CN106868062A - 一种发酵丙酸及其盐的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种发酵丙酸及其盐的方法,将产酸丙酸杆菌活化,接种于含有丙酸的种子培养基,在无氧条件下,25℃,培养36h;将所得菌液接种于发酵培养基中,在无氧条件下,恒温25℃,运算160rpm,发酵至PH稳定,期间通过碱或盐溶液将PH值保持在7。所述种子培养基中:丙酸按重量体积百分比为1%-1.5%g/ml。本发明所述发酵生产丙酸的方法在种子培养基中加入丙酸对产酸丙酸杆菌进行诱导培养,进一步在发酵过程中对发酵pH进行分段控制,可以提高丙酸的含量,缩短丙酸发酵时间,明显提高丙酸的生产效率。
Description
技术领域
本发明涉及微生物发酵技术领域,具体涉及一种发酵丙酸及其盐的方法。
背景技术
丙酸及其钙盐作为一种防腐保鲜剂,对于霉菌、酵母菌及细菌等具有广泛的抗菌作用,尤其是丙酸钙,在酸性条件下,产生游离丙酸,具有抗菌作用。在酸性介质(淀粉、含蛋白质和油脂物质)中丙酸及其钙盐对各类霉菌、革兰氏阴性杆菌或好氧芽孢杆菌有较强的抑制作用,还可以抑制黄曲霉素的产生,而对酵母菌无害,对人畜无害,无毒副作用,并能给人畜提供必需的钙。因此丙酸及其钙盐是食品、酿造、饲料、中药制剂诸方面的一种新型、安全、高效的食品与饲料用防霉剂,被广泛的应用于食品、饲料、医药等方面。
发明内容
本发明目的是提供一种发酵丙酸及其盐的方法。
为实现本发明的目的采用如下技术方案:
一种发酵丙酸及其盐的方法,将产酸丙酸杆菌活化,接种于含有丙酸的种子培养基,在无氧条件下,25℃,培养36h;
将所得菌液接种于发酵培养基中,在无氧条件下,恒温25℃,运算160rpm,发酵至PH稳定,期间通过碱或盐溶液将PH值保持在7。
所述种子培养基中:丙酸按重量体积百分比为1%-1.5%g/ml。
产酸丙酸杆菌的接种量为3v/v%~4v/v%。
所述种子培养基按重量体积百分比计算,酵母浸膏1.2-1.5%、牛肉汤1-2%、磷酸氢二钾1-2%、磷酸二氢钾1.5-2.5%、甘油5-10%,余量为水,pH 7.0。
所述发酵培养基按重量体积百分比为酵母浸膏2.5-3%、蛋白胨1-2%、磷酸氢二钾0.5-1.5%、磷酸二氢钾0.25-1%、甘油4-10%,余量为水,pH7.0。
所述产酸丙酸杆菌接种于种子培养基的接种量为3-8v/v%。
本发明的优点是:本发明所述发酵生产丙酸的方法在种子培养基中加入丙酸对产酸丙酸杆菌进行诱导培养,进一步在发酵过程中对发酵pH进行分段控制,可以提高丙酸的含量,缩短丙酸发酵时间,明显提高丙酸的生产效率。
具体实施方式
一种发酵丙酸及其盐的方法,将产酸丙酸杆菌活化,接种于含有丙酸的种子培养基,在无氧条件下,25℃,培养36h;
将所得菌液接种于发酵培养基中,在无氧条件下,恒温25℃,运算160rpm,发酵至PH稳定,期间通过碱或盐溶液将PH值保持在7。
所述种子培养基中:丙酸按重量体积百分比为1%-1.5%g/ml。
产酸丙酸杆菌的接种量为3v/v%~4v/v%。
所述种子培养基按重量体积百分比计算,酵母浸膏1.2-1.5%、牛肉汤1-2%、磷酸氢二钾1-2%、磷酸二氢钾1.5-2.5%、甘油5-10%,余量为水,pH 7.0。
所述发酵培养基按重量体积百分比为酵母浸膏2.5-3%、蛋白胨1-2%、磷酸氢二钾0.5-1.5%、磷酸二氢钾0.25-1%、甘油4-10%,余量为水,pH7.0。所述产酸丙酸杆菌接种于种子培养基的接种量为3-8v/v%。
实施例1
一、预处理
将常规甘油保藏的产酸丙酸杆菌按照1%的接种量接种于装有种子培养基的厌氧瓶(100ml厌氧瓶装100ml种子培养基)中,向厌氧瓶中充氮气后,置于25℃培养箱静置培养36h。按重量体积百分比(g/ml)计,种子培养基的成分为,酵母浸膏:1.5%、牛肉汤:1.5%、磷酸氢二钾:2.5%、磷酸二氢钾:1.5%、甘油:8%,余量为水,pH 7.0。
二、种子液
将上述厌氧瓶培养所得菌种按照1%的接种量无菌转入装有种子培养基的厌氧瓶(250ml厌氧瓶装200ml种子培养基),充入无菌氮气,培养温度为25℃,时间为36h。按重量体积百分比(g/ml)计,种子培养基的成分为,酵母浸膏:3%、蛋白胨:1.5%、磷酸氢二钾:1.2%、磷酸二氢钾:0.5%、甘油:8%,余量为水,pH 7.0。
三、生产发酵
1、在10L发酵罐中投入6L发酵培养基,发酵培养基成分:按重量体积百分比计,酵母浸膏:3%、蛋白胨:1.5%、磷酸氢二钾:1.2%、磷酸二氢钾:0.5%、甘油:8%,余量为水,pH 7.0。
2、将种子液按照10%的接种量接种于发酵罐中;
发酵生产:培养温度为25℃,搅拌速率80rpm,并保持氮气的持续充入。通过流加重量体积比(g/ml)为10%的Ca(OH)2溶液,将pH值维持在7.0。
3、发酵过程结束:
当pH值不再变化,发酵停止,离子色谱法测量丙酸含量。结果见表1。
表1 色谱测量结果
结果显示,样品稀释200倍,丙酸含量为33.7g/L,发酵所用时间为235h,发酵液终体积为7.0L,丙酸生产速率为0.143g/(L·h)。
对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种发酵丙酸及其盐的方法,其特征在于:
将产酸丙酸杆菌活化,接种于含有丙酸的种子培养基,在无氧条件下,25℃,培养36h;
将所得菌液接种于发酵培养基中,在无氧条件下,恒温25℃,运算160rpm,发酵至PH稳定,期间通过碱或盐溶液将PH值保持在7。
2.根据权利要求1所述的一种发酵丙酸及其盐的方法,其特征在于:
所述种子培养基中:丙酸按重量体积百分比为1%-1.5%g/ml。
3.根据权利要求1的一种发酵丙酸及其盐的方法,其特征在于:产酸丙酸杆菌的接种量为3v/v%~4v/v%。
4.根据权利要求1一种发酵丙酸及其盐的方法,其特征在于:
所述种子培养基按重量体积百分比计算,酵母浸膏1.2-1.5%、牛肉汤1-2%、磷酸氢二钾1-2%、磷酸二氢钾1.5-2.5%、甘油5-10%,余量为水,pH 7.0。
5.根据权利要求1一种发酵丙酸及其盐的方法,其特征在于:
所述发酵培养基按重量体积百分比为酵母浸膏2.5-3%、蛋白胨1-2%、磷酸氢二钾0.5-1.5%、磷酸二氢钾0.25-1%、甘油4-10%,余量为水,pH7.0。
6.根据权利要求1一种发酵丙酸及其盐的方法,其特征在于:
所述产酸丙酸杆菌接种于种子培养基的接种量为3-8v/v%。
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