CN107365347A - 一种西兰花蛋白肽的提取方法 - Google Patents

一种西兰花蛋白肽的提取方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107365347A
CN107365347A CN201710588682.6A CN201710588682A CN107365347A CN 107365347 A CN107365347 A CN 107365347A CN 201710588682 A CN201710588682 A CN 201710588682A CN 107365347 A CN107365347 A CN 107365347A
Authority
CN
China
Prior art keywords
broccoli
protein peptides
extracting method
protein
broccoli protein
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710588682.6A
Other languages
English (en)
Inventor
郝之奎
陈大华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Taizhou Keyuan Bio Technology Co Ltd
Original Assignee
Taizhou Keyuan Bio Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Taizhou Keyuan Bio Technology Co Ltd filed Critical Taizhou Keyuan Bio Technology Co Ltd
Priority to CN201710588682.6A priority Critical patent/CN107365347A/zh
Publication of CN107365347A publication Critical patent/CN107365347A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/30—Extraction; Separation; Purification by precipitation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/145—Extraction; Separation; Purification by extraction or solubilisation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明公开了一种西兰花蛋白肽的提取方法，本方法以西兰花的花球、茎或叶为直接原料，经过加热、酸解、分离、酶解、灭酶活、再分离及浓缩干燥等步骤制备得到西兰花蛋白肽粉。本发明制备西兰花蛋白肽的工艺简易，投资少，见效快，回报率高、投入回报周期短，生产制备的西兰花蛋白肽酸溶性蛋白含量、游离氨基酸、分子量分布等质量参数变化小，适宜于工业化生产。

Description

一种西兰花蛋白肽的提取方法
技术领域
本发明涉及生物提取技术领域，尤其涉及一种西兰花蛋白肽的提取方法。
背景技术
肽是蛋白质的水解产物，即蛋白质的结构片段。两个氨基酸通过肽键连接成二肽，三个氨基酸通过肽键连接成三肽，而多个氨基酸通过肽键连接成多肽。一般把2-10个氨基酸残基组成的肽，称之为寡肽。因为肽的分子相对蛋白质的分子小得多，但生物活性非常高，少量的肽就能发挥重要的作用，所以被称为活性肽。活性肽中不同的氨基酸排序，决定了它们有不同的功能，它们通过多种代谢和生理调节，可以起到促进免疫、抗自由基、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等作用。
西兰花(Brassica oleracea var.italia)为十字花科芸苔属甘蓝变种，原产意大利，含有丰富的生物活性物质和营养物质，被誉为“蔬菜皇冠”。西兰花中的营养成分不仅含量高，而且十分全面，主要包括蛋白质、碳水化合物、脂肪、矿物质、维生素C和胡萝卜素等。据分析，每100g新鲜西兰花的花球花球、茎或叶中，含蛋白质3.5g—4.5g，是菜花的3倍，番茄的4倍。
鉴于西兰花中高的蛋白质含量，以此为原料生产西兰花蛋白肽可以为西兰花的高附加值利用提供新途径。
发明内容
本发明的目的在于：针对上述存在的问题，提供一种西兰花蛋白肽的提取方法。
为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
一种西兰花蛋白肽的提取方法，包括如下步骤：
(1)选取西兰花的花球、茎或叶为原料，榨取成西兰花汁液；
(2)将所述西兰花汁液加热至65-90℃，充分搅拌0.5-1h后进行离心分离，收集沉淀；
(3)将分离得到的上清液用乙酸调pH至4.5-5.5，加热至80-90℃，静置5-10min后，再次离心分离，收集沉淀，将两次收集的沉淀合并后，得到西兰花浓缩蛋白；
(4)往西兰花浓缩蛋白中分别添加水搅拌均匀后，然后再添加无水亚硫酸钠及EDTA，混合均匀后，得到蛋白浆液；
(5)在步骤(4)所得蛋白浆液中加入复合蛋白酶进行酶解，控制溶液的温度在55-60℃，然后用NaOH溶液调节所得溶液的pH至6.0-6.5，酶解时间为3-4h；
(6)在酶解反应结束后，对酶解液进行冷藏沉降处理，过滤，收集滤液，将所得滤液进行浓缩干燥后得到所述西兰花蛋白肽。
较佳地，在步骤(4)，所述西兰花浓缩蛋白、水、无水亚硫酸钠及EDTA的质量比为1：10-12：0.01-0.05：0.01-0.05。
较佳地，在步骤(5)，所述复合蛋白酶由质量比为1：0.5-1的木瓜蛋白酶及胰蛋白酶混合而成。
较佳地，在步骤(6)，所述冷藏沉降处理的过程为先在10-15℃的条件下处理1-2h，再在2-5℃的条件下处理5-20h。
较佳地，在步骤(6)，所述过滤为用孔径为100-500nm的膜进行过滤。
较佳地，在步骤(6)，还包括将所述滤液进行酶灭活处理的步骤，所述酶灭活处理的温度为85-95℃，时间为10-15min，酶灭活后冷却至室温，再进行浓缩干燥处理。
较佳地，在步骤(6)，所述的干燥方法为喷雾干燥或冷冻干燥。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
(1)本发明西兰花蛋白肽的制备以西兰花的花球、茎或叶为原料，以人类可食用的蔬菜作物为原料，而不是购买中间产物进行制备，其产品安全性有保障，降低了生产成本，具有显著的经济和生态效益；
(2)本发明制备得到的西兰花蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量超过92％，分子量分布小于10000的占90％以上，游离氨基酸占6-8％。
(3)本发明制备西兰花蛋白肽的工艺简易，投资少，见效快，回报率高、投入回报周期短，生产制备的西兰花蛋白肽酸溶性蛋白含量、游离氨基酸、分子量分布等质量参数变化小，适宜于工业化生产。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下举出优选实施例，对本发明进一步详细说明。然而，需要说明的是，说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本发明的一个或多个方面有一个透彻的理解，即便没有这些特定的细节也可以实现本发明的这些方面。
实施例1
一种西兰花蛋白肽的提取方法，由以下步骤组成：
(1)选取西兰花的花球、茎或叶为原料，榨取成西兰花汁液；
(2)将所述西兰花汁液加热至90℃，充分搅拌0.5h后进行离心分离，收集沉淀；
(3)将分离得到的上清液用乙酸调pH至4.5，加热至90℃，静置5min后，再次离心分离，收集沉淀，将两次收集的沉淀合并后，得到西兰花浓缩蛋白；
(4)往西兰花浓缩蛋白中分别添加水搅拌均匀后，然后再添加无水亚硫酸钠及EDTA，混合均匀后，得到蛋白浆液；所述西兰花浓缩蛋白、水、无水亚硫酸钠及EDTA的质量比为1：10：0.05：0.01；
(5)在步骤(4)所得蛋白浆液中加入复合蛋白酶进行酶解，控制溶液的温度在55℃，然后用NaOH溶液调节所得溶液的pH至6.5，酶解时间为3h；复合蛋白酶由质量比为1:1的木瓜蛋白酶(80万U/g)及胰蛋白酶(4000U/g)混合而成；
(6)在酶解反应结束后，对酶解液进行冷藏沉降处理，用孔径为100nm的膜进行过滤，收集滤液，将所得滤液进行酶灭活处理，酶灭活处理的温度为95℃，时间为10min，酶灭活后冷却至室温，再进行浓缩干燥处理，浓缩干燥后得到所述西兰花蛋白肽。
较佳地，所述冷藏沉降处理的过程为先在15℃的条件下处理1h，再在2℃的条件下处理20h；干燥方法为喷雾干燥。
将实施例1制备得到的西兰花蛋白肽样品进行检测分析，各项指标如表1所示。
表1
实施例2
一种西兰花蛋白肽的提取方法，由以下步骤组成：
(1)选取西兰花的花球、茎或叶为原料，榨取成西兰花汁液；
(2)将所述西兰花汁液加热至65℃，充分搅拌1h后进行离心分离，收集沉淀；
(3)将分离得到的上清液用乙酸调pH至5.5，加热至80℃，静置10min后，再次离心分离，收集沉淀，将两次收集的沉淀合并后，得到西兰花浓缩蛋白；
(4)往西兰花浓缩蛋白中分别添加水搅拌均匀后，然后再添加无水亚硫酸钠及EDTA，混合均匀后，得到蛋白浆液；所述西兰花浓缩蛋白、水、无水亚硫酸钠及EDTA的质量比为1：12：0.01：0.05；
(5)在步骤(4)所得蛋白浆液中加入复合蛋白酶进行酶解，控制溶液的温度在55℃，然后用NaOH溶液调节所得溶液的pH至6.5，酶解时间为3h；复合蛋白酶由质量比为1:1的木瓜蛋白酶(80万U/g)及胰蛋白酶(4000U/g)混合而成；
(6)在酶解反应结束后，对酶解液进行冷藏沉降处理，用孔径为100nm的膜进行过滤，收集滤液，将所得滤液进行酶灭活处理，酶灭活处理的温度为95℃，时间为10min，酶灭活后冷却至室温，再进行浓缩干燥处理，浓缩干燥后得到所述西兰花蛋白肽。
较佳地，所述冷藏沉降处理的过程为先在15℃的条件下处理1h，再在2℃的条件下处理20h；干燥方法为冷冻干燥。
将实施例2制备得到的西兰花蛋白肽样品进行检测分析，各项指标如表2所示。
表2
实施例3
一种西兰花蛋白肽的提取方法，由以下步骤组成：
(1)选取西兰花的花球、茎或叶为原料，榨取成西兰花汁液；
(2)将所述西兰花汁液加热至65℃，充分搅拌1h后进行离心分离，收集沉淀；
(3)将分离得到的上清液用乙酸调pH至5.5，加热至80℃，静置10min后，再次离心分离，收集沉淀，将两次收集的沉淀合并后，得到西兰花浓缩蛋白；
(4)往西兰花浓缩蛋白中分别添加水搅拌均匀后，然后再添加无水亚硫酸钠及EDTA，混合均匀后，得到蛋白浆液；所述西兰花浓缩蛋白、水、无水亚硫酸钠及EDTA的质量比为1：10：0.03：0.04；
(5)在步骤(4)所得蛋白浆液中加入复合蛋白酶进行酶解，控制溶液的温度在60℃，然后用NaOH溶液调节所得溶液的pH至6.0，酶解时间为4h；复合蛋白酶由质量比为1:0.5的木瓜蛋白酶(80万U/g)及胰蛋白酶(4000U/g)混合而成；
(6)在酶解反应结束后，对酶解液进行冷藏沉降处理，用孔径为500nm的膜进行过滤，收集滤液，将所得滤液进行酶灭活处理，酶灭活处理的温度为85℃，时间为15min，酶灭活后冷却至室温，再进行浓缩干燥处理，浓缩干燥后得到所述西兰花蛋白肽。
较佳地，所述冷藏沉降处理的过程为先在10℃的条件下处理2h，再在5℃的条件下处理5h；干燥方法为喷雾干燥。
将实施例3制备得到的西兰花蛋白肽样品进行检测分析，各项指标如表3所示。
表3
对比实施例1
本实施例的其它工艺方法与实施例1一致，不同之处在于：在步骤(5)，将复合蛋白酶替换成单一的木瓜蛋白酶(80万U/g)进行酶解。
将对比实施例1制备得到的西兰花蛋白肽样品进行检测分析，其TCA酸溶性蛋白含量为86％，分子量分布小于10000的占90％以上，游离氨基酸占7％。
对比实施例2
本实施例的其它工艺方法与实施例1一致，不同之处在于：在步骤(5)，将复合蛋白酶替换成单一的胰蛋白酶(4000U/g)进行酶解。
将对比实施例2制备得到的西兰花蛋白肽样品进行检测分析，其TCA酸溶性蛋白含量为79％，分子量分布小于10000的占90％以上，游离氨基酸占5％。
由对比实施例1及2可知，使用实施例1的复合蛋白酶进行酶解制备得到的西兰花蛋白肽效果优于单一蛋白酶的酶解效果。
对比实施例3
本实施例的其它工艺方法与实施例1一致，不同之处在于：直接以购买得到的西兰花蛋白为原料制备西兰花蛋白肽。
一种西兰花蛋白肽的提取方法，由以下步骤组成：
(1)称取西兰花蛋白(含蛋白质30％)，往其中添加水搅拌均匀后，再添加无水亚硫酸钠及EDTA，混合均匀后，得到蛋白浆液；所述西兰花浓缩蛋白、水、无水亚硫酸钠及EDTA的质量比为1：10：0.05：0.01；
(2)在所得蛋白浆液中加入复合蛋白酶进行酶解，控制溶液的温度在55℃，然后用NaOH溶液调节所得溶液的pH至6.5，酶解时间为3h；复合蛋白酶由质量比为1:1的木瓜蛋白酶(80万U/g)及胰蛋白酶(4000U/g)混合而成；
(3)在酶解反应结束后，对酶解液进行冷藏沉降处理，用孔径为100nm的膜进行过滤，收集滤液，将所得滤液进行酶灭活处理，酶灭活处理的温度为95℃，时间为10min，酶灭活后冷却至室温，再进行浓缩干燥处理，浓缩干燥后得到所述西兰花蛋白肽。
将对比实施例3制备得到的西兰花蛋白肽样品进行检测分析，其TCA酸溶性蛋白含量为91％，分子量分布小于10000的占90％以上，游离氨基酸占6％。可知，实施例1制备得到的西兰花蛋白肽效果还略优于以对比实施例3的效果。
本发明研制的西兰花蛋白肽，可以开发为蛋白质补充剂或作为原料用于化妆品、食品添加剂、饮料等产品的生产。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种西兰花蛋白肽的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)选取西兰花的花球、茎或叶为原料，榨取成西兰花汁液；
(2)将所述西兰花汁液加热至65-90℃，充分搅拌0.5-1h后进行离心分离，收集沉淀；
(3)将分离得到的上清液用乙酸调pH至4.5-5.5，加热至80-90℃，静置5-10min后，再次离心分离，收集沉淀，将两次收集的沉淀合并后，得到西兰花浓缩蛋白；
(4)往西兰花浓缩蛋白中分别添加水搅拌均匀后，然后再添加无水亚硫酸钠及EDTA，混合均匀后，得到蛋白浆液；
(5)在步骤(4)所得蛋白浆液中加入复合蛋白酶进行酶解，控制溶液的温度在55-60℃，然后用NaOH溶液调节所得溶液的pH至6.0-6.5，酶解时间为3-4h；
(6)在酶解反应结束后，对酶解液进行冷藏沉降处理，过滤，收集滤液，将所得滤液进行浓缩干燥后得到所述西兰花蛋白肽。
2.根据权利要求1所述的一种西兰花蛋白肽的提取方法，其特征在于：在步骤(4)，所述西兰花浓缩蛋白、水、无水亚硫酸钠及EDTA的质量比为1：10-12：0.01-0.05：0.01-0.05。
3.根据权利要求1所述的一种西兰花蛋白肽的提取方法，其特征在于：在步骤(5)，所述复合蛋白酶由质量比为1：0.5-1的木瓜蛋白酶及胰蛋白酶混合而成。
4.根据权利要求3所述的一种西兰花蛋白肽的提取方法，其特征在于：在步骤(6)，所述冷藏沉降处理的过程为先在10-15℃的条件下处理1-2h，再在2-5℃的条件下处理5-20h。
5.根据权利要求4所述的一种西兰花蛋白肽的提取方法，其特征在于：在步骤(6)，所述过滤为用孔径为100-500nm的膜进行过滤。
6.根据权利要求1所述的一种西兰花蛋白肽的提取方法，其特征在于：在步骤(6)，还包括将所述滤液进行酶灭活处理的步骤，所述酶灭活处理的温度为85-95℃，时间为10-15min，酶灭活后冷却至室温，再进行浓缩干燥处理。
7.根据权利要求6所述的一种西兰花蛋白肽的提取方法，其特征在于：在步骤(6)，所述的干燥方法为喷雾干燥或冷冻干燥。
CN201710588682.6A 2017-07-19 2017-07-19 一种西兰花蛋白肽的提取方法 Pending CN107365347A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710588682.6A CN107365347A (zh) 2017-07-19 2017-07-19 一种西兰花蛋白肽的提取方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710588682.6A CN107365347A (zh) 2017-07-19 2017-07-19 一种西兰花蛋白肽的提取方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107365347A true CN107365347A (zh) 2017-11-21

Family

ID=60306892

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710588682.6A Pending CN107365347A (zh) 2017-07-19 2017-07-19 一种西兰花蛋白肽的提取方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107365347A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109400687A (zh) * 2018-07-25 2019-03-01 宁波大学 一种西兰花蛋白来源的ace抑制肽及其制备方法和应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101993480A (zh) * 2009-08-12 2011-03-30 中国农业科学院饲料研究所 一种西兰花叶蛋白及其制备方法
US20130034530A1 (en) * 2011-04-29 2013-02-07 David R. Fantz Dietary Supplement Cognitive Support System
CN106191183A (zh) * 2015-05-04 2016-12-07 浙江海正药业股份有限公司 西兰花蛋白肽的制备方法及其应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101993480A (zh) * 2009-08-12 2011-03-30 中国农业科学院饲料研究所 一种西兰花叶蛋白及其制备方法
US20130034530A1 (en) * 2011-04-29 2013-02-07 David R. Fantz Dietary Supplement Cognitive Support System
CN106191183A (zh) * 2015-05-04 2016-12-07 浙江海正药业股份有限公司 西兰花蛋白肽的制备方法及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
党亚丽等: "西兰花茎叶多肽的酶法提取及其增强免疫力功能研究", 《食品工业科技》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109400687A (zh) * 2018-07-25 2019-03-01 宁波大学 一种西兰花蛋白来源的ace抑制肽及其制备方法和应用
CN109400687B (zh) * 2018-07-25 2021-06-15 宁波大学 一种西兰花蛋白来源的ace抑制肽及其制备方法和应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104172353B (zh) 一种大鲵多肽饮品及其制备方法
CN101608145A (zh) 以植物水解提取物和水果提取物为原料生产烟用香料的方法
CN101897458A (zh) 一种海参蓝莓速溶颗粒及其加工方法
CN101637201B (zh) 一种猕猴桃汁奶粉
CN102994598B (zh) 丙氨酸和亮氨酸含量高的弱苦味玉米低聚肽及其制备方法
CN101824455B (zh) 一种大豆蛋白低聚肽及其制备方法和用途
CN103820297B (zh) 一种猕猴桃保健果醋及其制备方法
CN101514355A (zh) 连续酶解与超滤分离偶联制备麦胚蛋白ace抑制肽的方法
CN104961823A (zh) 一种适用于大规模制备食品级卵白蛋白的提纯方法
CN104886425A (zh) 一种沙果果酱粉的制作方法
CN107532191A (zh) 西兰花蛋白肽的制备方法、制备得到的西兰花蛋白肽及其应用
CN109699748A (zh) 一种澳洲坚果饮料及其制备方法
CN112869107A (zh) 一种利用高温花生饼粕制备酱香呈鲜基料的方法
CN103082081A (zh) 一种酵母蛋白及其制法,以该蛋白为原料的食品及其制法
CN107307175A (zh) 一种综合利用油莎豆粕的方法
CN106173186A (zh) 一种高值化综合利用小麦胚芽制备多肽的新方法
CN107365347A (zh) 一种西兰花蛋白肽的提取方法
CN109007764A (zh) 酵母抽提物酱油及其制备方法
CN107475336A (zh) 一种木瓜蛋白肽的制备方法
CN105755080A (zh) 一种印奇果多肽的制造方法
CN101797066A (zh) 一种五味子复合饮料的生产方法
CN107927319B (zh) 一种利用花生固有蛋白酶水解花生蛋白制备花生多肽液的方法
CN110923284A (zh) 一种核桃坚果香风味肽及其制备方法
US6479091B1 (en) Beverage containing hybrid Rumex acetosa L. and methods for preparing same
CN105876726B (zh) 一种天然虾味海鲜膏及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20171121