CN107531751A - 还原型谷胱甘肽的晶体 - Google Patents

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Abstract

本发明提供还原型谷胱甘肽的稳定且容易加工的晶体及其制造方法。根据本发明，通过将还原型谷胱甘肽的金属盐的非晶体悬浮在疏水性有机溶剂中后，向所得到的悬浮液中添加水，使还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体析出，由此制造还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体。

Description

还原型谷胱甘肽的晶体
技术领域
本发明涉及作为例如健康食品、药品、化妆品等的产品、原料或中间体等有用的还原型谷胱甘肽的晶体。
背景技术
已知还原型谷胱甘肽(γ-L-谷氨酰基-L-半胱氨酰基甘氨酸)是生物中广泛存在的物质，除了作为辅酶发挥作用之外，还在肝脏中具有解毒作用。因此，还原型谷胱甘肽被广泛用作药品、健康食品和化妆品等的产品、原料或中间体。
上述产品、原料和中间体中使用的还原型谷胱甘肽的形态从其操作良好性出发优选为粉末。但是，通过冷冻干燥、喷雾干燥等通常的干燥粉末的制造法得到的还原型谷胱甘肽的非晶体(amorphous)的吸湿性高且流动性也不充分，因此不适合加工。
作为还原型谷胱甘肽的晶体，已知有其游离体的晶体(专利文献1)，但该游离体的晶体的溶解度低，因此不适合于液体制剂，并且由于为酸性，因而在加工时需要注意。因此，需要保存稳定性良好且容易加工的形态的还原型谷胱甘肽晶体。
将还原型谷胱甘肽用二硫键连结而得到的氧化型谷胱甘肽(谷胱甘肽的二聚体)的游离体的一水合物(专利文献2)和六水合物(专利文献3)是已知的，但还原型谷胱甘肽的水合物晶体和盐晶体是未知的。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：国际公开第2008/047792号
专利文献2：国际公开第2003/035674号
专利文献3：国际公开第2011/132724号
发明内容
发明所要解决的问题
本发明的目的在于提供作为例如健康食品、药品、化妆品等的产品、原料或中间体等有用的还原型谷胱甘肽的金属盐晶体。
用于解决问题的手段
本发明涉及下述(1)～(22)。
(1)一种还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体。
(2)如上述(1)所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体，其中，还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体为还原型谷胱甘肽与选自由钠、钾、钙和镁组成的组中的金属的盐的晶体。
(3)如上述(1)所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体，其中，还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体为还原型谷胱甘肽与钠的盐(以下称为“还原型谷胱甘肽钠盐”)的晶体(以下称为“还原型谷胱甘肽钠盐晶体”)。
(4)如上述(3)所述的晶体，其中，还原型谷胱甘肽钠盐晶体为还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体。
(5)如上述(4)所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，在衍射角(2θ)为19.90°±0.20°、25.58°±0.20°和26.88°±0.20°处具有峰。
(6)如上述(5)所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为20.16°±0.20°、24.68°±0.20°、26.30°±0.20°、27.68°±0.20°和33.20±0.20°处具有峰。
(7)如上述(6)所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为17.90°±0.20°、20.86°±0.20°、22.10°±0.20°和25.30°±0.20°处具有峰。
(8)如上述(7)所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为6.42±0.20°、18.90±0.20°和29.30±0.20°处具有峰。
(9)如上述(4)～(8)中任一项所述的晶体，其中，在单晶X射线结构解析中，在-173℃下进行测定的情况下，具有大致如下的晶胞参数：α＝90°；β＝90°；γ＝90°；Z＝4；且空间群为P212121(#19)。
(10)如上述(3)所述的晶体，其中，还原型谷胱甘肽钠盐晶体为还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体。
(11)如上述(10)所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，在衍射角(2θ)为25.92°±0.20°、20.28°±0.20°和27.28°±0.20°处具有峰。
(12)如上述(11)所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为20.52°±0.20°、25.02°±0.20°、21.26°±0.20°、26.66°±0.20°和28.08±0.20°处具有峰。
(13)如上述(12)所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为22.48°±0.20°、33.56°±0.20°、19.70°±0.20°和18.32°±0.20°处具有峰。
(14)如上述(13)所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为19.26±0.20°、28.74±0.20°和29.64±0.20°处具有峰。
(15)一种还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，包括下述工序：在将还原型谷胱甘肽的金属盐的非晶体悬浮在疏水性有机溶剂中后，向所得到的悬浮液中添加水，由此使还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体析出。
(16)如上述(15)所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，其中，疏水性有机溶剂为己烷或甲苯。
(17)一种还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，包括下述工序：在将还原型谷胱甘肽的金属盐的非晶体悬浮在疏水性有机溶剂中后，向所得到的悬浮液中添加甲醇或乙醇的水溶液，由此使还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体析出。
(18)一种还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，包括下述工序：使还原型谷胱甘肽的游离体溶解在金属的氢氧化物水溶液中，将pH调节至5.0～8.0，获得还原型谷胱甘肽的金属盐的水溶液，然后将所得到的水溶液浓缩，接着将相对于该浓缩水溶液为0.1～3倍量的C1～C6的醇逐次少量地逐渐添加至该浓缩水溶液中，然后添加还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体作为籽晶，使还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体析出。
(19)如上述(15)、(17)或(18)所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，其中，还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体为还原型谷胱甘肽与选自由钠、钾、钙和镁组成的组中的金属的盐的一水合物晶体。
(20)如上述(15)、(17)或(18)所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，其中，还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体为还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体。
(21)如上述(18)所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，其中，C1～C6的醇为甲醇或乙醇。
(22)一种还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体的制造方法，其特征在于，使还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体在80℃以上干燥3小时以上。
发明效果
根据本发明，提供作为例如健康食品、药品、化妆品等的产品、原料或中间体等有用的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体。
附图说明
图1是示出还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体的粉末X射线衍射的峰图样的图。图的纵轴为强度(单位cps)、横轴为衍射角(2θ)(单位°)。
图2是示出还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体的粉末X射线衍射的峰图样的图。图的纵轴为强度(单位cps)、横轴为衍射角(2θ)(单位°)。
具体实施方式
1.本发明的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体
本发明的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体可以为无水晶体，也可以为水合物晶体。可以优选列举水合物晶体，可以更优选列举一水合物晶体。这是因为一水合物晶体的保存稳定性优良。
另外，本发明的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体可以为包含α晶体和β晶体等多晶型的晶体。其中，优选α晶体。作为晶体，可以列举α晶体在总还原型谷胱甘肽的金属盐晶体中所占的比率优选为95％以上、更优选为97％以上、进一步优选为98％以上、更进一步优选为99％以上、特别优选为99.5％以上、最优选为99.9％以上的晶体。
本发明的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体只要是还原型谷胱甘肽与任意一种金属的盐的晶体即可，对于金属没有限制。作为金属，优选属于碱金属和碱土金属的金属，更优选选自由钠、钾、钙和镁组成的组中的金属，进一步优选钠。
本发明的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体可以列举包含相对于谷胱甘肽为等价的分子数的金属离子的晶体。更具体而言，可以列举金属离子价数相对于谷胱甘肽离子价数通常为0.5～2、优选为0.8～1.2、更优选为1.0的晶体。
另外，作为本发明的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体，可以列举其pH通常为5.0～8.0、更优选为5.5～7.5、进一步优选为6.0～7.0的晶体。
更具体而言，在本发明的还原型谷胱甘肽与钠的盐(以下称为“还原型谷胱甘肽钠盐”)的晶体(以下称为“还原型谷胱甘肽钠盐晶体”)为一水合物晶体的情况下，在使用CuKα作为X射线源实施粉末X射线衍射时，在其衍射角(2θ)为19.90°±0.20°、25.58°±0.20°和26.88°±0.20°处具有峰。
优选进一步在2θ为20.16°±0.20°、24.68°±0.20°、26.30°±0.20°、27.68°±0.20°和33.20±0.20°处具有峰。
更优选进一步在(2θ)为17.90°±0.20°、20.86°±0.20°、22.10°±0.20°和25.30°±0.20°处具有峰。
进而优选进一步在2θ为6.42±0.20°、18.90±0.20°和29.30±0.20°处具有峰。
最优选为以表1所示的值规定的晶体，且为具有图1所示的衍射图样的晶体。
表1
作为进行粉末X射线衍射时使用的分析装置和测定条件，分析装置使用株式会社理学公司制造的试样水平型多功能X射线衍射装置UltimaIV，测定条件可以列举下述条件：X射线源使用封入有铜靶的管，对试样照射未进行单色化的X射线，使用能量分解型检测器对源自CuKα射线(波长)的衍射X射线进行检测。
更具体的本发明的还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体优选在单晶X射线结构解析中，在-173℃下进行测定的情况下，具有大致如下的晶胞参数：α＝90°；β＝90°；γ＝90°；Z＝4；且空间群为P212121(#19)。
更优选为在单晶X射线结构解析中，在-173℃下进行测定的情况下，以表2所示的值规定的晶体。
表2
作为确定本发明的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体结构的方法，可以列举利用单晶X射线衍射装置进行的结构解析(SXRD)。将还原型谷胱甘肽的金属盐的单晶安装到衍射仪中，在室温的大气中或规定温度的惰性气体气流中使用规定波长的X射线对衍射图像进行测定。根据由衍射图像计算出的面指数和衍射强度的组，进行基于直接法的结构确定和基于最小二乘法的结构精密化[Acta Cryst.A64,112(2008)]，得到单晶结构。作为单晶X射线衍射装置，可以使用例如安捷伦科技公司制造的单晶X射线结构解析装置SuperNova。
另外，更具体而言，在本发明的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体为无水晶体的情况下，在使用CuKα作为X射线源实施上述粉末X射线衍射时，在其衍射角(2θ)为25.92°±0.20°、20.28°±0.20°和27.28°±0.20°处具有峰。
优选进一步在衍射角(2θ)为20.52°±0.20°、25.02°±0.20°、21.26°±0.20°、26.66°±0.20°和28.08±0.20°处具有峰。
更优选进一步在衍射角(2θ)为22.48°±0.20°、33.56°±0.20°、19.70°±0.20°和18.32°±0.20°处具有峰。
进而优选进一步在衍射角(2θ)为19.26±0.20°、28.74±0.20°和29.64±0.20°处具有峰。
最优选为以表3所示的值规定的还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体，且为具有图2所示的衍射图样的晶体。
表3
2.本发明的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法
[还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体的制造方法]
(1)基于晶型转变的制造方法
作为本发明的制造方法，可以列举下述的还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体的制造方法，该制造方法包括下述工序：在将还原型谷胱甘肽与金属的盐的非晶体悬浮在疏水性有机溶剂中后，向所得到的悬浮液中添加水，由此使还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体析出。
或者，可以列举下述的还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体的制造方法，该制造方法包括下述工序：在将还原型谷胱甘肽与金属的盐的非晶体悬浮在疏水性有机溶剂中后，向所得到的悬浮液中添加甲醇或乙醇的水溶液，由此使还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体析出。
还原型谷胱甘肽与金属的盐的非晶体可以通过在还原型谷胱甘肽的游离体中加入等摩尔的金属的氢氧化物和水进行中和后，使用液氮进行快速冷冻，并且使其干燥而获得。
还原型谷胱甘肽的游离体可以为非晶体，也可以为晶体。晶体也可以由协和发酵生化株式会社购入。非晶体可以通过利用公知的方法对使用发酵法(国际公开第2008/126784号)或酶法[Appl.Microbiol.Biotechnol.,66,233(2004)和日本特开昭60-105499号公报等]得到的还原型谷胱甘肽进行纯化后，利用冷冻干燥或喷雾干燥等方法进行干燥而得到。
金属的氢氧化物优选碱金属或碱土金属的氢氧化物，特别优选选自由钠、钾、钙和镁组成的组中的金属的氢氧化物。作为金属的氢氧化物，可以最优选列举氢氧化钠。
向还原型谷胱甘肽中加入金属的氢氧化物和水，通常搅拌1～12天、优选搅拌5～10天、更优选搅拌7天而使其完全溶解后，利用液氮快速冷却，使用市售的冷冻干燥机进行干燥，由此能够获得还原型谷胱甘肽与金属的盐的非晶体。
通过使还原型谷胱甘肽的金属盐的非晶体分散、悬浮在疏水性有机溶剂中并向所得到的悬浮液中添加水，能够使还原型谷胱甘肽的金属盐从非晶体向晶体转变。
作为疏水性有机溶剂，可以列举例如己烷和甲苯等。相对于该疏水性有机溶剂每1ml，使通常5～100mg、优选为10～80mg、更优选为20～50mg的还原型谷胱甘肽的金属盐的非晶体分散。
添加至还原型谷胱甘肽的金属盐溶液中的水的量过多时，会向非晶体中供给水滴而发生液态化。因此，作为水的添加量，可以列举例如相对于疏水性有机溶剂1ml，通常为1～20μl、优选为2～15μl、更优选为2～12μl、特别优选为5～10μl。
添加水后，进行搅拌，由此能够获得还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体。作为所得到的还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体，优选为还原型谷胱甘肽与选自由钠、钾、钙和镁组成的组中的金属的盐的一水合物晶体，更优选为还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体。该晶体可以通过减压干燥等进行干燥。
另外，在上述中，通过添加甲醇或乙醇的水溶液来代替水，也能够获得还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体。
作为甲醇或乙醇的水溶液的添加量，可以列举例如相对于疏水性有机溶剂每1ml，以80％的甲醇水溶液或乙醇水溶液计为10～60μl。另外，若考虑甲醇和乙醇与己烷等疏水性有机溶剂的亲和性以及水相对于上述疏水性有机溶剂的添加量，只要是与80％的甲醇水溶液或乙醇水溶液的10～60μl对应的浓度的醇溶液及其添加量，就能够获得还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体。
(2)使用籽晶的晶体的制造方法
通过使用上述(1)中获得的还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体作为籽晶，即使以工业规模也能够制造还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体。
使还原型谷胱甘肽的游离体溶解在金属的氢氧化物水溶液中，将pH调节至5.0～8.0，获得还原型谷胱甘肽的金属盐水溶液，然后将该水溶液利用例如过滤器等过滤后，进行浓缩。
将浓缩水溶液暂时冷却后，缓慢地添加C1～C6的醇并进行搅拌，然后添加还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体作为籽晶。
使析出的晶体熟化后，再次进行冷却，然后将还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体分离。对分离得到的晶体进行干燥，由此能够获得还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体。
作为所得到的还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体，优选为还原型谷胱甘肽与选自由钠、钾、钙和镁组成的组中的金属的盐的一水合物晶体，更优选为还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体。
作为金属的氢氧化物，优选碱金属或碱土金属的氢氧化物，特别优选选自由钠、钾、钙和镁组成的组中的金属的氢氧化物。作为金属的氢氧化物，可以最优选列举氢氧化钠。
使还原型谷胱甘肽的游离体溶解在金属的氢氧化物水溶液中，通常将pH调节至5.0～8.0、优选调节至5.5～7.5、更优选调节至6.0～7.0，获得还原型谷胱甘肽的金属盐的水溶液。还原型谷胱甘肽的金属盐的水溶液通常减压浓缩至400～900g/L、优选减压浓缩至500～850g/L、更优选减压浓缩至600～800g/L。
浓缩水溶液通常冷却至10～30℃、优选冷却至15～28℃、更优选冷却至20～25℃，然后逐次少量地缓慢添加C1～C6的醇、优选添加浓缩水溶液的0.1～3倍量、优选0.5～2倍量、更优选与该浓缩水溶液基本等量的甲醇或乙醇。关于添加甲醇或乙醇的速度，例如在该浓缩水溶液为100ml的情况下，可以列举1.0～2.0ml/分钟。
相对于浓缩水溶液中含有的还原型谷胱甘肽的量(以游离体换算)，作为籽晶添加的还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体的量可以列举例如0.1～5％、优选列举0.2～3％、更优选列举0.3～2％。
添加籽晶后，放置在室温～80℃之间的任意温度下，由此能够使析出的晶体熟化。加热优选以例如20℃/小时的比例进行。
熟化时间可以是任意的，可以优选列举30分钟～20小时、更优选列举1小时～15小时。
在进行加热熟化的情况下，优选在进行冷却后在该冷却温度下使晶体熟化。冷却可以以例如5℃/小时的比例进行，作为熟化温度，可以列举15℃～室温、更优选列举20～25℃。
熟化时间可以是任意的，可以优选列举30分钟～5小时、更优选列举1小时～3小时。
熟化后，通过对晶体进行过滤或离心分离而分离晶体，然后对晶体进行干燥、例如进行减压干燥，由此能够获得还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体。
[还原型谷胱甘肽的金属盐的无水晶体的制造方法]
对于上述中获得的还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体，利用现有公知的任意方法、例如减压干燥、真空干燥、流化床干燥、通风干燥等进行干燥，由此得到白色的还原型谷胱甘肽的金属盐的无水晶体。可以优选列举使还原型谷胱甘肽的金属盐的一水合物晶体在80℃以上干燥3小时以上的方法。具体而言，例如使还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体在105℃下进行20小时的通风干燥，由此得到还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体。
实施例
以下，记载本发明的实施例，但本发明并不限定于此。
[实施例1]
基于晶型转变的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造1
(1)还原型谷胱甘肽的金属盐的非晶体的制造
向还原型谷胱甘肽的游离体的晶体(协和发酵生化株式会社制)0.5g中加入超纯水50mL和2mol/L的氢氧化钠水溶液813μL，使还原型谷胱甘肽完全溶解。将加入有溶解液的容器放入液氮中，对该溶液进行快速冷冻后，在冷冻干燥机中进行3天以上的减压干燥，由此获得还原型谷胱甘肽钠盐的非晶体。
(2)向还原型谷胱甘肽的金属盐晶体的转变
使上述(1)中获得的还原型谷胱甘肽钠盐的非晶体50mg分散在己烷1.0mL中后，添加5μL水，搅拌7天。通过抽吸过滤将析出的晶体分离，然后进行减压干燥，由此获得还原型谷胱甘肽钠盐晶体。
[实施例2]
基于晶型转变的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造2
使利用与实施例1(1)相同的方法获得的还原型谷胱甘肽的钠盐的非晶体250mg分散于己烷5mL中后，添加80％乙醇水溶液55μL，搅拌7天。通过抽吸过滤将析出的晶体分离，然后进行减压干燥，由此获得还原型谷胱甘肽钠盐晶体。
(试验例1)
粉末X射线衍射分析
将实施例1和2中获得的还原型谷胱甘肽钠盐晶体供于粉末X射线衍射分析。
分析条件和实施例1中获得的晶体的测定结果如下。
分析装置：理学电机公司制造的试样水平型多功能X射线衍射装置UltimaIV
测定条件：X射线源CuKα、测定波长使用未实施利用单色仪的单色化的Kα射线
表4
另外，将粉末X射线衍射分析的谱图示于图1中。
实施例2中获得的晶体也利用与上述同样的方法进行分析，将图1的谱图与实施例2中获得的晶体的谱图进行比较，结果两者非常一致。因此确认了实施例2中获得的晶体与实施例1中获得的晶体为同一晶型。
(试验例2)
水分含量的测定
将实施例1中获得的晶体供于下述条件的热分析。
测定装置：SSI Nanotechnologies公司(现：Hitachi High-Technologies公司)制造的热分析装置TG/DTA 6200型
测定条件：由以2℃/小时的速度从50℃升温至170℃时的重量变化量计算出水分含量
从升温开始到分解(170℃附近)之前，确认到约5％的重量减少。根据还原型谷胱甘肽钠盐的理论水分值，认为实施例1中获得的晶体为一水合物晶体。
(试验例3)
吸湿性试验
在下述条件下对实施例1(1)中获得的还原型谷胱甘肽钠盐的非晶体和实施例1中最终获得的还原型谷胱甘肽钠盐晶体的吸湿性进行比较。
保管条件：40℃、相对湿度75％(用饱和食盐水进行调节)
测定条件：利用精密天平称量样品约0.3g后，填充至塑料容器中，在上述条件下保管后，再次称量样品，计算出重量变化率
结果如下。需要说明的是，将试验开始时各自的重量设为100％，测定各经过时间的样品的重量。表5中，-表示未进行测定。
表5
经过时间(小时) 0 0.25 2 4 10 20 48
晶体重量(％) 100 - 100.7 - 101.9 102 102.9
非晶体重量(％) 100 100.7 104.1 106.2 110.2 117.3 125.8
确认到与非晶体相比，晶体不易吸湿，保存稳定性优良。
[实施例3]
还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体的制造
将游离体的谷胱甘肽晶体(从KOJIN.Co.Ltd购入)310g溶解在水中，使用氢氧化钠水溶液将pH调节至6.0，制成1000mL。将所得到的水溶液中的250mL供于下一工序。
将该250mL的水溶液进行浓缩而制成100mL的浓缩液，在将该浓缩液维持于25℃的同时用1小时滴加110mL的100％甲醇，然后添加0.75g的实施例1中得到的晶体作为籽晶，引发结晶。使晶体浆料在70℃下熟化1小时、在25℃下熟化12小时后，滤取出该晶体，使其在25℃下通风干燥，由此得到35.7g的还原型谷胱甘肽钠盐晶体。
(试验例4)
粉末X射线衍射分析
将实施例3中获得的还原型谷胱甘肽钠盐晶体供于粉末X射线衍射分析。
分析条件和实施例3中获得的晶体的测定结果如下。
分析装置：理学电机公司制造的试样水平型多功能X射线衍射装置UltimaIV
测定条件：X射线源CuKα、测定波长使用未实施利用单色仪的单色化的Kα射线
将图1的谱图与实施例1中获得的晶体的谱图进行比较，结果两者非常一致。因此，确认了实施例1中获得的晶体与实施例1中获得的晶体是同一晶型。
(试验例5)
单晶X射线结构解析
为了确定晶体的结构，对于实施例3中获得的还原型谷胱甘肽钠盐晶体，使用测定装置(安捷伦科技公司制造的单晶X射线结构解析装置SuperNova)实施单晶X射线衍射(SXRD)。首先，将还原型谷胱甘肽的金属盐的单晶安装到衍射仪中，在室温的大气中或规定温度的惰性气体气流中，使用规定波长的X射线测定衍射图像。接着，根据由衍射图像计算出的面指数和衍射强度的组，进行基于直接法的结构确定和基于最小二乘法的结构精密化[Acta Cryst.A64,112(2008)]，得到单晶结构。将其结果归纳于表6。
上述测定的结果，确认了该晶体确实是还原型谷胱甘肽钠盐的晶体，是晶胞内具有水分子的一水合物。另外，Flack参数(Flack parameter)[Acta Cryst.A39,876.(1983)]为-0.12(11)，几乎为0，由此确认了与解析结果的绝对构型不相矛盾。
表6
[实施例4]
还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体的制造
将实施例3中获得的还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体5.0g在105℃下进行20小时的通风干燥，由此得到4.6g的白色晶体。
(试验例6)
水分含量的测定
在下述条件下对实施例4中获得的晶体进行测定。
测定装置：平沼产业公司制造的自动水分测定装置AQV-2200
利用卡尔费休(Karl Fischer)法对该晶体中含有的水分量进行测定，结果为1.3重量％，根据与理论水分量的比较可知，该还原型谷胱甘肽钠盐晶体为还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体。
(试验例7)
粉末X射线衍射分析
按照与上述试验例4同样的步骤将实施例4中获得的还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体供于粉末X射线衍射分析。将其结果示于表7。另外，将粉末X射线衍射分析的谱图示于图2。
表7
如表7所示，实施例4中获得的晶体的粉末X射线衍射结果与实施例1中得到的还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体相比较，衍射角稍有不同。认为本结果是由于如下原因导致的：在干燥的过程中，水分子在不伴有分子的位置、构象的大幅变化的情况下从还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体上脱离，伴随着晶格的略微收缩，各衍射峰的强度发生了变化。同样的变化在参考文献(Cryst.Growth Des.Vol.16,p1543,2016)中也可以得到确认。
使用特定的方式对本发明进行了详细说明，但对本领域技术人员而言显而易见的是，可以在不脱离本发明的意图和范围的情况下进行各种变更和变形。需要说明的是，本申请基于2015年3月31日提交的日本专利申请(日本特愿2015-074084)，可通过引用援引其全部内容。
产业上的可利用性
根据本发明，提供作为例如健康食品、药品、化妆品等的产品、原料或中间体等有用的还原型谷胱甘肽的晶体。

Claims (22)

1.一种还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体。
2.如权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体，其中，还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体为还原型谷胱甘肽与选自由钠、钾、钙和镁组成的组中的金属的盐的晶体。
3.如权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体，其中，还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体为还原型谷胱甘肽与钠的盐(以下称为“还原型谷胱甘肽钠盐”)的晶体(以下称为“还原型谷胱甘肽钠盐晶体”)。
4.如权利要求3所述的晶体，其中，还原型谷胱甘肽钠盐晶体为还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体。
5.如权利要求4所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，在衍射角(2θ)为19.90°±0.20°、25.58°±0.20°和26.88°±0.20°处具有峰。
6.如权利要求5所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为20.16°±0.20°、24.68°±0.20°、26.30°±0.20°、27.68°±0.20°和33.20±0.20°处具有峰。
7.如权利要求6所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为17.90°±0.20°、20.86°±0.20°、22.10°±0.20°和25.30°±0.20°处具有峰。
8.如权利要求7所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为6.42°±0.20°、18.90°±0.20°和29.30°±0.20°处具有峰。
9.如权利要求4～8中任一项所述的晶体，其中，在单晶X射线结构解析中，在-173℃下进行测定的情况下，具有大致如下的晶胞参数：α＝90°；β＝90°；γ＝90°；Z＝4；且空间群为P212121(#19)。
10.如权利要求3所述的晶体，其中，还原型谷胱甘肽钠盐晶体为还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体。
11.如权利要求10所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，在衍射角(2θ)为25.92°±0.20°、20.28°±0.20°和27.28°±0.20°处具有峰。
12.如权利要求11所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为20.52°±0.20°、25.02°±0.20°、21.26°±0.20°、26.66°±0.20°和28.08°±0.20°处具有峰。
13.如权利要求12所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为22.48°±0.20°、33.56°±0.20°、19.70°±0.20°和18.32°±0.20°处具有峰。
14.如权利要求13所述的晶体，其特征在于，在粉末X射线衍射中，进一步在衍射角(2θ)为19.26°±0.20°、28.74°±0.20°和29.64°±0.20°处具有峰。
15.一种还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，包括下述工序：在将还原型谷胱甘肽的金属盐的非晶体悬浮在疏水性有机溶剂中后，向所得到的悬浮液中添加水，由此使还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体析出。
16.如权利要求15所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，其中，疏水性有机溶剂为己烷或甲苯。
17.一种还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，包括下述工序：在将还原型谷胱甘肽的金属盐的非晶体悬浮在疏水性有机溶剂中后，向所得到的悬浮液中添加甲醇或乙醇的水溶液，由此使还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体析出。
18.一种还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，包括下述工序：使还原型谷胱甘肽的游离体溶解在金属的氢氧化物水溶液中，将pH调节至5.0～8.0，获得还原型谷胱甘肽的金属盐的水溶液，然后将所得到的水溶液浓缩，接着将相对于该浓缩水溶液为0.1～3倍量的C1～C6的醇逐次少量地缓慢添加至该浓缩水溶液中，然后添加还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体作为籽晶，使还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体析出。
19.如权利要求15、17或18所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，其中，还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体为还原型谷胱甘肽与选自由钠、钾、钙和镁组成的组中的金属的盐的一水合物晶体。
20.如权利要求15、17或18所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，其中，还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体为还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体。
21.如权利要求18所述的还原型谷胱甘肽的金属盐的晶体的制造方法，其中，C1～C6的醇为甲醇或乙醇。
22.一种还原型谷胱甘肽钠盐的无水晶体的制造方法，其特征在于，使还原型谷胱甘肽钠盐的一水合物晶体在80℃以上干燥3小时以上。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114096330A (zh) * 2020-06-02 2022-02-25 维白奥锤有限公司 金属相变化合物及其制备方法

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014112641A1 (ja) * 2013-01-21 2014-07-24 協和発酵バイオ株式会社 一酸化窒素濃度上昇剤
US11186610B2 (en) 2016-12-20 2021-11-30 Kyowa Hakko Bio Co., Ltd. Crystal of glutathione trisulfide dihydrate and method for producing same
CN110678477B (zh) * 2017-06-08 2023-07-25 协和发酵生化株式会社 氧化型谷胱甘肽二阳离子盐的晶体及其制造方法
CN108129550B (zh) * 2017-12-21 2021-07-02 广州白云山天心制药股份有限公司 一种还原型谷胱甘肽的晶型及其制备方法
IT201800006336A1 (it) * 2018-06-14 2019-12-14 Glutatione ridotto in forma solida amorfa altamente solubile e processo per ottenerlo

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH03220392A (ja) * 1990-01-24 1991-09-27 Konica Corp 結晶変換によるチタニルフタロシアニンの製造方法
JP2005015682A (ja) * 2003-06-27 2005-01-20 Konica Minolta Business Technologies Inc Ｂ型チタニルフタロシアニン結晶の製造方法と感光性顔料及び電子写真感光体
CN101074202A (zh) * 2006-05-16 2007-11-21 重庆药友制药有限责任公司 一种注射用还原型谷胱甘肽的制备方法
CN101535278A (zh) * 2006-10-13 2009-09-16 巴斯夫欧洲公司 2-氯-5-[3，6-二氢-3-甲基-2，6-二氧代-4-(三氟甲基)-1-(2h)嘧啶基]-4-氟-n-[[甲基(1-甲基乙基)氨基]磺酰基]苯甲酰胺的水合物
CN102329370A (zh) * 2011-09-22 2012-01-25 山东金城医药化工股份有限公司 还原型谷胱甘肽单钠盐的制备方法
CN102725389A (zh) * 2009-12-30 2012-10-10 巴斯夫欧洲公司 包含谷氨酸-n,n-二乙酸(glda)或其衍生物的固体及其制备方法
WO2012137824A1 (ja) * 2011-04-06 2012-10-11 協和発酵バイオ株式会社 還元型グルタチオンの製造法
CN102803567A (zh) * 2009-06-03 2012-11-28 协和发酵生化株式会社 制造还原型谷胱甘肽的方法
WO2014133129A1 (ja) * 2013-02-28 2014-09-04 協和発酵バイオ株式会社 還元型グルタチオンの製造法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5735549A (en) * 1980-08-12 1982-02-26 Ajinomoto Co Inc Obtaining method of amino acid hydrate crystal
JPS5735548A (en) * 1980-08-12 1982-02-26 Ajinomoto Co Inc Drying method of amino acid crystal
JPS6127999A (ja) * 1984-07-16 1986-02-07 Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd グルタチオンの精製方法
EP1447409B1 (en) 2001-10-25 2009-03-11 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Crystal of oxidized glutathione and process for producing the same
CN101541827A (zh) 2006-10-16 2009-09-23 协和发酵生化株式会社 谷胱甘肽的结晶及其制造方法
KR101893621B1 (ko) 2010-04-21 2018-08-30 교와 핫꼬 바이오 가부시키가이샤 산화형 글루타티온의 결정 및 이의 제조 방법

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH03220392A (ja) * 1990-01-24 1991-09-27 Konica Corp 結晶変換によるチタニルフタロシアニンの製造方法
JP2005015682A (ja) * 2003-06-27 2005-01-20 Konica Minolta Business Technologies Inc Ｂ型チタニルフタロシアニン結晶の製造方法と感光性顔料及び電子写真感光体
CN101074202A (zh) * 2006-05-16 2007-11-21 重庆药友制药有限责任公司 一种注射用还原型谷胱甘肽的制备方法
CN101535278A (zh) * 2006-10-13 2009-09-16 巴斯夫欧洲公司 2-氯-5-[3，6-二氢-3-甲基-2，6-二氧代-4-(三氟甲基)-1-(2h)嘧啶基]-4-氟-n-[[甲基(1-甲基乙基)氨基]磺酰基]苯甲酰胺的水合物
CN102803567A (zh) * 2009-06-03 2012-11-28 协和发酵生化株式会社 制造还原型谷胱甘肽的方法
CN102725389A (zh) * 2009-12-30 2012-10-10 巴斯夫欧洲公司 包含谷氨酸-n,n-二乙酸(glda)或其衍生物的固体及其制备方法
WO2012137824A1 (ja) * 2011-04-06 2012-10-11 協和発酵バイオ株式会社 還元型グルタチオンの製造法
CN102329370A (zh) * 2011-09-22 2012-01-25 山东金城医药化工股份有限公司 还原型谷胱甘肽单钠盐的制备方法
WO2014133129A1 (ja) * 2013-02-28 2014-09-04 協和発酵バイオ株式会社 還元型グルタチオンの製造法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CAIRA等: "Crystalline polymorphism of organic compounds", 《TOPICS IN CURRENT CHEMISTRY》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114096330A (zh) * 2020-06-02 2022-02-25 维白奥锤有限公司 金属相变化合物及其制备方法

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