CN107075541B - 具有改善的稳定性的药物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种用于控释药物递送的可注射组合物及其制造方法,其中该组合物包括:乳酸类聚合物,其重均分子量介于5,000及50,000道尔顿之间、酸值小于3mgKOH/g、且乳酸类聚合物中的残余丙交酯单体含量小于约0.3重量%;药用的有机溶剂;以及生物活性物质或其盐,其分子结构内含有氨基酸丝氨酸,其能够与丙交酯单体反应而形成共轭体;并且其中该组合物减少该共轭体的形成。
Description
技术领域
本发明的领域涉及用以缓释及控释递送生物活性物质的递送系统。更具体而言,本发明涉及利用生物可降解聚合物达成生物活性物质缓释递送的递送系统的组合物,以及该组合物的制造方法。
发明背景
生物兼容性及生物可降解聚合物已被大量作为药物递送载体,以提供生物活性物质的持续释放或推迟释放。递送系统以各种可注射储存形式存在,包括液体形式、悬浮液、固体植入物、微球、微胶囊及微粒。
利用生物兼容性及生物可降解聚合物的缓释递送系统特别有利于半衰期短的高药效药物。此类递送系统可减少给药频率及疼痛、提高患者顺从性、改善病患便利性并降低成本。对于许多肽物质而言,特别是激素,会需要将药物以控制的速率在一段长时间内持续递送,因此控释递送系统非常理想。可将生物活性物质并入生物可降解及生物兼容性聚合物基质中以提供此类系统。有一种作法是将聚合物溶解于有机溶剂中,之后将有机溶剂移除而使其与生物活性物质混合,其中生物活性物质制成微粒、微球、微胶囊、微粒剂或固体植入物的形式。生物活性物质被并入固体聚合物基质中。已经有些产品是利用微粒及固体植入物形式的生物可降解聚合物而被成功开发,例如Lupron Depot、Zoladex、Trelstar、Sandostatin LAR等等。尽管这些产品看来有效,但其仍有缺点及限制,例如微粒所需的大体积悬浮流体,或是固体植入物需透过手术植入。这些产品会对病患造成不便。此外,重复生产无菌产品的制程很复杂,会增加制造成本。因此,期望能有一种容易制造及使用的组合物。
另一种作法是将生物可降解聚合物及生物活性物质溶解于生物兼容性有机溶剂中以提供液体或流动性组合物。当此种液体组合物注射至体内,溶剂会分散至周围的水性环境内,而聚合物会形成固体或凝胶储存,让生物活性物质由此释放一段长时间。以下美国专利是此领域中具有代表性者,且并入本文中作参考:8,173,148、8,313,763、6,565,874、6,528,080、RE37,950、6,461,631、6,395,293、6,355,657、6,261,583、6,143,314、5,990,194、5,945,115、5,792,469、5,780,044、5,759,563、5,744,153、5,739,176、5,736,152、5,733,950、5,702,716、5,681,873、5,599,552、5,487,897、5,340,849、5,324,519、5,278,202、5,278,201、4,938,763。虽然已取得某些成功,但仍有大量生物活性物质无法利用此作法进行有效递送,因此这样的方法仍无法令人十分满意。
聚酯是目前生物可降解缓释药物递送系统中最受欢迎的聚合物之一。聚酯及其相关材料,包括聚酸酐及聚碳酸酯,是公知的且已被用于医药用途上许多年。举例而言,聚(丙交酯-共-乙交酯)(poly(lactide-co-glycolide))或聚丙交酯(polylactide)是治疗晚期前列腺癌用的Lupron Depot及Eligard产品中使用的高分子材料。此类聚酯具有生物兼容性且可经由一般生化途径降解,例如水解及酶解,而产生天然存在的代谢产物。聚酯的生物降解性有利于作为缓释药物递送载体,但此易降解特性也存在问题。
许多生物活性物质通常包含一或多个亲核性基团,例如胺基,而会造成组合物的生物可降解聚合物与生物活性物质间发生交互作用。当生物活性物质与生物可降解聚合物结合时,生物活性物质的亲核性基团会与聚合物的酯键进行反应。这样的反应会对组合物的物理和/或化学特性产生不良影响,而让缓释及控释递送系统丧失优势。过去曾有利用酸添加剂、稳定化成分等等来试图解决此问题[参见美国专利8,173,148及8,343,513]。
除了聚合物的降解外,另一方面是生物活性物质在药物递送系统中的稳定性,这点也十分重要。在剂型制造过程、保存及体内释放期间,会产生大量与生物活性物质相关的杂质。举例而言,如美国专利6,565,874的实例6公开的,丙交酯对乙交酯的摩尔比率为75/25的聚(DL-丙交酯-共-乙交酯)(Birmingham Polymer,Inc.)被溶解于NMP中以产生聚合物含量为45重量%的溶液。将此溶液与醋酸亮丙立德(leuprolide acetate)结合及混合以获得可流动且可注射的粘性制剂。如本申请案所示,在此类制剂中意外地观察到在短时间内出现大量的亮丙立德相关物质或杂质,这会对药品的质量产生不良影响。更出人意料的是,主要产生的杂质并非如现有技术所述是由生物活性物质与聚(DL-丙交酯-共-乙交酯)间的反应所形成,而是由生物活性物质与聚合物的残余或未反应的丙交酯单体直接反应而得。
根据ICH指南[http://www.fda.gov/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/ucm073389.pdf],于新药品中任何杂质(单项杂质)若超过0.1%都应揭示。基于最高每日剂量,任何杂质若超过0.1%、0.2%、0.5%或1%均应指明。若于新药品中杂质高于特定质控限度水平,则应指明那些杂质并充分测试其不良影响与生物安全性。因此,任何杂质的产生若超过了对应的质控限度都会造成是否符合法规的问题。表征及质控这些杂质的不良影响与生物安全性可能非常昂贵且耗时。
美国专利8,343,513揭示了数种消除或减少微球内杂质的方法。其指出:“欲消除或减少微球内杂质,以下总则性事项须谨记在心:(i)PLGA微球内的丙交酯含量越高,则相关物质的数量就会越低,且由100%PLA制得的微球会具有最少量的相关物质;(ii)PLGA分子量越高,则相关物质也越多;PLGA上的目标用量越高,则相关物质的含量也越高;以及(iii)PLGA中可萃取寡聚物的含量越低,则相关物质的含量会越高;疏水性PLGA(封端PLGA)产生的相关物质比亲水性PLGA(自由酸端基)来的多”[参见美国专利8,343,513,第11栏,第二段]。其整体教导是采用具有酸端基的低分子量聚酯搭配大量额外添加的低pKa酸添加剂或寡聚物。酸添加剂的例子包括乳酸及乙醇酸,其为构成PLGA的单体。过量的酸添加剂对于在非药用的溶剂(例如二氯甲烷及甲醇)中短时间内(24小时)减少杂质生成的帮助有限。此外,酸性添加剂会造成分散相的低pH值。众所皆知低pH会导致组织刺激。因此,此种分散相可用于制造微球,但不适合透过直接注射方式进行病患给药。此外,8,343,513号专利指出在包含醋酸亮丙立德与PLGA50:50的微球中所观察到的杂质是亮丙立德的精氨酸基团与PLGA片段的加成物[参见美国专利8,343,513的图16与第43及44栏]。这些微粒是利用聚合物溶解于非药用的溶剂(例如二氯甲烷及甲醇)所得溶液制备而得。这些杂质不代表溶液中所产生的全部杂质。部分杂质可能在微粒制程期间被萃取至水相内而无法在微球中侦测。此外,微球内发现的杂质是亮丙立德与聚合物而不是与丙交酯单体间的反应产物[参见Murty SB,Thanoo BC,Wei Q,DeLuca PP.Int J Pharm.2005 Jun 13;297(1-2):50-61.用负载肽的聚合物微球的杂质形成研究第一部分.体内评价(Impurity formation studieswith peptide-loaded polymeric microspheres Part I.In vivo evaluation)]。出人意料的是,本发明所产生且描述的主要杂质并未在美国专利8,343,513及其他现有技术中提到。
美国专利8,951,973揭示一种调节释放并增加微球内肽稳定性的方法。其描述了藉由改变肽上的整体电荷来改变肽的等电点,这可以减缓肽从微球破裂而出并改善稳定性。然而,这必须改变肽序列中的氨基酸方可达成,且需制造新的化学物质。而此新的化学物质需要有额外的工作来确认是否能达到相同的效用及安全性。
因此,有需要开发出控释组合物,以预防或降低生物活性物质相关的杂质生成与生物可降解聚合物过早降解的问题,并使其得以直接注射至病患以于原位形成缓释储存。
发明概述
发明人意外地发现,在具有溶解于有机溶剂内的亲核性生物活性物质的可注射生物可降解聚合物制剂中,很快就生成大量的杂质,即使是在聚合物的酸值高于5mgKOH/g时。这些杂质是透过亲核性生物活性物质与生物可降解聚合物的未反应或残余单体间的反应而形成。在溶液中,亲核性生物活性物质与聚合物/单体会紧密接触,创造出利于进行会产生杂质/共轭体的反应的条件,视所选择的溶剂而定。
本发明显示可获得稳定性优于现有技术的聚合物组合物。现有技术中在组合物内形成的共轭体可被有效减少或预防。本发明提供一种稳定、可注射、生物可降解的聚合物组合物,用于亲核性生物活性物质的缓释递送系统,以及此聚合物组合物的制造方法。
本发明的组合物包括a)亲核性生物活性物质;b)药用的溶剂;以及c)合适的生物可降解聚合物,当三者被配制在一起时,可降低或预防杂质或相关物质的生成。该药物组合物可为粘性或非粘性液体、凝胶或乳膏,其可利用注射器进行注射。该药物组合物更为稳定,且可预先充填至单一注射器中,而提供一种可实时使用的系统。
本发明的生物活性物质含有亲核性基团,其能够催化酯类降解并与乳酸类聚合物、寡聚物或单体反应。生物活性物质可以肽、前药或其盐的形式存在。组合物内产生的杂质是生物活性物质与乳酸类聚合物的构造单元(例如丙交酯单体及寡聚物)间的加成物。
根据本发明,药用的有机溶剂可选自于由N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、2-吡咯烷酮、甲氧基聚乙二醇、烷氧基聚乙二醇、聚乙二醇酯、四氢呋喃聚乙二醇醚(glycofurol)、甘油缩甲醛、乙酸甲酯、乙酸乙酯、丁酮、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMAC)、四氢呋喃(THF)、己内酰胺、甲基癸基亚砜、苯甲醇、苯甲酸苄酯、苯甲酸乙酯、三醋精、二醋精、三丁精、柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、柠檬酸乙酰基三乙酯、柠檬酸乙酰基三丁酯、甘油三乙酯、磷酸三乙酯、邻苯二甲酸二乙酯、酒石酸二乙酯、乳酸乙酯、碳酸亚丙酯、碳酸亚乙酯、丁内酯及1-十二基氮杂环-庚-2-酮与其组合所组成的组。
根据本发明,生物可降解聚合物可为线型聚合物或支化聚合物或两者的混合物。该聚合物优选为乳酸类聚合物。乳酸类聚合物包括乳酸或丙交酯单体的均聚物(聚乳酸或聚丙交酯,PLA),以及乳酸(或丙交酯)与其他单体的共聚物(例如乙醇酸、乙交酯(聚(丙交酯-共-乙交酯),PLG或PLGA)及类似物)。聚合物的重均分子量通常为5,000至50,000。聚合物理想上的酸值为小于3mgKOH/g,优选小于2mgKOH/g,更优选小于1mgKOH/g。
根据本发明,乳酸类生物可降解聚合物可溶解于溶剂中。该聚合物之后可沉淀至乳酸类聚合物不可溶但单体及寡聚物可溶的抗溶剂中。所获得的沉淀聚合物理想上的未反应或残余丙交酯单体含量为0.3%或更低,优选为0.2%或更低,更优选为0.1%或更低。寡聚物中分子量小于5000的部分为20重量%或更低,优选为10%或更低,更优选为5%或更低。此聚合物在与亲核性生物活性物质及药用的有机溶剂一起配制时会形成稳定的溶液,此溶液可被预充填至单一注射器内。
根据本发明,用于控释药物递送的可注射组合物可利用一种方法制备,该方法包括:将乳酸类聚合物与药用的有机溶剂及生物活性物质或其盐结合,其中该乳酸类聚合物的重均分子量介于5,000及50,000道尔顿之间、酸值小于3mgKOH/g、残余丙交酯单体含量小于约0.3重量%,该生物活性物质可与丙交酯单体反应而形成共轭体,条件是该组合物的制造过程中并未添加酸添加剂。
附图简述
图1.在在NMP溶液中的60%PLA-100DL2E中的醋酸亮丙立德在37℃下一小时后的色谱图。
图2.LAAce 60%PLA-100DL2E在NMP中在时间0的色谱图。
图3.LAAce 60%PLA-100DL2E在DCM中在时间0的色谱图。
图4.LAAce 60%PLA-100DL2E在DMSO中在时间0的色谱图。
图5.LAAce 60%PLA-100DL2E在NMP中在37℃下1小时后的色谱图。
图6.LAAce 60%PLA-100DL2E在DMSO中在37℃下1小时后的色谱图。
图7.LAAce 60%PLA-100DL2E在DCM中在37℃下1小时后的色谱图。
图8.FMOC-SER-OH在含有25%D,L-丙交酯的NMP中在25℃下3小时后的色谱图。
图9.FMOC-SER-OH在含有25%D,L-丙交酯的NMP中在25℃下1天后的色谱图。
图10.FMOC-ARG-OH在含有25%D,L-丙交酯的NMP中在25℃下3小时后的色谱图。
图11.FMOC-ARG-OH在含有25%D,L-丙交酯的NMP中在25℃下1天后的色谱图。
图12.LAMS在含有10%L-丙交酯的NMP中的色谱图,其显示由单体产生的杂质。
图13.LAAce 57.5%PLA-0.1在NMP中的色谱图。
图14.LAAce 57.5%PLA-0.2在NMP中的色谱图。
图15.LAAce 57.5%PLA-0.3在NMP中的色谱图。
图16.LAAce 57.5%PLA-0.5在NMP中的色谱图。
图17.LAAce 57.5%PLA-1.0在NMP中的色谱图。
图18.LAAce 57.5%PLA-3.0在NMP中的色谱图。
图19.LAAce 57.5%PLA-0.1在NMP中在37℃下24小时后的色谱图。
图20.LAAce 57.5%PLA-0.2在NMP中在37℃下24小时后的色谱图。
图21.LAAce 57.5%PLA-0.3在NMP中在37℃下24小时后的色谱图。
图22.LAAce 57.5%PLA-0.5在NMP中在37℃下24小时后的色谱图。
图23.LAAce 57.5%PLA-1.0在NMP中在37℃下24小时后的色谱图。
图24.LAAce 57.5%PLA-3.0在NMP中在37℃下24小时后的色谱图。
图25.LAMS从含有纯化或未纯化聚合物的制剂中的体外释放。
发明详述
本发明提供一种用于形成生物活性物质的缓释递送系统的聚合物组合物以及该组合物的制造方法。本发明的聚合物组合物包括:a)生物活性物质或其盐;b)有机溶剂;以及c)乳酸类生物可降解均聚物或共聚物。本发明的生物活性物质或其盐通常具有亲核性且可和丙交酯单体或乳酸类寡聚物反应而形成共价共轭体或加成物。本发明的有机溶剂可为极性质子性或非质子性液体。本发明的乳酸类聚合物在聚合物组成结构中含有至少一种乳酸、乳酸酯或盐或丙交酯的单体单元。本发明的聚合物组合物可减少或预防生物活性物质和单体或寡聚物反应而在聚合物组合物中形成相关杂质。
本发明的聚合物组合物的形式可为微粒、微球、微胶囊、微粒剂或固体植入物,其藉由移除有机溶剂而于体外制备。这些剂型可利用已知方法进行给药,例如透过注射或外科手术。另一方面,优选的是,其形式可为溶液、乳液、悬浮液、糊剂、乳膏或凝胶,其如同流体般移动而可利用针、套管、管、腹腔管、探针或其他递送装置进行注射。当给药至个体时,这样的可注射组合物原位形成储存(depot),而让生物活性物质可由此受控释放持续达一段时间,视组合物而定。储存或植入物可为固体、凝胶、糊剂、半固体或粘性液体。通过生物可降解聚合物及其他成分的选择,可将生物活性物质的缓释时间控制在数周至一年。
本发明的聚合物组合物也可包括非聚合化合物和/或添加剂以控制释放,例如释放速率调控剂、造孔剂、增塑剂、有机溶剂、封装生物活性物质用的封装剂、热胶凝剂、突释(burst)效应缓和材料、水凝胶、多羟基材料、溶浸剂、组织输送剂或其他类似添加剂或其任一种组合。
冠词及量词“一”于本文中代表“一或超过一”以及“至少一”。
如本文中所定义,用语“控释递送”指生物活性物质在给药后于体内递送一段理想的延长的时间,优选从至少几天至一年。
用语“生物活性物质”意欲包括任何一种具有诊断和/或治疗特性的材料,包括但不限于有机小分子、无机小分子、大分子、肽、寡肽、蛋白质或酶、核苷酸、核苷、寡核苷酸、寡核苷、多核苷酸、聚核酸或其他构成此类化学化合物的类似分子。治疗特性的非限制性实例为抗代谢、抗真菌、抗炎症、抗肿瘤、抗感染、抗生素、营养素、激动剂及拮抗剂性质。
本发明的生物活性物质的形式可为自由分子、自由分子的有机或无机盐,或其可与载剂复合或共价结合,其可为前药或可为多形态生物活性物质(生物活性物质的多个单元复合或共价结合在一起)。
本发明的生物活性物质含有亲核性基团,其可催化酯类降解并与乳酸类聚合物、寡聚物或单体反应。“亲核性基团”可视为是一种化学物种,其提供电子对给亲电子剂而形成化学键,涉及寻求原子核或极性分子的正电端的反应。所有具有自由电子对或至少一个π键的分子或离子都是亲核性基团。由于亲核性基团会贡献电子,所以定义上也属于路易斯碱。亲核性基团包括氮基团,例如胺基团、脒基团、亚胺基团、氮杂芳族基团、氮杂环基团、任何其他含氮基团或其任一种组合,以作为一或多个亲核性基团。一或多个亲核性氮基团可为碱性自由分子形式或为有机或无机酸的盐形式。亲核性基团也可包括氧基团,例如氢氧阴离子、醇、烷氧阴离子、过氧化氢及羧酸根阴离子,及硫基团,例如硫化氢及其盐、硫醇(RSH)、硫醇阴离子(RS-)、硫羧酸(RC(O)-S-)的阴离子及二硫代碳酸酯(RO-C(S)-S-)与二硫代氨基甲酸酯(R2N-C(S)-S-)的阴离子。
本发明的生物活性物质可为脂族、芳族、杂芳族、环族、脂环族、杂环族有机化合物,任选包含一或多个羧酸、酯、内酯、酸酐、碳酸酯、氨基甲酸酯、脲、酰胺、内酰胺、亚胺、脒、烯胺、酰亚胺、肟、羰基、羟基、烯醇、胺、醚、硫醚、磺酰基、烃硫基、磺酸、硫酰胺、硫醇、硫醇酸、硫酯、硫脲、缩醛、缩酮、卤化物、环氧化物、硝基、亚硝基、黄原酸酯、炔胺基或其任一种组合,其中任选取代基与生物活性物质的亲核性基团兼容。
于本文中,用语“肽”广义上包括聚(氨基酸),其通常泛指“肽”、“寡肽”及“多肽”或“蛋白质”,这些名词于本文中可交替使用。此用语也包括生物活性肽类似物、衍生物、酰化衍生物、糖基化衍生物、聚乙二醇化衍生物、融合蛋白质及类似物。用语“肽”意欲包含任何具有诊断和/或治疗特性的生物活性肽,包括但不限于抗代谢、抗真菌、抗炎症、抗肿瘤、抗感染、抗生素、营养素、激动剂及拮抗剂特性。此用语也包括肽的合成类似物、具有碱官能性的非天然氨基酸或任何其他导入碱度的形式。本发明的肽含有至少一个亲核性基团。用语“至少一个”代表该肽也可包含复数个亲核性基团。
具体而言,本发明的生物活性肽可包含但不限于催产素、升压素、促肾上腺皮质激素(ACTH)、表皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、泌乳素、促黄体激素、促黄体激素释放激素(LHRH)、LHRH激动剂、LHRH拮抗剂、生长激素(包括人、猪、牛)、生长激素释放因子、胰岛素、红血球生成素(包括具有红血球生成活性的所有蛋白质)、生长抑素、高血糖素、白介素(包括IL-2、IL-11、IL-12等)、干扰素α、干扰素β、干扰素γ、胃泌素、四肽胃泌素、五肽胃泌素、尿抑胃素、分泌素、降钙素、脑啡肽、内啡肽、血管收缩素、促甲状腺素释放激素(TRH)、肿瘤坏死因子(TNF)、副甲状腺激素(PTH)、神经生长因子(NGF)、颗粒性白血球集落刺激因子(G-CSF)、颗粒性白血球-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、肝素酶、血管内皮生长因子(VEG-F)、骨成型蛋白(BMP)、hANP、类高血糖素肽(GLP-1)、艾塞那肽(exenatide)、肽YY(PYY)、肾素、缓激肽、枯草杆菌素、多粘菌素、黏菌素、泰罗雪定(tyrocidine)、短杆菌素、环孢菌素、酶、细胞因子、抗体、疫苗、抗生素、糖蛋白、促滤泡素、京都啡肽、促吞噬激素(taftsin)、促胸腺生成素、胸腺素、胸腺刺激素、胸腺体液因子、血清胸腺因子、集落刺激因子、促胃动素、铃蟾肽、强啡肽(dinorphin)、神经加压素、蓝肽、尿激酶、激肽释放酶、P物质类似物及拮抗剂、第二型血管收缩素、第七及第九凝血因子、短杆菌肽、黑色素细胞刺激素、甲状腺素释放激素、甲状腺刺激素、肠促胰酶素、缩胆囊素、人类胎盘催乳激素、人类绒毛膜促性腺激素、蛋白质合成刺激肽、胃抑肽、舒血管肠肽及其合成类似物、修饰物及药理活性片段。
本文所使用的优选肽在分子结构中含有氨基酸丝氨酸。本文所使用的优选肽包括LHRH及LHRH激动剂,例如亮丙瑞林(leuprorelin)、布舍瑞林(buserelin)、性腺释素(gonadorelin)、德舍瑞林(deslorelin)、夫替瑞林(fertirelin)、组胺瑞林(histrelin)、黄体瑞林(lutrelin)、戈舍瑞林(goserelin)、那法瑞林(nafarelin)、曲普瑞林(triptorelin)、西曲瑞克(cetrorelix)、恩夫韦地(enfuvirtide)、胸腺素α1(enfuvirtideα1)、阿巴瑞克(abarelix)。本文所使用的优选肽还包括例如生长抑素(somatostatin)、生长抑素八肽(octreotide)、帕瑞肽(pasireotide)、SOM230及兰瑞肽(lanreotide)。
本发明的生物活性物还包括核苷酸、核苷、寡核苷酸、寡核苷及聚核酸等具有亲核特性的生物活性化合物。
本发明使用的生物活性物质可为其本身或其药用的盐类。用于形成生物活性物质的药用的盐类的酸优选具有小于5的pKa。适用于本发明的酸可选自以下物质所组成的组,但不以此为限:盐酸、氢溴酸、硝酸、铬酸、硫酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、三氯乙酸、二氯乙酸、溴乙酸、氯乙酸、氰乙酸、2-氯丙酸、2-侧氧丁酸、2-氯丁酸、4-氰丁酸、扑酸(pamoic acid)、高氯酸、磷酸、碘化氢、乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、L-抗坏血酸、L-天门冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰胺基苯甲酸、(+)-莰二酸、(+)-樟脑-10-磺酸、羊脂酸(癸酸)、羊油酸(己酸)、亚羊脂酸(辛酸)、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己胺磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基-乙磺酸、蚁酸、延胡索酸、半乳酸(galactic acid)、龙胆酸、D-葡萄糖甲酸、D-葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、2-氧-戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、异丁酸、DL-乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、DL-杏仁酸、粘液酸(muric acid)、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟碱酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、扑酸(embonic acid)、丙酸、(-)-L-焦谷氨酸、水杨酸、4-胺基-水杨酸、癸二酸、硬酯酸、琥珀酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对-甲苯磺酸、十一烯酸。适合的酸的选择为本领域技术人员所熟知。
生物活性物质的药用的盐类可利用简单的酸碱滴定或中和法制得。生物活性物质的药用的盐类可在其合成及纯化期间制备。另一方面,这些盐类可由生物活性物质的游离碱形式制备而得。将游离碱溶解于适合的液体介质中。将此生物活性物质的溶液与酸的溶液混合以利用适当方法(如过滤、沉淀、冻干)移除溶剂而形成有利的盐类。若生物活性物质是以市售盐形式存在,则可利用简单的盐类交换法或离子交换法(如冻干、沉淀或其他本领域已知方法)来获得不同的盐类。举例而言,将醋酸亮丙立德溶解于适合的液体介质(如水)。将此肽溶液与强酸水溶液混合,例如甲磺酸。当醋酸亮丙立德与强酸(例如甲磺酸)溶于水时,此肽倾向与甲磺酸离子作用,而由较强的甲磺酸取代较弱的醋酸。可在真空下将溶剂及释放出来的醋酸(或其他弱但具挥发性的羧酸)移除。因此,将混合物溶液冷冻干燥以移除水及较弱的酸而形成理想的盐类。若生物活性物质在低pH环境下不稳定,则可透过极低浓度的酸的大量透析来制备生物活性物质的药用的盐类。
本发明的聚合物组合物的生物活性物质含量范围为0.01至40重量%。一般来说,最佳药物用量取决于期望的释放时间以及生物活性物质的药效。对于药效较弱且释放时间较长的生物活性物质而言,显然可能需要较高的用量。
用语“有机溶剂”意欲包含任何一种能溶解乳酸类聚合物的有机溶剂。可用于本发明的聚合物组合物的典型溶剂包括水、甲醇、乙醇、二甲亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二烷、四氢呋喃(THF)、乙腈、二氯甲烷、二氯乙烷、四氯化碳、氯仿、低烷基醚(例如乙醚及甲基乙基醚)、己烷、环己烷、苯、丙酮、乙酸乙酯及类似物。碳酸与芳基醇的酯,例如苯甲酸苄酯;C4至C10烷基醇;C2至C6烷酸C1至C6烷酯;碳酸与烷基醇的酯,例如碳酸亚丙酯、碳酸亚乙酯及碳酸二甲酯、单、双、三羧酸的烷基酯,例如2-乙氧基乙酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸甲酯、丁酸乙酯、丙二酸二乙酯、葡糖酸二乙酯(diethyl glutonate)、柠檬酸三丁酯、琥珀酸二乙酯、三丁精、肉豆蔻酸异丙酯、己二酸二甲酯、琥珀酸二甲酯、草酸二甲酯、柠檬酸二甲酯、柠檬酸三乙酯、柠檬酸乙酰基三丁酯、三醋精;烷酮,例如丁酮;以及其他羰基、醚、羧酸酯、酰胺与含羟基液体有机化合物,其于水中具有部分溶解度。就生物兼容性及药用性而言,碳酸亚丙酯、乙酸乙酯、柠檬酸三乙酯、肉豆蔻酸异丙酯及三醋精是优选的。如何在特定系统中选择适合的溶剂可由本领域技术人员参见本文后知悉。
本发明的有机溶剂优选具有生物兼容性及药用性。用语“生物兼容”代表该有机溶剂从组合物分散或扩散时不会造成严重组织刺激或植入处周遭坏死。用语“药用”代表该有机溶剂可用于药品中以治疗有需要的人类或动物。
本发明的有机溶剂可混溶或可分散于水性流体或体液内。用语“可分散”代表该溶剂可部分溶解或混溶于水中。单一溶剂或溶剂的混合物于水中的可溶性或混溶性可大于0.1重量%。优选地,该溶剂于水中的可溶性或混溶性大于3重量%。更优选地,该溶剂于水中的可溶性或混溶性大于7重量%。适合的有机溶剂应该能够扩散至体液内,而使液体组合物凝聚或凝固。可使用单一种该溶剂和/或该溶剂的混合物。可利用简单的实验来判断溶剂是否合适。
药用的有机溶剂的实例包括但不限于N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、2-吡咯烷酮、甲氧基聚乙二醇、烷氧基聚乙二醇、聚乙二醇酯、四氢呋喃聚乙二醇醚、甘油缩甲醛、乙酸甲酯、乙酸乙酯、丁酮、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMAC)、四氢呋喃(THF)、己内酰胺、甲基癸基亚砜、苯甲醇、苯甲酸苄酯、苯甲酸乙酯、三醋精、二醋精、三丁精、柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、柠檬酸乙酰基三乙酯、柠檬酸乙酰基三丁酯、甘油三乙酯、磷酸三乙酯、邻苯二甲酸二乙酯、酒石酸二乙酯、乳酸乙酯、碳酸亚丙酯、碳酸亚乙酯、丁内酯及1-十二基氮杂环-庚-2-酮以及其组合。优选的有机溶剂包括N-甲基-2-吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、二甲亚砜、二甲基乙酰胺(DMAC)、乳酸乙酯、四氢呋喃聚乙二醇醚、甘油缩甲醛、苯甲醇、苯甲酸苄酯、甲氧基聚乙二醇、烷氧基聚乙二醇、聚乙二醇酯以及亚异丙二醇。
生物可降解聚合物在各种有机溶剂中的溶解度会因为聚合物的特性及其对于溶剂的兼容性而有所不同。因此,同样的聚合物在不同溶剂中的溶解情形不会相同。举例而言,PLGA在N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)中的溶解度远高于在三醋精中。然而,当PLGA的NMP溶液接触到水溶液时,NMP因为水混溶性很高所以会很快散逸而形成固体聚合物基质。溶剂的高扩散速率可能会让固体植入物很快形成,然而,却也会导致较高的初始突释。当PLGA的三醋精溶液接触到水溶液时,三醋精因为水混溶性较低所以会缓慢散逸。溶剂的低扩散速率可能需要较长的时间让粘性液体转变成固体基质。可以有溶剂扩散和聚合物凝聚以包覆肽物质的最佳平衡。因此,将不同溶剂结合以获得理想的递送系统是有利的。可将与水混溶性较高及较低的溶剂结合以改善聚合物的溶解度、调整组合物的粘度、使扩散速率优化并减少初始突释。
本发明的聚合物组合物通常包含10重量%至99重量%的有机溶剂。本发明聚合物组合物的粘度取决于聚合物的分子量及使用的有机溶剂。组合物中聚合物的浓度优选小于70重量%。
“聚合物”是一种大的分子或大分子,其由许多重复子单元所组成。聚合物的范围可从熟知的合成塑料(例如聚苯乙烯)到天然的生物聚合物(例如DNA及蛋白质,其为生物结构与功能的基础)。天然和合成聚合物都是由许多小分子(又称为单体)藉由聚合反应而形成。聚合反应是指将许多小分子或单体结合成为共价键合的链或网的过程。聚合物的大分子质量相对于小分子化合物提供了独特的物理性质,包括韧性、粘弹性以及形成玻璃和半晶质结构而非晶体的趋势。
用语“生物可降解”指材料逐渐发生原位分解、溶解、水解和/或腐蚀。一般而言,本文的“生物可降解聚合物”是指主要可经由水解和/或酶解而可原位水解和/或生物腐蚀的聚合物。
用语“生物可降解聚合物”于本文中包括任何一种可于体内使用的生物兼容性和/或生物可降解的合成及天然聚合物。一般而言,本发明的生物可降解聚合物可为线型聚合物或支化或星状聚合物,或是线型聚合物及支化和/或星状聚合物的混合物。本发明的生物可降解聚合物优选为乳酸类聚合物。于本文中,“乳酸类聚合物(lactate-based polymer)”是指聚合物中含有乳酸盐或酯的聚合物。用语“乳酸盐或酯(lactate)”于本文中指作为制备乳酸类聚合物的试剂的乳酸或其盐(乳酸盐),或指作为经由酯键并入乳酸类聚合物分子链中的残基的那些部分。在描述用于制备乳酸类聚合物的单体时,用语“乳酸盐或酯”于本文中亦指乳酸盐或酯的环状二聚酯(丙交酯)。丙交酯单体是由乳酸(2-羟基丙酸)制成的天然可再生化合物。乳酸的产物丙交酯具有两种立体异构态(L(+)乳酸及D(-)乳酸),且以三种立体异构态存在:L-丙交酯、D-丙交酯及内消旋型丙交酯。
丙交酯经由两步骤合成:先进行乳酸寡聚化,之后再进行环化。若原来的酸为L-乳酸,则产生L-丙交酯;若原来的酸为D-乳酸,则产生D-丙交酯。内消旋型丙交酯则是由L-乳酸及D-乳酸的组合物制得。丙交酯经由聚合反应成为PLA必须采用有效率的纯化步骤以得到正确的纯度[Savioli Lopes M.,Jardini A.,Maciel Filho R.,2014,用于生物医药应用的通过开环聚合的聚(乳酸)的合成与表征(Synthesis and characterizations ofpoly(lactic acid)by ringopening polymerization for biomedical applications),Chemical Engineering Transactions,38,331-336DOI:10.3303/CET1438056]。
应了解的是,当提到用语“乳酸”、“乳酸盐或酯”或“丙交酯”时,其均涵盖化合物的任一种及所有手性形式。因此,“乳酸”包括(R)-乳酸及(S)-乳酸或D-乳酸、L-乳酸、D,L-乳酸或其任一种组合;“丙交酯”包括D-丙交酯、D,L-丙交酯、L,D-丙交酯、L-丙交酯、(R,R)-丙交酯、(S,S)-丙交酯及内消旋型丙交酯或其任一种组合。
乳酸类聚合物包含任一种含有乳酸盐或酯、乳酸或丙交酯单体的聚合物/共聚物。可利用缩聚反应(PC)、开环聚合反应(ROP)及其他方法(链伸长、接枝)来制备乳酸类聚合物。不同种类的聚合物和共聚物可利用ROP由D,L-丙交酯、L-丙交酯、D-丙交酯、乙交酯(GA)、ε-己内酯(CL)、碳酸三乙酯(TMC)、1,5-二氧杂庚-2-酮(DXO)及其他环状类似物制得。
本发明的乳酸类聚合物包括乳酸或丙交酯单体的均聚物(聚乳酸或聚丙交酯,PLA),以及乳酸(或丙交酯)与其他单体(例如乙醇酸(或乙交酯))的共聚物(聚(丙交酯-共-乙交酯),PLG或PLGA,及其类似物)。乳酸类聚合物可具有相同端基,即所有端基均相同,例如酯或羟基或羧酸。乳酸类聚合物可具有酯、羟基和/或羧酸的混合端基。乳酸类聚合物可具有包含端羟基的二醇核心,例如美国专利8,470,359的实例所揭示的。类似地,乳酸类聚合物也可具有包含端羟基的三醇或多元醇核心,例如葡萄糖。乳酸类聚合物可具有一个端基为酯,而另一端具有羟基或羧酸基。乳酸类聚合物也可具有一端羟基,而另一端具有羧酸或酯,反之亦然。
本发明的乳酸类聚合物的重均分子量通常为5,000至50,000。本发明的乳酸类聚合物可为市售产品或由已知方法制备而得的聚合物。举例而言,已知的聚合方法包括乳酸的缩合聚合反应及与其他单体(例如乙醇酸)的共聚合反应、利用催化剂(例如路易斯酸或金属盐,如二乙锌、三乙铝、辛酸亚锡)进行丙交酯的开环聚合反应,以及与其他环状单体(例如乙交酯)的共聚合反应;于羧基被保护的羟基羧酸衍生物进一步存在下进行丙交酯的开环聚合反应(例如国际专利申请案公开WO00/35990);丙交酯的开环聚合反应,其中在加热条件下将催化剂添加至丙交酯以引发开环聚合反应(例如J.Med.Chem.,16,897(1973));以及丙交酯与乙交酯和/或其他单体的共聚合反应的其他方法。
聚合反应可藉由本体聚合来进行,其中将丙交酯与其他共聚单体熔化,或藉由溶液聚合来进行,其中将丙交酯与其他共聚单体溶解于适合的溶剂中。溶液聚合反应中用来溶解丙交酯的溶剂包括但不限于芳族烃(例如苯、甲苯、二甲苯及类似物)、十氢萘、二甲基甲酰胺及类似物。
聚合物分子量会决定许多物性,因此非常重要。一些例子包括由液体过渡至蜡至橡胶至固体的温度,以及机械性质,例如刚性、强度、粘弹性、韧性及粘性。针对特定的用途选择具有适当分子量的适当聚合物是很重要的。
用语“重均分子量,Mw”及“数均分子量,Mn”对于本领域技术人员是已知的(参见http://www.chem.agilent.com/Library/technicaloverviews/Public/5990-7890EN.pdf)。用语“多分散性指数,PDI”于本文中定义为聚合物的重均分子量除以聚合物的数均分子量(PDI=Mw/Mn)。已知多分散性指数可用于描述聚合物的分子量分布。PDI代表着聚合物的均匀性。各分子具有大致相同的分子量的聚合物被称为单分散聚合物。对于这些分子而言,MW=MN,因此PDI为1。分子的分子量范围较大的聚合物被称为多分散聚合物。对于这些聚合物而言,MW>MN,因此其PDI大于1。PDI越高,则聚合物的分子量分布越广。本发明的乳酸类聚合物的PDI应小于2.5,优选小于2.0,更优选小于1.8。
可对本发明的乳酸类聚合物进行再沉淀。可将约10至40重量%的乳酸类聚合物(重均分子量为5,000至50,000)添加至可将其溶解的溶剂中。溶剂可包括例如氯仿、二氯甲烷、甲苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯、四氢呋喃、丙酮、乙腈、N-甲基-2-吡咯烷酮、DMSO及N,N-二甲基甲酰胺。之后可将含有本发明的乳酸类聚合物的有机溶液沉淀至抗溶剂,其中本发明的乳酸类聚合物不溶于该抗溶剂。抗溶剂包括但不限于醇类(如甲醇及乙醇)、短链醚类(如乙醚)、脂族烃(如己烷)和水。乳酸类聚合物的单体及小寡聚物仍可溶于抗溶剂中,因此会留在溶液中而不会沉淀。
可使乳酸类聚合物沉淀的抗溶剂用量通常为乳酸类聚合物溶液的溶剂的0.1至10倍重量,优选为0.2至5倍重量。举例而言,若将20公克的本发明乳酸类聚合物溶解于100g的丙酮中,则将丙酮重量0.1至10倍的抗溶剂(例如水)用于乳酸类聚合物溶液中以沉淀聚合物。
沉淀程序可由以下方法之一进行:1)将溶于有机溶剂的乳酸类聚合物溶液一次性加入抗溶剂中;2)将乳酸类聚合物溶液逐滴加入抗溶剂中;3)将抗溶剂一次性加入乳酸类聚合物溶液中;4)将抗溶剂逐滴加入乳酸类聚合物溶液中,以及类似作法。
本发明的乳酸类聚合物可利用超临界流体萃取法(SFE)进行纯化。SFE是一种使用超临界流体作为萃取溶剂而将一种成分(萃取剂)从另一种成分(基质)分离的方法。通常是从固体基质进行萃取,但也可从液体进行萃取。SFE利用超临界状态的流体,其由特定流体组合物的压力及温度界定。每一种流体材料都有被称为“临界点”的压力及温度的特性组合,且一旦超出这些参数值,则流体将呈现超临界态。用于超临界流体萃取的流体或溶剂可为单一化合物或为化合物的混合物。流体成分对本领域技术人员而言是已知且可轻易取得的,以选择适合的溶剂及共溶剂来纯化本发明的乳酸类聚合物。
本发明的乳酸类聚合物也包括嵌段共聚物,例如A-B-A嵌段共聚物、B-A-B嵌段共聚物和/或A-B嵌段共聚物和/或支化共聚物。在优选的嵌段共聚物中,A嵌段包括乳酸类聚合物,而B嵌段包括选自聚乙交酯、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚酸酐、聚原酸酯、聚醚酯、聚己内酯、聚酯酰胺、聚(ε-己内酯)、聚(羟丁酸)、及其共混物与共聚物的聚合物。B嵌段也可为聚乙二醇或单官能衍生化聚乙二醇,例如甲氧基聚乙二醇。某些这类组合可形成可接受的热可逆性凝胶。
根据本发明,用于控释药物递送的聚合物组合物为亲核性药物与聚合物溶于溶剂中的均匀溶液。本文所述的杂质或生物活性物质相关物质为生物活性物质与乳酸类聚合物构造单元(例如乳酸、乳酸盐或酯、丙交酯单体及寡聚物)的加成物。若使用亲核性生物活性物质及聚合物的均匀溶液,则杂质问题更为常见。在溶液中,亲核性生物活性物质与聚合物一起形成有利的条件,让生物活性物质与聚合物/寡聚物/单体因为生物活性物质与聚合物/寡聚物/单体间的紧密接触而可进行交互作用/反应。
生物活性物质相关物质可利用HPLC分析进行侦测。如美国专利8,343,513所载(第43及44栏、表35及图16),在利用溶剂萃取法制备的PLGA(RG503H)微球中,通过HPLC及HPLC-MS侦测到4种亮丙立德相关杂质。微球是从由醋酸亮丙立德、PLGA(RG503H)、二氯甲烷(DCM)及甲醇所组成的分散相制备而得。两种溶剂都有毒性且不适合人体使用。在本发明一个实施例中发现,在药用的溶剂中,例如N-甲基吡咯烷酮(NMP)及二甲亚砜(DMSO),会产生比毒性溶剂(例如DCM)中更多的生物活性物质相关杂质。
经发现,美国专利8,343,513中利用HPLC及HPLC-MS侦测到的4种亮丙立德相关杂质全部都是因为亮丙立德的精氨酸残基与聚合物片段进行反应而形成。在本发明一个实施例中,当丙交酯单体与精氨酸或丝氨酸混合并溶解于药用的溶剂N-甲基吡咯烷酮(NMP)中时,出人意料的是,利用HPLC可观察到相当不同的杂质型态。经发现,丝氨酸对于丙交酯单体的反应性比精氨酸更高。当醋酸亮丙立德与PLGA的NMP溶液混合时,HPLC侦测到两种主要的亮丙立德相关杂质。将HPLC发现的亮丙立德相关物质以ESI-MS/MS进行分析,以获得其片段离子特性。基于MS/MS数据,在4丝氨酸有观察到144Da加成。由此可知,相较于亮丙立德的MS片段,这两种杂质含有相同的MW且应被修饰在4丝氨酸。这两种杂质为亮丙立德的丝氨酸与丙交酯单体反应所形成的亮丙立德-丙交酯共轭体。两个主要共轭体为[Pyr-His-Trp-(Ser-D-丙交酯)-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHEt]及[Pyr-His-Trp-(Ser-L-丙交酯)-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHEt](Pyr=L-焦谷氨酰基),且并未如美国专利8,343,513所述般被侦测到。这代表着丙交酯单体的存在对亮丙立德的稳定性有不良影响。
更出人意料的是,在这些含有PLA的聚合物组合物中采用具有高酸值的低分子量聚合物(MW 11k,酸值12mgKOH/g)并未防止这些杂质的形成及聚合物分子量减少。事实上,亮丙立德-丙交酯共轭体在酸值较高的制剂中形成得更快。此外,若在这些聚合物组合物中采用酸值为5mgKOH/g的聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA 5050),可发现溶液中的丙交酯单体含量越高将会形成越多杂质。这些发现并无法从美国专利8,343,513的内容中预期。对比美国专利8,343,513的教导,寡聚物的存在并未减少反而增加了整体杂质的生成。
美国专利8,343,513进一步揭示为了减少杂质产生,必须使用具有高酸值的低分子量聚合物并使用大量的低pKa酸添加剂或寡聚物。此种酸性分散相并不适合人体肠外使用,因为低pH会造成组织刺激。在本发明另一个实施例中,当具有过量甲磺酸的甲磺酸生长抑素八肽(盐溶液的pH为2.4)溶解于外加有丙交酯单体的药用的溶剂时,会产生出乎意料的大量杂质,且该肽会极不稳定。事实上,酸过量的溶液所产生的杂质比未过量者更多。
本发明出乎意料且令人吃惊地发现,杂质的生成可藉由以下作法而减少或预防:(1)使用低残余丙交酯单体含量的乳酸类聚合物;(2)使用低可萃取寡聚物的乳酸类聚合物;(3)使用低酸值的乳酸类聚合物;以及(4)避免使用任何酸添加剂。
根据本发明,乳酸类聚合物的重均分子量为5,000至50,000、5,000至45,000、5,000至40,000、5,000至35,000、5,000至30,000、5,000至25,000、5,000至20,000、5,000至15,000、5,000至12,000、10,000至40,000、12,000至35,000或15,000至30,000道尔顿。
本发明的乳酸类聚合物的残余或未反应丙交酯含量小于0.3%,优选小于0.2%,更优选小于0.1%。
本发明的乳酸类聚合物中,MW小于5000的寡聚物部分少于20重量%,优选少于15重量%,优选少于10重量%,最优选少于5重量%。本发明的乳酸类聚合物中,MW小于1000的寡聚物部分少于5重量%,优选少于3重量%,更优选少于2重量%,最优选少于1重量%。
本发明乳酸类聚合物的多分散性从1.1至2.5。优选地,本发明乳酸类聚合物的多分散性为至少2.0或更低。更优选地,本发明乳酸类聚合物的多分散性为至少1.8或更低。
此外,乳酸类聚合物的“酸值”是另一个会影响杂质生成的重要特性。聚合物的酸值是中和一克聚合物中存在的酸所需的氢氧化钾“毫克”量。具有酸端基的聚合物会有某些酸值。低分子量聚合物具有较多酸端基,且具有较高的酸值。聚合物中的可萃取寡聚物酸也会贡献酸值。通常,对于具有酸端基的聚合物来说,酸值与分子量有关,更与数均分子量有关。本发明乳酸类聚合物的酸值为0至30mgKOH/g。本发明乳酸类聚合物的酸值可小于20,优选小于10,更优选小于3,最优选小于2。
本发明的药物组合物可含有5重量%至75重量%范围的乳酸类聚合物。本发明药物组合物的粘度取决于聚合物分子量和所使用的有机溶剂。通常,若是使用相同溶剂,则聚合物的分子量和浓度越高,粘度就越大。优选地,组合物中聚合物的浓度小于70重量%。
本发明中优选采用乳酸类聚合物,例如聚乳酸,以及乳酸与乙醇酸的共聚物(PLGA),包括聚(D,L-丙交酯-乙交酯)共聚物及聚(L-丙交酯-乙交酯)共聚物。此热塑性聚酯中,乳酸对乙醇酸的单体比例介于约50∶50至约100∶0,且重均分子量介于约5,000至约50,000。生物可降解热塑性聚酯可用本领域已知的方法制备,例如缩聚及开环聚合反应(例如美国专利第4,443,340、5,242,910、5,310,865号,其全部并入本文作参考)。也可用本领域已知的方法对生物可降解聚合物进行纯化,以移除残余单体与寡聚物,例如溶解及再沉淀聚合物(例如美国专利第4,810,775、5,585,460号,其全部并入本文作参考)。聚(DL-丙交酯-共-乙交酯)的末端基团可为羟基、羧基或酯,取决于聚合方法和端基修饰方式。适合的聚合物可包括单官能醇类或多元醇残基。单官能醇类的例子有甲醇、乙醇或1-十二醇。多元醇可为二醇、三醇、四醇、五醇和六醇,包括乙二醇、1,6-己二醇、聚乙二醇、甘油、糖类、葡萄糖、蔗糖、还原糖,例如山梨醇,及类似物。许多适合的PLGA可从市场上取得,且特定组成的PLGA可根据现有技术轻易制备。
组合物中存在的生物可降解聚合物的种类、分子量及数量可以影响生物活性物质从控释植入物释放的时间长短。为了达成控释植入物的理想特性,组合物中存在的生物可降解聚合物的种类、分子量及数量的选择可藉由简单的实验进行确认。
在本发明一个优选实施例中,聚合物组合物可用于配制甲磺酸亮丙立德的控释递送系统。于此实施例中,乳酸类聚合物优选为聚(D,L-丙交酯-乙交酯)共聚物,其于聚合物链中含有75%或更多的丙交酯、羟基末端基团及月桂酸酯末端;其可占组合物重量的约30%至约65%;且其平均分子量可为约5,000至约50,000。
在本发明另一优选实施例中,聚合物组合物可用于配制甲磺酸亮丙立德的控释递送系统。于此实施例中,乳酸类聚合物优选可为聚(DL-丙交酯-乙交酯)共聚物,其于聚合物链中含有75%或更多的丙交酯、两个羟基末端基团;其可占组合物重量的约30%至约65%;且其平均分子量可为约5,000至约50,000。
在本发明又一优选实施例中,组合物的乳酸类生物可降解聚合物具有0.2%或更少的残余丙交酯含量,且可和甲磺酸亮丙立德一起配制。在此实施例中,生物可降解聚合物优选可为聚(丙交酯-共-乙交酯)或100/0聚(DL-丙交酯),且可包含或不含羧酸末端基团;其可占组合物重量的约10%至约65%;且其平均分子量可为约5,000至约50,000。若以药用的有机溶剂(例如NMP)进行配制,经由丝氨酸位置所形成的亮丙立德-丙交酯共轭体少于5%,优选少于2%,更优选少于1%,且最优选少于0.5%。
一方面,本发明提供一种稳定化的可注射生物可降解聚合物组合物,可用于形成经济、实用且有效的控释递送系统,其包含:a)生物活性物质或其盐;b)药用的有机溶剂;c)乳酸类生物可降解均聚物或共聚物。本发明的生物活性物质或其盐通常具有亲核性,且可和丙交酯单体或乳酸类寡聚物反应以形成共价共轭体或加成物。优选地,聚合物组合物可被注射,且可被包装在试剂盒内,此试剂盒包含将该组合物充填至注射器内成为可随时使用的组态的步骤。试剂盒中的组合物在一段合理时间内均十分稳定,优选为至少一年,以于受控制的保存条件下达到适当的货架期。此组合物优选注射至个体中以于原位形成植入物,而治疗有效量的生物活性物质可由此处释放一段理想的较长时间。
本发明另一优选实施例提供一种用于控释药物递送的可注射组合物的制造方法,包括:将乳酸类聚合物与药用的有机溶剂及生物活性物质或其盐结合,其中该乳酸类聚合物的重均分子量介于5,000及50,000道尔顿之间、酸值小于3mgKOH/g、残余丙交酯单体小于约0.3重量%,该生物活性物质可与丙交酯单体反应而形成共轭体,条件是该组合物的制造过程中并未添加酸添加剂。其中,本文所定义的酸添加剂并非为存在于乳酸类聚合物中的酸或经由乳酸类聚合物降解所衍生的酸。酸添加剂是在乳酸类聚合物之外需要添加至组合物的材料。
一方面,乳酸类聚合物的酸值优选小于2mgKOH/g,更优选小于1mgKOH/g。
另一方面,乳酸类聚合物中的残余丙交酯单体小于约0.3重量%,优选小于0.2重量%,更优选小于0.1重量%。
再一方面,乳酸类聚合物中分子量为1000或更低的寡聚物的含量为2重量%或更少。
实施例
以下实施例说明本发明的组合物。这些实施例并非限制本发明,而是用来教导如何制造有用的控释药物递送组合物。
实施例1:在NMP中的PLA聚合物溶液中的醋酸亮丙立德
制备并评估类似于美国专利6,565,874的实施例6的制剂。将重均分子量为14,000且残余丙交酯单体含量为3.2重量%的聚(DL-丙交酯)(100DL 2E,Evonik)溶解于N-甲基吡咯烷酮(NMP)中,以获得60重量%的聚合物在NMP中的溶液。接着,将61.8mg的醋酸亮丙立德(99.5%纯度)与690.3mg的聚合物溶液结合并混合以得到液体制剂。将此制剂储存于37℃下一小时并以HPLC进行分析。
将约10-20mg制剂的一等分试样加入1.5mL离心管以进行分析。将3mL的MeOH与7mL的ACN的混合物(溶液A)取333μL加入前述制剂等分试样,旋转试管以溶解聚合物。之后取667μL稳定性缓冲液(6mL的三乙胺(TEA)与3mL的磷酸加入1公升的水,pH为3.0)加入,采用Lab-Line Titer板式摇动器以速度设定值10将溶液混合10分钟。添加0.5mL的溶液至HPLC试样瓶以分析样品,以可以达到约1mg/mL浓度的亮丙立德并进行测量。利用梯度反相UPLC或HPLC系统确认亮丙立德的纯度。将亮丙立德的峰面积与峰总数的峰面积比较并以百分比表示。
HPLC条件如下:
仪器:Shimadzu HPLC系统:双泵、型号LC-10ADVP;可变波长UV侦测器、型号-SPD-M10AVP;自动取样器、型号SIL-10ADVP
移动相:
A:0.05%TFA溶于水
B:0.05%TFA溶于乙腈
B:浓度24%(初始)→24%(2分钟)→30%(35分钟)→95%(37分钟)→24%(38分钟)→再平衡(40分钟)
流速:1.0mL/min
柱温度:40℃
注射体积:10μL
侦测:220nm
操作时间:40分钟
出人意料的是,在37℃下1小时期间发现有大量杂质产生。
如图1所示,亮丙立德的保留时间为约15.03分钟,而主要的亮丙立德相关杂质出现于亮丙立德峰的相对保留时间(RRT)约1.40、1.46、1.50、1.52及1.55。以峰面积计算,超过约10.8%的亮丙立德相关杂质在37℃下一小时内产生。如此大量的药物相关杂质将明显超出FDA及ICH规范中记载的质控限度。由这些类型的制剂在这么短时间内产生的大量亮丙立德相关杂质将对药品的质量造成不良影响。
实施例2:用在不同溶剂中的PLA聚合物配制的醋酸亮丙立德
利用在PLA(100DL 2E,残余丙交酯单体含量为3.2重量%,Evonik)在不同溶剂中的溶液(60%w/w)中的醋酸亮丙立德(LAAce)来制备制剂,以测试亮丙立德相关杂质的形成。被测试的溶剂为N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二氯甲烷(DCM)及二甲亚砜(DMSO)。表1列出制剂的组成。
表1:醋酸亮丙立德制剂,与在不同溶剂中的PLA-100DL2E一起
将制剂混合并于37℃下保存于玻璃瓶中。在时间0取出样品并利用HPLC分析,以测量亮丙立德纯度。图2至图4显示制剂的亮丙立德的初始色谱图。
色谱图显示在时间0(刚完成混合的时候),于亮丙立德的相对保留时间(RRT)为1.46、1.49、1.52及1.55时即有某些亮丙立德相关杂质。在37℃下温育后,再将制剂以HPLC分析亮丙立德。图5至图7显示在37℃下1小时后分别采用NMP、DMSO及DCM的制剂中的亮丙立德色谱图。
在亮丙立德峰RRT为约1.40、1.46、1.50、1.52及1.55时观察到的亮丙立德相关杂质明显多于时间0所观察到的。这样的结果显示亮丙立德相关杂质在DMSO及NMP制剂中形成得比在DCM制剂中更快。DCM制剂中亮丙立德相关杂质的形成在测试期间并无变化。这些结果说明了为何本申请案中所观察到的杂质与美国专利8,343,513所描述的不同。此外,DCM与水不混溶且并非用于注射的药用的溶剂。表2显示以HPLC在制剂中测得的亮丙立德纯度。亮丙立德纯度的减少与亮丙立德相关杂质的增加之间有明显的相关性。
表2:采用PLA-100DL2E配合不同溶剂的亮丙立德的纯度
因此,若存在药用的与水混溶溶剂(像是NMP及DMSO),亮丙立德将会出现大量杂质。
实施例3:精氨酸及丝氨酸与D,L-丙交酯单体反应
美国专利8,343,513的图16(柱43至44)显示在由RG503H聚合物的DCM溶液制得的微球中醋酸亮丙立德所产生的杂质结构。所有经确认的杂质均有聚合物和肽的精氨酸基团反应。在本发明中,经发现,丙交酯单体与肽的丝氨酸反应产生的共轭体是所生成的杂质中较多的,这是之前并未观察到的。为了测试与丙交酯单体反应而得的亮丙立德共轭体的生成,将FMOC-ARG-OH或FMOC-SER-OH溶解于NMP中。将D,L-丙交酯单体加入此溶液中。旋转以充分混合溶液。将5μL的溶液加入HPLC瓶中,其中含有0.5mL乙腈及0.5mL稳定性缓冲液(0.6%TEA/0.3%H3PO4于水中,pH=3.0)。将样品以HPLC分析。将剩余的溶液于玻璃瓶中保存在25℃下。于特定时间点取样并进行UPLC分析。表3列出制剂组成。
表3:丝氨酸及精氨酸制剂组成
FMOC-SER-OH(mg) | NMP(mg) | D,L-丙交酯(mg) |
95.7 | 205.0 | 100.8 |
FMOC-ARG-OH(mg) | NMP(mg) | D,L-丙交酯(mg) |
97.2 | 205.3 | 100.0 |
各制剂在3小时及24小时的HPLC色谱图如所示。图8显示FMOC-SER-OH溶液温育3小时后的HPLC色谱图。
图8显示在与丙交酯单体一起温育3小时后有非常少量的杂质产生。主要的丝氨酸峰的保留时间为22.5分钟。在29.5及30.0分钟时开始出现两个杂质峰。图9为25℃下1天的色谱图。
图9显示,在29.5及30.0分钟时有因为d,l-丙交酯与丝氨酸反应而产生的杂质。这两个峰是由丝氨酸与各单体(D-丙交酯及L-丙交酯)反应所产生。出人意料的是,此反应产生的大量杂质是在美国专利8,343,513中没有发现的。图10为FMOC-ARG-OH溶于NMP中在时间3小时的色谱图。
精氨酸峰在16.8分钟。而杂质则是出现于20.0分钟,并未观察到双杂质峰。图11为相同样品在25℃下1天后的色谱图。
在1天后,20.0分钟时观察到的杂质有所增加,如同25.5分钟的杂质。精氨酸并未如丝氨酸般形成两个峰。此外,整体的杂质生成仍少于丝氨酸所观察到的情形,这代表,若是在药用的与水混溶溶剂如NMP中,亮丙立德的丝氨酸对制剂中的D,L-丙交酯单体更具反应性。
实施例4:在NMP中对于不同酸值的PLA的亮丙立德稳定性
美国专利8,343,513宣称可利用外加的酸来稳定化亲核性化合物与有机溶剂及聚合物。本发明显示,酸值较高的聚合物仍无法避免在与水混溶的有机溶剂中亲核性化合物和聚合物的残余单体进行反应。聚合物的性质如表4所示。
表4:聚合物性质
将PLA聚合物如PLA1及PLA2溶解于NMP中以分别制得57.5%及60%的聚合物溶液。将醋酸亮丙立德(LAAce)(CSBio,#GF1122)与聚合物溶液混合而得到制剂。表5列出制剂组成。
表5:亮丙立德制剂组成
制剂 | 亮丙立德(mg) | 聚合物溶液(mg) |
LA-57.5%PLA1-NMP | 85.9 | 623.9 |
LA-60%PLA2-NMP | 79.3 | 589.7 |
将溶液均匀混合并保存于37℃。在特定时间点,以UPLC分析溶液的纯度,并以GPC分析聚合物分子量。UPLC条件如下:
仪器:Shimadzu UPLC系统:双泵、型号LC-30AD;可变波长UV侦测器、型号-SPD-M30A;自动取样器、型号SIL-30AC
移动相:
A:稳定性缓冲液(6mL的三乙胺(TEA)及3mL的磷酸加入1公升的水,pH调整至3.0)
B:乙腈
B:浓度15%(初始)→24%(40分钟)→24.9%(44分钟)→70%(46分钟)→70%(48.5分钟)→15%(49分钟)→再平衡(56分钟)
流速:0.4mL/min
柱温度:60℃
注射体积:2μL
侦测:220nm
操作时间:56分钟
表6列出使用此制剂在特定时间点所观察到的峰的相对保留时间(RRT)。
表6:37℃下温育后的亮丙立德制剂RRT
RRT为1.29及1.31的总杂质或丙交酯-亮丙立德共轭体随着时间而增加。出人意料的是,总杂质或丙交酯-亮丙立德共轭体在酸值较高的制剂中增加得较快。
以GPC分析聚合物分子量。表7列出分子量随着时间的变化,以初始分子量的百分比表示。
表7:于37℃下温育后的聚合物分子量变化,以初始分子量的百分比表示
时间(天) | PLA1 | PLA2 |
0 | 100.00 | 100.00 |
1 | 98.21 | 95.48 |
2 | 96.32 | 89.71 |
与美国专利8,343,513相反,酸值较高(PLA2)制剂中的聚合物并不像酸值较低聚合物般稳定。
实施例5:包含不同数量D,L-丙交酯单体的PLGA溶液中的亮丙立德稳定性
美国专利8,343,513宣称可将酸值至少为5的聚合物及有机溶剂中分散相内的亲核性化合物稳定化。本发明显示高酸值并未防止杂质与亮丙立德的丙交酯共轭体的形成。将PLGA聚合物PLGA5050(其含有不同数量的残余丙交酯单体)用于测量制剂稳定性的差异。表8列出此聚合物的性质。
表8:聚合物性质
将聚合物溶解于适量的NMP中以制备含有不同数量残余D,L-丙交酯的PLGA的50%聚合物溶液。
将醋酸亮丙立德(CSBio,#GF1122)混入聚合物溶液中以制备制剂。表9列出制剂组成。
表9:亮丙立德制剂组成
制剂 | 亮丙立德(mg) | 聚合物溶液(mg) |
LA-50%PLGA5050-1/NMP | 77.8 | 572.1 |
LA-50%PLGA5050-2/NMP | 80.9 | 603.1 |
将溶液均匀混合并保存于37℃。在特定时间点,以UPLC分析溶液的纯度,并以GPC分析聚合物分子量。
表10列出使用此制剂在特定时间点所观察到的峰的相对保留时间(RRT)。
表10:37℃下温育后的亮丙立德制剂RRT
*N.D.代表并未侦测
丙交酯-亮丙立德共轭体的RRT为1.297及1.312。可再次观察到杂质随着时间而增加,含有较多丙交酯单体的制剂增加的较快。
以GPC分析聚合物分子量。
在不同时间点,两种制剂的MW并没有明显差异。
实施例6:因亮丙立德产生的L-丙交酯单体杂质
为了证明杂质是否是因为与D,L-丙交酯单体反应而产生,将甲磺酸亮丙立德(LAMS)搭配L-丙交酯使用,以确认所形成的杂质是否只出现单一峰而非前述的双重峰。
表11列出此溶液的组成。
表11:LAMS在含有L-丙交酯的NMP组合物中
溶液 | 丙交酯(mg) | NMP(mg) | LAMS(mg) |
LAMS | 5.2 | 402.5 | 127.7 |
图12显示LAMS溶于含有10%L-丙交酯的NMP中3小时后于37℃下的色谱图。
图12显示原本观察到的双重峰现在则为单峰。双重峰代表丙交酯的两种异构物均进行反应。图12确认了杂质确实是由丙交酯单体造成的,因为在相同RRT观察到杂质,但若只使用丙交酯单体的其中一种异构物,则杂质仅出现单一峰。
实施例7:亮丙立德与不同浓度的D,L-丙交酯单体
用醋酸亮丙立德(LAAc)在具有根据表12的不同量的D,L-丙交酯的NMP中来制备溶液,用以测试亮丙立德的稳定性。
表12:具有丙交酯的醋酸亮丙立德制剂组合物
溶液 | LAAc(mg) | NMP(mg) | D,L-丙交酯(mg) |
1%丙交酯 | 156.5 | 412.5 | 5.4 |
0.1%丙交酯 | 372.5 | 986.1 | 1.3 |
0%丙交酯 | 76.6 | 207.2 | - |
将溶液均匀混合并保存于37℃。在特定时间点,将溶液一小等分试样加入HPLC瓶中,并以HPLC分析溶液纯度。表13显示随着时间经过这些制剂的纯度变化,其中丙交酯单体形成主要杂质。
表13:醋酸亮丙立德与丙交酯在NMP中的溶液在37℃下所得的HPLC峰面积百分比
表13显示亮丙立德百分比随着丙交酯含量增加而减少。在相对保留时间(RRT)为1.083及1.086观察到的杂质也随着丙交酯含量增加而增加。在37℃下4小时期间,于不含丙交酯单体的样品中并未观察到共轭体形成。
实施例8:丙交酯类聚合物的纯化
将适量的丙交酯类聚合物PLA100DL2E(MW 14k,残余单体3.2%)溶解于定量的丙酮中以达到理想浓度的丙交酯类聚合物溶液。聚合物浓度范围可为5重量%至50重量%。于本实施例中,将约25g的聚合物溶解于100mL的丙酮中以于适当容器(例如烧杯)内形成澄清溶液。在此溶液搅拌期间,加入约100mL的水以沉淀聚合物(方法1),或加入约40mL的水以沉淀聚合物(方法2)。将上清液倒出。重复此程序多至4次。在最后一次倒出后,将沉淀的聚合物于真空下冷冻并干燥约48小时。以GPC分析最终聚合物,结果如表14。
表14:未纯化及经纯化丙交酯类聚合物的特性
水添加得越多,会沉淀更多的小寡聚物,且不会改变整体聚合物分子量。水添加得越少,会移除更多的小寡聚物并增加聚合物分子量且降低多分散性。
实施例9:聚合物纯化对于亮丙立德稳定性的影响
利用实施例8的聚合物制备聚合物溶液,并与亮丙立德混合以制成制剂,用以比较经纯化聚合物与未纯化聚合物的稳定性。采用经纯化及未纯化聚合物将8%醋酸亮丙立德混合至60%聚合物的NMP溶液中。将制剂保存于37℃下,并以HPLC进行分析以测量亮丙立德稳定性。表15显示各制剂在各时间点的亮丙立德稳定性。
表15:具有不同纯化状态的聚合物制剂中亮丙立德的稳定性
表15显示对聚合物进行纯化会增加亮丙立德的稳定性。未纯化聚合物的亮丙立德在37℃下1小时后就有超过10%被降解,但经纯化聚合物制剂中的亮丙立德在1小时后仍接近于99%。在24小时后,纯化2次及纯化4次的聚合物制剂存在些许不同,显示仍存在些许单体而增加了降解速率。因此,越多纯化步骤可移除越多的丙交酯单体,这会减少亮丙立德-丙交酯共轭体的形成并增加制剂的稳定性。就制剂稳定性而言,纯化方法的差异很小。
实施例10:具有经纯化的PLGA聚合物的LAMS稳定性
将未纯化聚合物与高度纯化聚合物进行比较。纯化方法如同实施例8方法2,将聚合物溶解于丙酮中,之后将水加入丙酮/聚合物溶液以使其沉淀。对PLGA聚合物8515DLG2CE-P重复此方法至多三次以大幅降低丙交酯单体含量。表16显示所测试聚合物的单体含量。
表16:具有残余D,L-丙交酯含量的PLA/PLGA
表16显示PLGA 8515DLG2CE-P在每次纯化后单体均有所减少。制剂根据表17由甲磺酸亮丙立德(LAMS)制得。
表17:LAMS/PLGA制剂组成
将制剂在37℃下保存于玻璃瓶中。在特定时间点,测量亮丙立德稳定性,将D,L-丙交酯单体产生的杂质总和以HPLC色谱图的总AUC的百分比方式列表,如表18所示。
表18:表17的制剂在37℃下丙交酯-亮丙立德杂质的总和(%)
表18显示与单体有关的杂质峰和初始单体浓度之间存在直接相关性。藉由纯化而降低单体浓度可大幅减少制剂中的杂质。多次的纯化步骤可进一步减少单体含量,且因此增加制剂稳定性。优选进行至少两次纯化步骤以降低残余单体含量,而大幅减少丙交酯亮丙立德共轭体的形成。
实施例11:具有不同丙交酯单体含量的PLA制剂中亮丙立德的杂质形成
使用LAAce与不同d,l-丙交酯数量的PLA制备制剂,以测试亮丙立德的反应性。表19列出制剂的组成。
表19:在在NMP中的57.5%PLA中的LAAce的制剂
将制剂在37℃下保存于玻璃瓶中。在时间0取一样品并以HPLC分析以测量亮丙立德纯度。图13至图18显示这些制剂初始时亮丙立德的色谱图。
可观察到,RRT为1.49及1.53的杂质随着制剂中d,l-丙交酯含量的增加而有显著增加,即使是在刚完成混合后。于1小时、4小时及24小时后再次分析这些样品。图19至图24为24小时的色谱图。
表20以HPLC峰面积的形式比较了制剂在不同时间点下的亮丙立德纯度。
表20:对于单体浓度不同的制剂在不同时间下的LAAce纯度
表21列出由d,l-丙交酯和亮丙立德的丝氨酸位置反应形成的两种主要亮丙立德丙交酯共轭体的总和。
表21:具有不同单体浓度的制剂的两种丙交酯-亮丙立德杂质总和
这些表格显示由丙交酯产生的杂质随着时间而增加,且单体含量较高者增加较快,代表需要有制剂中单体含量低的聚合物。
实施例12:聚合物纯化对制剂稳定性的影响
将约25g得自Durect的8515PLGA聚合物(MW 17k,残余丙交酯约0.15重量%)搅拌并溶解于玻璃烧杯内的约100mL丙酮。一次添加1mL的二次蒸馏水至溶液中。总共添加45mL的水,而聚合物沉淀并在烧杯底部形成一个层。将溶液倒出并再溶解于约100mL的丙酮中。再次加入二次蒸馏水,每次1mL,直到共添加45mL。将沉淀物倒出并离心。用水冲洗沉淀物两次,并进行冷冻及冻干。发现,经纯化的聚合物的分子量从17.9k稍微增加到18.3k。预期残余丙交酯单体含量可从约0.15重量%下降至小于0.03重量%。
将经纯化及未纯化聚合物以NMP混合,以制得57.5%聚合物的NMP溶液。将甲磺酸亮丙立德(LAMS)添加至各聚合物溶液以制备含有57.5%聚合物溶液的8%LAMS制剂。将制剂充填至购自Schott的1mL长COC注射器,其具有购自West的4023/50灰色柱塞。接着将装有制剂的注射器以27kGy的剂量进行电子束照射而灭菌。
于照射后,将制剂保存于25℃,并测量制剂的稳定性。表22列出制剂中的杂质以及丝氨酸位置形成的亮丙立德丙交酯共轭体(Leup-Serine-Lac)。
表22:具有纯化或未纯化8515PLGA的灭菌LAMS制剂在25℃下的杂质形成
表22显示,未纯化聚合物出现了大量的共轭体,数量比制剂中使用经纯化聚合物者多出约8倍。
此外也测量分子量,如表23所示。
表23:使用经纯化或未纯化的8515PLGA的灭菌制剂中的分子量稳定性
随着时间可发现两制剂之间分子量有细微差异。此外,两制剂之间在多分散性指数上并无差异。
此外也测量两制剂于PBS中37℃下进行体外释放的情形,如图25所示。
图25显示采用8515PLGA-P的制剂比采用8515PLGA的制剂持续长数周。这是出乎意料之外的,因为两制剂中聚合物多分散性和分子量基本上相同。释放差异可能是来自于聚合物中小寡聚物的去除。去除小寡聚物在此实施例中让聚合物降解变慢。这是令人吃惊的,且和现有技术的教导相反,即当“寡聚物酸并入聚合物-药物溶液中时,其可显著减少或排除聚合物分子量的减少”[参见美国专利8,343,513第3栏第44至48行]。
对于某些治疗剂(例如GnRH激动剂类似物)而言,高初始释放可能是有利的。GnRH激动剂打断GnRH受体的正常脉动刺激并将GnRH受体去敏化,其间接向下调控促性腺素促黄体激素(LH)及促滤泡素(FSH)的分泌,导致低性腺功能症以及两种性别中雌二醇与睾丸激素浓度的显著减少。初始治疗需要较高剂量的GnRH激动剂来抑制睾丸激素浓度。一旦睾丸激素被抑制低于血清阉割水平(<0.5ng/mL),则只需要极低剂量的GnRH激动剂来维持此阉割水平。因此,GnRH激动剂同时有较高的初始突释以及较长的递送期间是有好处的。
Claims (18)
1.一种制造用于控释药物递送的可注射组合物的方法,包括:
将以下各项组合:
聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯,其重均分子量介于5,000及50,000道尔顿之间、酸值小于3mgKOH/g、且所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯中的残余丙交酯单体含量小于0.3重量%;与
药用的有机溶剂;和
亮丙立德或其盐,
条件是在所述组合物的制造中并未添加酸添加剂。
2.权利要求1所述的方法,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯内的丙交酯为D-丙交酯、D,L-丙交酯、L,D-丙交酯、L-丙交酯、(R,R)-丙交酯、(S,S)-丙交酯及内消旋型丙交酯或其任一种组合。
3.权利要求1所述的方法,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯的残余丙交酯单体含量小于0.2重量%。
4.权利要求1所述的方法,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯的残余丙交酯单体含量小于0.1重量%。
5.权利要求1所述的方法,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯的酸值小于2mgKOH/g。
6.权利要求1所述的方法,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯为聚乳酸或聚丙交酯。
7.权利要求1所述的方法,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯为聚(丙交酯-共-乙交酯),其丙交酯/乙交酯的比例为50/50至100/0。
8.权利要求1所述的方法,其中所述药用的有机溶剂选自N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲亚砜、二甲基乙酰胺、四氢呋喃聚乙二醇醚、甲氧基聚乙二醇350、聚乙二醇酯、苯甲酸苄酯、苯甲醇、苯甲酸乙酯、柠檬酸的酯、三醋精、二醋精、柠檬酸三乙酯、柠檬酸乙酰基三乙酯及其混合物的组。
9.权利要求1所述的方法,其中所述药用的有机溶剂为N-甲基-2-吡咯烷酮。
10.一种用于控释药物递送的可注射组合物,包括:
a.聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯,其重均分子量介于5,000及50,000道尔顿之间、酸值小于3mgKOH/g、且所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯中的残余丙交酯单体含量小于0.3重量%;
b.药用的有机溶剂;以及
c.亮丙立德或其盐,
条件是所述组合物制造过程中并未添加酸添加剂。
11.权利要求10所述的可注射组合物,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯内的丙交酯为D-丙交酯、D,L-丙交酯、L,D-丙交酯、L-丙交酯、(R,R)-丙交酯、(S,S)-丙交酯及内消旋型丙交酯或其任一种组合。
12.权利要求10所述的可注射组合物,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯的酸值小于2mgKOH/g。
13.权利要求10所述的可注射组合物,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯的残余丙交酯单体含量小于0.2重量%。
14.权利要求10所述的可注射组合物,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯的残余丙交酯单体含量小于0.1重量%。
15.权利要求10所述的可注射组合物,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯为聚乳酸或聚丙交酯。
16.权利要求10所述的可注射组合物,其中所述聚(丙交酯-共-乙交酯)或聚丙交酯为聚(丙交酯-共-乙交酯),其丙交酯/乙交酯的比例为50/50至100/0。
17.权利要求10所述的可注射组合物,其中所述药用的有机溶剂选自N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲亚砜、二甲基乙酰胺、四氢呋喃聚乙二醇醚、甲氧基聚乙二醇350、聚乙二醇酯、苯甲酸苄酯、苯甲醇、苯甲酸乙酯、柠檬酸的酯、三醋精、二醋精、柠檬酸三乙酯、柠檬酸乙酰基三乙酯及其混合物的组。
18.权利要求10所述的可注射组合物,其中所述药用的有机溶剂为N-甲基-2-吡咯烷酮。
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