CN107335029A - 一种清肠温中颗粒的制备方法 - Google Patents

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Abstract

一种清肠温中颗粒的制备方法，包括以下步骤：取黄连、三七、青黛，加8‑12倍量的50‑80v％的乙醇回流提取，提取液经过滤、离心、浓缩、干燥，得干膏粉I；取苦参、煨木香、地榆炭、炮姜、甘草，加8‑12倍量的水回流提取，将提取液过滤、浓缩，加乙醇至醇浓度达50‑70v％，静置，过滤，滤液浓缩、干燥得干膏粉II；将干膏粉I与干膏粉II的混合物制粒，干燥，整粒，即得。本发明分别采用不同提取方法和溶剂对原料药进行提取，使各药材的有效成分提取更加完全，提取物中有效成分的含量更高。

Description

一种清肠温中颗粒的制备方法
技术领域
本发明涉及中药制备领域，具体涉及一种清肠温中颗粒的制备方法。
背景技术
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)，又名慢性非特异性溃疡性结肠炎，是一种原因不明的慢性结肠炎，病变主要限于结肠的粘膜，表现为炎症或溃疡，多累及直肠和远端结肠，也可向近端扩展以至遍及整个结肠，其临床特点为有持续性或反复发作粘液血便、腹痛伴有不同程度的全身症状。在治疗方面，虽然切除全部病变的结、直肠可完全治愈此病，但付出的代价将是有可能从此终身腹部回肠造口。中医治疗溃疡性结肠炎的临床经验方有清肠温中方，其包括黄连、炮姜、苦参、三七、木香、青黛、地榆炭、甘草等八味中药，临床以汤剂形式使用，存在煎煮麻烦，口服体积大，患者顺应性差，携带、使用、贮藏不便、稳定性差等缺点，给临床使用上带来诸多不便。
为此，专利WO2015077977A1公开了一种用于治疗溃疡性结肠炎的中药组合物的制备方法，该方法是将黄连、炮姜、苦参、三七、木香、青黛、地榆炭、炙甘草等八味中药分别粉碎成细粉后混合或混合后粉碎成细粉，过100-150目筛，加入常规辅料制成颗粒剂；或是将上述八味中药混合，加水煎煮两次，滤过，合并滤液，上清液于60℃浓缩至相对密度为1.2-1.25的浸膏，加入常规辅料制成颗粒剂；又或是将上述八味中药混合粉碎成粗粉，加4-12倍药物重量的55-75％乙醇，浸渍12-48小时后，对药液加热保持药液温度为30-40℃，强制循环3-4小时，过滤，醇提液中加入常规辅料制成颗粒剂。上述技术或直接将药材粉碎入药或采用水煎煮或醇提的方法制成中药颗粒剂，虽然克服了汤剂的缺陷，但上述诸方法均没有充分考虑到药材中有效成分的药理作用和化学性质，故而对药材有效成分的提取并不充分，因此会带来服用剂量大，疗效欠佳的问题。
有鉴于上述原因，如何对清肠温中方颗粒剂的提取及成型工艺进行优化，以期在减少用量的同时显著提高药效，从而为患者提供更好的治疗溃疡性结肠炎的药物，成为本领域技术人员的追求目标。
发明内容
本发明所要解决的是现有的清肠温中方颗粒剂的制备方法所制得的清肠温中颗粒的服用剂量大、疗效欠佳的技术问题，进而提供一种可最大限度保留药材中有效成分的清肠温中颗粒的制备方法。
为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：
一种清肠温中颗粒的制备方法，包括以下步骤：
S1：取黄连、三七、青黛，加8-12倍量的50-80v％的乙醇回流提取，提取液经过滤、离心、浓缩、干燥，得干膏粉I；
S2：取苦参、煨木香、地榆炭、炮姜、甘草，加8-12倍量的水回流提取，将提取液过滤、浓缩，加乙醇至醇浓度达50-70v％，静置，过滤，滤液浓缩、干燥后得干膏粉II；
S3：将干膏粉I与干膏粉II的混合物制粒，干燥，整粒，即得。
其中，步骤S1和步骤S2中至少提取2次，每次1-3h。
其中，步骤S1中离心转速3000-9000rpm/min，时间5-15min。
其中，步骤S1和步骤S2中，浓缩时的温度为60-80℃。
其中，步骤S1中浓缩至相对密度为1.15～1.30；步骤S2中，将所述提取液浓缩至相对密度为1.00～1.20。
其中，步骤S1中，干燥温度为45-55℃；步骤S2中，干燥温度为50-80℃。
其中，步骤S2中静置温度0-10℃，时间8-16h。
其中，步骤S3中，将干膏粉I和干膏粉II的混合物与赋形剂按质量比2∶1-2∶3混合均匀，加入90～95v％的乙醇制软材，过筛制粒；所述赋形剂为糊精和/或乳糖。
进一步地，所述制粒还包括二次制粒，所用粘合剂为90-95％乙醇，以提高颗粒的成型率。
优选地，包括如下步骤：
S1：取黄连、三七、青黛，加8-12倍量的60-70v％的乙醇回流提取2-3次，每次1-2h，合并提取液，过滤，于5000-7000rpm/min下离心5-10min，离心液减压浓缩至60℃下相对密度为1.15～1.30的浸膏，而后于45-55℃干燥，得干膏粉I；
S2：取苦参、煨木香、地榆炭、炮姜、甘草，加10-12倍量的水回流提取2-3次，每次1-2h，合并提取液，过滤，于60-80℃浓缩得60℃下相对密度为1.05～1.10的药液，加乙醇至醇浓度达60v％，而后于4-8℃下静置10-12h，过滤，滤液于60-80℃浓缩、50-80℃干燥后得干膏粉II；
S3：将干膏粉I和干膏粉II的混合物与糊精按质量比2∶1混合均匀，加入95v％的乙醇制软材，过筛制粒，将颗粒置于45-55℃下干燥，整粒，即得。
优选地，所述清肠温中颗粒的原料药包括如下重量份的组分：
本发明中的v％代表体积百分含量；术语“倍量”指的是溶剂的体积与药材的重量之比，体积与重量的关系为mL/g。
本发明中黄连为毛莨科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptisdeltoidea C.Y.Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎；炮姜为姜科植物姜Zingiber officinale Rose.的干燥根茎；三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根和根茎；青黛为爵床科植物马蓝Baphicacanthus cusia(Nees)Bremek.、蓼科植物蓼蓝Polygonum tinctorium Ait.或十字花科植物菘蓝Isatisindigotica Fort.的叶或茎叶；苦参为豆科植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根；地榆炭为蔷薇科植物地榆Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆Sanguisorbaofficinalis L.var.longifolia(Bert.)Yu et Li的干燥根；煨木香为菊科植物木香Aucklandia lappa Decne.的干燥根；甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensisFisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflate Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根茎。
本发明的技术方案，具有如下优点：
1.本发明提供的清肠温中颗粒的制备方法，充分考虑到清肠温中方中各药味有效成分的药理作用和化学性质，对黄连、三七、青黛采取醇提，而对苦参、煨木香、地榆炭、炮姜、甘草进行水提醇沉，从而最大限度地将各药材中的有效成分完全提取出来，使得提取物中有效成分的含量达到最高，有效解决了采用现有清肠温中方颗粒剂的制备方法所制得的清肠温中颗粒的服用剂量大、疗效欠佳的问题。
2.本发明提供的清肠温中颗粒的制备方法，通过进一步严格控制醇提和水提醇沉的各工艺条件，在确保最大提取率的同时也可有效防止药材中的有效成分遭到破坏，从而更好地保留药材中的有效成分。
3.本发明提供的清肠温中颗粒的制备方法所制得的清肠温中颗粒外观良好，色泽均匀，吸湿性得到改善，溶化性好，成型工艺稳定可行。
4.本发明采用高效液相色谱法对清肠温中颗粒中盐酸小檗碱、靛玉红和苦参生物碱含量进行了测定，方法重复性良好，稳定可靠。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例4中浸膏粉与辅料混合后吸湿百分率曲线图；
图2是本发明实施例8中临界相对湿度测定结果曲线图；
图3是本发明实施例8中青黛饮片、青黛饮片与成型颗粒混合、成型颗粒的溶化性效果图；其中，①为青黛饮片；②为青黛饮片与成型颗粒混合；③为成型颗粒。
具体实施方式
下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
所用设备：FW-200型高速万能粉碎机购自北京科伟永兴仪器有限公司；KQ3200DE型数控超声波清洗器购自江苏省昆山市超声仪器有限公司，ZDHM型调温电热套购自北京市中兴伟业仪器有限公司，DZKW-4型电子恒温水浴锅购自北京中兴伟业仪器有限公司，DZF-6050型真空干燥箱购自上海博迅实业有限公司医疗设备厂，JY5002型电子天平(0.01g)购自上海衡平仪器仪表厂，CPA225D型电子天平(0.01mg)购自北京赛多利斯仪器系统有限公司，BS110S型电子天平(0.1mg)购自北京赛多利斯仪器系统有限公司，RE-52A旋转蒸发仪购自上海振捷实验设备有限公司，LC-20AT高效液相色谱仪购自日本岛津公司，Agilent 1260高效液相色谱仪购自美国安捷伦公司，10目筛、80目筛购自浙江省上虞市纱筛厂，AR-1型休止角测定仪购自中国日化研究院，玻璃干燥器，直尺。
试剂来源及规格：黄连(批号：501002642)、三七(批号：401003991)、苦参(批号：501002466)、炮姜(批号：400073196)、地榆炭(批号：401042925)、甘草(批号：401004045)均购于北京同仁堂药材有限责任公司；青黛(批号：1504019)购于北京琪景饮片厂；煨木香(批号：14121602)购于北京能济中药饮片有限公司。对照品表小檗碱(批号：H25F3X1)购于上海源叶生物科技有限公司；黄连碱(批号：3022/17817)购于月旭材料科技(上海)有限公司；盐酸巴马汀(批号：110732-201510)、盐酸小檗碱(批号：110713-201212)、三七皂苷R1(批号：110745-201318)、人参皂苷Rg1(批号：110703-201530)、人参皂苷Rb1(批号：110704-201424)、靛玉红(批号：110717-200204)苦参碱对照品(批号：110805-200508)、氧化苦参碱对照品(批号：110780-201007)均购于中国药品生物制品检定研究院。乙腈(色谱纯)购自Fisher公司，甲醇(色谱纯)购自Fisher公司，糊精(批号：15072201)购自辽宁东源药业有限公司、乳糖(批号：20120712)购自国药集团化学试剂有限公司、可溶性淀粉(批号：20150612)购自天津市福晨化学试剂厂，实验用水为高纯水，其他化学试剂均为分析纯。小鼠白介素-4ELISA试剂盒，肿瘤坏死因子-α抗体，规格0.2ml，MPO试剂盒购自宝生物工程(大连)有限公司。
实施例1 乙醇回流提取工艺考察
1、单因素考察醇提浓度
按处方比例称取青黛6g、三七12g、黄连12g，为1份药材，共称取4份，固定提取次数为2次，每次的溶剂倍量为12倍量，每次提取时间为2h，分别采用50v％、60v％、70v％、80v％乙醇进行提取，考察不同乙醇浓度对指标成分提取率及干膏得率的影响，确定合适的醇提浓度。结果见表1。
表1 单因素考察醇提浓度
注：提取率％＝提取液中指标成分含量/饮片中指标成分含量*100％
结果：乙醇浓度越高，靛玉红提取率越大，60v％、70v％时，靛玉红提取率接近且已达到80％以上；乙醇浓度在60v％、70v％、80v％时，对三七和黄连的提取影响不大。综合三个指标，考虑到大生产低能高效的要求，确定优选的提取溶剂为60v％乙醇。
2、醇提正交试验设计
根据单因素试验结果，固定提取溶剂为60v％乙醇，选取提取次数(A)、提取时间(B)、溶剂倍量(C)为影响因素，各因素设三个水平，采用L9(34)正交试验设计，优选最佳醇提工艺。因素水平表见表2。
表2 因素水平表
按处方比例称取药材9份，每份含青黛6g、三七12g、黄连12g，共计30g，依照表2进行试验。统计处理采用SAS8.0软件，直观分析结果见表3，方差分析结果见表4、表5、表6。
表3 醇提工艺直观分析表
注：提取率％＝提取液中指标成分含量/饮片中指标成分含量*100％
表4 靛玉红提取率方差分析表
表5 三七皂苷提取率方差分析表
表6 黄连生物碱提取率方差分析表
结果：从直观分析得，三个指标的最佳工艺均为A3B3C3。从方差分析得，对于靛玉红，仅A有统计学意义(P＜0.05)；对于三七皂苷，各因素均无统计学意义(P均＞0.05)；对于黄连生物碱，各因素均有统计学意义(P均＜0.05)，因素A三个水平之间的差异较大，因素B的差异主要在B1与B2、B3之间，因素C的差异主要在C1与C2、C3之间，故可调整B选择B2水平，C选择C2水平。因此，调整的醇提最佳工艺条件为A3B2C2，即加60v％乙醇加热回流提取3次，每次1.5小时，每次溶剂倍量为10倍量。
3、醇提工艺比较
正交试验直观分析得最佳醇提工艺为A3B3C3，方差分析调整工艺为A3B2C2，通过比较A3B3C3与A3B2C2工艺，考察工艺调整前后指标成分的提取率及干膏得率有无显著性的差别。另外，正交试验方差分析得提取次数有统计学意义，因此新增了A4B3C3和A4B2C2两个工艺，与A3B3C3和A3B2C2进行比较，确定最终的醇提工艺。结果见表7。
表7 醇提工艺比较结果
注：提取率％＝提取液中指标成分含量/饮片中指标成分含量*100％
结果：由表7得，A3B2C2与A3B3C3比较，各指标成分的提取率及干膏得率没有显著性的差别。考虑到大生产节约时间和成本，调整工艺为A3B2C2是比较合理的。提取4次比提取3次各指标成分提取率均有所增加，其中靛玉红和三七皂苷增加不明显，黄连生物碱增加程度稍微大些，综合各指标来看，四个工艺没有显著的差别。从四个工艺各指标的RSD值也可得出同样的结论。因此，考虑到大生产的高效率低能耗，确定优选出的工艺为A3B2C2，即60v％乙醇加热回流提取3次，每次1.5小时，每次溶剂用量为10倍量。
4、醇提工艺验证试验
按处方比例，称取3份药材，每份含青黛6g、三七12g、黄连12g，按优选工艺A3B2C2进行验证实验，考察工艺的稳定性。验证结果见表8。
表8 醇提工艺验证试验
注：提取率％＝提取液中指标成分含量/饮片中指标成分含量*100％
结果：经过三批验证，A3B2C2工艺重复性好，稳定可行，考虑到大生产节约能源和成本，确定为最佳的提取工艺。
5、离心工艺考察
评价指标为滤纸截留残渣情况、沉淀紧实程度、指标成分保留率。
滤纸截留残渣情况：离心后上清液经滤纸过滤，以滤纸上未截留为佳。
沉淀紧实程度：以沉淀不易晃动，紧实为佳。
指标成分保留率：以成分损失少、保留多为佳。
(1)离心转速考察
通常普通离心转速上千转离心10min可使固液得到很好的分离，故而固定离心时间为10min，对不同离心转速进行考察。
按处方比例称取青黛6g、三七12g、黄连12g，共计30g，按优选工艺A3B2C2进行提取，精密移取提取液4份，每份100mL，分别于3000r/min、5000r/min、7000r/min、9000r/min离心10min，优选最佳的离心转速。结果见表9。
表9 离心转速考察
注：保留率％＝离心液中指标成分含量/未离心提取液中指标成分含量*100％
结果：由表9得，不同转速下，指标成分的含量几乎无损失，结合滤纸上截留残渣计沉淀紧实情况，确定离心10min，转速在5000r/min以上均可达到固液分离要求。
(2)离心时间考察
离心转速考察结果得，离心10min转速5000r/min以上均可达到分离要求。因9000r/min转速太大，易使仪器磨损。故考察离心时间时，只考察了5000r/min和7000r/min下不同时间的情况。结果见表10。
表10 离心时间考察
注：保留率％＝离心液中指标成分含量/未离心提取液中指标成分含量*100％
结果：由表10得，离心时间对指标成分的含量影响不大，结合滤纸上截留残渣计沉淀紧实情况，建议选用的离心参数为5000r/min离心10min或7000r/min离心5min。
6、浓缩干燥工艺考察
(1)浓缩温度考察
按处方比例称取三七288g、黄连288g、青黛144g，共计720g，按优选的提取工艺和离心工艺进行实验(加10倍量60％乙醇，提取3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，混匀，滤液5000r/min离心10min)，离心液备用。精密量取离心液1000mL 3份，分别于60℃、70℃、80℃条件下减压浓缩至相对密度为1.15-1.20(60℃)的药液，放冷，加60％乙醇1000mL复溶，玻璃棒搅拌均匀。精密量取5mL至10mL容量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，测定靛玉红、三七皂苷的含量；精密量取5mL至25mL容量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，测定黄连生物碱的含量。计算不同温度下浓缩前后各指标成分的损失率。结果见表11。
表11 浓缩温度考察
注：损失率％＝(未浓缩离心液中指标成分含量-浓缩液中指标成分含量)/未浓缩离心液中指标成分含量*100％
结果：不同温度下减压浓缩，各成分损失率约在4％～6％，浓缩温度在60～80℃均可。
(2)浓缩的相对密度考察
按处方比例称取三七288g、黄连288g、青黛144g，共计720g，按优选的提取工艺和离心工艺进行实验(加10倍量60％乙醇，提取3次，每次1.5h，滤过，合并滤液，混匀，滤液5000r/min离心10min)，离心液备用。精密量取离心液3000mL 3份，分别80℃减压浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)、1.20～1.25(60℃)、1.25～1.30(60℃)的药液，放冷，加60％乙醇复溶至3000mL，玻璃棒搅拌均匀。精密量取5mL至10mL容量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，测定靛玉红、三七皂苷的含量；精密量取5mL至25mL容量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，测定黄连生物碱的含量。计算不同相对密度条件下各指标成分的损失率。结果见表12。
表12 浓缩相对密度考察
注：损失率％＝(未浓缩离心液中指标成分含量-浓缩液中指标成分含量)/未浓缩离心液中指标成分含量*100％
结果：药液浓缩至不同相对密度后，指标成分的保留率均在90％以上。因此，药液减压浓缩至相对密度1.15-1.30(60℃)之间均可。
(3)干燥温度考察
按处方比例称取三七288g、黄连288g、青黛144g，共计720g，按优选的提取工艺和离心工艺进行实验(加10倍量60％乙醇，提取3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，混匀，滤液于5000r/min离心10min)，离心液浓缩至相对密度为1.25～1.30(60℃)的药液。称取药液4份，每份约30g，分别于50℃、60℃、70℃、80℃条件下减压干燥(-0.06～-0.1MPa)，得干浸膏。干浸膏加60％乙醇复溶至3000mL，玻璃棒搅拌均匀。精密量取5mL至10mL容量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，测定靛玉红、三七皂苷的含量；精密量取5mL至25mL容量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，测定黄连生物碱的含量。计算不同温度下干燥前后各指标成分的损失率。结果见表13。
表13 干燥温度考察
注：损失率％＝(未干燥药液中指标成分含量-药液经干燥后指标成分含量)/未干燥药液中指标成分含量*100％
结果：对于靛玉红，干燥温度为50℃时，成分无损失，60℃～80℃时，损失率高达50％以上；对于三七皂苷，四个温度条件下损失均较低；对于黄连生物碱，温度在50℃～70℃时，损失率较低，80℃时损失达20％以上。综合三个指标，确定温度在50℃时对三个指标成分都有较好的保留。
7、三七粒度考察
对三七粉碎的粒度进行了考察。具体操作如下：
取三七药粉(最粗粉、粗粉、中粉各2份)12g，加60％乙醇回流提取三次，每次1.5小时(每次加300mL)，提取液滤过，放冷，转移至1000mL容量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀。精密量取5mL至10mL容量瓶中，加60％乙醇至刻度，摇匀，测定三七皂苷的含量，结果见表14。
表14 三七粒度考察
结果：三七皂苷含量：粗粉＞最粗粉≈中粉。粗粉与其他两者相比，提取量没有提高太多。且实验过程中发现，三七经粉碎提取后，煎煮液滤过困难。考虑到最粗粉较粗粉来说，煎煮时不易糊化，且过滤相对较易，确定三七在提取时粉碎成最粗粉(过10目筛)较合适。
实施例2 水提工艺考察
1、水提正交试验设计
以苦参生物碱提取率为考察指标，以干膏得率为参考，选取提取次数(A)、提取时间(B)、加水量(C)为影响因素，各因素设三个水平，采用正交设计，优选最佳水提取工艺。因素水平表见表15。
表15 因素水平表
采用SAS8.0进行数据处理，筛选出最佳提取工艺。直观分析结果见表16，方差分析结果见表17。
表16 水提工艺直观分析表
注：提取率％＝提取液中指标成分含量/饮片中指标成分含量*100％
表17 水提工艺方差分析表
结果：从直观分析得，影响因素A＞C＞B，最佳工艺为A3B2C3。从方差分析得，A、B、C三因素均有统计学意义(P均＜0.05)。故优选的水提工艺条件为A3B2C3，即加水提取3次，每次1.5h，每次加水量为12倍量。
2、水提工艺验证试验
按处方比例称取药材3份，每份含苦参15g、炮姜10g、地榆炭15g、煨木香6g、甘草3g，按优选工艺A3B2C3进行验证实验，考察工艺的稳定性。验证结果见表18。
表18 水提工艺验证试验
注：提取率％＝提取液中指标成分含量/饮片中指标成分含量*100％
结果：经过三批验证，A3B2C3工艺重复性好，稳定可行，考虑到大生产节约能源和成本，确定为大生产可参考的最佳提取工艺。此时的干膏得率约为31％。
3、浓缩干燥工艺考察
(1)浓缩温度考察
按处方比例称取苦参90g、炮姜60g、地榆炭90g、煨木香36g、甘草18g，共计294g，按优选的提取工艺进行实验(加12倍量水，提取3次，每次1.5h)，滤过，合并滤液，混匀。精密量取滤液2000mL 3份，分别在60℃、70℃、80℃条件下减压浓缩至相对密度为1.05-1.10(60℃)的药液，放冷，加水复溶至2000mL，玻璃棒搅拌均匀。精密量取10mL于250mL的分液漏斗中，加浓氨水1mL，摇匀，再加氯仿萃取4次，每次50mL。分取下层氯仿层，室温减压回收氯仿至干。残渣加水溶解并定容于10mL容量瓶中，摇匀，测定苦参生物碱的含量，计算不同温度下浓缩前后苦参生物碱的损失率。结果见表19。
表19 水液浓缩温度考察
注：损失率％＝(未浓缩水液中指标成分含量-浓缩后水液中指标成分含量)/未浓缩水液中指标成分
含量*100％
结果：水液在不同温度下减压浓缩，苦参生物碱的损失率约在2％以内，故浓缩温度在80℃以下均可。
(2)浓缩的相对密度考察
按处方比例称取苦参150g、炮姜100g、地榆炭150g、煨木香60g、甘草30g，共计490g，以A3B2C3进行提取，提取液分为五份，其中四份量取相同体积，分别浓缩至4个不同的相对密度范围(60℃)，加入适量乙醇使醇浓度达60v％，4℃低温静置12h，滤过，滤液浓缩，70℃减压干燥得干膏。剩余1份作为空白，量取体积，浓缩成干膏。制备供试品溶液，测定苦参碱、氧化苦参碱含量，计算苦参生物碱的转移率。结果见表20。
表20 单因素考察相对密度
注：转移率％＝醇沉液中指标成分含量/空白提取液中指标成分含量*100％
结果：60v％醇沉时，药液浓缩至相对密度为1.05-1.10(60℃)时，苦参生物碱的转移率最大，故确定最佳的相对密度为1.05～1.10(60℃)。
实施例3 醇沉工艺考察
1、单因素考察醇沉浓度
按处方比例称取苦参150g、炮姜100g、地榆炭150g、煨木香60g、甘草30g，共计490g，以A3B2C3进行提取，提取液分为四份，其中三份量取相同体积，浓缩至相对密度1.05-1.10(60℃)，加入适量乙醇使醇浓度分别达50v％、60v％、70v％，4℃低温静置12小时，滤过，滤液浓缩，得干膏。剩余1份作为空白，量取体积，浓缩成干膏。测定苦参碱、氧化苦参碱含量，计算苦参生物碱的转移率。结果见表21。
表21 单因素考察醇沉浓度
注：转移率％＝醇沉液中指标成分含量/空白提取液中指标成分含量*100％
结果：60v％和70v％醇沉时。苦参生物碱的转移率相当且大于50v％醇沉结果，故确定最终的醇沉浓度为60v％。
2、醇沉工艺验证
按处方比例，称取三份药材，每份含苦参150g、炮姜100g、地榆炭150g、煨木香60g、甘草30g，按优选出的醇沉工艺进行验证试验，考察工艺的稳定性。结果见表22。
表22 醇沉工艺验证试验
注：转移率％＝醇沉液中指标成分含量/空白提取液中指标成分含量*100％
结果：经过三批验证，优选的醇沉工艺重复性好，稳定可行，确定为大生产可参考的最佳醇沉工艺。此时干膏得率约为23％，比醇沉前减少了约8％。
3、浓缩干燥工艺
(1)浓缩温度考察
按处方比例称取苦参180g、炮姜120g、地榆炭180g、煨木香72g、甘草36g，共计588g，按优选的提取工艺进行实验(加12倍量水，提取3次，每次1.5h)，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.05-1.10(60℃)的药液，放冷，加乙醇使含醇量达60v％，4℃静置12h。滤过，分取滤液4份，每份500mL。分别在室温、60℃、70℃、80℃条件下减压浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)的药液，放冷，加水复溶至3000mL，玻璃棒搅拌均匀。精密量取10mL于250mL的分液漏斗中，加浓氨水1mL，摇匀，再加氯仿萃取4次，每次50mL。分取下层氯仿层，室温减压回收氯仿至干。残渣加水溶解并定容于10mL容量瓶中，摇匀，测定苦参生物碱的含量，计算不同温度下浓缩前后苦参生物碱的损失率。结果见表23。
表23 醇沉液浓缩温度考察
注：损失率％＝(室温下浓缩后水液中指标成分含量-其他温度下浓缩后水液中指标成分含量)/室温
下浓缩后水液中指标成分含量*100％
结果：醇沉液在不同温度下减压浓缩，苦参生物碱几乎无损失，故浓缩温度在80℃以下均可。
(2)干燥温度考察
按处方比例称取苦参180g、炮姜120g、地榆炭180g、煨木香72g、甘草36g，共计588g，按优选的水提醇沉工艺进行实验，醇沉液回收乙醇至相对密度为1.20-1.25(60℃)的稠膏。称取稠膏4份，每份约30～40g，分别于50℃、60℃、70℃、80℃条件下减压干燥(-0.06～-0.1MPa)，得干浸膏。干浸膏加水复溶至3000mL，玻璃棒搅拌均匀。精密量取10mL于250mL的分液漏斗中，加浓氨水1mL，摇匀，再加氯仿萃取4次，每次50mL。分取下层氯仿层，室温减压回收氯仿至干。残渣加水溶解并定容于10mL容量瓶中，摇匀，测定苦参生物碱的含量，计算不同温度下干燥前后苦参生物碱的损失率。结果见表24。
表24 干燥温度者察
注：损失率％＝(浓缩液未经干燥指标成分含量-浓缩液经干燥后指标成分含量)/浓缩液未经干燥指标成分含量*100％
结果：50℃～80℃时，苦参生物碱的损失率均在5％以内，故确定温度在80℃以下均可。
实施例4 湿法制粒工艺考察
1、湿润剂的选择
湿法制粒常用的润湿剂为乙醇，故选择乙醇为润湿剂，并考察不同浓度乙醇对制粒的影响。
2、辅料的选择
(1)考察浸膏粉及浸膏粉与辅料混合后的吸湿率
颗粒剂常用的辅料为糊精、乳糖、可溶性淀粉。分别将浸膏粉与上述辅料按2∶1混合均匀后备用。取上述物料适量，置干燥至恒重的称量瓶中，厚约2mm。立即精密称定称量瓶与物料的重量，置于底部盛有NaCl过饱和溶液(相对湿度为75％)的玻璃干燥器中(称量瓶打开)，于室内放置，定时称量。按下式计算吸湿百分率。结果见表25、图1。
表25 吸湿百分率％
结果：浸膏粉放置120h后，吸湿率趋于稳定，高达近25％，说明浸膏粉有较强的吸湿性。加入辅料后，物料的吸湿率均低于17％，浸膏粉的吸湿性均得到改善。且确定辅料的防潮顺序为可溶性淀粉＞糊精≈乳糖，为进一步筛选辅料提供了依据。
(2)考察制粒情况
将浸膏粉与糊精、乳糖、可溶性淀粉分别按2∶1的比例混合均匀，喷入95％乙醇制粒，以软材性状、制粒难易程度、颗粒成型率为评价指标。结果见表26。
软材性状标准：手捏成团，轻压即散。
制粒难易程度：易过筛，结块易捻开。
颗粒成型率测定方法
合格颗粒：能通过一号筛与不能通过五号筛的颗粒总和。
表26 辅料种类考察
结果：三种辅料均能使颗粒成型。其中，加入糊精和乳糖时颗粒的成型率较高，制粒容易。使用可溶性淀粉时，细粉较多，且浸膏粉极易与可溶性淀粉分离，软材极松散，制粒较难。
综上分析可知，考虑到糊精对浸膏粉吸湿性改善程度较好，稳定性好，且价格低廉，故最终选择糊精为赋形剂。
3、辅料用量及润湿剂乙醇浓度的考察
提取纯化工艺研究中，平均每个处方的干膏量约15g，日服用3次，每次服用约5g。实际生产中常见单剂量包装的颗粒剂规格有8g、10g、12g，由此计算出药辅比例上限值为2∶1、1∶1、2∶3。将适量干膏粉与糊精分别按2∶1、1∶1、2∶3的比例混合均匀，分别喷浓度为95v％、90v％、85v％的乙醇制粒。制粒结果见表27。
表27 颗粒剂成型工艺优选试验结果
结果：药辅比为2∶1，95v％乙醇作为润湿剂，制粒容易，颗粒成型率最高。
实施例5 清肠温中颗粒的制备
1、处方：黄连9kg；炮姜9kg；苦参9kg；三七6kg；木香6kg；青黛9kg；地榆炭9kg；甘草3kg；
2、制法：S1：按处方比例称取青黛(包煎)、三七(过10目筛)、黄连混合，加入上述药材10倍量的60v％乙醇回流提取3次，每次1.5小时，提取液滤过，合并滤液，混匀，滤液5000r/min离心10min。离心液在60℃下减压浓缩至相对密度为1.15-1.20(60℃)的药液，于50℃条件下减压干燥(-0.06～-0.1MPa)，粉碎成细粉，得干膏粉I。
S2：将炮姜、苦参、木香、地榆炭、甘草混合，加入上述药材12倍量的水提取3次，每次1.5h，提取液滤过，合并滤液，混匀。滤液在70℃下减压浓缩至相对密度为1.05-1.10(60℃)的药液，放冷，加乙醇使醇浓度达60v％，4℃低温静置12h，滤过，滤液80℃以下减压浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)，于真空干燥箱60℃以下减压干燥，粉碎成细粉，得干膏粉II。
S3：将干膏粉I和干膏粉II混合得浸膏粉，将浸膏粉与糊精按2∶1比例混合均匀，用95％乙醇为润湿剂制软材，过10目筛制粒，将颗粒置于50℃下鼓风干燥，用一号筛(10目筛)和五号筛(80目筛)整粒，即得。
实施例6 清肠温中颗粒的制备
1、处方：黄连7kg；炮姜11kg；苦参7kg；三七8kg；木香8kg；青黛4kg；地榆炭7kg；甘草5kg；
2、制法：S1：按处方比例称取青黛(包煎)、三七(过10目筛)、黄连混合，加入上述药材8倍量的80v％乙醇回流提取2次，每次2小时，提取液滤过，合并滤液，混匀，滤液7000r/min离心5min。离心液在80℃下减压浓缩至相对密度为1.25-1.30(60℃)的药液，于55℃条件下减压干燥(-0.06～-0.1MPa)，粉碎成细粉，得干膏粉I。
S2：将炮姜、苦参、木香、地榆炭、甘草混合，加入上述药材10倍量的水提取2次，每次2h，提取液滤过，合并滤液，混匀。滤液在60℃下减压浓缩至相对密度为1.15-1.2(60℃)的药液，放冷，加乙醇使醇浓度达70v％，4℃低温静置12h，滤过，滤液60℃以下减压浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)，于真空干燥箱50℃以下减压干燥，粉碎成细粉，得干膏粉II。
S3：将干膏粉I和干膏粉II合并得浸膏粉，将浸膏粉与乳糖按1∶1比例混合均匀，用90％乙醇为润湿剂制软材，过10目筛制粒，将颗粒置于55℃下鼓风干燥，用一号筛(10目筛)和五号筛(80目筛)整粒，即得。
实施例7 清肠温中颗粒的制备
1、处方：黄连11kg；炮姜7kg；苦参8kg；三七6kg；木香5kg；青黛11kg；地榆炭11kg；甘草1kg；
2、制法：S1：按处方比例称取青黛(包煎)、三七(过10目筛)、黄连混合，加入上述药材12倍量的70v％乙醇回流提取4次，每次1小时，提取液滤过，合并滤液，混匀，滤液9000r/min离心5min。离心液在70℃下减压浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)的药液，于45℃条件下减压干燥(-0.06～-0.1MPa)，粉碎成细粉，得干膏粉I。
S2：将炮姜、苦参、木香、地榆炭、甘草混合，加入上述药材8倍量的水提取4次，每次1h，提取液滤过，合并滤液，混匀。滤液在80℃下减压浓缩至相对密度为1.00-1.05(60℃)的药液，放冷，加乙醇使醇浓度达50v％，8℃低温静置10h，滤过，滤液70℃以下减压浓缩至相对密度为1.20-1.25(60℃)，于真空干燥箱80℃以下减压干燥，粉碎成细粉，得干膏粉II。
S3：将干膏粉I和干膏粉II合并得浸膏粉，将浸膏粉与糊精按2∶3比例混合均匀，用95％乙醇为润湿剂制软材，过10目筛制粒，将颗粒置于45℃下鼓风干燥，用一号筛(10目筛)和五号筛(80目筛)整粒，即得。
实施例8 颗粒性能考察
1、颗粒流动性考察
采用AR-1型休止角测定仪，测定颗粒的休止角。结果见表28。
表28 颗粒休止角测定表
结果：浸膏粉制粒后，休止角为33.40°＜40°，流动性得到改善。
结论：颗粒休止角小于40°，颗粒流动性良好。
2、颗粒临界相对湿度的测定
取7个干燥器，底层分别放入不同的盐的过饱和溶液，以保持一定的相对湿度。精密称定实施例5已制备的颗粒和浸膏粉各7份，装入恒重的称量瓶中，将称量瓶盖打开，放入上述干燥器中，密闭，置于25℃恒温环境中保持7天，打开干燥器，将称量瓶盖盖严，精密称重。计算干重和湿重，并由此计算颗粒和浸膏粉的吸湿率，绘制吸湿平衡曲线并求出临界相对湿度(CRH)，以吸湿百分率(％)为纵坐标，相对湿度(％)为横坐标作图，得到CRH曲线，作CRH曲线两端切线，其交点的横坐标为临界相对湿度(CRH)。结果见表29、图2。
表29 临界相对湿度测定结果
结果：经SAS8.0处理，得到浸膏粉的拟合方程为y＝e0.04166x，r2＝0.9949(P＜0.0001)；作出两端的切线方程分别为y＝0.46x-16.84和y＝1.96x-134.38，联立两式得，浸膏粉的临界相对湿度为78.36％。颗粒的拟合方程为y＝e0.05357x-1.27047，r2＝0.9774(P＜0.0001)；作出两端的切线方程分别为y＝0.33x-12.48和y＝2.13x-161.11，联立两式得，颗粒的临界相对湿度为82.57％。结果表明，制粒后物料的吸湿性有所改善。实施例6-7制备的颗粒具有同样的效果。
3、颗粒堆密度的测定
分别称取实施例5-7制备的颗粒10g，置50mL量筒中，使其从一定的高度落下，重复50次振动，读取颗粒的体积，共测定三次，计算颗粒的堆密度。结果见表30。
表30 颗粒堆密度的测定
结果：颗粒的平均堆密度为0.534g/mL，可为成品包装袋的大小提供一定的参考。
4、颗粒溶化性考察
(1)分别平行取实施例5-7制备的颗粒，各10g，倒入烧杯中，加热水200mL，搅拌5分钟，立即观察。
结果：颗粒全部溶化有轻微浑浊，无焦屑。
结论：颗粒的溶化性良好。
(2)为从溶化性角度证明醇提工艺(尤其对于青黛极细粉)的可行性，对青黛饮片、青黛饮片与实施例5制备的成型颗粒混合、实施例5制备的成型颗粒的溶化性进行了比较，具体操作如下：
①青黛饮片：称取青黛饮片1g，倒入烧杯中，加热水200mL，搅拌5分钟，立即观察。
②青黛饮片与成型颗粒混合：称取青黛饮片1g，成型颗粒9g，倒入烧杯中，加热水200mL，搅拌5分钟，立即观察。
③成型颗粒：称取成型颗粒10g，倒入烧杯中，加热水200mL，搅拌5分钟，立即观察。
结果如图3所示，青黛饮片未经提取直接用水冲，呈现明显的挂壁和漂浮于水面且有的粘结不分散的情况，成型颗粒的溶化性显示药液澄清。
结论：青黛饮片经优选工艺提取及制剂成型后，所得颗粒溶化性良好，反过来证明了乙醇回流提取青黛的可行性。
本发明的实用性：本方由8味药组成，主治清热燥湿，寒热并调，化瘀止血。用于治疗溃疡性结肠炎寒热错杂，湿热瘀阻证。证见下利脓血，腹部冷痛，里急后重，口干口苦，小便短赤，肛门灼热，苔黄厚腻，脉滑数或濡数。方中黄连、炮姜为君，二者均有良好的止泻功能，黄连清腹中湿热，炮姜温腹中寒湿，相互配伍，取平调寒热之义。苦参、青黛、地榆炭为臣，三者为治疗肠炎的验药。三七、木香为佐，二者配伍，以达行气活血之效。炙甘草为使，气味甘平，能调和寒热，调和诸药，缓急止痛止利，兼有补益作用。方中诸药，均有其针对的病机，相互配伍，能平调寒热，能除寒湿、湿热、滞气、淤血和食积邪气，达到止利之效。
对比例1 清肠温中颗粒的制备
1、处方：同实施例5
2、制法：S1：按照选定重量份数取黄连、炮姜、苦参、三七、木香、青黛、地榆炭、甘草，分别粉碎成细粉后混合或混合后粉碎成细粉，过120目筛；
S2：同实施例5的S3。
对比例2 清肠温中颗粒的制备
1、处方：同实施例5
2、制法：S1：按照选定重量份数取黄连、炮姜、苦参、三七、木香、青黛、地榆炭、甘草混合，加水煎煮二次，第一次加10倍量的水，煎煮1.5h，第二次加8倍量的水，煎煮1.5h，滤过，合并滤液，静置过夜，取上清液浓缩至60℃相对密度为1.2-1.25的浸膏；于50℃条件下减压干燥(-0.06～-0.1MPa)，粉碎成细粉，得浸膏粉。
S2：同实施例5的S3。
对比例3 清肠温中颗粒的制备
1、处方：同实施例5
2、制法：S1：按照选定重量份数取黄连、炮姜、苦参、三七、木香、青黛、地榆炭、炙甘草混合粉碎成粗粉，加8倍量的60v％乙醇，浸渍30小时后，对药液加热保持药液温度为35℃，强制循环3.5小时，过滤，得醇提液，浓缩至60℃相对密度为1.2-1.25的浸膏；于50℃条件下减压干燥(-0.06～-0.1MPa)，粉碎成细粉，得浸膏粉。
S2：同实施例5的S3。
试验例1 药物颗粒剂的有效成分含量测定
采用高效液相色谱法对黄连中盐酸小檗碱、青黛中靛玉红、苦参中苦参生物碱(苦参碱和氧化苦参碱)进行了含量测定，方法学验证证明建立的含量测定方法重复性好，简便可靠，可以达到本制剂质量控制的目的，为制剂质量控制奠定了基础。
1、盐酸小檗碱的含量测定
色谱条件：LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津公司，SPD-M20A PDA检测器，LCSolution色谱工作站)；Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；检测波长：345nm；流速：1.0mL/min；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(50∶50)(每100mL加十二烷基硫酸钠0.17g，再以磷酸调PH4.0值)
供试品溶液的制备：取清肠温中颗粒，研细，取约0.1g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸(100∶1)50mL，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-盐酸(100∶1)补足减失的重量，摇匀。滤过，取续滤液，即得。
对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.10742mg的溶液，即得。
阴性供试品溶液的制备：自制不含黄连的空白制剂，按供试品溶液的制备方法制备，得阴性供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液各10μL，HPLC测定。
2、靛玉红的含量测定
色谱条件：LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津公司，SPD-M20A PDA检测器，LCSolution色谱工作站)；Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6mm×250m℃，5μm)；检测波长：292nm；流速：1.0mL/min；以乙腈-0.1％醋酸(38∶62)为流动相。
供试品溶液的制备：取本品，研细，取约2g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀。滤过，取续滤液，即得。
对照品溶液的制备取靛玉红对照品适量，精密称定，加N，N-二甲基甲酰胺制成每1mL含0.0254mg的溶液，即得。
阴性供试品溶液的制备自制不含青黛的空白制剂，按供试品溶液制备方法制备，得阴性供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液各10μL，HPLC测定。
3、苦参生物碱的含量测定
色谱条件：LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津公司，SPD-M20A PDA检测器，LCSolution色谱工作站)；Merck Purospher STAR RP-C18(4.6mm×250mm，5μm)；检测波长：220nm；流动相组成：甲醇(A)-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液(B)(磷酸调PH值至3.0)梯度洗脱(0～35min，3％A～7％A；50min，7％A；55～75min，3％A)。
供试品溶液的制备：取本品，研细，取约2g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加浓氨水2mL，精密加入二氯甲烷50mL，密塞，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，摇匀。滤过，取续滤液5mL于梨形瓶中，旋蒸至干，加水溶解并定容于10mL容量瓶中，摇匀。滤过，取续滤液，即得。
对照品溶液的制备取苦参碱对照品、氧化苦参碱适量，精密称定，加5％甲醇分别制成每1mL含苦参碱0.40480mg、氧化苦参碱0.39294mg的对照品溶液，即得。
阴性供试品溶液的制备自制不含苦参的空白制剂，按供试品溶液制备方法制备，得阴性供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性供试品溶液各10μL，HPLC测定。
4、结果：取实施例5-7、对比例1-3制备的清肠温中颗粒，按上述建立的含量测定方法测定含量，计算盐酸小檗碱、靛玉红和苦参生物碱的含量。结果见表31。
表31 样品含量测定结果
由上表可知，本发明的制备方法制得的清肠温中颗粒中，盐酸小檗碱的平均含量为16.53mg/g，靛玉红的平均含量为0.11mg/g，苦参生物碱的平均含量为4.90mg/g，均明显高于对比例1-3。
试验例2 药物颗粒剂治疗溃疡性结肠炎的疗效
治疗组：本发明实施例5；对照组1：本发明对比例1；对照组2：本发明对比例2；对照组3：本发明对比例3；对照组4：美沙拉嗪。
1、临床资料治疗组30例中男15例，女15例；对照组1 30例中男18例，女12例；对照组2 30例中男12例，女18例；对照组3 30例中男18例，女12例；对照组4 30例中男12例，女18例；年龄18-60岁，病程3个月-9年，五组资料经统计学处理无明显性差异。
2、病例选择五组患者均有不同程度的腹痛、腹泻、黏液便等临床表现，结肠镜下均可见黏膜充血、水肿、粗糙颗粒状，多发性浅表糜烂和溃疡。
3、治疗方法服用清肠温中颗粒(实施例5)，口服，一次6g，一日3次，一月为一疗程；
对照组1：本发明对比例1，口服，一次10g，一日3次，一月为一疗程；
对照组2：本发明对比例2，口服，一次9g，一日3次，一月为一疗程；
对照组3：本发明对比例3，口服，一次8g，一日3次，一月为一疗程；
对照组4：美沙拉嗪组，口服，一次1g，一日3次，一月为一疗程。
治疗期间所有受试者不加用其它药物治疗。
4、治疗结果
疗效评定标准：1)痊愈：腹泻、腹痛、黏液脓血便及里急后重症状消失，肠镜检查肠黏膜恢复正常；2)显效：上述症状减轻，肠黏膜病变改善；3)无效：上述症状及肠黏膜均无改善。五组疗效比较，见表32。
表32 五组药物治疗效果
由上表可知，治疗组痊愈率、总有效率均明显优于对照组1-4。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，均属本发明的保护范围之内。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (10)

1.一种清肠温中颗粒的制备方法，包括以下步骤：
S1：取黄连、三七、青黛，加8-12倍量的50-80v％的乙醇回流提取，提取液经过滤、离心、浓缩、干燥，得干膏粉I；
S2：取苦参、煨木香、地榆炭、炮姜、甘草，加8-12倍量的水回流提取，将提取液过滤、浓缩，加乙醇至醇浓度达50-70v％，静置，过滤，滤液浓缩、干燥得干膏粉II；
S3：将干膏粉I与干膏粉II的混合物制粒，干燥，整粒，即得。
2.根据权利要求1所述的清肠温中颗粒的制备方法，其特征在于，步骤S1和步骤S2中至少提取2次，每次1-3h。
3.根据权利要求1或2所述的清肠温中颗粒的制备方法，其特征在于，步骤S1中离心转速3000-9000rpm/min，时间5-15min。
4.根据权利要求1-3任一项所述的清肠温中颗粒的制备方法，其特征在于，步骤S1和步骤S2中，浓缩时的温度为60-80℃。
5.根据权利要求1-4任一项所述的清肠温中颗粒的制备方法，其特征在于，步骤S1中浓缩至相对密度为1.15～1.30；步骤S2中，将所述提取液浓缩至相对密度为1.00～1.20。
6.根据权利要求1-5任一项所述的清肠温中颗粒的制备方法，其特征在于，步骤S1中，干燥温度为45-55℃；步骤S2中，干燥温度为50-80℃。
7.根据权利要求1-6任一项所述的清肠温中颗粒的制备方法，其特征在于，步骤S2中静置温度0-10℃，时间8-16h。
8.根据权利要求1-7任一项所述的清肠温中颗粒的制备方法，其特征在于，步骤S3中，将干膏粉I和干膏粉II的混合物与赋形剂按质量比2∶1-2∶3混合均匀，加入90～95v％的乙醇制软材，过筛制粒；所述赋形剂为糊精和/或乳糖。
9.根据权利要求1-8任一项所述的清肠温中颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：取黄连、三七、青黛，加8-12倍量的60-70v％的乙醇回流提取2-3次，每次1-2h，合并提取液，过滤，于5000-7000rpm/min下离心5-10min，离心液减压浓缩至60℃下相对密度为1.15～1.30的浸膏，而后于45-55℃干燥，得干膏粉I；
S2：取苦参、煨木香、地榆炭、炮姜、甘草，加10-12倍量的水回流提取2-3次，每次1-2h，合并提取液，过滤，于60-80℃浓缩得60℃下相对密度为1.05～1.10的药液，加乙醇至醇浓度达60v％，而后于4-8℃下静置10-12h，过滤，滤液于60-80℃浓缩、50-80℃干燥后得干膏粉II；
S3：将干膏粉I和干膏粉II的混合物与糊精按质量比2∶1混合均匀，加入95v％的乙醇制软材，过筛制粒，将颗粒置于45-55℃下干燥，整粒，即得。
10.根据权利要求1-9任一项所述的清肠温中颗粒的制备方法，其特征在于，所述清肠温中颗粒的原料药包括如下重量份的组分：
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