CN107543872A - 通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法 - Google Patents
通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107543872A CN107543872A CN201610499243.3A CN201610499243A CN107543872A CN 107543872 A CN107543872 A CN 107543872A CN 201610499243 A CN201610499243 A CN 201610499243A CN 107543872 A CN107543872 A CN 107543872A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- edox
- dushaban
- iii
- toluenesulfonic acid
- hydrates
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 39
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 2-Methylbenzenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 38
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 title claims abstract description 26
- 239000012535 impurity Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 36
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 41
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 26
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 10
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 9
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 7
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical compound CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 4
- -1 chloro- 3- methyl phenyl carbamates Chemical class 0.000 claims description 4
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000001664 diethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])N(*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 abstract description 3
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 abstract description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 abstract 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 abstract 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 abstract 1
- IAGUPODHENSJEZ-UHFFFAOYSA-N methyl n-phenylcarbamate Chemical compound COC(=O)NC1=CC=CC=C1 IAGUPODHENSJEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 14
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 5
- OFJRNBWSFXEHSA-UHFFFAOYSA-N 2-(3-amino-1,2-benzoxazol-5-yl)-n-[4-[2-[(dimethylamino)methyl]imidazol-1-yl]-2-fluorophenyl]-5-(trifluoromethyl)pyrazole-3-carboxamide Chemical compound CN(C)CC1=NC=CN1C(C=C1F)=CC=C1NC(=O)C1=CC(C(F)(F)F)=NN1C1=CC=C(ON=C2N)C2=C1 OFJRNBWSFXEHSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 229950010535 razaxaban Drugs 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003658 Atrial Fibrillation Diseases 0.000 description 1
- 102100029117 Coagulation factor X Human genes 0.000 description 1
- HGVDHZBSSITLCT-JLJPHGGASA-N Edoxaban Chemical compound N([C@H]1CC[C@@H](C[C@H]1NC(=O)C=1SC=2CN(C)CCC=2N=1)C(=O)N(C)C)C(=O)C(=O)NC1=CC=C(Cl)C=N1 HGVDHZBSSITLCT-JLJPHGGASA-N 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 230000010100 anticoagulation Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004296 chiral HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- ZYBWTEQKHIADDQ-UHFFFAOYSA-N ethanol;methanol Chemical compound OC.CCO ZYBWTEQKHIADDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 208000021090 palsy Diseases 0.000 description 1
- 238000005220 pharmaceutical analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000003340 retarding agent Substances 0.000 description 1
- 229940011622 savaysa Drugs 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000012430 stability testing Methods 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
本发明公开了一种通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法，采用以表面涂敷有纤维素‑三(4‑氯‑3‑甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶为填料的手性色谱柱，流动相为添加碱性添加剂的甲醇‑乙醇的混合溶液。采用本发明的方法，可以实现依度沙班与异构体Edox‑Ⅱ和Edox‑Ⅲ的完全分离，本方法操作方便，经过方法验证，方法专属性好，灵敏度高，精密准确，利用本发明的方法可以准确的进行甲苯磺酸依度沙班水合物原料药及其制剂的异构体Edox‑Ⅱ和Edox‑Ⅲ的定量分析，从而保证了甲苯磺酸依度沙班水合物及其制剂的质量可控性。
Description
技术领域
本发明属于药物分析领域，具体涉及用手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物及其异构体杂质的方法。
背景技术
甲苯磺酸依度沙班水合物为日本第一三共株式会社研制的小分子口服抗凝药，为凝血因子X(FXa)阻滞剂，于2011年4月由日本厚生劳动省(MHLW)批准在日本上市，用于预防骨科大手术后静脉血栓栓塞包括膝关节全置手术、股关节全置手术以及股关节骨折手术，于2015年1月由美国食品药品管理局(FDA)批准以商品名Savaysa在美国上市，用于降低非瓣膜性心房颤动患者的卒中和系统性栓塞的风险。
甲苯磺酸依度沙班水合物结构中含有3个手性中心，应存在8个异构体，不同立体构型可能会产生不同的药理活性，从而可能具有不同的药效和毒副作用。手性异构体对药品的质量影响较大，因此对于甲苯磺酸依度沙班水合物中其他构型异构体的检测对其质量控制具有重要的意义。
根据其合成工艺分析，甲苯磺酸依度沙班水合物原料中可能含有的异构体为Edox-Ⅰ、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ，结构见表1。
表1甲苯磺酸依度沙班水合物及其异构体信息表
其中Edox-Ⅰ可采用反相HPLC法分离检测，Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ在反相条件下无法实现分离，需采用手性色谱柱进行拆分。
目前甲苯磺酸依度沙班水合物的文献报道多为药理作用、临床评价、合成方法等。有文献报道用手性HPLC法拆分其他沙班类药物，文献《利伐沙班及其光学异构体的HPLC法分离与测定》(中国医药工业杂志,2015,46(11):1220-1222)报道崔萍等用研创IB手性柱拆分了利伐沙班及其光学异构体。文献《HPLC法测定利伐沙班中对映异构体的含量》(中国药师,2014,17(10):1629-1631)报道张倩如等用Chiralpak IA手性柱拆分了利伐沙班及其对映异构体，但目前尚未见甲苯磺酸依度沙班水合物异构体检测的文献报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法，可以将甲苯磺酸依度沙班水合物异构体杂质为Edox-Ⅱ与Edox-Ⅲ进行有效分离，从而可以准确控制甲苯磺酸依度沙班水合物的质量，从而实现甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的分离测定。
本发明所用的液相色谱方法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物(Edox)与其异构体杂质的方法，采用以表面涂敷有纤维素-三(4-氯-3-甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶为填料的手性色谱柱，以添加碱性试剂的甲醇-乙醇混合溶液作为流动相，甲醇-乙醇体积比为30:70～50:50，碱性试剂与甲醇-乙醇混合溶液的体积比为0.05％～0.5％。
上述所说的手性色谱柱选自牌号DAICEL CHIRALCEL OX-H手性色谱柱(规格4.6mm×250mm，5μm)。
本发明的碱性添加剂选自以下溶剂二乙胺、丁胺或乙醇胺，优选的碱性添加剂为二乙胺。
本发明所述的方法，其流动相甲醇-乙醇的混合溶液配比为30:70～50:50，优选的配比为40:60。
上述所说的有机混合溶液中包含的碱性添加剂与甲醇-乙醇溶液的体积比为0.05％～0.5％，优选的体积比为0.3％。
本发明所述的分离测定方法，可按以下方法实现：
1)系统适用性溶液的制备：取Edox对照品、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各适量，加流动相溶解并制成三者的混合溶液，其中Edox浓度为0.01mg/ml～2mg/ml，Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的浓度分别为Edox浓度的0.5％～1％。
2)供试品溶液：取Edox供试品适量，加流动相溶解并稀释制成0.01mg/ml～2mg/ml的溶液。
3)对照溶液：精密量取供试品溶液0.1ml～1.0ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。
4)色谱条件：采用以表面涂敷有纤维素-三(4-氯-3-甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶为填料的手性色谱柱；以添加体积比为0.05％～0.5％碱性添加剂的配比为30:70～50:50的甲醇与乙醇的混合溶液为流动相，碱性添加剂为二乙胺、丁胺或乙醇胺，流动相优选为甲醇-乙醇-二乙胺40:60:0.3；检测波长为：210nm～310nm，优选为290nm；流速为0.5ml/min～1.0ml/min，优选为1.0ml/min；柱温为：0℃～40℃，优选为35℃。
5)甲苯磺酸依度沙班水合物的异构体测定：精密量取上述供试品溶液和对照溶液各5μl～20μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱柱，按照主成分自身对照法计算样品中异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的量。
本发明的有益效果：采用本发明的方法来控制甲苯磺酸依度沙班水合物中的异构体杂质含量，可以实现依度沙班与异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的完全分离，本方法操作方便，经过方法验证，方法专属性好，灵敏度高，精密准确，利用本发明的方法可以准确的进行原料药甲苯磺酸依度沙班水合物及其制剂的异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的定量分析，从而保证了甲苯磺酸依度沙班水合物原料及其制剂的质量可控性。
附图说明
图1：实施例1甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体分离的系统适用性图谱
图2：实施例1甲苯磺酸依度沙班水合物中异构体杂质测定的空白溶剂图谱
图3：实施例1甲苯磺酸依度沙班水合物中异构体杂质测定的其他杂质干扰试验图谱
图4：实施例1甲苯磺酸依度沙班水合物中异构体杂质测定的图谱
图5：实施例2甲苯磺酸依度沙班水合物片中异构体杂质测定的空白辅料图谱
图6：实施例2甲苯磺酸依度沙班水合物片中异构体杂质测定的图谱
具体实施方式：
实施例仅对本发明内容做进一步说明，并不限定本发明，本发明的技术保护范围以权 利要求书为准。
本发明所用的甲苯磺酸依度沙班水合物原料、异构体Edox-Ⅱ、异构体Edox-Ⅲ、各其他杂质、甲苯磺酸依度沙班水合物及空白辅料均为本公司自制。
本发明所用的仪器：Dionex U-3000高效液相色谱仪，Chromeleon色谱工作站(Themo公司)，XSE105分析电子天平(瑞士METTLER TOLEDO公司)。
实施例1本发明所述的甲苯磺酸依度沙班水合物中的异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ测定的方法验证。
色谱柱：DAICEL CHIRALCEL OX-H手性色谱柱(规格4.6mm×250mm，5μm)；
流动相：甲醇-乙醇-二乙胺(40:60:0.3)；
检测波长：290nm；
流速：1.0mL/min；
柱温：35℃。
1.1系统适用性试验
取Edox对照品、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各适量，加流动相溶解并制成每1ml中含Edox1mg、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各5μg的混合溶液，精密量取20μl，照上述色谱条件进样分析，结果显示：Edox-Ⅲ、Edox、Edox-Ⅱ依次出峰，三者之间分离度为15.5和13.3，达基线分离(见图1)。
1.2专属性试验
甲苯磺酸依度沙班水合物原料中可能存在的杂质见表2，取Edox、Edox-Ⅱ、Edox-Ⅲ及表2中杂质各适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中含Edox1mg，Edox-Ⅱ、Edox-Ⅲ及表2中各杂质各5μg的混合溶液，精密量取空白溶剂(流动相)及上述混合溶液各20μl，照上述色谱条件进样分析。结果显示，空白溶剂对Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的测定无干扰，见图2；Edox-Ⅱ、Edox-Ⅲ与其相邻杂质的分离度均＞1.5，其他杂质对Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的测定无干扰。见表3和图3。
表2甲苯磺酸依度沙班水合物原料中可能存在的其他杂质信息表
表3混合溶液检测结果
1.3线性与范围试验
精密称取Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各适量，置同一量瓶中，加流动相溶解稀释制成一系列浓度的混合标准溶液。分别精密量取20μl，照上述色谱条件进样分析，以各成分的定量限浓 度作为最低浓度，供试品溶液浓度的0.3％作为最高浓度，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，结果见表4。结果显示，各成分标准曲线的回归线的相关系数(R)均＞0.990，符合要求。
表4线性范围考察结果
| 组分 | 线性方程 | 范围 |
| Edox-Ⅱ | A＝0.5967C+0.0123相关系数(R)为0.9995 | 0.37μg/ml～2.81μg/ml |
| Edox-Ⅲ | A＝0.5940C-0.0017相关系数(R)为1.0000 | 0.04μg/ml～2.80μg/ml |
1.4检测限和定量限试验
取Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各适量，用流动相逐步定量稀释后，照上述色谱条件进样分析，以各杂质信噪比约为10:1时的相应浓度作为定量限浓度，以信噪比约为3:1时的相应浓度作为检测限浓度，结果Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的定量限分别为：0.41μg/ml、0.04μg/ml，检测限分别为0.17μg/ml和0.015μg/ml。
1.5溶液稳定性试验
精密量取供试品溶液和对照溶液，分别放置0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h后，分别精密量取20μl，照上述色谱条件进样分析，结果显示，供试品溶液放置12h，Edox-Ⅱ均未检出，主峰面积及Edox-Ⅲ峰面积无变化；对照溶液放置12h，主峰面积无变化。因此供试品溶液及对照溶液12h内稳定。
1.6准确度试验
取Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中各约含20μg的溶液，作为对照品储备液。取样品(批号：150331批)约10mg，12份，精密称定，置10ml量瓶中，分别加流动相适量，超声振摇使溶解，放冷至室温，分别精密加入上述母液0ml、0.4ml、0.5ml和0.6ml(各3份)，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；再取对照品储备液0.5ml，至10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl，照上述色谱条件进样分析，计算低、中、高三种杂质浓度水平的供试液中Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的回收率，结果Edox-Ⅱ低、中、高三种浓度水平的平均回收率分别为：98.6％、101.8％、101.4％，平均回收率(n＝9)为100.6％，RSD(n＝9)为3.3％；Edox-Ⅲ低、中、高三种浓度水平的平均回收率分别为：100.7％、102.3％、102.9％，平均回收率(n＝9)为102.0％，RSD(n＝9)为1.9％。结果显示，本方法准确度好。
1.7精密度试验
由两个试验人员，分别于不同日期，各配制6份供试品溶液和对照溶液，使用不同仪 器，分别精密量取20μl，照上述色谱条件进样分析。结果，两个人员测得Edox-Ⅱ均为未检出，Edox-Ⅲ均为0.02％，RSD为0。结果表明，本方法精密度好。
1.8耐用性试验
分别考察检测波长变化±5nm、柱温变化±5℃、流速相对值变化±20％、二乙胺的量变化±10％，甲醇的量变化±5％以及使用三根不同批号色谱柱测定时，仪器色谱行为的变化(考察系统适用性及150331批样品中异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的含量)。结果显示，各条件下，Edox与异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的分离度均＞10，Edox-Ⅱ均为未检出，Edox-Ⅲ均为0.02％。结果表明，本方法耐用性好。
1.9样品测定
取Edox对照品、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各适量，加流动相溶解并制成每1ml含Edox1mg、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各5μg的混合溶液，作为系统适用性溶液。取Edox供试品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成1mg/ml的溶液，作为供试品溶液，精密量取1.0ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。分别精密量取20μl，照上述色谱条件进样分析。按主成分自身对照法计算各样品中异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的量。结果150331、150408、150413三批原料中Edox-Ⅱ均为未检出，Edox-Ⅲ均＜0.05％。见图4。
实施例2本发明所述的甲苯磺酸依度沙班水合物片中的异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ测定。
取Edox对照品、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各适量，加流动相溶解并制成每1ml含Edox1mg、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各5μg的混合溶液，作为系统适用性溶液。取甲苯磺酸依度沙班水合物片细粉适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含甲苯磺酸依度沙班水合物1.0mg的溶液，摇匀、滤过，作为供试品溶液，精密量取1.0ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取甲苯磺酸依度沙班水合物片空白辅料适量，加流动相溶解并稀释制成相应浓度的溶液，作为空白辅料溶液。分别精密量取20μl，照实施例1所述色谱条件进样分析。按主成分自身对照法计算各样品中异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的量。结果空白辅料对测定无干扰，150701、150702、150703三批片剂中Edox-Ⅱ均为未检出，Edox-Ⅲ均＜0.05％。见图5和图6。
Claims (7)
1.一种通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的方法，其特征在于，该方法的色谱条件为采用以表面涂敷有纤维素-三(4-氯-3-甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶为填料的手性色谱柱，以添加碱性试剂的甲醇-乙醇混合溶液作为流动相，所述甲醇-乙醇体积比为30:70～50:50，所述碱性试剂与甲醇-乙醇混合溶液的体积比为0.05％～0.5％。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述手性色谱柱为DAICEL CHIRALCEL OX-H手性色谱柱。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述碱性添加剂为二乙胺、丁胺或乙醇胺。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，该方法包括如下步骤：
1)系统适用性溶液的制备：取Edox对照品、Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ各适量，加流动相溶解并制成三者的混合溶液，其中Edox浓度为0.01mg/ml～2mg/ml，Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的浓度分别为Edox浓度的0.5％～1％，即得。
2)供试品溶液：取Edox供试品适量，加流动相溶解并稀释制成0.01mg/ml～2mg/ml的溶液，即得。
3)对照溶液：精密量取供试品溶液0.1ml～1.0ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。
4)色谱条件：采用以表面涂敷有纤维素-三(4-氯-3-甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶为填料的手性色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm；流动相为甲醇-乙醇-二乙胺40:60:0.3；检测波长为：210nm～310nm；流速为0.5ml/min～1.0ml/min；柱温为：0℃～40℃。
5)甲苯磺酸依度沙班水合物的异构体测定：精密量取上述供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照主成分自身对照法计算样品中异构体Edox-Ⅱ和Edox-Ⅲ的量。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述步骤4)中的检测波长为290nm。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述步骤4)中的流速为1ml/min。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述步骤4)中的柱温为35℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610499243.3A CN107543872B (zh) | 2016-06-29 | 2016-06-29 | 通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610499243.3A CN107543872B (zh) | 2016-06-29 | 2016-06-29 | 通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107543872A true CN107543872A (zh) | 2018-01-05 |
| CN107543872B CN107543872B (zh) | 2022-03-08 |
Family
ID=60965993
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610499243.3A Active CN107543872B (zh) | 2016-06-29 | 2016-06-29 | 通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107543872B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109580833A (zh) * | 2018-12-31 | 2019-04-05 | 辰欣药业股份有限公司 | 一种西格列汀原料及制剂中对映异构体杂质的测定方法 |
| CN110726800A (zh) * | 2019-11-22 | 2020-01-24 | 重庆柳江医药科技有限公司 | 对甲苯磺酸依度沙班一水合物警示结构杂质的检测方法 |
| CN112684092A (zh) * | 2020-12-21 | 2021-04-20 | 浙江海翔川南药业有限公司 | 利伐沙班中间体对映异构体杂质的分析方法 |
| CN113884601A (zh) * | 2021-10-29 | 2022-01-04 | 哈药集团技术中心 | 一种甲苯磺酸艾多沙班异构体检测方法 |
| CN113945666A (zh) * | 2021-11-01 | 2022-01-18 | 哈药集团技术中心 | 一种甲苯磺酸艾多沙班起始物料a中对映异构体检测方法 |
| CN115389655A (zh) * | 2022-08-11 | 2022-11-25 | 唯智医药科技（北京）有限公司 | 6-甲醛基-2,2二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯异构体杂质检测 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20120053349A1 (en) * | 2009-05-15 | 2012-03-01 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Oxamide derivative |
| CN103492348A (zh) * | 2011-02-17 | 2014-01-01 | 武田药品工业株式会社 | 旋光的二氢苯并呋喃衍生物的制备方法 |
| CN104359998A (zh) * | 2014-10-22 | 2015-02-18 | 江苏中谱检测有限公司 | 一种气相色谱-串联质谱检测甲磺酸甲酯的方法 |
| CN105008325A (zh) * | 2013-03-29 | 2015-10-28 | 第一三共株式会社 | 光学活性二胺化合物的制备方法 |
-
2016
- 2016-06-29 CN CN201610499243.3A patent/CN107543872B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20120053349A1 (en) * | 2009-05-15 | 2012-03-01 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Oxamide derivative |
| CN103492348A (zh) * | 2011-02-17 | 2014-01-01 | 武田药品工业株式会社 | 旋光的二氢苯并呋喃衍生物的制备方法 |
| CN105008325A (zh) * | 2013-03-29 | 2015-10-28 | 第一三共株式会社 | 光学活性二胺化合物的制备方法 |
| CN104359998A (zh) * | 2014-10-22 | 2015-02-18 | 江苏中谱检测有限公司 | 一种气相色谱-串联质谱检测甲磺酸甲酯的方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| PASAM SATYANARAYANA REDDY 等: "Determination of Edoxaban in Bulk and in Tablet Dosage Form by Stability Indicating High-Performance Liquid Chromatography", 《PHARMACEUTICAL SCIENCES》 * |
| 刘永强 等: "依度沙班对甲苯磺酸盐一水合物合成路线图解", 《中国新药杂志》 * |
| 解静蕾 等: "依度沙班对甲苯磺酸盐一水合物", 《中国药物化学杂志》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109580833A (zh) * | 2018-12-31 | 2019-04-05 | 辰欣药业股份有限公司 | 一种西格列汀原料及制剂中对映异构体杂质的测定方法 |
| CN109580833B (zh) * | 2018-12-31 | 2021-12-03 | 辰欣药业股份有限公司 | 一种西格列汀原料及制剂中对映异构体杂质的测定方法 |
| CN110726800A (zh) * | 2019-11-22 | 2020-01-24 | 重庆柳江医药科技有限公司 | 对甲苯磺酸依度沙班一水合物警示结构杂质的检测方法 |
| CN112684092A (zh) * | 2020-12-21 | 2021-04-20 | 浙江海翔川南药业有限公司 | 利伐沙班中间体对映异构体杂质的分析方法 |
| CN113884601A (zh) * | 2021-10-29 | 2022-01-04 | 哈药集团技术中心 | 一种甲苯磺酸艾多沙班异构体检测方法 |
| CN113945666A (zh) * | 2021-11-01 | 2022-01-18 | 哈药集团技术中心 | 一种甲苯磺酸艾多沙班起始物料a中对映异构体检测方法 |
| CN115389655A (zh) * | 2022-08-11 | 2022-11-25 | 唯智医药科技（北京）有限公司 | 6-甲醛基-2,2二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯异构体杂质检测 |
| CN115389655B (zh) * | 2022-08-11 | 2024-04-09 | 唯智医药科技（北京）有限公司 | 6-甲醛基-2,2二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯异构体杂质检测 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107543872B (zh) | 2022-03-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107543872A (zh) | 通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法 | |
| CN106706785B (zh) | 一种采用高效液相色谱检测厄贝沙坦氢氯噻嗪片中有关物质的方法 | |
| CN106383186B (zh) | 同时测定14种维生素含量的高效液相色谱分析方法 | |
| CN105067724B (zh) | 一种检测新利司他中有机溶剂残留的方法 | |
| CN105699524B (zh) | 一种替格瑞洛中异构体杂质含量的检测方法 | |
| CN105510482B (zh) | 一种替格瑞洛原料中异构体杂质含量的检测方法 | |
| CN105301135B (zh) | 高效液相色谱法检测替格瑞洛中手性异构体含量的方法 | |
| CN104251889B (zh) | 复方感冒药片中盐酸去氧肾上腺素、马来酸氯苯那敏和布洛芬三种成分含量的测定方法 | |
| Shakya et al. | Determination of pioglitazone hydrochloride in bulk and pharmaceutical formulations by UV spectrophotometric method | |
| Prasanna et al. | METHOD DEVELOPMENT AND VALIDATION OF SIMULTANEOUS DETERMINATION OF METFORMIN AND SAXAGLIPTIN IN PHARMACEUTICAL DOSAGE FORM BY RP-HPLC. | |
| CN104535690B (zh) | 一种测定桂利嗪固体制剂中桂利嗪含量的方法 | |
| Samineni et al. | Development and validation of analytical method for estimation of balofloxacin in bulk and pharmaceutical dosage form by RP-HPLC | |
| CN106525994A (zh) | 一种氨酚曲马多胶囊有关物质的测定方法 | |
| CN114354789B (zh) | 一种同时测定卡博替尼类似物及其有关物质的方法 | |
| CN106645494B (zh) | 依匹哌唑起始物料有关物质的检测方法 | |
| CN102841169B (zh) | 一种高效液相色谱梯度法测定左亚叶酸钙有关物质的方法 | |
| Patel et al. | Stress degradation studies on Telmisartan and development of a validated method by UV spectrophotometry in bulk and pharmaceutical dosage forms | |
| CN104965031B (zh) | 复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量测定方法 | |
| CN108344811A (zh) | 一种注射用脂质体中有机溶剂残留的检测方法 | |
| CN104181240B (zh) | 一种测定软胶囊囊材中羟苯乙酯含量的方法 | |
| CN104374861A (zh) | 一种用hplc分离测定利奥西呱原料药的有关物质的方法 | |
| Doki et al. | Method development and validation of RP-HPLC method for simultaneous estimation of clidinium bromide, chlordiazepoxide and dicyclomine hydrochloride in bulk and combined tablet dosage forms | |
| CN104251891A (zh) | 替米考星、磺胺二甲嘧啶复方制剂有关物质的检测方法 | |
| CN110441437A (zh) | 一种米氏酸含量的测定方法 | |
| CN104807934B (zh) | 异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20231227 Address after: No. 63, Kexin Road, Jiangbei New District, Nanjing, Jiangsu 211505 Patentee after: CHANG'AO PHARMACEUTICAL TECHNOLOGY (HOLDINGS) LTD. Address before: 210038 No. 1 Heng Fei Road, Nanjing economic and Technological Development Zone, Jiangsu, China Patentee before: NANJING CHANGAO PHARMACEUTICAL SCIENCE & TECHNOLOGY Co.,Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right |