CN107141342A - 一种湿法超微粉碎法提取水飞蓟籽仁蛋白的方法 - Google Patents

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    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants

Abstract

本发明公开了一种湿法超微粉碎法提取水飞蓟籽仁蛋白的方法，包括将水飞蓟籽仁先榨油，然后加入石油醚提取，过滤烘干后得到除油粉，然后将得到的除油粉在pH为7～10的条件下湿法超微粉碎，然后离心取上清液，将得到的上清液调节pH进行酸沉，然后一次静置、离心、干燥即得。本发明通过湿法超微粉碎过程中的机械挤压、摩擦以及剪切力不仅使水飞蓟籽仁粒度减小，更促进了蛋白等有效成分的溶出速率和效率，使得提取速率与提取效率均有提高。

Description

一种湿法超微粉碎法提取水飞蓟籽仁蛋白的方法
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一种湿法超微粉碎法提取水飞蓟籽仁蛋白的方法。
背景技术
水飞蓟(Silybum marianum)为菊科草本植物，其籽主要用来提取分离其有效成分水飞蓟素。由于水飞蓟素主要存在于籽壳中，采用脱壳工艺不仅可使其壳仁分离，便于高纯度水飞蓟素的高效提取，同时也为籽仁的综合利用创造了条件。由于籽仁中蛋白质的含量较高，因此，有必要深入研究水飞蓟蛋白的主要特性与生物活性，为其作为新资源食品的开发提供理论依据，也为实现水飞蓟资源的综合利用、提高其附加值提供技术支持。但现有水提碱沉法提取蛋白具有加热时间长、提取率偏低等缺点。
发明内容
本发明的目的就是提供一种湿法超微粉碎法提取水飞蓟籽仁蛋白的方法，通过湿法超微粉碎减小提取过程中的水飞蓟籽仁颗粒度并增加剪切挤压力，达到缩短提取时间，提高得率的目的。
为实现上述技术目的，本发明提出来了一种湿法超微粉碎法提取水飞蓟籽仁蛋白的方法，包括如下步骤：
(1)将水飞蓟籽仁先榨油，然后加入石油醚提取，过滤烘干后得到除油粉，
(2)将得到的除油粉过筛，去适量过筛后的除油粉加入适量水，调节pH为7～10，然后进行湿法超微粉碎，然后进行离心，取上清液；
(3)将得到的上清液调节pH进行酸沉，然后一次静置、离心、干燥。
优选地，步骤(1)中，石油醚的加入量为为水飞蓟籽仁质量的的5-10倍，搅拌提取10-12小时。
步骤(1)中，烘干的条件为在50℃下烘干。
优选地，所述湿法超微粉碎采用振动磨或者行星磨进行。
更优选地，采用振动磨湿法超微粉碎时在水冷的条件下进行。
步骤(2)中，加水量为水飞蓟籽仁重量的5-10倍量，湿法超微粉碎时间30-60分钟，物料粒度下降至100微米以下。
步骤(2)和步骤(3)中的离心条件为5000～6000rpm离心10～15min.
步骤(3)中，酸沉的条件为采用盐酸调节pH为4-5。
步骤(3)中，静置的时间为0.5-2小时。
步骤(3)中，干燥方法为烘箱烘干、喷雾干燥或者冷冻干燥。
有益效果：传统碱提预先将植物粉碎至100目，然后加入碱调pH至碱性，保温搅拌2～3小时保证蛋白充分提取。本方法将传统碱提方法的粉碎、保温、搅拌三个单元合并为湿法超微粉碎一个单元进行，时间从原来的2～3小时缩短至0.5-1小时，提取率较传统法并无降低，甚至还有升高。湿法超微粉碎过程中的机械挤压、摩擦以及剪切力不仅使水飞蓟籽仁粒度减小，更促进了蛋白等有效成分的溶出速率和效率，使得提取速率与提取效率均有提高。
具体实施例
以下通过具体的实施实例进一步说明本发明的工艺过程，但本发明并不仅限于这些实例项。
实施例1
①取水飞蓟籽仁榨油，加10倍量石油醚搅拌提取10h，过滤，50℃烘干得除油粉；
②将除油籽后粉碎过100目筛；
③称取除油籽仁粉10g，加水100mL，用0.1M NaOH调节PH＝10；
④在水冷条件下振动磨湿法超微粉碎30min，5000rpm离心10min，取上清液用0.1MHCl调至pH＝4.5，静置1小时，5000rpm离心10min，取沉淀烘干称重，测得率为90.6％。
实施例2
①取水飞蓟籽仁榨油，加8倍量石油醚搅拌提取12h，过滤，50℃烘干得除油粉。
②取10g水飞蓟除油粉，加80ml NaCl溶液(0.1M)，用0.1M NaOH调节PH＝9。
③行星式球磨机湿法超微粉碎1小时，5000rpm离心10min，取上清液。
④上清液用0.1MHCl调至pH＝4，静置30分钟小时，5000rpm离心10min，取沉淀，50ml水洗，冷冻干燥24小时干燥称重，测得率为75.3％。
实施例3
①取水飞蓟籽仁榨油，加8倍量石油醚搅拌提取12h，过滤，50℃烘干得除油粉。
②取12g水飞蓟除油粉，加100ml NaCl溶液(0.1M)，用0.1M NaOH调节PH＝10。
③载水冷条件喜爱振动磨湿法超微粉碎1小时，5000rpm离心10min，取上清液；
④上清液用0.1MHCl调至pH＝4，静置30分钟小时，5000rpm离心10min，取沉淀，加入50ml水，喷雾干燥收集固体称重，测得率为80.0％。
实施例4
①取水飞蓟籽仁榨油，加6倍量石油醚搅拌提取11h，过滤，50℃烘干得除油粉。
②取12g水飞蓟除油粉，加80ml NaCl溶液(0.1M)，用0.1M NaOH调节PH＝7。
③在水冷条件下振动磨湿法超微粉碎40min，5000rpm离心10min，取上清液；
④上清液用0.1MHCl调至pH＝4，静置30分钟小时，5000rpm离心10min，取沉淀，加入50ml水，喷雾干燥收集固体称重，测得率为78.0％。
本发明的关键是采用了湿法超微粉碎步骤，其是通过介质(研磨球或者研磨棒)在浆液中对物料施加挤压、剪切以及摩擦力，这些外加作用力显著强于传统提取是的机械搅拌力，在促使物料粉碎(使物料颗粒小于100微米)的同时，极大的增强了浆料内部的对流、混合等传质作用，使得原本只依靠浓度梯度相对较慢溶出的蛋白在短时间内就达到溶出的效果。

Claims (10)

1.一种湿法超微粉碎法提取水飞蓟籽仁蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将水飞蓟籽仁先榨油，然后加入石油醚提取，过滤烘干后得到除油粉，
(2)将得到的除油粉过筛，去适量过筛后的除油粉加入适量水，调节pH为7～10，然后进行湿法超微粉碎，然后进行离心，取上清液；
(3)将得到的上清液调节pH进行酸沉，然后一次静置、离心、干燥。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，石油醚的加入量为水飞蓟籽仁质量的的5-10倍，搅拌提取10-12小时。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，烘干的条件为在50℃下烘干。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述湿法超微粉碎采用振动磨或者行星磨进行。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，采用振动磨湿法超微粉碎时在水冷的条件下进行。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，加水量为水飞蓟籽仁重量的5-10倍量，湿法超微粉碎时间30-60分钟，物料粒度下降至100微米以下。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)中的离心条件为5000～6000rpm离心10～15min。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，酸沉的条件为采用盐酸调节pH为4-5。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，静置的时间为0.5-2小时。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，干燥方法为烘箱烘干、喷雾干燥或者冷冻干燥。
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