CN107249591B

CN107249591B - 固体药物配制品及其制备方法

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Publication number: CN107249591B
Application number: CN201580063476.2A
Authority: CN
Inventors: 海克·凯尔哈克; 布雷特·特鲁伊特; 铃木雄太; 村濑池沙; 鹿田太志
Original assignee: Eisai Co Ltd; Epizyme Inc
Current assignee: Eisai Co Ltd; Epizyme Inc
Priority date: 2014-11-17
Filing date: 2015-11-17
Publication date: 2024-01-30
Anticipated expiration: 2035-11-17
Also published as: KR20170103768A; EP3220916A4; IL296080B1; HUE062159T2; PT3220916T; PL3220916T3; IL296080A; WO2016081523A1; EP3220916A1; AU2015350108A1; MX2017006089A; DK3220916T3; NZ731696A; CA2967664A1; CN107249591A; SG11201703806XA; JP2021073241A; MX2021006734A; US20170360797A1; LT3220916T

Abstract

本发明涉及包含人类组蛋白甲基转移酶EZH2的一种或多种抑制剂的药物组合物，和使用这一种或多种EZH2抑制剂治疗癌症的方法。

Description

固体药物配制品及其制备方法

相关申请

本申请要求以下美国专利申请号的权益和优先权：2014年11月17日提交的62/080,985；2015年5月26日提交的62/166,572；和2015年11月6日提交的62/251,903，将这些专利申请中每个的内容通过引用以其整体而特此并入。

背景技术

已经将EZH2(一种组蛋白甲基转移酶)与各种癌症相联系。具体地说，在一系列癌症(如淋巴瘤、白血病和乳腺癌)中发现了EZH2的突变和/或过度活性。持续需要作为用于在抗癌治疗中使用的EZH2抑制剂的新药剂。

发明内容

本发明提供了治疗癌症(例如，实体瘤、B细胞淋巴瘤、或具有异常H3-K27甲基化的癌症)的方法。该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的剂型：

其中所述治疗有效量是在给予所述受试者之后提供生物等效于从约337ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml(例如，从约1720ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml、或从约7798ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)的单剂量。如本文使用的，表述“具有化学式(I)的化合物”、“化合物1”、和“EPZ-6438”都是指同一种化合物并且可以可互换地使用。

在另一个方面中，本发明提供了治疗癌症(例如，晚期实体瘤、B细胞淋巴瘤、或具有异常H3-K27甲基化的癌症)的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量是提供生物等效于对于每1mg的EPZ-6438而言从约4ng*hr/ml至约12ng*hr/ml(例如，对于每1mg的EPZ-6438而言从约7ng*hr/ml至约12ng*hr/ml、对于每1mg的EPZ-6438而言从约8ng*hr/ml至约12ng*hr/ml、对于每1mg的EPZ-6438而言从约9ng*hr/ml至约12ng*hr/ml、或对于每1mg的EPZ-6438而言从约9.7ng*hr/ml至约11.8ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)的单剂量。

在又另一个方面中，本发明提供了治疗癌症(例如，晚期实体瘤、B细胞淋巴瘤、或具有异常H3-K27甲基化的癌症)的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量提供生物等效于从约102ng/ml至约4125ng/ml(例如，从约476ng/ml至约4125ng/ml或从约1730ng/ml至约4125ng/ml)的平均Cmax的平均Cmax。

在又另一个方面中，本发明提供了治疗癌症(例如，晚期实体瘤、B细胞淋巴瘤、或具有异常H3-K27甲基化的癌症)的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量是提供生物等效于对于每1mg的EPZ-6438而言从约1.2ng/ml至约2.6ng/ml(例如，对于每1mg的EPZ-6438而言从约2.2ng/ml至约2.6ng/ml)的平均Cmax的平均Cmax的单剂量。

在仍另一个方面中，本发明提供了治疗癌症(例如，实体瘤、B细胞淋巴瘤、或具有异常H3-K27甲基化的癌症)的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量提供从约1小时至约2小时的中值Tmax。

本发明还提供了抑制EZH2或其突变体的组蛋白甲基转移酶活性的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量在给予该受试者之后提供至少约1170ng*hr/ml(例如，至少约4421ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)。

另外，本发明还提供了抑制EZH2或其突变体的组蛋白甲基转移酶活性的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量是在给予该受试者之后提供生物等效于从约337ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml(例如，从约1720ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml、或从约7798ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)的单剂量。

在又另一个方面中，本发明还提供了抑制EZH2或其突变体的组蛋白甲基转移酶活性的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量是提供生物等效于对于每1mg的EPZ-6438而言从约4ng*hr/ml至约12ng*hr/ml(例如，对于每1mg的EPZ-6438而言从约7ng*hr/ml至约12ng*hr/ml、对于每1mg的EPZ-6438而言从约8ng*hr/ml至约12ng*hr/ml、对于每1mg的EPZ-6438而言从约9ng*hr/ml至约12ng*hr/ml、或对于每1mg的EPZ-6438而言从约9.7ng*hr/ml至约11.8ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)的单剂量。

在又另一个方面中，本发明还涉及抑制EZH2或其突变体的组蛋白甲基转移酶活性的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述单剂量提供生物等效于从约102ng/ml至约4125ng/ml(例如，从约476ng/ml至约4125ng/ml或从约1730ng/ml至约4125ng/ml)的平均Cmax的平均Cmax。

在仍另一个方面中，本发明涉及抑制EZH2或其突变体的组蛋白甲基转移酶活性的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量是提供生物等效于对于每1mg的EPZ-6438而言从约1.2ng/ml至约2.6ng/ml(例如，对于每1mg的EPZ-6438而言从约2.2ng/ml至约2.6ng/ml)的平均Cmax的平均Cmax的单剂量。

本发明还涉及抑制EZH2或其突变体的组蛋白甲基转移酶活性的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量提供从约1小时至约2小时的中值Tmax。

本发明还涉及治疗晚期实体瘤或B细胞淋巴瘤的方法，该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的EPZ-6438的剂型，其中所述治疗有效量在给予该受试者之后提供至少约1170ng*hr/ml(例如，至少约4421ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)。

本发明还提供了用于治疗癌症(例如，实体瘤、B细胞淋巴瘤、或具有异常H3-K27甲基化的癌症)的口服剂型，该口服剂型包含治疗有效量的EPZ-6438、和至少一种药学上可接受的载体或赋形剂，其中所述治疗有效量是在给予人类受试者之后提供生物等效于从约337ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml(例如，从约1720ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml、或从约7798ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)的单剂量。

在另一个方面中，本文提供了用于治疗晚期实体瘤或B细胞淋巴瘤的口服剂型，该口服剂型包含治疗有效量的EPZ-6438、和至少一种药学上可接受的载体或赋形剂，其中所述治疗有效量是提供生物等效于对于每1mg的EPZ-6438而言从约4ng*hr/ml至约12ng*hr/ml(例如，对于每1mg的EPZ-6438而言从约7ng*hr/ml至约12ng*hr/ml、对于每1mg的EPZ-6438而言从约8ng*hr/ml至约12ng*hr/ml、对于每1mg的EPZ-6438而言从约9ng*hr/ml至约12ng*hr/ml、或对于每1mg的EPZ-6438而言从约9.7ng*hr/ml至约11.8ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)的单剂量。

在另一个方面中，随本文提供了用于治疗晚期实体瘤或B细胞淋巴瘤的口服剂型，该口服剂型包含治疗有效量的EPZ-6438、和至少一种药学上可接受的载体或赋形剂，其中所述治疗有效量提供生物等效于从约102ng/ml至约4125ng/ml(例如，从约476ng/ml至约4125ng/ml或从约1730ng/ml至约4125ng/ml)的平均Cmax的平均Cmax。

在又另一个方面中，随本文提供了用于治疗晚期实体瘤或B细胞淋巴瘤的剂型，该剂型包含治疗有效量的EPZ-6438、和至少一种药学上可接受的载体或赋形剂，其中所述治疗有效量是提供生物等效于对于每1mg的EPZ-6438而言从约1.2ng/ml至约2.6ng/ml(例如，对于每1mg的EPZ-6438而言从约2.2ng/ml至约2.6ng/ml)的平均Cmax的平均Cmax的单剂量。

随本文还提供了用于治疗晚期实体瘤或B细胞淋巴瘤的口服剂型，该口服剂型包含治疗有效量的EPZ-6438、和至少一种药学上可接受的载体或赋形剂，其中所述治疗有效量在给予人类受试者之后提供至少约1170ng*hr/ml(例如，至少约4421ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)。

本发明还涉及固体药物配制品，该固体药物配制品包含治疗剂和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中该治疗剂是化合物1、其盐、及其组合，并且该治疗剂在该配制品中的浓度等于约35-65wt.％的化合物1。在某些实施例中，该治疗剂在该配制品中的浓度等于约1-99wt.％、10-90％、20-80％、30-70％、或35-65wt.％的化合物1。在某些实施例中，该治疗剂在该配制品中的浓度等于约50wt.％、55wt.％或60wt.％的化合物1。在一个实施例中，该药物配制品处于固体单位剂型。在一个实施例中，该药物配制品是口服单位剂量配制品。在一个实施例中，该药物配制品处于片剂的形式。

本发明还涉及固体药物配制品，该固体药物配制品包含治疗剂(例如，化合物1或其盐、或其组合)和一种或多种药学上可接受的赋形剂，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、交联羧甲纤维素钠、或低取代羟丙基纤维素、及其组合。在一个实施例中，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、或交联羧甲纤维素钠、及其组合。在一个实施例中，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、或羧甲纤维素、及其组合。在一个实施例中，该固体药物配制品进一步包括乳糖、羟丙基纤维素、或硬脂酸镁或其组合。

本发明还涉及固体药物组合物，该固体药物组合物包含治疗剂和用于实现该治疗剂的速释的装置，其中该治疗剂选自化合物1、其盐、及其组合。

在另一个方面中，本发明涉及制备本文披露的药物配制品或组合物的方法。该方法包括a)将治疗剂、稀释剂、崩解剂和任选地滑润剂混合以形成第一混合物，其中该治疗剂选自下组，该组由以下各项组成：化合物1、其盐、及其组合。该方法任选地包括一个或多个以下步骤：

b)向该第一混合物中添加包含粘合剂的水溶液、或基于有机溶剂的溶液(例如IPA、EtOH等)、或有机/水性混合物(例如1:1EtOH:水)以形成第二混合物；

c)将该第二混合物粒化以形成湿粒；

d)干燥这些湿粒以形成经干燥颗粒；

e)对这些经干燥颗粒进行大小筛选以获得大小合格的颗粒；

f)将这些大小合格的颗粒与滑润剂和第二崩解剂混合以形成第三混合物；

g)压缩该第三混合物以形成片剂；并且

h)向这些片剂上施用包衣悬浮液以产生薄膜包衣片剂。

在某些实施例中，本发明涉及制备本文披露的药物配制品的方法。该方法包括a)将治疗剂、稀释剂、和崩解剂混合以形成第一混合物，其中该治疗剂选自下组，该组由以下各项组成：化合物1、其盐、及其组合。

该方法任选地包括一个或多个以下步骤：

b)将该第一混合物粒化成干颗粒；

e)对这些干颗粒进行大小筛选；

g)压缩该第三混合物以形成片剂；并且

h)向这些片剂上施用包衣悬浮液以产生薄膜包衣片剂。

尽管在本发明的实践或测试中可以使用与本文所述的方法和材料相似或等效的方法和材料，但是下文描述了适合的方法和材料。本文提及的所有公开案、专利申请、专利以及其他参考文献都通过引用而并入。不承认本文所引用的参考文献是所要求的发明的现有技术。在发生冲突的情况下，以包括定义的本说明书为准。另外，材料、方法以及实例仅仅是说明性的并不意在是限制性的。

任何以上方面和实施例都可以与任何其他方面或实施例组合。

根据以下详细描述和权利要求书，本发明的其他特征和优点将变得显而易见。

附图说明

图1A和1B是每天两次给予EPZ-6438后平均EPZ-6438血浆浓度与时间分布的图：(A)在第1天和(B)在第15天。

图2是每天两次给药单剂量(第1天)和多剂量(第15天)后平均代谢物对母体(ER-897387/EPZ-6438)暴露摩尔比的图。

图3A是肿瘤最大变化与剂量的图，并且图3B是肿瘤最大变化与稳态(第15天)暴露的图。

图4是显示出皮肤活检样品中H3K27Me3染色呈阳性的细胞平均百分比的图(C1D1＝第1周期，第1天给药前基线；C2D1＝第2周期，第1天)。

图5是皮肤活检中H3K27Me3染色呈阳性的细胞从基线的百分比变化与EPZ-6438剂量的图。

图6是肿瘤最大百分比变化与皮肤活检中H3K27Me3染色呈阳性的细胞中从基线的百分比变化的图。

图7是显示出皮肤活检样品中H3K27Me3染色呈阳性的细胞中从基线的百分比变化与EPZ-6438暴露之间的相关性的图。(线表示对抑制性PK/PD模型的拟合)。

图8是薄膜包衣EPZ-6438片剂的制造方法的实施例的流程图。

图9是显示出EPZ-6438 50mg、100mg、和200mg片剂(n＝6，平均值)的溶出曲线的图，桨板法(USP<711>的仪器2)，pH 4.5乙酸盐缓冲液，900ml，50rpm。

图10是显示出EPZ-6438 50mg、100mg、和200mg片剂(n＝6，平均值)的溶出曲线的图，桨板法(USP<711>的仪器2)，0.1N HCl，900ml，50rpm。

图11是显示出EPZ-6438的不同配制品(n＝2，平均值)的溶出曲线的图，桨板法(USP<711>的仪器2)，0.1N HCl，900ml，50rpm。

图12是显示出EPZ-6438的不同配制品(n＝2，平均值)的溶出曲线的图，桨板法(USP<711>的仪器2)，0.1N HCl，900ml，50rpm。

图13是显示出EPZ-6438的不同配制品(n＝2，平均值)的溶出曲线的图，桨板法(USP<711>的仪器2)，pH 4.5乙酸盐缓冲液，900ml，50rpm。

图14是显示出EPZ-6438的不同配制品(n＝2，平均值)的溶出曲线的图，桨板法(USP<711>的仪器2)，pH 4.5乙酸盐缓冲液，900ml，50rpm。

图15A是在第1天和在第15天每天两次给予EPZ-6438后平均EPZ-6438血浆浓度与时间分布的一系列图。

图15B是展示出皮肤中的EPZ-6438药效动力学的一系列图片。

图15C是展示出组蛋白甲基化的抑制与EPZ-6438暴露之间的相关性的图。

图16A-16F是来自给药EZH2抑制剂Tazemetostat的受试者的皮肤中的H3K27三甲基化的高级图像分析的一系列图或图像。

具体实施方式

组蛋白甲基转移酶(HMT)在基因表达的调节中起关键作用。具体而言，HMT参与细胞分裂和细胞分化的调节。HMT介导与特定基因相关的组蛋白的甲基化。取决于被甲基化的氨基酸残基，甲基化事件可以表示相关基因的沉默事件或活化事件。沉默标记的实例包括H3K27的三甲基化；而H3K4的三甲基化产生基因活化信号。许多细胞周期检查点调节子和肿瘤抑制基因以“二价”状态存在，其中这些包含活化组蛋白修饰(例如H3K27me3)和抑制组蛋白修饰(例如H3K4me3)。二价状态的基因取决于外部因素准备经历活化或抑制。EZH2调节参与B细胞分化和成熟的二价基因，包括CDKN1、PRDM1、和IRF4。

EZH2为组蛋白甲基转移酶，它是PRC2复合物的催化亚基，PRC2复合物催化组蛋白H3上的赖氨酸27(H3-K27)的单至三甲基化。组蛋白H3-K27三甲基化是抑制接近组蛋白修饰位点的特定基因的转录的机制。已知这种三甲基化是癌症(如前列腺癌)中表达改变的癌症标记物(参见例如，美国专利申请公开号2003/0175736；通过引用以其整体并入本文)。其他研究为EZH2表达调节异常、转录抑制和致瘤性转化间的功能联系提供了证据。瓦拉姆巴利(Varambally)等人(2002)自然419(6907):624-9科利尔(Kleer)等人(2003)美国国家科学院院刊(Proc Natl Acad Sci USA)100(20):11606-11。

EZH2甲基化活性在生发中心B细胞的调节和活化中起重要作用。EZH2蛋白水平在B细胞活化后增加。活化后，B细胞寄居在淋巴器官的生发中心，在其中发生体细胞高频突变，一个与抗凋亡基因和检查点调节子的抑制相关的过程。EZH2甲基化事件靶向参与B细胞增殖、分化和成熟的基因，包括CDKN1A(在细胞增殖中起作用)、PRDM1(在B细胞分化中起作用)和IRF4(在B细胞分化中起作用)。

B细胞成熟并离开生发中心后，B细胞内的EZH2水平降低。然而，B细胞成熟后的EZH2存在和活性与几种淋巴瘤相关，包括生发中心B细胞淋巴瘤等等。在三种常见的生发细胞淋巴瘤亚型中发现了EZH2的异常活化：滤泡性淋巴瘤(FL)、生发中心B细胞样弥漫性大B细胞淋巴瘤(GCB DLBCL)、和伯基特淋巴瘤。还在原发性纵隔大B细胞淋巴瘤(PMBCL)中发现了EZH2的异常活化。

EZH2基因内的遗传改变与组蛋白甲基化模式改变相关。例如，EZH2中的某些点突变与DLBCL中H3K4的甲基化改变相关；此外，染色体易位和融合SSX:SS18与滑膜肉瘤中H3K27的甲基化改变相关。导致氨基酸Y641(相当于Y646，催化结构域)转化为F、N、H、S或C的EZH2突变引起H3K27的超三甲基化并驱使淋巴瘤形成。影响H3K27甲基化的另外的遗传改变包括EZH2 SET-结构域突变、EZH2过表达、其他PRC2亚基过表达、组蛋白乙酰转移酶(HAT)的功能丧失突变以及MLL2的功能丧失。相对于对于EZH2蛋白纯合野生型(WT)的细胞，或相对于对于Y646突变纯合的细胞，对于EZH2 Y646突变杂合的细胞导致H3K27超三甲基化。

EPZ-6438(化合物1)是EZH2的小分子抑制剂，EZH2是甲基化H3K27的多梳抑制复合物2的催化亚基。H3K27的超三甲基化(H3K27Me3)在各种恶性肿瘤中均出现致瘤性，包括具有突变型EZH2的非霍奇金淋巴瘤(NHL)亚类。用EPZ-6438抑制H3K27Me3导致杀伤EZH2突变型淋巴瘤细胞并且其他EZH2抑制剂在突变型和WT EZH2 NHL模型中显示出活性。另外，具有INI1(SWI-SNF染色质重塑复合物的一个亚基)损失的肿瘤似乎依赖于EZH2。显示EPZ-6438在体外和在携带MRT异种移植物小鼠中诱导INI1缺失的恶性横纹肌样瘤(MRT)模型的凋亡和分化。

本发明至少部分地基于以下发现，即Zeste增强子同源物2(EZH2)抑制剂可以有效地治疗一种或多种癌症，例如通过异常H3-K27甲基化表征的一种或多种癌症。

本发明的一个方面涉及用于治疗或缓解的方法治疗癌症(例如，实体瘤、B细胞淋巴瘤、或具有异常H3-K27甲基化的癌症)的方法。该方法包括向对其有需要的受试者口服给予具有治疗有效量的具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的剂型：

其中所述治疗有效量是在给予所述受试者之后提供生物等效于从约337ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml(例如，从约1720ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml、或从约7798ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)的单剂量。

如本文使用的，表述“具有化学式(I)的化合物”、“化合物1”、和“EPZ-6438”都是指同一种化合物并且可以可互换地使用。

表述“生物等效的”或“生物等效性”是领域术语并且旨在根据由美国卫生和人类服务部(U.S Department of Health and Human Services)出版且通常被称为“橙皮书(Orange Book)”的第34版的经批准药品与治疗等效性评价(Approved Drug Productswith Therapeutic Equivalence Evaluations)进行定义。同一药物的不同配制品的生物等效性涉及就药物吸收速率和程度而言的等效性。将测试配制品的吸收程度和速率与参考配制品进行比较以便确定两种配制品是否是生物等效的。通过广泛测试，并且然后测量药物随时间的血液或血浆水平来以交叉方式进行标准生物等效性研究，广泛测试包括向多名志愿者(通常为12至24名健康的正常成年人)给予单剂量的测试药物和参考药物。用于确立配制品与参考配制品的生物等效性的详细指南已经由FDA非专利药物办公室，生物等效性部门(FDA Office of Generic Drugs,Division of Bioequivalence)出版。

其吸收速率和程度相差-20％/+25％或更少的两种剂型通常被认为是“生物等效的”。平均生物等效性的另一种方法涉及计算测试产品和参考产品的测量值的平均值(总体几何均数)的比率的90％置信区间。为了确立BE，经计算的置信区间应该通常落在产品平均值的比率的80％-125％内。除了这种通用方法之外，其他方法(包括(1)药代动力学数据的对数转换、(2)评估序列效应的方法和(3)评估离群数据的方法)可以有用于确立生物等效性。例如，在以上的(1)中，置信区间应该通常落在经对数转换的PK参数的平均值的差异的80％-125％内。

本发明涉及药物配制品，该药物配制品包含治疗剂和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中该治疗剂是化合物1：

(“化合物1”)或其盐、或其组合，并且该治疗剂在该配制品中的浓度等于约35-65wt.％的化合物1。

本发明涉及包含化合物1或其盐的速释配制品。在实施例中，该速释配制品在短时间内释放该治疗剂(例如在60min之后该配制品中所包括的不少于80％的治疗剂被释放)。在某些实施例中，该速释配制品在pH值范围在1与6.8之间(例如，pH＝1.2)的介质中在60min之后释放至少90％、或至少80％、或至少70％、或至少60％的治疗剂。在某些实施例中，该速释配制品在pH值范围在1与6.8之间(例如，pH＝1.2)的介质中在45min之后释放至少90％、或至少80％、或至少70％、或至少60％的治疗剂。在某些实施例中，该速释配制品处于片剂的形式。

适用时，本发明的配制品可以包括一个或多个以下特征：

例如，该治疗剂在该配制品中的浓度等于约40wt.％至约60wt.％的化合物1。

例如，该治疗剂在该配制品中的浓度等于约45wt.％至约55wt.％的化合物1。

例如，该治疗剂在该配制品中的浓度等于约47wt.％至约50wt.％的化合物1。

例如，该治疗剂是化合物1的盐，例如氢溴酸盐(HBr)盐，如单氢溴酸盐。

例如，这一种或多种药学上可接受的赋形剂包括一种或多种稀释剂、一种或多种崩解剂、和一种或多种粘合剂。

例如，该配制品包含约10wt.％至约20wt.％(例如，约10wt.％、11wt.％、12wt.％、13wt.％、14wt.％、15wt.％、16wt.％、17wt.％、18wt.％、19wt.％、或20wt.％)的稀释剂。

例如，治疗剂和稀释剂的总浓度是约60-80wt.％，例如约65wt.％、67.5wt.％、70wt.％、72.5wt.％、75wt.％、或80wt.％。

例如，稀释剂是乳糖一水合物。

例如，该配制品包含约15wt.％至约25wt.％(例如，约15wt.％、16wt.％、17wt.％、18wt.％、19wt.％、20wt.％、21wt.％、22wt.％、23wt.％、24wt.％、或25wt.％)的崩解剂。

例如，崩解剂包括低取代羟丙基纤维素、淀粉乙醇酸钠、或其组合。

例如，该配制品包含约1wt.％至约10wt.％(例如，约1wt.％、2wt.％、3wt.％、4wt.％、5wt.％、6wt.％、7wt.％、8wt.％、9wt.％、或10wt.％)的粘合剂。

例如，粘合剂是羟丙基纤维素。

例如，这一种或多种药学上可接受的赋形剂进一步包括滑润剂。

例如，该配制品包含约0.5wt.％至约5wt.％(例如，约0.5wt.％、0.7wt.％、0.9wt.％、1wt.％、2wt.％、3wt.％、4wt.％、或5wt.％)的滑润剂。

例如，滑润剂是硬脂酸镁。

例如，这一种或多种药学上可接受的赋形剂进一步包括包衣组合物。

例如，该配制品包含约1wt.％至约10wt.％(例如，约1wt.％、2wt.％、3wt.％、4wt.％、5wt.％、6wt.％、7wt.％、8wt.％、9wt.％、或10wt.％)的包衣组合物。

例如，包衣组合物是水溶性的速释包衣组合物。

例如，包衣组合物包含羟丙甲纤维素。

例如，包衣组合物进一步包含滑石和聚乙二醇。

例如，包衣组合物进一步包含着色剂，例如二氧化钛、氧化铁(III)、或两者。

例如，包衣组合物包含聚乙烯醇、羟丙甲纤维素、滑石、和聚乙二醇中的一种或多种。例如，包衣组合物进一步包含二氧化钛和/或氧化铁(III)。例如，包衣组合物是Opadry03F45063 RED。

例如，该配制品包含等于约40-60wt.％化合物1的量的治疗剂、约10-20wt.％的稀释剂、约15-25wt.％的崩解剂、约1-10wt.％的粘合剂、约0.5-5wt.％的滑润剂、以及约1-10wt.％的包衣组合物。例如，该配制品包含等于约40-60wt.％化合物1的量的治疗剂、约12-18wt.％的稀释剂、约18-23wt.％的崩解剂、约2-6wt.％的粘合剂、约1-3wt.％的滑润剂、以及约2-6wt.％的包衣组合物。

例如，该配制品由治疗剂、乳糖一水合物、低取代羟丙基纤维素、淀粉乙醇酸钠、羟丙基纤维素、和硬脂酸镁组成。例如，该配制品由等于约35-65wt.％、或40-60wt.％、或45-55wt.％化合物1的量的治疗剂、约10-20wt.％的乳糖一水合物、约11-19wt.％的低取代羟丙基纤维素、约3-7wt.％的淀粉乙醇酸钠、约1-10wt.％的羟丙基纤维素、和约0.5-5wt.％的硬脂酸镁组成。例如，该配制品由等于约50wt.％化合物1的量的治疗剂、约17wt.％的乳糖一水合物、约15wt.％的低取代羟丙基纤维素、约5wt.％的淀粉乙醇酸钠、约4wt.％的羟丙基纤维素、和约2wt.％的硬脂酸镁组成。

例如，该配制品由治疗剂、乳糖一水合物、低取代羟丙基纤维素、淀粉乙醇酸钠、羟丙基纤维素、硬脂酸镁、和包衣组合物组成。例如，该配制品由等于约40-60wt.％化合物1的量的治疗剂、约10-20wt.％的乳糖一水合物、约11-19wt.％的低取代羟丙基纤维素、约3-7wt.％的淀粉乙醇酸钠、约1-10wt.％的羟丙基纤维素、约0.5-5wt.％的硬脂酸镁、和约1-10wt.％的包衣组合物组成。例如，该配制品由等于约47-48wt.％化合物1的量的治疗剂、约16wt.％的乳糖一水合物、约14-15wt.％的低取代羟丙基纤维素、约5wt.％的淀粉乙醇酸钠、约4wt.％的羟丙基纤维素、约2wt.％的硬脂酸镁、和约4wt.％的包衣组合物组成。

例如，该配制品是口服剂量配制品，该口服剂量配制品的每单位剂量包含等于约10mg至约1000mg、或约10mg至约800mg、或约10mg至约500mg、或约10mg至约400mg化合物1的量的治疗剂。例如，该口服剂量配制品处于片剂的形式。例如，该片剂包含等于约25mg至约400mg化合物1的量的治疗剂。例如，该片剂包含等于约50mg、约75mg、约100mg、约125mg、约150mg、约175mg、约200mg或约400mg化合物1的量的治疗剂。

例如，该配制品是固体配制品。例如，该配制品基本上不含水。在此上下文中，“基本上”不含水意指在包装时该配制品的水含量少于7％、少于5％、少于1％、或少于0.5％的该配制品的总重量。在一个实施例中，水的量在该配制品的总重量的0.1％至5％(例如，0.1％-1％或0.1％-0.5％)之间。在一个实施例中，通过喷雾-包衣法制造的本发明的配制品中的水的量少于0.5％。

本发明涉及作为稳定配制品的口服配制品(例如，处于片剂的形式)。例如，本发明的稳定配制品经过一段时间(例如，3个月、12个月、18个月和24个月)将该配制品中活性化合物(例如，化合物1或其盐)的量保持为至少90％、优选至少95％、并且最优选至少99％的最初存在于该配制品中的活性化合物的量。储存条件可以是2-8摄氏度(2℃-8℃)、或25摄氏度(25℃)和60％相对湿度、或25℃和75％相对湿度、或40℃和75％相对湿度。

本发明涉及药物配制品，该固体药物配制品包含治疗剂(例如，化合物1、或其盐、或其组合)和一种或多种药学上可接受的赋形剂，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、交联羧甲纤维素钠、或低取代羟丙基纤维素、及其组合。在一个实施例中，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、或交联羧甲纤维素钠、及其组合。在一个实施例中，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、或羧甲纤维素、及其组合。在一个实施例中，该药物配制品进一步包括乳糖、羟丙基纤维素、或硬脂酸镁或其组合。

在一个实施例中，该药物配制品包含等于约25-75wt.％化合物1的量的治疗剂、和约5-35wt.％的赋形剂，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、交联羧甲纤维素钠、或低取代羟丙基纤维素、及其组合。在一个实施例中，该药物配制品包含等于约40-60wt.％化合物1的量的治疗剂、约10-30wt.％的赋形剂、约10-20wt.％的稀释剂、约2-6wt.％的粘合剂、和约1-3wt.％的滑润剂，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、交联羧甲纤维素钠、或低取代羟丙基纤维素、及其组合。

在一个实施例中，该药物配制品包含等于约50wt.％化合物1的量的治疗剂、约20wt.％的赋形剂、约10-20wt.％的稀释剂、约2-6wt.％的粘合剂、和约1-3wt.％的滑润剂，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、羧甲纤维素、羧甲纤维素钙、交联羧甲纤维素钠、或低取代羟丙基纤维素、及其组合。在一个实施例中，该配制品包含等于约50wt.％化合物1的量的治疗剂、约20wt.％的赋形剂、约10-20wt.％的乳糖一水合物、约2-6wt.％的羟丙基纤维素、和约1-3wt.％的硬脂酸镁，这些赋形剂选自淀粉乙醇酸钠、羧甲纤维素、及其组合。

在本发明的一个实施例中，本发明的配制品的组成提供于实例2的表3中。

在本发明的一个实施例中，本发明的配制品的组成提供于实例3的表5-6中，如配制品编号1-5之一。

在一个实施例中，该配制品是固体配制品。在一个实施例中，该配制品处于散剂、颗粒、囊剂、锭剂、或片剂的形式。在一个实施例中，单位剂量是散剂或片剂。在一个实施例中，片剂在泡罩包装或条中。例如，泡罩包装或条可以由不可渗透水蒸汽和氧气的材料制成。在一个实施例中，泡罩包装由金属箔构成。在一个实施例中，泡罩包装是FOIL/FOIL泡罩包装。在一个实施例中，将泡罩包装的容器用惰性气体(如氮气或氩气)冲洗。在一个实施例中，容器进一步包括干燥剂，如分子筛。在一个实施例中，单位剂量在具有密封件的高密度聚乙烯瓶中。在一个实施例中，该瓶进一步包含干燥剂。在一个实施例中，该瓶进一步包含除氧剂和/或分子筛。在一个实施例中，该瓶基本上不可渗透氧气和水蒸汽(例如，比HDPE瓶不可渗透得多)，如OxyGuard瓶。

例如，用于实现该治疗剂的速释的装置允许在60min之后释放至少90％、或至少80％、或至少70％、或至少60％的治疗剂。例如，用于实现该治疗剂的速释的装置允许在45min之后释放至少90％、或至少80％、或至少70％、或至少60％的治疗剂。例如，用于实现该治疗剂的速释的装置允许在30min之后释放至少80％、或至少70％、或至少60％的治疗剂。例如，根据JP16的6.10溶出测试或USP37的<711>溶出中速释剂型的程序，用于实现该治疗剂的速释的装置在从使用仪器2(桨板仪，桨板速度；50rpm)的溶出研究开始的60、45、或30分钟内允许溶出介质(pH 1.2，900mL，37±0.5℃)中至少约90％、或至少约80％、或至少约70％的溶出率。例如，根据JP16的6.10溶出测试或USP37的<711>溶出中速释剂型的程序，用于实现该治疗剂的速释的装置在从使用仪器2(桨板仪，桨板速度；50rpm)的溶出研究开始的60、45、或30分钟内允许溶出介质(pH 4.5乙酸盐缓冲液，900mL，37±0.5℃)中至少约80％、或至少约75％、或至少约70％、或至少约60％的溶出率。

c)将该第二混合物粒化以形成湿粒；

d)干燥这些湿粒以形成经干燥颗粒；

e)对这些经干燥颗粒进行大小筛选以获得大小合格的颗粒；

g)压缩该第三混合物以形成片剂；并且

h)向这些片剂上施用包衣悬浮液以产生薄膜包衣片剂。

该方法任选地包括一个或多个以下步骤：

b)将该第一混合物粒化成干颗粒；

e)对这些干颗粒进行大小筛选；

g)压缩该第三混合物以形成片剂；并且

h)向这些片剂上施用包衣悬浮液以产生薄膜包衣片剂。

适用时，本发明的方法可以包括一个或多个以下特征：

例如，该方法不包括步骤e)大小筛选。

例如，该方法不包括步骤h)包衣。

例如，该方法不包括步骤f)与滑润剂和第二崩解剂混合。

例如，该方法不包括步骤g)压缩。

例如，稀释剂是乳糖一水合物。

例如，崩解剂是低取代羟丙基纤维素。

例如，粘合剂是羟丙基纤维素。

例如，滑润剂是硬脂酸镁。

例如，第二崩解剂包括低取代羟丙基纤维素、淀粉乙醇酸钠、或其组合。

例如，包衣悬浮液包含羟丙甲纤维素。例如，包衣悬浮液进一步包含水、滑石、和/或聚乙二醇。例如，包衣悬浮液进一步包含一种或多种着色剂。

在本发明的一个实施例中，制备本发明的配制品的方法提供于图8中。如图8所示，将药物(例如，化合物1、其盐、或其组合)、乳糖一水合物和低取代羟丙基纤维素装入高剪切混合器中并混合(步骤1：混合)。然后，将羟丙基纤维素溶解于净化水中并且然后将溶液加入混合器中，并且将混合物粒化以产生湿粒(步骤2：粒化)。然后将湿粒使用流化床干燥器进行干燥以产生经干燥颗粒(步骤3：干燥)。接下来，将经干燥颗粒通过筛子进行大小筛选(步骤4：大小筛选)。然后，将大小合格的颗粒、低取代羟丙基纤维素、淀粉乙醇酸钠和硬脂酸镁掺在一起并在滚动型搅拌机中进行润滑(步骤5：润滑)。根据大小合格的颗粒的收率调整用于步骤5的低取代羟丙基纤维素、淀粉乙醇酸钠和硬脂酸镁的量。例如，大小合格的颗粒的收率越高，使用的崩解剂和滑润剂的量越高。接下来，将使用压片机将经润滑颗粒压缩成片剂(步骤6：压片)。然后使用锅式包衣机将通过将OPADRY 03F45063 RED与净化水混合制备的包衣悬浮液喷雾到片剂上(步骤7：薄膜包衣)，以产生薄膜包衣片剂。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在一个实施例中，所述癌症是晚期、难治性或耐药性癌症。在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在一个实施例中，所述癌症是INI1缺陷型肿瘤。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在一个实施例中，该受试者是人类。

适用时，在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，该癌症是实体瘤。本文所述的实体瘤的实例包括但不限于结肠直肠腺癌、胆管癌、胰腺癌、尤文氏肉瘤、滑膜肉瘤、腺泡状肉瘤、腺泡状软组织肉瘤、前列腺癌、横纹肌样肉瘤、恶性横纹肌样瘤、以及尿路上皮癌。

适用时，在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，该癌症是B细胞淋巴瘤。本文所述的B细胞淋巴瘤的实例包括但不限于弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、和边缘区淋巴瘤。

适用时，在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，该癌症是具有异常H3-K27甲基化的癌症。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，将具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐口服给予至少7、14、21、28、35、42、47、56、或64天。在某些实施例中，给药是没有药物假期的连续给药。例如，将具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在28天周期中口服给予28天。在其他实施例中，有药物假期的给予该化合物。例如，将具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐例如口服给予28天周期的21天，并且每个周期有7天的药物假期。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述单剂量的范围是从约100mg至约1600mg。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的单剂量是100、200、400、800或1600mg。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述治疗有效量是单次400mg剂量，其中所述单剂量提供生物等效于从约1720ng*hr/ml至约7798ng*hr/ml(例如，从约1720ng*hr/ml至约3899ng*hr/ml)的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述治疗有效量是单次800mg剂量，其中所述单剂量提供生物等效于从约7798ng*hr/ml至约9441ng*hr/ml的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述治疗有效量是单次1600mg剂量，其中所述单剂量提供生物等效于从约15596ng*hr/ml至约18882ng*hr/ml的平均AUC(0-12)的平均AUC(0-12)。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述治疗有效量是单次400mg剂量，其中所述单剂量提供生物等效于从约476ng/ml至约1730ng/ml(例如，从约476ng/ml至约865ng/ml)的平均Cmax的平均Cmax。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述治疗有效量是单次800mg剂量，其中所述单剂量提供生物等效于从约1730ng/ml至约2063ng/ml的平均Cmax的平均Cmax。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述治疗有效量是单次1600mg剂量，其中所述单剂量提供生物等效于从约3460ng/ml至约4125ng/ml的平均Cmax的平均Cmax。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述给药包括向该受试者每天两次地或每天三次地口服给予剂型。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述单剂量提供从约1小时至约2小时的中值Tmax。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述口服剂型或配制品的每单位剂量包含等于约25mg至约400mg(例如，等于约25mg至约200mg)EPZ-6438的量的治疗剂。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，根据JP16的6.10溶出测试或USP37的<711>溶出中速释剂型的程序，所述口服剂型或配制品从使用仪器2(桨板仪，桨板速度；50rpm)的溶出研究开始的60分钟内在溶出介质(pH 1.2，37±0.5℃)中提供至少约90％、或至少约80％、或至少约70％的溶出率。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，根据JP16的6.10溶出测试或USP37的<711>溶出中速释剂型的程序，所述口服剂型或配制品从使用仪器2(桨板仪，桨板速度；50rpm)的溶出研究开始的45分钟内在溶出介质(pH 1.2，37±0.5℃)中提供至少约90％、或至少约80％、或至少约70％的溶出率。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，根据JP16的6.10溶出测试或USP37的<711>溶出中速释剂型的程序，所述口服剂型或配制品从使用仪器2(桨板仪，桨板速度；50rpm)的溶出研究开始的30分钟内在溶出介质(pH 1.2，37±0.5℃)中提供至少约90％、或至少约80％、或至少约70％的溶出率。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，根据JP16的6.10溶出测试或USP37的<711>溶出中速释剂型的程序，所述口服剂型或配制品从使用仪器2(桨板仪，桨板速度；50rpm)的溶出研究开始的60分钟内在溶出介质(pH 4.5乙酸盐缓冲液，37±0.5℃)中提供至少约80％、或至少约75％、或至少约70％、或至少约60％的溶出率。

在本文所述的任何方法或配制品(例如，口服剂型)中，在某些实施例中，所述口服剂型或配制品包含淀粉乙醇酸钠或羧甲纤维素或其组合作为药学上可接受的载体或赋形剂。

其他适用于本发明的方法的化合物描述于美国公开案20120264734中，将其内容通过引用以其整体而特此并入。另外，化合物1适合作为组合疗法的一部分与一种或多种适合一起、依次或交替给予的其他治疗剂或治疗模式来给予。

在一个实施例中，以每天大约100mg至大约3200mg如约100mg BID至约1600mg BID(例如，100mg BID、200mg BID、400mg BID、800mg BID、或1600mg BID)的剂量向该受试者给予化合物1或其药学上可接受的盐，用于治疗癌症(例如，实体瘤、B细胞淋巴瘤或具有异常H3-K27甲基化的癌症)。

在一个实施例中，以每天大约100mg至大约3200mg如约100mg BID至约1600mg BID(例如，100mg BID、200mg BID、400mg BID、800mg BID、或1600mg BID)的剂量向该受试者给予化合物1或其药学上可接受的盐，用于治疗INI1缺陷型肿瘤。

在一个实施例中，将化合物1或其药学上可接受的盐与护理标准剂(如R-CHOP的一种或多种组分、BCL抑制剂、或BCR抑制剂)组合地(同时地或依次地)给予。例如，当与靶向具有突变型EZH2或WT EZH2生发中心淋巴瘤细胞系的细胞系中的BCR/PI3K途径的药物组合时，化合物1(或EPZ-6438)或其药学上可接受的盐具有加性效应或协同效应。当它们被暴露于EPZ-6438和靶向BCR/PI3K途径的药物的组合时，在ABC淋巴瘤细胞系中没有观察到效果。重要的是，与靶向BCR/PI3K途径的药物组合的EPZ-6438在生发中心B细胞淋巴瘤(GCB淋巴瘤)细胞系中显示出协同效应，无论GCB-淋巴瘤细胞系含有WT还是突变型EZH2蛋白。

组合疗法的其他实施例或实例描述于共同未决申请中，即国际申请号PCT/US2014/069167，它要求2013年12月6日提交的USSN 61/913,063、2014年1月31日提交的USSN 61/934,338、和2014年5月13日提交的USSN 61/992,881的优先权和权益，将其各自的内容通过引用以其整体而特此并入。

在一个实施例中，本发明的化合物为化合物本身，即游离碱或“裸”分子。在另一个实施例中，该化合物为其盐，例如裸分子的单-HCl盐或三-HCl盐、单-HBr盐或三-HBr盐。

除非本文另外指示或与上下文明显矛盾，否则本文冠词“一个/种(a/an)”和“该(the)”的使用应解释为包括单数和复数两者。例如，术语“崩解剂”是指被包括在或适于在本文所述的配制品中使用的一种或多种崩解剂。类似地，术语“治疗剂”是指被包括在或适于在本文所述的配制品中使用的一种或多种治疗剂。例如，本文所述的配制品可以仅包括化合物1作为治疗剂或活性成分，或者包括化合物1和另一种化合物(例如，化合物1的HBr盐或另一种抗癌药物)的混合物。除非另外指出，否则术语“包括/包含(comprising)”、“具有(having)”、“包括(including)”、和“含有(containing)”应被解释为开放性术语(即，意指“包括但不限于”)。另外，无论何时在一个实施例中使用“包括/包含(comprising)”或另一个开放性术语，都应理解的是同一实施例可以使用中间术语“基本上由...组成”或封闭术语“由...组成”更狭义地要求。

该治疗剂在该配制品中的浓度被表示为等于一定量的化合物1。如本文使用的，术语“当量”量或重量百分比是指根据效价修正因子(从化合物1获得的测定值得到的一个值)调整的药物的量。用于确定当量量的方法在本领域是众所周知的(参见例如，http://www.fda.gov/downloads/Drugs/.../Guidances/ucm070246.pdf)。

当与数值结合使用时，术语“约”、“大约”、或“近似的”意指包括一批值或一系列值。例如，“约X”包括X的±10％、±5％、±2％、±1％、±0.5％、±0.2％、或±0.1％的一系列值，其中X是数值。另外，“约X”还可以包括一系列的X±0.5、X±0.4、X±0.3、X±0.2、或X±0.1，其中X是数值。在一个实施例中，术语“约”是指多于或少于指定值的5％的一系列值。在另一个实施例中，术语“约”是指多于或少于指定值的2％的一系列值。在另一个实施例中，术语“约”是指多于或少于指定值的1％的一系列值。

在本说明书中，为方便起见，在一些情形中，化合物的结构式表示某一异构体，但本发明包括所有异构体，如几何异构体、基于不对称碳的光学异构体、立体异构体、互变异构体等。另外，由化学式表示的化合物可存在晶体多晶型物。应当指出，任何晶形、晶形混合物、或其无水物或水合物都被包括在本发明的范围内。此外，通过本发明化合物的体内降解产生的所谓的代谢物被包括在本发明的范围内。

此外，本发明中讨论的结构和其他化合物包括其所有阻转异构体。“阻转异构体”是这样一类立体异构体，其中两种异构体的原子空间排列不同。阻转异构体将其存在归因于由于大基团围绕中心键旋转受阻而引起的旋转受限。此类阻转异构体通常作为混合物存在，然而，由于最近在色谱技术方面的进展，已经可在所选情况下分离两种阻转异构体的混合物。

“互变异构体”是平衡地存在并且易于从一种异构体形式转化成另一种形式的两种或更多种结构异构体之一。这种转化导致氢原子的形式迁移，伴随着相邻共轭双键的转换。互变异构体在溶液中作为互变异构体组的混合物存在。在可能进行互变异构化的溶液中，互变异构体将达到化学平衡。互变异构体的确切比率取决于若干因素，包括温度、溶剂和pH。可通过互变异构作用相互转化的互变异构体的概念被称为互变异构现象。

在可能的多种类型的互变异构现象中，通常观察到两种。在酮-烯醇互变异构现象中，电子和氢原子发生同时转移。环-链互变异构现象由于糖链分子中的醛基(-CHO)与同一分子中的一个羟基(-OH)反应使其形成如葡萄糖所展现的环状(环形状)形式而发生。

常见的互变异构体对为：酮-烯醇、酰胺-腈、内酰胺-内酰亚胺、杂环中(例如，核碱基，如鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶中)的酰胺-亚胺酸互变异构现象、胺-烯胺和烯胺-烯胺。如下文所示的，酮-烯醇平衡的实例在吡啶-2(1H)-酮与相应的吡啶-2-醇之间。

应当理解的是，本发明的配制品中使用的化合物可以被描绘为不同互变异构体。还应当理解的是，在化合物具有互变异构形式时，所有互变异构形式都旨在被包括于本发明的范围内，并且化合物的命名不排除任何互变异构体形式。

术语“晶体多晶型物”、“多晶型物”或“晶型”意指其中化合物(或其盐或溶剂合物)可以不同晶体堆积排列结晶的晶体结构，所有这些晶体结构都具有相同元素组成。不同晶形通常具有不同XRPD图案、红外光谱、熔点、密度、硬度、晶体形状、光学和电学特性、稳定性以及溶解性。重结晶溶剂、结晶速率、储存温度、和其他因素可使一种晶形占优势。化合物的晶体多晶型物可以通过在不同条件下结晶来制备。

本发明的化合物可以是结晶的、半结晶的、非结晶的、无定形的、介晶的等。

本发明的化合物包括化合物本身、以及它们的N-氧化物、盐、它们的溶剂合物、和它们的前药(如果适用的话)。例如，盐可以在阴离子与经取代的嘌呤或7-脱氮嘌呤化合物上的带正电基团(例如，氨基)之间形成。适合的阴离子包括氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、硫酸氢根、氨基磺酸根、硝酸根、磷酸根、柠檬酸根、甲磺酸根、三氟乙酸根、谷氨酸根、葡糖醛酸根、戊二酸根、苹果酸根、马来酸根、琥珀酸根、延胡索酸根、酒石酸根、甲苯磺酸根、水杨酸根、乳酸根、萘磺酸根、以及乙酸根。同样地，盐也可以在阳离子与经取代的嘌呤或7-脱氮嘌呤化合物上的带负电基团(例如，羧酸根)之间形成。适合的阳离子包括钠离子、钾离子、镁离子、钙离子、以及铵阳离子(如四甲基铵离子)。经取代的嘌呤或7-脱氮嘌呤化合物还包括那些含有季氮原子的盐。前药的实例包括酯和其他药学上可接受的衍生物，它们在给予受试者时能够提供活性经取代的嘌呤或7-脱氮嘌呤化合物。

另外，本发明的化合物或晶型(例如，化合物或晶型的盐)可以水合或非水合(无水)形式或作为与其他溶剂分子的溶剂合物而存在。水合物的非限制性实例包括半水合物、一水合物、二水合物、三水合物等。溶剂合物的非限制性实例包括乙醇溶剂合物、丙酮溶剂合物等。

“溶剂合物”意指含有化学计量量或非化学计量量的溶剂的溶剂加成形式。一些化合物倾向于以结晶固态捕获固定摩尔比率的溶剂分子，从而形成溶剂合物。如果溶剂是水，那么所形成的溶剂合物是水合物；并且如果溶剂是醇，那么所形成的溶剂合物是醇合物。水合物是通过一个或多个水分子与该物质的一个分子组合形成，其中水保留其作为H₂O的分子状态。半水合物是通过一个水分子与该物质的多于一个分子组合形成，其中水保留其作为H₂O的分子状态。

本发明旨在包括本发明化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括那些原子数相同但质量数不同的原子。借助一般实例且不受限制的，氢同位素包括氚和氘，并且碳同位素包括C-13和C-14。

如本文使用的，“受试者”与“对其有需要的受试者”是可互换的，二者均指患有障碍的受试者(其中EZH2介导的蛋白质甲基化发挥了一定作用)，或相对于大多数群体，具有发展这种障碍的增加的风险的受试者。“受试者”包括哺乳动物。哺乳动物可以是例如人类或适当的非人类哺乳动物，如灵长类动物、小鼠、大鼠、狗、猫、母牛、马、山羊、骆驼、绵羊或猪。受试者还可以是鸟或家禽。在一个实施例中，哺乳动物是人。对其有需要的受试者可以是之前已经被诊断或鉴定为患有癌症或癌前病症的个体。对其有需要的受试者还可以是患有(例如，正遭受)癌症或癌前病症的个体。可替代地，对其有需要的受试者可以是相对于大多数群体，具有发展这种障碍的增加的风险的个体(即，相对于大多数群体，倾向发展这种障碍的受试者)。对其有需要的受试者可以患有癌前病症。对其有需要的受试者患有INI1缺陷型肿瘤。

INI1是对抗EZH2的酶功能的调节复合物。由于各种遗传改变，INI1失去了其调节功能。结果，EZH2活性被误调，导致EZH2在一组包括滑膜肉瘤和恶性横纹肌样瘤的遗传确定的癌症中起驱动性致癌作用。

滑膜肉瘤是一种软组织恶性肿瘤，并且是青少年和年轻患者中最常见的软组织肿瘤之一。诊断时患者的平均年龄大约为30岁。

恶性横纹肌样瘤或MRT是由导致EZH2功能误调的特定遗传改变引起的罕见且致命的儿童期癌症形式。MRT通常出现在肾脏或大脑中以及不到两岁的儿童中。

对其有需要的受试者可以患有难治性或耐药性癌症(即，不响应或尚未对治疗响应的癌症)。受试者可以是在治疗开始时具有抗性或可以在治疗过程中变得有抗性。在一些实施例中，对其有需要的受试者的癌症在最近的疗法缓解后复发。在一些实施例中，对其有需要的受试者接受了所有已知用于癌症治疗的有效疗法但都失败了。在一些实施例中，对其有需要的受试者接受了至少一种先前疗法。在一个优选实施例中，受试者患有癌症或癌性病症。

如本文使用的，“治疗(treating或treat)”描述了出于对抗疾病、病症或障碍的目的来管理和护理患者，并且包括给予本发明的化合物、或其药学上可接受的盐、前药、代谢物、多晶型物或溶剂合物，以缓解疾病、病症或障碍的症状或并发症，或消除该疾病、病症或障碍。术语“治疗”还可以包括体外细胞或动物模型的治疗。

本发明的化合物、或其药学上可接受的盐、前药、代谢物、多晶型物或溶剂合物可以或还可以用于预防相关的疾病、病症或障碍，或用于鉴别适于此目的的适合的候选物。如本文使用的，“预防(preventing，prevent)”、或“保护...免于”描述了减少或消除这种疾病、病症或障碍的症状或并发症的发作。

本文所述的方法和用途可以包括在向对其有需要的受试者给予本文所述的化合物或组合物之前和/或之后在来自该受试者的样品中检测存在或不存在一个或多个EZH2突变的步骤。所谓“样品”意思是源自受试者的任何生物样品，包括但不限于细胞、组织样品、体液(包括但不限于粘液、血液、血浆、血清、尿液、唾液、和精液)、肿瘤细胞、以及肿瘤组织。优选地，样品选自骨髓、外周血细胞、血液、血浆以及血清。样品可以由正在治疗或测试的受试者提供。可替代地，样品可以根据本领域的常规实践由医师获得。

已报导，在EZH2的单个氨基酸残基(例如，Y641、A677、和A687)处的EZH2基因的点突变与淋巴瘤有关。EZH2突变体的更多实例以及突变检测方法和突变相关障碍的治疗方法描述于例如美国专利申请公开号US20130040906中，将其全部内容通过引用以其整体而并入本文。

本领域的技术人员可参考一般参考文献来获得本文讨论的已知技术或等效技术的详细说明。这些文献包括奥苏贝尔(Ausubel)等人，当前分子生物学方案(CurrentProtocols in Molecular Biology)，约翰威利父子公司(John Wiley and Sons,Inc.)(2005)；萨姆布鲁克(Sambrook)等人，分子克隆，实验室手册(Molecular Cloning,ALaboratory Manual)(第3版)，冷泉港出版社(Cold Spring Harbor Press)，冷泉港，纽约(2000)；克里根(Coligan)等人，当前免疫学方案(Current Protocols in Immunology)，，约翰威利父子公司，纽约；恩纳(Enna)等人，当前药理学方案(Current Protocols inPharmacology)，约翰威利父子公司，纽约；芬戈尔(Fingl)等人，治疗的药理学基础(ThePharmacological Basis of Therapeutics)(1975)，雷明顿制药科学(Remington'sPharmaceutical Sciences)，麦克出版公司(Mack Publishing Co.)，伊斯顿，宾夕法尼亚州，第18版(1990)。当然，在制备或使用本发明的方面中可参考这些文献。

本发明还提供了药物组合物，这些药物组合物包含与至少一种药学上可接受的赋形剂或载体组合的一种或多种活性化合物(例如，化合物1或其盐)。

“药物组合物”是呈适合给予受试者的形式的含有本发明化合物的配制品。在一个实施例中，药物组合物呈整块或呈单位剂型。如本文使用的，术语“单位剂型”是指适合作为用于待治疗受试者的单一剂量的物理离散单位；每一单位含有经计算以产生所希望的治疗效果的预定量的活性化合物与所需药物载体的结合。单位剂型是多种形式中的任一种，包括例如IV袋、片剂、气溶胶吸入器上的单泵或小瓶。单位剂量组合物中的活性成分(例如，所披露的化合物或其盐、水合物、溶剂合物或异构体的配制品)的量是有效量，并且根据所涉及的具体治疗而变化。本领域的技术人员应认识到，有时有必要依据患者的年龄和病况对剂量进行常规改变。剂量还将取决于给药途径。考虑了多种途径，包括经口、经肺、经直肠、肠胃外、经皮、皮下、静脉内、肌内、腹膜内、吸入、经颊、舌下、胸膜内、鞘内、鼻内等。用于局部或经皮给予本发明的化合物的剂型包括散剂、喷雾剂、软膏剂、糊剂、乳膏剂、洗剂、凝胶剂、溶液、贴剂以及吸入剂。在一个实施例中，在无菌条件下将活性化合物与药学上可接受的载体以及需要的任何防腐剂、缓冲剂、或推进剂混合。

在一个实施例中，单位剂型是口服剂型。在一个实施例中，单位剂型是片剂。

如本文使用的，短语“药学上可接受的”是指在合理医学判断的范围内适用于与人类和动物的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理益处/风险比相称的那些化合物、材料、组合物、载体和/或剂型。

“药学上可接受的赋形剂”意指用于制备药物组合物的赋形剂，它们通常是安全的、无毒性的并且不是生物学上或其他方面不期望的，并且包括兽医使用以及人类药学使用可接受的赋形剂。如本说明书和权利要求书中使用的，“药学上可接受的赋形剂”包括一种和多于一种此类赋形剂。例如，用于本发明的配制品的药学上可接受的赋形剂可以是稀释剂或惰性载体、滑润剂、粘合剂、或其组合。用于本发明的配制品的药学上可接受的赋形剂可以进一步包括填充剂、抗微生物剂、抗氧化剂、抗结块剂、包衣剂、或其混合物。

药学上可接受的赋形剂的实例包括但不限于粘合剂、填充剂、崩解剂、滑润剂、抗微生物剂、抗氧化剂、以及包衣剂。

示例性粘合剂包括但不限于玉米淀粉、马铃薯淀粉、其他淀粉、明胶、天然和合成胶如阿拉伯胶、黄原胶、海藻酸钠、海藻酸、其他海藻酸盐、粉状黄蓍胶、瓜尔胶、纤维素及其衍生物(例如，乙基纤维素、乙酸纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠)、聚乙烯吡咯烷酮(例如，聚维酮、交聚维酮、共聚维酮等)、甲基纤维素、Methocel，预胶化淀粉(例如，由Colorcon有限公司出售的STARCH和STARCH 1500/>)、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素(FMC公司，马库斯胡克，宾夕法尼亚州，美国)、Emdex、Plasdone、或其混合物，填充剂：滑石、碳酸钙(例如，颗粒或粉末)、磷酸氢钙、磷酸三钙、硫酸钙(例如，颗粒或粉末)、微晶纤维素、粉状纤维素、糊精、高岭土、甘露醇、硅酸、山梨醇、淀粉、预胶化淀粉、葡萄糖、果糖、蜂蜜、无水乳糖、乳糖一水合物、乳糖和阿斯巴甜、乳糖和纤维素、乳糖和微晶纤维素、麦芽糖糊精、麦芽糖、甘露醇、微晶纤维素&amp；瓜尔胶、糖蜜、蔗糖、或其混合物。

示例性崩解剂包括但不限于：琼脂、海藻酸、碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲纤维素钠、交聚维酮、波拉克林钾、淀粉乙醇酸钠(如Explotab)、马铃薯或木薯淀粉、其他淀粉、预胶化淀粉、粘土、其他褐藻胶、其他纤维素、胶(像结冷胶)、低取代羟丙基纤维素、ployplasdone、或其混合物。

示例性滑润剂包括但不限于：硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻质矿物油、甘油、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其他二醇、山嵛酸甘油酯、硬脂酸、月桂基硫酸钠、硬脂酰富马酸钠(如Pruv)、植物性脂肪酸滑润剂、滑石、氢化植物油(例如，花生油、棉籽油、向日葵油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂、syloid硅胶(AEROSIL200，格雷斯公司(W.R.Grace Co.)，巴尔的摩，马里兰州，美国)、合成二氧化硅的凝聚型气溶胶(Deaussa公司，皮亚诺(Piano)，德克萨斯州，美国)、焦化二氧化硅(CAB-O-SIL，Cabot公司，波士顿，马萨诸塞州，美国)、或其混合物。

示例性抗结块剂包括但不限于：硅酸钙、硅酸镁、二氧化硅、胶态二氧化硅、滑石、或其混合物。

示例性抗微生物剂包括但不限于：苯扎氯铵、苄索氯铵、苯甲酸、苯甲醇、对羟基苯甲酸丁酯、氯化十六烷基吡啶、甲酚、氯丁醇、脱氢乙酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸甲酯、苯酚、苯乙醇、苯氧乙醇、乙酸苯汞、硝酸苯汞、山梨酸钾、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸钠、脱氢乙酸钠、丙酸钠、山梨酸、thimersol、thymo、或其混合物。

示例性抗氧化剂包括但不限于：抗坏血酸、BHA、BHT、EDTA、或其混合物。

示例性包衣剂包括但不限于：羧甲基纤维素钠、邻苯二甲酸乙酸纤维素、乙基纤维素、明胶、药用釉、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素(羟丙甲纤维素)、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯、虫胶、蔗糖、二氧化钛、巴西棕榈蜡、微晶蜡、结冷胶、麦芽糖糊精、甲基丙烯酸酯、微晶纤维素和角叉菜胶或其混合物。

本文所述的配制品还可以包括其他赋形剂及其类别，包括但不限于泊洛沙姆(如/>和Poloxamer 188)、抗坏血酸、谷胱甘肽、蛋白酶抑制剂(例如大豆胰蛋白酶抑制剂，有机酸)、降pH剂、乳膏剂和洗剂(像麦芽糖糊精和角叉菜胶)；用于咀嚼片剂的材料(像葡萄糖、果糖、乳糖一水合物、乳糖和阿斯巴甜、乳糖和纤维素、麦芽糖糊精、麦芽糖、甘露醇、微晶纤维素和瓜尔胶、山梨醇结晶)；肠胃外剂(像甘露醇和聚维酮)；增塑剂(像癸二酸二丁酯、用于包衣的增塑剂、聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯)；粉末滑润剂(像山嵛酸甘油酯)；用于包衣的球体(像糖球)；滚圆剂(像山嵛酸甘油酯和微晶纤维素)；悬浮/胶凝剂(像角叉菜胶、结冷胶、甘露醇、微晶纤维素、聚维酮、淀粉乙醇酸钠、黄原胶)；甜味剂(像阿斯巴甜、阿斯巴甜和乳糖、葡萄糖、果糖、蜂蜜、麦芽糖糊精、麦芽糖、甘露醇、糖蜜、山梨醇结晶、山梨醇专用溶液、蔗糖)；湿法造粒剂(像碳酸钙、无水乳糖、乳糖一水合物、麦芽糖糊精、甘露醇、微晶纤维素、聚维酮、淀粉)、焦糖、羧甲纤维素钠、樱桃香精(cherry cream flavor和cherry flavor)、无水柠檬酸、柠檬酸、糖粉、D&C Red No.33、D&C Yellow#10AluminumLake、乙二胺四乙酸二钠、乙醇15％、FD&C Yellow No.6aluminum lake、FD&C Blue#1Aluminum Lake、FD&C Blue No.1、FD&C blue no.2aluminum lake、FD&C Green No.3、FD&C Red No.40、FD&C Yellow No.6Aluminum Lake、FD&C Yellow No.6、FD&C Yellow No.10、棕榈酰硬脂酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、靛蓝胭脂红、卵磷脂、甘露醇、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、甘草酸单铵盐、天然和人造橙香精、药用釉、泊洛沙姆188、聚葡萄糖、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、聚维酮、预胶化玉米淀粉、预胶化淀粉、红氧化铁、糖精钠、羧甲基醚钠、氯化钠、柠檬酸钠、磷酸钠、草莓香精、合成黑色氧化铁、合成红色氧化铁、二氧化钛、以及白蜡。

在某些实施例中，本发明的配制品是固体口服剂型，该固体口服剂型可以任选地用有待用例如蓝(OY-LS-20921)、/>白(YS-2-7063)、/>白(YS-1-7040)和黑墨水(S-1-8106)包衣的包衣系统(例如/>fx薄膜包衣系统)进行处理。

如本文使用的，术语“治疗有效量”是指药学试剂用以治疗、改善、或预防所鉴别疾病或病状或用以展现可检测的治疗或抑制效果的量。该效果可以通过本领域已知的任何测定方法来检测。用于受试者的精确有效量取决于受试者的体重、身材和健康状况；病状的性质和程度；以及所选用于给予的治疗剂。给定情况的治疗有效量可以通过临床医师的技术和判断范围内的常规实验来确定。在一个优选方面中，待治疗的疾病或病状是癌症。在另一个方面中，待治疗的疾病或病状是细胞增殖性障碍。

本发明的含有活性化合物的药物组合物可以按照通常已知的方式(例如，通过常规的混合、溶解、粒化、造糖衣片、研细、乳化、胶囊化、包埋、或冻干等方法)来制造。药物组合物可以常规方式使用一种或多种促进将活性化合物加工成可在药学上使用的制剂的药学上可接受的载体(包括赋形剂和/或助剂)来配制。当然，适当的配制品取决于所选的给药途径。

特别有利的是以剂量单位形式配制口服组合物以便于给药和剂量统一。如本文使用的单位剂型是指适合作为用于待治疗受试者的单一剂量的物理离散单位；每一单位含有经计算以产生所希望的治疗效果的预定量的活性化合物与所需药物载体的结合。对于本发明的单位剂型的规格被指示为并且直接取决于活性化合物的独特特征和有待实现的特定治疗效果。

在治疗性应用中，在影响所选剂量的因素中，根据本发明使用的药物组合物的剂量尤其根据药剂、接受患者的年龄、体重和临床病状以及给予治疗的临床医师或执业医师的经验和判断而变化。通常，剂量应足以导致肿瘤生长的减慢，并且优选是消退，并且还优选是使肿瘤完全消退。药学试剂的有效量是提供如由临床医师或其他有资格的观察者注意到的客观上可识别的改进的量。例如，患者肿瘤的消退可以参考肿瘤的直径来测量。肿瘤直径减小指示消退。肿瘤在停止治疗后无法重新出现也指示消退。如本文使用的，术语“剂量有效方式”是指活性化合物在受试者或细胞中产生所希望的生物效果的量。

药物组合物可以同给药说明书一起被包括在容器、包装、或分配器中。

本发明配制品中的化合物能进一步形成盐。所有这些形式也被考虑在要求保护的发明的范围内。

如本文使用的，“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸或碱的盐来修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基的矿物盐或有机酸盐，如胺，酸性残基(如羧酸等)的碱盐或有机盐。药学上可接受的盐包括常规的无毒盐或例如由无毒的无机酸或有机酸形成的母体化合物的季铵盐。例如，这样的常规无毒盐包括但不限于来源于无机酸和有机酸的那些，这些无机酸和有机酸选自2-乙酰氧基苯甲酸、2-羟基乙磺酸、乙酸、抗坏血酸、苯磺酸、苯甲酸、重碳酸、碳酸、柠檬酸、依地酸、乙二磺酸、1,2-乙磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、乙二醇阿散酸、己基间苯二酚酸(hexylresorcinic)、水巴米克酸(hydrabamic)、氢溴酸、盐酸、氢碘酸、羟基马来酸、羟萘甲酸、羟乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂基磺酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、萘磺酸、硝酸、草酸、扑酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、聚半乳糖醛酸、丙酸、水杨酸、硬脂酸、亚乙酸(subacetic)、琥珀酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、硫酸、鞣酸、酒石酸、甲苯磺酸，以及常见的氨基酸，例如甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、精氨酸等。

药学上可接受的盐的其他实例包括己酸、环戊烷丙酸、丙酮酸、丙二酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基二环-[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、粘糠酸等。本发明还涵盖在以下发生时形成的盐：母体化合物中存在的酸性质子被金属离子(例如，碱金属离子、碱土金属离子或铵离子)替代；或与有机碱(如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等)配位。在盐形式中，应理解的是，化合物与盐的阳离子或阴离子的比率可以为1:1，或不同于1:1的任何比率，例如3:1、2:1、1:2、或1:3。

应该理解的是，对药学上可接受的盐的所有提及都包括同一种盐的如本文定义的溶剂加成形式(溶剂合物)或晶形(多晶型物)。

这些化合物、或其药学上可接受的盐、酯或前药是经口、经鼻、经皮、经肺、以吸入方式、经颊、舌下、腹膜内、皮下、肌内、静脉内、经直肠、胸膜内、鞘内和肠胃外给予的。在一个实施例中，化合物是口服给予的。本领域的技术人员应认识到某些给药途径的优点。

利用这些化合物的剂量方案是根据多种因素来选择的，包括患者的类型、物种、年龄、体重、性别和医学病状；待治疗病状的严重性；给药途径；患者的肾功能和肝功能；以及所采用的具体化合物或其盐。普通技术的医师或兽医可以容易地确定并开出所需药物的有效量以预防、对抗病状、或阻止病状的进展。

本发明披露的化合物的配制和给药技术可见于雷明顿：药学科学与实践(Remington:the Science and Practice of Pharmacy)，第19版，麦克出版公司，伊斯顿，宾夕法尼亚州(1995)。在一个实施例中，本文所述的化合物及其药学上可接受的盐在药物配制中与药学上可接受的载体或稀释剂组合使用。适合的药学上可接受的载体包括惰性固体填充剂或稀释剂和无菌水或有机溶液。化合物将以足以提供在本文所述范围内的期望剂量的量存在于此类药物组合物中。

除非另外指出，否则本文使用的所有百分比和比率都是按重量计。根据不同实例，本发明的其他特征和优点是显而易见的。所提供的实例说明在实施本发明中有用的不同组分和方法。这些实例并不限制要求保护的发明。基于本披露，技术人员可以识别并利用可用于实施本发明的其他组分和方法。

除非上下文明确陈述或显而易见，否则如本文使用的术语“或”应理解为是包含性的。

除非上下文另外阐明，否则本文提供的所有数值都由术语“约”修饰。

在本披露和附图中使用的缩写列表介绍如下。

AE：不良事件

AUC：血浆浓度-时间曲线下面积

AUC(0-x)：从时间零点到给药后x小时的血浆浓度-时间曲线下面积

AUC(0-t)：从时间零点到最后可定量浓度的时间的血浆浓度-时间曲线下面积

AUC(0-inf)：从时间零点到无穷的血浆浓度-时间曲线下面积

ANCOVA：协方差分析

BID：每天两次

CI：置信区间

Cmax：最大药物浓度

Cx：给药后x小时的血浆浓度

CV：变异系数

DLT：剂量限制性毒性

MTD：最大耐受剂量

PO：口服

PD：药效动力学

PK：药代动力学

T1/2：末端消除半衰期

Tmax：给予药物后达到最大(峰值)浓度的时间

实例

实例1PK/PD研究

使用zeste增强子同源物2(EZH2)组蛋白甲基转移酶抑制剂EPZ-6438作为单一药剂在患有晚期实体瘤(“ST”)或B细胞淋巴瘤的患者中进行1期首次在人体的研究。

将进行1期剂量升高以确定在患有B细胞淋巴瘤或晚期实体瘤的患者(“pt”)中的最大耐受剂量(MTD)安全性、PK、PD、以及初步抗肿瘤活性。

方法：向3至6位pt的同龄组PO BID地连续给予高达1600mg BID的最大可行剂量的EPZ-6438。收集用于PK分析的血液样品和用于PD分析的皮肤活检。将PD样品用H3K27me3特异性抗体染色，并且确定H3K27Me3阳性细胞从基线的变化百分比。对PK/PD关系进行分析。每8周进行肿瘤评估。

截至2014年8月14日，已经招募了21位患者并且以100、200、400、800、和1600mgBID的5个剂量水平进行治疗。B细胞NHL的诊断包括滤泡性淋巴瘤(FL，n＝4)，DLBCL(n＝4，包括1位患有原发性纵隔淋巴瘤[PMBL]和边缘区淋巴瘤的患者(“pt”)(n＝1))。ST pt包括1位患有MRT的pt。11位pt(7位患有ST，4位患有B细胞NHL)具有至少有1份备案的治疗后评估并且可评估疗效。中值年龄为59岁(范围23-83岁)。已经在1600mg BID处报告了1例血小板减少DLT。与因果关系无关的频繁出现的AE是虚弱(8位pt)、贫血(4位pt)、食欲下降和腹泻(各3位pt)、肺栓塞、失眠、肌肉痉挛、血小板减少、恶心和呕吐(各2位pt)。21位pt中有5位经历了3/4级AE。EPZ-6438PK展现出快速吸收(Tmax＝1-2hr)、剂量相关的暴露增加和快速消除(半衰期约4hr)。多次给药时较低的EPZ-6438暴露与较高的代谢物暴露相关。在皮肤的H3K27Me3阳性细胞中存在暴露相关的降低。在4位可评估NHL pt的2位中(1位患有转化的DLBCL，100mg BID，和1位患有PMBL，200mg BID)以及在1位患有INI1缺乏的MRT的pt(800mgBID)中显示了部分应答。正在进行进一步的同龄组扩展。

该研究显示EPZ-6438直到1600mg BID仍是良好耐受的，在NHL和MRT中具有初步活性证据并且暴露相关地抑制H3K27Me3。MTD尚未达到。这些数据支持EPZ-6438在2期研究中在B细胞淋巴瘤和INI1缺陷型肿瘤中的持续发展。

药代动力学

在剂量升高研究中，在单次(第1天)和多次(第15天)给予患有期实体瘤或B细胞淋巴瘤的受试者后，对EPZ-6438及其主要去乙基代谢物ER-897387的药代动力学进行表征。给予的剂量是100mg BID作为悬浮剂(n＝3)或片剂(n＝3)配制品以及200、400、800和1600mg作为片剂配制品。在第1天，EPZ-6438被快速吸收，并且在给药后大约1至2小时观察到EPZ-6438的最大血浆浓度(表1)。血浆浓度以双指数方式下降，并且直到给药后12小时EPZ-6438及其代谢物ER-897387的可量化水平认仍是可测量的(图1)。EPZ-6438的平均末端半衰期(t_1/2)是大约3至6小时。EPZ-6438暴露略高于剂量比例，高度可变(％CV＝32％-95％)并且在片剂与悬浮剂配制品之间相当。在第1天，就C_max和AUC_(0-12h)而言，EPZ-6438向ER-897387转化的范围分别是从大约39％到104％和从58％到156％。

在多次给药(第15天)之后，达到最大血浆浓度的中值时间(t_max)是1至2小时。跨剂量范围末端半衰期在第15天保持不变((t_1/2＝大约3-6小时)。在多次给药之后，EPZ-6438暴露存在剂量依赖性降低。给予100mg和1600mg剂量后，EPZ-6438累积率(R＝AUC_D15/AUC_D1)分别是大约74％和44％。

在给药后0.5至2小时时观察到ER-897387的最大浓度并且其消除与EPZ-6438平行(t_1/2＝3-6小时)。在多次给药之后，形成的代谢物的量增加(图2)。在第15天ER-897387暴露的增加与EPZ-6438暴露的降低有关，从而指示代谢诱导。

表1单剂量(第1天)每天两次给予EPZ-6438后EPZ-6438和ER-897387的平均(标准差)药代动力学参数

*n＝5对于t_1/2

#Tmax的统计数据被表示为中值与最小值-最大值范围

表2多剂量(第15天)每天两次给予EPZ-6438后EPZ-6438和ER-897387的平均(标准差)药代动力学参数

药效动力学

肿瘤最大变化百分比与EPZ-6438剂量之间没有直接相关性(图3)。在100mg和200mg剂量组中观察到的肿瘤最大变化分别是-78％和-87％。较高的EPZ-6438暴露与较大的肿瘤减小不相关。

在给药前(第1周期，第1天)和第2周期，第1天之前给药前收集皮肤活检，用于进行免疫组织化学分析。将皮肤样品用H3K27Me3特异性抗体染色，并且确定表皮的H3K27Me3阳性细胞从基线的变化百分比。在EPZ-6438给药的第2周期，第1天，H3K27Me3染色呈阳性的细胞的数目一致的减少，从而证实皮肤中组蛋白H3赖氨酸27三甲基化受到抑制(图4)。该效应是剂量依赖性的(图5)并且与肿瘤的最大变化不相关(图6)。

组蛋白H3赖氨酸27三甲基化的降低与EPZ-6438暴露相关(图7)。将抑制性EmaxPK/PD模型进行拟合以描述这种关系。

就最大抑制(Imax)和与最大抑制的50％(IC50)相关的暴露而言，该模型是参数化的。该模型估计Imax＝-44.4％并且IC50＝487ng·hr/mL。模型预测与最大抑制的90％(IC90)相关的EPZ-6438暴露是4421ng·hr/mL。这个估计量与给予800mg距离后保持的EPZ-6438暴露相当(平均第15天AUC＝4553ng·hr/mL)。

结果表明：

·EPZ-6438被快速吸收和消除(t1/2约3-6hr)

·EPZ-6438暴露大于剂量比例并且高度可变(％CV＝32％-95％)

·EPZ-6438被大量代谢(AUC代谢物/母体＝58％-156％)

·多次给药时EPZ-6438暴露的大幅降低与代谢物形成增加相关

·在肿瘤尺寸最大减小与EPZ-6438或暴露之间没有观察到直接相关性。在最低剂量(100和200mg)下观察到肿瘤尺寸的最大减小

·在皮肤中的生物活性与EPZ-6438暴露之间存在相关性。

·模型预测在800mg剂量下保持的EPZ-6438暴露处观察到导致近最大抑制(90％)的暴露

实例2薄膜包衣片剂

根据本文披露的方法制备EPZ-6438的配制品。下表3提供了50mg、100mg和200mg强度片剂的组分及其用量：

表3 EPZ-6438薄膜包衣片剂的组分与组成

NF＝国家处方集(美国)，USP＝美国药典，q.s.＝足量。

a：根据效价修正因子(游离形式的测定值的派生值)调整EPZ-6438药物的量。

b：依据EPZ-6438药物的量来调整乳糖一水合物的复合量，以便保持核心片剂的重量不变。

c：在干燥过程中除去。

d：根据大小合格的颗粒的收率进行调整。

在标准测试条件下，以行业标准用含有强度等于50mg、100mg、和200mg EPZ-6438的化合物1HBr的片剂进行溶出测试。图9和图10提供了不同条件下的溶出曲线。

实例31-5号配制品和比较实例1-8的制备

用于样品制备的组分列于下表4中。

表4组分表

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下表5和表6中列出了1-5号配制品(在表5-6中称为“Ex.1”到“Ex.5”)的组分和比较实例1-8(在表5-6中称为“C.Ex.1”到“C.Ex.8”)的组分以及每种组分在每种配制品样品中的量。

表5(50片片剂规模)

a：As是％(作为游离碱的纯度)，是86.3％。相当于200mg的EPZ-6438游离碱。

表6(12.5片片剂规模)

根据以下方法制备1号配制品。除了湿法制粒规模和/或不同组分及其用量不同之外，使用与1号配制品类似的方法制备其他样品。以50片片剂规模执行表5所示的样品的湿法制粒方法。以12.5片片剂规模执行表6所示的样品的制粒方法。基于湿法造粒规模以及表5和表6所示的配制品计算称量的组分量。

1号配制品的制备

使用研钵和研杵将11.59g的EPZ-6438药物、3.23g的乳糖一水合物、0.80g的羟丙基纤维素和2.00g的淀粉乙醇酸钠混合。将混合物使用研钵和研杵湿法造粒，同时逐渐加入适量的净化水。使用设置在70℃下的恒温烘箱干燥湿粒。使经干燥颗粒通过具有710μm开口的筛子。将40.0mg的淀粉乙醇酸钠和7.6mg的硬脂酸镁(每352.4mg的过筛颗粒)加入过筛颗粒中，并且通过在玻璃小瓶中振荡将组分润滑。使用配备有10.0mm直径冲头的单冲压片机将相当于一片片剂的经润滑颗粒以1450kgf进行压缩，并且获得了含有200mg作为游离碱的EPZ-6438药物的片剂。

实例4溶出测试

根据第37版USP的<711>溶出，使用仪器2(桨板法)执行溶出测试。将0.1mol/L HCl溶液和pH 4.5 50mmol/L乙酸盐缓冲液选为溶出介质，并根据第37版USP进行制备。溶出测试条件概述于表7中。在开始溶出测试之后在预定时间从容器中定期收集样品，并通过带有大约20μm开口的UHE-1400过滤器进行过滤。通过将EPZ-6438药物溶解于溶出介质中制备接近对应于100％溶出的浓度的标准溶液。通过分光光度计测量经过滤样品和标准溶液的吸光度，并且基于标准溶液的吸光度和浓度计算溶出率。

表7

溶出测试结果

每个样品使用2个容器执行溶出测试，并且平均溶出率示于表8-9和图11-14中。0.1mol/L HCl溶液中的溶出测试结果示于表8和图11-12中。pH 4.5乙酸盐缓冲液中的溶出测试结果示于表9和图13-14中。

表8

表9

1-5号配制品在0.1mol/L HCl溶液中快速溶解，并且平均溶出率在30分钟时达到80％以上。另外，1-4号配制品在pH 4.5乙酸盐缓冲液中的平均溶出率在30分钟时达到40％或更高。特别地，1号和5号配制品在pH 4.5乙酸盐缓冲液中在30分钟时溶解了80％或更多。

本文引用的全部公开案和专利文献都通过引用并入本文，如同每一份这样的公开案或文献都被具体地且分别地指出已通过引用并入本文。公开案和专利文献的引用并无意承认任何公开案和专利文献是相关的现有技术，也未构成对其内容或日期的任何承认。现已通过书面说明描述了本发明，本领域的技术人员应认识到，可在各种实施例中实践本发明，并且前述描述和下文的实例是出于说明的目的，并不限制随后的权利要求书。

在不背离本发明的精神或本质特征的情况下，本发明可以体现为其他具体形式。因此前述实施例应当在所有方面被视为是说明性的而非限制本文所述的发明。因此本发明的范围是由所附权利要求书而非前述说明书指示的，并且属于权利要求书的含义和等效范围内的所有变化意图被包含在其中。

Claims

1.一种固体药物配制品，所述固体药物配制品包含

含量为50wt.％±2.5wt.％的N-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-5-(乙基(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-4-甲基-4'-(吗啉代甲基)-[1,1'-联苯基]-3-甲酰胺：

或含量等同于50wt.％±2.5wt.％的化合物1的化合物1的盐，或化合物1与化合物1的盐的组合，所述组合以等同于50wt.％±2.5wt.％的化合物1的含量存在；

含量为16wt.％±0.8wt.％的乳糖一水合物；

含量为19wt.％±0.95wt.％的崩解剂，所述崩解剂包括低取代羟丙基纤维素和淀粉乙醇酸钠；

含量为4wt.％±0.2wt.％的羟丙基纤维素；和

含量为2wt.％±0.2wt.％的硬脂酸镁。

2.如权利要求1所述的固体药物配制品，所述固体药物配制品包含含量等同于50wt.％±2.5wt.％的化合物1的氢溴酸盐；和

含量为3wt.％±0.06wt.％的包衣。

3.一种固体药物配制品，所述固体药物配制品包含：

N-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-5-(乙基(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-4-甲基-4'-(吗啉代甲基)-[1,1'-联苯基]-3-甲酰胺：

其中，所述配制品包含：

含量为55wt.％±0.55wt.％的化合物1的氢溴酸盐；

含量为16wt.％±0.8wt.％的乳糖一水合物；

含量为4wt.％±0.2wt.％的羟丙基纤维素；

含量为2wt.％±0.2wt.％的硬脂酸镁；和

含量为3wt.％±0.06wt.％的包衣。

4.一种固体药物配制品，所述固体药物配制品包含：

其中，所述配制品包含：

含量为50wt.％±2.5wt.％的化合物1的氢溴酸盐；

乳糖一水合物；

含量为15wt.％±0.75wt.％的低取代羟丙基纤维素；

含量为5wt.％±0.5wt.％的淀粉乙醇酸钠；

含量为4wt.％±0.2wt.％的羟丙基纤维素；

含量为2wt.％±0.2wt.％的硬脂酸镁；和

含量为3wt.％±0.06wt.％的Opadry 03F45063 RED包衣。

5.一种固体药物配制品，所述固体药物配制品包含：

其中，所述配制品包含：

含量为40-60wt.％的化合物1的氢溴酸盐；

乳糖一水合物；

含量为11-19wt.％的低取代羟丙基纤维素；

含量为3-7wt.％的淀粉乙醇酸钠；

含量为1-10wt.％的羟丙基纤维素；

含量为0.5-5wt.％的硬脂酸镁；和

含量为1-10wt.％的Opadry 03F45063 RED包衣。

6.如权利要求4或5所述的固体药物配制品，所述固体药物配制品包含含量为20wt.％±2wt.％的乳糖一水合物。

7.一种固体药物配制品，所述固体药物配制品由以下项组成：

含量为40-60wt.％的N-((4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基)-5-(乙基(四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-4-甲基-4'-(吗啉代甲基)-[1,1'-联苯基]-3-甲酰胺：

或含量等同于40-60wt.％的化合物1的化合物1的盐，或化合物1与化合物1的盐的组合，所述组合以等同于40-60wt.％的化合物1的含量存在；

乳糖一水合物；

含量为11-19wt.％的低取代羟丙基纤维素；

含量为3-7wt.％的淀粉乙醇酸钠；

含量为1-10wt.％的羟丙基纤维素；

含量为0.5-5wt.％的硬脂酸镁；和

含量为1-10wt.％的包衣组合物。

8.如权利要求7所述的固体药物配制品，所述固体药物配制品包含含量为10-20wt.％的乳糖一水合物。

9.如权利要求7所述的固体药物配制品，其中所述包衣组合物包含羟丙甲纤维素、滑石、聚乙二醇、二氧化钛和氧化铁(III)。

10.如权利要求1所述的药物配制品，其中所述药物配制品进一步包括包衣组合物。

11.如权利要求10所述的固体药物配制品，其中所述包衣组合物包含羟丙甲纤维素、滑石、聚乙二醇、二氧化钛和氧化铁(III)。

12.如权利要求1所述的固体药物配制品，其中所述药物配制品包括含量等同于50wt.％±2.5wt.％的化合物1的化合物1的盐。

13.如权利要求12所述的药物配制品，其中所述化合物1的盐是化合物1的氢溴酸盐。

14.如权利要求1所述的固体药物配制品，其中所述药物配制品包括化合物1与化合物1的盐的组合，所述组合以等同于47-50wt.％的化合物1的含量存在。

15.如权利要求14所述的固体药物配制品，其中所述化合物1的盐是化合物1的氢溴酸盐。