KR20200144568A

KR20200144568A - 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품, 조합 산물 및 그 응용

Info

Publication number: KR20200144568A
Application number: KR1020207032925A
Authority: KR
Inventors: 쉰레이 지앙; 쉰동 지앙
Original assignee: 상하이 통리엔 파마슈티컬 컴퍼니 리미티드
Priority date: 2018-04-17
Filing date: 2019-04-17
Publication date: 2020-12-29
Also published as: MX2020010938A; JP2021533144A; CA3098205A1; AU2019254974A1; US20210177881A1; WO2019201268A1; EP3782627A1; EP3782627A4

Abstract

본 발명은 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품, 조합 산물 및 그 응용을 공개하고，상기 의약품의 유효 성분은 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신 III, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 I 중의 하나; 또는 이소발레릴 스피라마이신 I, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 III 중의 두 가지 또는 세 가지의 조합을 포함한다.

Description

통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품, 조합 산물 및 그 응용

본 발명은 의약품 응용 분야에 속하고, 구체적으로 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품, 조합 산물 및 그 응용에 관한 것이다.

국제 통증 협회는 통증을 실제 또는 잠재적인 신체 손상과 관련된, 사람들이 느끼는 불쾌한 감각이나 감정적 경험이라고 정의하고 있다. 1995년 미국 통증 학회는 통증을 제5대 생명 특징에 속한다고 하였고, 혈압, 체온, 호흡, 맥박과 함께 생체 특징의 중요한 지표를 구성한다.

암 통증은 암 환자들의 가장 흔하고 견디기 힘든 증상인 동시에, 제어가 가장 어려운 증상 중 하나이며, 약 30%~50%의 암 환자는 상이한 정도의 통증을 겪고 있고, 60%~90%의 암 말기 환자는 중등, 중증 통증을 겪고 있어, 암 환자의 생활의 질에 크게 영향을 준다.

장기적으로 통증을 겪고 있는 환자의 생활의 질을 향상시키기 위하여, 각 나라의 학자들은 통증을 치료하는 새로운 방법을 찾아 환자를 통증에서 해방시키고자 노력하였다. 상기 질병에 대해, 현재 통증을 치료하기 위한 의약품이 아주 많지만 대다수 의약품은 약효가 느리고 치료 주기가 길며 부작용이 크고 의존성이 강하며, 환자의 내성(Tolerance)의 제한으로 인해 일부 환자들의 진통 효과가 좋지 못하다.

바이트 스피라마이신(Bitespiramycin), 성지마이신(Shengjimycin)이라고도 불리우는 캐리마이신(Carrimycin)은 중국 의학과학원 생물기술연구소와 본 출원인이 합작하여 유전자 변형 기술을 통해 카보마이신 생성 균의 4'' 이소발레릴기 전이효소 원자단(4'' -o-acyl-transferase)을 스피라마이신 생성 균에 클론하고, 스피라마이신 4'' -OH를 유도 아실화하며, 4'' 위치에 이소발레릴기 측쇄에 형성된 4'' 위치 이소발레릴기 스피라마이신을 주요 성분으로 하는 신형 항생제를 추가한 것이다.

식 (I)

캐리마이신은 다양한 스피라마이신 유도체로 구성되고, 주요 유효 성분 이소발레릴 스피라마이신 (I+II+III) 총 함량이 60%보다 작지 않으며, 아실화 스피라마이신의 총 함량이 80%보다 작지 않고, 약학적으로 허용 가능한 약학 조성물이다. 중심 구조는 16원 마크롤라이드가 하나의 분자 포로사민, 하나의 분자 미카미아오스 및 하나의 분자 미카로오스에 연결되어 이루어지고, 그 주요 성분 이소발레릴 스피라마이신 I, II, III과 스피라마이신 구조의 다른 점은 미카로오스 4'' 위치에 연결된 원자단이 히드록실기가 아니라 이소발레릴기 라는 것이다. 화학적 구조는 식 (1)과 같고, 10여 가지의 성분을 포함한다. 현재 캐리마이신 완제품 조성 표준은 이소발레릴 스피라마이신 III ≥ 30%, 이소발레릴 스피라마이신 I, II, III 의 비율 총합 ≥ 60%, 아실화 스피라마이신의 총 비율 ≥ 80%, 다른 미지 성분의 총합 ≤ 5%이다.

캐리마이신은 16원 마크롤라이드계 항생제에 속하고, 활성 원자단 카르복실기, 알콕시기, 에폭시기, 케톤기와 알데히드기 및 한 쌍의 공액 C=C를 구비하며, 분자량은 약 884 ~ 982이다. 유사한 화학적 구조를 구비하기에 캐리마이신과 마크롤라이드계 항생제는 많은 공통성을 구비하는 바, 에스테르계, 아세톤, 클로로포름, 알코올계 등 대다수 유기 용매에 잘 용해되고, 석유 에테르에 약간 용해되며, 물에 잘 용해되지 않고, 분자 구조에는 2개의 디메틸아미노기를 포함하여 약산성을 띠고 산성 수용액에 잘 용해되며; 용해도가 온도가 올라감에 따라 내려가는 "부 용해도(Negative solubility)" 성질을 구비한다. 캐리마이신 주요 성분 이소발레릴 스피라마이신 4'' 위치 탄소 사슬이 길기에 친수성이 차하고, 물에 대한 용해도가 스피라마이신 및 4'' -아세틸 스피라마이신보다 작다.

캐리마이신은 백색 무결정 분말로서 약간의 흡습성이 있고, 비선광도는 약 -80.8°이며, 자외선 최대 흡수 파장은 231 ~ 232nm이고, 자체적으로 약간의 형광 발색 원자단을 구비하고, 진한 황산 또는 염산을 만나면 자색 반응을 나타내고, 강한 자색 형광을 발생하며, 231 ~ 232nm 에서 최대 광 흡수값을 가진다.

해당 의약품은 친유성이 좋고 조직 침투 능력이 강하며, 구강 복용 시 흡수가 빠르고 체내 유지 시간이 길며, 지속적인 후항생제 효과가 있다. 약효와 화학 형태의 관계에 따라, 마크롤라이드계 항생제 4'' 위치 아실화 후 그 친유성 및 체내 활성이 높아지고, 체내 항균 활성과 임상 치료 효과도 현저하게 높아지며, 항생제가 체내에서의 안정성은 4'' 히드록실기 에스테르의 탄소 사슬이 길어짐에 따라 증가되고, 즉 이소발레릴 스피라마이신 ＞ 부티릴 스피라마이신 ＞ 프로피오닐 스피라마이신 ＞ 아세틸 스피라마이신이다.

초보적인 체내외 약효학 실험에 따르면, 해당 의약품은 다수의 G⁺ 균에 대해 좋은 항균 활성을 구비할 뿐만 아니라, 일부 G^-균에 대해서도 일정한 작용이 있다. 각 항 기술 지표는 모두 아지트로마이신, 에리드로마이신 아세틸 스피라마이신, 마데카마이신보다 현저히 우수하고, 특히 폐렴 마이코플라즈마에 대한 항균 활성이 가장 강하며, 에리드로마이신 내약균, 임균, 폐렴구균, 황색포도상구균, 녹농균, 인플루엔자균, 호혈인플루엔자균, 박테로이데스 프라길리스, 레지오넬라균, 멀티 간균 및 가스괴저균에 대해서도 일정한 항균 활성이 있고, 임상 에리드로마이신 내성 황색포도상구균에 대해서는 극히 적은 교차 내성(Cross Resistance)만 있다. 캐리마이신은 주로 그람양성균 감염성 질병의 치료에 사용되고, 특히 상부 호흡기 감염에 사용되며, 비뇨계통 감염 등에 사용될 수 있다.

의약품동역학 연구 결과에 따르면, 캐리마이신 중의 활성을 구비하는 유효 성분은 주로 이소발레릴 스피라마이신 I, II, III이다. 캐리마이신이 체내에 들어간 후 대사를 통해 스피라마이신이 되고, 모체 이소발레릴 스피라마이신 I, II, III과 활성 대사물 스피라마이신 I, II, III의 AUC_0-t 총합으로 계산하면, 그 구강 복용의 절대 생체이용률은 평균 91.6%이다, 이는 이소발레릴 스피라마이신의 구조가 유효 성분 스피라마이신의 생체 이용률을 현저히 개선하였다는 것을 설명한다. 캐리마이신을 한번 복용하면 제거가 느리고, T_1/2β가 23-27시간 사이이다.

이를 감안하여 특히 본 발명을 제출한다.

본 발명이 해결하고자 하는 기술적 과제는 선행기술의 부족점을 극복하는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품, 조합 산물 및 그 응용을 제공하는 것이다.

상기 기술적 과제를 해결하기 위해, 본 발명이 사용하는 과제의 해결 수단의 기본 구상은 아래와 같다.

본 발명은 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품을 제공하고, 상기 의약품의 유효 성분은 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신 III, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 I 중의 하나;

또는 이소발레릴 스피라마이신 I, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 III 중의 두 가지 또는 세 가지의 조합을 포함한다.

또한, 상기 의약품은 의학적으로 허용 가능한 담체를 포함하고，상기 의약품은 의학적으로 허용 가능한 정제, 캡슐, 환제, 주사제, 서방출혈제 및 각종 미립 투여 시스템으로 제조된다.

또한, 상기 의약품의 사용량은 10 ~ 80 mg/kg이다.

본 발명은 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품을 더 제공하고, 상기 의약품의 유효 성분은 캐리마이신의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;

이소발레릴 스피라마이신 III의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;

이소발레릴 스피라마이신 II의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;

이소발레릴 스피라마이신 I의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체 중의 적어도 하나를 포함한다.

또한, 상기 의약품은 의학적으로 허용 가능한 담체를 포함하고，상기 의약품은 의학적으로 허용 가능한 정제, 캡슐, 환제, 주사제, 서방출형제 및 각종 미립 투여 시스템으로 제조된다.

또한, 상기 의약품의 사용량은 10 ~ 80 mg/kg이다.

본 발명은 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 조합 산물을 더 제공하고, 상기 조합 산물은 제1 약제를 포함하고, 상기 제1 약제의 유효 성분은 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신 III, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 I 중의 하나;

또한, 상기 조합 산물은 제2 약제를 더 포함하고，상기 제2 약제는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 관련 의약품 중의 적어도 하나를 포함하며;

바람직하게, 상기 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 관련 의약품은 마약성(마취) 진통제, 해열성 진통제, 항생제계 의약품, 항바이러스계 의약품을 포함한다.

본 발명은 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 조합 산물을 더 제공하고, 상기 조합 산물은 제1 약제를 포함하고, 상기 제1 약제의 유효 성분은 캐리마이신의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;

또한, 상기 조합 산물은 제2 약제를 더 포함하고，상기 제2 약제는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 관련 의약품 중의 적어도 하나를 포함하며; 상기 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 관련 의약품은 마약성 진통제, 해열성 진통제, 항생제계 의약품, 항바이러스계 의약품을 포함한다.

본 발명은 상술한 어느 하나의 의약품 또는 상술한 어느 하나의 조합 산물이 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는데 있어서의 응용을 더 제공한다.

또한, 상기 통증은 암 통증을 포함한다. 상기 통증은 외상성 통증 및 신경성 통증을 포함한다.

본 발명은 상술한 어느 하나의 의약품 또는 상술한 어느 하나의 조합 산물이 프로스타글란딘의 합성을 감소 또는 저지하여 P 물질의 방출을 억제하고, 5-히드록시트립타민 및 노르에피네프린의 재흡수를 억제하며, 고리형 산소화효소의 활성을 억제하는데 있어서의 응용을 더 제공한다.

이미 알고 있는 통증을 일으키는 내원성 통증 인자는 프로스타글란딘, P 물질, 5-히드록시트립타민, 노르에피네프린을 포함한다. 발열의 메커니즘은 병원체가 대식 세포를 자극하여 세포 인자를 방출하도록 하고, 사이클로스포린은 아라키돈산이 프로스타글란딘을 생성하도록 촉매화함으로써, 발열, 통증 및 염증을 일으킨다.

본 발명의 캐리마이신은 선행기술의 방법에 따라 분리하여 제조할 수 있고, 출원번호 CN101785778A의 중국 특허 출원의 실시예 1의 방법에 따라 분리 제조하여 얻을 수 있다.

상기 과제의 해결 수단을 사용한 후 본 발명은 선행기술에 비해 아래와 같은 유익한 효과를 구비한다.

본 발명의 의약품 및 조합 산물은 통증 및/또는 발열에 대해 우수한 치료 효과를 구비하고, 특히 암 통증에 대해 현저한 진통 작용이 있으며, 약효가 빠르고 치료 주기가 짧으며 부작용이 작고 의존성이 약하며, 환자의 내성의 제한을 받지 않기에, 중요한 경제적 효과와 사회적 효과가 있다.

도면은 본 발명의 일부분으로서 본 발명에 대해 이해를 위한 것이고, 본 발명의 예시적 실시예 및 그 설명은 본 발명을 해석하기 위한 것으로서 본 발명에 대한 부당한 한정이 아니다. 보다시피, 아래 설명에서 도면은 일부 실시예일 뿐이고, 본 기술분야의 통상의 기술자는 진보성 창출에 힘쓰지 않는 전제하에 이런 도면으로부터 다른 도면을 얻을 수도 있다.
도 1은 본 발명의 래트 접종 측 뒷다리의 기계적 통증 역치이다.
도 2는 본 발명의 래트의 접종 반대측 뒷다리의 기계적 통증 역치이다.
도 3은 본 발명의 래트 접종 측 뒷다리의 열 통증 역치이다.
도 4는 본 발명의 래트의 접종 반대측 뒷다리의 열 통증 역치이다.
도 5는 본 발명의 약품 및 조합 산물이 LPS 발열 모델 래트 체온 변화에 대한 절선그래프이다.
도 6은 본 발명의 약품 및 조합 산물이 건조 효모 발명 모델 래트 체온 변화에 대한 절선그래프이다.
설명해야 할 것은, 이런 도면 및 문자 설명은 어떤 방식으로든 본 발명의 구상 범위에 대한 한정이 아니고, 특정 실시예를 참고하여 본 기술분야의 통상의 기술자에게 본 발명의 개념을 설명할 뿐이다.

본 발명의 실시예의 목적, 과제의 해결 수단 및 장점이 더 명확해지도록, 아래 본 발명의 실시예 중의 도면을 참조하여 실시예 중의 과제의 해결 수단에 대해 명확하고 완전한 설명을 진행하며, 아래 실시에는 본 발명을 설명하기 위한 것이고 본 발명의 범위를 한정하기 위한 것이 아니다.

실시예 1: 코팅정

규격: 200mg/350mg

중심정 처방:

코팅액 처방:

의약품A는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신 III, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 I 중의 하나; 또는 이소발레릴 스피라마이신 I, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 III 중의 두 가지 또는 세 가지의 조합이다.

제조 공법:

중심정의 제조: 주약 및 보조 재료를 각각 100 메시 체로 거르고, 처방량의 의약품A 분말, 마이크로크리스탈린 셀룰로오스와 1/2 처방량의 카르복시메틸 전분 나트륨을 균일하게 혼합한 다음, 5% 포비돈 K₃₀ 수용액을 첨가하여 부드러운 재료(soft materials)를 제조하고, 18 메시 체로 과립을 제조하며, 습식 과립은 60℃ 통풍 조건에서 2h 건조하고, 건조 후 18 메시 체로 체별(Sieving)하며, 1/2 처방량의 카르복시메틸 전분 나트륨과 스테아린산 마그네슘을 첨가하여 균일하게 혼합한 후, 직경 11mm의 딤플 프레스 펠렛팅기를 이용하여 태블릿 무게 350 mg, 경도 6.5kg의 의약품 함유 중심정을 제조한다.

코팅액의 조제: 필요한 Opadry II(백색)를 계량하고 조제 용기에 필요한 량의 물을 첨가하며, 여러번 나누어 첨가하고, 모두 첨가한 후 교반 속도를 늦추어 회오리가 사라지도록 하며, 계속하여 30min 교반하면 된다.

필름 코팅정의 제조: 중심정을 코팅기(coating pan) 내에 넣고, 코팅 조건은 기기 속도 20r/min, 공기 유입 온도 40℃, 공기 유출 온도 30℃, 안개 분사 압력은 0.02Mpa, 시럽 분출 유량 1ml/min로 설정하여 코팅을 진행하고, 조건이 안정된 후 계속하여 1.5h 동안 분사하여 태블릿 표면이 매끈하고 광택이 균일해져 필름 코팅 검증 표준에 합격되도록 한다. 코팅으로 인해 무게는 5% 정도 증가된다.

실시예 2: 정제(10000정으로 계산)

처방:

제조 공법: 적정량의 전분을 계량하여 취하고, 15%의 농도로 희석하며, 페이스트가 될 때까지 가열하여 바인더를 제조하고, 주재료 의약품 A는 분말이고, 보조 재료인 전분, 저 치환도 하이드록시프로필 셀룰로오스, 전분 글리콜산 나트륨, 스테아린산 마그네슘은 각각 100 메쉬 체로 거르고, 처방량에 따라 필요한 주재료 및 보조 재료를 계량하여 취하고; 의약품A 분말, 전분, 저 치환도 하이드록시프로필 셀룰로오스를 충분히 균일하게 혼합한 후, 15% 전분 농도의 전분 페이스트를 이용하여 부드러운 재료로 제조하고, 14메시 체로 과립을 제조하며, 50-60℃에서 건조하여 수분을 3-5％로 제어하고, 14메시 체로 체별하며, 전분 글리콜산 나트륨, 스테아린산 마그네슘을 첨가하여 혼합하고, 과립 함량을 측정하며; 과립 함량에 따라 태블릿 무게를 계산하고, 펠렛팅(Φ9mm 딤플 프레스 헤드)을 진행하며, 태블릿 무게 차이를 측정하고; 검증이 합격된 후 포장한다.

실시예 3: 캡슐제(10000정으로 계산)

처방:

제조 공법: 주재료 의약품A 분말, 보조 재료 약용 전분을 공법 처방량에 따라 각각 계량하여 취한 후, 혼합기에 넣고 1.5-2 시간 동안 충분히 혼합하고; 샘플링하여 측정한 함량 데이터가 이론적인 데이터와 기본적으로 일치해야 하며(캡슐당 함유 중량은 약 0.105g), 검증 합격된 약용 3호 캡슐 및 잘 혼합된 포장할 원료를 전자동 캡슐기 조작 요구에 따라 각각 원료 공급기에 넣고 충진한다. 충진된 캡슐에 대해 차이 검증(±10％ 이내, ＜0.3g)을 진행하고, 용출도가 요구에 부합되어야 하며, 검증 후 요구에 부합되는 캡슐을 폴리싱기에 넣고 액체 파라핀을 첨가하여 15-20분 동안 폴리싱 처리를 진행한 다음 꺼내 완제품 포장박스 검증을 진행한다.

실시예 4: 드라이 시럽(10000포로 계산)

처방:

제조 공법: 의약품A 분말, 구연산, 자당을 각각 고속 기류 분쇄기로 과립 85％가 300 메쉬를 통과하고 15%가 180 메쉬를 통과하도록 분쇄한 다음, 분쇄 후의 고운 분말을 처방량에 따라 계량하여 취한 후 1-1.5 시간 동안 충분히 혼합하고 그 함량을 측정하며 포장량을 계산한다(이론적인 포장량은 포당 500mg). 다음 혼합물을 포장기에 넣고 은박지로 포장한 다음 분리포장기 조작 요구에 따라 분리 포장하고, 포장량 차이는 ±5％ 이내이며, 포장 후 검증 합격 후 외포장을 진행한다.

실시예 5: 과립제(10000포로 계산)

처방:

제조 공법: 의약품A 분말, 가루 사탕, 덱스트린을 120메시 체로 거르고, 처방량에 따라 의약품A 분말, 가루 사탕, 덱스트린을 계량하여 취한 후 균일하게 혼합하고, 균일하게 혼합한 상기 재료를 5％ PVP-K₃₀ 콜로이드를 이용하여 부드러운 재료로 제조하고, 진동 과립기로 제립을 진행하며, 70℃에서 건조를 진행하고 체별하며 검증 합격 후 분리 포장한다.

실시예 6: 동결 건조 분말 주사제

의약품A 분말 500mg 및 같은 몰량의 아디프산을 계량하여 취하고 균일하게 혼합한 후 5ml 물에 용해시켜 담황색 깨끗한 용액을 얻고, pH는 4.6-5.6 사이이다. 마니톨 40mg를 첨가하여 동결 건조 프로판트로 하고, 저온에서 9h 쾌속 냉동한 후 동결 건조하여 담황색 푸석푸석한 덩어리를 얻고, 사용 전 10ml 무균수로 용해시킨다.

실험예 1: 경골 암 통증 모델의 구축

Walker 래트 유선암 세포는 상하이생물의학공정연구소에서 구매하였다. 1ml복수종양(약 2×10⁷개 세포/ml)을 취하여 70-80g 암컷 Wistar 래트 복강 내에 접종하고, 7-10일 후 5ml 복수를 취하여 3분간 원심부리(1300rpm)하고 침전시킨 후, 10ml PBS로 세척하고 다시 원심 분리하여 침전시킨 다음, 다시 섞고(resuspend) 카운트를 진행하고, 세포 농도를 1×10⁷개 세포/ml로 조절하고 아이스 박스에 넣어둔다.

복강에 10% 포수클로랄(4ml/kg 체중)을 주사하여 래트를 마취시키고, 우측 무릎 관절 부위를 제모하며, 75% 알코올로 피부를 소독한다. 왼손으로 무릎 관절을 고정하여 그 표면 피부가 당겨지게 하고, 7호 니들 헤드로 무릎 관절 슬개 인대 내측 변두리에서 경골 종축을 따라 경골 끝을 향해 천공하되 깊이는 약 1cm이다. 다음 종양 세포가 흡입되어 있는 마이크로 시료 주입기(주입 전 마이크로 시료 주입기 내에 순차적으로 1μl 공기, 2μl 젤라틴 해면 수용액, 1μl 공기, 4μl 종양 세포 또는 PBS를 흡입한다)로 바꾸어 경골 골수강 내에 4μl 종양 세포를 주사하고; 대조 그룹 래트에 같은 량의 PBS를 주사하며, 마지막으로 모두 2μl 젤라틴 해면 용액을 주입하여 폐쇄하고 주사 후 1분간 니들을 빼지 않아 주사물이 나오는 것을 방지한다.

래트는 2개의 그룹으로 나누는데 각각 PBS를 주사한 대조 그룹과 Walker 256 모델 그룹이다. 모델 구축 전에 복사 열수축 발움츠림 잠복기(PWL)를 측정하여 기초 통증 역치로 한다. 모델 구축 후 하루 건너 한번씩 PWL을 측정하여 열 통증감각 과민 역치로 하며 구체적으로 표 2를 참조하고, 상응한 곡선도는 도 3, 4에 도시된 바와 같다. 아울러, von Frey 필라멘트로 인한 기계적 통증을 측정하고, 모델 구축 전에 기계적 통증 역치를 측정하여 기초 통증 역치로 한다. 모델 구축 후 격일로 한번씩 기계적 통증감각을 측정하여 열통증감각 과민 역치로 하며 구체적으로 표 1을 참조하고, 상응한 곡선도는 도 1, 2에 도시된 바와 같다.

^* p<0.05와 대조 그룹의 비교, ^** p<0.01과 대조 그룹의 비교

결과에 따르면, PBS 래트에 비해 Walker256를 접종한 후의 래트는 2번째 날부터 접종 측 뒷다리 Von Frey 필라멘트로 인한 기계적 통증 역치가 현저하게 감소(P<0.05)되었음을 볼 수 있다. 접종측과 유사하게, Walker256를 접종한 래트의 반대측 뒷다리의 기계적 통증 역치도 유사한 변화가 발생하였다. 그러나 열 통증감각 실험에서, Walker256를 접종한 후의 래트의 양측 뒷다리는 전반 실험 과정에서 모두 열 통증감각 과민 역치가 모두 현저한 차이(P<0.05)가 발생하지 않았다.

실험예 2: 의약품A가 경골 암 통증 래트 기계적 통증 역치에 대한 영향

래트를 랜덤으로 6개의 그룹으로 나누고, 각각 모델 그룹, 10, 20, 40 및 80 mg/kg 의약품A 투여 그룹, 양성 의약품(염산 모르핀) 대조 그룹이다. 경골 암 통증 모델 구축 완료 후, 연속 12일 동안 위내 투여하였고, 모델 그룹에는 동일한 부피의 생리식염수를 위내 투여하였으며, 양성 의약품 그룹은 실험의 마지막 날에 15 mg/kg의 염산 모르핀을 투여하였다. van Frey 필라멘트로 인한 기계적 통증을 지표로 하여 래트의 기계적 통증 역치의 변화를 측정하였고 구체적으로 표 3과 같다. 의약품A의 유효 성분은 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신 III, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 I 중의 하나; 또는 이소발레릴 스피라마이신 I, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 III 중의 두 가지 또는 세 가지의 조합을 포함한다.

^** p<0.01과 대조 그룹의 비교, ^*** p<0.001과 대조 그룹의 비교결과에 따르면, 모델 대조 그룹과 비교하여 20, 40, 80 mg/kg 의약품A 투여 그룹 및 양성 의약품 대조 그룹의 래트 모델 뒷다리의 기계적 통증 역치는 현저하게 높아졌고(p<0.01), 진통률은 각각 83.3%, 127.8%, 188.9%, 205.5%에 달하며, 의약품이 모델 반대측 뒷다리의 기계적 통증 역치에 대한 영향도 유사하고, 진통률은 각각 40.7%, 88.9%, 125.9%, 133.3%에 달하는 것을 볼 수 있다. 상술한 결과는 의약품 A가 암 통증 래트의 기계적 통증 역치를 현저하게 향상시킬 수 있음을 설명한다.

종합하면, 래트 경골 암 통증 모델을 구축하고 마이크로 시료 주입기를 사용하여 Walker256 유선암 세포를 래트 결골 골수강 내에 주입하였다. 종양 세포가 성장함에 따라, 래트 뒷다리에는 현저한 열 통증감각 과민이 나타나지 않았으나, 현저한 기계적인 통증감각 과민이 나타났고, 이 모델 구축이 성공하였음을 의미한다. 모델 구축 후 연속 12일 동안 위에 투여한 후 래트 양측 뒷다리의 기계적 통증 역치를 측정하였다. 결과에 따르면, 20-80 mg/kg 의약품A 투여 그룹 래트의 양측 뒷다리의 기계적 통증 역치가 현저하게 향상되었다. 20-80 mg/kg 의약품A의 투여는 모두 암 통증 래트의 기계적 통증 역치를 현저하게 향상시켰고, 실험 결과는 의약품 A가 암 통증의 치료에 사용될 수 있다는 것을 의미한다.

실험예 3: 마우스 몸부림 진통 실험

마우스 몸부림은 진통제를 선별하는 전형적인 방법으로서, 그 원리는 의약품 투여 마우스가 화학적 통증에 대한 인내 정도를 관찰하고, 그 방법은 의약품 투여 마우스의 복강 내에 1.44%의 초산을 0.2ml/마리의 량으로 주사하고, 주사하고 30min 내의 동물 몸부림 횟수를 기록하였다. 몸부림 지표는 복부를 실린더 밑에 대고 앞으로 기어가고 뒷다리를 쭉 뻗거나 엉덩이를 들고 한쪽으로 비트는 것이고, 몸부림 실험은 민감도가 높다.

건강한 쿤밍 종 수컷 마우스 60마리를 취하고, 체중은 18-22g이며, 동물 검역 합격 후 랜덤으로 6개의 그룹으로 나누고, 각각 블랭크 대조 그룹, 10 mg/kg, 20 mg/kg, 40 mg/kg, 80 mg/kg 의약품A 사용량 그룹 및 양성 의약품 염산 모르핀 15 mg/kg이며, 그룹당 10마리 마우스가 있다. 실험 전 각 그룹의 마우스에 대해 먼저 위에 투여를 진행하고, 블랭크 대조 그룹 마우스는 매일 같은 부피의 생리식염수를 투여하며, 연속 3일 투여하고; 양성 의약품 염산 모르핀은 실험 당일 1번만 투여한다. 의약품A의 유효 성분은 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신 III, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 I 중의 하나; 또는 이소발레릴 스피라마이신 I, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 III 중의 두 가지 또는 세 가지의 조합을 포함한다.

투여 1h 후 마우스당 1.44% 빙초산을 0.2ml/20g의 량으로 복강 주사하고, 빙초산을 주사한 20min 후 각 마우스의 몸부림 횟수를 기록하며, 그룹 사이의 차이를 분석한 다음 의약품 진통률을 계산하고, 진통률%=(블랭크 그룹 몸부림 횟수- 투여 그룹 몸부림 횟수)÷블랭크 그룹 몸부림 횟수×100%이며, 구체적으로 표 4와 같다.

^* p<0.05와 대조 그룹의 비교, ^** p<0.01과 대조 그룹의 비교결과에 따르면, 마우스의 몸부림 횟수는 의약품 A의 투여량이 증가됨에 따라 감소하고, 10 mg/kg, 20 mg/kg, 40 mg/kg, 80 mg/kg 의약품A 사용량 그룹이 빙초산으로 인한 마우스 통증에 대한 진통률은 각각 15.26%, 22.48%, 35.92%, 48.65%이며, 양성 의약품 염산 모르핀의 진통률은 45.83%임을 볼 수 있다. 따라서 20-80 mg/kg의 의약품A는 현저한 진통 작용을 구비한다.

실험예 4: 마우스 열판 진통 실험

마우스 열판법은 진통제를 선별하는 전형적인 방법으로서, 그 원리는 마우스를 사전 가열한(55±0.1℃) 항온 열판에 놓고, 마우스의 발이 열판 자극을 받아 통증이 발생 시 발을 ?C기까지 필요한 시간을 통증 역치로 한다. 이를 관측 지표로 하고 의약품 투여 전후의 역치를 변화를 비교하여 진통 의약품의 효과를 평가한다.

건강한 쿤밍 종 수컷 마우스 60마리를 취하고, 체중은 18-22g이며, 동물 검역 합격 후 랜덤으로 6개의 그룹으로 나누고, 각각 블랭크 대조 그룹, 10 mg/kg, 20 mg/kg, 40 mg/kg, 80 mg/kg 의약품A 사용량 그룹 및 양성 의약품 염산 모르핀 15 mg/kg이며, 그룹당 10마리 마우스가 있다. 실험 전 각 그룹의 마우스에 대해 먼저 위에 투여를 진행하고, 블랭크 대조 그룹 마우스는 매일 같은 부피의 생리식염수를 투여하며, 연속 3일 투여하고; 양성 의약품 염산 모르핀은 실험이 끝나기 전 1번만 투여한다. 의약품A의 유효 성분은 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신 III, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 I 중의 하나; 또는 이소발레릴 스피라마이신 I, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 III 중의 두 가지 또는 세 가지의 조합을 포함한다.

마우스를 55℃까지 사전 가열한 열판 통증 측정기에 놓고, 스톱워치로 마우스가 열판에 올려져서부터 발을 ?C기까지의 시간을 해당 마우스의 진통 역치로 기록한다. 투여 전후 각각의 마우스의 진통 역치를 측정하고, 30초를 초과하지 않으면 합격이다. 의약품 투여 30, 60, 90, 120min 후 다시 한번 측정하고, 실험이 끝난 후 측정된 통증 역치 평균값에 따라 통증 역치의 상승 퍼센트를 계산하고, 통증 역치 상승 퍼센트 % = (의약품 투여 후 평균 통증 역치 - 의약품 투여 전 평균 통증 역치)÷의약품 투여 전 평균 통증 역치×100%이며, 구체적으로 표 5, 6과 같다.

^* p<0.05와 대조 그룹의 비교, ^** p<0.01와 대조 그룹의 비교, ^*** p<0.001와 대조 그룹의 비교

결과에 따르면, 투여 30 min 후 40 mg/kg, 80 mg/kg 의약품A 그룹 및 양성 의약품 그룹의 통증 역치 통증 퍼센트는 각각 21.21%, 49.38% 및 68.11%이고, 투여 60 min 후 40 mg/kg, 80 mg/kg 의약품A 그룹 및 양성 의약품 그룹의 통증 역치 통증 퍼센트는 각각 35.77%, 49.33% 및 54.01%이며, 투여 90 min 후 40 mg/kg, 80 mg/kg 의약품A 그룹 및 양성 의약품 그룹의 통증 역치 통증 퍼센트는 각각 40.29%, 42.37% 및 51.90%이다. 따라서 40-80 mg/kg 의약품 A는 현저한 진통 작용이 있다.종합하면, 마우스 몸부림법 진통 실험은 마우스의 몸부림 횟수가 약무 A의 투여량의 증가됨에 따라 감소하고, 10 mg/kg, 20 mg/kg, 40 mg/kg, 80 mg/kg 의약품A 사용량 그룹이 빙초산으로 인한 마우스 통증에 대한 진통률은 각각 15.26%, 22.48%, 35.92%, 48.65%이며, 양성 의약품 염산 모르핀의 진통률은 45.83%라는 것을 보여준다. 마우스 열판법 진통 실험은 의약품 A를 투여한 후 마우스가 발을 ?C기까지의 시간이 상이한 정도로 연장되었고, 여기서 40 mg/kg, 80 mg/kg 사용량 그룹이 30 min 및 60 min일 때의 통증 역치가 현저히 향상되었다는 것을 보여준다. 이로부터 의약품 A는 현저한 진통 작용이 있고 중요한 경제적 효익과 사회적 효익이 있음을 알 수 있다. 마우스 몸부림법 진통 실험은 20-80 mg/kg 의약품A의 투여는 모두 현저한 진통 작용이 있음을 보여준다. 마우스 열판법 진통 실험은 투여량이 40, 80 mg/kg인 의약품 A를 투여한지 30min후 현저한 진통 작용이 있다는 것을 보여준다. 실험 결과에 따르면 의약품 A는 진통에 사용될 수 있다.

실험예 5, 의약품A가 LPS로 인한 래트 일반 발열 모델에 대한 영향

실험 동물: 건강한 수컷 Sprague Dawley 래트(등급 SPF), 체중의 220 - 260 g, 랴오닝성 창성생물기술 유한회사에서 구매하였고, 허가증 번호는 SCXK(랴오)2015 - 0001이다.

실험 약품 및 시약:

LPS (100mg): (Sigma 社), 로트 번호: L2880;

염화나트륨 주사액( 0. 45 g, 500 mL): (스자좡 제4약 유한회사) 로트 번호: 101217406; 0.9% 염화나트륨 주사액을 1 mg/ml로 용해 희석하고, EP 관에 분리 포장하며, -80℃에 저장해 둔다. 사용 전 0.9% 염화나트륨 주사액을 사용하여 10 μg/ml(100 μg/kg)의 무균 주사액으로 희석한다.

실험 의기:

전자 체온 MC-347 형: 오므론유한회사 생산(다롄), 온도 오차는 ± 0.1℃;

TE2101-L 전자 저울: 베이징 싸토리우스 의기시스템 유한회사;

PB602-N 전자 저울: 메틀러 토레도 의기 유한회사(상하이)

조작 단계는 아래와 같다.

그룹핑:

체중이 220 - 260 g인 수컷 SD 래트를 3d 동안 적응성 사육하고, 자유롭게 물과 음식을 섭취하도록 하며 12h 밤낮 순환시킨다. 랜덤으로 6개의 그룹으로 나누고, 각각 블랭크 대조 그룹, 모델 그룹, 의약품A 25, 50 및 100 mg/kg 또는 양성 의약품 이부프로펜 30 mg/kg이며 그룹당 10마리 마우스가 있다. 각 그룹은 부피 1ml/100 g 체중에 따라 위내 투여를 한다. 정상 그룹과 모델 그룹은 같은 부피의 증류수를 투여하고, 의약품 A 그룹과 양성 의약품 그룹은 상응한 사용량의 의약품을 투여하며, 각 그룹은 연속 2일 투여하고, 3번째 날 모든 마우스는 6h 동안 음식은 금지하고 물은 금지하지 않는다. 다음 정상 그룹과 모델 그룹에 같은 부피의 증류수를 투여하고, 의약품 A 그룹과 양성 의약품 그룹은 마지막 의약품을 투여한다. 마지막 투여 후 정상 그룹을 제외하고 다른 그룹의 래트는 모두 LPS 100μg/kg를 복강 주사(ip)하고 20% 건조 효모 현탁액 1ml/100g 등 피하 주사(sc)하여 모델 구축을 완료한다. 투여 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 10 h 후 전술한 방법에 따라 항문 온도를 측정하고 각 시점의 최대 체온 상승 높이△T(△T =발열 시 체온 - 기초 체온)를 계산한다.

실험 결과는 표 7과 같다.

상기 실험 결과에 따르면, 블랭크 그룹과 비교하면 LPS 모델은 2h~10h 발열이 현저하고, 여기서 6h에 피크에 도달하고 추후 천천히 내려간다. 의약품 A 투여 그룹과 모델 그룹을 비교하면, 래트의 체온이 현저하게 내려간다. 2h 및 10h 시 50 mg/kg 및 100 mg/kg가 현저하고, 4h, 6h 및 8h 시점에서 각 사용량 그룹은 모두 현저하다. 따라서 의약품 A는 LPS로 인한 래트의 일반 발열을 개선할 수 있다는 것을 설명한다.

실험예 6: 의약품A가 건조 효모로 인한 래트 일반 발열 모델에 대한 영향

실험 약품 및 시약: 본 실험은 실험예 1의 LPS를 건조 효모로 대체하고, 건조 효모는 후베이 안치효모 유한회사 제품이며, 사용 전 0-4 ℃ 증류수를 사용하여 20% 균일한 현탁액으로 조제한다.

다른 실험 약품 및 시약은 실험예 1과 같다.

실험 의기: 실험예 1과 같다.

조작 단계: 본 실험은 실험예 1의 LPS를 건조 효모로 대체하고, 다른 실험 조작 단계 및 사용량 선택은 실험예 1과 같으며, 마지막으로 투여 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 10 h 후 측정한 항문 온도에 따라 각 시점의 최대 체온 상승 높이△T(△T =발열 시 체온 - 기초 체온)를 계산한다.

실험 결과는 표 8과 같다.

상기 실험 결과에 따르면, 블랭크 그룹과 비교하면 건조 효모 모델은 2h~10h발열이 현저하고, 여기서 6h에 피크에 도달하고 추후 천천히 내려간다. 의약품 A 투여 그룹과 모델 그룹을 비교하면, 래트의 체온이 현저하게 내려간다. 2h 및 10h 시 50 mg/kg 및 100 mg/kg가 현저하고, 4h, 6h 및 8h 시점에서 각 사용량 그룹은 모두 현저하다. 따라서 의약품 A는 건조 효모로 인한 래트의 일반 발열을 개선할 수 있다는 것을 설명한다. 상술한 내용은 본 발명의 바람직한 실시예일 뿐 본 발명에 대한 어떠한 형식에서의 한정도 아니다. 비록 본 발명은 바람직한 실시예로 상기와 같이 개시되었으나, 이로써 본 발명이 한정되는 것은 아니다. 본 기술분야의 통상의 기술자는 본 발명의 기술범위를 벗어나지 않고 상기 제시된 기술내용을 이용하여 약간의 변동 또는 수식을 통해 등가 변화된 등가 실시예를 얻을 수 있고, 본 발명의 기술 내용 범위 내에서 본 발명의 실질적인 기술에 따라 상기 실시예에 대해 진행한 임의의 간단한 수정, 등가 변화와 수식은 모두 본 발명의 범위에 속한다.

Claims

통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품에 있어서,
상기 의약품의 유효 성분은 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신 III, 이소발레릴 스피라마이신 II, 그리고 이소발레릴 스피라마이신 I 중의 하나;
또는 이소발레릴 스피라마이신 I, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 III 중의 두 가지 또는 세 가지의 조합을 포함하는 것을 특징으로 하는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품.
제1항에 있어서,
상기 의약품은 의학적으로 허용 가능한 담체를 포함하고，상기 의약품은 의학적으로 허용 가능한 정제, 캡슐, 환제, 주사제, 서방출형제(sustained release agent) 및 각종 미립 투여 시스템으로 제조되는 것을 특징으로 하는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품.
제1항에 있어서,
상기 의약품의 사용량은 10 ~ 80 mg/kg인 것을 특징으로 하는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품.
통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품에 있어서,
상기 의약품의 유효 성분은,
캐리마이신의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;
이소발레릴 스피라마이신 III의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;
이소발레릴 스피라마이신 II의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;
이소발레릴 스피라마이신 I의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체 중의 적어도 하나를 포함하는 것을 특징으로 하는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 의약품.
통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 조합 산물에 있어서,
상기 조합 산물은 제1 약제를 포함하고, 상기 제1 약제의 유효 성분은 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신 III, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 I 중의 하나;
또는 이소발레릴 스피라마이신 I, 이소발레릴 스피라마이신 II, 이소발레릴 스피라마이신 III 중의 두 가지 또는 세 가지의 조합을 포함하는 것을 특징으로 하는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 조합 산물.
제5항에 있어서,
상기 조합 산물은 제2 약제를 더 포함하고，상기 제2 약제는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 관련 의약품 중의 적어도 하나를 포함하며; 상기 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 관련 의약품은 마약성 진통제, 해열성 진통제, 항생제계 의약품, 항바이러스계 의약품을 포함하는 것을 특징으로 하는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 조합 산물.
통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 조합 산물에 있어서,
상기 조합 산물은 제1 약제를 포함하고, 상기 제1 약제의 유효 성분은 캐리마이신의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;
이소발레릴 스피라마이신 III의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;
이소발레릴 스피라마이신 II의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체;
이소발레릴 스피라마이신 I의 유도체, 약학적으로 허용 가능한 염, 용매 화합물, 대사산물, 입체 이성질체, 호변체, 다형체, 의약품 전구체 중의 적어도 하나를 포함하는 것을 특징으로 하는 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는 조합 산물.
제1항 내지 제3항에 중의 어느 한 항에 따른 의약품 또는 제4항에 따른 의약품 또는 제5항 내지 제6항 중의 어느 한 항에 따른 조합 산물 또는 제7항에 따른 조합 산물이 통증 및/또는 발열을 예방 및/또는 치료하는데 있어서의 응용.
제8항에 있어서,
상기 통증은 암 통증을 포함하는 것을 특징으로 하는 응용.
제1항 내지 제3항에 중의 어느 한 항에 따른 의약품 또는 제4항에 따른 의약품 또는 제5항 내지 제6항 중의 어느 한 항에 따른 조합 산물 또는 제7항에 따른 조합 산물이 프로스타글란딘의 합성을 감소 또는 저지하고 P 물질의 방출을 억제하며, 5-히드록시트립타민 및 노르에피네프린의 재흡수를 억제하고, 고리형 산소화효소의 활성을 억제하는데 있어서의 응용.