CN106901325A

CN106901325A - 一种灵芝全活性物质的制备与应用

Info

Publication number: CN106901325A
Application number: CN201710151876.XA
Authority: CN
Inventors: 刘斌; 郭伟灵; 陈弘培; 潘雨阳; 李田田; 贾瑞博; 吕旭聪; 花朋朋; 黄梓芮; 林占熺
Original assignee: Fujian Agriculture and Forestry University
Current assignee: Fujian Agriculture and Forestry University
Priority date: 2017-03-15
Filing date: 2017-03-15
Publication date: 2017-06-30

Abstract

本发明公开了一种灵芝全活性物质的制备与应用，其以灵芝为原料，将其粉碎后采用极性从小到大的乙醇溶液及水进行分步提取，再经复合蛋白酶酶解，分别得到灵芝85wt%‑95wt%醇提物、灵芝55wt%‑65wt%醇提物、灵芝水提取物及酶解物，即获得灵芝全活性物质。经药效性实验表明，所得灵芝活性物质具有极显著降低血清中总胆固醇(TC)以及甘油三酯（TG）的作用，可根据中医“君臣佐使”理论以及现代营养学理论，将其中的一种或几种与其他具有相同功效的药食同源活性成分复配，以制备具有增强免疫力、调节血糖、血脂、血压及保肝等功效的功能性食品。

Description

一种灵芝全活性物质的制备与应用

技术领域

本发明属于天然活性成分分离技术领域，具体涉及一种灵芝全活性物质的制备与应用。

背景技术

随着生活水平的提高和生活节奏的改变，被称为“富贵病”的“三高症”发病率越来越高，尤其高发于50岁以上的中老年人。高血脂可以引起血管栓塞；高血压可以引起脑出血和脑血管破裂；高血糖可以引起糖尿病。全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人，居各种死因首位。但目前临床上常用的口服降血糖血脂药均有副作用，可引起消化系统的不良反应，有些还会引起麻疹、贫血、白细胞和血小板减少、头晕和乏力等。因此寻找开发具有增强机体免疫力作用的保健食品，以辅助药物治疗，在有效的控制血糖和血脂的同时降低副作用已引起人们的关注。

灵芝，别名“红芝”、“丹芝”、“赤芝”和“仙草”等，属于单子菌纲，是我国一种著名的药食兼用的真菌，已有两千多年的历史记载，被称为“不朽的蘑菇”。在秦汉时期或者更早的《神农百草经》、陶弘景的《名医别录》、唐朝苏敬的《新修本草》和明朝李时珍的《本草纲目》等古典书籍上都记载了灵芝的药用价值。

灵芝药用价值在国内外近年来不断地更新，其含有的生物活性物质如多糖、氨基酸多肽、天然有机锗和三萜类化合物等，均对维护人体健康有重要的利用价值。已知灵芝的药用保健价值有：①抗癌作用：灵芝的多糖体能刺激抗体的形成，提高并调整机体内部的防御能力，降低某些物质诱发肿瘤的发生率，并对多种化疗药物有增效作用；②抗菌、抗病毒作用；③降血压、降血脂等；④增强免疫作用；⑤降血糖。

虽然灵芝有显著并且明确的降血脂降血压，以及抗癌、保肝健胃等功效，但目前在高效制备灵芝活性成分的技术上，往往存在活性物质制备不完全、制作工艺繁琐、利用率低等问题。针对这些问题，本发明提供了一种采用极性从小到大的溶剂提取制备灵芝活性物质的方法，而目前尚未见此类报道，且此方法对促进灵芝产品大规模工业化生产具有良好的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种灵芝全活性物质的制备方法及其应用，其可解决目前存在的活性物质制备不完全、制作工艺繁琐、利用率低等问题，对促进灵芝产品大规模工业化生产具有良好的应用前景。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种灵芝全活性物质的制备，其是以灵芝为原料，将其粉碎后采用极性从小到大的乙醇溶液及水进行分步提取，再经复合蛋白酶酶解，分别得到灵芝85wt%-95wt%醇提物、灵芝55wt%-65wt%醇提物、灵芝水提取物及酶解物，即获得灵芝全活性物质；

其制备方法包括如下步骤：

1）将灵芝用粉碎机磨成细粉备用；

2）将所得灵芝细粉用85wt%-95wt%的乙醇溶液为溶剂，于45-80℃条件下超声-微波协同萃取或超声辅助提取1-3次，每次0.5-4h，然后过滤，获得灵芝85wt%-95wt%醇提液；

3）将步骤2）中剩余的滤渣用55wt%-65wt%的乙醇溶液为溶剂，于45-80℃条件下超声-微波协同萃取或超声辅助提取1-3次，每次0.5-3h，然后过滤，获得灵芝55wt%-65wt%醇提液；

4）再将步骤3）剩余的滤渣用去离子水为溶剂，于60-90℃条件下超声-微波协同萃取或超声辅助提取1-3次，每次0.5-3h，然后过滤，获得灵芝水提液；

5）将步骤4）水提剩余物在45-50℃条件下，用灵芝细粉重量0.2-2%的复合蛋白酶酶解0.5-3h，然后过滤，以获得灵芝的酶解产物；

6）将步骤2）~5）所得产物经减压浓缩、冷冻干燥后，即分别制得灵芝85wt%-95wt%醇提物、灵芝55wt%-65wt%醇提物、灵芝水提物以及酶解物。

步骤2）~4）的提取过程中溶剂与物料的比例为1:10-1:30 g/mL。

本发明所得灵芝全活性物质具有极显著降低血清中总胆固醇(TC)以及甘油三酯（TG）的作用，可根据中医“君臣佐使”理论以及现代营养学理论，将其中的一种或几种与其他具有相同功效的药食同源活性成分复配，以制备具有增强免疫力、调节血糖、血脂、血压及保肝等功效的功能性食品。

本发明的有益之处在于：

（1）本发明利用极性从小到大的溶剂分步提取灵芝活性物质，再经过滤、浓缩、冷冻干燥，分别制备灵芝85wt%-95wt%醇提物、灵芝55wt%-65wt%醇提物、灵芝水提物以及酶解物，可实现灵芝活性物质的全面提取，简化提取步骤，方便工业化生产。

（2）根据中医的“君臣佐使”以及现代营养学理论，将本发明所得灵芝全活性物质中的一种或几种与其他具有相同功效的药食同源活性成分复配，制备的功能性食品长期食用可起到增强免疫力、调节血糖、血脂、血压等功效。

附图说明

图1为所得不同灵芝活性物质对高脂模型大鼠血脂水平的影响情况图，其中A为甘油三酯、B为总胆固醇、C为高密度脂蛋白、D为低密度脂蛋白（注：NFD：空白组；-：模型组；GL95：灵芝95%醇提物；GL55%：灵芝55%醇提物；GLWE：灵芝水提物；GLEM：灵芝酶解物；GLMX；阳性对照组（水飞激素）；*：与模型组比较P<0.05；**：与模型组比较P<0.01；#：与空白组比较P<0.05；##：与空白组比较P<0.01）。

具体实施方式

一种灵芝全活性物质，其制备方法包括如下步骤：

1）将灵芝用粉碎机磨成细粉备用；

2）按料液比1:10 g/mL将所得灵芝细粉用95wt%的乙醇溶液为溶剂，于45℃条件下超声-微波协同萃取或超声辅助提取3次，每次0.5h，然后过滤，获得灵芝95wt%醇提液；

3）按料液比1:10 g/mL将步骤2）中剩余的滤渣用55wt%的乙醇溶液为溶剂，于45℃条件下超声-微波协同萃取或超声辅助提取3次，每次0.5h，然后过滤，获得灵芝55wt%醇提液；

4）按料液比1:10 g/mL将步骤3）剩余的滤渣用去离子水为溶剂，于60℃条件下超声-微波协同萃取或超声辅助提取3次，每次0.5h，然后过滤，获得灵芝水提液；

5）将步骤4）水提剩余物在45℃条件下，用灵芝细粉重量0.2-2%的复合蛋白酶酶解3h，然后过滤，获得灵芝的酶解产物；

6）将步骤2）~5）所得产物经减压浓缩、冷冻干燥后分别制得灵芝95wt%醇提取、灵芝55wt%醇提物、灵芝水提物以及酶解物，即获得灵芝全活性物质。

图1为所得不同灵芝活性物质对高脂肪饲料喂养的Wistar大鼠血脂水平的影响情况图，其中A为甘油三酯、B为总胆固醇、C为高密度脂蛋白、D为低密度脂蛋白。由图1可见，所得灵芝活性物质（GL95、GL55、GLWE、GLEM）均具有极显著降低血清中总胆固醇（TC）以及甘油三酯（TG）、提高高密度脂蛋白（HDL）的作用。

为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。

实施案例1 一种调节血糖血脂的灵芝保健胶囊

1）将灵芝用粉碎机磨成细粉，按料液比1:20 g/mL加入95wt%的乙醇溶液，于60℃条件下超声辅助提取4h，然后过滤，获得灵芝95wt%醇提液；

2）按料液比1:20 g/mL，将步骤1）中剩余的滤渣用55wt%的乙醇溶液，于60℃条件下超声辅助提取3h，然后过滤，获得灵芝55wt%醇提液；

3）将茶树菇、海带分别加入其重量10倍的蒸馏水，浸泡2h后，武火煮沸1.5h，过滤；滤渣再加入其重量8倍的蒸馏水，武火煮1.5h，过滤；所得滤渣再次加入其重量4倍的蒸馏水，文火煮沸2 h，过滤；合并3次滤液，即分别得到茶树菇水提物及海带水提物；

4）将所得灵芝95wt%醇提液4重量份、灵芝55wt%醇提液8重量份与海带水提物8重量份，茶树菇水提物重量6份充分混合后，采用喷雾干燥器干燥，并将其装入胶囊中，制成具有降血糖、降血脂功效的灵芝保健胶囊。

实施案例2 一种调节血糖血脂的灵芝保健冲剂

1）将灵芝用粉碎机磨成细粉，按料液比1:30 g/mL加入95wt%的乙醇溶液，于80℃条件下超声-微波协同萃取2次，每次1h，然后过滤，获得灵芝95wt%醇提液；

2）按料液比1:30 g/mL，将步骤1）中剩余的滤渣用60wt%的乙醇溶液，于80℃条件下超声-微波协同萃取2次，每次1h，然后过滤，获得灵芝60wt%醇提液；

3）按料液比1:30 g/mL，将步骤2）剩余的滤渣用去离子水为溶剂，于90℃条件下超声-微波协同萃取2次，每次1h，然后过滤，获得灵芝水提液；

4）将步骤3）水提剩余物在50℃条件下，用灵芝细粉重量0.2%的复合蛋白酶酶解0.5h，然后过滤，以获得灵芝的酶解产物；

5）将所得灵芝95wt%醇提液5重量份、灵芝60wt%醇提液8重量份、灵芝水提取液10重量份以及酶解产物12重量份充分混合，用喷雾干燥器干燥，得到其混合物干粉，将其装入无菌罐中保存，制成具有降血糖、降血脂功效的灵芝保健冲剂。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims

1.一种灵芝全活性物质的制备，其特征在于：以灵芝为原料，将其粉碎后采用极性从小到大的乙醇溶液及水进行分步提取，再经复合蛋白酶酶解，分别得到灵芝85wt%-95wt%醇提物、灵芝55wt%-65wt%醇提物、灵芝水提取物及酶解物，即获得灵芝全活性物质。

2.根据权利要求书1所述灵芝全活性物质的制备，其特征在于：包括如下步骤：

1）将灵芝用粉碎机磨成细粉备用；

2）将所得灵芝细粉用85wt%-95wt%的乙醇溶液为溶剂，于45-80℃条件下超声-微波协同萃取或超声辅助提取1-3次，每次0.5-4h，经过滤获得灵芝85wt%-95wt%醇提液；

3）将步骤2）中剩余的滤渣用55wt%-65wt%的乙醇溶液为溶剂，于45-80℃条件下超声-微波协同萃取或超声辅助提取1-3次，每次0.5-3h，经过滤获得灵芝55wt%-65wt%醇提液；

4）再将步骤3）剩余的滤渣用去离子水为溶剂，于60-90℃条件下超声-微波协同萃取或超声辅助提取1-3次，每次0.5-3h，经过滤获得灵芝水提液；

5）将步骤4）水提剩余物在45-50℃条件下用复合蛋白酶酶解0.5-3h，然后过滤，获得灵芝的酶解产物；

6）将步骤2）~5）所得产物经减压浓缩、冷冻干燥后，即分别制得灵芝85wt%-95wt%醇提取、灵芝55wt%-65wt%醇提物、灵芝水提物以及酶解物。

3. 根据权利要求书2所述灵芝全活性物质的制备，其特征在于：提取过程中溶剂与物料的比例为1:10-1:30 g/mL。

4.根据权利要求书2所述灵芝全活性物质的制备，其特征在于：步骤5）中复合蛋白酶的添加量为灵芝细粉重量的0.2-2%。

5.一种如权利要求1所述方法制备的灵芝全活性物质的应用，其特征在于：将所得灵芝全活性物质中的一种或几种与具有相同功效的药食同源活性成分复配，制备具有增强免疫力、调节血糖、血脂、血压或保肝作用的功能性食品。