CN107656069A - 全血中全量程c‑反应蛋白定量检测试剂及方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种全血中全量程C‑反应蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2，所述试剂R1是用于血红蛋白定量检测的试剂，检测结果用于红细胞压积修正全血C‑反应蛋白浓度，试剂R1、试剂R2组合是用于全量程C‑反应蛋白检测试剂。该全血中全量程C‑反应蛋白定量检测试剂使用的检测样本可以为末梢血等全血，同时满足既可以测定高浓度CRP含量，又可以测定低浓度CRP含量的要求，且灵敏度高、稳定性强、线性范围宽，具有良好的抗干扰性、准确性及精密度，能够满足临床检验要求的特点。本发明还公开了一种全血中全量程C‑反应蛋白检测方法。

Description

全血中全量程C-反应蛋白定量检测试剂及方法
技术领域
本发明涉及检测试剂技术领域，尤其是涉及一种全血中全量程C-反应蛋白定量检测试剂。本发明还涉及一种全血中全量程C-反应蛋白检测方法。
背景技术
C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是一种正急性时相反应蛋白，在机体受到感染或组织损伤时由肝脏分泌，在数小时内急剧上升，且在疾病恢复期迅速下降，因此在感染、炎症等疾病的早期诊断、病程、预后等方面具有重要临床意义。另一方面CRP是独立的心血管疾病预测指标，即超敏C-反应蛋白(hs-CRP)。美国心脏病协会2003年建议：hs-CRP＜1mg/L为低危险性、1-3mg/L为中危险性、>3mg/L为高危险性。根据检测灵敏度的不同，可分普通CRP、超敏CRP和全量程CRP。所谓全量程CRP是基于其测定方法更敏感，测定范围更宽广而命名，即可用于感染性疾病的诊断和疗效观察，又可作为心血管疾病的独立预测因子。
近年来，随着对CRP临床意义的深入研究，其在临床中的应用范围越来越广泛。
目前，用于临床上的CRP检测试剂有多种。比如，授权公告号为CN 103941017 B的中国发明专利公开的C反应蛋白检测试剂盒、授权公告号为CN101881777 B的中国发明专利公开的超敏C反应蛋白检测方法及超敏C反应蛋白检测试剂盒、授权公告号为CN 101769932B的中国发明专利公开的全量程C反应蛋白检测试剂盒等。这些检测试剂盒均以血清或血浆为检测样本。然而，通常在临床检查时采集到的是全血样本，均需对全血进行预先分离红细胞再进行测试，需要专门的如离心机等的分离装置，且增加了操作步骤，费时费力，同时加大了样本需求量，对于儿童和新生儿以及大面积烧伤等患者而言，采足检测需求量的血样较为困难。
鉴于此，授权公告号为CN 104515857 B的中国发明专利公开了一种全血C-反应蛋白测量方法、装置及样本分析仪，其通过对全血样本进行溶血处理，将负载有抗-C反应蛋白抗体的乳胶试剂加入溶血后的全血样本，经凝集反应后得到生成物，最终确定出全血C-反应蛋白浓度。然而，该专利并未提及是否能检测全量程CRP。经查询，目前还没有发现全血全量程CRP定量检测试剂。
发明内容
针对上述现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种全血中全量程C-反应蛋白定量检测试剂，它具有使用的检测样本可以为末梢血等全血，且既可以测定高浓度CRP含量，又可以测定低浓度CRP含量，同时，其灵敏度高、稳定性强、线性范围宽，具有良好的抗干扰性、准确性及精密度，能够满足临床检验要求的特点。本发明还提供了一种全血中全量程C-反应蛋白检测方法。
为了实现上述目的，本发明所采用的第一个技术方案是：
全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2，所述试剂R1是用于血红蛋白定量检测的试剂，检测结果用于红细胞压积修正全血C-反应蛋白浓度，试剂R1、试剂R2组合是用于全量程C-反应蛋白检测试剂。
所述试剂R1包括：质量百分比为0.05％-1.50％的破胞组分，pH为5.0-10.0、浓度为30-50mmol/L的缓冲液，质量百分比为0.01％-3.00％的表面活性剂，质量百分比为0.10％-1.50％的电解质，质量百分比为0.15％-2.00％的防腐剂，质量百分比为0.20％-3.00％的反应促进剂，以及质量百分比为0.50％-2.00％的稳定剂；同时，该破胞组分用以去除干扰测定的血红细胞，其中不分离血细胞，使用原样全血；
所述试剂R2包括：质量百分比为0.01％-3.00％的表面活性剂，质量百分比为0.10％-3.00％的电解质，质量百分比为0.01％-2.00％防腐剂，质量百分比为0.02％-10.00％的稳定剂，pH为5.0-10.0、浓度为10-100mmol/L的缓冲液，以及抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒；同时，该抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒由两种粒径不同的胶乳颗粒、两种不同的抗人CRP抗体组成。
所述两种粒径不同的胶乳颗粒、两种不同的抗人CRP抗体是标记有抗CRP单克隆抗体的大胶乳颗粒和标记有抗CRP多克隆抗体的小胶乳颗粒，其中，大胶乳颗粒的粒径为50-300nm、质量百分比为0.01％-0.05％，小胶乳颗粒的粒径为10-130nm、质量百分比为0.01％-1.00％，且该试剂R2中的大胶乳颗粒和小胶乳颗粒的混合比例为10:1-1:10。
所述破胞组分为脂肪酸盐、硫酸酯盐、磷酸酯盐、聚山梨酯、烷基苯磺酸钠中的一种；
所述缓冲液为甘氨酸缓冲液、Good’s缓冲液、Tris缓冲液、磷酸-柠檬酸缓冲液中的一种；
所述表面活性剂为Tween20、Emulgen B-66、Span20、Triton X-100中的至少一种；
所述电解质为钠离子、钾离子中的至少一种；
所述防腐剂为叠氮钠、山梨酸盐类、庆大霉素中的至少一种；
所述反应促进剂为聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇8000、聚乙二醇6000中的一种；
所述稳定剂为牛血清蛋白、明胶、乙二醇、乳糖、蔗糖中的一种。
本发明所采用的第一个技术方案是：
全血中全量程C-反应蛋白检测方法，
所述方法中使用的试剂为前述全血中全量程C-反应蛋白检测试剂；
所采用的检测仪器为：全自动生化分析仪；分析方法为：两点终点法；反应方向为：上升反应；校准方式为：Spline；测定波长为：540-570nm和650-800nm；测定温度为：37℃；样本：R1：R2＝3μl:150μl:150μl；
步骤为：3μl样本和150μl试剂R1混匀后于37℃孵育10sec-3min，在540-570nm处读取第1读数点吸光度A1，随即加入150μl试剂R2，在650-800nm处读取第2读数点吸光度A2，混匀后37℃孵育5min，在650-800nm处读取第3读数点吸光度A3，计算A3-A2差值，根据校准曲线计算所得值及相应红细胞压积，得出样本中C-反应蛋白含量。
所述波长540-570nm为血红蛋白测定波长、波长650-800nm为全血中全量程C-反应蛋白测定波长。
本发明的优点是：
1、样本需求量少。采用全血样本，减少用量，省去分离步骤，省时省力，更适合采血困难患者及门诊患者的快速检测需求。
2、应用范围广。既可以测定高浓度CRP含量，又可以测定低浓度CRP含量的要求，同时可应用于心血管疾病和感染、炎症领域，临床应用范围广泛。
3、线性范围宽。为0-300mg/L，健康人参考范围为≤5mg/L，hs-CRP＜1mg/L为低危险性；1-3mg/L为中危险性；>3mg/L为高危险性。本发明线性范围基本覆盖CRP和hs-CRP的参考范围，能够满足临床全量程检测的需要。
4、检测灵敏度高。试剂缓冲液、表面活性剂等成分的配比提高了反应的灵敏度。
5、准确度高。与进口试剂血清全量程CRP检测试剂的相关性达到0.9985，基本可替代市面上现有的血清全量程CRP检测试剂或检测方法。前带达到500mg/L，理论值500mg/L时所测结果仍大于线性最大值(300mg/L)，基本不会造成临床误判。
6、试剂稳定。试剂各成分配比优化，试剂在2-8℃密闭条件下可稳定12个月。开盖稳定性达到30天，热稳定性(37℃)达到15天。
7、批量检测。适用于全自动生化分析仪，可实现快速、批量检测。
即，本发明的全血中全量程C-反应蛋白定量检测试剂使用的检测样本可以为末梢血等全血，同时满足既可以测定高浓度CRP含量，又可以测定低浓度CRP含量的要求，且灵敏度高、稳定性强、线性范围宽，具有良好的抗干扰性、准确性及精密度，能够满足临床检验要求的特点。
另外需要说明的是：两种粒径不同的胶乳颗粒、两种不同的抗人CRP抗体是标记有抗CRP单克隆抗体的大胶乳颗粒和标记有抗CRP多克隆抗体的小胶乳颗粒。抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒中胶乳颗粒太小，聚集产生的吸光度变化很小，结果很难实现试验灵敏度的要求，且制备较为复杂，延长了生产时间，增加了试剂的生产成本；粒径太大，在检测高浓度检测物时，其聚集产生的吸光度变化超过了检测限，而且颗粒较大会加速自聚集，分散性降低，胶乳颗粒粒径随着试验方法改变而改变。所述大胶乳颗粒，其粒径为50-300nm，质量百分比为0.01％-0.05％；所述小胶乳颗粒，其粒径为10-130nm，质量百分比为0.01％-1.00％，所述试剂R2中的大胶乳颗粒和小胶乳颗粒的混合比例为10:1-1:10。其中标记有抗CRP单克隆抗体的大胶乳颗粒增加了反应灵敏度，标记有抗CRP多克隆抗体的小胶乳颗粒增加了反应面积，提高了检测范围。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明进一步说明：
图1是本发明的全血中全量程CRP检测试剂的操作步骤示意图；
图2是本发明的全量程CRP检测试剂线性范围测定；
图3是本发明试剂和国际知名品牌血清对比试剂相关性；
图4是本发明试剂的前带测定。
图5是本发明试剂开盖稳定性测试。
具体实施方式
实施例1
全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2。
具体的讲：
试剂R1的包括：破胞组分、缓冲液、表面活性剂、电解质、防腐剂、反应促进剂、稳定剂。其中：破胞组分为质量百分比为0.05％的脂肪酸盐，缓冲液为pH值为5.0、浓度为30mmol/L的甘氨酸缓冲液，表面活性剂为质量百分比为0.01％的Tween20，电解质为质量百分比为0.1％的钠盐，防腐剂为质量百分比为0.15％的叠氮钠，反应促进剂为质量百分比为0.20％的聚乙二醇2000，稳定剂为质量百分比为0.50％的牛血清蛋白。
试剂R2包括：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒、表面活性剂、稳定剂、防腐剂、电解质、缓冲液。其中：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒中大胶乳颗粒和小胶乳颗粒的混合比例为10:1，大胶乳颗粒的百分含量为0.01％，粒径大小为50nm，小胶乳颗粒的百分含量为0.01％，粒径大小为10nm；表面活性剂为质量百分比为0.01％的Tween20；稳定剂为质量百分比为0.02％的牛血清蛋白；防腐剂为质量百分比为0.01％的叠氮钠；电解质为质量百分比为0.10％的钠盐；缓冲液为pH值为5.0、浓度为30mmol/L的甘氨酸缓冲液。
见图1所示，采用前述全血中全量程C-反应蛋白检测试剂进行C-反应蛋白检测的方法为：
检测仪器为：全自动生化分析仪；分析方法为：两点终点法；反应方向为：上升反应；校准方式为：Spline；测定波长为：540nm和650nm；测定温度为：37℃；样本：R1：R2＝3μl:150μl:150μl。
步骤为：3μl样本和150μl试剂R1混匀后于37℃孵育10sec，在540nm处读取第1读数点吸光度A1，随即加入150μl试剂R2，在650nm处读取第2读数点吸光度A2，混匀后37℃孵育5min，在650nm处读取第3读数点吸光度A3，计算A3-A2差值，根据校准曲线计算所得值及相应红细胞压积，得出样本中C-反应蛋白含量。
实施例2
全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2。
具体的讲：
试剂R1包括：破胞组分、缓冲液、表面活性剂、电解质、防腐剂、反应促进剂、稳定剂。其中：破胞组分为质量百分比为1.50％的硫酸酯盐，缓冲液为pH值为10.0、浓度为50mmol/L的Tris缓冲液，表面活性剂为质量百分比为3.00％的Emulgen B-66，电解质为质量百分比为1.5％的钾盐，防腐剂为质量百分比为2.00％的山梨酸盐类，反应促进剂为质量百分比为3.00％的聚乙二醇4000，稳定剂为质量百分比为2.00％的明胶。
试剂R2包括：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒、表面活性剂、稳定剂、防腐剂、电解质、缓冲液。其中：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒中大胶乳颗粒和小胶乳颗粒的混合比例为1:10，大胶乳颗粒的百分含量为0.05％，粒径大小为300nm，小胶乳颗粒的百分含量为1.00％，粒径大小为130nm；表面活性剂为质量百分比为3.00％的Emulgen B-66；稳定剂为质量百分比为10.00％的明胶；防腐剂为质量百分比为2.00％的山梨酸盐类；电解质为质量百分比为3.00％的钾盐；缓冲液为pH值为10.0、浓度为100mmol/L的Tris缓冲液。
见图1所示，采用前述全血中全量程C-反应蛋白检测试剂进行C-反应蛋白检测的方法为：
检测仪器为：全自动生化分析仪；分析方法为：两点终点法；反应方向为：上升反应；校准方式为：Spline；测定波长为：570nm和800nm；测定温度为：37℃；样本：R1：R2＝3μl:150μl:150μl。
步骤为：3μl样本和150μl试剂R1混匀后于37℃孵育min，在570nm处读取第1读数点吸光度A1，随即加入150μl试剂R2，在800nm处读取第2读数点吸光度A2，混匀后37℃孵育5min，在800nm处读取第3读数点吸光度A3，计算A3-A2差值，根据校准曲线计算所得值及相应红细胞压积，得出样本中C-反应蛋白含量。
实施例3
全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2。
具体的讲：
试剂R1包括：破胞组分、缓冲液、表面活性剂、电解质、防腐剂、反应促进剂、稳定剂。其中：破胞组分为质量百分比为0.50％的磷酸酯盐，缓冲液为pH值为7.0、浓度为50mmol/L的磷酸-柠檬酸缓冲液，表面活性剂为质量百分比为1.00％的Span20，电解质为质量百分比为1.00％的钠盐，防腐剂为质量百分比为1.00％的庆大霉素，反应促进剂为质量百分比为1.00％的聚乙二醇8000，稳定剂为质量百分比为1.00％的乙二醇。
试剂R2包括：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒、表面活性剂、稳定剂、防腐剂、电解质、缓冲液。其中：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒中大胶乳颗粒和小胶乳颗粒的混合比例为1:5，大胶乳颗粒的百分含量为0.05％，粒径大小为150nm，小胶乳颗粒的百分含量为0.50％，粒径大小为50nm；表面活性剂为质量百分比为1.00％的Span20；稳定剂为质量百分比为1.00％的乙二醇；防腐剂为质量百分比为1.00％的庆大霉素；电解质为质量百分比为1.00％的钠盐；缓冲液为pH值为7.0、浓度为50mmol/L的磷酸-柠檬酸缓冲液。
见图1所示，采用前述全血中全量程C-反应蛋白检测试剂进行C-反应蛋白检测的方法为：
检测仪器为：全自动生化分析仪；分析方法为：两点终点法；反应方向为：上升反应；校准方式为：Spline；测定波长为：550nm和700nm；测定温度为：37℃；样本：R1：R2＝3μl:150μl:150μl。
步骤为：3μl样本和150μl试剂R1混匀后于37℃孵育30sec，在550nm处读取第1读数点吸光度A1，随即加入150μl试剂R2，在700nm处读取第2读数点吸光度A2，混匀后37℃孵育5min，在700nm处读取第3读数点吸光度A3，计算A3-A2差值，根据校准曲线计算所得值及相应红细胞压积，得出样本中C-反应蛋白含量。
实施例4
全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2。
具体的讲：
试剂R1包括：破胞组分、缓冲液、表面活性剂、电解质、防腐剂、反应促进剂、稳定剂。其中：破胞组分为质量百分比为1.00％的烷基苯磺酸钠，缓冲液为pH值为6.5、浓度为40mmol/L的Good’S缓冲液，表面活性剂为质量百分比为2.00％的Triton X-100，电解质为质量百分比为0.50％的钠盐和钾盐混合物，防腐剂为质量百分比为1.00％的叠氮钠和山梨酸盐类混合物，反应促进剂为质量百分比为0.50％的聚乙二醇6000，稳定剂为质量百分比为1.50％的乳糖。
试剂R2包括：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒、表面活性剂、稳定剂、防腐剂、电解质、缓冲液。其中：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒中大胶乳颗粒和小胶乳颗粒的混合比例为1:4，大胶乳颗粒的百分含量为0.01％，粒径大小为300nm，小胶乳颗粒的百分含量为0.10％，粒径大小为10nm；表面活性剂为质量百分比为2.00％的Triton X-100；稳定剂为质量百分比为5.00％的乳糖；防腐剂为质量百分比为1.00％的叠氮钠和山梨酸盐类混合物；电解质为质量百分比为0.50％的钠盐和钾盐混合物；缓冲液为pH值为6.5、浓度为40mmol/L的Good’S缓冲液。
见图1所示，采用前述全血中全量程C-反应蛋白检测试剂进行C-反应蛋白检测的方法为：
检测仪器为：全自动生化分析仪；分析方法为：两点终点法；反应方向为：上升反应；校准方式为：Spline；测定波长为：560nm和680nm；测定温度为：37℃；样本：R1：R2＝3μl:150μl:150μl。
步骤为：3μl样本和150μl试剂R1混匀后于37℃孵育60sec，在560nm处读取第1读数点吸光度A1，随即加入150μl试剂R2，在680nm处读取第2读数点吸光度A2，混匀后37℃孵育5min，在680nm处读取第3读数点吸光度A3，计算A3-A2差值，根据校准曲线计算所得值及相应红细胞压积，得出样本中C-反应蛋白含量。
实施例5
全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2。
具体的讲：
试剂R1包括：破胞组分、缓冲液、表面活性剂、电解质、防腐剂、反应促进剂、稳定剂。其中：破胞组分为质量百分比为1.50％的聚山梨酯，缓冲液为pH值为7.5、浓度为45mmol/L的甘氨酸缓冲液，表面活性剂为质量百分比各为1.50％的Tween20和Span20，电解质为质量百分比为0.80％的钠盐，防腐剂为质量百分比为0.60％的叠氮钠，反应促进剂为质量百分比各为1.50％的聚乙二醇2000，稳定剂为质量百分比为1.80％的蔗糖。
试剂R2包括：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒、表面活性剂、稳定剂、防腐剂、电解质、缓冲液。其中：抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒中大胶乳颗粒和小胶乳颗粒的混合比例为5:1，大胶乳颗粒的百分含量为0.04％，粒径大小为200nm，小胶乳颗粒的百分含量为0.80％，粒径大小为50nm；表面活性剂为质量百分比各为1.50％的Tween20和Span20；稳定剂为质量百分比为1.80％的蔗糖；防腐剂为质量百分比为0.60％的叠氮钠；电解质为质量百分比为0.80％的钠盐；缓冲液为pH值为7.5、浓度为45mmol/L的甘氨酸缓冲液。
见图1所示，采用前述全血中全量程C-反应蛋白检测试剂进行C-反应蛋白检测的方法为：
检测仪器为：全自动生化分析仪；分析方法为：两点终点法；反应方向为：上升反应；校准方式为：Spline；测定波长为：560nm和750nm；测定温度为：37℃；样本：R1：R2＝3μl:150μl:150μl。
步骤为：3μl样本和150μl试剂R1混匀后于37℃孵育2min，在560nm处读取第1读数点吸光度A1，随即加入150μl试剂R2，在750nm处读取第2读数点吸光度A2，混匀后37℃孵育5min，在750nm处读取第3读数点吸光度A3，计算A3-A2差值，根据校准曲线计算所得值及相应红细胞压积，得出样本中C-反应蛋白含量。
实施例6
本发明试剂各项性能指标测试
1.线性范围试验
用CRP校准品配制成高浓度样本，用生理盐水按常规比例分别进行倍比稀释，采用实施例1配比的试剂R1、R2重复测定每个样本3次(其余实施例试剂同样具有相同的实验结果)，计算均值，求出回归方程，并通过回归方程和红细胞压积计算出理论值，结果见图2。本发明试剂的线性范围宽，为0-300mg/L，健康人CRP参考范围为≤5mg/L，hs-CRP＜1mg/L为低危险性；1-3mg/L为中危险性；>3mg/L为高危险性。本发明线性范围基本覆盖CRP和hs-CRP的参考范围，满足临床全量程检测的需求。
2.抗干扰性测试
使用CRP含量正常和异常的两个人全血样本，分别加入不同含量的干扰物质，采用实施例2配比的试剂R1、R2进行测定(其余实施例试剂同样具有相似的实验结果)，干扰效应结果如下：
当CRP浓度为正常时，胆红素≤60mg/dL，脂肪乳≤1000mg/dL，溶血≤1000mg/dL。
当CRP浓度为异常时，胆红素≤60mg/dL，脂肪乳≤1000mg/dL，溶血≤1000mg/dL。
以上结果表明：本发明试剂的抗干扰性为，胆红素≤60mg/dL，脂肪乳≤1000mg/dL，溶血≤1000mg/dL。对测定结果无干扰。
3.稳定性试验
本发明试剂(采用实施例3配比的试剂R1、R2，其余实施例试剂同样具有相似的实验结果)在2-8℃贮存条件下，开盖后每天(直到第46天)对同一样本进行测定，每个样本测3次，取均值，结果见图5所示。表明，开盖后第2天-第46天与第1天相比，测得值差异很小，说明本发明试剂在2-8℃贮存条件下开盖稳定性能达到30天。
4.前带测定试验
取1500mg/L的高浓度CRP抗原与抗原稀释液11个浓度倍比稀释，用本发明试剂(采用实施例4配比的试剂R1、R2，其余实施例试剂同样具有相似的实验结果)测OD，每个浓度测3遍，记录吸光度变化及测得的浓度值。观察实际测得的浓度值(应呈抛物线)，吸光度达到顶峰时的浓度，此时超过这个浓度即产生钩状效应，即前带现象。结果见图4所示。
效果例
本发明检测试剂与国际知名品牌血清CRP检测试剂
随机抽取某医院检验科的500例样本，分别采用本发明检测试剂(采用实施例5配比的试剂R1、R2，其余实施例试剂同样具有相似的实验结果)和国际某知名品牌血清CRP检测试剂，结果如图3，两种试剂之间差异无统计学意义(P＞0.05)，相关系数R＝0.9985。结果表明：本发明检测试剂和国际知名品牌血清CRP检测试剂具有很好的相关性，基本能替代国际知名品牌血清CRP检测试剂，应用于临床检测。
以上所述仅为本发明的优选实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (6)

1.全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，包括试剂R1、试剂R2，其特征在于：所述试剂R1是用于血红蛋白定量检测的试剂，检测结果用于红细胞压积修正全血C-反应蛋白浓度，试剂R1、试剂R2组合是用于全量程C-反应蛋白检测试剂。
2.根据权利要求1所述的全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，其特征在于：
所述试剂R1包括：质量百分比为0.05％-1.50％的破胞组分，pH为5.0-10.0、浓度为30-50mmol/L的缓冲液，质量百分比为0.01％-3.00％的表面活性剂，质量百分比为0.10％-1.50％的电解质，质量百分比为0.15％-2.00％的防腐剂，质量百分比为0.20％-3.00％的反应促进剂，以及质量百分比为0.50％-2.00％的稳定剂；同时，该破胞组分用以去除干扰测定的血红细胞，其中不分离血细胞，使用原样全血；
所述试剂R2包括：质量百分比为0.01％-3.00％的表面活性剂，质量百分比为0.10％-3.00％的电解质，质量百分比为0.01％-2.00％防腐剂，质量百分比为0.02％-10.00％的稳定剂，pH为5.0-10.0、浓度为10-100mmol/L的缓冲液，以及抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒；同时，该抗人C-反应蛋白致敏的胶乳颗粒由两种粒径不同的胶乳颗粒、两种不同的抗人CRP抗体组成。
3.根据权利要求2所述的全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，其特征在于：所述两种粒径不同的胶乳颗粒、两种不同的抗人CRP抗体是标记有抗CRP单克隆抗体的大胶乳颗粒和标记有抗CRP多克隆抗体的小胶乳颗粒，其中，大胶乳颗粒的粒径为50-300nm、质量百分比为0.01％-0.05％，小胶乳颗粒的粒径为10-130nm、质量百分比为0.01％-1.00％，且该试剂R2中的大胶乳颗粒和小胶乳颗粒的混合比例为10:1-1:10。
4.根据权利要求2所述的全血中全量程C-反应蛋白检测试剂，其特征在于：
所述破胞组分为脂肪酸盐、硫酸酯盐、磷酸酯盐、聚山梨酯、烷基苯磺酸钠中的一种；
所述缓冲液为甘氨酸缓冲液、Good’s缓冲液、Tris缓冲液、磷酸-柠檬酸缓冲液中的一种；
所述表面活性剂为Tween20、Emulgen B-66、Span20、Triton X-100中的至少一种；
所述电解质为钠离子、钾离子中的至少一种；
所述防腐剂为叠氮钠、山梨酸盐类、庆大霉素中的至少一种；
所述反应促进剂为聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇8000、聚乙二醇6000中的一种；
所述稳定剂为牛血清蛋白、明胶、乙二醇、乳糖、蔗糖中的一种。
5.全血中全量程C-反应蛋白检测方法，其特征在于：
所述方法中使用的试剂为权利要求1至4中任一项所述的全血中全量程C-反应蛋白检测试剂；
所采用的检测仪器为：全自动生化分析仪；分析方法为：两点终点法；反应方向为：上升反应；校准方式为：Spline；测定波长为：540-570nm和650-800nm；测定温度为：37℃；样本：R1：R2＝3μl:150μl:150μl；
步骤为：3μl样本和150μl试剂R1混匀后于37℃孵育10sec-3min，在540-570nm处读取第1读数点吸光度A1，随即加入150μl试剂R2，在650-800nm处读取第2读数点吸光度A2，混匀后37℃孵育5min，在650-800nm处读取第3读数点吸光度A3，计算A3-A2差值，根据校准曲线计算所得值及相应红细胞压积，得出样本中C-反应蛋白含量。
6.根据权利要求5所述的全血中全量程C-反应蛋白检测方法，其特征在于：所述波长540-570nm为血红蛋白测定波长、波长650-800nm为全血中全量程C-反应蛋白测定波长。
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