CN107475336A - 一种木瓜蛋白肽的制备方法 - Google Patents

一种木瓜蛋白肽的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107475336A
CN107475336A CN201710674867.9A CN201710674867A CN107475336A CN 107475336 A CN107475336 A CN 107475336A CN 201710674867 A CN201710674867 A CN 201710674867A CN 107475336 A CN107475336 A CN 107475336A
Authority
CN
China
Prior art keywords
papain
peptide
preparation
powder
compound protease
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710674867.9A
Other languages
English (en)
Inventor
郝之奎
潘万贵
林海波
徐峰
管月清
魏春
高影
王笑丽
廖祥儒
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Taizhou Vocational and Technical College
Original Assignee
Taizhou Vocational and Technical College
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Taizhou Vocational and Technical College filed Critical Taizhou Vocational and Technical College
Priority to CN201710674867.9A priority Critical patent/CN107475336A/zh
Publication of CN107475336A publication Critical patent/CN107475336A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products

Abstract

本发明公开了一种木瓜蛋白肽的制备方法，本方法采用复合蛋白酶对木瓜蛋白粉进行酶解反应，得到所述木瓜蛋白肽；所述复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1‑2U：0.5‑1U的比例混合而成。本发明制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量超过80％，分子量分布小于10000的占85％以上，游离氨基酸占5‑7％。本发明制备木瓜蛋白肽的工艺简易，投资少，见效快，回报率高、投入回报周期短，生产制备的木瓜蛋白肽酸溶性蛋白含量、游离氨基酸、分子量分布等质量参数变化小，适宜于工业化生产。

Description

一种木瓜蛋白肽的制备方法
技术领域
本发明涉及生物提取技术领域，尤其涉及一种木瓜蛋白肽的制备方法。
背景技术
肽是蛋白质的水解产物，即蛋白质的结构片段。两个氨基酸通过肽键连接成二肽，三个氨基酸通过肽键连接成三肽，而多个氨基酸通过肽键连接成多肽。一般把2-10个氨基酸残基组成的肽，称之为寡肽。因为肽的分子相对蛋白质的分子小得多，但生物活性非常高，少量的肽就能发挥重要的作用，所以被称为活性肽。活性肽中不同的氨基酸排序，决定了它们有不同的功能，它们通过多种代谢和生理调节，可以起到促进免疫、抗自由基、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等作用。
木瓜(学名:Chaenomeles sinensis(Thouin)Koehne):蔷薇科木瓜属，其果皮光滑美观，果肉厚实细致、香气浓郁、汁水丰多、甜美可口、营养丰富，有“百益之果”、“水果之皇”、“万寿瓜”之雅称，是岭南四大名果之一。木瓜富含17种以上蛋白质及氨基酸，如糖分、有机酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、皂甙、黄酮类、脂肪酶。木瓜还含有木瓜蛋白酶、番木瓜碱、膳食纤维以及多种维生素，并含有钙、铁等物质。半个中等大小的木瓜足供成人整天所需的维生素C，木瓜在中国素有“万寿果”之称，顾名思义，多吃可延年益寿。目前还未见有木瓜蛋白肽制备方法的报道。
发明内容
本发明的目的在于：针对上述存在的问题，提供一种木瓜蛋白肽的制备方法。
为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
一种木瓜蛋白肽的制备方法，采用复合蛋白酶对木瓜蛋白粉进行酶解反应，得到所述木瓜蛋白肽；所述复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1-2U：0.5-1U的比例混合而成。
较佳地，所述木瓜蛋白肽的制备方法的具体步骤为：
(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：9-12；
(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为50-55℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.2-6.5，酶解的时间为4-5h，得到酶解液；
(3)将所得酶解液加热至85-95℃，维持20-25min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后过滤，得到滤液；
(4)将所得滤液进行浓缩干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。
较佳地，酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6000-7000U。
较佳地，所述木瓜蛋白肽的制备方法的具体步骤为：
(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：11；
(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为52℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.3，酶解的时间为4.5h，得到酶解液；所述酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6500U；
(3)将所得酶解液加热至90℃，维持22min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后过滤，得到滤液；
(4)将所得滤液进行浓缩干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。
较佳地，在步骤(3)，所述冷藏沉降处理为先在10-15℃的条件下处理1-2h，再在2-5℃的条件下处理5-20h。
较佳地，在步骤(3)，所述过滤为用孔径为100-200nm的膜进行过滤。
较佳地，在步骤(4)，所述的干燥方法为喷雾干燥或冷冻干燥。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
(1)本发明制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量超过80％，分子量分布小于10000的占85％以上，游离氨基酸占5-7％。
(2)本发明制备木瓜蛋白肽的工艺简易，投资少，见效快，回报率高、投入回报周期短，生产制备的木瓜蛋白肽酸溶性蛋白含量、游离氨基酸、分子量分布等质量参数变化小，适宜于工业化生产。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下举出优选实施例，对本发明进一步详细说明。然而，需要说明的是，说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本发明的一个或多个方面有一个透彻的理解，即便没有这些特定的细节也可以实现本发明的这些方面。
本实施例的木瓜蛋白粉购自上海中邦斯瑞生物科技有限公司，其蛋白含量为90％。
实施例1
一种木瓜蛋白肽的制备方法，由以下步骤组成：
(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：9；
(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为50℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.5，酶解的时间为4h，得到酶解液；复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1U：1U的比例混合而成；酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6000U；
(3)将所得酶解液加热至85℃，维持25min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后用孔径为100nm的膜进行过滤，得到滤液；所述冷藏沉降处理为先在10℃的条件下处理1h，再在2℃的条件下处理5h；
(4)将所得滤液进行浓缩，并进行喷雾干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。
本实施例制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量为82％，分子量分布小于10000的占86％，游离氨基酸占5.5％。
实施例2
一种木瓜蛋白肽的制备方法，由以下步骤组成：
(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：12；
(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为55℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.2，酶解的时间为5h，得到酶解液；复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：2U：0.5U的比例混合而成；酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶7000U；
(3)将所得酶解液加热至95℃，维持20min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后用孔径为200nm的膜进行过滤，得到滤液；所述冷藏沉降处理为先在15℃的条件下处理2h，再在5℃的条件下处理20h；
(4)将所得滤液进行浓缩，并进行冷却干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。
本实施例制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量为85％，分子量分布小于10000的占88％，游离氨基酸占7％。
实施例3
一种木瓜蛋白肽的制备方法，由以下步骤组成：
(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：11；
(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为52℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.3，酶解的时间为4.5h，得到酶解液；复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1.5U：0.8U的比例混合而成；酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6500U；
(3)将所得酶解液加热至90℃，维持22min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后用孔径为100nm的膜进行过滤，得到滤液；所述冷藏沉降处理为先在10℃的条件下处理1h，再在5℃的条件下处理20h；
(4)将所得滤液进行浓缩，并进行冷却干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。
本实施例制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量为85％，分子量分布小于10000的占88％，游离氨基酸占7％。
对比实施例1
本实施例的其它工艺方法与实施例1一致，不同之处在于：在步骤(5)，将复合蛋白酶替换成单一的木瓜蛋白酶进行酶解；酶解每克木瓜蛋白粉所需木瓜蛋白酶6000U。
将对比实施例1制备得到的木瓜蛋白肽样品进行检测分析，其TCA酸溶性蛋白含量为75％，分子量分布小于10000的占80％，游离氨基酸占4％。
对比实施例2
本实施例的其它工艺方法与实施例1一致，不同之处在于：在步骤(5)，将复合蛋白酶替换成单一的胰蛋白酶(4000U/g)进行酶解；酶解每克木瓜蛋白粉所需胰蛋白酶6000U。
将对比实施例2制备得到的木瓜蛋白肽样品进行检测分析，其TCA酸溶性蛋白含量为79％，分子量分布小于10000的占75％，游离氨基酸占5％。
由对比实施例1及2可知，使用实施例1的复合蛋白酶进行酶解制备得到的木瓜蛋白肽效果优于单一蛋白酶的酶解效果。
本发明研制的木瓜蛋白肽，可以开发为蛋白质补充剂或作为原料用于化妆品、食品添加剂、饮料等产品的生产。本发明制备木瓜蛋白肽的工艺简易，投资少，见效快，回报率高、投入回报周期短，生产制备的木瓜蛋白肽酸溶性蛋白含量、游离氨基酸、分子量分布等质量参数变化小，适宜于工业化生产。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：采用复合蛋白酶对木瓜蛋白粉进行酶解反应，得到所述木瓜蛋白肽；所述复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1-2U：0.5-1U的比例混合而成。
2.根据权利要求1所述的木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：所述制备方法的具体步骤为：
(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：9-12；
(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为50-55℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.2-6.5，酶解的时间为4-5h，得到酶解液；
(3)将所得酶解液加热至85-95℃，维持20-25min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后过滤，得到滤液；
(4)将所得滤液进行浓缩干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。
3.根据权利要求1或2所述的木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6000-7000U。
4.根据权利要求1或2所述的木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：所述制备方法的具体步骤为：
(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：11；
(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为52℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.3，酶解的时间为4.5h，得到酶解液；所述酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6500U；
(3)将所得酶解液加热至90℃，维持22min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后过滤，得到滤液；
(4)将所得滤液进行浓缩干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。
5.根据权利要求2所述的木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：在步骤(3)，所述冷藏沉降处理为先在10-15℃的条件下处理1-2h，再在2-5℃的条件下处理5-20h。
6.根据权利要求2所述的木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：在步骤(3)，所述过滤为用孔径为100-200nm的膜进行过滤。
7.根据权利要求2所述的木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：在步骤(4)，所述的干燥方法为喷雾干燥或冷冻干燥。
CN201710674867.9A 2017-08-09 2017-08-09 一种木瓜蛋白肽的制备方法 Pending CN107475336A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710674867.9A CN107475336A (zh) 2017-08-09 2017-08-09 一种木瓜蛋白肽的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710674867.9A CN107475336A (zh) 2017-08-09 2017-08-09 一种木瓜蛋白肽的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107475336A true CN107475336A (zh) 2017-12-15

Family

ID=60598950

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710674867.9A Pending CN107475336A (zh) 2017-08-09 2017-08-09 一种木瓜蛋白肽的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107475336A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110292102A (zh) * 2019-08-12 2019-10-01 重庆骄王天然产物股份有限公司 一种蛋白粉及其制备方法
CN113136412A (zh) * 2021-04-22 2021-07-20 浙江珂瑞康生物医疗科技有限公司 用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002074098A1 (en) * 2001-03-21 2002-09-26 Dsm Ip Assets B.V. Cheese-making process
CN101473936A (zh) * 2009-01-16 2009-07-08 伍曾利 番木瓜提取物的制备方法
CN102204620A (zh) * 2011-05-10 2011-10-05 华南理工大学 无苦味蛋白肽的制备方法
CN102940093A (zh) * 2012-11-25 2013-02-27 哈尔滨派特纳生物科技开发有限公司 木瓜蛋白糖霜粉
CN106072095A (zh) * 2016-05-30 2016-11-09 张吉越 沙棘活性多肽的制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002074098A1 (en) * 2001-03-21 2002-09-26 Dsm Ip Assets B.V. Cheese-making process
CN101473936A (zh) * 2009-01-16 2009-07-08 伍曾利 番木瓜提取物的制备方法
CN102204620A (zh) * 2011-05-10 2011-10-05 华南理工大学 无苦味蛋白肽的制备方法
CN102940093A (zh) * 2012-11-25 2013-02-27 哈尔滨派特纳生物科技开发有限公司 木瓜蛋白糖霜粉
CN106072095A (zh) * 2016-05-30 2016-11-09 张吉越 沙棘活性多肽的制备方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110292102A (zh) * 2019-08-12 2019-10-01 重庆骄王天然产物股份有限公司 一种蛋白粉及其制备方法
CN113136412A (zh) * 2021-04-22 2021-07-20 浙江珂瑞康生物医疗科技有限公司 用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101897458B (zh) 一种海参蓝莓速溶颗粒及其加工方法
CN1428431A (zh) 酶法制取大豆多肽的方法
CN104886425A (zh) 一种沙果果酱粉的制作方法
CN103820297B (zh) 一种猕猴桃保健果醋及其制备方法
CN104997013A (zh) 一种醋栗营养粉的制备方法
CN105039089A (zh) 一种木瓜肽酒及其制备方法
CN102994598A (zh) 丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽及其制备方法
CN103989152B (zh) 一种金针菇水解液的制备方法
CN110122708A (zh) 一种全桑饮料的制备方法
CN107788491A (zh) 一种鱼肉风味液体调味料及其制备方法和用途
CN107475336A (zh) 一种木瓜蛋白肽的制备方法
CN1657569A (zh) 黑莓果固态天然食用色素的制备方法
CN1683497A (zh) 一种火棘果酒饮料及其制备方法
CN107156747A (zh) 一种虫草核桃肽营养粉及其制备方法
CN101250470B (zh) 一种草莓白兰地的制备方法
CN112535213A (zh) 一种骆驼奶蛋白粉配方及其制备工艺
CN101248864B (zh) 草莓固态天然色素的制备方法
CN109370847A (zh) 桑葚养生酒及其制备方法
CN1080818A (zh) 果蕈酱及其制作方法
CN107365347A (zh) 一种西兰花蛋白肽的提取方法
CN105724990B (zh) 蓝莓饮品及其制备方法
CN109628262A (zh) 一种火龙果酒的加工方法
CN108410634A (zh) 桑果红酒的制备方法
CN105586203A (zh) 金银花果酒及其制备方法
CN105876726B (zh) 一种天然虾味海鲜膏及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20171215

RJ01 Rejection of invention patent application after publication