CN107490676A - 一种补体c3检测试剂盒及检测方法 - Google Patents
一种补体c3检测试剂盒及检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107490676A CN107490676A CN201710679511.4A CN201710679511A CN107490676A CN 107490676 A CN107490676 A CN 107490676A CN 201710679511 A CN201710679511 A CN 201710679511A CN 107490676 A CN107490676 A CN 107490676A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- reagent
- complement
- buffer solution
- preservative
- nonidet
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明提供一种免疫比浊试剂盒,它包含试剂R1和试剂R2,其中试剂R1中包含乙基苯基聚乙二醇,试剂R2中包含乙基苯基聚乙二醇、镁盐、醋酸钙和抗体。本发明的试剂盒抗体性能好、重复性好、试剂检测结果准确,能够满足使用要求。
Description
技术领域
本发明涉及医学免疫体外诊断领域,具体涉及一种补体C3检测试剂盒及检测方法。
背景技术
比浊法在临床检验工作中得到了广泛的应用。现在应用最普遍的是免疫比浊法。
早期的免疫分析技术大部分都是通过观察沉淀物的形成、凝集及溶血现象的发生和测定由集合体造成的光散射来分析待测样品中特异性蛋白质的有无及含量,如免疫扩散、免疫电泳、直接及简介血凝、被动血凝、补体结合实验等,这些检测方法成本低、结果易于判断、技术上便于掌握,可广泛用于检测多种类型的临床样品。但由于上述方法操作繁琐,费时且灵敏度和精确度差而趋于被淘汰。
免疫比浊法克服了上述缺点,并且能结合临床的需求而开发出定量精确的自动化仪器。因此,对于免疫学检测来说,免疫比浊法具有免疫学抗原、抗体结合的特异性,又具有生物化学反应学特点,可以在自动化生化仪上检测体液中,特别是血液中的微量待测物质,是一种非常有应用前途的临床检验实用技术。
免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊度。当抗体浓度固定时,形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加,反应液的浊度也随之增加。通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照,即可计算出检样中抗原的含量。
根据免疫比浊的基本原理而研制、开发的各种检测仪器已经广泛地应用在临床检验的许多方面,它是凝血仪光学法和免疫法的基本工作原理;是全自动生化测定中的载脂蛋白,半抗原及其他蛋白质的测定原理;同时它还可以应用于微生物检测。通过精确地对多种物质进行定量,对许多疾病的诊断、治疗及预后评估都有较大的临床意义。
临床常用的免疫比浊法因其样本用量少,可直接在全自动生化分析仪上批量样本分析、操作简单,但目前建立的试剂及方法都存在一些缺点和不足,主要表现在:
抗体在保存过程中很容易出现絮状或片状沉淀,导致抗体性能变差、重复性不好、变异系数(CV)变大,直接造成试剂检测结果不准确,而且增加过滤步骤,操作复杂,且过滤可能除去抗体,影响检测效果,对患者造成一定的影响,不能满足使用要求。
发明内容
为解决上述问题,本发明公开了一种补体C3检测试剂盒及检测方法,试剂稳定性好、均一性好、检测结果准确性好、操作方便、便于推广应用。
为实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本方发明提供了一种补体C3检测试剂盒,其中包含试剂R1和试剂R2,所述试剂R1中包含乙基苯基聚乙二醇1-50g/L,所述试剂R2中包含乙基苯基聚乙二醇1-50g/L、镁盐0.01-16.5g/L、醋酸钙0.01-22g/L和抗体10-1000mg/L。
一种补体C3检测试剂盒,所述试剂R1中乙基苯基聚乙二醇为5-40g/L,优选为28g/L;所述试剂R2中乙基苯基聚乙二醇为4.5-42g/L,优选为26g/L。
一种补体C3检测试剂盒,所述镁盐为0.03-11.5g/L,优选为6g/L;所述镁盐优选为硫酸镁、氯化镁或醋酸镁中的一种或多种。
一种补体C3检测试剂盒,所述醋酸钙为0.05-15g/L,优选为10g/L。
其中,
所述试剂R1中还包含缓冲液、无机盐、防腐剂和聚集物;优选地,所述试剂R1中还包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L和聚集物1-60g/L。
所述试剂R2中还包含缓冲液、无机盐和防腐剂,优选地,所述试剂R2中还包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L和防腐剂0.5-1g/L。
一种补体C3检测试剂盒,其中还包含校准品,所述校准品采用多点定标,所述校准品包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.1-2g/L、葡聚糖0.3-100g/L、海藻糖1-100g/L、蔗糖1-100g/L、牛血清白蛋白1-100g/L和抗原。
一种补体C3检测试剂盒,其中包含试剂R1和试剂R2,所述试剂R1中包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、聚乙二醇60001-60g/L、乙基苯基聚乙二醇1-50g/L,所述试剂R2中包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、抗体10-1000mg/L、乙基苯基聚乙二醇1-50g/L、硫酸镁0.01-16.5g/L、醋酸钙0.01-22g/L;
优选地,
所述试剂R1中包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、聚乙二醇6000 1-60g/L、乙基苯基聚乙二醇5-40g/L,所述试剂R2中包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、抗体10-1000mg/L、乙基苯基聚乙二醇4.5-42g/L、硫酸镁0.03-11.5g/L、醋酸钙0.05-15g/L;
更优选地,
所述试剂R1中包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、聚乙二醇6000 1-60g/L、乙基苯基聚乙二醇28g/L,所述试剂R2中包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、抗体10-1000mg/L、乙基苯基聚乙二醇26g/L、硫酸镁6g/L、醋酸钙10g/L。
一种补体C3检测试剂盒,
优选地,所述抗体为羊抗人、兔抗人、马抗人、鼠抗人或其他动物抗人抗体;
优选地,所述缓冲液为醋酸盐缓冲液、氯化铵缓冲液、磷酸盐缓冲液、TRIS缓冲液、硼酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、CAPSO、MOPS或Hepes缓冲液中的一种或几种;
优选地,所述无机盐为氯化钠、氯化钾中的一种或两种;
优选地,所述防腐剂为叠氮钠、苯酚、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯或乙基汞硫代硫酸钠中的一种或几种;
优选地,所述聚集物为聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000或聚乙二醇8000中的一种或几种;
本方面还提供了一种利用上述补体C3检测试剂盒的检测方法,包括如下步骤:
(1)向待测样品中加入试剂R1混匀,待测样品与试剂R1按体积比为(1-9):300加入,37℃孵育,在一定的波长下,读取吸光度A1;
(2)向步骤(1)的混合液中加入试剂R2混匀,试剂R2与试剂R1按体积比为1:(1-6)加入,37℃孵育,在一定的波长下,读取吸光度A2;
(3)得出吸光度△A,△A=A2-A1;
(4)使用校准品在全自动生化分析仪上通过内置曲线拟合模式拟合标准曲线,根据吸光度自动计算出待测样品中补体C3的含量。
本发明中所指的聚集物是在反应中促进抗原抗体凝集的物质。
本发明提供补体C3检测试剂盒及检测方法中涉及原料来源如下:
由于采用了上述技术方案,本发明的有益效果是:
本发明提供的补体C3检测试剂盒及检测方法,试剂稳定性好,均一性好,抗体可以稳定保存,不会出现沉淀现象,抗体效价高、性能好,而且没有过滤步骤,操作方便,成本低廉,检测结果准确,重复性好,具有更广泛的通用性。
实施方式
为了使本领域技术人员更好地理解本申请中的技术方案,下面结合实施例对本发明作进一步说明,显然,所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本申请保护的范围。
实施例1补体C3检测试剂盒
试剂R1:
磷酸盐缓冲液 | 20mmol/L |
氯化钠 | 1g/L |
叠氮钠 | 0.5g/L |
聚乙二醇6000 | 1g/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 1g/L |
试剂R2:
TRIS缓冲液 | 20mmol/L |
氯化钠 | 1g/L |
叠氮钠 | 0.5g/L |
羊抗人补体C3抗体 | 10mg/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 1g/L |
硫酸镁 | 0.01g/L |
醋酸钙 | 0.01g/L |
校准品:
补体C3抗原用标准品稀释液(20mmol/L磷酸盐缓冲液、2g/L氯化钠、0.2g/L叠氮钠、0.3g/L葡聚糖、1g/L海藻糖、2g/L蔗糖、2g/L牛血清白蛋白)溶解,用市售对照试剂检测并调整至120mg/L,分装保存于-20℃。使用前取出,并用标准品稀释液稀释成不同浓度的补体C3标准品(补体C3抗原浓度:0mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、70mg/L)。然后用0.65μm的滤膜过滤除菌,放置2~8℃保存。
实施例2补体C3检测试剂盒
试剂R1:
TRIS缓冲液 | 60mmol/L |
氯化钾 | 15g/L |
苯酚 | 0.6g/L |
聚乙二醇6000 | 30g/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 50g/L |
试剂R2:
磷酸盐缓冲液 | 40mmol/L |
氯化钾 | 15g/L |
苯酚 | 0.6g/L |
羊抗人补体C3抗体 | 50mg/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 50g/L |
硫酸镁 | 16.5g/L |
醋酸钙 | 22g/L |
校准品:
补体C3抗原用标准品稀释液(50mmol/L甘氨酸缓冲液、10g/L氯化钠、0.5g/L叠氮钠、20g/L葡聚糖、25g/L海藻糖、30g/L蔗糖、20g/L牛血清白蛋白)溶解,用市售对照试剂检测并调整至100mg/L,分装保存于-20℃。使用前取出,并用标准品稀释液稀释成不同浓度的补体C3标准品(补体C3抗原浓度:0mg/L、10mg/L、30mg/L、50mg/L、70mg/L)。然后用0.65μm的滤膜过滤除菌,放置2~8℃保存。
实施例3补体C3检测试剂盒
试剂R1:
醋酸盐缓冲液 | 100mmol/L |
氯化钾 | 20g/L |
叠氮钠 | 0.8g/L |
聚乙二醇6000 | 40g/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 5g/L |
试剂R2:
校准品:
补体C3抗原用标准品稀释液(70mmol/L TRIS缓冲液、25g/L氯化钠、1g/L叠氮钠、55g/L葡聚糖、50g/L海藻糖、60g/L蔗糖、75g/L牛血清白蛋白)溶解,用市售对照试剂检测并调整至200mg/L,分装保存于-20℃。使用前取出,并用标准品稀释液稀释成不同浓度的补体C3标准品(补体C3抗原浓度:2mg/L、10mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L)。然后用0.65μm的滤膜过滤除菌,放置2~8℃保存。
实施例4补体C3检测试剂盒
试剂R1:
MOPS缓冲液 | 150mmol/L |
氯化钠 | 30g/L |
叠氮钠 | 0.8g/L |
聚乙二醇6000 | 40g/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 40g/L |
试剂R2:
MOPS缓冲液 | 100mmol/L |
氯化钠 | 30g/L |
叠氮钠 | 0.8g/L |
羊抗人补体C3抗体 | 500mg/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 41g/L |
硫酸镁 | 6g/L |
醋酸钙 | 10g/L |
校准品:
补体C3抗原用标准品稀释液(100mmol/L TRIS缓冲液、15g/L氯化钠、1g/L叠氮钠、10g/L葡聚糖、100g/L海藻糖、95g/L蔗糖、100g/L牛血清白蛋白)溶解,用市售对照试剂检测并调整至160mg/L,分装保存于-20℃。使用前取出,并用标准品稀释液稀释成不同浓度的补体C3标准品(补体C3抗原浓度:0mg/L、20mg/L、40mg/L、70mg/L、100mg/L)。然后用0.45μm的滤膜过滤除菌,放置2~8℃保存。
实施例5补体C3检测试剂盒
试剂R1:
MOPS缓冲液 | 120mmol/L |
氯化钠 | 20g/L |
叠氮钠 | 1g/L |
聚乙二醇6000 | 50g/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 28g/L |
试剂R2:
MOPS缓冲液 | 80mmol/L |
氯化钠 | 20g/L |
叠氮钠 | 1g/L |
羊抗人补体C3抗体 | 100mg/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 26g/L |
硫酸镁 | 6g/L |
醋酸钙 | 10g/L |
校准品:
补体C3抗原用标准品稀释液(100mmol/L TRIS缓冲液、30g/L氯化钠、0.5g/L叠氮钠、90g/L葡聚糖、100g/L海藻糖、100g/L蔗糖、100g/L牛血清白蛋白)溶解,用市售对照试剂检测并调整至120mg/L,分装保存于-20℃。使用前取出,并用标准品稀释液稀释成不同浓度的补体C3标准品(补体C3抗原浓度:0mg/L、20mg/L、50mg/L、80mg/L、100mg/L)。然后用0.65μm的滤膜过滤除菌,放置2~8℃保存。
实施例6补体C3检测试剂盒
试剂R1:
试剂R2:
TRIS缓冲液 | 20mmol/L |
氯化钠 | 1g/L |
叠氮钠 | 0.5g/L |
羊抗人补体C3抗体 | 10mg/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 10g/L |
硫酸镁 | 0.01g/L |
校准品:
补体C3抗原用标准品稀释液(20mmol/L磷酸盐缓冲液、2g/L氯化钠、0.2g/L叠氮钠、0.3g/L葡聚糖、1g/L海藻糖、2g/L蔗糖、2g/L牛血清白蛋白)溶解,用市售对照试剂检测并调整至120mg/L,分装保存于-20℃。使用前取出,并用标准品稀释液稀释成不同浓度的补体C3标准品(补体C3抗原浓度:0mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、70mg/L)。然后用0.65μm的滤膜过滤除菌,放置2~8℃保存。
实施例7补体C3检测试剂盒
试剂R1:
磷酸盐缓冲液 | 20mmol/L |
氯化钠 | 1g/L |
叠氮钠 | 0.5g/L |
聚乙二醇6000 | 1g/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 10g/L |
试剂R2:
TRIS缓冲液 | 20mmol/L |
氯化钠 | 1g/L |
叠氮钠 | 0.5g/L |
羊抗人补体C3抗体 | 10mg/L |
乙基苯基聚乙二醇 | 10g/L |
醋酸钙 | 0.01g/L |
校准品:
补体C3抗原用标准品稀释液(20mmol/L磷酸盐缓冲液、2g/L氯化钠、0.2g/L叠氮钠、0.3g/L葡聚糖、1g/L海藻糖、2g/L蔗糖、2g/L牛血清白蛋白)溶解,用市售对照试剂检测并调整至120mg/L,分装保存于-20℃。使用前取出,并用标准品稀释液稀释成不同浓度的补体C3标准品(补体C3抗原浓度:0mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、70mg/L)。然后用0.65μm的滤膜过滤除菌,放置2~8℃保存。
实施例8补体C3检测试剂盒
试剂R1:
磷酸盐缓冲液 | 20mmol/L |
氯化钠 | 1g/L |
叠氮钠 | 0.5g/L |
聚乙二醇6000 | 1g/L |
吐温20 | 10g/L |
试剂R2:
TRIS缓冲液 | 20mmol/L |
氯化钠 | 1g/L |
叠氮钠 | 0.5g/L |
羊抗人补体C3抗体 | 10mg/L |
吐温20 | 10g/L |
校准品:
补体C3抗原用标准品稀释液(20mmol/L磷酸盐缓冲液、2g/L氯化钠、0.2g/L叠氮钠、0.3g/L葡聚糖、1g/L海藻糖、2g/L蔗糖、2g/L牛血清白蛋白)溶解,用市售对照试剂检测并调整至120mg/L,分装保存于-20℃。使用前取出,并用标准品稀释液稀释成不同浓度的补体C3标准品(补体C3抗原浓度:0mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、70mg/L)。然后用0.65μm的滤膜过滤除菌,放置2~8℃保存。
不同实施例检测结果比较,其中CV值=STDEV(1-7)/均值。
1.配制一份补体C3浓度为40mg/L的样本,用实施例1的试剂盒对样本重复检测7次,检测结果如表1所示。
表1:2-8℃保存1个月、3个月、12个月测定结果
由表1可见,实施例1在1个月、3个月、12个月测得的补体C3浓度均接近真实值,并且测得的变异系数(CV值))均小于2%,说明本发明的试剂盒重复性好、性能稳定,测量准确。
2.配制一份补体C3浓度为1mg/L的样本,用实施例2的试剂盒对样本重复检测7次,检测结果如表2所示。
表2:2-8℃保存1个月、3个月、12个月测定结果
由表2可见,实施例2在1个月、3个月、12个月测得的补体C3浓度均接近真实值,并且测得的变异系数均小于2%,说明本发明的试剂盒重复性好、性能稳定,测量准确。
3.配制一份补体C3浓度为30mg/L的样本,用实施例3的试剂盒对样本重复检测7次,检测结果如表3所示。
表3:2-8℃保存1个月、3个月、12个月测定结果
由表3可见,实施例3在1个月、3个月、12个月测得的补体C3浓度均接近真实值,并且测得的变异系数均小于1%,说明本发明的试剂盒重复性好、性能稳定,测量准确。
4.配制一份补体C3浓度为50mg/L的样本,用实施例4的试剂盒对样本重复检测7次,检测结果如表4所示。
表4:2-8℃保存1个月、3个月、12个月测定结果
由表4可见,实施例4在1个月、3个月、12个月测得的补体C3浓度均接近真实值,并且测得的变异系数均小于1%,说明本发明的试剂盒重复性好、性能稳定,测量准确。
5.配制一份补体C3浓度为2mg/L的样本,用实施例5的试剂盒对样本重复检测7次,检测结果如表5所示。
表5:2-8℃保存1个月、3个月、12个月测定结果
由表5可见,实施例5在1个月、3个月、12个月测得的补体C3浓度均为真实值,并且测得的变异系数均小于0.5%,说明本发明的试剂盒重复性好、性能稳定,测量准确。
6.配制一份补体C3浓度为30mg/L的样本,用实施例6的试剂盒对样本重复检测7次,检测结果如表6所示。
表6:2-8℃保存1个月、3个月、12个月测定结果
由表6可见,实施例6在1个月、3个月、12个月测得的补体C3浓度均偏离真实值,并且测得的变异系数均大于5%,说明该试剂盒重复性不好、性能不稳定,测量不准确。
7.配制一份补体C3浓度为30mg/L的样本,用实施例7的试剂盒对样本重复检测7次,检测结果如表7所示。
表7:2-8℃保存1个月、3个月、12个月测定结果
由表7可见,实施例7在1个月、3个月、12个月测得的补体C3浓度均偏离真实值,并且测得的变异系数均大于6%,说明该试剂盒重复性不好、性能不稳定,测量不准确。
8.配制一份补体C3浓度为30mg/L的样本,用实施例8的试剂盒对样本重复检测7次,检测结果如表8所示。
表8:2-8℃保存1个月、3个月、12个月测定结果
由表8可见,实施例8在1个月、3个月、12个月测得的补体C3浓度均偏离真实值,并且测得的变异系数均大于7%,说明该试剂盒重复性不好、性能不稳定,测量不准确。
应该理解到披露的本发明不仅仅限于描述的特定的方法、方案和物质,因为这些均可变化。还应理解这里所用的术语仅仅是为了描述特定的实施方式方案的目的,而不是意欲限制本发明的范围,本发明的范围仅受限于所附的权利要求。
本领域的技术人员还将认识到,或者能够确认使用不超过常规实验,在本文中所述的本发明的具体的实施方案的许多等价物。这些等价物也包含在所附的权利要求中。
Claims (10)
1.一种补体C3检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包含试剂R1和试剂R2,所述试剂R1中包含乙基苯基聚乙二醇1-50g/L,所述试剂R2中包含乙基苯基聚乙二醇1-50g/L、镁盐0.01-16.5g/L、醋酸钙0.01-22g/L和抗体10-1000mg/L。
2.根据权利要求1所述的补体C3检测试剂盒,其特征在于:所述试剂R1中乙基苯基聚乙二醇为5-40g/L,优选为28g/L;所述试剂R2中乙基苯基聚乙二醇为4.5-42g/L,优选为26g/L。
3.根据权利要求1或2所述的补体C3检测试剂盒,其特征在于:所述镁盐为0.03-11.5g/L,优选为6g/L;所述镁盐优选为硫酸镁、氯化镁或醋酸镁中的一种或多种。
4.根据权利要求1-3任一项所述的补体C3检测试剂盒,其特征在于:所述醋酸钙为0.05-15g/L,优选为10g/L。
5.根据权利要求1-4任一项所述的补体C3检测试剂盒,其特征在于:所述试剂R1中还包含缓冲液、无机盐、防腐剂和聚集物;优选地,所述试剂R1中还包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L和聚集物1-60g/L。
6.根据权利要求1-5任一项所述的补体C3检测试剂盒,其特征在于:所述试剂R2中还包含缓冲液、无机盐和防腐剂,优选地,所述试剂R2中还包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L和防腐剂0.5-1g/L。
7.根据权利要求1-6任一项所述的补体C3检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包含校准品,所述校准品采用多点定标,所述校准品包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.1-2g/L、葡聚糖0.3-100g/L、海藻糖1-100g/L、蔗糖1-100g/L、牛血清白蛋白1-100g/L和抗原。
8.一种补体C3检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包含试剂R1和试剂R2,所述试剂R1中包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、聚乙二醇6000 1-60g/L、乙基苯基聚乙二醇1-50g/L;所述试剂R2中包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、抗体10-1000mg/L、乙基苯基聚乙二醇1-50g/L、硫酸镁0.01-16.5g/L、醋酸钙0.01-22g/L;
优选地,
所述试剂R1中包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、聚乙二醇6000 1-60g/L、乙基苯基聚乙二醇5-40g/L;所述试剂R2中包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、抗体10-1000mg/L、乙基苯基聚乙二醇4.5-42g/L、硫酸镁0.03-11.5g/L、醋酸钙0.05-15g/L;
更优选地,
所述试剂R1中包含缓冲液20-150mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、聚乙二醇6000 1-60g/L、乙基苯基聚乙二醇28g/L;所述试剂R2中包含缓冲液20-100mmol/L、无机盐1-30g/L、防腐剂0.5-1g/L、抗体10-1000mg/L、乙基苯基聚乙二醇26g/L、硫酸镁6g/L、醋酸钙10g/L。
9.根据权利要求1-8任一项所述的补体C3检测试剂盒,其特征在于:
所述抗体优选为羊抗人、兔抗人、马抗人、鼠抗人或其他动物抗人抗体;
所述缓冲液优选为醋酸盐缓冲液、氯化铵缓冲液、磷酸盐缓冲液、TRIS缓冲液、硼酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、CAPSO、MOPS或Hepes缓冲液中的一种或几种;
所述无机盐优选为氯化钠、氯化钾中的一种或两种;
所述防腐剂优选为叠氮钠、苯酚、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯或乙基汞硫代硫酸钠中的一种或几种;
所述聚集物优选为聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000或聚乙二醇8000中的一种或几种。
10.一种利用上述补体C3检测试剂盒的检测方法,包括如下步骤:
(1)向待测样品中加入试剂R1混匀,待测样品与试剂R1按体积比为(1-9):300加入,37℃孵育,在一定的波长下,读取吸光度A1;
(2)向步骤(1)的混合液中加入试剂R2混匀,试剂R2与试剂R1按体积比为1:(1-6)加入,37℃孵育,在一定的波长下,读取吸光度A2;
(3)得出吸光度△A,△A=A2-A1;
(4)使用校准品在全自动生化分析仪上通过内置曲线拟合模式拟合标准曲线,根据吸光度自动计算出待测样品中补体C3的含量。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710679511.4A CN107490676B (zh) | 2017-08-10 | 2017-08-10 | 一种补体c3检测试剂盒及检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710679511.4A CN107490676B (zh) | 2017-08-10 | 2017-08-10 | 一种补体c3检测试剂盒及检测方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107490676A true CN107490676A (zh) | 2017-12-19 |
CN107490676B CN107490676B (zh) | 2019-02-12 |
Family
ID=60645212
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710679511.4A Active CN107490676B (zh) | 2017-08-10 | 2017-08-10 | 一种补体c3检测试剂盒及检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN107490676B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110716038A (zh) * | 2019-10-23 | 2020-01-21 | 俞梦越 | 一种急性冠脉综合征补体检测试剂盒及其使用方法 |
Citations (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002096457A2 (en) * | 2001-05-31 | 2002-12-05 | Novartis Ag | Stable liquid formulations of antibodies |
CN1606452A (zh) * | 2001-12-21 | 2005-04-13 | 诺沃娜第克公司 | 修饰的因子ⅶ多肽的液体组合物 |
US20060269543A1 (en) * | 2005-05-19 | 2006-11-30 | Amgen Inc. | Compositions and methods for increasing the stability of antibodies |
EP1881323A1 (en) * | 2005-05-11 | 2008-01-23 | Yamasa Corporation | Method of stabilizing pulmonary surfactant protein |
CN102766677A (zh) * | 2012-07-31 | 2012-11-07 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 乳酸脱氢酶检测试剂盒及其制备方法 |
CN104237522A (zh) * | 2012-12-03 | 2014-12-24 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 脂联素含量检测试剂盒及其制备方法 |
CN104833810A (zh) * | 2015-05-02 | 2015-08-12 | 王贤俊 | 一种补体c3检测方法 |
CN104849224A (zh) * | 2015-05-02 | 2015-08-19 | 王贤俊 | 一种补体c3检测试剂盒及其制备 |
CN105238848A (zh) * | 2015-10-14 | 2016-01-13 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 一种α-L-岩藻糖苷酶检测试剂盒及制备方法 |
CN105891497A (zh) * | 2014-12-19 | 2016-08-24 | 北京科美生物技术有限公司 | 一种降钙素原胶体金免疫比色法定量检测试剂盒及其制备方法 |
CN106153885A (zh) * | 2016-06-17 | 2016-11-23 | 上海执诚生物科技有限公司 | 基于胶乳免疫比浊法的补体c3试剂盒及其制备方法 |
US20170007689A1 (en) * | 2015-07-07 | 2017-01-12 | Nanobio Corporation | Methods and compositions for nanoemulsion vaccine formulations |
CN106814193A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-06-09 | 美康生物科技股份有限公司 | 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白含量检测试剂盒 |
-
2017
- 2017-08-10 CN CN201710679511.4A patent/CN107490676B/zh active Active
Patent Citations (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002096457A2 (en) * | 2001-05-31 | 2002-12-05 | Novartis Ag | Stable liquid formulations of antibodies |
CN1606452A (zh) * | 2001-12-21 | 2005-04-13 | 诺沃娜第克公司 | 修饰的因子ⅶ多肽的液体组合物 |
EP1881323A1 (en) * | 2005-05-11 | 2008-01-23 | Yamasa Corporation | Method of stabilizing pulmonary surfactant protein |
US20060269543A1 (en) * | 2005-05-19 | 2006-11-30 | Amgen Inc. | Compositions and methods for increasing the stability of antibodies |
CN102766677A (zh) * | 2012-07-31 | 2012-11-07 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 乳酸脱氢酶检测试剂盒及其制备方法 |
CN104237522A (zh) * | 2012-12-03 | 2014-12-24 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 脂联素含量检测试剂盒及其制备方法 |
CN105891497A (zh) * | 2014-12-19 | 2016-08-24 | 北京科美生物技术有限公司 | 一种降钙素原胶体金免疫比色法定量检测试剂盒及其制备方法 |
CN104849224A (zh) * | 2015-05-02 | 2015-08-19 | 王贤俊 | 一种补体c3检测试剂盒及其制备 |
CN104833810A (zh) * | 2015-05-02 | 2015-08-12 | 王贤俊 | 一种补体c3检测方法 |
US20170007689A1 (en) * | 2015-07-07 | 2017-01-12 | Nanobio Corporation | Methods and compositions for nanoemulsion vaccine formulations |
CN105238848A (zh) * | 2015-10-14 | 2016-01-13 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 一种α-L-岩藻糖苷酶检测试剂盒及制备方法 |
CN106153885A (zh) * | 2016-06-17 | 2016-11-23 | 上海执诚生物科技有限公司 | 基于胶乳免疫比浊法的补体c3试剂盒及其制备方法 |
CN106814193A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-06-09 | 美康生物科技股份有限公司 | 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白含量检测试剂盒 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
孙宝国主编: "《日用化工辞典》", 30 June 2002, 北京:化学工业出版社 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110716038A (zh) * | 2019-10-23 | 2020-01-21 | 俞梦越 | 一种急性冠脉综合征补体检测试剂盒及其使用方法 |
CN110716038B (zh) * | 2019-10-23 | 2022-08-30 | 俞梦越 | 一种急性冠脉综合征补体检测试剂盒及其使用方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN107490676B (zh) | 2019-02-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN108303544A (zh) | 一种全血c反应蛋白检测试剂盒 | |
CN107462731B (zh) | 一种免疫球蛋白a检测试剂盒及检测方法 | |
CN102636653A (zh) | 复合胶乳粒子包被胱抑素c检测试剂盒 | |
CN105842458A (zh) | 一种降钙素原测定试剂盒及其降钙素原的含量的测定方法 | |
CN107462729B (zh) | 一种载脂蛋白a1检测试剂盒及检测方法 | |
CN107656069A (zh) | 全血中全量程c‑反应蛋白定量检测试剂及方法 | |
CN107907691A (zh) | 一种肌红蛋白检测试剂盒及其使用方法 | |
CN107942051A (zh) | 一种d‑二聚体检测试剂盒及其使用方法 | |
CN105974106B (zh) | 11-脱氢-血栓素b2测定试剂盒及其用途 | |
CN106771152A (zh) | 一种快速检测钙卫蛋白的试剂盒 | |
CN106290907A (zh) | 全血中血清淀粉样蛋白a定量检测试剂以及检测方法 | |
CN107478853B (zh) | 一种载脂蛋白b检测试剂盒及检测方法 | |
CN107490675B (zh) | 一种免疫比浊试剂盒及检测方法 | |
Van Lente et al. | Evaluation of a nephelometric assay for haptoglobin and its clinical usefulness. | |
CN107490696A (zh) | 一种视黄醇结合蛋白检测试剂盒及检测方法 | |
CN107490676B (zh) | 一种补体c3检测试剂盒及检测方法 | |
CN107462730B (zh) | 一种补体c4检测试剂盒及检测方法 | |
CN107478854B (zh) | 一种脂蛋白a检测试剂盒及检测方法 | |
CN107490697B (zh) | 一种前白蛋白检测试剂盒及检测方法 | |
CN107449919B (zh) | 一种c-反应蛋白检测试剂盒及检测方法 | |
CN107478846B (zh) | 一种免疫球蛋白g检测试剂盒及检测方法 | |
CN102369441B (zh) | 免疫分析方法及用于该方法的试剂 | |
CN107356764A (zh) | 一种载脂蛋白e检测试剂盒及检测方法 | |
CN107422114B (zh) | 一种类风湿因子检测试剂盒及检测方法 | |
CN107356765B (zh) | 一种免疫球蛋白e检测试剂盒及检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |