CN107349211A - 一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用 - Google Patents
一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107349211A CN107349211A CN201710618202.6A CN201710618202A CN107349211A CN 107349211 A CN107349211 A CN 107349211A CN 201710618202 A CN201710618202 A CN 201710618202A CN 107349211 A CN107349211 A CN 107349211A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mno
- hollow
- nano
- particle
- peg
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 title claims abstract description 62
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims abstract description 105
- NUJOXMJBOLGQSY-UHFFFAOYSA-N manganese dioxide Chemical compound O=[Mn]=O NUJOXMJBOLGQSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 100
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 73
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims abstract description 54
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims abstract description 45
- 229920002518 Polyallylamine hydrochloride Polymers 0.000 claims abstract description 35
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 22
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 21
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 20
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 claims abstract description 16
- -1 polypropylene Polymers 0.000 claims abstract description 16
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 claims abstract description 16
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 claims abstract description 14
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 9
- BOTDANWDWHJENH-UHFFFAOYSA-N Tetraethyl orthosilicate Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)OCC BOTDANWDWHJENH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 31
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 22
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 17
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 14
- SURLGNKAQXKNSP-DBLYXWCISA-N chlorin Chemical compound C\1=C/2\N/C(=C\C3=N/C(=C\C=4NC(/C=C\5/C=CC/1=N/5)=CC=4)/C=C3)/CC\2 SURLGNKAQXKNSP-DBLYXWCISA-N 0.000 claims description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 8
- MWWSFMDVAYGXBV-RUELKSSGSA-N Doxorubicin hydrochloride Chemical compound Cl.O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MWWSFMDVAYGXBV-RUELKSSGSA-N 0.000 claims description 7
- 229960002918 doxorubicin hydrochloride Drugs 0.000 claims description 7
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 7
- 238000005530 etching Methods 0.000 claims description 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 6
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 4
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 3
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 claims description 2
- 241000209094 Oryza Species 0.000 claims 2
- 238000005576 amination reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 13
- 238000010276 construction Methods 0.000 abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 4
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 abstract 1
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 31
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 17
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 15
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 13
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 12
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 12
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 12
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 238000013461 design Methods 0.000 description 6
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 6
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L sodium carbonate Substances [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 3
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 3
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 239000005543 nano-size silicon particle Substances 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- 238000005245 sintering Methods 0.000 description 3
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 3
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000012632 fluorescent imaging Methods 0.000 description 2
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- MSKSQCLPULZWNO-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-methoxyethoxy)ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethanamine Chemical compound COCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCN MSKSQCLPULZWNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VVJKKWFAADXIJK-UHFFFAOYSA-N Allylamine Chemical class NCC=C VVJKKWFAADXIJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 1
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 208000030270 breast disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229910052681 coesite Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052906 cristobalite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 238000005034 decoration Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- XYIBRDXRRQCHLP-UHFFFAOYSA-N ethyl acetoacetate Chemical compound CCOC(=O)CC(C)=O XYIBRDXRRQCHLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011147 inorganic material Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 231100001252 long-term toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000002539 nanocarrier Substances 0.000 description 1
- 230000007959 normoxia Effects 0.000 description 1
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 238000012634 optical imaging Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- VDGJOQCBCPGFFD-UHFFFAOYSA-N oxygen(2-) silicon(4+) titanium(4+) Chemical compound [Si+4].[O-2].[O-2].[Ti+4] VDGJOQCBCPGFFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 229910052682 stishovite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 229910052905 tridymite Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 238000002371 ultraviolet--visible spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
- A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0036—Porphyrins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明提供了一种空心二氧化锰(MnO2)复合纳米材料、其制备方法及其应用,该方法包括:将正硅酸乙酯溶解在乙醇和碱性水溶液的混合溶液中,水解得到二氧化硅纳米颗粒;将二氧化硅纳米颗粒的水溶液和高锰酸钾溶液混合,还原反应后再刻蚀,得到空心MnO2纳米颗粒;将空心MnO2纳米颗粒表面依次修饰聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层,得到空心MnO2复合纳米材料。该方法一次实验能得到大量形貌可控的空心结构的MnO2复合纳米材料,重复性好;具有非常好的水溶性和生物相容性,高效装载药物并在肿瘤部位特定释放;与anti‑PD‑L1联合使用,不仅能对原始肿瘤进行有效的杀伤,还能明显的抑制远端肿瘤的生长。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域,尤其涉及一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用。
背景技术
癌症是威胁人类健康的重大恶性疾病之一。虽然从上世纪50年代起,数十年中大量的人力、物力、财力被投入到癌症的预防和治疗中,但在这方面人类所取得的进展十分有限。
在最近几年,二氧化锰(MnO2)纳米结构作为肿瘤微环境(TME)-响应的治疗诊断试剂的一种引起了大量的关注。研究发现MnO2纳米结构在TME中存在的H+或谷胱甘肽(GSH)条件下可以分解,产生的Mn2+离子显著的增强T1的磁共振成像,可以用于肿瘤特异性的成像与检测。与此同时,MnO2纳米结构在TME中过氧化氢(H2O2)的存在下分解成水和氧气,产生的氧气可以改善肿瘤的乏氧。这种作用通过研究发现可以提高多种癌症治疗的效果,例如放射治疗和光动力治疗,因为在这些治疗过程中氧气具有重要的作用。MnO2纳米颗粒能够降解成水溶性的Mn2+离子并通过肾脏迅速的排泄出体外。与许多不可降解的无机纳米材料相比,这种材料在活体应用时不会有长期的毒性。之前报道的MnO2纳米结构大多是纳米颗粒、纳米片或与纳米材料结合的纳米复合物,不能实现有效的药物装载和精确控制药物的释放。
当前,已经有文献报道基于MnO2的纳米复合物用于癌症的治疗,但是具有以下几方面的缺点:(1)合成的步骤较为复杂,很难进行大批量的合成。(2)合成的MnO2材料的形貌不可控,不利于实验的重复。(3)合成的MnO2材料大部分是与其他无机材料相复合,不利于材料代谢出体外。然而,制备一种合成方法简单、可大批量生产、重复性好、容易代谢并将该颗粒同时用于制备癌症的成像诊断和治疗制剂未曾见报道。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用,该制备方法简单,重复性较好且制备的空心MnO2复合纳米材料容易代谢。
本发明提供了一种空心MnO2复合纳米材料的制备方法,包括以下步骤:
a)将正硅酸乙酯溶解在乙醇和碱性水溶液的混合溶液中,水解,得到实心二氧化硅纳米颗粒;
b)将所述实心二氧化硅纳米颗粒的水溶液和高锰酸钾溶液混合,还原反应后再刻蚀,得到空心MnO2纳米颗粒;
c)将所述空心MnO2纳米颗粒表面依次修饰聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层,得到空心MnO2复合纳米材料。
优选地,所述步骤a)中水解的温度为40~50℃,水解的时间为1.5~2.5h。
优选地,所述步骤b)中刻蚀的温度为55~65℃;刻蚀的时间为11~13h。
本发明提供了一种空心MnO2复合纳米材料,包括空心MnO2纳米颗粒;
及在所述空心MnO2纳米颗粒表面逐层修饰的聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层;
所述空心MnO2纳米颗粒的比表面积为350~400m2·g-1;粒径为150~200nm。
优选地,所述空心MnO2纳米颗粒、聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层的质量比为1:4~6:4~6:4~6。
优选地,所述空心MnO2复合纳米材料的平均孔径为3.5~4.5nm。
本发明提供了一种空心MnO2复合纳米材料在制备用于治疗癌症的治疗剂中的应用;
所述空心MnO2纳米材料为上述技术方案所述制备方法制备的空心MnO2复合纳米材料或上述技术方案所述空心MnO2复合纳米材料。
优选地,所述治疗剂中包括二氢卟酚e6和/或盐酸阿霉素。
优选地,所述二氢卟酚e6和盐酸阿霉素的装载量分别为17~89%和13~87%。
本发明提供了一种空心MnO2复合纳米材料的制备方法,包括以下步骤:a)将正硅酸乙酯溶解在乙醇和碱性水溶液的混合溶液中,水解,得到实心二氧化硅纳米颗粒;b)将所述实心二氧化硅纳米颗粒的水溶液和高锰酸钾溶液混合,还原反应后再刻蚀,得到空心MnO2纳米颗粒;c)将所述空心MnO2纳米颗粒表面依次修饰聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层,得到空心MnO2复合纳米材料。该方法以实心二氧化硅球为模板,一次实验可以得到大量形貌可控的空心结构的MnO2复合纳米材料,重复性好;在酸性条件下可以完全的分解,通过荧光成像和磁共振成像,证明该纳米颗粒在小鼠体内会分解产生Mn2+离子并通过肾脏排出体外。另外,该制备方法制备的空心MnO2复合纳米材料具有非常好的水溶性和生物相容性,在水和生理环境下都具有很好的分散性,可以高效的装载药物试剂并在肿瘤部位特定的释放;能够实现可见光区的较强的荧光成像以及肿瘤部位特异性的T1磁共振成像;与anti-PD-L1联合使用之后,不仅可以对原始肿瘤进行有效的杀伤,还能明显的抑制远端肿瘤的生长。实验结果表明:该制备方法可以一次合成至少6g空心MnO2复合纳米材料;TEM表明其可重复实验;MnO2纳米颗粒在中性或碱性条件下是稳定的,在弱酸性的环境中会分解成Mn2+离子;二氢卟酚e6和盐酸阿霉素的装载量分别为17~89%和13~87%;注射纳米颗粒24h之后,肿瘤位置的T1磁共振信号有2倍的增强;H-MnO2-PEG/C&D加激光的联合治疗组在治疗结束的时候肿瘤的生长速度最慢并且体积最小,肿瘤的体积仅仅增加了2倍。
附图说明
图1为本发明实施例1中合成空心MnO2纳米材料流程示意图;
图2为本发明实施例1制备的H-MnO2-PEG纳米材料的透射电镜(TEM)图;
图3为本发明实施例1制备的H-MnO2-PEG纳米材料的高纬度环形暗场扫描的TEM元素映射(HHAADF-STEM)图;
图4为本发明实施例1制备的H-MnO2-PEG纳米材料在不同溶液中的稳定性测试图;
图5为本发明实施例1制备的H-MnO2-PEG纳米材料的孔径分布曲线与氮气吸附与脱附的等温线图;
图6为本发明实施例2中大规模合成的H-MnO2-PEG材料的透射电镜图;
图7为本发明实施例3制备的H-MnO2-PEG纳米在不同pH值下的稳定性测试图;
图8为本发明实施例4中药物在H-MnO2-PEG材料中的装载曲线以及在不同pH值下的释放情况;
图9为本发明实施例5中氮气或氧气环境下激光照射后,单纯的Ce6或H-MnO2-PEG/C在4T1细胞中的光动力治疗效果图;
图10为本发明实施例6中H-MnO2-PEG/C&D在细胞水平联合治疗的效果图;
图11为本发明实施例7中H-MnO2-PEG/C&D在活体水平的荧光和T1磁共振成像;
图12为本发明实施例8中H-MnO2-PEG/C&D在活体水平联合治疗的效果图;
图13为本发明实施例9中H-MnO2-PEG/C&D与anti-PD-L1联合治疗后,对小鼠原始肿瘤以及远端肿瘤的治疗结果图。
具体实施方式
本发明提供了一种空心MnO2复合纳米材料的制备方法,包括以下步骤:
a)将正硅酸乙酯溶解在乙醇和碱性水溶液的混合溶液中,水解,得到实心二氧化硅纳米颗粒;
b)将所述实心二氧化硅纳米颗粒的水溶液和高锰酸钾溶液混合,还原反应后再刻蚀,得到空心MnO2纳米颗粒;
c)将所述空心MnO2纳米颗粒表面依次修饰聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层,得到空心MnO2复合纳米材料。
本发明提供的制备方法简单,是以实心二氧化硅球为模板,一次实验可以得到大量形貌可控的空心结构的材料,具有简单的合成步骤、较好的可重复性以及较高的产率。
本发明将正硅酸乙酯溶解在乙醇和碱性水溶液的混合溶液中,水解,得到实心二氧化硅纳米颗粒。本发明优选将正硅酸乙酯滴加到所述乙醇和碱性水溶液的混合溶液中。在本发明中,所述碱性水溶液优选选自质量分数为30%的氨水。所述水解的温度优选为40~50℃,更优选为45℃;水解的时间优选为1.5~2.5h,更优选为2h。本发明优选采用水浴加热的形式满足水解所需的温度。本发明优选将水解产物用水洗涤3次,得到实心二氧化硅纳米颗粒(sSiO2)。
本发明以得到的实心二氧化硅球为模板,一次实验可以得到大量形貌可控的空心结构的材料,具有简单的合成步骤、较好的可重复性以及较高的产率。
得到实心二氧化硅纳米颗粒后,本发明将所述实心二氧化硅纳米颗粒的水溶液和高锰酸钾溶液混合,还原反应后再刻蚀,得到空心MnO2纳米颗粒(H-MnO2材料)。
本发明将实心二氧化硅纳米颗粒分散在水中,得到实心二氧化硅纳米颗粒的水溶液。本发明优选在超声的条件下将高锰酸钾溶液滴加到实心二氧化硅纳米颗粒的水溶液中。还原反应的时间优选为11~13h,更优选为12h。
本发明优选将还原产物离心,得到的沉淀重新分散在水中,再在强碱性溶液中刻蚀,得到空心MnO2纳米颗粒。在本发明中,所述强碱性溶液优选采用2mol/L的Na2CO3水溶液。所述刻蚀的温度优选为55~65℃,更优选为60℃;刻蚀的时间优选为11~13h,更优选为12h。本发明优选将空心MnO2纳米颗粒用水洗涤3次。
得到空心MnO2纳米颗粒后,本发明将所述空心MnO2纳米颗粒表面依次修饰聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层,得到空心MnO2复合纳米材料。
本发明优选将聚丙烯胺盐酸盐溶液分散在血清瓶中,所述聚丙烯胺盐酸盐溶液的质量浓度优选为4.5~5.5mg/mL,更优选为5mg/mL;所述聚丙烯胺盐酸盐的重均分子量优选为15000g/mol。
本发明优选在超声条件下在聚丙烯胺盐酸盐溶液中缓慢加入到空心MnO2纳米颗粒的水溶液中;所述聚丙烯胺盐酸盐(PAH)和空心MnO2纳米颗粒的质量比优选为4.5~5.5:1,更优选为5:1。滴加完聚丙烯胺盐酸盐溶液后继续优选超声0.4~0.6h,然后在室温下优选搅拌5~7h。本发明优选将溶液在14800rpm下离心得到沉淀并用水洗涤三次,得到PAH修饰的H-MnO2材料(H-MnO2-PAH),即所述聚丙烯胺盐酸盐以聚丙烯胺盐酸盐层的形式修饰在空心MnO2纳米颗粒表面。
本发明将聚丙烯酸(PAA)溶液分散在本领域技术人员熟知的血清瓶中;所述聚丙烯酸(PAA)溶液的质量浓度优选为4.5~5.5mg/mL,更优选为5mg/mL;所述聚丙烯酸的重均分子量优选为1800g/mol。
本发明优选在超声条件下在聚丙烯酸(PAA)溶液中缓慢滴加H-MnO2-PAH溶液;所述聚丙烯酸和H-MnO2-PAH的质量比优选为4.5~5.5:1,更优选为5:1。滴加完H-MnO2-PAH溶液后继续优选超声0.4~0.6h,然后在室温下优选搅拌5~7h。本发明优选将溶液在14800rpm下离心得到沉淀并用水洗涤三次,得到PAA修饰的H-MnO2-PAH材料(H-MnO2-PAA),即所述聚丙烯酸以聚丙烯酸层的形式复修饰在所述聚丙烯胺盐酸盐层表面。
本发明将H-MnO2-PAH溶液分散在血清瓶中,在超声的条件下滴加氨基化的聚乙二醇(mPEG-NH2);所述氨基化的聚乙二醇为氨基化的支链状聚乙二醇;其重均分子量优选为5000g/mol。所述氨基化的聚乙二醇和H-MnO2-PAH的质量比优选为4.5~5.5:1,更优选为5:1。本发明优选将H-MnO2-PAH溶液与氨基化的聚乙二醇混合后的溶液采用2mol/L的Na2CO3溶液调节至pH值为8.0;然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)反应;所述反应优选在搅拌的条件下进行,所述反应的时间优选为11~13h,更优选为12h。反应结束后,本发明优选通过14800rpm离心分离得到H-MnO2-PEG并用水洗涤三次。
本发明提供了一种空心MnO2复合纳米材料,包括空心MnO2纳米颗粒;
及在所述空心MnO2纳米颗粒表面逐层修饰的聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层;
所述空心MnO2纳米颗粒的比表面积为350~400m2·g-1;粒径为150~200nm。
本发明提供的空心MnO2复合纳米材料包括空心MnO2纳米颗粒。在本发明中,所述空心MnO2纳米颗粒的比表面积为350~400m2·g-1;粒径为150~200nm,优选为170~190nm,更优选为180nm。
本发明提供的空心MnO2复合纳米材料包括修饰在所述空心MnO2纳米颗粒表面的聚丙烯胺盐酸盐层。所述聚丙烯胺盐酸盐的重均分子量为15000g/mol。
本发明提供的空心MnO2复合纳米材料包括修饰在所述聚丙烯胺盐酸盐层表面的聚丙烯酸层。所述聚丙烯酸的重均分子量为1800g/mol。
本发明提供的空心MnO2复合纳米材料包括复修饰在所述聚丙烯酸层表面的氨基化的聚乙二醇层。所述聚乙二醇的重均分子量为5000g/mol。
在本发明中,所述空心MnO2纳米颗粒、聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层的质量比优选为1:4~6:4~6:4~6,更优选为1:5:5:5。
本发明提供了一种空心MnO2复合纳米材料在制备用于治疗癌症的治疗剂中的应用;
所述空心MnO2纳米材料为上述技术方案所述制备方法制备的空心MnO2复合纳米材料或上述技术方案所述空心MnO2复合纳米材料。
在本发明中,所述治疗剂优选包括二氢卟酚e6和/或盐酸阿霉素。
在本发明中,所述二氢卟酚e6和盐酸阿霉素的装载量优选分别为17~89%和13~87%。
本发明提供的空心MnO2复合纳米材料具有非常好的水溶性和生物相容性,在水和生理环境下都具有很好的分散性,可以高效的装载药物试剂并在肿瘤部位特定的释放;能够实现可见光区的较强的荧光成像以及肿瘤部位特异性的T1磁共振成像;对小鼠进行尾静脉注射,通过荧光和磁共振成像发现纳米颗粒能够在肿瘤部位有效的富集,可以催化肿瘤部位的过氧化氢,改善肿瘤的乏氧,提高光动力治疗的效果并最终实现高效的联合治疗。研究还发现该纳米颗粒可以引起小鼠一系列的免疫反应,在与anti-PD-L1联合使用之后,不仅可以对原始肿瘤进行有效的杀伤,还能明显的抑制远端肿瘤的生长;在酸性条件下可以完全的分解,通过荧光成像和磁共振成像,证明了该纳米颗粒在小鼠体内会分解产生Mn2+离子并通过肾脏排出体外,证明该纳米颗粒在活体水平是完全可代谢的。
为了进一步说明本发明,下面结合实施例对本发明提供的一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用进行详细地描述,但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1:制备空心MnO2材料(H-MnO2-PEG):
(1)将14mL乙醇,2mL水和500μL氨水(30%)混合搅拌并在45℃水浴条件下缓慢滴加100μL正硅酸乙酯反应2h,之后用水洗涤三次,得到实心的二氧化硅纳米颗粒(sSiO2)。
(2)将40mg的sSiO2分散在10mL的水中,在超声条件下将高锰酸钾(300mg)的水溶液逐滴滴加到溶液中,在搅拌12h之后,通过14800rpm离心获得沉淀,将沉淀用水洗涤三次并重新分散在水中。
(3)将(2)中得到的材料溶解在2mol/L Na2CO3的水溶液中,在60℃下反应12h,得到空心介孔的二氧化硅颗粒(H-MnO2)并用水洗涤三次。
(4)将10mL聚丙烯胺盐酸盐(PAH,MW=15000)高分子溶液(5mg/mL)分散在血清瓶中,在超声条件下缓慢加入5mLH-MnO2(2mg/mL)水溶液。滴加完后继续超声0.5h,然后在室温下搅拌6h。将溶液在14800rpm下离心得到沉淀并用水洗涤三次,获得PAH修饰的H-MnO2材料(H-MnO2-PAH)。
(5)将10mL聚丙烯酸(PAA,MW=1800)高分子溶液(5mg/mL)分散在血清瓶中,在超声条件下缓慢滴加5mL H-MnO2-PAH溶液(2mg/mL)。滴加完后继续超声0.5h,然后在室温下搅拌6h。将溶液在14800rpm下离心得到沉淀并用水洗涤三次,获得PAA修饰的H-MnO2-PAH材料(H-MnO2-PAA)。
(6)将10mLH-MnO2-PAA溶液(5mg/mL)分散在血清瓶中,在超声条件下缓慢滴加250mg氨基化的支链状聚乙二醇(mPEG-5K-NH2,MW=5000),用2mol/L的Na2CO3将反应溶液pH值调节到8.0,加入50mg的EDC并搅拌12h。反应结束后,通过14800rpm离心分离得到H-MnO2-PEG并用水洗涤三次。
图1为本发明实施例1制备的H-MnO2-PEG复合纳米材料负载二氢卟酚e6(Ce6)和盐酸阿霉素(DOX)的合成示意图;
图2为本发明实施例1制备的H-MnO2-PEG纳米材料的透射电镜(TEM)图;图2说明了合成的纳米颗粒形貌是球状并且是空心的结构,H-MnO2-PEG的尺寸为150nm,该纳米层的厚度约为15nm。
图3为本发明实施例1制备的H-MnO2-PEG纳米材料的高纬度环形暗场扫描的TEM元素映射(HHAADF-STEM)图;图3进一步确认了H-MnO2-PEG纳米层的空心结构以及多种元素的组成。
图4为本发明实施例1制备的H-MnO2-PEG纳米材料在不同溶液中的稳定性测试图;不同的溶液包括水、盐酸缓冲液以及细胞培养基,由图4可以看出:H-MnO2-PEG纳米材料在不同溶液中都能够很好的分散并且材料的粒径没有随着时间的推移而产生变化,其水合半径约为180nm。
图5为本发明实施例1制备的H-MnO2-PEG纳米材料的孔径分布曲线与氮气吸附与脱附的等温线图;在图5中,根据比表面积测定仪测量得到H-MnO2-PEG的比表面积和平均的孔径分别为360m2·g-1和3.94nm,如此高的比表面积说明H-MnO2-PEG纳米颗粒是空心结构,另一方面由于材料的孔径较大,可以作为一个药物载体高效的装载药物。
实施例2:H-MnO2-PEG纳米颗粒大规模合成实验
为了进一步研究材料的合成产率与可重复性,设计了以下实验:
根据实施案例1中的合成步骤(1),得到2g sSiO2并将其分散在300mL水中,在超声条件下将高锰酸钾(15g)的水溶液逐滴滴加到水中。搅拌12h之后,通过14800rpm离心获得沉淀,将沉淀用水洗涤三次并将其溶解在2mol/L Na2CO3的水溶液中,在60℃下反应12h,得到空心介孔的MnO2颗粒(H-MnO2)并用水洗涤三次。
图6为本发明实施例2中大规模合成的H-MnO2-PEG材料的透射电镜图;在图6中,根据实验结果可以发现一次合成的实验可以得到6g的材料,证明该材料可以进行大规模的合成。对该合成的材料进行TEM的表征,结果发现大规模合成材料的形貌和尺寸没有发生明显的变化,表明该纳米材料可以进行大规模的合成并且具有形貌可控、高产率以及可重复性等优势。
实施例3:H-MnO2-PEG纳米颗粒在不同pH值下的稳定性
H-MnO2-PEG纳米颗粒在不同时间点与多种pH值的PBS(5.5,6.5和7.4)孵育。在特定的时间里,溶液通过紫外-可见光谱仪测量和TEM表征,检验材料的降解情况。
MnO2纳米颗粒在中性或碱性条件下是稳定的,但是在弱酸性的环境中会分解成Mn2 +离子。因此,本申请记录了在不同的时间里,H-MnO2-PEG纳米颗粒与不同pH值(7.4,5.5)的磷酸缓冲液孵育之后的TEM图,见图7,图7为本发明实施例2制备的H-MnO2-PEG纳米在不同pH值下的稳定性测试图。图7中7a表明H-MnO2-PEG纳米层在pH值7.4的PBS中培养8h之后形貌没有明显的变化,证明H-MnO2-PEG在中性的环境中是稳定的。然而H-MnO2-PEG在酸性的溶液中显示随时间变化而分解,这主要是由于MnO2分解成Mn2+离子。MnO2特征吸收峰在pH值为7.4下变化不大,但是在pH值为6.5和pH值为5.5条件下迅速的降低,这一结果进一步说明了H-MnO2-PEG超灵敏的pH响应的降解行为。
实施例4:H-MnO2-PEG纳米颗粒的药物装载与释放
将10mL的H-MnO2-PEG(0.2mg/mL)溶液与不同浓度的二氢卟酚e6(Ce6)和盐酸阿霉素(DOX)混合反应12h。之后14800rpm离心分离得到H-MnO2-PEG/C&D纳米颗粒并用水洗涤三次。
为了将H-MnO2-PEG应用于光动力治疗,不同浓度的光敏分子Ce6可以在超声条件下与材料孵育,混合溶液在室温下搅拌12h后除去未装载上的Ce6之后,通过紫外-可见光谱可以计算出Ce6的装载效率。图8为实施例4中药物在H-MnO2-PEG材料中的装载曲线以及在不同pH值下的释放情况,在图8中(a)看出,当Ce6:MnO2的孵育质量比为3:1时,Ce6可以达到88.9%的高装载量。另一方面,DOX作为一种常见的抗癌药物也可以装载到H-MnO2-PEG纳米层的空心结构中。H-MnO2-PEG与不同浓度的DOX在黑暗中混合反应12h之后,通过紫外-可见光谱可以计算出药物的装载效率。结果表明DOX的装载是随着加入到反应溶液中DOX的量逐渐增加,最大有效装载效率可以达到86.1%。
图8中(b)表明Ce6和DOX可以同时装载到H-MnO2-PEG纳米层的空心结构中,得到两种药物共同装载的H-MnO2-PEG/C&D纳米颗粒。H-MnO2-PEG/C&D在不同pH值的溶液中药物的释放也进行了研究。如图8中(c),在pH值为7.4的溶液中,Ce6和DOX这两种药物的释放都十分的缓慢,分别为23%和21%。然而在弱酸性的pH值下(pH值为6.5和pH值为5.5),Ce6(49%和73%)和DOX(62%和95%)都会快速的释放,这主要是由于H-MnO2-PEG纳米颗粒在酸性条件下会分解成Mn2+离子,因此可以促进药物的释放。
实施例5:H-MnO2-PEG/C纳米颗粒的光动力治疗效果
在光动力治疗中,4T1小鼠乳腺癌细胞在96孔板中与不同浓度的H-MnO2-PEG/C或单纯的Ce6培育2h之后,96孔板移动到一个透明的盒子中分别通30min的氧气和氮气。之后细胞分别在氧气和氮气的环境下,在660nm激光下照射30min。细胞之后用新鲜的培养基继续培养24h,之后用MTT检测细胞的相对活性。
图9为实施例5中氮气或氧气环境下激光照射后,单纯的Ce6或H-MnO2-PEG/C在4T1细胞中的光动力治疗效果图;图9表明在氧气的条件下,单纯的Ce6和H-MnO2-PEG/C对细胞都有明显的杀伤作用,存活率分别为14%和4%。作为对照,在氮气环境下,单纯Ce6的光动力治疗对细胞的杀伤效果非常有限。但是H-MnO2-PEG/C组在氮气的乏氧条件下,也能有效的诱导细胞凋亡,这主要是由于MnO2可以催化H2O2并在肿瘤细胞中原位产生额外的氧气。因此不同于传统的光动力治疗需要在正常含氧量的条件下才能发挥作用,装载了Ce6的H-MnO2-PEG纳米颗粒甚至可以在乏氧的环境下作为有效的光动力治疗试剂。
实施例6:H-MnO2-PEG/C&D纳米颗粒在细胞水平的联合治疗
在细胞的联合治疗中,4T1细胞与不同浓度的H-MnO2-PEG/C或H-MnO2-PEG/C&D在96孔板中培养2h,之后不需要激光照射或在660nm的激光照射下照射30min(5mW·cm-2)。在继续培养1h之后,细胞转移到新鲜的培养基中并在MTT测试之前继续培养24h。
图10为实施例6中H-MnO2-PEG/C&D在细胞水平联合治疗的效果图,图10表明,和单纯的光动力(H-MnO2-PEG/C加光照)或化疗(H-MnO2-PEG/C&D)治疗组相比,在不同的药物浓度下联合治疗组(H-MnO2-PEG/C&D加光照)可以更加有效的杀伤细胞,存活率为5%,表明了这两种治疗方式协同治疗的效果。
实施例7:H-MnO2-PEG/C&D纳米颗粒在活体的成像
活体荧光成像是通过Maestro活体荧光成像系统获得。磁共振成像是通过3.0T的临床磁共振成像扫描仪收集的,它含有小动物成像的线圈。我们通过静脉注射H-MnO2-PEG/C&D之后(MnO2=10mg·kg-1,Ce6=4.7mg·kg-1和DOX=4.5mg·kg-1),在4T1荷瘤的Balb/c小鼠模型上,通过活体荧光成像和T1磁共振成像追踪纳米颗粒在小鼠体内的分布。
图11为实施例7中H-MnO2-PEG/C&D在活体水平的荧光和T1磁共振成像;图11中(a)所示,Ce6的荧光在肿瘤部位逐渐的增强并在8h达到最高峰,表明H-MnO2-PEG/C&D在肿瘤部位有效的富集。在注射24h之后,通过小鼠体外的主要器官和肿瘤成像也进一步证实了材料在肿瘤部位的有效富集(图11中(b)所示)。除此之外,在小鼠的肾脏也发现很强的Ce6荧光信号,证明载体在降解之后可以通过肾脏迅速的代谢。
在静脉注射H-MnO2-PEG/C&D之后,4T1荷瘤小鼠的磁共振图像进行了处理。图11中(c)表明:在注射纳米颗粒24h之后,肿瘤位置的T1磁共振信号有2倍的增强。表明H-MnO2-PEG/C&D在肿瘤位置的有效富集,这与荧光成像的结果一致。而且成像结果发现这些小鼠的肾脏有很强的T1信号(图11中(d)和(e)所示),相对于对照组小鼠,T1的信号值增强了6倍,表明H-MnO2-PEG/C&D在分解成Mn2+离子之后会快速的通过肾脏代谢。因此荧光与磁共振成像都说明H-MnO2-PEG/C&D纳米载体一方面通过肿瘤增强的渗透性和高滞留性(EPR)作用可以在肿瘤位置有效的被动富集,另一方面载体会逐渐的分解成离子并能快速的肾脏代谢。
实施例8:H-MnO2-PEG/C&D纳米颗粒在活体水平的联合治疗
4T1荷瘤小鼠分别静脉注射200μL的PBS,单纯的Ce6+DOX,H-MnO2-PEG/C,H-SiO2-PEG/C&D以及H-MnO2-PEG/C&D(MnO2=10mg·kg-1,SiO2=25mg·kg-1,Ce6=4.7mg·kg-1和DOX=4.5mg·kg-1)。激光照射组是在660nm激光照射下进行(5mW·cm-2,1h)。每组实验是五只小鼠,肿瘤的尺寸在两个星期中隔天测量。肿瘤的体积通过下面的公式计算:宽度2×长度/2。组织和肿瘤的切片是通过标准的H&E染色并在显微镜下观察。
肿瘤的尺寸在两个星期内检测,在第十四天收集每组小鼠的肿瘤并称重。图12为实施例8中H-MnO2-PEG/C&D在活体水平联合治疗的效果图,图12中(a)所示,单纯药物加激光组(第二组)没有明显的抑制肿瘤的生长,相对于原始肿瘤的体积生长了11倍,说明较低剂量的单纯药物在肿瘤部位不能有效的滞留。H-MnO2-PEG不加激光组对肿瘤的生长也没有明显的作用(第三组),肿瘤体积增加了10倍。H-MnO2-PEG/C加激光组(第四组),或是H-MnO2-PEG/C&D不加激光组(第五组),它们都只能部分的延缓肿瘤的生长,其肿瘤的体积分别增加了7倍和8倍。H-SiO2-PEG/C&D加激光的联合治疗组可以比较显著的抑制肿瘤生长,肿瘤体积只生长了5倍。但是H-MnO2-PEG/C&D加激光的联合治疗组在治疗结束的时候肿瘤的生长速度最慢并且体积最小,肿瘤的体积仅仅增加了2倍。最重要的是本申请的联合治疗组的治疗效率要比预计的叠加作用更加的好(图12中(b)所示)。
实施例9:H-MnO2-PEG/C&D纳米颗粒与anti-PD-L1抗体联合治疗
为了研究双边的肿瘤模型,4T1细胞皮下注射在小鼠的左侧(原始肿瘤)和右侧(远端肿瘤)。一个星期之后,将小鼠分别静脉注射200μL的PBS,或H-MnO2-PEG/C&D(MnO2=10mg·kg-1,Ce6=4.7mg·kg-1和DOX=4.5mg·kg-1)或H-MnO2-PEG/C&D+anti-PD-L1。注射12h之后,原始的肿瘤在660nm激光下照射(5mW·cm-2,1h),之后在激光照射完的1,3,5,7天分别注射750μg·kg-1的anti-PD-L1抗体。原始和远端的肿瘤尺寸与小鼠的体重每两天检测一次。
如图13所示,图13是实施例9中H-MnO2-PEG/C&D与anti-PD-L1联合治疗后,对小鼠原始肿瘤以及远端肿瘤的治疗结果,和期待的一样,基于H-MnO2-PEG/C&D的化疗-光动力治疗与anti-PD-L1抗体联用之后,与H-MnO2-PEG/C&D的联合治疗组相比,可以进一步提高左侧肿瘤的治疗效果。H-MnO2-PEG/C&D在小鼠左侧肿瘤引导的化疗-光动力治疗与anti-PD-L1抗体联用之后可以延缓远程肿瘤的生长,但是右侧其他组的小鼠肿瘤没有明显的抑制。联合治疗组小鼠左侧和右侧肿瘤的体积分别增加了2.5倍和2.3倍。因此H-MnO2-PEG/C&D组诱导的化疗-光动力治疗与anti-PD-L1抗体的联合治疗不仅对直接光照的原始肿瘤进行有效地杀伤,而且可以抑制远端肿瘤的生长(例如活体深层次的肿瘤或治疗之前很难检测的肿瘤)。
由以上实施例可知,本发明提供了一种空心MnO2复合纳米材料的制备方法,包括以下步骤:a)将正硅酸乙酯溶解在乙醇和碱性水溶液的混合溶液中,水解,得到实心二氧化硅纳米颗粒;b)将所述实心二氧化硅纳米颗粒的水溶液和高锰酸钾溶液混合,还原反应后再刻蚀,得到空心MnO2纳米颗粒;c)将所述空心MnO2纳米颗粒表面依次修饰聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层,得到空心MnO2复合纳米材料。该方法以实心二氧化硅球为模板,一次实验可以得到大量形貌可控的空心结构的MnO2复合纳米材料,重复性好;在酸性条件下可以完全的分解,通过荧光成像和磁共振成像,证明该纳米颗粒在小鼠体内会分解产生Mn2+离子并通过肾脏排出体外。另外,该制备方法制备的空心MnO2复合纳米材料具有非常好的水溶性和生物相容性,在水和生理环境下都具有很好的分散性,可以高效的装载药物试剂并在肿瘤部位特定的释放;能够实现可见光区的较强的荧光成像以及肿瘤部位特异性的T1磁共振成像;与anti-PD-L1联合使用之后,不仅可以对原始肿瘤进行有效的杀伤,还能明显的抑制远端肿瘤的生长。实验结果表明:该制备方法可以一次合成至少6g空心MnO2复合纳米材料;TEM表明其可重复实验;MnO2纳米颗粒在中性或碱性条件下是稳定的,在弱酸性的环境中会分解成Mn2+离子;二氢卟酚e6和盐酸阿霉素的装载量分别为17~89%和13~87%;注射纳米颗粒24h之后,肿瘤位置的T1磁共振信号有2倍的增强;H-MnO2-PEG/C&D加激光的联合治疗组在治疗结束的时候肿瘤的生长速度最慢并且体积最小,肿瘤的体积仅仅增加了2倍。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种空心MnO2复合纳米材料的制备方法,包括以下步骤:
a)将正硅酸乙酯溶解在乙醇和碱性水溶液的混合溶液中,水解,得到实心二氧化硅纳米颗粒;
b)将所述实心二氧化硅纳米颗粒的水溶液和高锰酸钾溶液混合,还原反应后再刻蚀,得到空心MnO2纳米颗粒;
c)将所述空心MnO2纳米颗粒表面依次修饰聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层,得到空心MnO2复合纳米材料。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤a)中水解的温度为40~50℃,水解的时间为1.5~2.5h。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤b)中刻蚀的温度为55~65℃;刻蚀的时间为11~13h。
4.一种空心MnO2复合纳米材料,包括空心MnO2纳米颗粒;
及在所述空心MnO2纳米颗粒表面逐层修饰的聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层;
所述空心MnO2纳米颗粒的比表面积为350~400m2·g-1;粒径为150~200nm。
5.根据权利要求4所述的空心MnO2复合纳米材料,其特征在于,所述空心MnO2纳米颗粒、聚丙烯胺盐酸盐层、聚丙烯酸层和氨基化的聚乙二醇层的质量比为1:4~6:4~6:4~6。
6.根据权利要求4所述的空心MnO2复合纳米材料,其特征在于,所述空心MnO2复合纳米材料的平均孔径为3.5~4.5nm。
7.一种空心MnO2复合纳米材料在制备用于治疗癌症的治疗剂中的应用;
所述空心MnO2纳米材料为权利要求1~3任意一项所述制备方法制备的空心MnO2复合纳米材料或权利要求4~6任意一项所述空心MnO2复合纳米材料。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述治疗剂中包括二氢卟酚e6和/或盐酸阿霉素。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述二氢卟酚e6和盐酸阿霉素的装载量分别为17~89%和13~87%。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710618202.6A CN107349211B (zh) | 2017-07-26 | 2017-07-26 | 一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710618202.6A CN107349211B (zh) | 2017-07-26 | 2017-07-26 | 一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107349211A true CN107349211A (zh) | 2017-11-17 |
CN107349211B CN107349211B (zh) | 2020-01-17 |
Family
ID=60285609
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710618202.6A Active CN107349211B (zh) | 2017-07-26 | 2017-07-26 | 一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN107349211B (zh) |
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107899013A (zh) * | 2017-10-17 | 2018-04-13 | 郑州大学 | 一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法 |
CN108096586A (zh) * | 2017-12-05 | 2018-06-01 | 上海大学 | 基于二氧化锰修饰的双响应药物释放体系的制备方法、制品与应用 |
CN109364267A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-02-22 | 四川大学华西医院 | 肿瘤组织和细胞双重靶向的介孔二氧化硅纳米载药颗粒及其制备方法 |
CN109674670A (zh) * | 2019-01-23 | 2019-04-26 | 复旦大学 | 一种氧化锰纳米团簇及其制备方法和应用 |
CN111150853A (zh) * | 2020-03-02 | 2020-05-15 | 临沂大学 | 一种肿瘤联合治疗药物载体的制备及应用 |
CN111202720A (zh) * | 2020-01-30 | 2020-05-29 | 上海工程技术大学 | 硫化铜/二氧化硅/二氧化锰纳米复合粒子及制法和应用 |
CN111484082A (zh) * | 2020-04-01 | 2020-08-04 | 东南大学 | 空心结构MnO2药物控释载体及其制备方法 |
CN113289031A (zh) * | 2021-05-13 | 2021-08-24 | 浙江大学杭州国际科创中心 | 一种MnSiO4/Yeast生物杂化材料及其制备方法、应用 |
CN113318236A (zh) * | 2021-05-17 | 2021-08-31 | 浙江大学杭州国际科创中心 | 一种MSNAs-TPP多功能纳米颗粒及其制备方法、应用 |
CN113493223A (zh) * | 2020-04-03 | 2021-10-12 | 长春可研生物科技有限公司 | 一种中空二氧化锰纳米球的制备方法与应用 |
CN113666421A (zh) * | 2021-07-23 | 2021-11-19 | 北京化工大学 | 二氧化锰包覆介孔二氧化硅的纳米花材料的制备方法 |
CN114788862A (zh) * | 2022-02-28 | 2022-07-26 | 上海市第十人民医院 | 一种锰基放疗增敏剂及其制备方法和应用 |
CN116966278A (zh) * | 2023-08-30 | 2023-10-31 | 广东药科大学附属第一医院 | 一种装载乳酸氧化酶的缓释材料及其制备方法与应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102698268A (zh) * | 2012-05-21 | 2012-10-03 | 苏州大学 | 一种导电高分子纳米材料及其用途 |
CN105906822A (zh) * | 2016-04-29 | 2016-08-31 | 郑州大学 | 一种包覆二氧化锰片层的聚乳酸-羟基乙酸共聚物的制备方法及应用 |
-
2017
- 2017-07-26 CN CN201710618202.6A patent/CN107349211B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102698268A (zh) * | 2012-05-21 | 2012-10-03 | 苏州大学 | 一种导电高分子纳米材料及其用途 |
CN105906822A (zh) * | 2016-04-29 | 2016-08-31 | 郑州大学 | 一种包覆二氧化锰片层的聚乳酸-羟基乙酸共聚物的制备方法及应用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
DENGSEN YUAN等: "A novel hierarchical hollow SiO2@MnO2 cubes reinforced elastic polyurethane foam for the highly efficient removal of oil from water", 《CHEMICAL ENGINEERING JOURNAL》 * |
WENWEN ZHU等: "Modulation of Hypoxia in Solid Tumor Microenvironment with MnO2 Nanoparticles to Enhance Photodynamic Therapy", 《ADV. FUNCT. MATER.》 * |
YONGSHENG LI 等: "Hollow-Structured Mesoporous Materials: Chemical Synthesis, Functionalization and Applications", 《ADVANCED MATERIALS》 * |
Cited By (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107899013B (zh) * | 2017-10-17 | 2020-01-14 | 郑州大学 | 一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法 |
CN107899013A (zh) * | 2017-10-17 | 2018-04-13 | 郑州大学 | 一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法 |
CN108096586A (zh) * | 2017-12-05 | 2018-06-01 | 上海大学 | 基于二氧化锰修饰的双响应药物释放体系的制备方法、制品与应用 |
CN109364267B (zh) * | 2018-12-10 | 2022-02-18 | 四川大学华西医院 | 肿瘤组织和细胞双重靶向的介孔二氧化硅纳米载药颗粒及其制备方法 |
CN109364267A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-02-22 | 四川大学华西医院 | 肿瘤组织和细胞双重靶向的介孔二氧化硅纳米载药颗粒及其制备方法 |
CN109674670A (zh) * | 2019-01-23 | 2019-04-26 | 复旦大学 | 一种氧化锰纳米团簇及其制备方法和应用 |
CN111202720A (zh) * | 2020-01-30 | 2020-05-29 | 上海工程技术大学 | 硫化铜/二氧化硅/二氧化锰纳米复合粒子及制法和应用 |
CN111202720B (zh) * | 2020-01-30 | 2023-04-28 | 上海工程技术大学 | 硫化铜/二氧化硅/二氧化锰纳米复合粒子及制法和应用 |
CN111150853A (zh) * | 2020-03-02 | 2020-05-15 | 临沂大学 | 一种肿瘤联合治疗药物载体的制备及应用 |
CN111150853B (zh) * | 2020-03-02 | 2023-09-19 | 临沂大学 | 一种肿瘤联合治疗药物载体的制备及应用 |
CN111484082A (zh) * | 2020-04-01 | 2020-08-04 | 东南大学 | 空心结构MnO2药物控释载体及其制备方法 |
CN113493223A (zh) * | 2020-04-03 | 2021-10-12 | 长春可研生物科技有限公司 | 一种中空二氧化锰纳米球的制备方法与应用 |
CN113289031B (zh) * | 2021-05-13 | 2022-05-03 | 浙江大学杭州国际科创中心 | 一种MnSiO4/Yeast生物杂化材料及其制备方法、应用 |
CN113289031A (zh) * | 2021-05-13 | 2021-08-24 | 浙江大学杭州国际科创中心 | 一种MnSiO4/Yeast生物杂化材料及其制备方法、应用 |
CN113318236B (zh) * | 2021-05-17 | 2022-07-08 | 浙江大学杭州国际科创中心 | 一种MSNAs-TPP多功能纳米颗粒及其制备方法、应用 |
CN113318236A (zh) * | 2021-05-17 | 2021-08-31 | 浙江大学杭州国际科创中心 | 一种MSNAs-TPP多功能纳米颗粒及其制备方法、应用 |
CN113666421A (zh) * | 2021-07-23 | 2021-11-19 | 北京化工大学 | 二氧化锰包覆介孔二氧化硅的纳米花材料的制备方法 |
CN114788862A (zh) * | 2022-02-28 | 2022-07-26 | 上海市第十人民医院 | 一种锰基放疗增敏剂及其制备方法和应用 |
CN114788862B (zh) * | 2022-02-28 | 2024-01-26 | 上海市第十人民医院 | 一种锰基放疗增敏剂及其制备方法和应用 |
CN116966278A (zh) * | 2023-08-30 | 2023-10-31 | 广东药科大学附属第一医院 | 一种装载乳酸氧化酶的缓释材料及其制备方法与应用 |
CN116966278B (zh) * | 2023-08-30 | 2024-02-02 | 广东药科大学附属第一医院 | 一种装载乳酸氧化酶的缓释材料及其制备方法与应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN107349211B (zh) | 2020-01-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107349211A (zh) | 一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用 | |
Xu et al. | Bioresponsive and near infrared photon co-enhanced cancer theranostic based on upconversion nanocapsules | |
Chen et al. | Multifunctional graphene oxide‐based triple stimuli‐responsive nanotheranostics | |
KR102081666B1 (ko) | 암 치료용 약학 조성물 | |
CN102781472B (zh) | 放射线治疗剂 | |
Duo et al. | Patient-derived microvesicles/AIE luminogen hybrid system for personalized sonodynamic cancer therapy in patient-derived xenograft models | |
CN105641696B (zh) | 一种金钆复合纳米材料、制备方法及其用途 | |
AU2005251499A1 (en) | Activatable particles, preparations and uses. | |
CN110743012A (zh) | 一种葡萄糖氧化酶修饰的介孔二氧化锰药物组合物的制备方法及应用 | |
CN107007835B (zh) | 载普鲁士蓝靶向纳米复合物及其制备方法 | |
Li et al. | Magnetic iron oxide nanoparticles/10-hydroxy camptothecin co-loaded nanogel for enhanced photothermal-chemo therapy | |
Yuan et al. | MRI tracing non-invasive TiO2-based nanoparticles activated by ultrasound for multi-mechanism therapy of prostatic cancer∗ | |
CN105997879A (zh) | 一种pH与温度双重敏感性的纳米囊泡及其制备方法和应用 | |
Du et al. | Confined nanoparticles growth within hollow mesoporous nanoreactors for highly efficient MRI-guided photodynamic therapy | |
CN107875384A (zh) | 一种包载光敏剂的肿瘤靶向治疗用药物递送系统 | |
Yin et al. | Cleavable collagenase-assistant nanosonosensitizer for tumor penetration and sonodynamic therapy | |
Zhou et al. | Two-dimensional semiconductor heterojunction nanostructure for mutually synergistic sonodynamic and chemoreactive cancer nanotherapy | |
Lee et al. | Multimeric grain-marked micelles for highly efficient photodynamic therapy and magnetic resonance imaging of tumors | |
Huang et al. | Smart responsive-calcium carbonate nanoparticles for dual-model cancer imaging and treatment | |
Liu et al. | Plasmon enhanced catalysis-driven nanomotors with autonomous navigation for deep cancer imaging and enhanced radiotherapy | |
Dong et al. | GQDs/hMSN nanoplatform: Singlet oxygen generation for photodynamic therapy | |
CN106581683B (zh) | 一种聚乙二醇修饰的金属有机纳米材料及其制备方法、应用 | |
Xia et al. | Mesocrystalline ZnS nanoparticles-augmented sonocatalytic full water splitting into H2/O2 for immunoactivating deep tumor | |
CN109125723A (zh) | 复合声敏剂、其制备方法、应用、使用方法、用途及药物组合物 | |
Feng et al. | Intracellular marriage of bicarbonate and Mn ions as “immune ion reactors” to regulate redox homeostasis and enhanced antitumor immune responses |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |