CN105974106B - 11-脱氢-血栓素b2测定试剂盒及其用途 - Google Patents
11-脱氢-血栓素b2测定试剂盒及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105974106B CN105974106B CN201610286284.4A CN201610286284A CN105974106B CN 105974106 B CN105974106 B CN 105974106B CN 201610286284 A CN201610286284 A CN 201610286284A CN 105974106 B CN105974106 B CN 105974106B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- thromboxane
- 11dhtxb2
- dehydrogenations
- assay kit
- reagent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 44
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims abstract description 28
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 25
- 229920000126 latex Polymers 0.000 claims abstract description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 claims abstract description 12
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 5
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 claims description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 5
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 4
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 4
- TZBAVQKIEKDGFH-UHFFFAOYSA-N n-[2-(diethylamino)ethyl]-1-benzothiophene-2-carboxamide;hydrochloride Chemical compound [Cl-].C1=CC=C2SC(C(=O)NCC[NH+](CC)CC)=CC2=C1 TZBAVQKIEKDGFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000006798 recombination Effects 0.000 claims description 4
- 238000005215 recombination Methods 0.000 claims description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 4
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 claims description 4
- WFCSWCVEJLETKA-UHFFFAOYSA-N 2-piperazin-1-ylethanol Chemical compound OCCN1CCNCC1 WFCSWCVEJLETKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 3
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000005864 Sulphur Substances 0.000 claims description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 3
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 claims description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 claims description 2
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 claims description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 1
- UXAMZEYKWGPDBI-UHFFFAOYSA-N C(CCCCCCCCCCCCCCC)Br(C)(C)C Chemical compound C(CCCCCCCCCCCCCCC)Br(C)(C)C UXAMZEYKWGPDBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 claims 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 17
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 5
- XNRNNGPBEPRNAR-UHFFFAOYSA-N Thromboxane B2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1OC(O)CC(O)C1CC=CCCCC(O)=O XNRNNGPBEPRNAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 4
- 238000006356 dehydrogenation reaction Methods 0.000 abstract 4
- XNRNNGPBEPRNAR-JQBLCGNGSA-N thromboxane B2 Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1OC(O)C[C@H](O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XNRNNGPBEPRNAR-JQBLCGNGSA-N 0.000 abstract 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 23
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 19
- DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N thromboxane A2 Chemical compound OC(=O)CCC\C=C/C[C@@H]1[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)O[C@@H]2O[C@H]1C2 DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 10
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 208000025870 aspirin resistance Diseases 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 4
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000010906 Cyclooxygenase 1 Human genes 0.000 description 3
- 108010037464 Cyclooxygenase 1 Proteins 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003178 Arterial thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 2
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 2
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000000640 hydroxylating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 description 2
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011020 pilot scale process Methods 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 2
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000009329 sexual behaviour Effects 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 2
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical class OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N Methyl methacrylate Chemical compound COC(=O)C(C)=C VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001252 acrylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000012482 calibration solution Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000007213 cerebrovascular event Effects 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 1
- 229940031098 ethanolamine Drugs 0.000 description 1
- UAIZDWNSWGTKFZ-UHFFFAOYSA-L ethylaluminum(2+);dichloride Chemical compound CC[Al](Cl)Cl UAIZDWNSWGTKFZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 125000000913 palmityl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229920006389 polyphenyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- HJWLCRVIBGQPNF-UHFFFAOYSA-N prop-2-enylbenzene Chemical compound C=CCC1=CC=CC=C1 HJWLCRVIBGQPNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010010 raising Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- RPENMORRBUTCPR-UHFFFAOYSA-M sodium;1-hydroxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].ON1C(=O)CC(S([O-])(=O)=O)C1=O RPENMORRBUTCPR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- AISMNBXOJRHCIA-UHFFFAOYSA-N trimethylazanium;bromide Chemical compound Br.CN(C)C AISMNBXOJRHCIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54346—Nanoparticles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
- G01N33/537—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
- G01N33/539—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody involving precipitating reagent, e.g. ammonium sulfate
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明公开了一种11‑脱氢‑血栓素B2测定试剂盒：其特征在于，所述试剂盒包括：试剂R1，其包含0.01％‑2％的以w/v计的11dhTxB2抗体和缓冲液；试剂R2，其包含0.1％‑2％的以w/v计的包被了11dhTxB2蛋白的纳米胶乳微粒的缓冲液；校准品，其为11dhTxB2蛋白和缓冲液；以及质控品，其为溶于人工尿液中的11dhTxB2蛋白。本发明的11‑脱氢‑血栓素B2测定试剂盒提高了检测尿液中11‑脱氢‑血栓素B2含量的灵敏度和线性范围，检测灵敏度可以达到775pg/ml，线性范围可以达到0‑6300pg/ml。是一种灵敏度高、特异性好、准确性高、精密度好、稳定性好的11‑脱氢‑血栓素B2测定试剂盒。
Description
技术领域
本发明涉及一种测定试剂盒，具体地涉及一种11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，本发明也涉及该试剂盒的用途。
背景技术
由于阿司匹林的抗血小板聚集作用，高风险患者可以减少约25％的动脉血栓形成性事件的发生率。但在接受阿司匹林治疗的有动脉血栓形成性事件的患者，在长期随访中，有10％-25％出现病情的复发，这一现象被称为阿司匹林抵抗或者耐药。这个观点的出现使得人们开始质疑阿司匹林的有效性，因为服用阿司匹林后，相当一部分患者的血小板功能还是正常的。
匈牙利学者Pusch等对2008年以前的有关阿司匹林抵抗发生率及其临床联系的相关资料进行了系统回顾。他们发现，尽管目前“阿司匹林抵抗(AR)”还没有被广泛接受的标准定义，但不同的实验室方法已经证明，阿司匹林抵抗与不良预后相关，但这些实验室方法无法相互比较。因此，阿司匹林治疗期间，仍具有高血小板活性或血小板抑制率很低的患者，应采用何种治疗才能有效，目前尚未确定。
根据Gum等的研究发现，测定服用阿司匹林患者的血小板功能反应性与死亡、心肌梗死及脑血管事件的预后具有良好的相关性。
目前临床上对阿司匹林抵抗主要的检测方法是检测血小板(PLT)功能，需要使用专用的血小板聚集仪。操作步骤如下：血小板聚集实验用光比浊法，以1000rmp/min(离心半径6mm)，离心10min，提取富含血小板的血浆(PRP)；再以3000rmp/min(离心半径6mm)离心20min，提取缺乏血小板的血浆(PPP)，PLT＝10～20×109/L。再以PPP做空白对照，用PPP调整PRP至200-300×109/L，用血小板聚集检测仪光比浊法进行不同诱导剂的血小板聚集试验，同时检测血常规和生化指标。
众所周知，血小板离开人体后，聚集功能就已经启动，所以体外检测血小板功能需要严格的控制程序，且易受干扰，实验的重复性很差。
最近的研究显示，与无症状的患者相比，冠心病患者服用阿司匹林后尿液中11dhTxB2水平显著升高。原因是阿司匹林可以在血小板环氧合酶-1(COX-1)上不可逆转的添加乙酰基，这样可以抑制它的活性从而延长血小板的寿命。低剂量阿司匹林可抑制95％的血小板COX-1活性,从而抑制血栓素A2(TxA2)生成。血栓素A2(TxA2)经裂解，形成稳定的11dhTxB2、11dh2和3DinorTxB2,经尿液排出。尿液中含有丰富的血栓素A2(TxA2)的代谢物，其中11dhTxB2是最稳定的代谢物之一，具有相对较长的循环时间，约为45分钟。
目前用于检测11dhTxB2含量的方法有酶联免疫法，具体操作如下：标准物和样本添加至包被了羊抗鼠IgG抗体的孔内，再添加11dhTxB2指示剂和11dhTxB2单克隆抗体，2小时孵育后，清洗孔并添加底物，30分钟添加终止液，使用微板读数器读数。光密度与样本或标准物内的11dhTxB2数量成反比。
检测开始时向孔内放入标准物和样本，添加11dhTxB2指示剂。指示剂是11dhTxB2与碱性磷酸酶共轭物，然后添加鼠单克隆11dhTxB2抗体开始反应。在两小时孵育期间，11dhTxB2和11dhTxB2指示剂会竞争结合到鼠抗11dhTxB2抗体上，抗体被包被的羊抗鼠IgG抗体捕捉至孔上，清洗微量滴定板孔除去未结合的酶。接下来检测人员添加p-硝基苯磷酸(pNPP)底物，孵育30分钟，再添加0.1M的终止液乙二胺四乙酸(EDTA)结束颜色反应，然后此板在标准微量滴定板读数器405nm下进行读数。
对于含有较高水平的11dhTxB2样本，会有较少的11dhTxB2指示剂结合至单克隆抗体，结果产生较低的光密度(OD)。样本中的11dhTxB2较少时，会有较多的指示剂结合至抗体，产生较高的OD读数。11dhTxB2的真正浓度是通过对比临床样本OD值和包装随带的定标液建立的参考曲线获得的。该检测方法用时在4小时左右，且精密度低。
以上两种方法检测阿司匹林抵抗都需要耗费大量的人力、物力和时间，且成本高，很难实现批量自动化检测。
发明内容
因此，需要提供一种11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，这样就可用生化分析仪实现大批量自动化检测，大大缩短了检测时间。
为此，本发明提供了一种一种11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，所述试剂盒包括：
试剂R1，其包含0.01％-2％的以w/v计的11dhTxB2抗体和缓冲液；
试剂R2，其包含0.1％-2％的以w/v计的包被了11dhTxB2蛋白的纳米胶乳微粒的缓冲液；
校准品，其为11dhTxB2蛋白和缓冲液；以及
质控品，其为溶于人工尿液中的11dhTxB2蛋白。
本发明11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒的检测原理为通过11dhTxB2抗体与抗原结合，生成具有特异性的大分子蛋白产物，使尿液样本中的11dhTxB2先与试剂R1中11dhTxB2抗体反应，反应完成后，剩余的11dhTxB2抗体与试剂2中包被了11dhTxB2的纳米胶乳微粒进行特异性反应结合，其反应量的多少与尿液中11dhTxB2蛋白成反比。反应产生的浊度带入11-脱氢-血栓素B2校准品测定的校准曲线，计算尿液样本中11dhTxB2的含量。
本发明所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其中，所述试剂R1和试剂R2还包含10mmol-50mmol/L缓冲液、以w/v计的0.2％-2％稳定剂。进一步，所述试剂R1还包含以w/v计的0.1％-5％增乳剂。进一步，所述试剂R1、试剂R2和校准品还包含防腐剂。其中，所述的缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液和羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液其中的一种或多种；其PH在5.0-10.0之间；所述稳定剂为：乙二胺四乙酸二钠、牛血清白蛋白、聚乙二醇4000和聚乙二醇6000中一种或多种；所述增乳剂为：聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇10000、吐温80、十六烷基三甲基溴化铵、或IPTG中一种或多种；所述防腐剂为：叠氮钠、硫柳汞、苯酚和procline300中一种或多种。
本发明所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其中，所述11dhTxB2蛋白为重组11dhTxB2蛋白，所述11dhTxB2抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
本发明所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其中，所述包被了11dhTxB2蛋白的纳米胶乳微粒为30nm-400nm纳米胶乳微粒偶联物，进一步所述的纳米胶乳微粒为聚苯乙烯、二乙烯基苯、丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲酯和乙烯基甲苯中一种材质或多种材质且其化学基团被修饰过的胶乳微粒，被修饰的化学基团与11dhTxB2蛋白的氨基缩合形成偶联物。
本发明所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其中，所述校准品的各校准点浓度在0-7000pg/ml之间优选地至少6个校准点。
本发明也提供了上述11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒在确定服用小剂量阿司匹林患者对阿司匹林耐药性中用途。进一步地，该11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒与患者尿液中测定的尿肌酐的量联合使用，以计算11dhTxB2的生产率。
本发明的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒提高了检测尿液中11-脱氢-血栓素B2含量的灵敏度和线性范围，检测灵敏度可以达到775pg/ml，线性范围可以达到0-6300pg/ml。是一种灵敏度高、特异性好、准确性高、精密度好、稳定性好的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒(免疫比浊法)。
本发明的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒可以快速、准确的测定尿液中11-脱氢-血栓素B2含量，通过结合肌酐的量，如11dhTxB2结果(pg/mL)除以患者样本的肌酐结果(mg/dL)，然后再乘以100，换算成11dhTxB2的生产率，即血栓素A2(TxA2)的代谢率。
血栓素A2(TxA2)的代谢率越高说明血液中血栓素A2(TxA2)含量越多，则血小板的聚集功能越强，进而确定患者对阿司匹林是否抵抗。通过检测服用阿司匹林患者的尿液中11dhTxB2的生产率，反映血小板的聚集功能的强弱，从而判断服用阿司匹林患者是否存在阿司匹林抵抗。
下面通过参考附图和具体实施方式对本发明进行详细说明。所述实施例仅仅是示意目的，不意指对本发明的任何限制。所述的实验材料和试剂若无特别说明，均是可以通过商购得到，所述实验方法若无特别说明，均为本领域常规的实验方法。
附图说明
图1是标准尿液样本线性实验。
图2是本发明试剂盒与对照酶联免疫法试剂盒的正常样本的相关性实验。
图3是本发明试剂盒与对照酶联免疫法试剂盒的异常样本的相关性实验。
图4是本发明试剂盒的测定的尿液中11-脱氢-血栓素B2量与测定的尿肌酐的量联合使用，计算的11dhTxB2生产率的标准检测结果。
具体实施方式
11-脱氢-血栓素B2单克隆和多克隆抗体，购自艾美捷科技有限公司(为美国Cayman Chemical生产)。纳米胶乳微粒，购自西安凯新生物科技有限公司。人工尿液，购自东莞科鸿化工有限公司。11dhTxB2蛋白是委托专业生产公司按《重组11dhTxB2蛋白技术要求》用常规方法制备的重组11dhTxB2蛋白。
实施例1：11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒的制备
1.试剂R1的制备：
称取该11dhTxB2单克隆抗体0.015mg溶于100ml 10mmol/L Tris缓冲液中，使得其溶解完全，经0.22μm的滤膜过滤后，制成0.015％(W/V)的试剂R1。
2.试剂R2的制备：
使用30nm的羟基化聚苯乙烯纳米胶乳微粒，在PH＝6.0的MES缓冲液中加入EADC:Sulfo-NHS:纳米胶乳微粒，其质量比为1:0.5:0.1，超声2-3秒,混匀,经室温在旋转摇床上活化2小时，17000rpm离心30分钟，用PH＝6.0的MES缓冲液洗涤3次，然后将微球悬于PH＝8.0HEPES缓冲液中，制成微粒悬液，测粒径及CV值。
在30nm的微粒悬液中，加入质量为纳米胶乳微粒1/3重的11dhTxB2蛋白，超声2-3秒，立即混匀，使HEPES缓冲液的最终浓度为25mg/ml，室温旋转摇床孵育4小时。再分别加入0.2％的乙醇胺，0.1％的牛血清白蛋白，0.1％的叠氮钠，0.02％甘氨酸的封闭液，室温旋转摇床孵育1小时。在2-8℃的条件下17000rpm离心30分钟，弃上清液，沉淀物分别用终浓度的HEPES缓冲液(PH＝8.0)，0.1％的叠氮钠，0.02％甘氨酸的洗涤液重悬，再离心，如此洗涤3次，制成30nm微粒交联的11dhTxB2蛋白偶联物。用20mmol/L的HEPES缓冲液(PH＝8.0)重悬偶联物，使其终浓度为0.1％(W/V)，制成试剂R2。
3.校准品的制备方法：
使用重组11dhTxB2蛋白分别溶于0.02mol/L的PBS缓冲液(PH＝7.4)中，制成779pg/ml、1561pg/ml、2410pg/ml、3147pg/ml、6301pg/ml的5个浓度，使用0.02mol/L的PBS缓冲液(PH＝7.4)为0点空白校准。
4.质控品的制备方法：
精密称取11dhTxB2蛋白，溶于含人工尿液的0.02mol/L PBS缓冲液(含1.8％尿素，0.05％尿酸，1.1％的无机盐)中。使其终浓度分别约为791pg/ml、1588pg/ml和2385pg/ml的低、中、高三个浓度的质控品。
实施例2：11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒的制备
与实施例1不同之处在于制成2％(W/V)的试剂R1以及2％(W/V)的试剂R2，其中试剂R2制备中使用了400nm的羟基化丙烯酸酯纳米胶乳微粒。
实施例3：11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒的制备
与实施例1不同之处在于制成1％(W/V)的试剂R1以及1％(W/V)的试剂R2，其中试剂R2制备中使用了200nm的羟基化二乙烯基苯纳米胶乳微粒。
实施例4-6：11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒的制备
实施例4与实施例1不同之处在于试剂R1和试剂R2分别地添加了0.2％(W/V)乙二胺四乙酸二钠以及0.1％(W/V)的叠氮钠；试剂R1添加了0.1％(W/V)聚乙二醇2000；校准品添加了0.1％(W/V)的苯酚。以及其中试剂R1中所使用抗体为11-脱氢-血栓素B2多克隆抗体。
实施例5与实施例2不同之处在于试剂R1和试剂R2分别地添加了2％(W/V)牛血清白蛋白以及0.1％(W/V)的硫柳汞；试剂R1添加了5％(W/V)聚乙二醇6000、吐温80和IPTG混合物；校准品添加了0.1％(W/V)的procline 300。以及其中试剂R1中所使用抗体为11-脱氢-血栓素B2多克隆抗体。
实施例6与实施例3不同之处在于试剂R1和试剂R2分别地添加了1％(W/V)聚乙二醇4000以及0.1％(W/V)的硫柳汞。试剂R1添加了2％(W/V)十六烷基三甲基溴化铵；校准品添加了0.1％(W/V)的叠氮钠。以及其中试剂R1中所使用抗体为11-脱氢-血栓素B2多克隆抗体。
实施例7：11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒的制备
另外对实施例1-6中的缓冲剂进行了替换，分别用pH5、pH7和pH10三个PH值的下列一种缓冲液：碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液和羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液，替换实施例1-6的相应缓冲液，进行试剂盒的制备。
实施例8：11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒(免疫比浊法)的性能
试验分析方法：两点终点法。取实施例1的试剂R1：120μl，加入24μl质控品，于37℃孵育5分钟后，加入实施例1的试剂R2：40μl，37℃保温45秒读第一点，反应5分钟后，再次读点，得到吸光度差值ΔA。
分析仪器：迪瑞CS-1300型全自动分析仪。
[基本参数]：
检测方法： 终点法
主波长： 700nm
反应温度： 37℃
操作步骤： 单位：ul
[结果计算]
计算校准吸光度差值(A2-A1)，并建立校准液吸光度-浓度工作曲线。
1.灵敏度试验
检测20次水，记录吸光度差值(ΔA水)，计算平均值(X水)和标准偏差(SD水)；检测浓度为791pg/ml的质控品20次，记录吸光度差值(ΔA样),计算平均值(X样)和标准偏差(SD样)，用如下公式计算灵敏度。
灵敏度＝791×(X样+3×SD样)/X水
| 测定次数 | ΔA水 | ΔA样(浓度791pg/ml) |
| 1 | 0.2132 | 0.1900 |
| 2 | 0.2198 | 0.1849 |
| 3 | 0.2241 | 0.1876 |
| 4 | 0.2098 | 0.1932 |
| 5 | 0.2083 | 0.1921 |
| 6 | 0.2216 | 0.1976 |
| 7 | 0.2178 | 0.1827 |
| 8 | 0.2089 | 0.1841 |
| 9 | 0.2065 | 0.1870 |
| 10 | 0.2126 | 0.1875 |
| 11 | 0.2033 | 0.1912 |
| 12 | 0.2085 | 0.1941 |
| 13 | 0.2168 | 0.1921 |
| 14 | 0.2264 | 0.1874 |
| 15 | 0.2166 | 0.1881 |
| 16 | 0.2127 | 0.1863 |
| 17 | 0.2188 | 0.1938 |
| 18 | 0.2249 | 0.1918 |
| 19 | 0.2284 | 0.1937 |
| 20 | 0.2270 | 0.1879 |
| 均值 | 0.2163 | 0.189665 |
| SD | 0.007505 | 0.003891 |
本发明试剂灵敏度＝791×(0.189665+3×0.007505)/0.2163＝775pg/ml。
2.标准尿液样本线性实验
用高浓度11dhTxB2蛋白标准液，制成浓度为0.0pg/ml，393.81pg/ml，787.625pg/ml，1575.25pg/ml，3150.5pg/ml和6301pg/ml的6个标准样本，每个浓度的样本用本发明实施例1的阿司匹林测定试剂盒测定3次，取其平均值。对测定值进行相关分析，如图1所示，图中X轴表示理论值(pg/ml)，Y轴表示实测值(pg/ml)，R2＝0.99963。
3.精密度实验
用本发明实施例1所制备的试剂盒检测质控品11dhTxB2的高浓度、低浓度样本各20次，计算批内精密度；用3个批次的试剂盒检测同一浓度11dhTxB2质控品20次，计算批间精密度。实验结果如下表所示:
本发明试剂盒的批内精密度分别为：9.1％,3.1％。批间精密度为：11.3％。说明本发明具有良好的精密度。
4.干扰试验：
取未服用阿司匹林的健康人标本，制成混合尿液。精密称取胆红素、抗坏血酸、肌酐、葡萄糖、水杨酸，制成5组高浓度干扰物溶液。分别精密量取高浓度干扰物溶液与尿液混合，制成不同干扰物浓度的尿液，将配制好的尿液样本用本发明实施例1所制得的测定试剂盒分别进行测定，每个样本重复测定3次，取其平均值，以未加干扰物的样本测定均值为100％，计算干扰度。
干扰度＝加干扰物样本均值/未加干扰物样本均值×100％
干扰度在90％-110％之间的示为可接受结果。
结果显示：当胆红素浓度小于30mg/dl、抗坏血酸浓度小于200mg/dl、肌酐浓度小于1000mg/dl、葡萄糖浓度小于2000mg/dl、水杨酸浓度小于200mg/dl时，各干扰物对本发明试剂盒测定影响无明显影响。
本试剂盒使用方法：两点终点法。取试剂R1：120ul，加入24ul样本，于37℃孵育5分钟后，加入试剂R2：40ul，37℃保温45秒读第一点，反应5分钟后，再次读点，得到吸光度差值ΔA。所测得吸光度差值ΔA代入由测得的标准品ΔA标所绘制的标准曲线方程，计算样本的浓度值。(用标准品ΔA标所绘制的标准曲线方程，计算质控品ΔA质控，质控品浓度必须在规定的范围内。)
5.相关性实验
分别使用本发明实施例1所制得的测定试剂盒和对照酶联免疫法试剂盒(市售某公司同类产品)对50份正常样本(未使用阿司匹林药物人的尿液)和50份异常样本(使用阿司匹林药物人的尿液)进行相关性实验和相关性分析。其中50份正常样本中男性23人，女性27人，最小年龄21岁，最大年龄67岁，平均年龄43.12；50分异常样本中男性26人，女性24人，最小年龄44岁，最大年龄85岁，平均年龄65.74。试验结果如图2和图3所示，图中X轴为对照试剂盒测定值，Y轴为本发明试剂盒测定值，其中正常样本中两试剂盒的相关系数R2＝0.98255，异常样本中两试剂盒的相关系数为R2＝0.99535。结果表明，本发明试剂盒与对照酶联免疫法试剂盒的检测数据图呈直线关系，两试剂盒具有显著的相关性。
实施例9
阿司匹林抵抗的临界值实验
11dhTxB2检测试剂盒的临界值评估研究涉及到201份样本来自服用阿司匹林的个体；204份样本来自未服用阿司匹林个体。其中包括166名服用ASA控制剂量前和/或后明显健康的成人。测量了11-脱氢-血栓素B2的浓度，并将浓度除以肌酐浓度得到标准检测结果。下图4所示为405份样本的频率分布图。根据这些频率，确定临界值是1500pg 11dhTxB2/mg尿肌酐。
另外，也如实施例8所述实验了本发明实施例2-7所制备的试剂盒，结果与实施例8相似，在此不再赘述。
Claims (11)
1.一种11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒：其特征在于，所述试剂盒包括：
试剂R1，其包含0.01％-2％的以w/v计的11dhTxB2抗体和缓冲液；
试剂R2，其包含0.1％-2％的以w/v计的包被了11dhTxB2蛋白的纳米胶乳微粒的缓冲液；
校准品，其为11dhTxB2蛋白和缓冲液；以及
质控品，其为溶于人工尿液中的11dhTxB2蛋白；
该试剂盒的线性范围为0-6300pg/ml。
2.根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R1和试剂R2还包含10mmol-50mmol/L缓冲液，以及以w/v计的0.2％-2％稳定剂。
3.根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R1还包含以w/v计的0.1％-5％增乳剂。
4.根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R1、试剂R2和校准品还包含防腐剂。
5.根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述11dhTxB2蛋白为重组11dhTxB2蛋白，所述11dhTxB2抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
6.根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述的缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液和羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液其中的一种或多种；其PH在5.0-10.0之间。
7.根据权利要求2所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为：乙二胺四乙酸二钠、牛血清白蛋白、聚乙二醇4000和聚乙二醇6000中一种或多种。
8.根据权利要求3所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述增乳剂为：聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇10000、吐温80、十六烷基三甲基溴化铵、或IPTG中一种或多种。
9.根据权利要求4所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为：叠氮钠、硫柳汞、苯酚和proclin 300 中一种或多种。
10.根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述包被了11dhTxB2蛋白的纳米胶乳微粒为30nm-400nm纳米胶乳微粒偶联物。
11.根据权利要求1所述的11-脱氢-血栓素B2测定试剂盒，其特征在于，所述校准品的各校准点浓度在0-7000pg/ml之间，所述校准点为至少6个。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610286284.4A CN105974106B (zh) | 2016-05-04 | 2016-05-04 | 11-脱氢-血栓素b2测定试剂盒及其用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610286284.4A CN105974106B (zh) | 2016-05-04 | 2016-05-04 | 11-脱氢-血栓素b2测定试剂盒及其用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105974106A CN105974106A (zh) | 2016-09-28 |
| CN105974106B true CN105974106B (zh) | 2018-06-22 |
Family
ID=56994301
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610286284.4A Expired - Fee Related CN105974106B (zh) | 2016-05-04 | 2016-05-04 | 11-脱氢-血栓素b2测定试剂盒及其用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105974106B (zh) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20210255180A1 (en) * | 2018-06-25 | 2021-08-19 | Vascu Technology, Inc. | Methods and Kits for Detection of 11-dehydro-thromboxane B2 |
| CN109900887A (zh) * | 2019-04-03 | 2019-06-18 | 深圳市安帝宝科技有限公司 | 一种尿液样本的前处理液 |
| CN111060686A (zh) * | 2019-11-22 | 2020-04-24 | 苏州普瑞斯生物科技有限公司 | 一种纤溶酶原激活物的检测试剂盒及制备方法 |
| CN110672838B (zh) * | 2019-12-04 | 2020-04-03 | 湖南新开源菲思特精准医疗科技有限公司 | 检测阿司匹林代谢及血小板高反应性的试剂盒及检测方法 |
| CN116445419B (zh) * | 2023-04-20 | 2023-10-24 | 北京易安泰生物科技有限公司 | 11dhTxB2单克隆抗体及其制备方法和应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103592430A (zh) * | 2012-08-13 | 2014-02-19 | 张涛 | 用于检测11-去氢血栓烷素b2的elisa试剂盒 |
| CN103941007A (zh) * | 2014-03-28 | 2014-07-23 | 瑞莱生物科技（江苏）有限公司 | 一种快速定量检测阿司匹林疗效的免疫荧光试纸条及其制备方法 |
| CN104792982A (zh) * | 2015-03-10 | 2015-07-22 | 山东盛百灵医药科技有限公司 | 一种阿司匹林耐药性监测试剂 |
| CN104849464A (zh) * | 2015-05-12 | 2015-08-19 | 广州华弘生物科技有限公司 | 一种检测阿司匹林疗效的试剂盒及其检测方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2587239B2 (ja) * | 1987-07-08 | 1997-03-05 | 小野薬品工業株式会社 | 酵素標識トロンボキサンｂ▲下２▼類およびそれを用いた１１−デヒドロ−トロンボキサンｂ▲下２▼の測定法 |
| EP1488232B1 (en) * | 2002-03-24 | 2007-11-14 | McMaster University | Method and device for predicting cardiovascular events |
| WO2010039992A1 (en) * | 2008-10-01 | 2010-04-08 | The Johns Hopkins University | Platelet function analysis for adverse cardiovascular events |
-
2016
- 2016-05-04 CN CN201610286284.4A patent/CN105974106B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103592430A (zh) * | 2012-08-13 | 2014-02-19 | 张涛 | 用于检测11-去氢血栓烷素b2的elisa试剂盒 |
| CN103941007A (zh) * | 2014-03-28 | 2014-07-23 | 瑞莱生物科技（江苏）有限公司 | 一种快速定量检测阿司匹林疗效的免疫荧光试纸条及其制备方法 |
| CN104792982A (zh) * | 2015-03-10 | 2015-07-22 | 山东盛百灵医药科技有限公司 | 一种阿司匹林耐药性监测试剂 |
| CN104849464A (zh) * | 2015-05-12 | 2015-08-19 | 广州华弘生物科技有限公司 | 一种检测阿司匹林疗效的试剂盒及其检测方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| An Immunoturbidimetric Assay for the Detection of Thromboxane Metabolites in Urine;I. Muncy,et al;《CLINICAL CHEMISTRY》;20141231;第60卷(第10期);第S234页的B356文献 * |
| TxB Cardio Test Kit;Corgenix,Inc.;《ftp://69.55.190.158/Intra/PI/13916.pdf》;20141022;正文第1-3页 * |
| 尿11-脱氢血栓素B2水平与2型糖尿病合并冠心病患者阿司匹林临床疗效的相关性研究;刘滕飞 等;《北京大学学报（医学版）》;20151012;第47卷(第6期);920-924 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105974106A (zh) | 2016-09-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105974106B (zh) | 11-脱氢-血栓素b2测定试剂盒及其用途 | |
| CN102628864B (zh) | 胶乳增强免疫比浊法测定血清或尿液中心脏型脂肪酸结合蛋白的试剂盒 | |
| CN108303544A (zh) | 一种全血c反应蛋白检测试剂盒 | |
| CN102175871A (zh) | 双胶乳法测定血清或尿液中游离轻链的液体双试剂试剂盒 | |
| CN107402308A (zh) | Il‑6定量检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN102628867A (zh) | 双抗体胶乳增强视黄醇结合蛋白检测试剂盒 | |
| CN102353770A (zh) | 胱氨酸蛋白酶抑制剂c检测试剂盒 | |
| CN106932589A (zh) | 测定人体血清视黄醇结合蛋白含量的试剂盒及其制备方法 | |
| US11156618B1 (en) | Rapid measurement of total vitamin D in blood | |
| CN107102150A (zh) | 一种尿微量白蛋白测定试剂盒及其制备方法 | |
| CN104535770A (zh) | 一种复合抗体的肌红蛋白测定试剂盒 | |
| CN103389383A (zh) | 一种测定血清中肌红蛋白含量的检测试剂盒 | |
| CN105486875A (zh) | 视黄醇结合蛋白检测试剂盒 | |
| CN106771152A (zh) | 一种快速检测钙卫蛋白的试剂盒 | |
| CN106370860A (zh) | 血清免疫球蛋白e胶体金层析定量检测试剂盒及试纸条 | |
| Lucertini et al. | Enzyme-linked immunosorbent assay of retinol-binding protein in serum and urine. | |
| CN102226808A (zh) | 胰蛋白酶原-2化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN106324251A (zh) | 小片段BMG抗体的制备方法及β2‑微球蛋白检测试剂盒 | |
| CN105699665A (zh) | 一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的检测试剂盒 | |
| CN108627652B (zh) | 一种基于单粒径并可同时检测血清和尿液样本中视黄醇结合蛋白的试剂盒 | |
| CN105759050B (zh) | 一种定量检测肌钙蛋白i含量免疫荧光试剂盒及制备方法 | |
| CN106546729B (zh) | 一种去除干式免疫荧光定量法检测中血清基质效应的新工艺方法 | |
| CN104730231B (zh) | 一种用于荧光免疫定量检测的样本缓冲液及其应用 | |
| CN107462729A (zh) | 一种载脂蛋白a1检测试剂盒及检测方法 | |
| WO2020005947A9 (en) | Methods and kits for detection of 11-dehydro-thromboxane b2 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20180622 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |