CN107058128A - 一种桑黄菌株及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种桑黄菌株及其应用。本发明提供一种桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)GY‑S01，其保藏编号为CGMCC No.13579。桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)GY‑S01，其特点表现为：出黄快，自栽培袋接入菌种到子实体产生仅需20天左右，略给环境刺激，子实体即可生长，可实现菌丝体与子实体生长同步进行。在适宜的环境下，子实体色泽好，产量高，是工厂化栽培桑黄子实体的一株优良品种。

Description

一种桑黄菌株及其应用
技术领域
本发明涉及一种桑黄菌株及其应用。
背景技术
桑黄(Phellinus spp.)是一种珍贵的多年生大型药用真菌，通常着生于桑属(Morus L.)植物上，又名桑耳、桑臣、桑黄菇，被誉为“森林黄金”，是一种名贵的中药材，在我国传统中医药中用于痢疾、盗汗、血崩、血淋、脐腹涩痛、脱肛泻血、带下、经闭等症治疗。
随着国内外专家们对桑黄的抗癌机理及药用价值研究的越来越深入，桑黄已广泛被人们所认识，市场上对桑黄的需求量越来越大。目前，桑黄的人工栽培方式多以桑树、杨树、柞树等阔叶树枝桠粉碎的木屑为主要栽培原料，以大棚袋栽地面出黄为主，因其大棚内受季节环境影响较大，人工很难掌控有利于桑黄的(温、湿、光、气)环境，难以有效保证生长出来的桑黄子实体达到质量和重量并存的效果。因此，选育适应强，出黄快，质量好，产量高的桑黄优良菌株成了关键性的问题。选育桑黄优良菌株对于满足市场的需求非常重要。
发明内容
本发明的目的是提供一种桑黄菌株及其应用。
本发明提供的桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)GY-S01，已于2017年01月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；邮编：100101)，保藏编号为CGMCCNo.13579。桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)GY-S01简称为桑黄菌株GY-S01。
本发明保护所述桑树桑黄在生产桑黄中的应用。
本发明还保护一种生产桑黄的方法，包括如下步骤：培养所述桑树桑黄，得到桑黄。
本发明还保护生产桑黄的方法，为方法甲或方法乙。
所述方法甲包括如下步骤：
(a1)将所述的桑树桑黄的原种接种至含有栽培培养基的栽培袋中，进行栽培种培养直至菌丝体长至栽培袋三分之二处；
(a2)完成步骤(a1)后，进行出黄培养，得到桑黄。
所述方法乙包括如下步骤：
(b1)将所述桑树桑黄的原种接种至含有栽培培养基的栽培袋中，进行栽培种培养；所述栽培种培养的时间为20-25天；
(b2)完成步骤(b1)后，进行出黄培养，得到桑黄。
以上任一所述栽培培养基的原料组成为：70质量份桑树木屑、25质量份麸皮、4质量份豆粕、1质量份石膏粉和水；所述栽培培养基的水分含量为60-65％。
所述麸皮为小麦麸皮。所述豆粕为大豆豆粕。
以上任一所述栽培种培养的条件为：25℃、60％-65％相对湿度、避光。
以上任一所述方法中，将原种接种至含有栽培培养基的栽培袋后，将栽培袋封口。
以上任一所述出黄培养的条件为：25-30℃、85-95％相对湿度、100-250Lux光照。
以上任一所述出黄培养的条件具体可为：28℃、85-95％相对湿度、200Lux光照。
以上任一所述出黄培养的时间可为30-60天，具体可为40天。
以上任一所述方法中，完成步骤(a1)或(b1)后，先进行如下步骤：在栽培袋自上而下的三分之一处开两个5-10厘米月牙形的口(两个口分别开在栽培袋相对应的位置)。
以上任一所述方法中，完成出黄培养后，采收桑黄子实体。
以上任一所述“桑树桑黄的原种”是将母种接种于原种培养基上培养得到的。
所述原种培养基的原料组成为：80质量份小麦粒、19质量份桑树木屑、1质量份石膏粉和水；所述原种培养基的水分含量为50-55％。
所述培养条件具体可为：25℃、避光。
所述“将母种接种于原种培养基上培养”具体可为：取母种菌丝体(豆粒大小两块)，接入装有原种培养基的菌种瓶中，25℃避光培养10-20天(菌种长满瓶内培养基)。
所述“母种”是将所述桑树桑黄接种于母种培养基上培养得到的。
每1000ml所述母种培养基的原料组成为：一份桑树木屑滤液、10g大豆蛋白胨、5g酵母膏、15g葡萄糖、20g琼脂、10mg维生素B1，余量为水；每一份桑树木屑滤液的制备方法如下：100g桑树木屑加入1000ml水，煮沸，过滤并收集滤液。
所述培养条件具体可为25℃、避光。
所述“将所述桑树桑黄接种于母种培养基上培养”具体可为：取所述桑树桑黄的菌丝体接种至母种培养基斜面中，室温25℃避光培养7-10天(菌种长满斜面培养基)。
本发明还保护一种生产桑黄的试剂盒，包括所述栽培培养基。
所述试剂盒还包括所述原种培养基。
所述试剂盒还包括所述母种培养基。
所述试剂盒还包括所述桑树桑黄。
本发明提供了一种桑黄菌株，其特点表现为：出黄快。自栽培袋接入菌种到子实体产生仅需20天左右，略给环境刺激，子实体即可生长，可实现菌丝体与子实体生长同步进行。在适宜的环境下，子实体色泽好，产量高，是工厂化栽培桑黄子实体的一株优良品种。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
母种培养基：取100g桑树木屑置于1000ml水中，加温煮沸60分钟，采用纱布过滤，取滤液。向滤液中加入大豆蛋白胨10g、酵母膏5g、葡萄糖15g、琼脂20g和维生素B110mg，用水补足至1000ml，121℃灭菌20min。
原种培养基：取80质量份小麦粒(小麦粒用沸水煮至总麦粒中有5％左右破肚后捞出使用，80质量份指的是沸水煮之前的小麦粒重量)、19质量份桑树木屑和1质量份石膏粉混匀，加水至混合物水分含量为50-55％，装入菌种瓶内(每瓶装量为瓶高的三分之二)，塞好透气硅胶塞，123℃灭菌45min。
栽培培养基：取70质量份桑树木屑、25质量份麸皮、4质量份豆粕和1质量份石膏粉混匀，加水至混合物中水分含量为60-65％，装入栽培袋内(每袋装量为袋高的70％)，封口，123℃灭菌60min。
实施例1、桑黄菌株GY-S01的分离鉴定
一、菌株GY-S01的获得
从山东省夏津县黄河故道千年古桑林里一株古桑树上采集得到野生桑黄子实体，经过组织分离、反复选育，得到一株菌株，将其命名为菌株GY-S01。
二、菌株GY-S01的分子鉴定
为准确鉴定菌株GY-S01，对其ITS上的一段保守序列进行测序，将测得的序列在GenBank核酸序列数据库进行同源序列搜索，结果发现其与多个桑黄菌种的同源性达到99％以上。证实菌株GY-S01为桑黄，将其命名为桑树桑黄GY-S01。
三、桑黄菌株GY-S01的保藏
桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)GY-S01，已于2017年01月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；邮编：100101)，保藏编号为CGMCC No.13579。桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)GY-S01简称为桑黄菌株GY-S01。
实施例2、桑黄菌株GY-S01的人工栽培
一、母种培养
将桑黄菌株GY-S01的菌丝体接种至母种培养基斜面中，25℃避光培养7-10天(菌种长满斜面培养基)。
二、原种培养
取步骤一培养的母种菌丝体(豆粒大小两块)，接入装有原种培养基的菌种瓶中，25℃避光培养10-20天(菌种长满瓶内培养基)。
三、栽培种培养及出黄培养
1、栽培种培养
取步骤二培养的原种，接入装有栽培培养基的栽培袋中，将栽培袋封口，25℃、60-65％相对湿度、避光条件下培养直至菌丝体长至栽培袋三分之二处(通常20-25天)。
2、出黄培养
完成步骤1后，在栽培袋自上而下的三分之一处开两个5-10厘米月牙形的口(两个口分别开在栽培袋相对应的位置)，在28℃、85-95％相对湿度、200Lux光照的条件下培养直至采收成熟桑黄子实体(通常30-60天)。
取出黄培养40天采收的桑黄子实体进行有效成分(粗多糖、总黄酮、粗蛋白和总三萜)检测。
粗多糖的检测方法参照“NY/T 1676-2008食用菌中粗多糖含量的测定”。
总黄酮的检测方法参照《保健食品检验与评价技术规范》2003版。
粗蛋白的检测方法参照“GB/T 15673-2009食用菌中粗蛋白含量的测定”。
总三萜的检测方法参照“DB34/T 485-2004大别山灵芝”。
结果表明，桑黄子实体中粗多糖含量为2.60g/100g，总黄酮含量为0.32g/100g，粗蛋白含量为20.0g/100g，总三萜含量为1.6g/100g。
上述栽培过程显示，桑黄菌株GY-S01，出黄快(菌丝体无需长满栽培袋，只需长至约三分之二处时即可)，自栽培袋接入菌种到形成子实体只需20天左右(整袋菌丝体接近三分之二)，略给光照刺激，子实体即可生长，可实现发菌与子实体生长同步进行。

Claims (10)

1.桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang)GY-S01，其保藏编号为CGMCC No.13579。
2.权利要求1所述的桑树桑黄在生产桑黄中的应用。
3.一种生产桑黄的方法，包括如下步骤：培养权利要求1所述的桑树桑黄，得到桑黄。
4.生产桑黄的方法，为方法甲或方法乙；
所述方法甲包括如下步骤：
(a1)将权利要求1所述的桑树桑黄的原种接种至含有栽培培养基的栽培袋中，进行栽培种培养直至菌丝体长至栽培袋三分之二处；
(a2)完成步骤(a1)后，进行出黄培养，得到桑黄；
所述方法乙包括如下步骤：
(b1)将权利要求1所述的桑树桑黄的原种接种至含有栽培培养基的栽培袋中，进行栽培种培养；所述栽培种培养的时间为20-25天；
(b2)完成步骤(b1)后，进行出黄培养，得到桑黄；
所述栽培培养基的原料组成为：70质量份桑树木屑、25质量份麸皮、4质量份豆粕、1质量份石膏粉和水；所述栽培培养基的水分含量为60-65％。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述出黄培养的条件为：25-30℃、85-95％相对湿度、100-250Lux光照。
6.如权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述“原种”是将母种接种于原种培养基上培养得到的；
所述原种培养基的原料组成为：80质量份小麦粒、19质量份桑树木屑、1质量份石膏粉和水；所述原种培养基的水分含量为50-55％。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述“母种”是将所述桑树桑黄接种于母种培养基上培养得到的；
每1000ml所述母种培养基的原料组成为：一份桑树木屑滤液、10g大豆蛋白胨、5g酵母膏、15g葡萄糖、20g琼脂、10mg维生素B1，余量为水；每一份桑树木屑滤液的制备方法如下：100g桑树木屑加入1000ml水，煮沸，过滤并收集滤液。
8.一种生产桑黄的试剂盒，包括权利要求4中所述的栽培培养基。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括权利要求6中所述的原种培养基。
10.如权利要求7或8所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括权利要求7中所述的母种培养基。
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