CN107899013B - 一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法 - Google Patents

一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107899013B
CN107899013B CN201710964499.1A CN201710964499A CN107899013B CN 107899013 B CN107899013 B CN 107899013B CN 201710964499 A CN201710964499 A CN 201710964499A CN 107899013 B CN107899013 B CN 107899013B
Authority
CN
China
Prior art keywords
mesoporous
mno
monomethyl ether
solution
aptamer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710964499.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107899013A (zh
Inventor
张振中
庄路阳
史进进
刘卫
张慧芳
安静一
赵秀
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhengzhou University
Original Assignee
Zhengzhou University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhengzhou University filed Critical Zhengzhou University
Priority to CN201710964499.1A priority Critical patent/CN107899013B/zh
Publication of CN107899013A publication Critical patent/CN107899013A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107899013B publication Critical patent/CN107899013B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
    • A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及具有光动力学治疗开光效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，可有效解决肿瘤光动力治疗的用药问题，方法是，将十二烷基苯磺酸钠、KMnO4溶于超纯水，加入硝酸溶液，离心，沉淀烘干、煅烧，成介孔MnO2纳米颗粒；取血卟啉单甲醚甲醇溶液，加入介孔MnO2纳米颗粒甲醇溶液，混匀，超声，旋干，得装载光敏剂血卟啉单甲醚的介孔MnO2纳米颗粒；取ssDNA5'‑HS‑TTT CCC AGT TGA TCC TTT GGA TAC CCT GGG制成发卡状核酸适配体；将发卡状核酸适配体加入到装载光敏剂血卟啉单甲醚的介孔MnO2纳米颗粒中反应，使核酸适配体尽可能多的固定到装载光敏剂血卟啉单甲醚的介孔MnO2纳米颗粒表面。本发明方法简单，易操作，原料丰富，成本低，使用效果好，避免了PDT的光敏毒性。

Description

一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧 化锰纳米载药系统的制备方法
技术领域
本发明涉及医药，特别是一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法。
背景技术
肿瘤是严重威胁人类健康的一种疾病，治愈难度高，目前对肿瘤的治疗主要有手术、化疗和放疗。自上世纪90年代以来，肿瘤光动力学治疗成为研究热点，主要集中在光敏剂的肿瘤靶向特异性转运、光动力学治疗肿瘤的作用机制及其与其它治疗的协同作用等。
肿瘤光动力学治疗的机制也是目前肿瘤光动力治疗的重要方向。由于光动力治疗中产生的活性氧(ROS)寿命和运动距离十分有限，只有20nS，200nm，导致多数ROS没有对肿瘤细胞的有效部位产生损伤作用，限制了肿瘤光动力治疗的效率。相关资料表明：光动力治疗对肿瘤细胞的损伤位点主要为：细胞膜(影响营养物质的转运)、线粒体(损伤线粒体膜，启动凋亡通路)和细胞核(损伤核内DNA分子)。因此把光敏剂转运至细胞膜、线粒体和细胞核，将显著提高ROS的损伤效率，进而提高肿瘤光动力治疗的效果。此外，还有从肿瘤自身的氧化应激调节机制出发，发现了肿瘤细胞内谷胱甘肽(GSH)对ROS具有显著的猝灭作用，导致光动力治疗的效率下降，因此通过下调肿瘤细胞内GSH量进而提高了光动力治疗的效率，实现增强PDT。因此，从PDT的作用和影响机制出发，开展肿瘤PDT的深入研究是十分必要的。
光敏剂在肿瘤的特异性分布直接决定着光动力学治疗的效果和其毒副作用，因此大量研究集中在如何将光敏剂高效的转运至肿瘤组织。
但目前光动力学治疗也存在着一些问题，多数光敏剂如HMME为水难溶性药物，难以在体内直接应用；小分子光敏剂难以穿过体内的重重生物学屏障，实现在其作用靶点(肿瘤细胞，亚细胞器)的高效分布；肿瘤细胞具有一定的氧化应激调节作用，降低活性氧的杀伤作用；
更重要的是，在前期的研究中发现HMME、CE6等常用的光敏剂在体内较难被代谢清除，在体内大量蓄积，导致严重的光敏毒性，如临床上进行光动力学治疗后为避免光敏毒性，患者需要进行4周左右的完全避光，而这无疑给患者带来极大的痛苦。基于上述问题，近年来，开展新的高效、可智能激活的肿瘤光动力学治疗成为多个领域要解决的技术热点。
发明内容
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种具有光动力学治疗开光效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，可有效解决肿瘤光动力治疗的用药问题。
本发明解决的技术方案是，一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，介孔MnO2装载光敏剂血卟啉单甲醚(简称HMME，以下同)，采用具有靶向乳腺癌细胞的核酸适配体进行封孔，包括以下步骤：
(1)、制备介孔MnO2纳米颗粒：将十二烷基苯磺酸钠(SDBS)2～3g溶于15～20ml的超纯水中，70℃搅拌15min，加入溶有1～2g的KMnO4的超纯水溶液15-20ml中，70℃搅拌15min，再逐滴加入2mol/L的硝酸溶液6ml，70℃搅拌反应3h，用水或乙醇洗至中性，12000r/min离心10min，沉淀烘干，250℃煅烧3h，成介孔MnO2纳米颗粒；
(2)、装载光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)：取2mg/ml的血卟啉单甲醚(HMME)甲醇溶液2ml，再加入1mg/ml的介孔MnO2纳米颗粒甲醇溶液2ml，混匀，超声2h，45℃旋干，用pH7.4的PBS缓冲液溶解，12000r/min离心10min，用pH7.4的PBS缓冲液冲洗两遍，得装载光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)的介孔MnO2纳米颗粒；
(3)、核酸适配体前处理：取浓度100μM的ssDNA 5'-HS-TTT CCC AGT TGA TCC TTTGGA TAC CCT GGG-3'200μL，在95℃放置5分钟，变成直线单链，冷却至室温，5'端第二个碱基对与3'端第一个碱基对(共六个碱基)互补配对，形成发卡状，成发卡状核酸适配体；
(4)、封孔及连接靶头：将发卡状核酸适配体加入到载药2mg载体/5OD的装载光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)的介孔MnO2纳米颗粒中，在摇床中反应12小时，使核酸适配体尽可能多的固定到装载光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)的介孔MnO2纳米颗粒表面。
本发明方法简单，易操作，原料丰富，成本低，使用效果好，利用二氧化锰的光猝灭作用，从肿瘤环境和肿瘤细胞的氧化应激机制两方面出发，利用二氧化锰兼具供氧和降低细胞内GSH的作用，为PDT过程中ROS的上游和下游扫清障碍，利用核酸适配体兼具识别肿瘤细胞及智能调控PDT双重功能，使所构建的PDT体系能够“自主”的识别肿瘤细胞，在确诊后“自主”开启PDT，具有肿瘤治疗的“主观能动性”，避免了PDT的光敏毒性，利于疾病的治疗和患者身体健康，有显著的经济和社会效益。
具体实施方式
以下结合具体情况对本发明的具体实施方式作详细说明。
本发明在具体实施中，可由以下实施例给出。
实施例1
本发明在具体实施中，一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，所述的制备介孔MnO2纳米颗粒，将十二烷基苯磺酸钠(SDBS)2.5g装入EP管中，加入超纯水18ml溶解，70℃搅拌15min，加入溶有1.5g的KMnO4的超纯水溶液18ml中，70℃搅拌15min，再逐滴加入2mol/L的硝酸溶液6ml，70℃搅拌反应3h，用水或乙醇洗至中性，12000r/min离心10min，沉淀烘干，250℃煅烧3h，成介孔MnO2纳米颗粒；
(2)、装载光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)：取2mg/ml的血卟啉单甲醚(HMME)甲醇溶液2ml置于圆底烧瓶中，再加入1mg/ml的介孔MnO2纳米颗粒甲醇溶液2ml，混匀，超声2h，45℃旋干，用pH7.4的PBS缓冲液溶解，12000r/min离心10min，用pH7.4的PBS缓冲液冲洗两遍，得装载光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)的介孔MnO2纳米颗粒；
(3)、核酸适配体前处理：取浓度100μM的ssDNA 5'-HS-TTT CCC AGT TGA TCC TTTGGA TAC CCT GGG-3'200μL，在95℃放置5分钟，变成直线单链，冷却至室温，5'端第二个碱基对与3'端第一个碱基对(共六个碱基)互补配对，形成发卡状，成发卡状核酸适配体；
(4)、封孔及连接靶头：将发卡状核酸适配体加入到载药2mg载体/5OD的装载光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)的介孔MnO2纳米颗粒中，在摇床中反应12小时，使核酸适配体尽可能多的固定到装载光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)的介孔MnO2纳米颗粒表面。
实施例2
本发明在具体实施中，一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，所述的制备介孔MnO2纳米颗粒：将十二烷基苯磺酸钠(SDBS)2g溶于16ml的超纯水中，70℃搅拌15min，加入溶有1.2g的KMnO4的超纯水溶液16ml中，70℃搅拌15min，再逐滴加入2mol/L的硝酸溶液6ml，70℃搅拌反应3h，用水或乙醇洗至中性，12000r/min离心10min，沉淀烘干，250℃煅烧3h，成介孔MnO2纳米颗粒。
实施例3
本发明在具体实施中，一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，所述的制备介孔MnO2纳米颗粒：将十二烷基苯磺酸钠(SDBS)1.8g溶于19ml的超纯水中，70℃搅拌15min，加入溶有1.8g的KMnO4的超纯水溶液19ml中，70℃搅拌15min，再逐滴加入2mol/L的硝酸溶液6ml，70℃搅拌反应3h，用水或乙醇洗至中性，12000r/min离心10min，沉淀烘干，250℃煅烧3h，成介孔MnO2纳米颗粒。
本发明制备方法简单，易生产，成本低，使用效果好，其产品可有效用于肿瘤光动力治疗，实现具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统在制备治疗肿瘤药物中的应用，并经有关实验取得了非常满意的有益技术效果，有关试验情况如下：
对介孔MnO2纳米颗粒进行透射电子显微镜表征，结果证明介孔MnO2纳米颗粒的粒径在200nm左右，粒径均匀，介孔明显，为球形颗粒。
实验1：对谷胱甘肽的影响试验
配制50μg/ml的MnO2溶液，100μg/ml的GSH溶液；
取96孔板，分别加入100μg/ml的GSH溶液100μl六个空，分两组，每组3个孔，一组加入50μl的配制好的MnO2溶液，另一组加入50μl的超纯水，加入谷胱甘肽检测试剂，充分混匀，反应5min，405nm处，酶标仪测定各孔吸光度；
根据吸光度可以看出，加介孔MnO2纳米颗粒溶液的吸光度与空白孔结果没有差别，说明介孔MnO2纳米颗粒可以与谷胱甘肽反应。
实验2：荧光猝灭作用实验
(1)配制1μg/ml的HMME溶液、1.2μg/ml的介孔MnO2纳米颗粒溶液，稀释上述最终制剂按HMME浓度为1μg/ml，此时制剂中介孔MnO2纳米颗粒溶液的浓度为1.2μg/ml；
(2)分别测荧光强度，激发波长：388nm；
结果表明单纯MnO2在613处没有峰，HMME在613处峰值在156，而本发明具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统在此处峰值为29，对比单纯HMME峰值大大降低了，说明介孔MnO2纳米颗粒装载HMME后，对其具有荧光猝灭作用。
实验3：Mn2+的核磁成像作用实验
配制0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml介孔MnO2纳米颗粒溶液；
配制2μM的GSH溶液；
取24孔板依次将配制好的0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml MnO2溶液加入孔中，每孔0.9ml，每个浓度加两个孔分两组，一组各加0.1ml配制好的GSH溶液，一组加超纯水，充分反应，做核磁成像；
结果表明未用GSH处理的介孔MnO2纳米颗粒，磁共振效果不明显，经过GSH处理的介孔MnO2纳米颗粒，由于介孔MnO2纳米颗粒与GSH反应，Mn4+被还原成Mn2+，因此具有磁共振成像的特性，并且Mn2+的浓度越高，所表现出来的磁共振特性越明显。
实验4：改善肿瘤组织缺氧状况实验
(1)小鼠模型的构建：
取健康裸鼠(购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，许可证号：SYXK(豫)(2012-0006)，将100万人乳腺癌细胞(MCF-7)混悬液接种到小鼠右前肢的腋下皮肤下，并且定期用游标卡尺测量其肿瘤的长径(A)与短径(B)，按下述公式计算肿瘤体积：
Figure BDA0001435999000000051
当按照上述公式计算得到裸鼠的瘤体积≥100mm3时，则认为小鼠肿瘤模型构建成功，可应用于以后各项实验。
(2)MnO2对肿瘤组织缺氧状况的考察
取上述制剂配成400μg/ml(HMME)，此时MnO2浓度为480μg/ml。
随机取六只裸鼠模型，分两组，通过尾静脉注射分别将0.2ml的HMME(400μg/ml)、MnO2(480μg/ml)溶液注射进裸鼠体内，隔天给药(7次)，解剖裸鼠，取肿瘤组织做免疫组化，观察组织缺氧状况，两组对照。结果：HMME组较MnO2荧光强度强，说明HMME组缺氧状况明显，进一步说明MnO2可以改善组织缺氧状况。
与空白组对比可知HMME消耗肿瘤组织氧气，MnO2能够一定程度上改善肿瘤组织缺氧的情况，制剂组与游离HMME组对比进一步证明了MnO2能够改善肿瘤组织缺氧。
实验5：活性氧猝灭作用试验
铺六孔板10个孔(MCF-7和Bst各5个)分别加空白培养基、含MnO2、HMME、MnO2-F68@HMME、MnO2-DNA@HMME 5μg/ml的培养基两毫升，孵育4h，532(1w)激光照射，每孔2min，10min后，加入活性氧检测试剂(12μl/12ml无血清培养基)，每孔1ml，培养箱孵育20min，吸去培养基，PBS洗两遍，不含EDTA咦酶每孔500μl，消化90s收集细胞，PBS洗3遍(1000rpm、6min)最后重悬在500μl的PBS中，测流式。
结果可以看出，MCF-7和Bst组，MnO2(A02)、HMME(A03)、MnO2-F68@HMME(A05)组活性氧无明显区别，而MnO2-DNA@HMME组MCF-7活性氧的产生远高于Bst，这是由于在MCF-7细胞中，HMME被释放出来，532激光照射，产生ROS，而在Bst细胞中，药物不能释放出来，532激光照射时，因MnO2的猝灭作用，不能产生ROS，因此降低治疗时HMME对正常细胞的毒副作用，实现选择性治疗。
实验充分证明，本发明利用介孔二氧化锰的光敏剂猝灭作用，抑制其产生活性氧的作用，以介孔MnO2为基体包封光敏剂，使光敏剂在MnO2介孔中处于关闭状态不会产生光疗作用，只有在肿瘤部位时，MnO2介孔被打开，光敏剂释放，从而降低光动力治疗毒性，增加患者顺从性。同时在肿瘤的酸性环境及活性氧的作用下，MnO2逐渐被溶解为Mn2+，Mn2+与蛋白结合后大大增加其磁共振弛豫率，依据磁共振成像准确反映药物递送系统位置，定位激光照射，从而增加光动力治疗体系的疗效。用特定序列的核酸适配体对其进行表面修饰，构建出一种可同时实现光疗、核磁成像于一体的诊断治疗多功能靶向的给药系统，来提高抗肿瘤的效率，降低毒副作用并实现肿瘤的高效诊断，并最终用于对肿瘤病人的诊断和治疗。
本发明有效克服了现有光动力学治疗药物的缺点与不足，利用二氧化锰的光猝灭作用，从肿瘤环境和肿瘤细胞的氧化应激机制两方面出发，利用二氧化锰兼具供氧和降低细胞内GSH的作用，为PDT过程中ROS的上游和下游扫清障碍，利用核酸适配体兼具识别肿瘤细胞及智能调控PDT双重功能，使所构建的PDT体系能够“自主”的识别肿瘤细胞，在确诊后“自主”开启PDT，具有肿瘤治疗的“主观能动性”，避免了PDT的光敏毒性。
本发明提供了具有光猝灭作用的纳米载体材料，并提供了所述纳米药物系统的制备方法。本发明提供了具有分子识别作用及开关可控的新型光动力学纳米治疗系统，制备简便、无光毒性、长循环特性、靶向性等优势，可以提高药物的生物利用率。
本发明与现有技术相比，具有以下突出技术特点：
本发明介孔二氧化锰作为纳米载体在体内具有长循环特性，利用二氧化锰的光猝灭作用，从肿瘤环境和肿瘤细胞的氧化应激机制两方面出发，利用二氧化锰兼具供氧和降低细胞内GSH及核磁成像以及特定核酸序列与MCF-7表面蛋白特异性结合的作用构建出一种可同时实现光疗、核磁成像于一体的开关型多功能靶向光动力学给药系统，来提高抗肿瘤的效率，避免了PDT的光敏毒性。除此之外，该系统还具备纳米载体的EPR效应，有效用于光动力治疗肿瘤，开拓了肿瘤治疗用药的新途径，提高了药物的利用率和疗效，经济和社会效益显著。
申请人要指出的是，上述给出的仅是具体的实施例，是用于说明本发明的具体实施方式，而不是用于限制本发明的保护范围，凡是采用等同、等效替换手段所作出的(改进或润饰)本质上与本发明相同的技术方案，均属于本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，其特征在于，介孔MnO2装载光敏剂血卟啉单甲醚，采用具有靶向乳腺癌细胞的核酸适配体进行封孔，包括以下步骤：
(1)、制备介孔MnO2纳米颗粒：将十二烷基苯磺酸钠2~3g溶于15~20ml的超纯水中，70℃搅拌15min，加入溶有1~2g的KMnO4的超纯水溶液15-20ml中，70℃搅拌15min，再逐滴加入2mol/L的硝酸溶液6ml，70℃搅拌反应3h，用水或乙醇洗至中性，12000r/min离心10min，沉淀烘干，250℃煅烧3h，成介孔MnO2纳米颗粒；
(2)、装载光敏剂血卟啉单甲醚：取2mg/ml的血卟啉单甲醚甲醇溶液2ml，再加入1mg/ml的介孔MnO2纳米颗粒甲醇溶液2ml，混匀，超声2h，45℃旋干，用pH7.4的PBS缓冲液溶解，12000r/min离心10min，用pH7.4的PBS缓冲液冲洗两遍，得装载光敏剂血卟啉单甲醚 的介孔MnO2纳米颗粒；
(3)、核酸适配体前处理：取浓度100μM的ssDNA 5'-HS- TTT CCC AGT TGA TCC TTTGGA TAC CCT GGG-3' 200μL，在95℃放置5分钟，变成直线单链，冷却至室温，5'端第二个碱基对与3'端第一个碱基对互补配对，形成发卡状，成发卡状核酸适配体；
(4)、封孔及连接靶头：将发卡状核酸适配体加入到载药2mg载体/5OD的装载光敏剂血卟啉单甲醚 的介孔MnO2纳米颗粒中，在摇床中反应12小时，使核酸适配体固定到装载光敏剂血卟啉单甲醚的介孔MnO2纳米颗粒表面。
2.根据权利要求1所述的具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)、制备介孔MnO2纳米颗粒：将十二烷基苯磺酸钠2.5g装入EP管中，加入超纯水18ml溶解，70℃搅拌15min，加入溶有1.5g的KMnO4的超纯水溶液18ml中，70℃搅拌15min，再逐滴加入2mol/L的硝酸溶液6ml，70℃搅拌反应3h，用水或乙醇洗至中性，12000r/min离心10min，沉淀烘干，250℃煅烧3h，成介孔MnO2纳米颗粒；
(2)、装载光敏剂血卟啉单甲醚：取2mg/ml的血卟啉单甲醚甲醇溶液2ml置于圆底烧瓶中，再加入1mg/ml的介孔MnO2纳米颗粒甲醇溶液2ml，混匀，超声2h，45℃旋干，用pH7.4的PBS缓冲液溶解，12000r/min离心10min，用pH7.4的PBS缓冲液冲洗两遍，得装载光敏剂血卟啉单甲醚 的介孔MnO2纳米颗粒；
(3)、核酸适配体前处理：取浓度100μM的ssDNA 5'-HS- TTT CCC AGT TGA TCC TTTGGA TAC CCT GGG-3' 200μL，在95℃放置5分钟，变成直线单链，冷却至室温，5'端第二个碱基对与3'端第一个碱基对互补配对，形成发卡状，成发卡状核酸适配体；
(4)、封孔及连接靶头：将发卡状核酸适配体加入到载药2mg载体/5OD的装载光敏剂血卟啉单甲醚 的介孔MnO2纳米颗粒中，在摇床中反应12小时，使核酸适配体固定到装载光敏剂血卟啉单甲醚 的介孔MnO2纳米颗粒表面。
3.根据权利要求1所述的具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述的制备介孔MnO2纳米颗粒：将十二烷基苯磺酸钠2g溶于16ml的超纯水中，70℃搅拌15min，加入溶有1.2g的KMnO4的超纯水溶液16ml中，70℃搅拌15min，再逐滴加入2mol/L的硝酸溶液6ml，70℃搅拌反应3h，用水或乙醇洗至中性，12000r/min离心10min，沉淀烘干，250℃煅烧3h，成介孔MnO2纳米颗粒。
4.根据权利要求1所述的具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法，其特征在于，所述的制备介孔MnO2纳米颗粒：将十二烷基苯磺酸钠1.8g溶于19ml的超纯水中，70℃搅拌15min，加入溶有1.8g的KMnO4的超纯水溶液19ml中，70℃搅拌15min，再逐滴加入2mol/L的硝酸溶液6ml，70℃搅拌反应3h，用水或乙醇洗至中性，12000r/min离心10min，沉淀烘干，250℃煅烧3h，成介孔MnO2纳米颗粒。
CN201710964499.1A 2017-10-17 2017-10-17 一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法 Active CN107899013B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710964499.1A CN107899013B (zh) 2017-10-17 2017-10-17 一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710964499.1A CN107899013B (zh) 2017-10-17 2017-10-17 一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107899013A CN107899013A (zh) 2018-04-13
CN107899013B true CN107899013B (zh) 2020-01-14

Family

ID=61840503

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710964499.1A Active CN107899013B (zh) 2017-10-17 2017-10-17 一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107899013B (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109316465A (zh) * 2018-11-02 2019-02-12 孙世国 一种无机纳米可生物降解多靶点靶向智能给药系统、其制备方法及应用
CN111298133B (zh) * 2020-03-02 2022-04-29 郑州大学 一种岩藻多糖包被的门控型介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法及其应用
CN111544594A (zh) * 2020-05-11 2020-08-18 南京大学 基于免疫疗法和化学疗法相结合的多功能纳米材料及其制备方法和应用
CN112741903B (zh) * 2021-01-13 2022-06-28 长沙医学院 一种dna/纳米复合物及其制备方法与应用
CN114053227A (zh) * 2021-10-13 2022-02-18 江苏大学 一种表面镶有金属化合物颗粒的多功能纳米粒及其制备方法和抗肿瘤中的应用
CN114668853B (zh) * 2022-03-10 2023-08-04 东华大学 一种含大蒜素的肿瘤原位响应的纳米颗粒及其制备和应用
CN114949247B (zh) * 2022-04-29 2023-09-05 中南大学湘雅医院 一种可稳定装载dna的杂化纳米粒及其制备方法与应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102869446A (zh) * 2010-03-02 2013-01-09 阿卜杜拉国王科技大学 高比表面积纤维二氧化硅纳米颗粒
CN107349211A (zh) * 2017-07-26 2017-11-17 苏州大学 一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102869446A (zh) * 2010-03-02 2013-01-09 阿卜杜拉国王科技大学 高比表面积纤维二氧化硅纳米颗粒
CN107349211A (zh) * 2017-07-26 2017-11-17 苏州大学 一种空心MnO2复合纳米材料、其制备方法及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Hollow Manganese Oxide Nanoparticles as Multifunctional Agents for Magnetic Resonance Imaging and Drug Delivery;Jongmin Shin等;《Functional Nanoparticles》;20081128;第48卷;第5490–5498页 *
Modulation of Hypoxia in Solid Tumor Microenvironment with MnO 2 Nanoparticles to Enhance Photodynamic Therapy;Wenwen Zhu等;《Advanced Functional Materials》;20160520;第26卷;第321-324页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN107899013A (zh) 2018-04-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107899013B (zh) 一种具有光动力学治疗开关效应及分子识别作用的介孔二氧化锰纳米载药系统的制备方法
Liu et al. Recent advances of AIE light-up probes for photodynamic therapy
Liang et al. Core-shell structured upconversion nanocrystal-dendrimer composite as a carrier for mitochondria targeting and catalase enhanced anti-cancer photodynamic therapy
Chen et al. NIR-II light activated photodynamic therapy with protein-capped gold nanoclusters
Wang et al. Carbon dots as a new class of nanomedicines: opportunities and challenges
Xu et al. Highly emissive dye-sensitized upconversion nanostructure for dual-photosensitizer photodynamic therapy and bioimaging
Jin et al. Near-infrared light-regulated cancer theranostic nanoplatform based on aggregation-induced emission luminogen encapsulated upconversion nanoparticles
Wang et al. Light-induced hypoxia-triggered living nanocarriers for synergistic cancer therapy
Li et al. Self-assembly of monomeric hydrophobic photosensitizers with short peptides forming photodynamic nanoparticles with real-time tracking property and without the need of release in vivo
Dong et al. Chemical modulation of glucose metabolism with a fluorinated CaCO3 nanoregulator can potentiate radiotherapy by programming antitumor immunity
Jin et al. Multifunctional DNA polymer-assisted upconversion therapeutic nanoplatform for enhanced photodynamic therapy
Yang et al. Self-illuminating photodynamic therapy with enhanced therapeutic effect by optimization of the chemiluminescence resonance energy transfer step to the photosensitizer
CN103585644A (zh) 一种聚乙二醇修饰的磁性纳米颗粒及其应用
Liu et al. Degradable calcium phosphate-coated upconversion nanoparticles for highly efficient chemo-photodynamic therapy
Zhao et al. Multifunctional magnetic nanoparticles for simultaneous cancer near-infrared imaging and targeting photodynamic therapy
Yang et al. In-situ fabrication of novel Au nanoclusters-Cu2+@ sodium alginate/hyaluronic acid nanohybrid gels for cuproptosis enhanced photothermal/photodynamic/chemodynamic therapy via tumor microenvironment regulation
Lv et al. Degradable magnetic-response photoacoustic/up-conversion luminescence imaging-guided photodynamic/photothermal antitumor therapy
CN107469079B (zh) 一种t1-mri成像引导下的光动治疗剂制备方法
Zhu et al. Sonodynamic cancer therapy by novel iridium-gold nanoassemblies
Hu et al. 808 nm near-infrared light-excited UCNPs@ mSiO2-Ce6-GPC3 nanocomposites for photodynamic therapy in liver cancer
Sun et al. Boosting Type-I and Type-II ROS Production of Water-Soluble Porphyrin for Efficient Hypoxic Tumor Therapy
Feng et al. Polydopamine-based multifunctional antitumor nanoagent for phototherapy and photodiagnosis by regulating redox balance
Hu et al. A thermally activated delayed fluorescence photosensitizer for photodynamic therapy of oral squamous cell carcinoma under low laser intensity
Wang et al. Trace-Water-Induced Competitive Coordination Synthesis and Functionalization of Porphyrinic Metal–Organic Framework Nanoparticles for Treatment of Hypoxic Tumors
Dong et al. GQDs/hMSN nanoplatform: Singlet oxygen generation for photodynamic therapy

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant