CN107095909A - 显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物及其制备方法,该中药提取物包括管花肉苁蓉提取物90份‑150份,管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,刺五加提取物100份‑170份,刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,淫羊藿提取物80份‑110份,淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%,经功能性实验证实,以刺五加苷B1&C含量达标的刺五加提取物与管花肉苁蓉提取物、淫羊藿提取物复配制备的组合物缓解体力疲劳功效能够明显提升,作用甚至优于刺五加苷B&E:能明显延长小鼠负重游泳时间,增加小鼠肝糖原储备量,降低小鼠运动后血清尿素水平,缓解小鼠疲劳,并且其效果优于单独使用管花肉苁蓉提取物。
Description
技术领域
本发明属于中药制备的技术领域,更具体的,本发明涉及一种肉苁蓉提取组合物及其制备方法的技术领域。
背景技术
随着社会经济的快速发展,人们面临的工作压力越来越大,极易产生机体疲劳。机体疲劳是个体活动到一定程度时,组织器官及整个机体工作能力暂时降低的现象,如果机体疲劳长期积累而不能消除,就会发展成为过度疲劳,引起身体某些器官的病变而危害人体的健康。目前,保护机体的免疫机能和预防自由基损伤是当今疲劳研究中的新着眼点,而中医药及天然生物资源应用于抗疲劳显示出良好的效果。
管花肉苁蓉(Cistanchetubulosa(Scheuk)Whight)为列当科植物肉苁蓉属,以干燥带鳞片的肉质茎为正品入药,是常用的补肾壮阳中药,具有补肾益精、润燥的功能,现有添加肉苁蓉用于缓解体力疲劳的保健品中,至少存在两方面的问题:一是保健功效无法保证;二是添加的原料较多。中医认为刺五加(Acanthopanax senticosus)有益气健脾、补肾安神的作用。其药具有祛风湿、壮筋骨、强腰膝、活血化淤之功效,在我国的一些地方被当作强壮药使用。刺五加主要活性成分为多糖、苷类、黄酮类、鞣酸、腺苷、三萜类等。淫羊藿(Epimedium brevicomu Maxim.)为历代常用的补益中药,具有抗氧化、抗衰老、抗炎镇痛、免疫调节、抗菌抗病毒、预防心脑血管疾病、抗辐射、抗肿瘤等多种生理功能。现有发明专利:“一种提高免疫力、缓解体力疲劳、改善性功能的中药复合物”(授权公告号CN102872206B)以玛咖、淫羊藿提取物、红景天提取物、肉苁蓉提取物、刺五加提取物、蝮蛇粉组合制备中药复合物,该组合物与医药上接受的赋形剂、添加剂使用,制备成应用于提高免疫力、抗疲劳、性功能改善的药品、保健品或食品,制成中药复合物的原料较多,质控指标因此增加,不利于生产控制及产品功效保证。因此,亟需一种合适的具有缓解体力疲劳作用的中药组合物。
发明内容
针对现有技术现状的不足及存在的问题,尤其是传统具有缓解体力疲劳作用的中药复合物所需原料较多、质控指标多、功效无法保证的瓶颈问题,本发明提供了显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物及其制备方法,与现有技术相比,该方法通过分别对管花肉苁蓉、刺五加和淫羊藿进行乙醇溶液回流提取,减压浓缩制备提取物,通过制备工艺对管花肉苁蓉提取物、淫羊藿提取物,尤其是刺五加提取物中缓解体力疲劳关键性成分的含量进行控制,配比形成提取组合物,该提取组合物包括管花肉苁蓉提取物90份-150份,刺五加提取物100份-170份,淫羊藿提取物80份-110份。经功能性实验证实,该提取组合物能明显延长小鼠负重游泳时间,增加小鼠肝糖原储备量,降低小鼠运动后血清尿素水平,缓解小鼠疲劳,与对照组比较差异有显著性(P<0.001),并且其效果明显优于单独使用管花肉苁蓉提取物,优于管花肉苁蓉提取物和淫羊藿提取物的组合物,在中药制备领域具有广泛的实用性。
本发明提供的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物,按照重量份比计,包括管花肉苁蓉提取物90份-150份,管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,刺五加提取物100份-170份,刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,淫羊藿提取物80份-110份,淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%。经功能性实验证实,该提取组合物能明显延长小鼠负重游泳时间,增加小鼠肝糖原储备量,降低小鼠运动后血清尿素水平,缓解小鼠疲劳,与对照组比较差异有显著性(P<0.001),并且其效果优于单独使用管花肉苁蓉提取物,优于管花肉苁蓉提取物和淫羊藿提取物的组合物。
优选的,本发明提供的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物,按照重量份比计,包括管花肉苁蓉提取物120份,管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,刺五加提取物135份,刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,淫羊藿提取物95份,淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%。
本发明提供的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物,制备方法具体采用以下技术步骤:
(1)管花肉苁蓉提取物的制备:取管花肉苁蓉,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入管花肉苁蓉10-12倍体积份数的70%-80%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并两次提取液,在真空度0.07MPa-0.08MPa,温度60℃-65℃下减压浓缩得到浸膏,所得浸膏在真空度0.07MPa-0.08MPa,温度60℃-65℃下真空干燥至水分低于5%后粉碎,得到管花肉苁蓉提取物,经检测管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,备用。
(2)刺五加提取物的制备:取刺五加,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材10-14倍体积份数的40%-45%乙醇溶液,回流提2次,每次1h,过滤,合并2次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.05g/cm3-1.08g/cm3,在进风温度150℃-170℃,排风温度75℃-85℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到刺五加提取物,经检测刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,备用。
(3)淫羊藿提取物的制备:取淫羊藿,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材10-14倍体积份数的70%-80%乙醇溶液,回流提取3次,每次1.5h,过滤,合并三次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.05g/cm3-1.08g/cm3,在进风温度150℃-170℃,排风温度75℃-85℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到淫羊藿提取物,经检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%,备用。
(4)提取组合物的制备:将步骤(1)得到的管花肉苁蓉提取物、步骤(2)得到的刺五加提取物和步骤(3)得到的淫羊藿提取物按照管花肉苁蓉提取物90份-150份,刺五加提取物100份-170份,淫羊藿提取物80份-110份配比,按照常规技术制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
本发明采用的管花肉苁蓉、40目干燥机、乙醇溶液、刺五加、和淫羊藿均可通过公共渠道购买或定制。
使用本发明提供的技术方案可以达到如下有益效果:
(1)本发明提供的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物制备方法,分别对管花肉苁蓉、刺五加和淫羊藿进行乙醇溶液回流提取,减压浓缩,制备提取物,通过制备工艺对管花肉苁蓉提取物中的苯乙醇总苷,淫羊藿提取物中淫羊藿苷,更重要的,对刺五加提取物中的刺五加苷B1&C,的含量进行控制,优选了组合物组成及其有效成分、配比,进而制备出显著缓解体力疲劳的提取组合物。
(2)经功能性实验证实,本发明提供的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物能明显延长小鼠负重游泳时间,增加小鼠肝糖原储备量,降低小鼠运动后血清尿素水平,缓解小鼠疲劳,与对照组比较差异有显著性(P<0.001),并且其效果优于单独使用管花肉苁蓉提取物,优于管花肉苁蓉提取物和淫羊藿提取物的组合物,在中药制备领域具有广泛的实用性。
(3)本发明显著提升组合物缓解体力疲劳作用的关键成分是刺五加苷B1&C,药理试验证实刺五加苷B1&C对提升组合物的缓解体力疲劳作用有关键性作用:组合物筛选药效试验结果显示,组合物中刺五加苷B1&C的含量等于或大于本申请提供的提取组合物中对于刺五加苷B1&C含量的控制标准,相比同类组合物就具有显著的缓解体力疲劳功效,结果证实刺五加苷B1&C含量符合一定要求的刺五加提取物的添加是明显提升组合物缓解体力疲劳功效的关键。
(4)虽然在刺五加苷B1&C存在的条件下,组合物的功效相比同类组合物显示出较大优势,但是药理试验结果还显示刺五加苷B1&C含量达到本发明要求,同时苯乙醇总苷、淫羊藿苷含量亦达到本发明要求时,组合物的功效最佳,即这种配伍方式达到了明显的协同增效作用。因此,要达到本发明所述更佳的保健功效除了控制刺五加苷B1&C的含量,还需控制组合物中苯乙醇总苷、淫羊藿苷含量,二者都是保证保健功效的关键。
具体实施方式
下面结合以下实施例,对本发明的具体实施方式作进一步详细描述,但本发明不限于下述实施例。
本发明采用的管花肉苁蓉、40目干燥机、乙醇溶液、刺五加和淫羊藿均可通过公共渠道购买或定制。
本发明中选用的所有材料、试剂和仪器都为本领域熟知的,但不限制本发明的实施,其他本领域熟知的一些试剂和设备都可适用于本发明以下实施方式的实施。
实施例一:显著缓解体力疲劳作用的提取组合物
本发明提供的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物,包括管花肉苁蓉提取物90份-150份,管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,刺五加提取物100份-170份,刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,淫羊藿提取物80份-110份,淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%。
优选的,本发明提供的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物,包括管花肉苁蓉提取物120份,管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,刺五加提取物135份,刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,淫羊藿提取物95g,淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%。
实施例二:显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物的制备
本发明提供的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物,制备方法具体采用以下技术步骤:
(1)管花肉苁蓉提取物的制备:取管花肉苁蓉,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入管花肉苁蓉10-12倍体积份数的70%-80%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并两次提取液,在真空度0.07MPa-0.08MPa,温度60℃-65℃下减压浓缩得到浸膏,所得浸膏在真空度0.07MPa-0.08MPa,温度60℃-65℃下真空干燥至水分低于5%后粉碎,得到管花肉苁蓉提取物,经检测管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,备用。
(2)刺五加提取物的制备:取刺五加,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材10-14倍体积份数的40%-45%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并2次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.05g/cm3-1.08g/cm3,在进风温度150℃-170℃,排风温度75℃-85℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到刺五加提取物,经检测刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,备用。
(3)淫羊藿提取物的制备:取淫羊藿,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材10-14倍体积份数的70%-80%乙醇溶液,回流提取3次,每次1.5h,过滤,合并三次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.05g/cm3-1.08g/cm3,在进风温度150℃-170℃,排风温度75℃-85℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到淫羊藿提取物,经检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%,备用。
(4)提取组合物的制备:将步骤(1)得到的管花肉苁蓉提取物、步骤(2)得到的刺五加提取物和步骤(3)得到的淫羊藿提取物按照管花肉苁蓉提取物90份-150份,刺五加提取物100份-170份,淫羊藿提取物80份-110份配比,按照常规技术制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
实施例三:
取管花肉苁蓉,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入管花肉苁蓉10倍体积份数的70%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并两次提取液,在真空度0.07MPa,温度60℃下减压浓缩得到浸膏,所得浸膏在真空度0.07MPa,温度60℃下真空干燥至水分低于5%后粉碎,得到管花肉苁蓉提取物,经检测管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,备用;取刺五加,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材10-14倍体积份数的40%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并2次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.05g/cm3,在进风温度150℃,排风温度75℃-85℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到刺五加提取物,经检测刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,备用;取淫羊藿,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材10-14倍体积份数的70%乙醇溶液,回流提取3次,每次1.5h,过滤,合并三次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.05g/cm3,在进风温度150℃,排风温度75℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到淫羊藿提取物,经检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%,备用;将上述管花肉苁蓉提取物、刺五加提取物和淫羊藿提取物按照管花肉苁蓉提取物90g,刺五加提取物100g,淫羊藿提取物80g配比,按照常规技术制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
实施例四:
取管花肉苁蓉,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入管花肉苁蓉12倍体积份数的80%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并两次提取液,在真空度0.08MPa,温度65℃下减压浓缩得到浸膏,所得浸膏在真空度0.08MPa,温度65℃下真空干燥至水分低于5%后粉碎,得到管花肉苁蓉提取物,经检测管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,备用;取刺五加,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材14倍体积份数的442%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并2次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.08g/cm3,在进风温度170℃,排风温度85℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到刺五加提取物,经检测刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,备用;取淫羊藿,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材14倍体积份数的80%乙醇溶液,回流提取3次,每次1.5h,过滤,合并三次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.08g/cm3,在进风温度170℃,排风温度85℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到淫羊藿提取物,经检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%,备用;将上述管花肉苁蓉提取物、刺五加提取物和淫羊藿提取物按照管花肉苁蓉提取物150g,刺五加提取物170g,淫羊藿提取物110g配比,按照常规技术制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
实施例五:
取管花肉苁蓉,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入管花肉苁蓉11倍体积份数的80%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并两次提取液,在真空度0.07MPa,温度62℃下减压浓缩得到浸膏,所得浸膏在真空度0.08MPa,温度63℃下真空干燥至水分低于5%后粉碎,得到管花肉苁蓉提取物,经检测管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,备用;取刺五加,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材13倍体积份数的45%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并2次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.06g/cm3,在进风温度165℃,排风温度76℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到刺五加提取物,经检测刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,备用;取淫羊藿,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材12倍体积份数的75%乙醇溶液,回流提取3次,每次1.5h,过滤,合并三次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.07g/cm3,在进风温度160℃,排风温度82℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到淫羊藿提取物,经检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%,备用;将上述管花肉苁蓉提取物、刺五加提取物和淫羊藿提取物按照管花肉苁蓉提取物145g,刺五加提取物160g,淫羊藿提取物90g配比,按照常规技术制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
实施例六:
取管花肉苁蓉,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入管花肉苁蓉10倍体积份数的75%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并两次提取液,在真空度0.075MPa,温度64℃下减压浓缩得到浸膏,所得浸膏在真空度0.07MPa,温度61℃下真空干燥至水分低于5%后粉碎,得到管花肉苁蓉提取物,经检测管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,备用;取刺五加,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材12倍体积份数的44%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并2次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.07g/cm3,在进风温度160℃,排风温度79℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到刺五加提取物,经检测刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,备用;取淫羊藿,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材11倍体积份数的80%乙醇溶液,回流提取3次,每次1.5h,过滤,合并三次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.08g/cm3,在进风温度166℃,排风温度80℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到淫羊藿提取物,经检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%,备用;将上述管花肉苁蓉提取物、刺五加提取物和淫羊藿提取物按照管花肉苁蓉提取物100g,刺五加提取物100g,淫羊藿提取物80g配比,按照常规技术制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
实施例七:
取管花肉苁蓉,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入管花肉苁蓉12倍体积份数的70%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并两次提取液,在真空度0.08MPa,温度63℃下减压浓缩得到浸膏,所得浸膏在真空度0.075MPa,温度64℃下真空干燥至水分低于5%后粉碎,得到管花肉苁蓉提取物,经检测管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,备用;取刺五加,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材11倍体积份数的45%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并2次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.05g/cm3,在进风温度155℃,排风温度83℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到刺五加提取物,经检测刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,备用;取淫羊藿,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材10倍体积份数的70%乙醇溶液,回流提取3次,每次1.5h,过滤,合并三次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.06g/cm3,在进风温度152℃,排风温度77℃,喷雾压力0.4MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到淫羊藿提取物,经检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%,备用;将上述管花肉苁蓉提取物、刺五加提取物和淫羊藿提取物按照管花肉苁蓉提取物120g,刺五加提取物135g,淫羊藿提取物95g配比,按照常规技术制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
实施例八:显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物的筛选
选择昆明种小鼠50只,随机分5组,每组10只。以标志性成分含量不同的提取物按相同配比分别制备各组合物,设置组合物1组(肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷45.1%、淫羊藿提取物中淫羊藿苷8.7%,刺五加提取物中刺五加苷B1&C0.9%)、组合物2组(肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷27.4%、淫羊藿提取物中淫羊藿苷5.1%,刺五加提取物中刺五加苷B&E1.07%(市场购买刺五加提取物,未检测到刺五加苷B1&C))、组合物3组(肉苁蓉、淫羊藿、刺五加肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷45.3%、淫羊藿提取物中淫羊藿苷8.8%,刺五加提取物中刺五加苷B1&C0.33%)、组合物4组(肉苁蓉、淫羊藿、刺五加、肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷27.0%、淫羊藿提取物中淫羊藿苷5.0%,刺五加提取物中刺五加苷B1&C0.9%)剂量均为1.000g/kg·bw/d,空白对照组以无菌水代替受试物。灌胃量0.2ml/10g·bw,连续灌胃14d,进行小鼠爬杆试验及血清CK及ATP测定。
表1:各组样品对小鼠爬杆试验及血清CK、ATP的影响(n=10)
组别 | 爬杆时间(min) | ATP(nmol/L) | CK(U/L) |
空白对照组 | 6.96±1.71 | 197.11±8.27 | 114.55±4.28 |
组合物1组 | 10.84±4.84** | 218.83±8.11** | 118.45±4.37* |
组合物2组 | 7.09±2.87 | 205.30±7.46* | 117.03±6.75 |
组合物3组 | 8.03±1.87* | 207.06±10.43* | 117.57±6.54 |
组合物4组 | 7.90±1.62* | 207.14±6.21* | 118.02±6.22* |
由表1可知,组合物1对小鼠爬杆时间及血清CK、ATP的影响最大,其可显著增加小鼠爬杆时间(P<0.01),显著提高小鼠血清CK和ATP值(P<0.01)。组合物4对小鼠爬杆时间及血清CK、ATP的影响次之,增加小鼠爬杆时间、血清CK、ATP值都有明显提升(P<0.05)。组合物2仅可提高小鼠血清ATP(P<0.05),组合物3可提高小鼠爬杆时间、血清ATP(P<0.05)。
综合小鼠爬杆试验及小鼠血清CK、ATP测定结果,组合物1组即本发明提取组合物组对小鼠得缓解体力疲劳作用最显著(P<0.01)。分析4种组合物的组成及保健功效,组合物4优于组合物2,二者功效成分的区别仅在于,组合物4中含刺五加苷B1&C且含量达到本发明标准,而组合物2含刺五加苷B&E不含刺五加苷B1&C;组合物4也优于组合物3,二者功效成分的区别在于,组合物4中刺五加苷B1&C含量达到本发明标准,其余指标含量均低于本发明所述标准,组合物2中刺五加苷B1&C低于本发明要求,但其余标准均达到本发明要求。综合组合物4与组合物2、组合物4与组合物3的成分与功效差异,认为含有刺五加苷B1&C的刺五加提取物对提升组合物缓解体力疲劳功效的有明显作用,其对组合物缓解体力疲劳作用的提升甚至优于市售刺五加提取物(含刺五加苷B&E,未检测到刺五加苷B1&C),实验结果表明刺五加苷B1&C是明显提升组合物缓解体力疲劳功效的关键性成分。此外,组合物1的功效又优于组合物4,二者的区别在于,组合物1各有效成分含量达到本发明要求,而组合物4的中仅有刺五加苷B1&C含量达到本发明要求,即仅有刺五加苷B1&C而其余成分含量不够高同样会减弱组合物缓解体力疲劳功效,所以只有当苯乙醇总苷、淫羊藿苷含量均达到本发明所述标准要求,同时又保证刺五加苷B1&C含量时,组合物的缓解体力疲劳功效才会更显著(P<0.01)。本发明通过对组合物中各指标成分的控制及对配比的控制实现了提取组合物缓解体力疲劳功效的明显提升。
实施例九:显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物的功能性试验
选择SPF级ICR种雄性小鼠120只,设管花肉苁蓉提取物组(1组)、管花肉苁蓉和淫羊藿提取物组合物组(2组)、本发明提取组合物(3组),剂量均为1.000g/kg·bw/d,溶剂对照组以无菌水代替受试物,灌胃量0.2ml/10g·bw,连续灌胃30d,体重18g-22g。将动物分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三大组,每大组40只动物,分别进行负重游泳试验、血清尿素和肝糖原测定。
表2 各组对小鼠负重游泳时间的影响
组别 | 游泳时间s |
溶剂对照组 | 307.5±69.1 |
1组 | 341.2±81.9 |
2组 | 380.2±78.5 |
3组 | 478.4±91.5** |
由表2可知,三组均一定程度上延长了小鼠负重游泳时间,其中3组小鼠负重游泳时间与对照组比较延长,差异具有显著性(P<0.001)。
表3 各组对小鼠血清尿素的影响
组别 | 血清尿素mmol/L |
溶剂对照组 | 9.00±1.22 |
1组 | 8.58±1.02 |
2组 | 7.84±1.23 |
3组 | 6.09±1.03** |
由表3可知,三组血清尿素水平均有下降,其中3组小鼠血清尿素低于对照组(P<0.001)。
表4 各组对小鼠肝糖原的影响
组别 | 肝糖原mg/g肝组织 |
溶剂对照组 | 20.263±3.775 |
1组 | 24.014±4.937 |
2组 | 25.582±5.962 |
3组 | 33.260±5.708** |
由表4可知,三组肝糖原均有提升,其中3组小鼠血清尿素高于对照组(P<0.001)。
通过表2至表4的实验结果分析,经口灌胃给予小鼠不同组合物,结果显示本发明提供的提取组合物(管花肉苁蓉提取物120份,管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,刺五加提取物135份,刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,淫羊藿提取物95g,淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%)能明显延长小鼠的负重游泳时间,增加小鼠肝糖原储备量,降低小鼠运动后血清尿素水平,与对照组比较差异有显著性(P<0.001),其效果优于管花肉苁蓉提取物组,优于管花肉苁蓉和淫羊藿提取物组合物组,即本发明提供的提取组合物具有缓解体力疲劳作用,在中药制备领域具有实际应用价值。
采用上述实施例二提供的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物制备方法,通过分别对管花肉苁蓉、刺五加和淫羊藿进行乙醇溶液回流提取,减压浓缩,制备提取物,对管花肉苁蓉提取物中的苯乙醇总苷,淫羊藿提取物中淫羊藿苷,尤其是刺五加提取物中的刺五加苷B1&C的含量进行控制,优选了组合物组成及其有效成分、配比,进而制备出显著缓解体力疲劳的提取组合物;制备的提取组合物包括管花肉苁蓉提取物90份-150份,刺五加提取物100份-170份,淫羊藿提取物80份-110份。经功能性实验证实,该提取组合物能明显延长小鼠负重游泳时间,增加小鼠肝糖原储备量,降低小鼠运动后血清尿素水平,缓解小鼠疲劳,与对照组比较差异有显著性(P<0.001),并且其效果优于单独使用管花肉苁蓉提取物,优于管花肉苁蓉提取物和淫羊藿提取物的组合物,在中药制备领域具有广泛的实用性。
如上所述,即可较好地实现本发明,上述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述,并非对本发明的范围进行限定,在不脱离本发明设计精神的前提下,本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进,均应落入本发明确定的保护范围内。
Claims (3)
1.显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物,其特征在于,按照重量份比计,包括管花肉苁蓉提取物90份-150份,管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,刺五加提取物100份-170份,刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,淫羊藿提取物80份-110份,淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%。
2.如权利要求1所述的显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物,其特征在于,按照重量份比计,所述的管花肉苁蓉提取物120份,管花肉苁蓉提取物中苯乙醇总苷>40.0%,刺五加提取物135份,刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,淫羊藿提取物95份,淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%。
3.显著缓解体力疲劳作用的肉苁蓉提取组合物的制备方法,其特征在于,具体采用以下技术步骤:
(1)管花肉苁蓉提取物的制备:取管花肉苁蓉,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入管花肉苁蓉10-12倍体积份数的70%-80%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并两次提取液,在真空度0.07MPa-0.08MPa,温度60℃-65℃下减压浓缩得到浸膏,所得浸膏在真空度0.07MPa-0.08MPa,温度60℃-65℃下真空干燥至水分低于5%后粉碎,得到管花肉苁蓉提取物,经检测管花肉苁蓉提取物中松果菊苷>15.0%、麦角甾苷>4.0%、苯乙醇总苷>40.0%,备用;
(2)刺五加提取物的制备:取刺五加,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材10-14倍体积份数的40%-45%乙醇溶液,回流提取2次,每次1h,过滤,合并2次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.05g/cm3-1.08g/cm3,在进风温度150℃-170℃,排风温度75℃-85℃,喷雾压力0.4 MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到刺五加提取物,经检测刺五加提取物中刺五加苷B1&C>0.8%,备用;
(3)淫羊藿提取物的制备:取淫羊藿,除去杂质及霉变等净选后经40目干燥机干燥粉碎,投料,加入药材10-14倍体积份数的70%-80%乙醇溶液,回流提取3次,每次1.5h,过滤,合并三次提取液,在真空度0.08MPa,温度60℃下减压浓缩至相对密度1.05g/cm3-1.08g/cm3,在进风温度150℃-170℃,排风温度75℃-85℃,喷雾压力0.4 MPa下喷雾干燥至水分低于5%后粉碎,得到淫羊藿提取物,经检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷>8.0%,备用;
(4)提取组合物的制备:将步骤(1)得到的管花肉苁蓉提取物、步骤(2)得到的刺五加提取物和步骤(3)得到的淫羊藿提取物按照管花肉苁蓉提取物90份-150份,刺五加提取物100份-170份,淫羊藿提取物80份-110份配比,按照常规技术制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
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