CN107315055A - 胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法 - Google Patents

胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107315055A
CN107315055A CN201710524598.8A CN201710524598A CN107315055A CN 107315055 A CN107315055 A CN 107315055A CN 201710524598 A CN201710524598 A CN 201710524598A CN 107315055 A CN107315055 A CN 107315055A
Authority
CN
China
Prior art keywords
agmatine sulphate
agmatine
content
assaying method
mobile phase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710524598.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107315055B (zh
Inventor
王阳
何连顺
米雨禾
李斌水
马静
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
JING JING PHARMACEUTICAL Co Ltd
Original Assignee
JING JING PHARMACEUTICAL Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by JING JING PHARMACEUTICAL Co Ltd filed Critical JING JING PHARMACEUTICAL Co Ltd
Priority to CN201710524598.8A priority Critical patent/CN107315055B/zh
Publication of CN107315055A publication Critical patent/CN107315055A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107315055B publication Critical patent/CN107315055B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，涉及精氨酸酶法转化为胍基丁胺硫酸盐中转化液含量测定技术领域。采用高效液相色谱法对胍基丁胺硫酸盐的含量进行测定，色谱条件为：色谱柱：WondaSil C18‑WR；色谱柱柱温：25‑35℃；流动相：0.1vt%高氯酸与乙腈体积比为90‑95:10‑5；流速：0.5‑1.0ml/min；检测波长：185‑230nm。本发明采用高效液相色谱外标法，能够快速、准确的测定胍基丁胺硫酸盐含量。此方法操作简单，可用于规模化生产中对于胍基丁胺硫酸盐含量的检测。

Description

胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法
技术领域
本发明涉及精氨酸酶法转化为胍基丁胺硫酸盐中转化液含量测定技术领域。
背景技术
胍基丁胺硫酸盐（硫酸胍基丁胺）通过刺激释放下丘脑的荷尔蒙来工作；还可以通过两种途径提高一氧化氮的含量；刺激释放一氧化氮和抑制一氧化氮酶的合成（一氧化氮酶会消耗一氧化氮）；胍基丁胺是一种多功能的补充物，可以提高身体耐久度，加快身体恢复，提高身体性能，表现出惊人和长久的能量供输，提高全身构造，包括提高肌肉量和减少肥胖油脂。因此，胍基丁胺硫酸盐的市场运用前景广阔。
精氨酸酶法转化为胍基丁胺硫酸盐的方法与化学合成技术相比，仅采用精氨酸和稀硫酸为原料，无其他化学品使用，具有低成本、绿色环保，产品市场接受度高，售价高，竞争优势明显的特点。
目前，精氨酸酶法转化为胍基丁胺硫酸盐中转化液的含量测定方法报道的较少，是亟待要解决的技术问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，采用高效液相色谱外标法，能够快速、准确的测定胍基丁胺硫酸盐含量；此方法操作简单，可用于规模化生产中对于胍基丁胺硫酸盐含量的检测。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：一种胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，采用高效液相色谱法对胍基丁胺硫酸盐的含量进行测定，色谱条件为：
色谱柱：WondaSil C18-WR；
色谱柱柱温：25-35℃；
流动相：0.1vt%高氯酸与乙腈体积比为90-95:10-5；
流速：0.5-1.0ml/min；
检测波长：185-230nm。
优选的，色谱柱柱温：30℃；流动相：0.1vt%高氯酸与乙腈体积比为95:5；流速：0.5ml/min。
上述胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，包括以下步骤：
（1）配制流动相；
（2）调节高效液相色谱仪条件，开机平衡色谱柱；
（3）精密称取胍基丁胺硫酸盐标准品，用流动相溶解定容，得标准品溶液；
（4）直接量取胍基丁胺硫酸盐样品转化液；
（5）将标准品溶液、样品转化液依次注入高效液相色谱仪，采集并记录图谱，采用外标法计算样品中胍基丁胺硫酸盐的含量。
优选的，步骤（3）中，精密称取胍基丁胺硫酸盐标准品25mg，转移至50ml容量瓶中，加水5ml溶解后用流动相稀释至50ml容量瓶刻度，摇匀后取1ml至10ml容量瓶中用流动相稀释至10ml容量瓶刻度，摇匀进样。
优选的，色谱柱长度为250mm，内径为4.6mm，其填料粒径为5μm。
优选的，步骤（1）中，配制流动相：0.1vt%高氯酸与乙腈体积比为90-95:10-5混合均匀后，用0.45μm滤膜抽滤。
优选的，步骤（4）中，量取胍基丁胺硫酸盐样品转化液0.5ml到25ml。
优选的，步骤（5）中，标准品溶液、样品转化液的进样体积为20μl。
胍基丁胺硫酸盐的结构式为：。
采用上述技术方案所产生的有益效果在于：
（1）本发明采用高效液相色谱外标法，能够快速、准确的测定胍基丁胺硫酸盐含量，确保其质量可控，减小误差，节约成本，检测时间短，提高了生产效率；
（2）本方法操作简单，可用于规模化生产中对于胍基丁胺硫酸盐含量的检测。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明；
图1是本发明实施例2中标准品的高效液相色谱图；
图2是本发明实施例2中样品的高效液相色谱图；
图3是本发明实施例3中标准品的高效液相色谱图；
图4是本发明实施例3中样品的高效液相色谱图。
具体实施方式
本发明的实施例仅用来说明实现本发明的技术方案，这些实施方式并不对本发明构成进一步限定。
实施例1-3
1.1仪器
高效液相色谱仪，超声，溶剂过滤器，0.45μm滤膜，烧杯，量筒，容量瓶和移液器等。
1.2试剂
高氯酸（分析纯）、乙腈（色谱纯）、超纯水。
1.3操作步骤
1.3.1配制流动相
高氯酸（0.1vt%）流动相制备：用移液器移取1ml高氯酸（AR）至装有适量超纯水的1000量瓶中，定容到刻度，摇匀，用无机0.45μm滤膜抽滤；
将0.1vt%高氯酸与乙腈体积比为95:5混合均匀，用0.45μm滤膜抽滤，得流动相。
1.3.2标准品、样品制备
精密称取胍基丁胺硫酸盐标准品25mg（精确至0.0002g），转移至50ml容量瓶中，加水5ml使之溶解后用流动相稀释至50ml容量瓶刻度，摇匀后取1ml至10ml容量瓶中用流动相稀释至10ml容量瓶刻度，摇匀进样。
量取胍基丁胺硫酸盐样品转化液0.5ml到25ml。
1.3.3色谱条件
色谱柱：WondaSil C18-WR，4.6mm×250mm，5μm
柱温：30℃
流动相：0.1vt%高氯酸：乙腈=95:5 混合均匀后用0.45μm滤膜抽滤
流速：0.5ml/min
进样量：20μL
检测波长：185-230nm
将标准品溶液、样品转化液依次注入高效液相色谱仪，采集并记录图谱，如图1-4所示，采用外标法计算样品中胍基丁胺硫酸盐的含量。
外标法测算样品中胍基丁胺硫酸盐的含量公式为：
以标准品及样品的峰面积比计算
样品转化液浓度含量：
C--胍基丁胺硫酸盐样品转化液浓度，单位为mg/ml；
Cb--胍基丁胺硫酸盐标准品溶液浓度，单位为mg/ml；
Sb--胍基丁胺硫酸盐标准品的峰面积；
S--胍基丁胺硫酸盐样品转化液的峰面积；
n--样品转化液稀释倍数。
具体数值见下表所示:
本发明采用高效液相色谱外标法，能够快速、准确的测定胍基丁胺硫酸盐含量。此方法操作简单，可用于规模化生产中对于胍基丁胺硫酸盐含量的检测。

Claims (8)

1.一种胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，其特征在于：采用高效液相色谱法对胍基丁胺硫酸盐的含量进行测定，色谱条件为：
色谱柱：WondaSil C18-WR；
色谱柱柱温：25-35℃；
流动相：0.1vt%高氯酸与乙腈体积比为90-95:10-5；
流速：0.5-1.0ml/min；
检测波长：185-230nm。
2.根据权利要求1所述的胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，其特征在于：色谱柱柱温：30℃；流动相：0.1vt%高氯酸与乙腈体积比为95:5；流速：0.5ml/min。
3.根据权利要求1所述的胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）配制流动相；
（2）调节高效液相色谱仪条件，开机平衡色谱柱；
（3）精密称取胍基丁胺硫酸盐标准品，用流动相溶解定容，得标准品溶液；
（4）直接量取胍基丁胺硫酸盐样品转化液；
（5）将标准品溶液、样品转化液依次注入高效液相色谱仪，采集并记录图谱，采用外标法计算样品中胍基丁胺硫酸盐的含量。
4.根据权利要求3所述的胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，其特征在于：步骤（3）中，精密称取胍基丁胺硫酸盐标准品25mg，转移至50ml容量瓶中，加水5ml溶解后用流动相稀释至50ml容量瓶刻度，摇匀后取1ml至10ml容量瓶中用流动相稀释至10ml容量瓶刻度，摇匀进样。
5.根据权利要求1所述的胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，其特征在于：色谱柱长度为250mm，内径为4.6mm，其填料粒径为5μm。
6.根据权利要求3所述的胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，其特征在于：步骤（1）中，配制流动相：0.1vt%高氯酸与乙腈体积比为90-95:10-5混合均匀后，用0.45μm滤膜抽滤。
7.根据权利要求3所述的胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，其特征在于：步骤（4）中，量取胍基丁胺硫酸盐样品转化液0.5ml到25ml。
8.根据权利要求3所述的胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法，其特征在于：步骤（5）中，标准品溶液、样品转化液的进样体积为20μl。
CN201710524598.8A 2017-06-30 2017-06-30 胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法 Active CN107315055B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710524598.8A CN107315055B (zh) 2017-06-30 2017-06-30 胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710524598.8A CN107315055B (zh) 2017-06-30 2017-06-30 胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107315055A true CN107315055A (zh) 2017-11-03
CN107315055B CN107315055B (zh) 2019-12-17

Family

ID=60179812

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710524598.8A Active CN107315055B (zh) 2017-06-30 2017-06-30 胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107315055B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110044758A (zh) * 2019-04-26 2019-07-23 西安近代化学研究所 一种硫酸乙基胍含量的测定方法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104152478A (zh) * 2014-07-31 2014-11-19 洛阳华荣生物技术有限公司 一种生物转化联产d-精氨酸和胍基丁胺的方法
CN104911223A (zh) * 2015-06-15 2015-09-16 长兴制药有限公司 一种胍基丁胺硫酸盐的生物制备方法
CN105062943A (zh) * 2015-08-27 2015-11-18 江南大学 一种利用高产精氨酸脱羧酶的重组菌生产胍基丁胺的方法
CN105675756A (zh) * 2016-01-25 2016-06-15 江南大学 一种同时测定微生物酶法产l-丙氨酰-l-谷氨酰胺反应体系中五种物质的高效液相检测方法
CN105713938A (zh) * 2015-03-30 2016-06-29 江汉大学 一种硫酸胍基丁胺的生物转化方法
CN105861529A (zh) * 2016-05-27 2016-08-17 江南大学 一种精氨酸脱羧酶及其应用
CN105866316A (zh) * 2016-06-24 2016-08-17 曲阜师范大学 一种同时检测食品中氨基酸和生物胺的分析方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104152478A (zh) * 2014-07-31 2014-11-19 洛阳华荣生物技术有限公司 一种生物转化联产d-精氨酸和胍基丁胺的方法
CN105713938A (zh) * 2015-03-30 2016-06-29 江汉大学 一种硫酸胍基丁胺的生物转化方法
CN104911223A (zh) * 2015-06-15 2015-09-16 长兴制药有限公司 一种胍基丁胺硫酸盐的生物制备方法
CN105062943A (zh) * 2015-08-27 2015-11-18 江南大学 一种利用高产精氨酸脱羧酶的重组菌生产胍基丁胺的方法
CN105675756A (zh) * 2016-01-25 2016-06-15 江南大学 一种同时测定微生物酶法产l-丙氨酰-l-谷氨酰胺反应体系中五种物质的高效液相检测方法
CN105861529A (zh) * 2016-05-27 2016-08-17 江南大学 一种精氨酸脱羧酶及其应用
CN105866316A (zh) * 2016-06-24 2016-08-17 曲阜师范大学 一种同时检测食品中氨基酸和生物胺的分析方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张玉瑶等: "生物样品中胍丁胺的定量分析方法及评价", 《神经药理学报》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110044758A (zh) * 2019-04-26 2019-07-23 西安近代化学研究所 一种硫酸乙基胍含量的测定方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN107315055B (zh) 2019-12-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN205374391U (zh) 一种毒素检测用固相萃取小柱
CN110231423A (zh) 分散液液微萃取-高效液相色谱测定粮食中拟除虫菊酯类农药的方法
CN101961430A (zh) 一种复方感冒灵片的质量分析方法
CN104777249A (zh) 测定止咳枇杷糖浆中有效成分苦杏仁苷含量的方法
CN107688067A (zh) 通窍鼻炎片的含量测定方法
CN106770730B (zh) 一种甲基汞和乙基汞测定方法
CN107247103A (zh) 一种利用hplc外标法测定硫脲合成中硫脲含量的方法
Kubáň et al. CE of inorganic species–A review of methodological advancements over 2009–2010
CN104407087A (zh) 一种同时检测桃金娘根中没食子酸和鞣花酸的方法
CN105181858B (zh) 一种杂质吸附型净化柱及其制备方法与应用
CN104764820A (zh) 测定半夏糖浆中活性成分盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量的方法
CN107315055A (zh) 胍基丁胺硫酸盐的含量测定方法
CN104458965B (zh) 一种饲料中碘含量检测方法
CN106338564B (zh) 一种用于检测维格列汀中间体中对映异构体的方法
CN104910339A (zh) 用于检测莱克多巴胺的磁性分子印迹聚离子液体及其制备方法和用途
CN103926332A (zh) 一种同时测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷含量的超高效液相色谱方法
CN106442790A (zh) 一种b族维生素的检测方法
CN104155383A (zh) 青蒲颗粒的检测方法
CN104820051B (zh) 一种虫草菌粉(Cs-4)及其制剂金水宝胶囊的检测方法
CN102914607A (zh) 一种植物源性食品中喹螨醚残留量测定的高效液相色谱法
CN207520642U (zh) 一种在线配液层析系统
CN109060991A (zh) 一种食品中维生素b6的含量测定方法
CN110068643A (zh) 一种基于液相色谱串联质谱测定医用食品中维生素的方法
CN103105322A (zh) 一种用于测定二氧化钚粉末中铀含量的分析方法
CN205374385U (zh) 白酒中邻苯二甲酸酯的测定系统

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant