CN107308107A - 一种长效土霉素注射液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种长效土霉素注射液及其制备方法,属于兽药制剂技术领域。该注射液每1000ml包括如下组分:土霉素100‑240g、甲醛合次硫酸氢钠120‑140g、丙二醇300‑400ml、氯化镁80‑120g、乙醇胺10‑50ml、短梗霉多糖‑聚谷氨酸交联聚合物50‑100g、金银花提取液10‑20ml、苦荞茶提取液10‑20ml、余量为注射用水。本发明产品质量稳定,在保质期内不变色,不沉淀,一次注射药效可保持4天,对猪的附红细胞体病、猪气喘病、支原体、立克次体病引起的精神不振、高温,高烧及全身性疾病,均有较好治疗作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种长效土霉素注射液及其制备方法,属于兽药技术领域。
背景技术
土霉素(Oxytertracycline,OTC)是从土壤中链球菌的培养液中提炼所得。抗菌范围广,抑菌作用强,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、支原体、衣原体、立克次氏体、猪附红细胞体等引起的感染有较好的疗效,具有较好的预防和治疗疾病的作用。且耐药菌株少,毒副作用较小,药物的残留量亦较低。还可以作为一种饲料添加剂以促进畜禽生长。美国辉瑞公司上个世纪八十年代研制成具有长效作用的土霉素注射液,在市场上效果很好。虽然进口土霉素注射液质量较好、药效长,但是市场售价很高,长期使用给广大农牧养殖户带来巨大的经济压力。目前,国内也有不少的长效土霉素注射液出售,但大部分医药企业生产的产品极不稳定,有效成分越来越低,药效差,容易氧化变黑,而且质量可控性差。
发明内容
本发明的目的是提供一种长效土霉素注射液。该注射液质量稳定、有效成分高、药效长久稳定。
本发明的另一目的是提供一种长效土霉素注射液的制备方法。
本发明采用以下技术方案:
一种长效土霉素注射液,每1000ml注射液包括如下组分:土霉素100-240g、甲醛合次硫酸氢钠120-140g、丙二醇300-400ml、氯化镁80-120g、乙醇胺10-50ml、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物50-100g、金银花提取液10-20ml、苦荞茶提取液10-20ml、余量为注射用水;
所述短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物是由以下方法制得的:将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物;
所述聚谷氨酸溶液和短梗霉多糖溶液的质量比为1:1;所述短梗霉多糖溶液的浓度为5mg/ml,pH为4.5;所述聚谷氨酸溶液的浓度为50mg/ml,pH为4.3。
优选的,所述的长效土霉素注射液,每1000ml注射液包括如下组分:土霉素180g、甲醛合次硫酸氢钠130g、丙二醇350ml、氯化镁100g、乙醇胺35ml、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物75g、金银花提取液15ml、苦荞茶提取液15ml、余量为注射用水。
一种长效土霉素注射液的制备方法,它包括以下步骤:
1)将分别苦荞茶、金银花和50℃的温水按照料液比为1g:20ml混合浸泡30-45min后大火煎煮至沸腾,换慢火继续煎煮30分钟,抽滤后得一次提取液和滤渣;向滤渣中加入5倍于其重量的冷水,以大火煎至沸腾后换小火煎煮30分钟,抽滤后得二次提取液;将上述一次提取液和二次提取液混合加热至沸腾后15分钟即分别得到苦荞茶提取液和金银花提取液,备用;
2)将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物,备用;
3)取适量注射用水,加入甲醛合次硫酸氢钠、氯化镁、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物搅拌溶解后,加入丙二醇,搅拌混匀得混合液;
4)将苦荞茶提取液和金银花提取液加入上述步骤3)所制得的混合溶液中,然后加入土霉素搅拌至完全溶解后,再加入乙醇胺调节pH值至8.5-8.9,用注射用水定容至1000ml;
5)药液无菌过滤,充氮气灌封,无菌分装即得。
所述步骤2)中聚谷氨酸溶液和短梗霉多糖溶液的质量比为1:1;所述短梗霉多糖溶液的浓度为5mg/ml,pH为4.5;所述聚谷氨酸溶液的浓度为50mg/ml,pH为4.3。
本发明的有益效果是:1)本发明产品质量稳定,在保质期内不变色,不沉淀,一次注射药效可保持4天,对猪的附红细胞体病、猪气喘病、支原体、立克次体病引起的精神不振、高温,高烧及全身性疾病,均有较好治疗作用。2)本发明的注射液中还添加了少量中药成分,在增加药效的同时还能协同作用起到抗氧化的作用,保证了土霉素注射液较好的稳定性。3)短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物在本发明中起到增加土霉素在水溶液中溶解性的作用,使土霉素更好的溶解到水溶液中,保证了较高的有效成分,增强了药物的治疗效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明。
实施例1
一种长效土霉素注射液,每1000ml注射液包括如下组分:土霉素100g、甲醛合次硫酸氢钠120g、丙二醇300ml、氯化镁80g、乙醇胺10ml、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物50g、金银花提取液10ml、苦荞茶提取液10ml、余量为注射用水。
所述短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物是由以下方法制得的:将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物。
所述聚谷氨酸溶液和短梗霉多糖溶液的质量比为1:1。
所述短梗霉多糖溶液的浓度为5mg/ml,pH为4.5。
所述聚谷氨酸溶液的浓度为50mg/ml,pH为4.3。
上述长效土霉素注射液的制备方法,它包括以下步骤:
1)将分别苦荞茶、金银花和50℃的温水按照料液比为1g:20ml混合浸泡30-45min后大火煎煮至沸腾,换慢火继续煎煮30分钟,抽滤后得一次提取液和滤渣;向滤渣中加入5倍于其重量的冷水,以大火煎至沸腾后换小火煎煮30分钟,抽滤后得二次提取液;将上述一次提取液和二次提取液混合加热至沸腾后15分钟即分别得到苦荞茶提取液和金银花提取液,备用;
2)将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物,备用;
3)取适量注射用水,加入甲醛合次硫酸氢钠、氯化镁、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物搅拌溶解后,加入丙二醇,搅拌混匀得混合液;
4)将苦荞茶提取液和金银花提取液加入上述步骤3)所制得的混合溶液中,然后加入土霉素搅拌至完全溶解后,再加入乙醇胺调节pH值至8.5-8.9,用注射用水定容至1000ml;
5)药液无菌过滤,充氮气灌封,无菌分装即得。
实施例2
一种长效土霉素注射液,每1000ml注射液包括如下组分:土霉素240g、甲醛合次硫酸氢钠140g、丙二醇400ml、氯化镁120g、乙醇胺50ml、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物100g、金银花提取液20ml、苦荞茶提取液20ml、余量为注射用水。
所述短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物是由以下方法制得的:将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物。
所述聚谷氨酸溶液和短梗霉多糖溶液的质量比为1:1。
所述短梗霉多糖溶液的浓度为5mg/ml,pH为4.5。
所述聚谷氨酸溶液的浓度为50mg/ml,pH为4.3。
上述长效土霉素注射液的制备方法,它包括以下步骤:
1)将分别苦荞茶、金银花和50℃的温水按照料液比为1g:20ml混合浸泡30-45min后大火煎煮至沸腾,换慢火继续煎煮30分钟,抽滤后得一次提取液和滤渣;向滤渣中加入5倍于其重量的冷水,以大火煎至沸腾后换小火煎煮30分钟,抽滤后得二次提取液;将上述一次提取液和二次提取液混合加热至沸腾后15分钟即分别得到苦荞茶提取液和金银花提取液,备用;
2)将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物,备用;
3)取适量注射用水,加入甲醛合次硫酸氢钠、氯化镁、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物搅拌溶解后,加入丙二醇,搅拌混匀得混合液;
4)将苦荞茶提取液和金银花提取液加入上述步骤3)所制得的混合溶液中,然后加入土霉素搅拌至完全溶解后,再加入乙醇胺调节pH值至8.5-8.9,用注射用水定容至1000ml;
5)药液无菌过滤,充氮气灌封,无菌分装即得。
实施例3
一种长效土霉素注射液,每1000ml注射液包括如下组分:土霉素180g、甲醛合次硫酸氢钠130g、丙二醇350ml、氯化镁100g、乙醇胺35ml、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物75g、金银花提取液15ml、苦荞茶提取液15ml、余量为注射用水。
所述短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物是由以下方法制得的:将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物。
所述聚谷氨酸溶液和短梗霉多糖溶液的质量比为1:1。
所述短梗霉多糖溶液的浓度为5mg/ml,pH为4.5。
所述聚谷氨酸溶液的浓度为50mg/ml,pH为4.3。
上述长效土霉素注射液的制备方法,它包括以下步骤:
1)将分别苦荞茶、金银花和50℃的温水按照料液比为1g:20ml混合浸泡30-45min后大火煎煮至沸腾,换慢火继续煎煮30分钟,抽滤后得一次提取液和滤渣;向滤渣中加入5倍于其重量的冷水,以大火煎至沸腾后换小火煎煮30分钟,抽滤后得二次提取液;将上述一次提取液和二次提取液混合加热至沸腾后15分钟即分别得到苦荞茶提取液和金银花提取液,备用;
2)将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物,备用;
3)取适量注射用水,加入甲醛合次硫酸氢钠、氯化镁、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物搅拌溶解后,加入丙二醇,搅拌混匀得混合液;
4)将苦荞茶提取液和金银花提取液加入上述步骤3)所制得的混合溶液中,然后加入土霉素搅拌至完全溶解后,再加入乙醇胺调节pH值至8.5-8.9,用注射用水定容至1000ml;
5)药液无菌过滤,充氮气灌封,无菌分装即得。
对比例1
无短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物的长效土霉素注射液的制备
一种长效土霉素注射液,每1000ml注射液包括如下组分:土霉素180g、甲醛合次硫酸氢钠130g、丙二醇350ml、氯化镁100g、乙醇胺35ml、金银花提取液15ml、苦荞茶提取液15ml、余量为注射用水。
制备方法同实施例3,不同的是没有短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物的制备和添加过程。对比例2
无中药提取液的长效土霉素注射液的制备
一种长效土霉素注射液,每1000ml注射液包括如下组分:土霉素180g、甲醛合次硫酸氢钠130g、丙二醇350ml、氯化镁100g、乙醇胺35ml、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物75g、金银花提取液15ml、苦荞茶提取液15ml、余量为注射用水。
制备方法同实施例3,不同的是没有中药提取液的制备和添加过程。
本发明注射液稳定性考察试验
温度加速试验:本实验研究了本发明实施例3配方制备的长效土霉素注射液在40℃温度加速实验(6个月)。将土霉素注射液(3个批次)按市场包装,放在盛饱和氯化钠溶液的密闭干燥器中(相对湿度约为75%),再将干燥器置于隔水式电热恒温培养箱中维持40℃温度。在温度加速试验6个月的试验期内每个月取样考察外观、色泽、澄明度、含量、pH值及不溶性微粒等。结果表明:从第3个月起pH开始增加,共增加了0.25;但含量下降并不明显,范围在0.1%-0.15%之间,从第5个月开始,含量下降幅度较大,达2.5%-3.2%,接近前四个月的和,但总的下降范围在允许的范围之内;其余指标没有明显的变化,未见色泽、澄明度的变化,也没有发现不溶性微粒。
长期稳定性试验:本试验研究了本发明实施例3配方制备的长效土霉素注射液的长期稳定性试验(24个月)。将长效土霉素注射液(3个批次)按市场包装,置于稳定性试验箱中,然后调节培养箱温度和湿度,控制在20±2℃、60±5%,并长期保持以上条件24个月,并于第0、1、2、3、6、9、12、18、24月,按照稳定性重点考察项目检测其含量、色泽、澄明度、pH、不溶性微粒。结果表明:长效土霉素注射液比较稳定,在20±2℃环境下其含量下降很少,在试验期的24个月下降范围在3%-4%,黄芪多糖含量没有明显的变化,外观色泽没有可见的变化,溶液澄清透明,没有不溶性微粒出现。
本发明长效土霉素注射液临床药效学试验
在临沂某养殖场,采集临床自然发病的病例,经确诊感染了猪副嗜血杆菌病,另一批猪确诊为感染了附红细胞体病,对采集的病例分4组,第1组为本发明实施例3制备的长效土霉素注射液组,第2组为对比例1制备的无短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物的长效土霉素注射液组,第3组为对比例2制备的无中药提取液的长效土霉素注射液,第4组为市售长效土霉素注射液(美国辉瑞公司生产)组。共分四组进行治疗,按照10mg/kg体重,4天一次,比较其治疗效果,具体见表1。
判定标准:
治愈:在试验给药期间,猪用药后精神、食欲均恢复正常,临床典型症状消失者定为治愈;
有效:在试验给药治疗和观察期间,治愈猪以及给药后有明显减轻者,均判定为有效;
无效:在试验期间,临床症状无明显变化或加重直至死亡,尸体剖检有特征性病变确定为死亡。
表1临床应用效果统计
由上述表1中可以看出,本发明制备的长效土霉素注射液对猪副嗜血杆菌病和附红细胞体病的治疗效果要明显优于市售对照组;与对比例1相比,本发明的长效土霉素注射液在添加了短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物后,本发明的治疗效果增加较显著,而与对比例2相比,本发明的治疗效果增加相对较小,这是由于本发明中增加的短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物增加了土霉素在水溶液中的溶解度,增加了药物有效成分,且保持较好的药物稳定性。而添加的中药提取液量较少,对药效增加不太明显,但两种中药提取液习协同作用,抗氧化效果显著增加,与其他成分共同作用,保证了本发明的注射液具有很好的稳定性且药效持久。
Claims (4)
1.一种长效土霉素注射液,其特征在于,每1000ml注射液包括如下组分:土霉素100-240g、甲醛合次硫酸氢钠120-140g、丙二醇300-400ml、氯化镁80-120g、乙醇胺10-50ml、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物50-100g、金银花提取液10-20ml、苦荞茶提取液10-20ml、余量为注射用水;
所述短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物是由以下方法制得的:将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物;
所述聚谷氨酸溶液和短梗霉多糖溶液的质量比为1:1;所述短梗霉多糖溶液的浓度为5mg/ml,pH为4.5;所述聚谷氨酸溶液的浓度为50mg/ml,pH为4.3。
2.根据权利要求1所述的长效土霉素注射液,其特征在于,每1000ml注射液包括如下组分:土霉素180g、甲醛合次硫酸氢钠130g、丙二醇350ml、氯化镁100g、乙醇胺35ml、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物75g、金银花提取液15ml、苦荞茶提取液15ml、余量为注射用水。
3.一种权利要求1或2所述的长效土霉素注射液的制备方法,其特征在于,它包括以下步骤:
1)将分别苦荞茶、金银花和50℃的温水按照料液比为1g:20ml混合浸泡30-45min后大火煎煮至沸腾,换慢火继续煎煮30分钟,抽滤后得一次提取液和滤渣;向滤渣中加入5倍于其重量的冷水,以大火煎至沸腾后换小火煎煮30分钟,抽滤后得二次提取液;将上述一次提取液和二次提取液混合加热至沸腾后15分钟即分别得到苦荞茶提取液和金银花提取液,备用;
2)将短梗霉多糖溶液以5滴/s的速度滴加到聚谷氨酸溶液中,30℃条件下搅拌反应2h,无水乙醇沉淀混合液,真空抽滤收集沉淀,将沉淀用去离子水溶解,置于透析袋中透析2h,将透析保留液冷冻干燥,得短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物,备用;
3)取适量注射用水,加入甲醛合次硫酸氢钠、氯化镁、短梗霉多糖-聚谷氨酸交联聚合物搅拌溶解后,加入丙二醇,搅拌混匀得混合液;
4)将苦荞茶提取液和金银花提取液加入上述步骤3)所制得的混合溶液中,然后加入土霉素搅拌至完全溶解后,再加入乙醇胺调节pH值至8.5-8.9,用注射用水定容至1000ml;
5)药液无菌过滤,充氮气灌封,无菌分装即得。
4.根据权利要求3所述的长效土霉素注射液的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中聚谷氨酸溶液和短梗霉多糖溶液的质量比为1:1;所述短梗霉多糖溶液的浓度为5mg/ml,pH为4.5;所述聚谷氨酸溶液的浓度为50mg/ml,pH为4.3。
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