CN106896166B - 一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法 - Google Patents
一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106896166B CN106896166B CN201710045541.XA CN201710045541A CN106896166B CN 106896166 B CN106896166 B CN 106896166B CN 201710045541 A CN201710045541 A CN 201710045541A CN 106896166 B CN106896166 B CN 106896166B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mobile phase
- substance
- lieting
- love song
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 30
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 239000002994 raw material Substances 0.000 title claims abstract description 16
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 22
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims abstract description 18
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 18
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 15
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 10
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims abstract description 7
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 11
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical group [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 3
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims description 2
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 claims 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 74
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 abstract 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 39
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 32
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 21
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 19
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 13
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 9
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 6
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- SEGLCEQVOFDUPX-UHFFFAOYSA-N di-(2-ethylhexyl)phosphoric acid Chemical compound CCCCC(CC)COP(O)(=O)OCC(CC)CCCC SEGLCEQVOFDUPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- OGCNTTUPLQTBJI-XFULWGLBSA-N 2-[[6-[(3r)-3-aminopiperidin-1-yl]-3-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl]methyl]-4-fluorobenzonitrile;butanedioic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O.C=1C(F)=CC=C(C#N)C=1CN1C(=O)N(C)C(=O)C=C1N1CCC[C@@H](N)C1 OGCNTTUPLQTBJI-XFULWGLBSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 229940090124 dipeptidyl peptidase 4 (dpp-4) inhibitors for blood glucose lowering Drugs 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- 108010067722 Dipeptidyl Peptidase 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 1
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 1
- 101800000224 Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100040918 Pro-glucagon Human genes 0.000 description 1
- 102100037505 Secretin Human genes 0.000 description 1
- 108010086019 Secretin Proteins 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007806 chemical reaction intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000030136 gastric emptying Effects 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000001310 location test Methods 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N preproglucagon 78-108 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 229960002101 secretin Drugs 0.000 description 1
- OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N secretin human Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 229950010728 trelagliptin Drugs 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
- G01N21/33—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using ultraviolet light
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
本发明公开了一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,采用高效液相色谱法,其色谱条件包括:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,以pH=3.3‑3.7的磷酸盐缓冲水溶液和乙腈的体积比为88‑92:8‑12为流动相A,以pH=3.3‑3.7的磷酸盐缓冲水溶液和乙腈的体积比为18‑22:78‑82为流动相B,检测波长为218‑222nm,进行梯度洗脱。本发明检出的杂质多,能快速、有效、准确监控琥珀酸曲格列汀中的有关物质。
Description
技术领域
本发明涉及化学药物分析方法技术领域,尤其涉及一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法。
背景技术
琥珀酸曲格列汀(Trelagliptin succinate),化学名为2-({6-[(3R)-3-氨基哌啶-1-
基]-3-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基}甲基)-4-氟苄腈琥珀酸盐,其分子式为C18H20FN5O2·C4H6O4,分子量为475.47,CAS号为1029877-94-8,其结构式如下:
曲格列汀是一种二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂,通过抑制DPP-4的活性,使得血浆胰高血糖素样肽-1(GLP-1)活性水平持续升高,GLP-1是一种肠促胰素,具有葡萄糖依赖性促胰岛素分泌的特性,可通过促进β细胞的胰岛素分泌、抑制α细胞不适当的胰升糖素分泌、延缓胃排空及抑制食欲等多个途径参与机体血糖稳态调节;适用于2型糖尿病患者。琥珀酸曲格列汀是由日本武田(Takeda)公司开发上市的新型DPP-4抑制剂,2014年3月向日本卫生劳动福利部提交新药申请,2015年3月26日获批准以商品名上市,用于2型糖尿病的治疗,口服单剂量100mg,每周一次。琥珀酸曲格列汀的疗效在所有临床试验中均得到了证实,同时具有良好的安全性和耐受性,每周给药1次便可有效控制血糖水平,有望改善患者的用药依从性。
为了保证药物的安全有效,需要对药物原料及其制剂中的有关物质进行研究、检测和监控。申请号为CN201410547100.6的专利公开了一种琥珀酸曲格列汀及其制剂的有关物质检测方法,采用二极管阵列检测器,色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,流动相A为磷酸盐缓冲液,流动相B为乙腈,且所述的磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为60:40-85:15,磷酸盐缓冲液的pH值为5.0-5.5,磷酸盐缓冲液的浓度为0.05-0.1mol/L,检测波长为278nm。但该方法存在以下问题:1、该专利中未给出任何已知杂质,无法判断该方法的适用性;2、改方法的波长参数设置为278nm,不能涵盖所有杂质。由于药品的合成工艺不同,药品的杂质谱也会发生变化,因此需要根据不同的合成工艺建立合适的分析方法,达到对琥珀酸曲格列汀有关物质准确、有效的检测和监控。
发明内容
基本背景技术存在的技术问题,本发明提出了一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,本发明检出的杂质多,各杂质峰与主峰之间均能有效分离,专属性高,灵敏度高,重复性好,中间精密度好,回收率高,能快速、有效、准确监控琥珀酸曲格列汀中的有关物质。
本发明提出的一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,采用高效液相色谱法,其色谱条件包括:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,以pH=3.3-3.7的磷酸盐缓冲水溶液和乙腈的体积比为88-92:8-12为流动相A,以pH=3.3-3.7的磷酸盐缓冲水溶液和乙腈的体积比为18-22:78-82为流动相B,检测波长为218-222nm,进行梯度洗脱;
所述梯度洗脱过程为:0.01-5min内,流动相A和流动相B的体积比为94:6;5-50min内,流动相A和流动相B的体积比从94:6匀速渐变至40:60;50-50.01min内,流动相A和流动相B的体积比从40:60匀速渐变至94:6;50.01-60min内,流动相A和流动相B的体积比为94:6。
优选地,色谱柱的长度为250mm,直径为4.6mm,填料粒径为5μm。
优选地,流动相A中,pH=3.3-3.7的磷酸盐缓冲水溶液和乙腈的体积比可以为88.5:11.5、89:11、89.5:10.5、90:10、90.5:9.5、91:9或91.5:8.5。
优选地,流动相B中,pH=3.3-3.7的磷酸盐缓冲水溶液和乙腈的体积比可以为18.5:81.5、19:81、19.5:80.5、20:80、20.5:79.5、21:79或21.5:78.5。
优选地,检测波长可以为218.1、218.2、218.3、218.4、218.5、218.6、218.7、218.8、218.9、219、219.1、219.2、219.3、219.4、219.5、219.6、219.7、219.8、219.9、220、220.1、220.2、220.3、220.4、220.5、220.6、220.7、220.8、220.9、221、221.1、221.2、221.3、221.4、221.5、221.6、221.7、221.8或221.9nm。
优选地,磷酸盐缓冲水溶液的pH可以为3.31、3.32、3.33、3.34、3.35、3.36、3.37、3.38、3.39、3.4、3.41、3.42、3.43、3.44、3.45、3.46、3.47、3.48、3.49、3.5、3.51、3.52、3.53、3.54、3.55、3.56、3.57、3.58、3.59、3.6、3.61、3.62、3.63、3.64、3.65、3.66、3.67、3.68或3.69。
优选地,磷酸盐缓冲水溶液中,用磷酸调节pH=3.3-3.7。
优选地,磷酸盐缓冲水溶液中,磷酸盐的浓度为0.02-0.03mol/L。
优选地,磷酸盐缓冲水溶液中,磷酸盐的浓度可以为0.021、0.022、0.023、0.024、0.025、0.026、0.027、0.028或0.029mol/L。
优选地,磷酸盐缓冲水溶液中,磷酸盐为磷酸二氢钾。
优选地,流速为0.95-1.05ml/min。
优选地,流速可以为0.96、0.97、0.98、0.99、1.0、1.01、1.02、1.03或1.04ml/min。
优选地,柱温为30-40℃。
优选地,柱温为30.5、31、31.5、32、32.5、33、33.5、34、34.5、35、35.5、36、36.5、37、37.5、38、38.5、39或39.5℃。
优选地,进样量为5-50μl。
优选地,进样量为6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48或49μl。
优选地,所述有关物质为:
上述杂质中,杂质1和杂质11为起始原料,杂质7为中间体,杂质3、4、6、8、9、10为工艺杂质,杂质2、5为降解杂质。
本发明的具体步骤为:分别配制系统适用性溶液、对照溶液和供试品溶液并进样,通过加校正因子的主成分自身对照法计算供试品中各杂质的含量。
上述系统适用性溶液为:分别取杂质1、2、3、4、6、8、10、11对照品各约12.5mg,精密称定,分别置25ml量瓶中,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,分别作为杂质对照品贮备液一;另取杂质5、7、9对照品各约12.5mg,精密称定,分别置25ml量瓶中,加乙腈适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为杂质对照品贮备液二;另取琥珀酸曲格列汀对照品约12.5mg,精密称定,置25ml量瓶中,加初始比例流动相使溶解,取上述杂质对照品贮备液一、杂质对照品贮备液二各0.25ml置同一25ml量瓶中,加初始比例流动相稀释至刻度,摇匀,作为系统适用性溶液。
上述供试品溶液为:取琥珀酸曲格列汀供试品适量,精密称定,用初始比例流动相溶解并定容得到含琥珀酸曲格列汀浓度为0.5mg/ml的供试品溶液。
上述对照溶液为:精密量取供试品溶液1.0ml于100ml量瓶中,用初始比例流动相定容至刻度,摇匀得到对照溶液。
上述初始比例流动相为流动相A和流动相B的体积比为94:6,即为空白溶剂。
本发明人对琥珀酸曲格列汀、杂质1-11分别进行紫外吸收光谱扫描,结果见表1和图1-12:
表1琥珀酸曲格列汀和各杂质的紫外吸收波长
物质名称 | 杂质1 | 杂质2 | 杂质3 | 杂质4 | 杂质5 | 杂质6 |
最大吸收波长nm | 259 | 275 | 274 | 274 | 222、259 | 273 |
物质名称 | 杂质7 | 杂质8 | 杂质9 | 杂质10 | 杂质11 | 琥珀酸曲格列汀 |
最大吸收波长nm | 224、260 | 274 | 265 | 275 | 228 | 272 |
由表1和图1-12可以看出,琥珀酸曲格列汀及各杂质在220nm波长处均有较大紫外吸收,在此波长处可充分检出杂质,因此,选择220nm波长作为本品有关物质检查波长。
本发明人通过筛选合适流动性组分并优化各组分比例,以及筛选合适的其他色谱条件,对琥珀酸曲格列汀以及上述11个杂质进行色谱分析,确定了本发明分析方法,通过对起始原料、反应中间体、工艺杂质、降解杂质、琥珀酸曲格列汀的峰定位试验,干扰性试验和琥珀酸曲格列汀的降解试验对本发明进行专属性验证,结果见表2和图13:
表2专属性验证结果
由表2和图13可以看出,各杂质峰之间、曲格列汀主峰及其相邻杂质峰之间的分离度均大于1.5,曲格列汀主峰的理论板数大于3000,本发明的专属性好。
本发明人还选用市场上常用的制备琥珀酸曲格列汀制剂的药用辅料和空白溶剂对本发明进行了研究,发现常用的药用辅料和空白溶剂对本发明没有干扰。
本发明人对琥珀酸曲格列汀和各杂质的检测限、定量限、线性、校正因子进行检测,结果见表3:
表3琥珀酸曲格列汀和各杂质的检测限、定量限、线性、校正因子试验结果
上述报告限度是指超出此限度的杂质均应在检测报告中报告,并应报告具体的检测数据。
由表3可以看出,本发明对各杂质检测灵敏度均较高,其检测限和定量限均小于报告限度,并且琥珀酸曲格列汀和各杂质在较低浓度范围内线性关系良好。
本发明人配制供试品溶液,分别于配制后的0、2、4、8和12h进样并记录图谱,统计供试品中琥珀酸曲格列汀峰面积,计算相对标准偏差RSD为0.16%,各时间点均未检出各已知杂质,也未新增杂质,结果表明,供试品溶液在12h内稳定。
本发明人对各杂质进行回收率试验,结果见表4:
表4各杂质的回收率验证结果
由表4可以看出,本发明的回收率试验结果符合要求,本发明回收率高。
本发明人取琥珀酸曲格列汀配制供试品溶液,进样并记录图谱,按加校正因子自身对照法计算供试品中杂质1-11的含量,结果见表5和图14。
表5琥珀酸曲格列汀中各杂质的含量测定结果
由表5和图14可以看出,琥珀酸曲格列汀供试品中未检出已知杂质,检出2未知杂质,但含量均小于报告限度。
本发明检出的杂质多,能快速、有效、准确监控琥珀酸曲格列汀中的有关物质;本发明具有良好的专属性,各杂质峰之间、琥珀酸曲格列汀主成分峰及其相邻杂质峰之间的分离度均大于1.5,曲格列汀主峰的理论板数大于3000,杂质峰和主峰可以有效分离;本发明检测限、定量限均较小,本发明的灵敏度好;本发明的回收率高,可以准确测量琥珀酸曲格列汀原料和制剂中的有关物质;本发明通过加校正因子自身对照法对上述11个杂质进行定量分析,增加本发明有关物质检测的准确性。
附图说明
图1为杂质1紫外扫描图。
图2为杂质2紫外扫描图。
图3为杂质3紫外扫描图。
图4为杂质4紫外扫描图。
图5为杂质5紫外扫描图。
图6为杂质6紫外扫描图。
图7为杂质7紫外扫描图。
图8为杂质8紫外扫描图。
图9为杂质9紫外扫描图。
图10为杂质10紫外扫描图。
图11为杂质11紫外扫描图。
图12为琥珀酸曲格列汀紫外扫描图。
图13为系统适用性溶液高效液液相色谱图。
图14为琥珀酸曲格列汀原料有关物质高效液液相色谱图。
图15为琥珀酸曲格列汀制剂有关物质高效液液相色谱图。
具体实施方式
下面,通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
实施例1
高效液相色谱条件:
十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(250×4.6mm,5μm),以磷酸调节pH=3.5的磷酸二氢钾缓冲水溶液和乙腈的体积比为90:10为流动相A,以磷酸调节pH=3.5的磷酸二氢钾缓冲水溶液和乙腈的体积比为20:80为流动相B,检测波长为220nm,流速为1.0ml/min,柱温为35℃,其中,磷酸二氢钾缓冲水溶液中,磷酸二氢钾的浓度为0.025mol/L,进行梯度洗脱;
所述梯度洗脱过程为:0.01-5min内,流动相A和流动相B的体积比为94:6;5-50min内,流动相A和流动相B的体积比从94:6匀速渐变至40:60;50-50.01min内,流动相A和流动相B的体积比从40:60匀速渐变至94:6;50.01-60min内,流动相A和流动相B的体积比为94:6。
样品配制:
系统适用性溶液:分别取杂质1、2、3、4、6、8、10、11对照品各约12.5mg,精密称定,分别置25ml量瓶中,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,分别作为杂质对照品贮备液一;另取杂质5、7、9对照品各约12.5mg,精密称定,分别置25ml量瓶中,加乙腈适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为杂质对照品贮备液二;另取琥珀酸曲格列汀对照品约12.5mg,精密称定,置25ml量瓶中,加初始比例流动相使溶解,取上述杂质对照品贮备液一、杂质对照品贮备液二各0.25ml置同一25ml量瓶中,加初始比例流动相稀释至刻度,摇匀,作为系统适用性溶液。
试验操作:取系统适用性溶液20μl进样,记录色谱图。
典型色谱图见图13。
实施例2
高效液相色谱条件:
十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(250×4.6mm,5μm),以磷酸调节pH=3.3的磷酸二氢钾缓冲水溶液和乙腈的体积比为92:8为流动相A,以磷酸调节pH=3.3的磷酸二氢钾缓冲水溶液和乙腈的体积比为22:78为流动相B,检测波长为222nm,流速为0.95ml/min,柱温为40℃,其中,磷酸二氢钾缓冲水溶液中,磷酸二氢钾的浓度为0.02mol/L,进行梯度洗脱;所述梯度洗脱过程同实施例1。
样品配制:
系统适用性溶液:同实施例1。
供试品溶液:取琥珀酸曲格列汀供试品适量,精密称定,用初始比例流动相溶解并定容得到含琥珀酸曲格列汀浓度为0.5mg/ml的供试品溶液。
对照溶液:精密量取供试品溶液1.0ml于100ml量瓶中,用初始比例流动相定容至刻度,摇匀得到对照溶液。
试验操作:取系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液各50μl进样,记录色谱图。
实施例3
高效液相色谱条件:
十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(250×4.6mm,5μm),以磷酸调节pH=3.7的磷酸二氢钾缓冲水溶液和乙腈的体积比为88:12为流动相A,以磷酸调节pH=3.7的磷酸二氢钾缓冲水溶液和乙腈的体积比为18:82为流动相B,检测波长为218nm,流速为1.05ml/min,柱温为30℃,其中,磷酸二氢钾缓冲水溶液中,磷酸二氢钾的浓度为0.03mol/L,进行梯度洗脱;所述梯度洗脱过程同实施例1。
样品配制:
系统适用性溶液:同实施例1。
供试品溶液:同实施例2。
对照溶液:同实施例2。
试验操作:取系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液各5μl进样,记录色谱图。
实施例4
高效液相色谱条件:同实施例1。
样品配制:
系统适用性溶液:同实施例1。
供试品溶液:同实施例2。
对照溶液:同实施例2。
试验操作:取系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液各20μl进样,记录色谱图。
典型色谱图见图14。
实施例5
高效液相色谱条件:同实施例1。
样品配制:
系统适用性溶液:同实施例1。
供试品溶液:取规格为50mg的琥珀酸曲格列汀片10片,研碎混匀,取细粉适量(约相当于含琥珀酸曲格列汀25mg),精密称定,置50ml量瓶中,用初始比例流动相溶解并定容,过滤得到供试品溶液。
对照溶液:精密量取供试品溶液1.0ml于100ml量瓶中,用初始比例流动相定容至刻度,摇匀得到对照溶液。
试验操作:取系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液各20μl进样,记录色谱图。
典型色谱图见图15。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,其特征在于,采用高效液相色谱法,其色谱条件包括:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,以pH=3.3-3.7的磷酸盐缓冲水溶液和乙腈的体积比为88-92:8-12为流动相A,以pH=3.3-3.7的磷酸盐缓冲水溶液和乙腈的体积比为18-22:78-82为流动相B,检测波长为218-222nm,进行梯度洗脱;
所述梯度洗脱过程为:0.01-5min内,流动相A和流动相B的体积比为94:6;5-50min内,流动相A和流动相B的体积比从94:6匀速渐变至40:60;50-50.01min内,流动相A和流动相B的体积比从40:60匀速渐变至94:6;50.01-60min内,流动相A和流动相B的体积比为94:6;
所述有关物质为:
2.根据权利要求1所述琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,其特征在于,色谱柱的长度为250mm,直径为4.6mm,填料粒径为5μm。
3.根据权利要求1或2所述琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,其特征在于,磷酸盐缓冲水溶液中,用磷酸调节pH=3.3-3.7。
4.根据权利要求1或2所述琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,其特征在于,磷酸盐缓冲水溶液中,磷酸盐的浓度为0.02-0.03mol/L。
5.根据权利要求1或2所述琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,其特征在于,磷酸盐缓冲水溶液中,磷酸盐为磷酸二氢钾。
6.根据权利要求1或2所述琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,其特征在于,流速为0.95-1.05ml/min。
7.根据权利要求1或2所述琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,其特征在于,柱温为30-40℃。
8.根据权利要求1或2所述琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法,其特征在于,进样量为5-50μl。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710045541.XA CN106896166B (zh) | 2017-01-22 | 2017-01-22 | 一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710045541.XA CN106896166B (zh) | 2017-01-22 | 2017-01-22 | 一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106896166A CN106896166A (zh) | 2017-06-27 |
CN106896166B true CN106896166B (zh) | 2019-08-09 |
Family
ID=59198274
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710045541.XA Active CN106896166B (zh) | 2017-01-22 | 2017-01-22 | 一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106896166B (zh) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107884496B (zh) * | 2017-11-14 | 2020-12-22 | 杭州新博思生物医药有限公司 | 一种琥珀酸曲格列汀中琥珀酸的含量测定方法 |
CN108680678B (zh) * | 2018-06-20 | 2021-08-06 | 江苏万川医疗健康产业集团有限公司 | 测定曲格列汀有关物质的方法 |
CN109668988B (zh) * | 2019-02-27 | 2021-07-02 | 浙江华贝药业有限责任公司 | 一种分析测定琥珀酸曲格列汀中2-(二溴甲基)-4-氟苯腈的方法 |
CN110305106B (zh) * | 2019-06-20 | 2021-05-25 | 石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司 | 一种琥珀酸曲格列汀有关物质及其制备方法、分析方法和应用 |
CN111116560A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-05-08 | 北京鑫开元医药科技有限公司 | 一种琥珀酰胺衍生物的制备方法 |
CN113004244A (zh) * | 2019-12-19 | 2021-06-22 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种曲格列汀杂质及其制备方法和用途 |
CN111253372A (zh) * | 2020-02-23 | 2020-06-09 | 北京鑫开元医药科技有限公司 | 一种琥珀酸曲格列汀二聚体的制备方法及用途 |
CN111458423A (zh) * | 2020-03-22 | 2020-07-28 | 浙江华贝药业有限责任公司 | 一种分析测定琥珀酸曲格列汀中2-氰基-5-氟溴苄的方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104237421A (zh) * | 2014-10-15 | 2014-12-24 | 济南春和景明医药技术有限公司 | 一种琥珀酸曲格列汀及其制剂的有关物质检测方法 |
CN105699547A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-06-22 | 中山万汉医药科技有限公司 | 一种测定琥珀酸曲格列汀原料中有关物质的方法 |
CN105738517A (zh) * | 2016-02-24 | 2016-07-06 | 中山万汉医药科技有限公司 | 一种测定曲格列汀片中有关物质的方法 |
CN106074422A (zh) * | 2016-07-27 | 2016-11-09 | 上海海虹实业(集团)巢湖今辰药业有限公司 | 一种琥珀酸曲格列汀口服固体制剂及其制备方法 |
CN106290596A (zh) * | 2015-05-28 | 2017-01-04 | 中美华世通生物医药科技(武汉)有限公司 | 分离分析琥珀酸曲格列汀及其制剂有关物质的方法 |
-
2017
- 2017-01-22 CN CN201710045541.XA patent/CN106896166B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104237421A (zh) * | 2014-10-15 | 2014-12-24 | 济南春和景明医药技术有限公司 | 一种琥珀酸曲格列汀及其制剂的有关物质检测方法 |
CN106290596A (zh) * | 2015-05-28 | 2017-01-04 | 中美华世通生物医药科技(武汉)有限公司 | 分离分析琥珀酸曲格列汀及其制剂有关物质的方法 |
CN105738517A (zh) * | 2016-02-24 | 2016-07-06 | 中山万汉医药科技有限公司 | 一种测定曲格列汀片中有关物质的方法 |
CN105699547A (zh) * | 2016-04-22 | 2016-06-22 | 中山万汉医药科技有限公司 | 一种测定琥珀酸曲格列汀原料中有关物质的方法 |
CN106074422A (zh) * | 2016-07-27 | 2016-11-09 | 上海海虹实业(集团)巢湖今辰药业有限公司 | 一种琥珀酸曲格列汀口服固体制剂及其制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Identification,characterization and HPLC quantification of process-related impurities in Trelagliptin succinate bulk drug:Six identified as new compounds;Hui Zhang等;《Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis》;20160510;第128卷;第18~27页 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN106896166A (zh) | 2017-06-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106896166B (zh) | 一种琥珀酸曲格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法 | |
CN105334274B (zh) | 枸橼酸托法替布含量及其有关物质的反相高效液相色谱法测定方法 | |
CN104749269B (zh) | 一种利用hplc测定阿格列汀原料药及制剂中对映异构体杂质的方法 | |
CN105301126B (zh) | 一种托匹司他有关物质的分析方法 | |
CN110455944A (zh) | 一种同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法 | |
Kadi et al. | A validated stability-indicating HPLC method for determination of varenicline in its bulk and tablets | |
CN108318610A (zh) | 一种苯甲酸阿格列汀原料及其制剂中有关物质的分析方法 | |
CN114113346B (zh) | 一种达比加群酯原料药或制剂中对甲苯磺酸乙酯、对甲苯磺酸异丙酯的检测方法 | |
CN111721858B (zh) | 一种测定利伐沙班中基因毒性杂质的方法 | |
CN114965720A (zh) | 一种测定氢溴酸伏硫西汀有关物质的方法 | |
CN115308347B (zh) | 一种托吡司特中氮氧化物杂质的分析方法 | |
Trivedi et al. | A rapid, stability indicating RP-UPLC method for determination of paliperidone palmitate in a depot injectable formulation | |
CN106841415A (zh) | 一种阿齐沙坦原料及其制剂中有关物质的分析方法 | |
CN106124667B (zh) | 一种分离测定西格列汀有关物质的方法 | |
CN112763622B (zh) | 一种液相色谱测定法匹拉韦的方法 | |
CN106153756B (zh) | 一种检测依维莫司中雷帕霉素的高效液相色谱法 | |
CN105277628B (zh) | 通过高效液相色谱法分离测定雷美替胺及其杂质的方法 | |
CN114441677B (zh) | 一种同时检测三苯乙酸维兰特罗多种基因杂质的方法 | |
CN116678982B (zh) | 一种棕榈酸帕利哌酮杂质sm1-g的检测方法 | |
CN114609289B (zh) | 一种奥美沙坦酯氨氯地平复方制剂中杂质的检测方法 | |
CN103175927A (zh) | 一种他替瑞林及其制剂的含量测定和杂质测定的方法 | |
Koduru et al. | Stability-indicating RP-HPLC method applied to the quantification of anti-histaminic drug ebastine in its oral suspension dosage form | |
CN115656364A (zh) | 一种利福平中有关物质的检测方法及其在mnp监测中的应用 | |
Foppa et al. | Development, validation and stability study of pediatric atenolol syrup | |
CN111257458B (zh) | 一种3-奎宁环酮盐酸盐的检测方法及应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |