅠ是常见的心肌损伤的标志物。6-k-PGFlα是前列腺素I2(PGI2)的代谢产物,而前列腺素I2具有抑制血小板聚集的作用,因而通过检测6-k-PGFlα的表达能够反映出冠心病的严重程度。TXB2是TXA2的降解产物,TXA2能够促进血小板的聚集,可以导致心肌的缺血。6-k-PGFlα和TXB2的表达水平与血小板的活化有着密切的关系,TXA2和PGI2在正常情况下保持平衡状态,而冠心病会打破这种平衡,从而使血小板产生黏附、聚集、释放等作用,导致血栓的形成。
实验结果表明,与正常对照组相比,冠心病模型组大鼠血浆CK-MB和TroponinⅠ水平显著上调,证明造模成功,模型组大鼠出现明显的心肌细胞损伤;与模型组相比,黄褐毛忍冬提取物1-5给药组大鼠血浆CK-MB和TroponinⅠ水平显著下调,证明黄褐毛忍冬提取物1-5对冠心病模型大鼠有明显的心肌保护作用,黄褐毛忍冬提取物1-5给药组之间无显著性差异(P>0.05);与总提取物1-5给药组相比,黄褐毛忍冬提取物1-5给药组给药总量减少60-80%,但是药效达到90%以上等效。与正常对照组相比,冠心病模型组大鼠血浆6-k-PGFlα和TXB2的表达水平明显失衡,而黄褐毛忍冬提取物1-5可以有效逆转冠心病模型大鼠血浆6-k-PGFlα和TXB2失衡,抑制血小板聚集,各给药组之间无显著性差异(P>0.05)。
综上可知,黄褐毛忍冬提取物1-5可以改善冠心病模型大鼠的TXA2和PGI2的不平衡状态,产生一定的抑制血小板聚集作用,对于冠心病模型大鼠心肌损害也有一定的保护作用,且给药剂量小,主要药效成分明确,可以开发成治疗冠心病的药物。
实施例4:黄褐毛忍冬提取物的抑制肝脏糖异生作用
将昆明种小鼠60只,按体重和性别随机均分为6组:对照组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组。给药组小鼠分别灌胃给予含50mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,对照组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,连续灌胃4周,末次灌胃后禁食12h后,尾静脉采血测空腹血糖,记作0min时血糖值;其后,按体重2g/kg剂量腹腔注射L-a-丙氨酸,1h后摘眼球取血,测60min时血糖值。根据0min和60min时血糖值计算糖异生率(%)。最后处死取肝,作肝糖元测定,用蒽酮硫酸法测肝糖原。
结果腹腔注射生糖氨基酸1h后,各组血糖都有升高,但对照组血糖升高幅度明显大于各给药组,依据各组0min和60min时血糖值计算糖异生率(%),如下表所示:
组别 | 肝脏糖异生率(%) | 组别 | 肝脏糖异生率(%) |
对照组 | 36.5±4.4 | 提取物3给药组 | 19.6±4.1 |
提取物1给药组 | 19.3±3.9 | 提取物4给药组 | 19.1±3.5 |
提取物2给药组 | 18.9±3.2 | 提取物5给药组 | 19.5±3.6 |
与对照组相比,黄褐毛忍冬提取物1-5给药组肝脏糖异生率显著降低(P<0.05),各给药组之间无显著性差异(P>0.05)。肝糖原测定结果显示,对照组肝糖原平均含量为0.58g/100g,黄褐毛忍冬提取物1-5给药组肝糖原平均含量均在0.8g/100g以上,与对照组差异显著(P<0.05),各给药组之间无显著性差异(P>0.05)。
上述实验结果表明,黄褐毛忍冬提取物1-5对小鼠糖异生具有明显的抑制作用,对肝糖原的合成有明显的促进作用,证明黄褐毛忍冬提取物1-5可以明显抑制肝脏糖异生,可以开发成治疗肥胖、非酒精性脂肪肝、糖尿病等疾病的药物。
实施例5:黄褐毛忍冬提取物治疗骨质疏松的作用
一、实验方法
将3月龄未经产SD雌性大鼠适应性喂养3天后,随机将其分为两大组,假手术组和去卵巢手术组。假手术组只去除卵巢周围少量脂肪组织。去卵巢手术组行卵巢切除术,术后注射3天40万IU/kg青霉素预防感染。
手术完成待大鼠苏醒之后,将去卵巢手术组随机分为6个组:模型组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组,每组10只,分笼喂养。每天适时添加饲料、换水,观察生存状态,给药前各组大鼠体重无统计学差异。大鼠术后一周基本恢复,进行药物治疗。给药组大鼠灌胃给予含50mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,假手术组和模型组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,连续灌胃12周,于末次灌胃后1h后处死。
骨矿密度检测:动物处死前3天,将大鼠麻醉,以俯卧位整齐排列于测试台上,用Lunar ProdigyAdvance DEXA骨密度测定仪,通过小动物模式对大鼠进行全身扫描,获得图像后用GE公司配套软件对大鼠的骨矿密度(BMD)进行分析。
胫骨生物力学性能检测:取大鼠右侧胫骨,剔净附着的软组织和软骨,保存于-20℃的冰箱中,使用时从冰箱取出复温,用5943单立柱台式材料试验机做胫骨的三点弯曲实验。跨距:12.1mm,压力加载速度:1mm/min,检测过程由计算机自动描记胫骨的位移-载荷曲线、最大载荷、弹性模量和断裂能。
二、实验结果
1、对大鼠骨矿密度(BMD)的影响
双能X线骨密度仪扫描结果显示,去卵巢12周后,与假手术组相比,模型组大鼠股骨BMD显著降低(P<0.05),出现明显的骨质疏松;与模型组相比,黄褐毛忍冬提取物1-5给药组大鼠股骨BMD显著升高(P<0.05),各给药组之间无显著性差异(P>0.05)。
各组BMD如下表所示:
组别 | BMD(g/cm2) | 提取物2给药组 | 210.4±22.1 |
假手术组 | 248.3±23.6 | 提取物3给药组 | 209.7±24.5 |
模型组 | 165.5±18.4 | 提取物4给药组 | 212.8±21.3 |
提取物1给药组 | 208.7±20.2 | 提取物5给药组 | 207.5±20.9 |
2、对大鼠胫骨生物力学性能的影响
胫骨生物力学性能检测结果显示,去卵巢12周后,与假手术组相比,模型组大鼠胫骨最大载荷、弹性模量、断裂能均显著降低(P<0.05);与模型组相比,黄褐毛忍冬提取物1-5给药组大鼠胫骨最大载荷、弹性模量、断裂能均显著升高(P<0.05),各给药组之间无显著性差异(P>0.05)。各组大鼠胫骨最大载荷如下表所示:
骨矿密度BMD是评价骨质疏松症形成及药物防治疗效的可靠指标之一。上述实验结果表明,黄褐毛忍冬提取物1-5可以显著抑制去卵巢大鼠的骨矿密度降低。骨生物力学是研究骨组织在外力作用下的力学特征和骨在受力后的生物学效应,是对骨质量进行评定的一种可靠方法。有学者认为,骨量减少可以影响骨的生物力学性能,使骨生物力学强度降低,因此骨生物力学性能的变化是评价骨质疏松的一个重要而特殊的指标。上述实验结果表明,黄褐毛忍冬提取物1-5可以改善去卵巢大鼠股骨的内在特性。这些结果证明,黄褐毛忍冬提取物1-5可以显著改善骨质疏松模型大鼠的骨特性,可以开发成防治骨质疏松的药物。
实施例6:黄褐毛忍冬提取物的抗病毒作用
按照文献方法测试黄褐毛忍冬提取物1-5的抗呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒I型(HSV-I)和柯萨奇病毒B3型(CVB3)作用(参考文献:疏风解毒胶囊体内抗病毒作用的实验研究,中药新药与临床药理2014年1月第25卷第1期)。
将SPF级ICR小鼠按体重和性别随机均分为7组:正常对照组、病毒对照组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组。除正常对照组外,其余各组每鼠分别在浅麻状态下滴鼻感染10LD50的RSV 0.5mL、10LD50的HSV-10.3mL、10LD50的CVB30.5mL。滴鼻2小时后进行药物干预。给药组小鼠分别灌胃给予含30mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,正常对照组、病毒对照组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,灌胃7次。滴鼻感染病毒结束后共观察2周,逐日记录各组小鼠死亡数。并按公式计算死亡保护率和生命延长率:死亡保护率(%)=(病毒对照组死亡率-给药组死亡率)/病毒对照组死亡率×100%;生命延长率(%)=(给药组平均存活时间-病毒对照组平均存活时间)/病毒对照组平均存活时间×100%。实验结果应用SPSS16.0分析,数据以(x±s)表示,组间比较用t检验。
实验结果表明,黄褐毛忍冬提取物1-5对RSV、HSV-I和CVB3病毒感染小鼠均具有明显的保护作用,各给药组之间无显著性差异(P>0.05)。生命延长率结果如下表:
综上可见,本发明证明黄褐毛忍冬提取物1-5对RSV、HSV-I和CVB3病毒感染小鼠均具有明显的保护作用,黄褐毛忍冬提取物1-5可以开发成抗病毒药物。
实施例7:黄褐毛忍冬提取物的抗菌作用
分别腹腔注射和皮肤感染金黄色葡萄球菌及化脓链球菌建立小鼠感染模型,观察黄褐毛忍冬提取物1-5对感染小鼠的治疗作用。
一、实验材料
试验动物选用6-8周龄昆明种小鼠,体重(22±2)g,雌雄各半。实验前12h禁食不禁水。
化脓链球菌(Streptococcuspyogene)和金黄色葡萄球菌(Staphyloccocusaureus Rosenbach)由中国药科大学生命科学院微生物实验室提供。金黄色葡萄球菌使用牛肉膏蛋白胨液体培养基:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠15g,蒸馏水1000mL,pH7.2;化脓链球菌使用牛脑心浸膏培养基:牛脑心浸膏37g,蒸馏水1000mL,自然pH。经过37℃培养18h,以0.5麦氏比浊液为对照,配制出5×108CFU/mL细菌悬液,备用。
二、实验方法
1、金黄色葡萄球菌和链球菌体表感染小鼠试验
将昆明种小鼠按体重和性别随机均分为12组,每组10只:模型组(金黄色葡萄球菌感染)、模型组(链球菌感染)、黄褐毛忍冬提取物1-5给药组(金黄色葡萄球菌感染)、黄褐毛忍冬提取物1-5给药组(链球菌感染)。将每只小鼠背部脊柱两侧脱毛,用75%乙醇消毒。待乙醇挥发完全后用解剖刀做“井”字切口,待创口血流停止后,分别涂抹金黄色葡萄球菌或链球菌菌液0.2mL,用纱布固定;12h后,给药组在创口涂抹不同药物0.5mL(含25mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,赋形剂为氮酮溶液),模型组在创口涂抹等量赋形剂,纱布包扎固定,每日换药并观察小鼠伤口变化,连续给药5d,共观察8d。
2、金黄色葡萄球菌和链球菌全身感染小鼠试验
取昆明种小鼠若干只,分别腹腔注射不同剂量的金黄色葡萄球菌和链球菌感染菌液,每只小鼠0.5mL,观察48h内各组小鼠的存活情况,分别确定两种致病菌对感染小鼠的最小致死量(MLD)。然后再取昆明种小鼠120只,按体重和性别随机均分为12组,每组10只:模型组(金黄色葡萄球菌感染)、模型组(链球菌感染)、黄褐毛忍冬提取物1-5给药组(金黄色葡萄球菌感染)、黄褐毛忍冬提取物1-5给药组(链球菌感染)。按1MLD菌量每鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌或链球菌0.5mL制备全身感染模型。分别于感染后0、4、8小时进行药物干预。给药组小鼠分别灌胃给予含25mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,模型组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na。记录7d内各组小鼠的死亡情况。
结果应用SPSS 16.0统计软件分析,数据以(x±s)表示,组间比较用t检验。
二、实验结果
1、对金黄色葡萄球菌和链球菌体表感染小鼠的影响
各给药组小鼠伤后1d内可见创口收缩,并有血痂形成,伤后2-3d创口皮肤局部干燥,出现较厚痂皮,伤后4-5d有肉芽组织填充创口,部分痂皮边缘脱落,局部皮肤愈合,伤后8d伤口均全部愈合。模型组小鼠皮肤伤口附近可见大量坏死组织覆盖,处于严重感染状态。
2、对金黄色葡萄球菌和链球菌全身感染小鼠的影响
各组小鼠存活情况如下表所示:
组别 | 金黄色葡萄球菌感染存活数 | 链球菌感染存活数 |
模型组 | 24h内全部死亡 | 24h内全部死亡 |
提取物1给药组 | 全部存活 | 全部存活 |
提取物2给药组 | 全部存活 | 全部存活 |
提取物3给药组 | 全部存活 | 全部存活 |
提取物4给药组 | 全部存活 | 全部存活 |
提取物5给药组 | 全部存活 | 全部存活 |
实验结果表明,黄褐毛忍冬提取物1-5对金黄色葡萄球菌和链球菌体表感染小鼠、金黄色葡萄球菌和链球菌全身感染小鼠均具有明显的抗菌保护作用,可以显著促进体表感染伤口的愈合,显著提高全身感染小鼠的存活率。因此,黄褐毛忍冬提取物1-5可开发成抗菌药物。
实施例8:黄褐毛忍冬提取物的抗炎抗氧化作用
一、实验方法
1、巴豆油所致小鼠耳肿胀实验
将雄性昆明种小鼠70只,按体重和性别随机均分为7组:正常对照组、模型组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组。给药组小鼠分别灌胃给予含10mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,正常对照组和模型组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,连续灌胃1周。末次给药2h后,将1%巴豆油溶液(巴豆油:乙醇:吡啶:乙醚=1:10:20:69)100μ1均匀涂在模型组和给药组小鼠右耳正反两面致炎造模,2h后颈椎脱臼法处死小鼠,沿耳廓剪下右耳,用直径8mm的不锈钢圆冲沿耳缘相同部位冲下,电子天平称重。以小鼠右耳质量减去正常对照组小鼠右耳质量,两耳质量差作为肿胀度,按照如下公式计算抑制率:
抑制率(%)=(模型组肿胀度-给药组肿胀度)/模型组肿胀度×100%。
检测结果应用SPSS 16.0统计软件分析,数据以(x±s)表示,组间比较用t检验。
2、小鼠血清MDA水平和SOD活性测定
将雄性昆明种小鼠60只,按体重和性别随机均分为6组:正常对照组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组。给药组小鼠分别灌胃给予含10mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,正常对照组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,连续灌胃3周。末次给药2h后,各组小鼠断头取血,测定小鼠血清丙二醛(MDA)浓度以及超氧化物歧化酶(SOD)活性,测定方法均按照试剂盒(南京建成生物技术有限公司提供)的说明操作。
检测结果应用SPSS 16.0统计软件分析,数据以(x±s)表示,组间比较用t检验。
二、实验结果
1、对巴豆油所致小鼠耳肿胀的影响
与正常对照组相比,模型组小鼠右耳出现明显肿胀;与模型组相比,各给药组右耳肿胀度明显改善(P<0.05),说明黄褐毛忍冬提取物1-5可以明显改善巴豆油所致小鼠耳肿胀,具有抗炎作用。各给药组之间的抑制率无显著性差异(P>0.05)。
各给药组抑制率(%)计算结果如下表所示。
组别 | 抑制率(%) | 提取物3给药组 | 51.17±6.24 |
提取物1给药组 | 50.22±6.63 | 提取物4给药组 | 48.95±6.01 |
提取物2给药组 | 49.35±6.07 | 提取物5给药组 | 50.35±6.19 |
2、对小鼠血清MDA水平和SOD活性的影响
与正常对照组相比,各给药组小鼠血清MDA水平显著降低,SOD活性显著升高,说明黄褐毛忍冬提取物1-5具有明显的抗氧化作用。各给药组之间无显著性差异(P>0.05)。
测定结果如下表所示。
组别 | MDA(mmol/L) | SOD(U/mL) |
对照组 | 5.72±0.54 | 195.85±26.63 |
提取物1给药组 | 3.72±0.39 | 239.41±30.23 |
提取物2给药组 | 3.68±0.35 | 242.87±31.21 |
提取物3给药组 | 3.75±0.41 | 238.55±29.58 |
提取物4给药组 | 3.71±0.38 | 241.69±28.76 |
提取物5给药组 | 3.64±0.40 | 240.84±30.54 |
巴豆油所致的耳肿胀模型是一种筛选抗炎药物的常用方法;SOD是机体清除超氧阴离子自由基的重要酶,MDA是过氧化脂质(LPO)进一步分解产物,它的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度。上述实验结果表明,黄褐毛忍冬提取物1-5具有明显的抗炎抗氧化作用,可以用于制备抗炎抗氧化的药物。
实施例9:黄褐毛忍冬提取物的保肝利胆作用
一、实验方法
1、对小鼠CCl4急性肝损伤的影响
将雄性昆明种小鼠70只,按体重和性别随机均分为7组:对照组、模型组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组。给药组小鼠分别灌胃给予含20mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,对照组和模型组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,连续灌胃1周。除对照组,其余各组于末次灌胃前4h,皮下注射10mL/kg 0.5%CCl4花生油溶液。染毒后禁食不禁水。16h后摘眼球取血,3500r/min离心15min,分离血清,测定ALT和AST(试剂盒由南京建成生物提供)。
检测结果应用SPSS 16.0统计软件分析,数据以(x±s)表示,组间比较用t检验。
2、对大鼠胆汁流量的影响
将雄性SD大鼠60只,按体重和性别随机均分为6组:对照组和黄褐毛忍冬提取物1-5给药组。给药组小鼠分别灌胃给予含20mg/kg/d三种总皂苷的提取物量,对照组灌胃给予等体积溶媒0.5%CMC-Na,连续灌胃1周。最后一次给药后12小时内禁食不禁水,按文献(李仪奎,中药药理实验方法学,上海:上海科学技术出版社,1991)方法,实验时将大鼠用乌拉坦(5ml/100kg)腹腔注射麻醉,固定于手术台上,进行胆总管插管术,插入直径为0.6mm的塑料细管,待胆汁入管后,用丝线结扎,导管引出腹腔,用10ml的离心管收集胆汁,手术后用止血钳夹闭腹腔,用盐水纱布覆盖,待稳定15-20min后,收集并计量4h内胆汁流量,并按照如下公式计算各给药组胆汁流量增加百分率:胆汁流量增加百分率(%)=(给药组胆汁流量-对照组胆汁流量)/对照组胆汁流量×100%。
检测结果应用SPSS 16.0统计软件分析,数据以(x±s)表示,组间比较用t检验。
二、实验结果
1、对小鼠CCl4急性肝损伤的影响
与对照组相比,模型组小鼠血清转氨酶显著升高(P<0.05),说明CCl4急性肝损伤模型造模成功。与模型组相比,黄褐毛忍冬提取物1-5给药组小鼠血清转氨酶显著降低(P<0.05),说明黄褐毛忍冬提取物1-5可以明显改善CCl4对小鼠的急性肝损伤,具有保肝作用。各给药组之间差异不显著(P>0.05)。结果如下表所示。
2、对大鼠胆汁流量的影响
黄褐毛忍冬提取物1-5均可明显增加大鼠胆汁流量,具有利胆作用。结果如下。
组别 | 胆汁流量增加百分率(%) | 提取物3给药组 | 39.8±4.5 |
提取物1给药组 | 42.5±4.7 | 提取物4给药组 | 41.7±5.1 |
提取物2给药组 | 41.2±4.9 | 提取物5给药组 | 40.5±4.8 |
上述实验结果表明,黄褐毛忍冬提取物1-5可以有效促进大鼠胆汁分泌,可以有效改善CCl4对小鼠的急性肝损伤,证明黄褐毛忍冬提取物1-5具有明显的保肝利胆作用,可以用于制备保肝利胆的药物。
实施例10:含有黄褐毛忍冬提取物的药物制剂
1、片剂:黄褐毛忍冬提取物5g,淀粉50g,硬脂酸镁3g。
制备工艺:取黄褐毛忍冬提取物加淀粉、硬脂酸镁混合均匀,制成颗粒,干燥,压片。
2、胶囊:黄褐毛忍冬提取物5g,淀粉50g,硬脂酸镁3g。
制备工艺:取黄褐毛忍冬提取物加淀粉、硬脂酸镁混合均匀,制成颗粒,干燥,装胶囊。
3、注射液:黄褐毛忍冬提取物1g,注射用氯化钠适量。
制备工艺:取黄褐毛忍冬提取物加注射用水溶解,加入注射用氯化钠至等渗,调节pH值至7-7.1,滤过,冷藏24小时,加注射用水至规定量,滤过,灌封,灭菌,即得。
当然,还可以使用药学上可以接受的载体或赋形剂制成其它药学上可以接受的剂型;药学上可以接受的载体或赋形剂包括一种或多种固体、半固体或液体辅料;药学上可以接受的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、丸剂、糖浆剂、散剂、膏剂、液体制剂。
上述实施例证明,本发明提供的Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于50%的黄褐毛忍冬提取物具有多种药理作用,可以开发成防治不同疾病的药物;该黄褐毛忍冬提取物的药效强度与黄褐毛总提取物基本一致,但主要药效成分更加明确,可以极大降低患者的服药剂量,同时便于进行质量控制。
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容,但本领域技术人员应当知道,不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。
Claims (8)
1.一种黄褐毛忍冬提取物,其特征在于:以黄褐毛忍冬为原料提取富集得到,其中,Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于50%。
2.根据权利要求1所述的黄褐毛忍冬提取物,其特征在于:所述Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于70%。
3.根据权利要求1所述的黄褐毛忍冬提取物,其特征在于:所述Decaisoside E、黄褐毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量百分含量之和不低于90%。
4.权利要求1-3任一所述黄褐毛忍冬提取物在制备防治脑卒中的药物中的应用,或在制备治疗冠心病的药物中的应用,或在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用,或在制备治疗骨质疏松的药物中的应用,或在制备抗病毒的药物中的应用,或在制备抗菌药物中的应用,或在制备抗炎抗氧化的药物中的应用,或在制备保肝利胆的药物中的应用。
5.一种药物制剂,其特征在于:含有权利要求1-3任一所述黄褐毛忍冬提取物,还含有药学上可以接受的载体或赋形剂,制成药学上可以接受的剂型。
6.根据权利要求5所述的药物制剂,其特征在于:所述药学上可以接受的载体或赋形剂包括一种或多种固体、半固体或液体辅料。
7.根据权利要求5所述的药物制剂,其特征在于:所述药学上可以接受的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、丸剂、糖浆剂、散剂、膏剂、液体制剂。
8.权利要求6或7所述药物制剂在制备防治脑卒中的药物中的应用,或在制备治疗冠心病的药物中的应用,或在制备抑制肝脏糖异生的药物中的应用,或在制备治疗骨质疏松的药物中的应用,或在制备抗病毒的药物中的应用,或在制备抗菌药物中的应用,或在制备抗炎抗氧化的药物中的应用,或在制备保肝利胆的药物中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201711102084.XA CN107648297B (zh) | 2017-11-10 | 2017-11-10 | 一种黄褐毛忍冬提取物、含有该提取物的制剂及在医药领域的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201711102084.XA CN107648297B (zh) | 2017-11-10 | 2017-11-10 | 一种黄褐毛忍冬提取物、含有该提取物的制剂及在医药领域的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107648297A true CN107648297A (zh) | 2018-02-02 |
CN107648297B CN107648297B (zh) | 2021-03-02 |
Family
ID=61121267
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201711102084.XA Active CN107648297B (zh) | 2017-11-10 | 2017-11-10 | 一种黄褐毛忍冬提取物、含有该提取物的制剂及在医药领域的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN107648297B (zh) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109846896A (zh) * | 2019-02-27 | 2019-06-07 | 贵州师范大学 | 常春藤皂苷在制备抗血管内皮细胞炎性损伤药物中的应用 |
CN110974834A (zh) * | 2019-12-02 | 2020-04-10 | 贵州中医药大学 | 黄褐毛忍冬酸水解产物在制药中的应用及其制备方法 |
CN111840306A (zh) * | 2020-07-23 | 2020-10-30 | 中南大学 | 川续断皂苷b在制备治疗脑卒中疾病药物中的应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101837057A (zh) * | 2009-03-19 | 2010-09-22 | 中国医学科学院药物研究所 | 中药有效部位复方处方组成、制备工艺及其抗糖尿病用途 |
-
2017
- 2017-11-10 CN CN201711102084.XA patent/CN107648297B/zh active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101837057A (zh) * | 2009-03-19 | 2010-09-22 | 中国医学科学院药物研究所 | 中药有效部位复方处方组成、制备工艺及其抗糖尿病用途 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
张小娜等: "忍冬属药材药效成分及药理作用研究进展", 《中国药理学通报》 * |
柴兴云等: "山银花中皂苷类成分研究", 《中国天然药物》 * |
汤丹等: "黄褐毛忍冬中总皂苷成分的结构解析", 《高等学校化学学报》 * |
赵京芬等: "接骨木及其同属植物的化学成分和药理活性研究进展", 《中国冶金工业医学杂志》 * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109846896A (zh) * | 2019-02-27 | 2019-06-07 | 贵州师范大学 | 常春藤皂苷在制备抗血管内皮细胞炎性损伤药物中的应用 |
CN109846896B (zh) * | 2019-02-27 | 2021-07-13 | 贵州师范大学 | 常春藤皂苷在制备抗血管内皮细胞炎性损伤药物中的应用 |
CN110974834A (zh) * | 2019-12-02 | 2020-04-10 | 贵州中医药大学 | 黄褐毛忍冬酸水解产物在制药中的应用及其制备方法 |
CN111840306A (zh) * | 2020-07-23 | 2020-10-30 | 中南大学 | 川续断皂苷b在制备治疗脑卒中疾病药物中的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN107648297B (zh) | 2021-03-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101185692B (zh) | 一种胆木提取物及其制剂与用途 | |
CN107648297A (zh) | 一种黄褐毛忍冬提取物、含有该提取物的制剂及在医药领域的应用 | |
KR100699790B1 (ko) | 댕댕이나무 추출물을 포함하는 간 질환 예방 및 치료효과를 가지는 약제학적 조성물 | |
CN109846896A (zh) | 常春藤皂苷在制备抗血管内皮细胞炎性损伤药物中的应用 | |
WO2023065376A1 (zh) | 一种包含落新妇苷和/或其异构体的组合物在制备治疗银屑病的药物中的用途 | |
CN101658525B (zh) | 用于抗血栓性疾病的药物组合物及其制备方法和用途 | |
CN107412430A (zh) | 一种玄参水提物及其应用 | |
CN101099753A (zh) | 救必应总皂苷的制备方法及应用 | |
CN102727486A (zh) | 线叶旋覆花内酯a在制备治疗心肌炎药物中的应用 | |
CN103860565B (zh) | 一种治疗肝纤维化的药物组合物 | |
CN109602759A (zh) | 罗汉松实多糖的用途 | |
CN101974011B (zh) | 一种具有药用活性的新化合物灯盏细辛酸甲酯 | |
US20100074975A1 (en) | Pharmaceutical composition for the prevention and treatment of liver disease comprising a lonicera caerulea L. Var. Edulis extract | |
CN102266567B (zh) | 一种黄芩提取物磷脂复合物及其制备方法和用途 | |
CN101538297A (zh) | 荠菜高纯度单体黄酮及其总黄酮的制备方法及其用途 | |
CN104546822A (zh) | 淫羊藿苷元的医药用途 | |
CN103265493A (zh) | 波叶山蚂蝗提取物及提取方法和提取物的新用途 | |
CN104042928B (zh) | 一种治疗糖尿病的药物组合物及其制备方法和用途 | |
CN108379252B (zh) | 醋栗花青素在制备抗肝纤维化药品或保健品中的应用 | |
CN102266386B (zh) | 一种黄芩提取物及其制备方法和用途 | |
CN107019778A (zh) | 一种具有减肥和降血脂作用的组合物及其制备方法与用途 | |
CN101700367B (zh) | 治疗泌尿系统疾病的药物组合物 | |
CN101028311B (zh) | 中药卷柏的新用途 | |
CN105106263B (zh) | 海南眼树莲醇提取物抗炎活性成分及应用 | |
CN101700368B (zh) | 治疗泌尿系统疾病的药物组合物组份的检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |