CN107213196A - 一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物及其应用。一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，它主要包括下述重量配比的原料，益母草干粉30～70份、小蓟干粉30～70份。本发明将益母草干粉、小蓟干粉与其他辅料按照一定的配比制成组合物，该组合物针对流产后出血不止的妇科疾病具有良好的治疗效果；此外，本发明还对益母草干粉的制备方法作了改进，从而提高了益母草干粉和小蓟干粉的有效成分的提取率。
Description
技术领域
本发明涉及一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物及其应用，属于食品医药技术领域。
背景技术
益母草(Leonurus artemisia(Laur.)S.Y.Hu F)为唇形科、益母草属植物，夏季开花。其干燥地上部分为常用中药，中国大部分地区均产，生用或熬膏用。益母草味辛苦、凉，活血、祛淤、调经、消水，可用于治疗妇女月经不调，胎漏难产，胞衣不下，产后血晕，瘀血腹痛，崩中漏下，尿血、泻血，痈肿疮疡。益母草有利尿消肿、收缩子宫的作用，是历代医家用来治疗妇科病的要药。
益母草可全草入药，主要的化学成分有生物碱、二萜类化合物、黄酮类化合物、脂肪酸及无机盐等。其中研究较多的是生物碱，主要包括益母草碱和水苏碱，这也是治疗妇科疾病的中药成分。小蓟为菊科植物刺儿菜的全草或根茎。多年生草本，生于山坡、荒地、路旁或田间，分布于除广东、广西、云南、西藏以外的全国各地区。夏、秋季花开放时采割，除去杂质，晒干，或鲜用。
自20世纪80年代法国Rossel Uclaf公司研制成功分子水平抗孕激素药物米非司酮以来，以米非司酮配伍前列腺素类药物用于抗早孕的方法在全世界范围内得到了广泛的运用，获得了良好的临床效果。药物流产因其高效、方便的特点，受到了广大育龄妇女的欢迎。但药物流产后出血不止是目前尚未解决的主要问题，严重的影响了妇女的身心健康。
发明内容
本发明的目的，是提供一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物及其应用。本发明针对流产后出血不止的妇科疾病提供了一种治疗效果良好的组合物；此外，本发明还提高了益母草干粉和小蓟干粉的有效成分的提取率。
为达到上述目的，本发明提供的技术方案如下:一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 30～70份、
小蓟干粉 30～70份。
前述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 45～60份、
小蓟干粉 50～60份。
前述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 50份、
小蓟干粉 50份。
前述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物中，所述益母草干粉按下述步骤制备；
a、净选：采收鲜益母草，去除杂物、杂草，并摘除黄叶、烂叶及死叶，经清洗机清洗干净，得A品；
b、切断、破碎、匀浆：将A品经鼓式植物破碎机切段，在高湿物料粉碎机内加入适量饮用水后破碎，匀浆，得B品；
c、过滤：将B品经过固液分离机分离，收集40目筛网过滤后的鲜益母草匀浆汁，得C品；
d、鲜益母草汁浓缩：将C品吸入连续浓缩锅、单效强制循环蒸发器中，控制浓缩温度不超过50℃，浓缩至40℃下的相对密度1.19～1.25的鲜益母草浓缩液，为D品；
e、冷冻干燥：将D品装盘，通过速冻库或冷冻仓进行冷冻，使物料冷冻至-30℃～-35℃，再通过干燥仓进行升温干燥，当物料温度升至50℃、真空达到20～30Pa，再继续烘干1小时出料，得E品；
f、粉碎：将E品经过摇摆颗粒机80目筛网粉碎，再经过除铁器除铁，得F品；
G、灭菌：将F品通过Co60辐照灭菌，辐照剂量6KGy,得益母草干粉。
前述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物中，所述小蓟干粉按下述步骤制备；
a、净选：采收新鲜小蓟，去除杂物、杂草，并摘除黄叶、烂叶及死叶，经清洗机清洗干净，得A品；
b、切断、破碎、匀浆：将A品经鼓式植物破碎机切段，在高湿物料粉碎机内加入适量饮用水后破碎，匀浆，得B品；
c、过滤：将B品经过固液分离机分离，弃去草渣，收集40目筛网过滤后的小蓟匀浆汁，得C品；
d、小蓟汁的浓缩：将C品吸入连续浓缩锅、单效强制循环蒸发器，浓缩温度控制不超过50℃，浓缩至40℃下的相对密度1.19～1.25的鲜小蓟浓缩液，为D品；
e、冷冻干燥：将D品装盘，通过速冻库或冷冻仓进行冷冻，使物料冷冻至-30℃～-35℃，再通过干燥仓进行升温干燥，当物料温度升至50℃、真空达到20～30Pa，再继续烘干1小时出料，得E品；
f、粉碎：将E品经过摇摆颗粒机80目筛网粉碎，再经过除铁器除铁，得F品；
G、灭菌：将F品通过Co60辐照灭菌，辐照剂量6KGy，得小蓟干粉。
前述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，还包括药学或食品学上可接受的辅料组成。
前述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物的制剂，所述制剂的剂型为片剂、胶囊剂、微乳剂、脂质体剂、口服液、糖浆剂、颗粒剂、丸剂、微丸剂、散剂、膏剂、丹剂、注射剂、栓剂、霜剂、喷雾剂、滴丸剂、贴剂或缓释制剂。
前述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物的应用，是指该组合物在制备治疗堕胎后流血不止的妇科疾病的药物上的应用。
前述的制剂中，所述胶囊剂的制备方法是将益母草干粉和小蓟干粉按照处方比例置双锥混合罐中混合30分钟，将混合后的粉末加入糊精置三维摆动混合机中混合30分钟后取出再置干法制粒机中进行干法制粒，制粒筛网为30目，制得的颗粒用20目筛整粒；将筛出的颗粒置热风循环烘箱内70～80℃干燥5小时后取出与硬脂酸镁按等量递增法手工混合3次，每次混合至肉眼观察无明显白点，再将剩余颗粒倒入三维摆动混合机中混合10分钟，得胶囊颗粒；最后将胶囊颗粒按常规技术手段制成胶囊剂。
前述的制剂中，所述片剂的制备方法是称取PVPK30(聚维酮K30)，溶于纯化水中配成5％的溶液，过80目筛后作为粘合剂待用；将MCC(微晶纤维素)、L-HPC(羟丙纤维素)、PVPP(交联聚维酮)分别过100目筛，与50目～100目的益母草干粉和小蓟干粉一起，置湿法混合颗粒机中混合10分钟；缓慢加入粘合剂进行制软材，混5分钟，可在加完5％聚维酮K30溶液后再加适量纯化水进行制软材，纯化水量为可利用物料量的80％；将制得的软材置摇摆式颗粒机中30目筛制粒，制得的湿颗粒置热风循环烘箱内60～65℃烘6小时，干燥后的颗粒用20目筛整粒，颗粒除铁，十二烷基硫酸钠过100目筛，先手工将其与一部分颗粒于不锈钢盆中混合4次，每次混合1分钟左右，与剩余的颗粒一起置于多向运动混合机中混合10分钟，得片剂颗粒，再将颗粒按常规技术手段制成片剂。
与现有技术比较，本发明将益母草干粉、小蓟干粉与其他辅料按照一定的配比制成组合物，该组合物针对流产后出血不止的妇科疾病具有良好的治疗效果；此外，本发明还提供了一种动物试验的方法，该方法可用于评价药物对动物药物流产后流血不止的疗效，该方法以大鼠为试验对象，将受孕的雌鼠，通过药物(如米非司酮、米索前列醇等)流产后，将本发明所述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物通过灌胃的方式对大鼠给药，对比未喂食清水的大鼠，通过光学显微镜和电子显微镜观测其子宫组织细胞，发现使用过本药品的大鼠的出血不止现象有明显的改善，另外，本发明还对益母草干粉和小蓟干粉的制备方法作了改进，从而提高了益母草干粉和小蓟干粉的有效成分的提取率。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明，但应注意本发明的范围并不受这些实例的任何限制。
实施例1：益母草干粉的制备
a、净选：采收鲜益母草，去除杂物、杂草，并摘除黄叶、烂叶及死叶，经清洗机清洗干净，得A品；
b、切断、破碎、匀浆：将A品经鼓式植物破碎机切段，在高湿物料粉碎机内加入适量饮用水后破碎，匀浆，得B品；
c、过滤：将B品经过固液分离机分离，收集40目筛网过滤后的鲜益母草匀浆汁，得C品；
d、鲜益母草汁浓缩：将C品吸入连续浓缩锅、单效强制循环蒸发器中，控制浓缩温度不超过50℃，浓缩至40℃下的相对密度1.19～1.25的鲜益母草浓缩液，为D品；
e、冷冻干燥：将D品装盘，通过速冻库或冷冻仓进行冷冻，使物料冷冻至-30℃～-35℃，再通过干燥仓进行升温干燥，当物料温度升至50℃、真空达到20～30Pa，再继续烘干1小时出料，得E品；
f、粉碎：将E品经过摇摆颗粒机80目筛网粉碎，再经过除铁器除铁，得F品；
G、灭菌：将F品通过Co60辐照灭菌，辐照剂量6KGy,得益母草干粉。
申请人还对通过本发明的制备方法得到的益母草干粉(定义为A品)和采用常规手段制备益母草干粉(定义为B品)作了对比试验测定
盐酸益母草碱照高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4％辛烷磺酸钠的0.1％磷酸溶液(24:76)为流动相；检测波长277nm。理论塔板数按盐酸益母草碱峰计算应不低于6000。
对照品溶液制备取盐酸益母草碱对照品适量，精密称定，加70％乙醇制成每1ml含100μg的溶液，即得。
供试品溶液制备
取装量差异项下的本品内容物，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇25ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
盐酸水苏碱照高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验以丙烯酰胺键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.2％冰醋酸溶液(80:20)为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论塔板数按盐酸水苏碱峰计算应不低于3000。
对照品溶液制备取盐酸水苏碱对照品适量，精密测定，加入70％乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
供试品溶液制备取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇25ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液的进样体积为4μl～10μl注入液相色谱仪，测定。用外标两点法对数方程计算，即得。
其检测结果如下表所示：
| A品(％) | B品(％) | |
| 盐酸益母草碱含量 | 0.211 | 0.056 |
| 盐酸水苏碱含量 | 4.16 | 0.985 |
结论，从上表可看出，A品的盐酸水苏碱和盐酸益母草碱的含量均高于B品的含量，说明本发明所述的益母草制备方法对有效成分的保留具有显著的意义。
实施例2：小蓟干粉的制备
a、净选：采收新鲜小蓟，去除杂物、杂草，并摘除黄叶、烂叶及死叶，经清洗机清洗干净，得A品；
b、切断、破碎、匀浆：将A品经鼓式植物破碎机切段，在高湿物料粉碎机内加入适量饮用水后破碎，匀浆，得B品；
c、过滤：将B品经过固液分离机分离，弃去草渣，收集40目筛网过滤后的小蓟匀浆汁，得C品；
d、小蓟汁的浓缩：将C品吸入连续浓缩锅、单效强制循环蒸发器，浓缩温度控制不超过50℃，浓缩至40℃下的相对密度1.19～1.25的鲜小蓟浓缩液，为D品；
e、冷冻干燥：将D品装盘，通过速冻库或冷冻仓进行冷冻，使物料冷冻至-30℃～-35℃，再通过干燥仓进行升温干燥，当物料温度升至50℃、真空达到20～30Pa，再继续烘干1小时出料，得E品；
f、粉碎：将E品经过摇摆颗粒机80目筛网粉碎，再经过除铁器除铁，得F品；
G、灭菌：将F品通过Co60辐照灭菌，辐照剂量6KGy，得小蓟干粉。
经申请人试验，通过本发明的制备得到的小蓟干粉，有效成分的提取率可以提高20％以上，对于本发明所述的小蓟干粉的制备方法对有效成分的保留具有显著的意义。
实施例3：一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 30～70份、
小蓟干粉 70～30份。
实施例4：一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 45～60份、
小蓟干粉 50～60份。
实施例5：一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 30份、
小蓟干粉 70份。
实施例6：一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 70份、
小蓟干粉 30份。
实施例7：一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 50份、
小蓟干粉 50份。
实施例8：动物实验(流产后出血不止)
以不全流产动物模型模拟大鼠药物流产后出血时间过长的情况，运用光、电镜技术，从形态学指标确认药物对动物流产后出血不止的效果。
1.实验动物
健康Wistar大鼠，雌鼠，体重180±20g，80只；雄鼠，体重200±20g，40只。分笼饲养，自由摄食、饮水。
2.实验方法
2.1造模与分组方法
将Wistar动情大鼠按雌雄2:1比例合笼，次日晨进行阴道涂片检查，以显微镜下发现精子为受孕第1天。受孕后随机选出32只大鼠，分为正常组、药物组，每组16只。于第7天起分别灌胃米非司酮，按8.3mg/kg体重和米索前列醇按0.1mg/kg体重，同时在阴道内置入消毒棉球一个，观察阴道出血情况。
2.2给药方法
所有组别在服用米索前列醇后第2天于大鼠阴道棉球上可见血迹，提示药流成功，按以下方案给药：
正常组：给予1mg/kg蒸馏水，每日灌胃1次×5天；
药物组：给予28.8g/kg一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物的水溶液(益母草干粉和小蓟干粉的混合比例为1:1，下同)×5天。
2.3取材
上述各组大鼠在用药结束后(妊娠第13天)处死，开腹并分离子宫，剥离周围组织后，剪取一侧宫角纵向剖开，生理盐水充分洗涤，轻轻展平后置2.5％戊二醛固定，于冰箱中保存，以备做电镜观察。
取1mm各组大鼠子宫组织块，置于4℃条件下，用3％的戊二醛液固定，0.1M磷酸缓冲液(PBS)冲洗，0.1％饿酸固定，蒸馏水连续冲洗，用50％、70％、90％、100％丙酮逐渐脱水，室温下包埋剂浸透过液，包埋修块，半薄切片Humphne染色，定位、超薄切片，电子染色，于透射电镜下进行超微结构观察。
3.试验结果
3.1大体观察结果
正常组大鼠子宫充血，呈暗红色，依稀可辨其结节状；高、低剂量组子宫均呈未孕状态，但偶有充血。
3.2光镜观察结果
正常组：虹膜组织疏松破碎，细胞数量减少、分散，有大量炎细胞浸润；高、低剂量组虹膜细胞变性、坏死，核固缩，细胞透明样变。
3.3电镜观察结果
正常组：虹膜细胞核异染色质增多，粗面内质网明显扩张，核糖体减少，线粒体肿胀，细胞膜不完整，可见次级溶酶体，间质有少量炎细胞。
药物组：虹膜细胞蜕变更明显，核深染、固缩、染色质凝集变性，核周隙增宽，部分线粒体空泡变、膜溶解，粗面内质网或明显减少，或囊泡状扩张，胞浆内可见大量溶酶体。
4.结论
药物流产后出血时间过长的主要原因是虹膜组织残留，从子宫蜕膜组织形态学可见，正常组引起的细胞凋亡，并没有发展到使细胞完全消化崩解，这些脱落的细胞如不能及时排出宫腔，条件适宜时，很可能复活，并继续生长，导致药物流产后出血时间过长。含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物可促进蜕膜细胞固缩、坏死进而凋亡，加速蜕膜细胞消化崩解，使其及时排出宫腔而达到缩短药物流产后出血不止的目的。
实施例9：一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物的胶囊剂的制备方法
处方
1.混合：将益母草干粉和小蓟干粉按照处方比例置双锥混合罐中混合30分钟。混合后的粉末进行称量。将混合粉末及糊精置三维摆动混合机中混合30分钟。
2.干法制粒、整粒：置干法制粒机中进行干法制粒。制粒筛网为30目，制得的颗粒用20目筛整粒。
3.干燥：颗粒置热风循环烘箱内70～80℃干燥5小时。
4.总混：将硬脂酸镁与颗粒按等量递增法手工混合3次(每次混合至肉眼观察无明显白点)，再将剩余颗粒倒入三维摆动混合机中混合10分钟。
5.填充、灯检、抛光：检验合格的颗粒中间产品采用1号胶囊于胶囊充填机上填充，装量为0.4g，装量差异稳定在内控±8％(0.368～0.432g)，每10分钟检测一次装量并做记录。将填充好的胶囊灯检、抛光。整个过程控制房间湿度在35～55％范围内。
6.铝塑泡罩包装：取合格胶囊于铝塑泡罩包装机上铝塑泡罩包装，开启循环水，控制参数：综合温度150～190℃，上封温度100～130℃，下封温度100～130℃。
实施例10：一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物的片剂的制备方法
1.处方
2.配料混合、制软材：称取PVPK30(聚维酮K30)，溶于纯化水中配成5％的溶液，过80目筛后作为粘合剂待用。将MCC(微晶纤维素)、L-HPC(羟丙纤维素)、PVPP(交联聚维酮)分别过100目筛，与50目～100目的益母草干粉和小蓟干粉一起，置湿法混合颗粒机中混合10分钟。缓慢加入粘合剂进行制软材，混5分钟，可在加完5％聚维酮K30溶液后加适量纯化水进行制软材，纯化水量为可利用物料量的80％。
3.制粒、烘干：将软材置摇摆式颗粒机中30目筛制粒，湿颗粒置热风循环烘箱内60～65℃烘6小时。
4.整粒、总混：干燥后颗粒用20目筛整粒，颗粒除铁，十二烷基硫酸钠过100目筛，先手工将其与一部分颗粒于不锈钢盆中混合4次，每次混合1分钟左右，与剩余的颗粒一起置于多向运动混合机中混合10分钟，放出颗粒。颗粒半成品检验。
5.压片、挑片：颗粒半成品检验合格后，置于压片机中，使用浅凹￠9mm上冲、下冲，控制片重差异在±4.5％范围内，硬度在7.0～10.0kg/cm2范围内。
6.包衣、挑片：将30g欧巴代-93018359和167ml纯化水配置成包衣粉混悬液。包衣液用80目筛过滤，包衣过程中应对包衣液进行搅拌。将检验合格后的素片置于包衣锅中，旋转素片，将包衣液喷射到素片上，喷完后晾片30分钟后取出包衣片。整个过程应保证包衣均匀，避免粘片。
Claims (8)
1.一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，其特征在于:它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 30～70份、
小蓟干粉 30～70份。
2.根据权利要求1所述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，其特征在于:它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 45～60份、
小蓟干粉 50～60份。
3.根据权利要求1所述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，其特征在于:它主要包括下述重量配比的原料，
益母草干粉 50份、
小蓟干粉 50份。
4.根据权利要求1至3任一项所述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，其特征在于:所述益母草干粉按下述步骤制备；
a、净选：采收鲜益母草，去除杂物、杂草，并摘除黄叶、烂叶及死叶，经清洗机清洗干净，得A品；
b、切断、破碎、匀浆：将A品经鼓式植物破碎机切段，在高湿物料粉碎机内加入适量饮用水后破碎，匀浆，得B品；
c、过滤：将B品经过固液分离机分离，收集40目筛网过滤后的鲜益母草匀浆汁，得C品；
d、鲜益母草汁浓缩：将C品吸入连续浓缩锅、单效强制循环蒸发器中，控制浓缩温度不超过50℃，浓缩至40℃下的相对密度1.19～1.25的鲜益母草浓缩液，为D品；
e、冷冻干燥：将D品装盘，通过速冻库或冷冻仓进行冷冻，使物料冷冻至-30℃～-35℃，再通过干燥仓进行升温干燥，当物料温度升至50℃、真空达到20～30Pa，再继续烘干1小时出料，得E品；
f、粉碎：将E品经过摇摆颗粒机80目筛网粉碎，再经过除铁器除铁，得F品；
G、灭菌：将F品通过Co60辐照灭菌，辐照剂量6KGy,得益母草干粉。
5.根据权利要求1至3任一项所述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，其特征在于:所述小蓟干粉按下述步骤制备；
a、净选：采收新鲜小蓟，去除杂物、杂草，并摘除黄叶、烂叶及死叶，经清洗机清洗干净，得A品；
b、切断、破碎、匀浆：将A品经鼓式植物破碎机切段，在高湿物料粉碎机内加入适量饮用水后破碎，匀浆，得B品；
c、过滤：将B品经过固液分离机分离，弃去草渣，收集40目筛网过滤后的小蓟匀浆汁，得C品；
d、小蓟汁的浓缩：将C品吸入连续浓缩锅、单效强制循环蒸发器，浓缩温度控制不超过50℃，浓缩至40℃下的相对密度1.19～1.25的鲜小蓟浓缩液，为D品；
e、冷冻干燥：将D品装盘，通过速冻库或冷冻仓进行冷冻，使物料冷冻至-30℃～-35℃，再通过干燥仓进行升温干燥，当物料温度升至50℃、真空达到20～30Pa，再继续烘干1小时出料，得E品；
f、粉碎：将E品经过摇摆颗粒机80目筛网粉碎，再经过除铁器除铁，得F品；
G、灭菌：将F品通过Co60辐照灭菌，辐照剂量6KGy，得小蓟干粉。
6.根据权利要求1-3任一项所述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物，其特征在于:还包括药学或食品学上可接受的辅料组成。
7.根据权利要求1-3任一项所述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物的制剂，其特征在于：所述制剂的剂型为片剂、胶囊剂、微乳剂、脂质体剂、口服液、糖浆剂、颗粒剂、丸剂、微丸剂、散剂、膏剂、丹剂、注射剂、栓剂、霜剂、喷雾剂、滴丸剂、贴剂或缓释制剂。
8.根据权利要求1-7任一项所述的一种含有益母草干粉和小蓟干粉的组合物的应用，是指该组合物在制备治疗堕胎后流血不止的妇科疾病的药物上的应用。
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- 2017-06-14 CN CN201710447016.0A patent/CN107213196A/zh active Pending
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