CN104906121B - 含泰地罗新的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种含泰地罗新的药物组合物，所述药物组合物的剂型为注射剂，所述组合物包括质量/体积百分数为1～20%的泰地罗新、10～25%的聚乙烯吡咯烷酮、酸、以及余量为水，酸的用量为使得所述组合物的pH值为5.5～6.5；且所述泰地罗新为泰地罗新或其药物上可接受的盐。本发明原料中的泰地罗新是畜禽专用抗生素，不会给人类带来交叉耐药性问题，是畜呼吸道病的首选药物，它对猪链球菌、巴氏杆菌、副嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌以及支原体均具有很好的治疗效果。

Description

含泰地罗新的药物组合物

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及含泰地罗新的药物组合物。

背景技术

呼吸道感染是畜牧业中较难控制的传染病之一，对畜牧业生产危害严重。呼吸道感染流行时，会给畜牧业生产造成巨大的经济损失。因此，如何防治猪、牛等家畜的呼吸道感染是兽医和兽药工作者的重要研究课题。由于呼吸道感染一般为多重感染，致病因素多，病情复杂，在我国用于动物主要用药物进行防治，大环内酯类抗生素是用于治疗猪、牛的呼吸道感染的一类常用药物。现用于动物疾病治疗的大环内酯类抗生素主要有泰乐菌素和替米考星，这两种药物在使用初期都取得了良好的效果，但随着使用时间的延长，很多致病菌都出现了不同程度的耐药性。虽然用量不断增大，但治疗效果却在逐渐降低。因此开发新型大环内酯类抗生素具有现实意义。泰地罗新(Tildipirosin)是英特威国际有限公司开发的最新动物专用的大环内酯类半合成抗生素，为泰乐菌素的衍生物。2011年3月8日，欧盟兽用药品委员会（CVMP）准许了英特威公司以泰地罗新为主要成分的无菌注射液（商品名为Zuprevo）的市场许可申请，用于治疗由细菌感染引起的猪和牛的呼吸道疾病。

泰地罗新药效均强于泰乐菌素和替米考星等市场广泛使用的大环内酯类药物。泰地罗新无致癌、致畸和遗传毒性，给药后大部分以原形排泄物形式排出体外，并通过脱氧、氧化、水解等作用降解，不会对环境产生大的影响。泰地罗新口服急性毒性很低，以1700mg/kg bw给小鼠灌胃，结果没有观察到任何副作用，大鼠口服2000mg/kg bw，结果被毛凌乱，行动不协调，眼睑闭合或者半闭合，剖检未见任何异常，泰地罗新属于低毒。三个月大鼠喂养试验表明，大鼠的最大无毒剂量为20mg/kg bw。在特殊毒性方面，小鼠微核试验和体外哺乳动物细胞变异实验表明泰地罗新没有致突变作用。泰地罗新已获得FDA和EMEA批准上市，泰地罗新是广谱抗菌药，对一些革兰氏阳性、革兰氏阴性细菌和支原体均具有抗菌活性，用于治疗猪和牛由细菌及支原体感染引起的呼吸道疾病。泰地罗新安全性比较高，适合畜牧业发展需求。

发明内容

呼吸道感染是畜牧业中较难控制的传染病之一，对畜牧业生产危害严重。由于泰乐菌素和替米考星等抗生素的广泛应用，导致耐药菌株和多重交叉耐药菌株的不断增加和扩散，细菌的耐药性问题变的越来越严重，越来越突出，使得呼吸道疾病成为困扰养殖业的重要疾病，早期大环内醋类抗生素主要存在以下缺陷：吸收不规则，在胃酸中不稳定，半衰期短及抗菌谱较窄等，为克服这些缺陷，采用泰地罗新及药物上可接受的盐为原料，开发了泰地罗新组合物，解决了早期大环内酯类药物的上述缺陷。

因此，本发明提供一种含泰地罗新的药物组合物，所述药物组合物的剂型为注射剂，所述组合物包括质量/体积百分数为1～20%的泰地罗新、10～25%的聚乙烯吡咯烷酮、酸、以及余量为水，酸的用量为使得所述组合物的pH值为5.5～6.5；且所述泰地罗新为泰地罗新或其药物上可接受的盐。本发明中，泰地罗新的质量/体积百分数为20%是指例如最终定容为100ml的注射剂中含泰地罗新20g。

在本发明的具体实施方式中，所述酸为无机酸或有机酸，优选为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、柠檬酸、酒石酸中的一种或多种。

本发明还提供另一种含泰地罗新的药物组合物，所述药物组合物的剂型为口服剂，所述口服剂包括口服液、可溶性粉、颗粒剂或预混剂，且所述泰地罗新为泰地罗新或其药物上可接受的盐。

在该药物组合物中，所述口服液包括质量/体积百分数为1～20%的泰地罗新、20～70%的有机溶剂、以及余量为水，且以酸调节所述口服液的pH值为5.5～6.5。所述有机溶剂例如为N,N-二甲基吡咯烷酮、二甲基甲酰胺、丙二醇、甘油、吐温中的一种或多种。

在该药物组合物中，所述可溶性粉包括质量份数为1～30份的泰地罗新、1～30份的助溶剂、1～30份的pH值稳定剂、以及粉用载体。优选地，所述助溶剂选自酒石酸、柠檬酸、磷酸中的一种或多种，所述pH值稳定剂选自磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、酒石酸钾、酒石酸钠中的一种或多种，所述粉用载体为选自无水葡萄糖、蔗糖、乳糖、玄明粉、可溶性淀粉中的一种或多种。

在该药物组合物中，所述颗粒剂包括占颗粒总重量的质量百分数为1～30%的泰地罗新、10～50%的稀释剂、10～50%的崩解剂、以及湿润剂乙醇。优选所述稀释剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、黄豆粉、玉米粉中的一种或多种，所述崩解剂选自羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、羟甲基纤维素钠、羧甲淀粉钠、羟丙纤维素、微晶纤维素中的一种或多种。

在该药物组合物中，所述预混剂包括质量百分数为5～30%的磷酸泰地罗新和70～95%的预混剂用载体。优选所述预混剂用载体选自玉米粉、玉米芯粉、鼓皮、石粉、脱脂米糠、碳酸钙、豆粕粉、沸石粉、淀粉、无水葡萄糖、口服葡萄糖、乳糖、玉米芯粉中的一种或多种。

本发明中的预混剂的制备方法例如为：分别将磷酸泰地罗新及辅料口服葡萄糖和玉米芯粉进行粉碎，粉碎后过60目筛，取磷酸泰地罗新与等量的辅料以等量递加稀释法稀释、混合，过60目筛精筛三次，得到混合物；将混合物与剩余的辅料混合均匀，将混合物过80目筛精筛三次。

本发明原料中的泰地罗新是畜禽专用抗生素，不会给人类带来交叉耐药性问题，是畜呼吸道病的首选药物，它对猪链球菌、巴氏杆菌、副嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌以及支原体均具有很好的治疗效果。另外，本发明的泰地罗新组合物与现有大环内酯类药物相比具有在胃酸中稳定、半衰期长及抗菌谱广的优点，克服了现有大环内酯类药物的缺陷。

具体实施方式

以下实施例用于详细说明本发明，但其内容并不限定本发明的保护范围。

实施例1～4和对比例1

实施例1～4为泰地罗新组合物注射液的制备，表1给出了本发明中的泰地罗新组合物注射液中各组分的质量体积（W/V）百分含量，按照表1中的各组分含量配置混合液，以纯化水定容后过滤，灌封，100℃灭菌30分钟即得泰地罗新组合物注射液。

对比例1为英特威公司以泰地罗新为主要成分的商品Zuprevo，其中含有18%的泰地罗新，8.25%的一水柠檬酸用于调节pH值，40%的丙二醇，余量为水。

表1

	泰地罗新(%)	聚乙烯吡咯烷酮(%)	丙二醇(%)	柠檬酸调节pH值至
					实施例1	1	10	/	5.5
实施例2	4	15	/	5.7
					实施例3	10	20	/	5.6
实施例4	20	25	/	6.1
					对比例1	18	/	40	8.25%

一、注射液的药物稳定性试验：

注射液1：本发明实施例3制备的10%泰地罗新组合物的注射液，

注射液2：泰地罗新10g（以泰地罗新计），加丙二醇至40ml，用一水柠檬酸调节至澄清，加水定容适量，并用一水柠檬酸调节pH值至5.8，并最终定容为100ml。

试验仪器：SPX-250IC人工气候箱。试验过程：将上述注射液1和注射液2在40℃±2℃的条件下放置6个月，于试验起始、试验进行第1、2、3、6月取样，考察性状、pH值、含量有关项目，与试验起始时的检测结果对比，试验结果见表2。

表2

由表2可知，上述加速试验结果表明本发明中的注射液1比注射液2稳定，本发明制备的泰地罗新组合物的注射液药物样品的性状、pH值、含量均无明显变化，说明本发明中的样品在偏酸性条件下比较稳定。

二、本发明实施例3中制备得到的泰地罗新组合物注射液（10%W/V）和对比例1中的Zuprevo（18%W/V）在猪体内的药物代谢动力学研究：

18头长白猪（种名），随机分成3组，以4mg/kg体重肌肉注射给药，试验前禁食16h，第一组泰地罗新组合物注射液（10%W/V）组，给药后5min、10min、15min、1h、2h、4h、8h、10h、1d、2d、3d、4d、5d、6d、8d、10d、12d和l4d、前腔静脉采血5mL。第二组Zuprevo（18%W/V）组，给药后5min、10min、15min、1h、2h、4h、8h、10h、1d、2d、3d、4d、5d、6d、8d、10d、12d和l4d前腔静脉采血5mL。第三组用于采集空白血浆，采集的血样均用肝素钠抗凝，离心取血浆，-80℃保存。

血浆药物提取方法：取血浆0.5ml加入乙腈5ml（色谱级），4500转离心10min，收集上清。

固相萃取柱（SPE）预处理：1.5ml甲醇预洗，然后用2.5ml50mmol醋酸铵乙腈溶液（95:5）预洗。然后将血浆提取液过C18（美国瓦里安公司产品）SPE柱，最后用2ml甲醇洗脱至5ml玻璃试管中，45℃水浴氮气吹干，取1ml甲醇溶解，0.22μm过滤进样。

色谱条件：以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（pH值8.2±0.2）-甲醇-乙腈（30：45：25）为流动相；WATERS ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1×50mm,1.7μm)；流速为0.20ml/min；检测波长为210nm；柱温为35℃。

表3给出了猪肌肉注射泰地罗新组合物注射液和Zuprevo后的药物代谢动力学参数。

表3

	泰地罗新组合物注射液	Zuprevo
			参数	平均数±SD	平均数±SD
Cmax（μg/ml）	0.675±0.483	0.911±0.396
			Tmax（h）	0.54±0.12	0.34±0.55
AUC(h*ug/mL)	15.07±2.14	12.88±4.32
			T1/2（h）	115±9	96±3.2
MRT(h)	92±12	66±8.3

表3中Cmax为血药浓度达到峰值的浓度，Tmax为血药浓度达到峰值的时间。因泰地罗新属于时间依赖性药物，因而在Cmax相当的情况下，AUC值越大即曲线下面积越大（高于最小抑菌浓度MIC以上的时间越长）则临床治疗效果越好。由表3中的AUC数据可见本发明中的泰地罗新组合物注射液的临床治疗效果优于Zuprevo。

表3中，T1/2为消除半衰期，即血浆药物浓度或体内药量降低50%所需的时间；MRT为药物平均驻留时间。T1/2值越大、MRT值越大说明药物在体内代谢越慢，药效越好。由表3中的T1/2和MRT数据也可以看出，本发明中的泰地罗新组合物注射液的药效优于Zuprevo。

三、实施例1～4和对比例1的治疗试验：

试验动物及实验分组：河南省某猪场自然发病杜洛克、长白、大白三元杂交仔猪，发病后经上述临床诊断、实验室诊断（分离培养和生化实验）确诊为猪副嗜血杆菌病。选择140头，日龄40-50d体重13.4kg-16.6kg出生后均未接种过猪副嗜血杆菌疫苗的仔猪，试验前按常规饲养。

临床症状：膘情良好的猪，病猪发热40.5～42.0℃，精神沉郁，食欲下降，生长缓慢，肌肉颤抖，呼吸困难，行走缓慢或不愿站立，出现跛行或一侧性跛行，到了后期病猪消瘦虚弱，被毛粗乱无光，咳嗽，呈腹式呼吸，严重的皮肤发红，不能站立。

分离培养：将肺炎区、心血、肝和胸水离心后沉积物分别接种于血液琼脂平皿和肉汤中，置37℃温箱内培养24h后观察。结果是，肉汤中未见细菌生长，继续培养至8h可见平皿表面许多针头大，边缘整齐，圆形隆起，灰自色半透明的菌落，取少许涂片，革兰氏染色，镜检，见有大小不一致的比较密布的革兰氏阴性杆菌。

试验的仔猪均自由饮水，且随机分成7组，其治疗的给药情况如下。

其中4组为泰地罗新组合物注射液：实施例1～4制备的泰地罗新组合物注射液，肌肉注射，每公斤体重4mg，给药一次。

一组为泰乐菌素注射液：山东中抗药业有限公司（10%），每公斤体重0.05ml，一天一次，连用3天。

一组为Zuprevo注射液对照组，每公斤体重4mg，给药一次。

另有一组为感染对照组。表4给出了这7组仔猪的临床验证疗效试验结果。

表4

由表4可见，泰地罗新组合物注射液对猪副嗜血杆菌病具有较好的治疗效果，与早期大环内酯类药物相比具有更广的抗菌谱。从实施例1～4与对比例1中的Zuprevo的数据比较可知，本发明中含泰地罗新4～20%的组合物注射液的治疗效果均优于含泰地罗新18%的Zuprevo的治疗效果。尤其是泰地罗新含量分别为4%和10%的实施例2和3，在其泰地罗新的用量低于泰地罗新含量为18%的对比例1的情况下，其治疗效果仍明显优于对比例1。

实施例5

本实施例为对含量为10%（W/V）的泰地罗新口服液的研究。

一、10%的泰地罗新口服液的制备，具体操作步骤为：

(1)在配制罐中加入所配制泰地罗新口服液的体积总量60-70%的水，搅拌，用浓度为85%的浓磷酸调节pH值至5.7-6.3。

(2)按量加入泰地罗新。

(3)再用浓度为5%-100%的浓磷酸调节pH值至5.5-6.0，使物料全部溶清。

(4)再加入30%g的甘油搅拌使溶解，温热至50-60℃。

(5)加水至100ml，然后通过0.45微米滤膜过滤，经过滤得到所需的泰地罗新口服液。

二、口服液的治疗试验

1选择杜长大三元杂交商品猪，雌雄各半，平均体重25.7-27.lkg，共80头；随机分为4组，第1组：20头，泰地罗新口服液（上述口服液1）治疗组；第2组：20头，氟苯尼考溶液（潍坊山美动物保健品有限公司）治疗组；第3组：20头，攻毒对照组，攻毒不治疗；第4组，20头，健康对照组，不攻毒不治疗。其中，攻毒对照组为每头猪经皮下注射耐药（耐泰乐菌素和替米考星）巴氏杆菌5000个，同时滴鼻感染5000个。

2评价指标

2.1体温攻毒后每隔4h测量一次体温，体温超过40℃后开始给药治疗，给药后分别于2h、4h、8h、12h、18h、24h、36h、48h和72h测量猪直肠温度。

2.2临床症状：每天定时观察并记录猪的临床症状，如精神状态、食欲、呼吸频率、咳嗽鼻腔分泌物等。

2.3病理检查：对死亡猪进行剖解，观察病理变化。

2.4增重：于试验开始(0d)至试验结束(7d)称量每头猪的体重，比较各组增重情况。

2.5死亡率：观察并记录试验猪的死亡情况。

3试验结果

3.1体温变化情况

攻毒20h后，猪体温开始上升，24h测得平均体温为41.5-42.50℃。使用泰地罗新口服液1治疗后，感染巴氏杆菌的患畜体温能够迅速下降，而单纯给予氟苯尼考溶液治疗的患畜药体温开始下降要延后，使用泰地罗新口服液能够及时减轻患畜的发热症状。

3.2临床症状

各组试验猪均出现了不同程度的症状，主要表现为精神沉郁、食欲不振、颤抖、呼吸困难、鼻腔分泌粘性物，阳性对照组，病猪全身皮肤发紫，攻毒30h后，开始出现病猪死亡，至72h，阳性对照组全部试验猪死亡。

泰地罗新口服液治疗组，给药12h后，病猪开始陆续进食，精神状态开始好转；氟苯尼考溶液组进食时间略晚，精神状态恢复缓慢。

3.3病理变化

死亡病猪剖解发现，皮下严重地渗出性水肿，小肠粘膜充血，小肠内充满黄色胶冻样粘液；花斑肺；肺间质充血，支气管内充有粘液；心耳充血、发紫，心肌苍白；扁桃体水肿严重；淋巴结充血、肿大；肝、肾正常。

3.4临床疗效：表5给出了上述组别的临床验证疗效试验结果。

表5

由表5可见，本发明中的泰地罗新口服液对人工诱发猪巴氏杆菌病具有较好的治疗效果，对革兰氏阴性菌也能起到很好的治疗效果，比早期大环内酯类药物具有更广的抗菌谱。

实施例6

本实施例为对重量百分含量为20%的泰地罗新可溶性粉的研究。

制备材料：泰地罗新，酒石酸、酒石酸钠、粉用载体为蔗糖。

制备方法：取泰地罗新200g，酒石酸20g、酒石酸钠50g、蔗糖粉730g，逐级混合均匀，粉碎，过80目筛，即得泰地罗新组合物的可溶性粉。

治疗效果：90头患猪病猪，主要临床症状为咳嗽、喘气、呼吸困难，经PCR病原鉴定为支原体感染，按体重随机分为3组：其中第1组为空白对照组，不给予药物治疗；第2组用本发明制备的泰地罗新可溶性粉进行治疗，用法为100g兑水200L，饮水，连用5天，第3组药物对照组为氟苯尼考可溶性粉（2%，先灵葆雅厂），用法为100g兑水200L,饮水，连用5天。表6给出了临床验证疗效试验结果。

表6

由表6可见，泰地罗新可溶性粉治疗组和氟苯尼考可溶性粉治疗组与对照组对支原体感染的治疗效果差异极显著((P<0.01)，且本发明泰地罗新可溶性粉的疗效比氟苯尼考可溶性粉效果好。

实施例7

本实施例为泰地罗新颗粒剂的制备。

(1)将泰地罗新5g与稀释剂乳糖20g，崩解剂微晶纤维素20g和羟丙甲纤维素5g进行粉碎，过筛，混合，润湿剂乙醇65%进行混合粘合，以“手握成团，轻压即散”为原则掌握软材的质量。(2)将软材放入20目筛中，制的湿颗粒。(3)将湿颗粒放入箱式干燥箱中干燥。(4)置药筛内轻轻筛动3分钟，收集通过1号筛和不能通过4号筛的颗粒。

Claims (5)

1.一种含泰地罗新的药物组合物，所述药物组合物的剂型为注射剂，所述组合物包括质量/体积百分数为1～20％的泰地罗新、10～25％的聚乙烯吡咯烷酮、酸、以及余量为水，酸的用量为使得所述组合物的pH值为5.5～6.5；且所述泰地罗新为泰地罗新或其药物上可接受的盐。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述酸为无机酸或有机酸。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述酸为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、柠檬酸、酒石酸中的一种或多种。

4.一种含泰地罗新的药物组合物，所述药物组合物的剂型为口服剂，所述口服剂包括口服液，且所述泰地罗新为泰地罗新或其药物上可接受的盐；

所述口服液包括质量/体积百分数为1～20％的泰地罗新、20～70％的有机溶剂、以及余量为水，且以酸调节所述口服液的pH值为5.5～6.5。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述有机溶剂为N,N-二甲基吡咯烷酮、二甲基甲酰胺、丙二醇、甘油、吐温中的一种或多种。