CN107064356A - 一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有n‑亚硝胺的提取及测定方法 - Google Patents

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CN107064356A CN201710241224.5A CN201710241224A CN107064356A CN 107064356 A CN107064356 A CN 107064356A CN 201710241224 A CN201710241224 A CN 201710241224A CN 107064356 A CN107064356 A CN 107064356A
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Abstract

本发明涉及一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N‑亚硝胺的提取及测定方法，属于烟草化学检验技术领域。本发明电子烟液中烟草特有N‑亚硝胺的提取方法，将电子烟液的稀释液流过活化后的HiCapt MCX固相萃取柱，用甲醇水溶液进行淋洗，再用丙酮、丙酮氨水混合液、丙酮甲酸混合液中的任意一种进行洗脱，即得。本发明电子烟液中烟草特有N‑亚硝胺的提取方法，能有效去除杂质及干扰物，提高测定方法的准确度和精密度，方法的相对回收率介于92.2％～108.9％之间，日内及日间精密度分别小于4.6％和4.2％。

Description

一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚 硝胺的提取及测定方法
技术领域
本发明涉及一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取及测定方法，属于烟草化学检验技术领域。
背景技术
N-亚硝胺是一类在结构上含有-N-NO的多种化合物的总称，根据物理性质的差异可将其分为挥发性N-亚硝胺和非挥发性N-亚硝胺。其中，挥发性N-亚硝胺是一类受到广泛关注的致癌物质，不仅是霍夫曼清单和美国食品药品监督管理局“烟草制品及烟气中有害及潜在有害物质名单”中的重要物质，也是国际癌症研究机构“无烟气烟草制品中28种有害物质”名单中的重要成分。因此，测定烟草特有N-亚硝胺的含量对正确评价吸烟对健康的危害具有重要意义。
电子烟(electrical cigarette，e-cigarette)是一种外形模仿卷烟的电子产品，其通过雾化含烟碱的烟液而让使用者在吸食时产生一种类似抽烟的感觉。近年来，随着国内外对传统卷烟的管控措施不断加强，电子烟取得了十足的发展，并且在国内外的产销量都大幅增加。然而，迄今为止，国内外均没有系统的电子烟安全性评估资料，且其安全性尚未得到充分的科学论证。因此，准确测定电子烟烟液中的成分显得尤为重要。目前已经有资料显示电子烟烟液中含有烟草特有N-亚硝胺，然而，烟草特有N-亚硝胺在电子烟液中的含量很低(通常为ng级别)，因此要对电子烟液中烟草特有N-亚硝胺进行准确定量分析，通常需要一定的样品前处理过程，以达到去除共存基质干扰和富集烟草特有N-亚硝胺的目的。
授权公告号为CN 105158392 B的中国发明专利一种电子烟烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，主要步骤是将电子烟烟液样品用含有抗坏血酸的磷酸盐缓冲液稀释后用二氯甲烷萃取，萃取液浓缩后用在线凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱仪进行测定，采用内标法定量。该方法具有灵敏度高、基质去除效果好、抗干扰能力强的优点。但是，该方法样品前处理和仪器分析过程中需要使用二氯甲烷和环己烷等对人体和环境有害的溶剂；而且所使用的检测仪器(在线凝胶渗透色谱-气相色谱-串联质谱仪)配置复杂，价格较为昂贵；分析一个样品的时间超过45min，相对较长。申请公开号为CN102012407A的发明专利公开了一种烟草特有N-亚硝胺的检测方法，在该方案中将萃取液流经固相萃取小柱，然后采用甲酸水淋洗，最后用氨水/甲醇洗脱，得到待测液。该方案中的固相萃取填料为N-乙烯基吡咯烷酮-苯磺酸共聚物，有机聚合物填料在有机溶剂中会溶胀，会在一定程度上影响填料的富集和净化效果。另外，该方案中也没有对影响萃取效果的各种参数进行优化。
因此，开发一种灵敏度高、基质去除效果好且对环境污染小、快速检测电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的方法迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取方法。
本发明第二个目的在于提供一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，该方法灵敏度高、环境污染小且能实现快速检测。
为实现上述目的，本发明的技术方案是：
一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，包括以下步骤：
1)将电子烟液的稀释液流过活化后的HiCapt MCX固相萃取柱，完成上样；
2)用甲醇水溶液进行淋洗；
3)用丙酮、丙酮氨水混合液、丙酮甲酸混合液中的任意一种进行洗脱，即得N-亚硝胺的提取液；所述丙酮氨水混合液中丙酮、氨水的体积比为97～99:3～1；丙酮甲酸混合液中丙酮、甲酸的体积比为97～99:3～1；所述氨水的质量分数为35％。
所述电子烟液中烟草特有N-亚硝胺包括NNN、NNK、NAT和NAB。
所述电子烟液的稀释液为采用5～100mmol/L的乙酸铵水溶液对电子烟液进行稀释所得。
每稀释1g电子烟液所用乙酸铵溶液的体积为10～100mL。
电子烟液加入乙酸铵溶液进行稀释时采用超声或涡旋震荡的方式进行。超声功率280～700W，频率20～40kHz，时间≥5min。超声时间优选10min。涡旋振荡的速率为500～2500rpm，时间≥3min。涡旋震荡的时间优选5min。
步骤1)中HiCapt MCX固相萃取柱为疏水/离子交换混合保留机理固相萃取柱。所述HiCapt MCX固相萃取柱购自于维泰克科技(武汉)有限公司。
所用HiCapt MCX固相萃取柱中的填料具有疏水和强离子交换的作用。每将6mL粗提取液上样时对应使用50～1000mg HiCapt MCX固相萃取填料。优选为500mg。
步骤1)中活化为依次用丙酮、甲醇体积分数为5％的甲醇水溶液、水清洗固相萃取柱。所述丙酮、甲醇水溶液、水的体积比为1:2:2。
所述电子烟液的稀释液pH值为3.0～11.0。进一步地，优选为pH为4.0～6.0。
所述调pH用pH调节剂为乙酸或氨水。当选用乙酸调节pH时，优选质量分数为10％的乙酸溶液。
步骤2)中甲醇水溶液中甲醇的体积分数为5％～20％。甲醇水溶液中甲醇的体积分数优选8％～12％。步骤2)中甲醇水溶液的用量选择时，每将6mL粗提取液上样，淋洗时甲醇水溶液的用量为≥0.5mL。优选为1mL。
步骤2)中淋洗后在真空泵的负压作用下抽干淋洗液。
步骤3)中丙酮与氨水体积比优选为99:1。丙酮与甲酸的体积比优选为99:1。
步骤3)中洗脱，洗脱液的用量为：每将6mL粗提取液上样，淋洗，干燥后使用的洗脱液体积≥0.5mL。优选为1～2mL。
一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，包括以下步骤：
1.提取液的制备
1.1将电子烟液的稀释液流过活化后的HiCapt MCX固相萃取柱，完成上样，
所述电子烟液的稀释液中含有同位素内标；
1.2用甲醇水溶液进行淋洗，之后真空干燥；
1.3用丙酮、丙酮氨水混合液、丙酮甲酸混合液中的任意一种进行洗脱，即得N-亚硝胺的提取液；所述丙酮氨水混合液中丙酮、氨水的体积比为97～99:3～1；丙酮甲酸混合液中丙酮、甲酸的体积比为97～99:3～1；
2.电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定
将步骤1.3所得提取液吹干，用甲酸铵溶液、甲酸乙腈溶液配制而成的复溶液进行复溶，之后进行液相色谱-串联质谱测定。
步骤1.1中同位素内标包括NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4、NAB-d4。
步骤1.1中电子烟液的稀释液为采用5～100mmol/L的乙酸铵水溶液对电子烟液进行稀释所得。
每稀释1g电子烟液所用乙酸铵溶液的体积为10～100mL。
步骤1.1中每mL电子烟液的稀释液中加入每种同位素内标的量均为10ng。
步骤2中复溶液由0.01mol/L的甲酸铵溶液与甲酸体积分数为0.1％的甲酸乙腈溶液按照1～2:1～2的体积比配制而成。所述复溶液的用量为：每将6mL粗提取液上样，最终测定前需使用复溶液的体积≥0.1mL。进一步优选为0.2mL。
所述液相色谱-串联质谱分析的条件：色谱柱：Poroshell 120EC-C18(3.0mm×100mm，2.7μm)；柱温：40℃；进样量：5μL；流动相为0.01mol/L甲酸铵(A)-0.1％甲酸乙腈(B)；流速：0.4mL/min；流动相梯度程序：t＝0min,10％B，t＝2.0min，40％B，t＝4.0min,60％B，t＝6.0min，90％B，t＝9.0min，90％B，t＝9.5min，10％B，t＝15.0min，10％B；质谱条件：电喷雾电压5000V；雾化气(Gas1)压力50psi；辅助雾化气(Gas2)压力50psi；气帘气(Gas1)压力35psi；离子源温度450℃；进口电压8V；出口电压10V；去簇电压40V；驻留时间40ms；监测模式：多反应监测。
所述多反应监测中NNN、NNK、NAT和NAB的定量离子对依次为178.1>148.2、208.1>122.1、190.1>160.1和192.1>162.2，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV；NNN、NNK、NAT和NAB的定性离子对依次为178.1>120.1、208.1>106.1、190.1>106.1和192.1>133.1，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV；NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4和NAB-d4的定量离子对依次为182.1>152.2、212.1>126.1、194.1>164.1和196.1>166.2，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV。
本发明一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法中，提取液的制备步骤中涉及到的具体参数及提取条件与电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取方法中的相同。
本发明一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法中混合标准溶液按照如下方法进行配制：
以四种烟草特有N-亚硝胺的同位素内标(NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4和NAB-d4)为溶质，甲醇为溶剂，配制内标溶液；以四种烟草特有N-亚硝胺(NNN、NNK、NAT和NAB)为溶质，加入固定体积的内标溶液，甲醇为溶剂，配制系列浓度的混合标准溶液。
本发明电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法中标准曲线的制作步骤为：以四种烟草特有N-亚硝胺的同位素内标(NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4和NAB-d4)为溶质，甲醇为溶剂，配制内标溶液；以四种烟草特有N-亚硝胺(NNN、NNK、NAT和NAB)为溶质，加入固定体积的内标溶液，甲醇为溶剂，配制系列浓度的混合标准溶液经液相色谱-串联质谱分析后，内标法定量，以目标分析物和相应内标物峰面积之比对应目标分析物浓度作回归分析，即得各目标分析物的标准曲线。
本发明一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，还包括取待测溶液进行液相色谱-串联质谱分析，对照标准曲线得到待测溶液中烟草特有N-亚硝胺的含量，经计算得到样品中烟草特有N-亚硝胺的含量。
本发明的有益效果是：
本发明基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取及测定方法中，使用混合保留机理，利用疏水/强阳离子交换材料对电子烟液中的烟草特有N-亚硝胺进行萃取，再结合液相色谱-串联质谱对其进行快速检测，样品前处理操作简单、快捷，杂质及干扰物的去除效率高，样品分析时间短，疏水/强阳离子交换材料对样品待测液具有良好的净化效果，能有效去除杂质及干扰物，提高测定方法的准确度和精密度，方法的相对回收率介于92.2％～108.9％之间，日内及日间精密度分别小于4.6％和4.2％。
附图说明
图1为混合标准溶液3的色谱图；
图2为8种电子烟液的测定结果图；
图3为HiCapt MCX固相萃取柱中填料质量的优化结果图；
图4为上样溶液pH值的优化结果图；
图5为淋洗液中甲醇含量的优化结果图；
图6为洗脱液种类的优化结果图；
图7为洗脱液体积的优化结果图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的实施方式作进一步说明。
实施例1
本实施例基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，包括以下步骤：
1)称取1.0000g电子烟液(精确至0.1mg)，置入15mL具塞离心管中，准确加入10mL浓度10mmol/L的乙酸铵水溶液，置于超声波发生器(购自昆山市超声仪器有限公司，型号：KQ-700DB)上超声10min，超声功率700W，频率40kHz，静置5min，得电子烟液的稀释液，调节电子烟液的稀释液pH值为4，作为上样溶液，备用；称取500mg HiCapt MCX固相萃取填料于带有筛板的固相萃取空柱管中，不断敲打使填料填充均匀，上端盖上筛板压紧，待用；上样前，依次用1.0mL丙酮、2.0mL甲醇体积分数为5％的甲醇水溶液、2mL水清洗活化固相萃取小柱；然后在重力作用下将6mL上样溶液自然流过固相萃取小柱以完成上样过程；
2)上样结束后用1mL甲醇体积分数为10％的甲醇水溶液进行淋洗，待淋洗液完全流过萃取柱后，在真空泵的负压作用下抽干淋洗液；
3)用2mL丙酮(含1％体积分数的氨水)洗脱目标分析物，收集，即得。
本实施例一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，包括以下步骤：
1.电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取
1.1称取1.0000g电子烟液(精确至0.1mg)，置入15mL具塞离心管中，加入内标后准确加入10mL浓度10mmol/L的乙酸铵水溶液，置于超声波发生器(购自昆山市超声仪器有限公司，型号：KQ-700DB)上超声10min，超声功率700W，频率40kHz，静置5min，得电子烟液的稀释液，调电子烟液的稀释液pH值为4，作为上样溶液，备用；称取500mg HiCapt MCX固相萃取填料于带有筛板的固相萃取空柱管中，不断敲打使填料填充均匀，上端盖上筛板压紧，待用；上样前，依次用1.0mL丙酮、2.0mL甲醇体积分数为5％的甲醇水溶液、2mL水清洗活化固相萃取小柱；然后在重力作用下将6mL上样溶液自然流过固相萃取小柱以完成上样过程；
1.2上样结束后用1mL甲醇体积分数为10％的甲醇水溶液进行淋洗，待淋洗液完全流过萃取柱后，在真空泵的负压作用下抽干淋洗液；
1.3用2mL丙酮(含1％体积分数氨水)洗脱目标分析物，收集，即得，其中氨水的质量分数为35％；
2.电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定
将步骤1.3所得提取液在35℃下氮气吹干，再用0.2mL复溶液进行复溶，即得待测液。复溶液由0.01mol/L的甲酸铵溶液和甲酸体积分数为0.1％的甲酸乙腈溶液按照1:1的体积比配制而成。
混合标准溶液的配制：以四种烟草特有N-亚硝胺的同位素内标(NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4和NAB-d4)为溶质，甲醇为溶剂，配制内标溶液；以四种烟草特有N-亚硝胺(NNN、NNK、NAT和NAB)为溶质，加入固定体积的内标溶液，甲醇为溶剂，配制系列浓度的混合标准溶液，具体见下表1，其中内标的浓度均为10ng/mL。将混合标准溶液进行液相色谱-串联质谱分析。
表1混合标准溶液的浓度表
标准曲线的制作：取混合标准溶液进行液相色谱-串联质谱分析，分析条件为：色谱柱：Poroshell 120EC-C18(3.0mm×100mm，2.7μm)；柱温：40℃；进样量：5μL；流动相为0.01mol/L甲酸铵(A)-0.1％甲酸乙腈(B)；流速：0.4mL/min；流动相梯度程序：t＝0min,10％B，t＝2.0min,40％B，t＝4.0min,60％B，t＝6.0min,90％B，t＝9.0min,90％B，t＝9.5min,10％B，t＝15.0min,10％B；质谱条件：电喷雾电压5000V；雾化气(Gas1)压力50psi；辅助雾化气(Gas2)压力50psi；气帘气(Gas1)压力35psi；离子源温度450℃；进口电压8V；出口电压10V；去簇电压40V；驻留时间40ms；监测模式：多反应监测。
所述多反应监测中NNN、NNK、NAT和NAB的定量离子对依次为178.1>148.2、208.1>122.1、190.1>160.1和192.1>162.2，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV；NNN、NNK、NAT和NAB的定性离子对依次为178.1>120.1、208.1>106.1、190.1>106.1和192.1>133.1，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV；NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4和NAB-d4的定量离子对依次为182.1>152.2、212.1>126.1、194.1>164.1和196.1>166.2，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV。程序运行结束，以目标分析物峰面积和相应同位素峰面积之比对目标分析浓度作回归分析，即得各目标分析物的标准曲线，参数见下表2，混合标准溶液3的色谱图见图1。
表2各目标分析物对应的标准曲线、定量限和检测限
注：检测限和定量限是信噪比(S/N)3和10时对应的浓度。
样品中烟草特有N-亚硝胺的测定：取上述待测溶液进行液相色谱-串联质谱分析，分析条件同混合标准溶液进行液相色谱-串联质谱分析的分析条件，将测得的各物质峰面积代入下式1中，经计算得到样品中目标分析物的含量。
式1：
式中，m为样品中目标分析物的含量，ng/g；x为目标分析物与同位素内标的峰面积之比；a为标准曲线的斜率，b为标准曲线的截距；V为样品提取液的体积，mL；n为样品质量，g。
实施例2
按实施例1所述的测定方法，选取另外8种电子烟液，测定其中烟草特有N-亚硝胺的含量，结果如图2所示。
在本发明其它实施例中，HiCapt MCX固相萃取填料的用量还可以为50mg、100mg、200mg、300mg或1000mg，其它同实施例1。由图3HiCapt MCX固相萃取填料质量的优化结果图可知，填料的质量在50-1000mg范围内，随着填料质量不断提高，目标分析物的峰面积均显著提高，当HiCapt MCX固相萃取填料的质量达到500mg时，继续增加填料质量，目标分析物的峰面积提高不明显，综合考虑所有目标分析物的萃取效果，优选HiCapt MCX固相萃取填料的质量为500mg。
在本发明其它实施例中，上样溶液的pH值还可以为3.4、6、10.5或11，其它同实施例1。如图4上样溶液pH值的优化结果图所示，在pH为4.0时，所有被分析物具有较好的萃取效果；当pH值高于6.0或低于4.0时，目标分析物的萃取效率均有所下降；由于HiCapt MCX固相萃取填料对目标分析物的萃取主要是靠疏水和阳离子交换作用，pH在4.0-6.0时大部分目标分析物分子以质子化形式存在，而填料中的阳离子基团以负离子形式存在，此时HiCapt MCX固相萃取填料和目标分析物之间的疏水作用和阳离子交换作用力较强，因此具有最佳的萃取效果。
在本发明其它实施例中，步骤2)及1.2中甲醇水溶液中甲醇的体积分数还可以为5％、8％、12％、15％或20％，其它同实施例1。如图5淋洗液中甲醇含量的优化结果图所示，当甲醇水溶液中甲醇体积分数为8％～12％时，目标分析物具有较好的萃取效率，继续增加甲醇含量，降低了目标分析物与填料之间的疏水相互作用，不利于萃取效率的提高。因此，甲醇水溶液中甲醇的体积分数优选为8％～12％，进一步优选为10％。
在本发明其它实施例中，步骤3)及1.3中的洗脱液还可以为含3％体积分数氨水的丙酮混合液、含1％或3％体积分数甲酸的丙酮混合液或丙酮，其它同实施例1。如图6洗脱液种类、图7洗脱液体积用量的优化结果图所示，在丙酮中添加一定比例的氨水，能够提高目标分析物的洗脱效率，这是因为碱性条件下能够破坏填料和目标分析物之间的阳离子交换作用。除了NAB外，其余的目标分析物均能被1mL洗脱液液完全洗脱，为了保证较好的洗脱效率，洗脱液的体积优选为1～2mL。
在本发明其它实施例中，电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法步骤2中复溶液还可以由0.01mol/L的甲酸铵溶液和甲酸体积分数为0.1％的甲酸乙腈溶液按照1:2或2:1的体积比配制而成，其它同实施例1。
在本发明其它的实施例中，超声提取、漩涡振荡的条件均可适当调整。
试验例
1)精密度及加标回收测试
为考察上述测定方法的重现性，在实施例1稀释前的电子烟液中加入一定量的混合标准溶液，配制成低、中、高三种浓度的样品(低、中、高浓度对应的值分别为各目标分析物线性范围最低值的2、10和40倍)。在优化的分析条件下，目标分析物与干扰物分离良好，干扰物不影响目标分析物的定量。
以一天内配制的5个样品进行测定，计算不同浓度下的日内相对标准偏差；以连续3天配制的样品进行测定，计算不同浓度下的日间相对标准偏差；将分析所得的峰面积之比代入标准曲线中，计算得到待测溶液中目标分析物的含量，并与实际添加量相比得到相对回收率，结果见下表3。
表3精密度及加标回收测试结果
从表3可以看出，目标分析物在不同浓度下的日内及日间精密度分别小于4.6％和4.2％，说明该方法具有较好的重现性。同时，不同浓度下目标分析物的相对回收率介于92.2％～108.9％之间。
为了进一步验证本发明烟草特有N-亚硝胺的测定方法的准确性，分别采用本方法和授权公告号CN 105158392 B的中国发明专利中的现有方法对市售电子烟液中的N-亚硝胺进行测定，结果如表4所示。
表4采用本方法和现有方法对电子烟液分析的结果(ng/g)
结果表明，两种方法得到的测定结果一致性良好，说明该方法准确性好，可以满足日常分析要求。

Claims (10)

1.一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将电子烟液的稀释液流过活化后的HiCapt MCX固相萃取柱，完成上样；
2)用甲醇水溶液进行淋洗；
3)用丙酮、丙酮氨水混合液、丙酮甲酸混合液中的任意一种进行洗脱，即得N-亚硝胺的提取液；所述丙酮氨水混合液中丙酮、氨水的体积比为97～99:3～1；丙酮甲酸混合液中丙酮、甲酸的体积比为97～99:3～1；所述氨水的质量分数为35％。
2.如权利要求1所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，所述电子烟液中烟草特有N-亚硝胺包括NNN、NNK、NAT和NAB。
3.如权利要求1所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，所述电子烟液的稀释液为采用5～100mmol/L的乙酸铵水溶液对电子烟液进行稀释所得。
4.如权利要求1所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，所述电子烟液的稀释液pH值为3.0～11.0。
5.如权利要求1所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的提取方法，其特征在于，步骤2)中甲醇水溶液中甲醇的体积分数为5％～20％。
6.一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
1.提取液的制备
1.1将电子烟液的稀释液流过活化后的HiCapt MCX固相萃取柱，完成上样，所述电子烟液的稀释液中含有同位素内标；
1.2用甲醇水溶液进行淋洗；
1.3用丙酮、丙酮氨水混合液、丙酮甲酸混合液中的任意一种进行洗脱，即得N-亚硝胺的提取液；所述丙酮氨水混合液中丙酮、氨水的体积比为97～99:3～1；丙酮甲酸混合液中丙酮、甲酸的体积比为97～99:3～1；
2.电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定
将步骤1.3所得提取液吹干，用甲酸铵溶液、甲酸乙腈溶液配制而成的复溶液进行复溶，之后进行液相色谱-串联质谱测定。
7.如权利要求6所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，其特征在于，所述同位素内标包括NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4、NAB-d4。
8.如权利要求6所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，其特征在于，所述复溶液由0.01mol/L的甲酸铵溶液与甲酸体积分数为0.1％的甲酸乙腈溶液按照1～2:1～2的体积比配制而成。
9.如权利要求6所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，其特征在于，所述液相色谱-串联质谱测定时的色谱条件为：色谱柱：Poroshell 120 EC-C18；柱温：40℃；进样量：5μL；流动相为0.01mol/L甲酸铵(A)-0.1％甲酸乙腈(B)；流速：0.4mL/min；流动相梯度程序：t＝0min，10％B，t＝2.0min，40％B，t＝4.0min，60％B，t＝6.0min，90％B，t＝9.0min，90％B，t＝9.5min，10％B，t＝15.0min，10％B；质谱条件：电喷雾电压5000V；雾化气压力50psi；辅助雾化气压力50psi；气帘气压力35psi；离子源温度450℃；进口电压8V；出口电压10V；去簇电压40V；驻留时间40ms；监测模式：多反应监测。
10.如权利要求9所述的一种基于疏水离子交换固相萃取的电子烟液中烟草特有N-亚硝胺的测定方法，其特征在于，所述多反应监测中NNN、NNK、NAT和NAB的定量离子对依次为178.1>148.2、208.1>122.1、190.1>160.1和192.1>162.2，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV；NNN、NNK、NAT和NAB的定性离子对依次为178.1>120.1、208.1>106.1、190.1>106.1和192.1>133.1，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV；NNN-d4、NNK-d4、NAT-d4和NAB-d4的定量离子对依次为182.1>152.2、212.1>126.1、194.1>164.1和196.1>166.2，相应的碰撞电压依次为15、16、15和17eV。
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