发明内容
为了解决上述问题,本发明提供的人参定性定量中药饮片的质量标准与制造工艺,增加药屑杂质、重金属及有害元素、黄曲霉毒素B1、二氧化硫残留量,并将含量测定中的人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量的标准限度从0.27%提高至0.30%、人参皂苷Rb1的标准限度从0.18%提高至0.20%。并通过特定的工序生产出片厚0.3~1mm的人参中药饮片,确保中药饮片符合高标准高品质的要求。
本发明提供的人参定性定量中药饮片的制造工艺,包括以下步骤:
A10、净制:清除混在人参中的杂质及霉变品等,或将人参按大小进行分档,以便达到洁净或进一步加工处理。注意:人参经净选后不得直接接触地面。
A20、润药:净制后的人参放入洗润池中,真空负压状态下润药0.5-2h,至人参彻底润透,折断面无干心。润药参数:温度55-60℃,压力-0.05MPa,喷淋时间5s,喷淋延时100s。注意:人参需润透,折断面无干心,人参内外软硬适宜。
A30、切制:片厚0.3~1mm,按全自动高速切片机操作规程操作,调好刀距,将人参进行试切,用游标卡尺检测,调整好切制厚度,符合要求后再正式切药。
A40、干燥:采用热风循环烘箱进行干燥,将人参铺于烘箱架子上,摊铺厚度均匀,厚度在3cm以下。打开开关,开启加热开关、风机,在温度55±2℃进行干燥,在温度达到设定温度后干燥6-8h,干燥完毕,关闭加热开关,继续吹风,待箱内温度降下至35~40℃,关闭风机。干燥后岗位人员需填写中间产品请检单,交质量部由QA取样进行水分检查。
A50、包装:根据本品包装规格要求进行包装。包装前需对包装间进行检查,确认包装生产线的清场已经完成,并核对包装材料是否符合要求。内包装:在设备上调整好需要印制的生产日期、批号,QA监控,称取规定重量的人参放入料斗中,用封口机封口,要求做到封口严密、平整、美观。外包装:在设备上调整好需印制的生产日期及批号,QA监控,在外包装盒子上打印批号、生产日期,打印过程中需注意批号及生产日期是否清晰。将内包装完成后的饮片及检验报告书放入外包盒中,4袋/盒。将每10盒饮片,套入1个热缩膜中,进行热收缩;热收缩后装入大纸箱中,240盒/箱。操作过程中,QA随时抽检。包装后岗位人员需填写成品请检单,交质量部由QA取样进行产品检查。
A60、成品:包装后岗位人员需填写成品请检单,交质量部由QA取样进行产品检查。
增加药屑杂质、重金属及有害元素、黄曲霉毒素B1、二氧化硫残留量,并将含量测定中的人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量的标准限度从0.27%提高至0.30%、人参皂苷Rb1的标准限度从0.18%提高至0.20%。修订后的人参定性定量中药饮片的质量标准如下所示:
人参饮片
拼音名称:Renshen Yinpian
包装:纯铝复合膜包装。
【性状】取本品适量,在日光下观察,本品呈圆形或类圆形薄片。外表皮灰黄色。切面淡黄白色或类白色,显粉性,形成层环纹棕黄色,皮部有黄棕色的点状树脂道及放射性裂隙。体轻,质脆。嗅之,香气特异,尝之,味微苦、甘。
鉴别
显微鉴别
仪器及用具:中药粉碎机、药典筛、显微镜、酒精灯
试剂及试液:水合氯醛试液、甘油醋酸试液、甘油乙醇试液、稀甘油(试剂均使用分析纯,实验用水为纯化水)
测定及结果判定:取本品粉末(过四号筛)适量,挑取少许置载玻片上,滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他试液1~2滴,盖上盖玻片。必要时滴加水合氯醛试液后,在酒精灯上加热透化,并滴加甘油乙醇试液或稀甘油,盖上盖玻片,于显微镜下观察:粉末淡黄白色。树脂道碎片易见,含黄色块状分泌物。草酸钙簇晶直径20~68μm,棱角锐尖。木栓细胞表面观类方形或多角形,壁细波状弯曲。网纹导管和梯纹导管直径10~56μm。淀粉粒甚多,单粒类球形、半圆形或不规则多角形,直径4~20μm,脐点点状或裂缝状;复粒由2~6分粒组成。
薄层鉴别
仪器及用具:中药粉碎机、分析天平、药典筛、超声波清洗机、恒温水浴锅、点样器、展开缸、薄层板、三用紫外仪
试剂及试液:三氯甲烷、正丁醇、氨水、乙酸乙酯、碳酸氢钠、甲醇、环已烷、二氯甲烷、甲酸、稀盐酸(试剂均使用分析纯,实验用水为纯化水)
对照药材及对照品:当归对照药材、阿魏酸对照品、藁本内酯对照品
测定及结果判定:取本品粉末1g,加三氯甲烷40ml,加热回流1小时,弃去三氯甲烷液,药渣挥干溶剂,加水0.5ml搅拌湿润,加水饱和正丁醇10ml,超声处理30分钟,吸取上清液加3倍量氨试液,摇匀,放置分层,取上层液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取人参对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rf对照品及人参皂苷Rg1对照品,加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述三种溶液各1~2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上,分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。喷以硫酸溶液(1→10),在105℃加热至斑点显色清晰。结果判定:供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;置紫外光灯(365nm)下检视,显相同的荧光斑点。与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
药屑、杂质
仪器及用具:中药粉碎机、分析天平、药典筛
照杂质检查法(通则2301)测定。
取供试品约100g(精确到0.1g),摊开,拣出杂质,用6号筛筛出药屑,合并,称重,计算其在供试品中的量(%)。
结果判定:本品杂质不得过3%。
水分
仪器及用具:中药粉碎机、分析天平、药典筛、电热恒温鼓风干燥箱、称量瓶
照水分测定法(通则0832第二法)测定。
取供试品2~5g,平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中,厚度不超过5mm,疏松供试品不超过10mm,精密称定,开启瓶盖在100~105℃干燥5小时,将瓶盖盖好,移置干燥器中,放冷30分钟,精密称定,再在上述温度干燥1小时,放冷,称重,至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量,计算供试品中含水量(%)。
结果判定:本品水分不得过12.0%。
总灰分
仪器及用具:中药粉碎机、分析天平、药典筛、马弗炉、电炉、坩埚
照灰分测定法(通则2302)测定。
取供试品2~3g(如须测定酸不溶性灰分,可取供试品3~5g),置炽灼至恒重的坩埚中,称定重量(准确至0.01g),缓缓炽热,注意避免燃烧,至完全炭化时,逐渐升高温度至500~600℃,使完全灰化并至恒重。根据残渣重量,计算供试品中总灰分的含量(%)。
结果判定:本品总灰分不得过5.0%。
重金属及有害元素
仪器及用具:中药粉碎机、分析天平、药典筛、微波消解仪、原子吸收分光光度计
试剂及试液:硝酸、磷酸二氢铵、硝酸镁、碘化钾、抗坏血酸、盐酸、硼氢化钠、氢氧化钠、硫酸、高锰酸钾、盐酸羟胺(其中硝酸、磷酸二氢铵、硝酸镁为优级纯,其他试剂均使用分析纯,实验用水为纯化水)
标准样品:铅单元素标准样品、镉单元素标准样品、砷单元素标准样品、汞单元素标准样品、铜单元素标准样品
方法:照铅、镉、砷、汞、铜测定法(通则2321)测定
铅的测定(石墨炉法)
测定条件参考条件:波长283.3nm,干燥温度100~120℃,持续20秒;灰化温度400~750℃,持续20~25秒;原子化温度1700~~2100℃,持续4~5秒。
铅标准贮备液的制备精密量取铅单元素标准溶液适量,用2%硝酸溶液稀释,制成每1ml含铅(Pb)1μg的溶液,即得(0~5℃贮存)。
标准曲线的制备分别精密量取铅标准贮备液适量,用2%硝酸溶液制成每1ml分别含铅0ng、5ng、20ng、40ng、60ng、80ng的溶液。分别精密量取1ml,精密加含1%磷酸二 氢铵和0.2%硝酸镁的溶液0.5ml,混匀,精密吸取20μl注入石墨炉原子化器,测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
供试品溶液的制备A法取供试品粗粉0.5g,精密称定,置聚四氯乙烯消解罐内,加硝酸3~5ml,混匀,浸泡过夜,盖好内盖,旋紧外套,置适宜的微波消解炉内,进行消解(按仪器规定的消解程序操作)。消解完全后,取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸气挥尽,并继续缓缓浓缩至2~3ml,放冷,用水转入25ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得。同法同时制备试剂空白溶液。
测定法精密量取空白溶液与供试品溶液各1ml,精密加含1%磷酸二氢铵和0.2%硝酸镁的溶液0.5ml,混匀,精密吸取10~20μl,照标准曲线的制备项下方法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中铅(Pb)的含量,计算,即得。
镉的测定(石墨炉法)
测定条件参考条件:波长228.8nm,干燥温度100~120℃,持续20秒;灰化温度300~500℃,持续20~25秒;原子化温度1500~1900℃,持续4~5秒。
镉标准贮备液的制备 精密量取镉单元素标准溶液适量,用2%硝酸溶液稀释,制成每1ml含镉(Cd)1μg的溶液,即得(0~5℃贮存)。
标准曲线的制备分别精密量取镉标准贮备液适量,用2%硝酸溶液稀释制成每1ml分别含镉0ng、0.8ng、2.0ng、4.0ng、6.0ng、8.0ng的溶液。分别精密吸取10μl,注入石墨炉原子化器,测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
供试品溶液的制备同铅测定项下供试品溶液的制备。
测定法 精密吸取空白溶液与供试品溶液各10~20μl,照标准曲线的制备项下方法测定吸光度(若供试品有干扰,可分别精密量取标准溶液、空白溶液和供试品溶液各1ml,精密加含1%磷酸二氢铵和0.2%硝酸镁的溶液0.5ml,混匀,依法测定),从标准曲线上读出供试品溶液中镉(Cd)的含量,计算,即得。
砷的测定(氢化物法)
测定条件 采用适宜的氢化物发生装置,以含硼氢化钠和0.3%氢氧化钠溶液(临用前配制)作为还原剂,盐酸溶液(1→100)为载液,氮气为载气,检测波长为193.7nm。
砷标准贮备液的制备精密量取砷单元素标准溶液适量,用2%硝酸溶液稀释,制成每1ml含砷(As)1μg的溶液,即得(0~5℃贮存)。
标准曲线的制备 分别精密量取砷标准贮备液适量,用2%硝酸溶液稀释制成每1ml分别含砷0ng、5ng、10ng、20ng、30ng、40ng的溶液。分别精密量取10ml,置25ml量瓶中,加25%碘化钾溶液(临用前配制)1ml,摇匀,加10%抗坏血酸溶液(临用前配制)1ml,摇匀,用盐酸溶液(20→100)稀释至刻度,摇匀,密塞,置80℃水浴中加热3分钟,取出,放冷。取适量,吸入氢化物发生装置,测定吸收值,以峰面积(或吸光度)为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
供试品溶液的制备同铅测定项下供试品溶液的制备中的A法制备。
测定法精密吸取空白溶液与供试品溶液各10ml,照标准曲线的制备项下,自“加25%碘化钾溶液(临用前配制)1ml”起,依法测定。从标准曲线上读出供试品溶液中砷(As)的含量,计算,即得。
汞的测定(冷蒸气吸收法)
测定条件 采用适宜的氢化物发生装置,以含0.5%硼氢化钠和0.1%氢氧化钠的溶液(临用前配制)作为还原剂,盐酸溶液(1→100)为载液,氮气为载气,检测波长为253.6nm。
汞标准贮备液的制备 精密量取汞单元素标准溶液适量,用2%硝酸溶液稀释,制成每1ml含汞(Hg)1μg的溶液,即得(0~5℃贮存)。
标准曲线的制备 分别精密量取汞标准贮备液0ml、0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml,置50ml量瓶中,加20%硫酸溶液10ml、5%高锰酸钾溶液0.5ml,摇匀,滴加5%盐酸羟胺溶液至紫红色恰消失,用水稀释至刻度,摇匀。取适量,吸入氢化物发生装置,测定吸收值,以峰面积(或吸光度)为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
供试品溶液的制备A法取供试品粗粉0.5g,精密称定,置聚四氟乙烯消解罐内,加硝酸3~5ml,混匀,浸泡过夜,盖好内盖,旋紧外套,置适宜的微波消解炉内进行消解(按仪器规定的消解程序操作)。消解完全后,取消解内罐置电热板上,于120℃缓缓加热至红棕色蒸气挥尽,并继续浓缩至2~3ml,放冷,加20%硫酸溶液2ml、5%高锰酸钾溶液0.5ml,摇匀,滴加5%盐酸羟胺溶液至紫红色恰消失,转入10ml量瓶中,用水洗涤容器,洗液合并于量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,必要时离心,取上清液,即得。同法同时制备试剂空白溶液。
测定法 精密吸取空白溶液与供试品溶液适量,照标准曲线制备项下的方法测定从标准曲线上读出供试品溶液中汞(Hg)的含量,计算,即得。
铜的测定(火焰法)
测定条件 检测波长为324.7nm,采用空气-乙炔火焰,必要时进行背景校正。
铜标准贮备液的制备精密量取铜单元素标准溶液适量,用2%硝酸溶液稀释,制成每1ml含铜(Cu)10μg的溶液,即得(0~5℃贮存)。
标准曲线的制备 分别精密量取铜标准贮备液适量,用2%硝酸溶液制成每1ml分别含铜0μg、0.05μg、0.2μg、0.4μg、0.6μg、0.8μg的溶液。依次喷入火焰,测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
供试品溶液的制备 同铅测定项下供试品溶液的制备。
测定法精密吸取空白溶液与供试品溶液适量,照标准曲线的制备项下的方法测定。从标准曲线上读出供试品溶液中铜(Cu)的含量,计算,即得。
结果判定:本品含铅不得过8mg/kg、镉不得过0.8mg/kg、砷不得过4mg/kg、汞不得过0.Smg/kg、铜不得过20mg/kg。
有机氯类农药残留量
仪器及用具:中药粉碎机、分析天平、药典筛、旋转蒸发仪、超声波清洗机、离心机、气相色谱仪
试剂及试液:异辛烷、乙腈、无水硫酸镁、氯化钠、无水硫酸钠、环已烷、乙酸乙酯、弗罗里硅土固相萃取小柱、正已烷、丙酮(其中异辛烷、乙腈为色谱纯,其他试剂均使用分析纯,实验用水为纯化水)
对照品:α-BHC,β-BHC,γ-BHC,δ-BHC、p,p′-DDE,p,p′-DDD,o,p′-DDT,p,p′-DDT、PCNB、六氯苯、七氯、顺式环氧七氯、反式环氧七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、顺式氯丹、反式氯丹、氧化氯丹、a-硫丹、、β-硫丹、硫丹硫酸盐农药对照品
方法:照农药残留量测定法(通则0512第二法)测定。
色谱条件与系统适用性试验:以50%苯基50%二甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm),验证柱:以100%二甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm),63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度240℃,检测器温度300℃,不分流进样,流速为恒压模式(初始流速为1.3ml/min)。程序升温:初始70℃,保持1分钟,每分钟10℃升至180℃,保持5分钟,再以每分钟5℃升至220℃,最后以每分钟100℃升至280℃,保持8分钟。理论板数按α-BHC计算应不低于1×106,两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
对照品贮备溶液的制备 精密称取六六六(BHC)(α-BHC,β-BHC,γ-BHC,δ-BHC)、滴滴涕(DDT)(p,p′-DDE,p,p′-DDD,o,p′-DDT,p,p′-DDT)、五氯硝基苯(PCNB)、六氯苯、七氯、顺式环氧七氯、反式环氧七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、顺式氯丹、反式氯丹、氧化氯丹、a-硫丹、、β-硫丹、硫丹硫酸盐农药对照品适量,用异辛烷分别制成每1ml约含100μg的溶液(其中β-六六六、异狄氏剂、p,p’-滴滴滴、o,p’-滴滴涕每1ml分别含200μg),即得。
混合对照品贮备溶液的制备精密量取上述对照品贮备溶液各1ml,置100ml量瓶中,用异辛烷稀释至刻度,摇匀,即得。
混合对照品溶液的制备 别精密量取上述混合对照品贮备溶液,用异辛烷制成每1L分别含10μg、20μg、50μg、100μg、200μg、500μg的溶液,即得(其中β-六六六、异狄氏剂、p,p’-滴滴滴、o,p’-滴滴涕每1L分别含20μg、40μg、100μg、200μg、400μg、1000μg)。
供试品溶液的制备 取供试品,粉碎成粉末(过三号筛),取约1.5g,精密称定,置于50ml聚苯乙烯具塞离心管中,加入水10ml,混匀,放置2小时,精密加入乙腈15ml,剧烈振摇提取1分钟,再加入预先称好的无水硫酸镁4g与氯化钠1g的混合粉末,再次剧烈振摇1分钟后,离心(4000转/分钟)1分钟。精密吸取上清液10ml,40℃减压浓缩至近干,用环已烷-乙酸乙酯(1∶1)混合溶液分次转移至10ml量瓶中,加环已烷-乙酸乙酯(1∶1)混合溶液至刻度,摇匀,转移至预先加入1g无水硫酸钠的离心管中,振摇,放置1小时,离心(必要时滤过),取上清液5ml过凝胶渗透色谱柱(400mm×25mm,内装BIO-Beads S-X3填料;以环已烷-乙酸乙酯(1∶1)混合溶液为流动相;流速为每分钟5.0ml)净化,收集18~30分钟的洗脱液,于40℃水浴减压浓缩至近干,加少量正已烷替换两次,加正已烷1ml使溶解,转移至弗罗里硅土固相萃取小柱[1000mg/6ml,用正已烷-丙酮(95∶5)混合溶液10ml和正已烷10ml预洗]上,残渣用正已烷洗涤3次,每次1ml,洗液转移至同一 弗罗里硅土固相萃取小柱上,再用正已烷-丙酮(95∶5)混合溶液10ml洗脱,收集全部洗脱液,置氮吹仪上吹至近干,加异辛烷定容至1ml,涡旋使溶解,即得。
测定法分别精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液各1μl,注入气相色谱仪,按外标标准曲线法计算供试品中22种有机氯农药残留量。
结果判定:本品含总六六六(a-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC之和)不得过0.2mg/kg;总滴滴涕(pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT,pp′-DDT之和)不得过0.2mg/kg;五氯硝基苯不得过0.1mg/kg;六氯苯不得过0.1mg/kg;七氯(七氯、环氧七氯之和)不得0.05mg/kg;艾氏剂不得过0.05mg/kg;氯丹(顺式氯丹、反式氯丹、氧化氯丹之和)不得过0.1mg/kg。
黄曲霉毒素B1
仪器及用具:中药粉碎机、分析天平、药典筛、均质瓶、离心机、高效液相色谱仪(配置荧光检测器及衍生化泵、衍生化保温箱)
试剂及试液:甲醇、乙腈、碘、氯化钠、免疫亲合柱(其中乙腈为色谱纯,其他试剂为分析纯,实验用水为纯化水)
对照品:黄曲霉毒素B1对照品
方法:照黄曲霉毒素测定法(通则2351)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)为流动相;采用柱后衍生法检测,碘衍生法:衍生溶液为0.05%的碘溶液(取碘0.5g,加入甲醇100ml使溶解,用水稀释至1000ml制成),衍生化泵流速每分钟0.3ml,衍生化温度70℃以荧光检测器检测,激发波长λex=360nm(或365nm),发射波长λex=450nm。两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
混合对照品溶液的制备精密量取黄曲霉毒素B1对照品溶液(标示浓度为1.0μg/ml)0.5ml,置10ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,作为贮备溶液。精密量取贮备溶液1ml,置25ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,即得。
供试品溶液的制备取供试品粉末约15g(过二号筛),精密称定,置于均质瓶中,加入氯化钠3g,精密加入70%甲醇溶液75ml,高速搅拌2分钟(搅拌速度大于11000转/分钟),离心5分钟(离心速度2500转/分钟),精密量取上清液15ml,置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,量取续滤液20.0ml,通过免疫亲合柱,流速每分钟3ml,用水20ml洗脱,洗脱液弃去,使空气进入柱子,将水挤出柱子,再用适量甲醇洗脱,收集洗脱液,置2ml量瓶中,并用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
测定法分别精密吸取上述混合对照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl,注入液相色谱仪,测定峰面积,以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,绘制标准曲线。另精密吸取上述供试品溶液20~25μl,注入液相色谱仪,测定峰面积,从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素B1的量,计算,即得。
结果判定:本品每1000g含黄曲霉毒素B1不得过5μg。
二氧化硫残留量
仪器及用具:中药粉碎机、分析天平、药典筛、电热套
试剂及试液:过氧化氢、甲基红乙醇溶液、0.01mol/L氢氧化钠滴定液、盐酸溶液(6mol/L)(试剂均使用分析纯,实验用水为纯化水)
方法:照二氧化硫残留量测定法(通则2331)测定。
取药材或饮片细粉约10g,精密称定,置两颈圆底烧瓶中,加水300~400ml。打开回流冷凝管开关给水,将冷凝管的上端E口处连接一橡胶导气管置于100ml锥形瓶底部。锥形瓶内加入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液(橡胶导气管的末端应在吸收液液面以下)。使用前,在吸收液中加入3滴甲基红乙醇溶液指示剂(2.5mg/ml),并用0.01mol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色(即终点;如果超过终点,则应舍弃该吸收溶液)。开通氮气,使用流量计调节气体流量至约0.2L/min;打开分液漏斗C的活塞,使盐酸溶液(6mol/L)10ml流入蒸馏瓶,立即加热两颈烧瓶内的溶液至沸,并保持微沸;烧瓶内的水沸腾1.5小时后,停止加热。吸收液放冷后,置于磁力搅拌器上不断搅拌,用氢氧化钠滴定液(0.01mol/L)滴定,至黄色持续时间20秒不褪,并将滴定的结果用空白实验校正。
结果判定:本品二氧化硫残留量不得过150mg/kg。
含量测定
仪器及用具:中药粉碎机、分析天平、药典筛、恒温水浴锅、高效液相色谱仪
试剂及试液:乙腈、三氯甲烷、正丁醇、甲醇(其中乙腈为色谱纯,其他试剂均使用分析纯,实验用水为纯化水)
对照品:人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品及人参皂苷Rb1对照品
方法:照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000。
对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品及人参皂苷Rb1对照品,加甲醇制成每1ml各含0.2mg的混合溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备取本品粉末(过四号筛)约1g,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷加热回流3小时,弃去三氯甲烷液,药渣挥干溶剂,连同滤纸筒移入100ml锥形瓶中,精密加水饱和正丁醇50ml,密塞,放置过夜,超声处理(功率250W,频率50kHz)30分钟,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液25ml,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液10~20μl,注人液相色谱仪,测定,即得。
结果判定:本品按干燥品计算,含人参皂苷Rg1(C42H72O14)和人参皂苷Re(C48H82O18)的总量不得少于0.30%,人参皂苷Rb1(C54H92O23)不得少于0.20%。
微生物限度
沙门菌取本品10g,以无菌接种至适宜体积(经方法适用性实验确定)的胰酪大豆胨液体培养基中,混匀,按非无菌产品微生物限度检查:控制菌检查法检查。
结果判定:沙门菌不得检出(10g)。
耐胆盐革兰阴性菌取本品,以无菌胰酪大豆胨液体培养基为稀释剂,制成1∶10的供试液,混匀,按非无菌产品微生物限度检查:控制菌检查法检查。
结果判定:耐胆盐革兰阴性菌应小于104cfu(1g)。