CN107126436B - 用于治疗呼吸病症的医药碳水化合物 - Google Patents

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Abstract

本申请涉及用于治疗呼吸病症的医药碳水化合物。本发明涉及用于治疗呼吸病症的方法以及式(1)和/或(2)的化合物或它们的药物学可接受的无机或有机盐，和它们的组合物，所述呼吸病症包括病毒性/细菌性感染后、急性/慢性支气管炎、COPD、囊性纤维化和炎症。申请人已发现式(1)和/或(2)的化合物或它们的药物学可接受的无机或有机盐能够通过在受损呼吸道细胞表面上修复唾液酸糖缀合物来加速受损呼吸道细胞活力的恢复。

Description

用于治疗呼吸病症的医药碳水化合物
本申请是申请日为2010年7月2日、申请号为201080029985.0、发明名称为“用于治疗呼吸病症的医药碳水化合物”的申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及用于治疗咳嗽及包括病毒性/细菌性感染后(post viral/bacterialinfections)、急性/慢性支气管炎、COPD和炎症的相关呼吸病症的新方法以及式(1)和/或(2)的一组碳水化合物及其组合物。
背景技术
在人类中，具有足球场面积的呼吸道是身体与外界联系的充分空气交换所需的最大表面；同时，它受到空气中的许多物理、化学和生物物质的影响，从而引起肺和呼吸道紊乱，包括哮喘、慢性阻塞性肺病、炎症。此外，某些遗传性紊乱例如囊性纤维化也受到呼吸道与外界联系的影响。病毒和细菌可能进入身体并引起发生呼吸道感染。
咳嗽是需要治疗的一种普通病症。然而，现行治疗仅限于缓解征状以便让身体自行恢复，并且在多数情况下恢复是缓慢的。
在澳大利亚，止咳糖浆的销售一年超过$两千万。据估计，止咳糖浆的全球市场每年超过$10亿。
时常伴随正常期的持续性咳嗽持续几个月乃至几年，这归因于支气管哮喘、隐匿回流(occult reflex)或病毒性/细菌性感染后以及吸烟引起气道变得过敏/反应过度。因此，存在对于身体在受到空气中能够引起呼吸系统紊乱的许多物理、化学和生物物质影响后能够促进其恢复的有效治疗的需求。
本说明书中包括文献、作用、材料、设备和制品等的讨论，它们仅仅旨在提供本发明的背景。并非暗示或表示因为其存在于本申请各权利要求的优先权日之前，任何或所有这些内容便形成现有技术基础的部分或者是本发明相关领域中的常识。
发明内容
在本发明的一方面，本发明提供促进受试者的受损呼吸细胞表面上的唾液酸糖缀合物(sialylglycoconjugate)的修复以治疗受试者中的呼吸病症的方法，所述方法包括向受试者施用能够加速唾液酸糖缀合物生物合成的至少一种药物学可接受的化合物的步骤。
在一个实施方案中，所述方法提供细胞活力的恢复，以使细胞处于正常生物功能的更好状态以应答可能影响呼吸表面从而引起呼吸病症的因子，所述呼吸病症例如但不限于咳嗽、病毒性或细菌性感染后、急性/慢性支气管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纤维化及其它呼吸道炎症。
在另一实施方案中，本发明提供选自由式(1)和式(2)的化合物和它们的药物学可接受的盐和衍生物及其组合组成的组的化合物的用途。所述用途是用于治疗或预防如本文所述的呼吸病症。
在本发明的其他方面，提供包含至少一种能够加速唾液酸糖缀合物生物合成的药物学可接受的化合物以用于治疗和预防呼吸病症的组合物和药物组合物。
在本发明的另一方面，还提供用于筛选治疗呼吸病症的化合物的方法，所述方法包括：
用试验化合物处理在细胞表面上具有降低的唾液酸糖缀合物的细胞；和
在将所述试验化合物暴露于所述细胞之后测量所述细胞表面上唾液酸糖缀合物的恢复。
在所述细胞表面上所述唾液酸糖缀合物的恢复的测量可通过测量所述细胞的活力来测定。
在本发明的另一方面，还提供治疗或预防受试者的呼吸病症的方法，所述方法包括向受试者施用通过所述筛选方法鉴定的至少一种化合物的步骤。
附图说明
图1显示活细胞内唾液酸糖缀合物的生物合成途径。
具体实施方式
从细胞生物学和分子生物学的观点来看，受损呼吸道的受损细胞表面可引起受损呼吸道过敏/反应过度，然后将对刺激物的刺激敏感。例如，申请人已发现病毒或细菌感染后呼吸道细胞经常在其表面唾液酸糖缀合物上丢失末端唾液酸。结果，降低“裸”细胞的活力。然后其引起导致支气管炎和咳嗽的炎性反应。不受理论的限制，假定在细胞表面上唾液酸的恢复可修复由感染或其它物理、化学、生物因子损伤的呼吸道，从而最终治愈支气管炎，并终止咳嗽。
申请人现已在本申请中示出了在两种人类呼吸道细胞系(小气道上皮细胞(SAEC)和正常人支气管/气管上皮细胞(NHBE))中进行的细胞培养实验。首先用来自流感病毒或细菌的神经氨酸苷酶(NAs)处理细胞。NAs从细胞表面唾液酸糖缀合物中切割唾液酸。结果，降低了“裸”细胞的活力。例如，当用0.01U/ml终浓度下的产气荚膜梭菌(C.perfringens)NA，或用0.17μg/孔终浓度下的流感病毒NWS/G70C NA处理时，SAEC损失超过25％的活力。在NHBE细胞系中也得到了类似结果。在用NA处理细胞后，洗涤细胞以除去NA，然后用式(1)和/或(2)的化合物孵育24小时。最终测定细胞的活力。结果(实施例7-36)显示式(1)和/或(2)的一组碳水化合物能够通过在细胞表面上修复唾液酸糖缀合物来帮助受损呼吸道细胞活力的恢复。
因此，在本发明的一方面，本发明提供促进受试者的受损呼吸细胞表面上的唾液酸糖缀合物的修复以治疗受试者中的呼吸病症的方法，所述方法包括向受试者施用能够加速唾液酸糖缀合物生物合成的至少一种药物学可接受的化合物的步骤。
在本发明的另一方面，本发明提供促进受试者的受损呼吸细胞恢复细胞活力以治疗受试者中的呼吸病症的方法，所述方法包括向受试者施用能够加速唾液酸糖缀合物生物合成的至少一种药物学可接受的化合物的步骤。
促进唾液酸糖缀合物在呼吸细胞表面上的修复也可表示细胞恢复到生存状态或活力的恢复，从而使细胞处于正常生物功能的更好状态以应答可影响呼吸表面从而导致呼吸病症的因子，所述呼吸病症例如但不限于咳嗽、病毒性或细菌性感染后、急性/慢性支气管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纤维化及其他呼吸道炎症。
在另一实施方案中，至少一种药物学可接受的化合物选自由能够作为中间物参与唾液酸糖缀合物生物合成的碳水化合物、其前体及其前药和其药物学可接受的盐和衍生物及其组合组成的组。
可口服、通过吸入或注射给药使用上述化合物以治疗呼吸病症，所述呼吸病症选自由咳嗽、病毒性或细菌性感染后、急性/慢性支气管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纤维化及其它呼吸道炎症组成的组。
贯穿本申请文件的说明书和权利要求书的词语“包括(comprise)”及该词语的变形，例如“包括(comprising)”和“包括(comprises)”不意于排除其它添加剂、组分、统一体(integers)或步骤。
在另一实施方案中，本发明提供选自由式(1)的化合物和式(2)的化合物组成的组的化合物的用途：
Figure GDA0001355752110000051
其中，
当B＝H时，A可为NHCOCH3、NH2、OH、NH2·HX或者当A＝H时，B可为NHCOCH3、NH2、NH2·HX，HX可为药物学适宜的无机或有机酸，例如盐酸、硫酸、磷酸、乙酸、柠檬酸等；
R1、R2、R3、R4可以相同或不同。它们可以是H、CH3、(CH2)nCH3(n＝1～20)、CH2Ph、COCR5R6R7、CO-活性酯如新戊酯(piva ester)、茚基酯；
R5、R6、R7可以相同或不同。它们可以是H、CH3、(CH2)nCH3(n＝1～20)、C6H5、CH2Ph、CH3CH2(OCH2CH2)mCH3(m＝1～200)；和
R4可以是
Figure GDA0001355752110000061
R5'、R6'可以相同或不同。它们可以是H或药物学适宜的无机或有机盐，例如Na、K、Ca、Mg、Zn、NH3、三乙胺等，或者R5'、R6'可以是药物学适宜的酯，例如(CH2)nCH3(n＝1～20)或CH3CH2(OCH2CH2)mCH3(m＝1～200)或活性酯如新戊酯、茚基酯；
Figure GDA0001355752110000062
其中，
R8可以是H、CH3、(CH2)nCH3(n＝1～20)、CH2Ph、COCH2Ph、CO-活性酯，例如新戊酯、茚基酯、COCR14R15R16；其中R14、R15、R16可以相同或不同。它们可以是H、CH3、(CH2)nCH3(n＝1～20)、C6H5、CH2Ph、CH2CH2(OCH2CH2)mCH3(m＝1～200)；
R8可以是胞嘧啶核苷、胞苷单磷酸、胞苷二磷酸、胞苷三磷酸、腺嘌呤核苷、腺苷单磷酸、腺苷二磷酸、腺苷三磷酸；
R9可以是H、CH3、药物学可接受的无机或有机盐，例如Na、K、Ca、Mg、Zn、NH3、三乙胺等，或者是药物学适宜的活性酯，例如新戊酯、茚基酯等，或者是CH2CR17R18R19其中R17、R18、R19可以相同或不同。它们可以是H、CH3、(CH2)nCH3(n＝1～20)、CH2CH2(OCH2CH2)mCH3(m＝1～200)、C6H5、CH2Ph；
R10、R11、R12、R13可以相同或不同。它们可以是H、CH3、(CH2)nCH3(n＝1～20)、CH2Ph、活性酯，例如piva酯或COCR20R21R22。其中R20、R21、R22可以相同或不同。它们可以是H、CH3、(CH2)nCH3(n＝1～20)、C6H5、CH2Ph、CH2CH2(OCH2CH2)mCH3(m＝1～200)；
R13可以是
Figure GDA0001355752110000071
R23、R24可以相同或不同。它们可以是H、CH3、(CH2)nCH3(n＝1～20)、CH2CH2(OCH2CH2)mCH3(m＝1～200)、CH2Ph，或活性酯如新戊酯、茚基酯或CH2CR25R26R27，或者药物学可接受的无机或有机盐，例如Na、K、Ca、Mg、Zn、NH3、三乙胺等，和R25、R26、R27可以相同或不同。它们可以是H、CH3、(CH2)nCH3(n＝1～20)、C6H5、CH2Ph。
在一个实施方案的式(1)中，当A＝NHCOCH3，B＝H，R1、R2、R3、R4＝H时，所述化合物为N-乙酰-D-甘露糖胺。贯穿本说明书将其称为化合物(1)。
在另一实施方案的式(2)中，当R8、R10、R11、R12、R13＝H，R9＝Na时，所述化合物为N-乙酰神经氨酸钠盐(唾液酸钠盐)。贯穿本说明书将其称为化合物(2)。
当R8为胞苷单磷酸，并且R9、R10、R11、R12、R13＝H时，所述化合物为CMP-唾液酸。
作为细胞表面上糖缀合物的寡糖链上的末端糖，唾液酸非常适合作为特定生物过程例如细胞粘附[1]、识别决定簇的形成或屏蔽[2][3]以及糖蛋白结构的稳定化[4]的分子决定簇(molecular determinant)。活细胞中唾液酸糖缀合物的生物合成途径示于图1[5]。
据报道，N-乙酰神经氨酸而非乳糖，剂量依赖性地防御粘液纤毛转运(mucocilliary transport)的损伤[6]。此外，在兔子中利用反复给药(吸入)N-乙酰神经氨酸的预治疗显著地预防了由长期暴露SO2引起的炎症改变[7]。另外据报道，向哺乳动物口服给药N-乙酰-D-甘露糖胺，其被迅速地代谢为葡萄糖[8]。还报道了施用N-乙酰甘露糖胺或其衍生物(以在缺乏糖分子的患者内产生唾液酸)以治疗肌肉萎缩的方法，所述肌肉萎缩包括遗传性包涵体肌病(HIMB)和有镶边空泡远端肌病(Nonaka肌病)。某些肾病症例如起因于肾膜的唾液酸化不足(hyposialytion)也可通过该方法而治疗[8b][8c]。
然而，这些治疗中没有涉及这些中间物用于治疗呼吸病症的用途。
申请人已试验了式(1)和/或(2)的化合物的安全性。例如，在耐受性和亚慢性毒性研究中对Balb-C小鼠(AEC批准码：BAM/B/2005/16)使用化合物(1)和(2)。耐受性研究的结果显示两种化合物对于口服剂量在5g/Kg或对于腹腔内剂量在2g/Kg是良好耐受的。在亚慢性毒性研究中，结果显示两种化合物对于口服剂量在1g/Kg/天×30天或者对于腹腔内剂量在0.5g/Kg/天×30天是非毒性的。
申请人还建立了豚鼠(guinea pig)咳嗽模型。在该模型中试验了化合物(1)和(2)。在500mg/kg/天×3天的口服剂量下，两种化合物能够使由豚鼠内神经氨酸苷酶引起的呼吸道损害修复。这些体内结果与体外数据一致。因此，效力和安全性数据均支持式(1)和/或(2)的化合物，和特别是化合物(1)和(2)可用于医药应用。
申请人已发现式(1)和/或(2)的化合物能够通过在受损呼吸道细胞表面上修复唾液酸糖缀合物来加速恢复受损呼吸道细胞的活力。
式(1)和/或(2)的化合物在进入细胞后增强了唾液酸糖缀合物的产生。因此，本发明的一方面涉及式(1)和/或(2)的化合物及其药物学可接受的盐和衍生物及其组合或它们的混合物作为用于治疗咳嗽及相关的呼吸病症的活性治疗剂的用途，所述相关的呼吸病症包括细菌性感染病毒性/细菌性感染后、急性/慢性支气管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纤维化和炎症。
式(1)和/或(2)的化合物的药物学可接受组合物及其混合物还可通过将它们与一种或多种用于治疗呼吸病症的其它活性成分组合来形成。所述其它活性成分例如，胆茶碱(支气管扩张剂(bronchodialator))、茶碱(支气管扩张剂)、舒喘灵(salbutamol)和硫酸特布他林(缓解与哮喘及其它呼吸病症相关的支气管痉挛)、溴己新(bromhexine)(祛痰药、粘液溶解药)、可待因、福尔可定(pholcodeine)(止痛药、止咳药)、氯苯达诺(clofedanol)(止咳药)、喷托维林(pentoxyverine)(止咳药)、二甲氧酯、海罂栗碱(止咳药)、普若姆待(promdate)、他洛昔明(taloximine)、乙酰胡椒乙胺(acetyl piperacetamide)、桉叶油(eucalypus oil)、氯化铵和草药例如川贝母(fritillariae cirrhosae)(镇咳草药)。粘蛋白合成抑制剂例如他尼氟酯(talniflumate)、2-氨基-苯基-乙酸，或与某些糖皮质激素例如氟尼缩松(平喘药)组合；或与症状缓解药物学相容性止咳糖浆组合；或与磷酸二酯酶-4抑制剂如用于治疗慢性阻塞性肺病(COPD)的西洛司特(Ariflo)组合。
此外，式(1)和/或(2)的化合物的药物学可接受组合物及其药物学可接受的盐和衍生物及其组合以及它们的混合物还可通过将其与一种或多种其它活性成分的组合来形成，所述其它活性成分例如，抗病毒剂如扎纳米韦(zanamivir)和/或奥司他韦(oseltamivir)(抗流感病毒剂)、普可那利(pleconaril)和/或恩韦肟(enviroxime)(抗鼻病毒剂)；抗微生物剂，例如抗生素如红霉素、四环素、利福霉素、青霉素、头孢霉素；喹诺酮、氟喹诺酮类(fluoroquinolones)；磺酰胺类和三甲氧苄二氨嘧啶；抗真菌剂，例如两性霉素、克霉唑(clotrimazole)、益康唑、氟康唑、氟胞嘧啶等。
本文涉及到的式(1)和/或(2)的化合物包括式(1)和/或(2)的化合物及其药物学可接受的衍生物和盐。
在另外或可选的实施方案中提供用于治疗或预防呼吸病症的方法，所述呼吸病症包括在含人类在内的动物中的病毒性/细菌性感染后、急性/慢性支气管炎、COPD、囊性纤维化和炎症，所述方法包括施用有效量的式(1)和/或(2)的化合物。
在另外或可选的方面还提供式(1)和/或(2)的化合物在制造用于治疗呼吸病症的药物中的用途，所述呼吸病症包括在含人类在内的动物中的病毒性/细菌性感染后、急性/慢性支气管炎、COPD、囊性纤维化和炎症。
在治疗中需要使用的式(1)和/或(2)的化合物的量将随着给药途径、待治疗的病症的性质以及动物(包括人类患者)的年龄和情况而变化，并将最终由护理兽医或医师裁量。
通常适宜的剂量将在每天约0.1mg至500mg/kg体重的范围内，优选0.1mg至50mg/kg/天的范围内。
通常，口服剂量可为1mg/kg/天至500mg/kg/天，注射剂量可为1mg/kg/天至100mg/kg/天。吸入剂量可为0.01mg/kg/天至5mg/kg/天。优选地，对于口服或注射给药剂量可为5mg至50mg/kg，每天两到三次持续5至10天；对于吸入剂量可为0.1至0.5mg/kg，每天一至五次持续5至10天的时间。
优选在咳嗽或相关的病症出现的同时或之后开始治疗，并继续治疗直至咳嗽或相关的病症结束。适宜的治疗是每天给予1至4次并继续治疗3至30天。
所需的剂量可以表现为单剂量或作为以适当的间隔(例如，每天两个、三个、四个或以上亚剂量(subdoses))给药的分剂量(divided doses)。
式(1)和/或(2)的化合物以单位剂型(例如每单位剂型包含0.1至500mg活性成分)方便地给药。作为本文所使用的术语“单位剂量”不仅包括单独包装的单位剂量例如瓶，还包括从瓶中分配入注射器的可分量(aliquot)和包含于输注容器中用于输注的组合物。
虽然可能将式(1)和/或(2)的化合物作为原料化学品给药用于治疗，但优选作为药物学配方的活性成分呈现。
因此本发明进一步提供药物学配方，其包含与一种或多种其药物学可接受载体一起的式(1)和/或(2)的化合物或其药物学可接受的衍生物以及任选的其它治疗和/或预防成分。所述载体必须在与配方其它成分兼容并且不损害其受体的意义上而言是“可接受的”。
药物学配方包括适于口腔、直肠、鼻或胃肠外(包括肌内、皮内、皮下和静脉内)给药的那些，或以适于给药到胃肠道的形式，或以适于给药到呼吸道(包括鼻道)如通过吸入或吹入(insufflation)或用于皮内或皮下移植或用于透皮贴剂(transdermal patch)的形式的那些。配方在适当的情况下可方便地以离散的剂量单位呈现，并可通过在药剂领域众所周知的任何方法来制备。所有的方法包括引入活性化合物与液体载体或细分散的固体载体或两者联合，然后如有必要将产品成形为所需的配方的步骤。
适于口服的药物学配方可呈现为各自包含预定量活性成分的离散单位例如胶囊剂、扁囊剂(cachet)或片剂；呈现为粉剂或颗粒剂；呈现为溶液、悬浮液或呈现为乳浊液。活性成分还可呈现为丸剂、膏剂或糊剂。口服用片剂和胶囊剂可包含常规的赋形剂例如粘合剂、填料、滑润剂、崩解剂或润湿剂。片剂可以是根据本领域技术内众所周知的方法涂布的。口服液体制剂可以是例如油水悬浮液(aqueous of oily suspension)、溶液、乳浊液、糖浆或酏剂的形式，或者可以呈现为在使用前用水或其它适当载体构造(constitution)的干燥产品。这样的液体制剂可包含常规添加剂例如悬浮液、乳化剂、非水载体(其可包含食用油)或防腐剂。
式(1)和/或(2)的化合物还可配制为肠胃外给药(例如，通过注射，如团注(bolusinjection)或连续输注)并可以呈现为安瓿(ampoule)、预填充注射器(pre-filledsyringes)、小体积输注(small volume infusion)的单位剂量形式或者呈现为具有增加的防腐剂的多剂量容器。组合物可采用像悬浮液、溶液或在油或水载体中的乳浊液这样的形式，并可包含配方试剂例如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。可选地，活性成分可以是通过灭菌固体的无菌分离物或者通过溶液的冷冻干燥获得的，在使用前用适当载体(如灭菌的、无致热原的水)构造的粉末形式。
对于直肠给药，优选其中载体为固体的单位剂量栓塞剂。适当的载体包括可可油及本领域内通常使用的其它材料，并且栓塞剂可以由活性化合物与软化的或熔融的载体混合随后通过冷却和在模型内成形而方便地形成。
对于向呼吸道的给药(包括鼻内给药)，式(1)和/或(2)的化合物可以通过本领域内为给药至呼吸道所采用的任何方法和配方来给药。
因此通常式(1)和/或(2)的化合物可以以溶液或悬浮液或作为干粉的形式给药。
溶液和悬浮液将优选为水性的，例如单独由水(例如无菌或无致热原的水)或水与生理学可接受的助溶剂(例如乙醇、丙二醇、聚乙二醇如PEG 400)制备。
这样的溶液或悬浮液可额外地包含其它赋形剂例如防腐剂(例如苯扎氯铵)、增溶剂/表面活性剂例如聚山梨酸酯(例如，吐温
Figure GDA0001355752110000131
80、司盘
Figure GDA0001355752110000132
80、苯扎氯铵)、缓冲液、等渗性调节剂(例如氯化钠)、吸收促进剂和增稠剂(viscosity enhancer)。悬浮液可额外地包含悬浮剂(例如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠)。
溶液或悬浮液通过常规方法，例如用滴管、移液管或喷雾器直接应用到鼻腔。可以以单剂量或多剂量形式提供配方。在后一种情况中，希望提供剂量测量方法。在滴管或移液管的情况中，这可通过患者施用适当的、预定体积的溶液或悬浮液来实现。在喷雾器的情况中，这可借助例如测量雾化喷雾泵来实现。
气雾剂配方也可用于呼吸道给药，其中式(1)和/或(2)的化合物可以在具有适当推进剂(propellant)的加压包装内提供，所述推进剂例如含氯氟烃(CFC)如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它适当气体。气雾剂还可方便地包含表面活性剂例如卵磷脂。药物的剂量可以通过规定量阀来控制。
任选地，式(1)和/或(2)的化合物可以以干粉的形式提供，例如在适当粉末基质例如乳糖、淀粉、淀粉衍生物如羟基丙甲基纤维素和聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)中的化合物的粉末混合物的形式。方便地，粉末载体将在鼻腔内形成凝胶。粉末组合物可以以例如胶囊剂或例如明胶或泡罩包装的药筒(cartridge)(由其粉末可借助吸入器(inhaler)给药)的单位剂量的形式呈现。
在用来向呼吸道给药的配方、包括鼻内配方中，化合物将通常具有例如约5微米以下的小粒径。这样的粒径可通过本领域内已知的方法如通过微粉化(micronisation)而获得。
当需要时，可以采用适于给出活性成分持续释放的配方。
式(1)和/或(2)的化合物还可以与其它治疗剂，例如抗感染剂如抗生素、抗病毒剂以及用于治疗呼吸病症的药剂组合使用。因此在另外的方面本发明提供与另外的治疗活性剂一起的包含式(1)和/或(2)的化合物或其药物学可接受的衍生物的组合。
可方便地呈现上述组合以便以药物学配方的形式使用，并因此使该包含与药物学可接受载体一起的如上述所定义的组合的配方由此构成本发明的另外方面。
此类组合的单个组分可以以分离或组合的药物学配方或者依次或者同时给药。
当与治疗中有活性的第二种治疗剂一起使用式(1)和/或(2)的化合物时，各化合物的剂量可以与当单独使用各化合物时所采用的剂量相同或不同。适当的剂量将易于被本领域内的技术人员所理解。
式(1)和/或(2)的化合物及其药物学可接受的衍生物可通过本领域内用于制备相似结构的化合物的任何已知方法来制备。
在本发明的另外方面，提供筛选用于治疗呼吸病症的化合物的方法，所述方法包括：
用试验化合物处理在细胞表面上具有降低的唾液酸糖缀合物的细胞；和
在所述试验化合物暴露于所述细胞后测量所述细胞活力的恢复。
基于本发明，可将其它化合物用于促进呼吸细胞表面上唾液酸糖缀合物的修复；或用于通过其加速唾液酸糖缀合物生物合成的能力来促进细胞活力的恢复。因此，以细胞表面上唾液酸糖缀合物的修复为条件，可实现细胞修复至用于正常生物学功能的更好状态以应答可影响呼吸表面从而导致呼吸病症的因子。
该方法包括获得细胞，优选呼吸细胞，所述细胞在表面上具有降低的唾液酸糖缀合物。该细胞称为“裸细胞”，该细胞对可影响其正常行使功能的能力的因子敏感。
所述细胞可通过用神经氨酸苷酶处理正常细胞如呼吸细胞以从细胞表面上的唾液酸糖缀合物除去唾液酸来得到。然后通过试验化合物修复表面上的唾液酸糖缀合物的能力来测量该细胞。试验化合物可通过加速唾液酸糖缀合物的生物合成或通过导致细胞表面上唾液酸糖缀合物修复的其它方式来修复唾液酸糖缀合物。
细胞表面上唾液酸糖缀合物的修复能力可通过细胞活力的修复来测量。细胞的活力可通过本领域技术人员(skilled addressee)可用的任何方法测量。然而，其可通过细胞增殖的细胞能力来测定。这可通过利用标准细胞增殖试剂盒例如但不限于细胞增殖ELISA试剂盒来测量掺入复制细胞的新合成DNA的BrdU或通过利用[3H]-胸腺嘧啶核苷类细胞增殖分析来测量。
该能力也可通过测定由于细胞暴露于试验化合物而在细胞上修复的唾液酸糖缀合物的数量来测量。这可通过本领域技术人员可得到的方法，例如但不限于使用抗唾液酸糖缀合物的抗体来测量。
在另一实施方案中，还提供治疗或预防受试者中的呼吸病症的方法，所述方法包括向受试者施用通过所述筛选方法鉴定的至少一种化合物的步骤。
最后，除了具体描述的那些之外，如上所述的本发明可容许改变、修改和/或添加，并且应理解本发明包括可能进行的所有此类改变、修改和/或添加，应理解各种其它修改和/或添加将落入如上所述的说明书的范围内。以下实施例仅用于示例性目的，并且不应解释为本发明的限制。
实施例
实施例中使用的一般方法
·在Bruker Avance 300上、DPX 300A上的Xwin-NMR 3.5版记录NMR。
·在Mass Spectrometer Micromass ZMD上使用ESI(电喷射离子化探针)记录MS。使用Water Mass Lynx NT软件运行系统。
·在硅胶60F245(E.Merck)上进行快速柱层析(Flash column chromatography)。
·在硅胶预涂布板(E.Merck)上进行薄层色谱(TLC)。
·在Waters alliance 2690分离模块上运行HPLC，通过Waters双波长2487UV检测器检测，软件为Waters Millenium 32。
·细胞培养和细胞活力分析
·方法1
所用细胞：小气道上皮细胞(SAEC)
培养基：SAGM Bullet试剂盒(SABM+生长添加剂)
和/或
所用细胞：正常人支气管上皮细胞(NHBE)
培养基：BEGM Bullet试剂盒(BEBM+生长添加剂)
实验细节：
融化冷藏的细胞(1ml中1×l06个细胞)并在175cm2皮氏培养皿(petri-dish)中的完全培养基上培养。次日除去培养基并用新鲜培养基替换。培养细胞约5-6天以得到70-80％融合。在生长期，每隔一天更换培养基。
当得到适当的融合时，除去培养基。用1×PBS清洗单层细胞。除去PBS之后，添加2ml胰蛋白酶+EDTA。在室温下轻轻地摇动细胞2分钟。用1×PBS收集细胞，在200g下离心10分钟。重悬沉淀至5×104/ml。在96孔板中，以l00μl/孔(约5000个细胞/孔)等分细胞。将细胞于37℃下孵育24小时。
将10μl细菌神经氨酸苷酶(来自产气荚膜梭菌)添加到各孔至对于SAEC为终浓度为0.0lU/ml和对于NHBE为0.008u/ml。然后将细胞于37℃下孵育6小时。
在1000rpm下进行板的离心10分钟，吸出培养基并添加200μl新鲜培养基。再次离心板，用100μl新鲜培养基替换培养基。
试验用化合物配制成6×所需浓度；将20μl化合物分三次添加到各孔中。然后将细胞于37℃下孵育24小时。
37℃下用10μl BrdU标签(细胞增殖ELISA试剂盒-Roche)标记细胞过夜(约16小时)。
除去标记培养基并固定细胞，并用制造商提供的固定液(fixing solution)在室温下变性30分钟。
除去固定液后，将100μl抗BrdU-POD(根据制造商的建议在适当浓度下)添加到各孔。在室温下孵育板90分钟。
除去抗体偶联物，并用200μl洗涤液(提供的)洗涤孔三次。除去洗涤液后，添加100μl底物溶液(提供的)；并在室温下孵育30分钟。添加50μl 1M H2SO4来终止反应。在450nm下(690nm的参考波长)测量样品的吸光度。
用0.01U/ml来自产气荚膜梭菌的神经氨酸苷酶(NA)处理的小气道上皮细胞(SAEC)。
Figure GDA0001355752110000181
用0.008U/ml来自产气荚膜梭菌的神经氨酸苷酶(NA)处理的正常人支气管上皮细胞(NHBE)。
Figure GDA0001355752110000182
细胞活力分析通常给出±10％的运算偏差。因此，仅将细胞活力相对于对照(用神经氨酸苷酶处理)的细胞活力显示≥120％的结果认定为显著。其表明具有阳性结果的化合物可以在48小时内修复细胞活力。在式(1)和/或(2)的化合物中，具有低细胞毒性的最具活性的化合物为N-乙酰甘露糖胺(化合物1)和N-乙酰神经氨酸(化合物2)。
·方法2
所用细胞：小气道上皮细胞(SAEC)
培养基：SAGM Bullet试剂盒(SABM+生长添加剂)
和/或
所用细胞：正常人支气管上皮细胞(NHBE)
培养基：BEGM Bullet试剂盒(BEBM+生长添加剂)
实验细节：
融化冷藏的细胞(1ml中1×l06个细胞)并在175cm2皮氏培养皿中的完全培养基上培养。次日除去培养基并用新鲜培养基替换。培养细胞约5-6天以得到70-80％融合。在生长期，每隔一天更换培养基。
当得到适当的融合时，除去培养基。用1×PBS清洗单层细胞。除去PBS之后，添加2ml胰蛋白酶+EDTA。在室温下轻轻地摇动细胞2分钟。用1×PBS收集细胞，在200g下离心10分钟。重悬沉淀至5×104/ml。在96孔板中，以l00μl/孔(约5000个细胞/孔)等分细胞。将细胞于37℃下孵育24小时。
将10μl病毒神经氨酸苷酶(来自流感病毒NWS/G70C)添加到各孔至终浓度0.017μg/ml。然后将细胞于37℃下孵育6小时。
在1000rpm下进行板的离心10分钟，吸出培养基并添加200μl新鲜培养基。再次离心板，用100μl新鲜培养基替换培养基。
试验用化合物配制成6×所需浓度；将20μl化合物分三次添加到各孔中。然后将细胞于37℃下孵育24小时。
37℃下用10μl BrdU标签(细胞增殖ELISA试剂盒-Roche)标记细胞过夜(约16小时)。
除去标记培养基并固定细胞，并用制造商提供的固定液在室温下变性30分钟。
除去固定液后，将100μl抗BrdU-POD(根据制造商的建议在适当浓度下)添加到各孔。在室温下孵育板90分钟。
除去抗体偶联物，并用200μl洗涤液(提供的)洗涤孔三次。除去洗涤液后，添加100μl底物溶液(提供的)并在室温下孵育30分钟。添加50μl 1M H2SO4终止反应。在450nm下(690nm的参考波长)测量样品的吸光度。
实施例1.N-乙酰-D-甘露糖胺(1)的制备。
[化合物(1)，式(1)，B＝H，A＝NHCOCH3,R1＝R2＝R3＝R4＝H]
将1g通过水解壳多糖获得的N-乙酰-D-葡糖胺溶解于3ml水中，然后通过使用30％的NaOH溶液调节至pH>11。使混合物于20℃～40℃下静置48小时。用5N H2SO4将所得溶液中和至pH6.5～7.0，然后在减压下蒸发至干燥。在乙醇中回流固体10分钟，冷却至室温，并过滤。真空蒸发滤液至干燥以提供白色固体，通过1H-nmr测定，该白色固体包含85％的N-乙酰-D-甘露糖胺和15％的N-乙酰-D-葡糖胺。由乙醇/异丙醇/EA分步重结晶(fractionallyrecrystallized)该固体以提供作为白色固体的标题化合物(125mg，62.5％，基于N-乙酰-D-甘露糖胺的20％转化率)。未反应的N-乙酰-D-葡糖胺(0.8g)可再次用于下一批反应。
1H-nmr(D2O) δ(ppm)
5.15(d,0.7H),3.85～3.32(m,6.3H),1.99(s,3H)
MS 222(M+1)
实施例2.N-乙酰-神经氨酸钠盐(2)的制备。
[化合物(2)，式(2)，R8＝R10＝R11＝R12＝R13＝H,R9＝Na]
向N-乙酰甘露糖胺(2.7g，12.2毫摩尔)和丙酮酸钠(2.7g，24.5毫摩尔)在水(15ml)中的pH7.0～7.5的溶液中添加透析袋(截留MW20,000)，所述透析袋包含在反应混合物中的N-乙酰神经氨酸裂解酶[EC 4.1.3.3](25单位)，所述反应混合物为pH7.0-7.5下的在水(3ml)中的N-乙酰甘露糖胺(0.54g)和丙酮酸钠(0.54g)的反应混合物。在60r.p.m.30℃下震荡反应混合物5天。除去酶袋(enzyme bag)并再次用于新一批反应。用水(15ml)稀释反应混合物，然后通过Amberlite IRA-400(HCOO-形式)的柱(150ml)。然后用水(300ml)洗涤、用0.5M HCOOH溶液洗脱树脂。收集洗脱液并真空蒸发至干燥。将残余物溶解于水中(2ml)，然后用冰醋酸(10ml)在4℃稀释过液，过滤晶体，用EtOH洗涤，干燥以提供作为白色晶体粉末的N-乙酰神经氨酸(1.5g，39.8％)。
1H-nmr(D2O) δ(ppm)
4.00(m,1H)、3.97(m,1H)、3.87(d,1H)、3.77(dd,1H)、3.67(m,1H)、3.55(dd,1H)、3.48(d,1H)、2.24(dd,1H,J＝13.2HZ,5.1HZ)、1.98(s,3H)、1.83(dd,1H,J＝13.2HZ,11.5HZ)。
MS 310(M+1)
N-乙酰神经氨酸(1g,3.23mmol)溶解于水(20ml)中，然后与NaHCO3(0.26g、3.09mmol，至PH 6～6.5)搅拌，冻干后以提供作为白色粉末的标题产物(1.05g、98％)。
实施例3.N-乙酰-神经氨酸乙酯(ethyl N-acetyl-neuraminate)(3)的制备。
向N-乙酰-神经氨酸(1g，3.23毫摩尔)的无水乙醇(75ml)悬浮液中添加1.5ml乙酰氯。密封混合物并在室温下搅拌16小时以形成清液。将所得溶解真空蒸发至干燥。用乙酸乙酯洗涤白色固体并真空干燥以提供作为白色固体的标题化合物(1g，91.7％)。
1H-nmr(D2O) δ(ppm)
4.27(q,2H)、4.04(m,2H)、3.91(d,1H)、3.78(dd,1H)、3.68(dd,1H)、3.57(dd,1H)、3.52(d,1H)、2.28(dd,1H)、2.01(s,3H)、1.88(dd,1H)、1.28(t,3H)。
MS 338(M+1)、360(M+23)
实施例4.5-乙酰胺基-4,7,8,9,-四邻乙酰基-3,5-双脱氧-β-D-丙三氧基-D-半乳-2-壬酮吡喃糖酸乙酯(ethyl5-acetamido-4,7,8,9,-tetra-o-acetyl-3,5-dideoxy-β-D-glycero-D-galacto-2-nonulopyranosonate)(5-乙酰胺基-4,7,8,9-四邻乙酰基-神经氨酸乙酯)(4)的制备。
在40℃向醋酸酐(acetic anhydrade)和60％高氯酸的水溶液(aqueous 60％perchloric acid)(5μl)的摇动溶液中，在30分钟以上分步(in portion)添加5-乙酰胺基-神经氨酸乙酯(230mg，0.68mmol)。40℃下搅拌所得混合物2小时。然后将其冷却至室温，用冷水(10ml)稀释，用硫酸铵饱和，用乙酸乙酯(40ml×3)萃取。合并有机萃取物并相继用饱和的NaHCO3溶液和水洗涤。经MgSO4干燥有机层，并真空蒸发至干燥。在乙酸乙酯中溶解残余物，用己烷稀释以给出作为白色晶体的标题化合物(223mg，65％)。
1H-nmr(CDCl3) δ(ppm)
5.71(m,1H)、5.36(dd,1H,J＝1.5HZ,5.6HZ)、5.25(ddd,1H,J＝2.4HZ,7.5HZ)、5.22(ddd,1H,J＝11.4HZ,5.4HZ,9.5HZ)、4.51(dd,1H,J＝12.4HZ)、4.47(d,1H,J＝0.8HZ)、4.21～4.13(m,4H)、4.03(dd,1H)、2.26(ddd,1H,12.8HZ)、2.19(dd,1H)、2.15、2.11、2.03、2.02和1.91(5s,15H)、1.29(t,3H,J＝7.2HZ)。
MS 506(M+1)
实施例5.胞嘧啶核苷-5’-单磷酸-5-乙酰胺基-3,5,-双脱氧-β-D-丙三氧基-D-半乳-2-壬酮吡喃糖酸(CMP-唾液酸)(5)的制备。
将N-乙酰神经氨酸(100mg，0.32毫摩尔)和胞嘧啶核苷-5’三磷酸钠盐(156.3mg，0.32毫摩尔)溶解于包含MgCl2(20mM)的32ml Tris-HCl缓冲液(100mM，pH 8.8)中。向该溶液中添加CMP-Neu5Ac合成酶(5mg，来自脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis))。在37℃下孵育反应混合物2～3小时。同时通过TLC(硅胶，EtOH:1M NH4HCO3＝7:3)监测。用甲醇(50ml)稀释反应混合物并过滤掉。在减压下蒸发滤液至干燥。在Bio Gel P-2树脂(50ml)上层析残余物以提供冻干后作为白色晶体粉末的标题化合物(147mg，75％)。
HPLC分析：
·C-18柱
·移动相：缓冲液A(0.1M磷酸钾缓冲液。补充有8mM四丁基硫酸氢铵，pH5.3)和缓冲液B(70％缓冲液A加30％甲醇，pH5.9)
·梯度条件：
100％缓冲液A 2.5分钟，0～40％缓冲液B 7.5分钟，40～100％缓冲液B 1分钟，100％缓冲液B 4分钟，100～0％缓冲液B 1分钟，随后100％缓冲液A的平衡相4分钟。
·流速：1ml/分钟。
·270nm下U.V检测
1H-nmr(D2O) δ(ppm)
7.87(d,1H,J＝7.6HZ)、6.25(d,1H,J＝7.6HZ)、5.91(d,1H,J＝4.4HZ)、4.26～4.20(m,2H)、4.17～4.10(m,3H)、4.09～3.98(m,2H)、3.90～3.80(m,3H)、3.59～3.40(m,2H)、2.42(dd,1H,J＝4.8,13.2HZ)、1.98(s,3H)、1.60(dt,1H,J＝5.6,12.6HZ)。
MS 635(M2-+Na+)
实施例6.5-乙酰胺基-8,9-邻异亚丙基-神经氨酸乙酯(6)的制备。
向5-乙酰胺基-神经氨酸乙酯(150mg，0.445毫摩尔)的无水DMF(2ml)溶液中添加2,2-二甲氧基丙烷(1ml，8毫摩尔)和Amberlyst 15(50mg)。在60℃下搅拌混合物7小时，然后冷却至室温并过滤。在减压下蒸发滤液至干燥。TLC(硅胶，EA/MeOH＝10:4)指示反应完成。残余物复溶于EA/MeOH＝10/1(1ml)中，然后快速柱层析。合并所需组分并真空蒸发至干燥以提供作为白色形式的标题化合物(135mg，75％)。
1H-nmr(D2O) δ(ppm)
4.28～4.23(m,2H)、4.23～4.11(m,2H)、4.08～3.92(m,2H)、3.96～3.52(m,3H)、2.31(dd,1/3H)、2.23(dd,2/3H)、1.99(s,3H)、1.82(dd,2/3H)、1.70(dd,1/3H)、1.36(s,3H)、1.32(s,3H)、1.25(t,3H)。
MS 428(M+Na)
实施例7：化合物(1)对小气道上皮细胞(SAEC)活力恢复的活性
化合物(1)[式(1)，B＝H，A＝NHCOCH3，R1＝R2＝R3＝R4＝H]
Figure GDA0001355752110000241
实施例8:化合物(1)对正常人支气管/气管上皮细胞(NHBE)活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000242
实施例9.化合物(2)对SAEC活力恢复的活性
化合物(2)[式(2)，R8＝R10＝R11＝R12＝R13＝H，R9＝Na]
Figure GDA0001355752110000251
实施例10:化合物(2)对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000252
实施例11.化合物(3)对SAEC活力恢复的活性
化合物(3)[式(2)，R8＝R10＝R11＝R12＝R13＝H，R9＝C2H5]
Figure GDA0001355752110000261
实施例12:化合物(3)对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000262
实施例13:化合物(4)对SAEC活力恢复的活性
化合物(4)[式(2)，R8＝H，R9＝C2H5，R10＝R11＝R12＝R13＝CH3CO]
Figure GDA0001355752110000271
实施例14:化合物(4)对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000272
实施例15:化合物(5)对SAEC活力恢复的活性
化合物(5)[式(2)，R8＝胞嘧啶核苷单磷酸，R9＝R10＝R11＝R12＝R13＝H]
Figure GDA0001355752110000281
实施例16:化合物(5)对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000282
实施例17:化合物(6)对SAEC活力恢复的活性
化合物(6)[式(2)，R8＝H，R9＝C2H5，R10＝R11＝H，R12和R13＝>C(CH3)2]
Figure GDA0001355752110000283
实施例18.化合物(6)对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000291
实施例19:化合物(7)对SAEC活力恢复的活性
化合物(7)[式(1)，B＝H，A＝NHCOCH3，R1＝R2＝R3＝R4＝COCH3]
Figure GDA0001355752110000292
实施例20:化合物(7)对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000301
实施例21.化合物(8)对SAEC活力恢复的活性
化合物(8)[式(1)，B＝H，A＝NHCOCH3，R1＝H，R2＝R3＝R4＝COCH3]
Figure GDA0001355752110000302
实施例22:化合物(8)对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000311
实施例23:化合物(9)对SAEC活力恢复的活性
化合物(9)[式(1)，A＝H，B＝NHCOCH3，R1＝R2＝R3＝R4＝H]
Figure GDA0001355752110000312
实施例24.化合物(9)对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000313
实施例25.D-葡萄糖对SAEC活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000321
实施例26:D-葡萄糖对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000322
实施例27.化合物(1)在高浓度下对SAEC活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000323
实施例28:化合物(1)在高浓度下对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000324
实施例29:化合物(2)在高浓度下对SAEC活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000331
实施例30:化合物(2)在高浓度下对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000332
实施例31:化合物(9)在高浓度下对SAEC活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000333
实施例32:化合物(9)在高浓度下对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000334
实施例33:化合物(1)(85％)和化合物(9)(15％)的混合物在高浓度下对SAEC活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000341
实施例34:化合物(1)(85％)和化合物(9)(15％)的混合物在高浓度下对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000342
实施例35:化合物(1)(85％)和化合物(9)(15％)的混合物对SAEC活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000343
实施例36.化合物(1)(85％)和化合物(9)(15％)的混合物对NHBE活力恢复的活性
Figure GDA0001355752110000351
实施例37.豚鼠的咳嗽实验[9][10]
雄性豚鼠圈养于围栏内并可以利用水和食物自由采食(ad libitum)。该研究经Bio21研究所动物伦理委员会(Bio21 Institute Animal Ethics Committee)批准。
将24只神志清醒的雄性Hartley豚鼠(500～550g)分成A、B、C三组(对于每组8只动物)，并在第一天经气雾剂用5单位/ml的神经氨酸苷酶(Sigma N2133，冻干粉，X型，150～400单位/mg蛋白质)的水溶液(B组和C组)或仅用盐水(A组)预处理5分钟。然后，在第一、第二和第三天，豚鼠或者口服500mg/kg化合物(1)(C组)或者仅口服水(A组和B组)。在第四天，用0.5M柠檬酸溶液(雾化，暴露10分钟)处理(challenge)所有动物。然后在15分钟的时间内记录咳嗽频率、到第一、第二和第三次咳嗽的时间，以及到第一次擦鼻子(nose rubs)的时间。结果表明化合物(1)有助于修复由神经氨酸苷酶引起的损伤的倾向。
Figure GDA0001355752110000361
Figure GDA0001355752110000362
Figure GDA0001355752110000363
通过相同的实验方案利用化合物(2)代替化合物(1)，得到相似的结果。
在本申请的基础上或要求其优先权可以提出进一步的专利申请。应理解，仅经由实施例提供以下权利要求，并不意于限制在任何此类进一步的申请中可能要求保护的范围。日后可以向权利要求添加或从其中删除特征以便进一步限定或重新限定一个或多个发明。
最后，应理解，在不违背本文概述的本发明精髓的情况下，可以进行各种其它修改和/或改变。
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Claims (10)

1.一种用于非治疗目的的在体外促进受损呼吸细胞的细胞活力恢复的方法，所述方法包括向所述细胞施用有效量的至少一种药物学可接受的化合物的步骤，所述至少一种药物学可接受的化合物加速在呼吸细胞表面上的唾液酸糖缀合物生物合成从而修复唾液酸糖缀合物，所述至少一种药物学可接受的化合物为唾液酸糖缀合物的生物合成途径的药物学可接受的化合物，
其中所述至少一种药物学可接受的化合物选自由式(1)的化合物和式(2)的化合物组成的组，
式(1)具有下式：
Figure FDA0002423629770000011
其中，
B为H，A为NHCOCH3，且R1、R2、R3、和R4各为H；
B为H，A为NHCOCH3，且R1、R2、R3、和R4各为COCH3；或
B为H，A为NHCOCH3，R1为H，且R2、R3、和R4各为COCH3；
和式(2)具有下式
Figure FDA0002423629770000021
其中，
R8、R9、R10、R11、R12、和R13各为H；
R8、R10、R11、R12、和R13各为H，且R9＝Na；
R8、R10、R11、R12、和R13各为H，且R9＝C2H5；
R8为H，R9为C2H5，且R10、R11、R12、和R13各为CH3CO；
R8为胞嘧啶核苷单磷酸，且R9、R10、R11、R12、和R13各为H；或
R8、R10、和R11各为H，R9为C2H5，且R12和R13合并为C(CH3)2。
2.有效量的至少一种药物学可接受的化合物在制备用于治疗病毒性或细菌性感染后的呼吸病症的组合物中的用途，所述至少一种药物学可接受的化合物加速在呼吸细胞表面上的唾液酸糖缀合物生物合成从而修复唾液酸糖缀合物，所述至少一种药物学可接受的化合物为唾液酸糖缀合物的生物合成途径的药物学可接受的化合物，所述呼吸病症选自由咳嗽、急性/慢性支气管炎、慢性阻塞性肺病COPD、囊性纤维化组成的组；
其中所述至少一种药物学可接受的化合物选自由式(1)的化合物和式(2)的化合物组成的组，
式(1)具有下式：
Figure FDA0002423629770000031
其中，
B为H，A为NHCOCH3，且R1、R2、R3、和R4各为H；
B为H，A为NHCOCH3，且R1、R2、R3、和R4各为COCH3；或
B为H，A为NHCOCH3，R1为H，且R2、R3、和R4各为COCH3；
和式(2)具有下式
Figure FDA0002423629770000032
其中，
R8、R9、R10、R11、R12、和R13各为H；
R8、R10、R11、R12、和R13各为H，且R9＝Na；
R8、R10、R11、R12、和R13各为H，且R9＝C2H5；
R8为H，R9为C2H5，且R10、R11、R12、和R13各为CH3CO；
R8为胞嘧啶核苷单磷酸，且R9、R10、R11、R12、和R13各为H；或
R8、R10、和R11各为H，R9为C2H5，且R12和R13合并为C(CH3)2。
3.根据权利要求2所述的用途，其中所述药物学可接受的化合物适于给药的剂量在每天0.1mg/kg至500mg/kg体重的范围内。
4.根据权利要求2或3所述的用途，其中所述药物学可接受的化合物适于给药的剂量在每天0.1mg/kg至50mg/kg体重的范围内。
5.根据权利要求2或3所述的用途，其中所述药物学可接受的化合物适于口服的剂量在1mg/kg/天至500mg/kg/天的范围内。
6.根据权利要求5所述的用途，其中所述药物学可接受的化合物适于给药的剂量在5mg/kg至50mg/kg、每天两到三次持续5至10天的范围内。
7.根据权利要求2或3所述的用途，其中所述药物学可接受的化合物适于注射的剂量在1mg/kg/天至100mg/kg/天的范围内。
8.根据权利要求7所述的用途，其中所述药物学可接受的化合物适于给药的剂量在5mg/kg至50mg/kg、每天两到三次持续5至10天的范围内。
9.根据权利要求2所述的用途，其中所述药物学可接受的化合物适于吸入的剂量在0.01mg/kg/天至5mg/kg/天的范围内。
10.根据权利要求9所述的用途，其中所述药物学可接受的化合物适于给药的剂量在0.1mg/kg至0.5mg/kg、每天一至五次持续5至10天的范围内。
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