CN106632540A

CN106632540A - 一种甜茶苷的提取方法

Info

Publication number: CN106632540A
Application number: CN201610958878.5A
Authority: CN
Inventors: 陈力健; 兰永凤; 毛丹翎
Original assignee: Guangxi Jinxiu Flavors & Fragrances Co Ltd
Current assignee: Guangxi Jinxiu Flavors & Fragrances Co Ltd
Priority date: 2016-10-27
Filing date: 2016-10-27
Publication date: 2017-05-10

Abstract

本发明公开了一种甜茶苷的提取方法，步骤包括，将甜茶粉碎，用缓冲溶液提取，纤维素酶水解，30‑40℃提取后进行酶灭活，再在70‑90℃进行水提；提取液浓缩后与滤渣进行乙醇的微波提取，提取液浓缩后通过大孔树脂层析，丙酮作为洗脱剂，收集洗脱液浓缩成浸膏，进行聚酰胺柱纯化，先用水淋洗除杂，再用体积分数为10‑30%的乙醇淋洗除杂，最后用体积分数50‑70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得甜茶苷提取物。本发明方法缩短了提取时间，提高了效率，提取的甜茶苷产品提取率不低于80%，纯度不低于99%，为纯白色结晶，是高含量高品质甜茶提取物，无苦味，甜度高，满足了市场对高品质甜茶苷产品的需求问题。

Description

一种甜茶苷的提取方法

技术领域

本发明涉及化工提取技术领域，尤其是一种甜茶苷的提取方法。

背景技术

广西甜茶Rubus Suatrssimus S.Lee是蔷薇科多年生藤木，为广西特有的多年生无毒、低热能、高甜度和具有保健功能的野生珍稀甜味植物，主产于广西的瑶山、金秀、永福和岑溪等县市。由于其味甜，故名甜茶。与罗汉果、合浦珍珠、广西香料等齐名为广西四大名品。在广西民间具有悠久的应用历史，长期以来当地人民一直当茶饮用，亦用来代糖加工食品，还可入药。

甜茶叶的主要成分有甜茶苷、生物类黄酮、茶多酚、氨基酸、无机盐、硒、锗等。主要甜味成分是甜茶苷，为斯替维醇和葡萄糖结合而成的四环二萜苷，分子式 C₂₀H₅₀O₁₃, 在化学结构上与甜叶菊苷（斯替维苷）相似。甜茶苷是一种高甜度低热量的天然甜味剂，拿常见的蔗糖作对比，甜茶苷的甜度为它的300倍，而热值仅是它的5%。经药理实验，甜茶苷能激活人的胰岛素，具有降血糖、降血压、促进新陈代谢、抑制胃酸过多，清热润肺、生生津解渴、降低血胆固醇、抑制和廷缓血管硬化、防治冠心病和糖尿病，并有高甜度、低热值的特性，不但可作为药用，还是口感好，是一种品质优良的食品添加剂、调味品，可代替蔗糖用于高血压、糖尿病、肥胖症、肾虚病等患者以及老年人和儿童的食品、保健品和药品中。

以下是检索到的专利：

1. 中国专利，名称：一种从甜茶叶中提取甜茶苷的生产方法，申请号：201210302985.4，公布号：CN 102838644 A，申请人：长沙绿蔓生物科技有限公司，发明人：张宝堂，文晴，摘要：本发明提供了一种从甜茶中提取甜茶苷的生产方法。该方法的工艺流程如下：甜茶原料药破碎→溶剂提取→浓缩→乙醇沉淀→大孔树脂纯化→浓缩→聚酰胺树脂层析→浓缩→结晶和重结晶→干燥→成品。使用该方法能生产出高品质的甜茶苷产品，减少物料损失，缩短生产周期，提高产品收率，降低生产成本，并且适合于工业化生产。利用该方法生产出的甜茶苷纯度高于98%，产品纯度高，成分较单一；颜色纯白，色泽好；同时克服了工业化生产高含量高品质的甜茶提取物的技术难点，顺利的实现了规模化生产。

2.中国专利，名称：一种提取甜茶苷的新方法，申请号：201410402940.3，公布号：CN 104262425 A，申请人：桂林莱茵生物科技股份有限公司，发明人：赵军，杨文国，李元元，罗勇为，黄华凤，摘要：本发明涉及一种提取甜茶苷的新方法，包括：原料粉碎、溶剂提取、膜浓缩、离心、调 pH值、大孔树脂纯化、碱酸处理、洗脱、浓缩、复合离子交换树脂层析、浓缩、结晶、干燥后得到成品，本方法能够得到纯度99％的甜茶苷产品，并且产品雪白，无苦味，溶剂残留少，无农药残留。同时本方法大大减少了生产工序，节约生产成本，工艺稳定性好。

3. 中国专利，名称：一种高纯度甜茶苷的制备方法，申请号：201510627954.X，公布号：CN 105166198 A，申请人：重庆骄王天然产物股份有限公司，发明人：杨刚柱，徐小琴，卫伟，薛荣涛，摘要：一种高纯度甜茶苷的制备方法，涉及食品加工领域。针对上述缺点，提供一种处理过程简单，无污染、能耗低，产物纯度高的高纯度甜茶苷制备方法。该制备方法包括以下步骤：（1）将甜茶叶粉碎，经水提取后得到甜茶粉提取液；（2）提取液经中空纤维超滤膜和反渗透膜，得到浓缩液；（3）浓缩液干燥、粉碎，得到甜茶苷粗品；（4）甜茶苷粗品用乙醇溶解，过滤，重结晶，得到一次结晶产物；（5）一次结晶产物用乙醇溶解，过滤，重结晶，得到高纯度甜茶苷。该制备方法处理过程无污染，通过膜系统使得分离和浓缩步骤合一，降低处理难度，得到的甜茶苷纯度可以达到98%以上。

国内外对甜茶苷的分离提取、测试及药理等方面进行了研究，对小规模提取较高纯度的甜茶苷也有报道，但高含量的甜茶苷工业化生产报道不多。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取率高，物料损失少，产品纯度高，低毒环保，适合于工业化大生产，所得产品纯度高、无杂质的甜茶苷纯品的制备方法。

本发明公开了一种甜茶苷天然香料的提取方法，包括如下步骤：

（1）酶解水提：将甜茶洗净，粉碎到50-100目，超声波提取2次，每次60-70min，第一次提取中，加入甜茶质量8-10倍，pH为5.0-5.5的缓冲溶液对甜茶进行提取，并加入纤维素酶，在30-40℃下提取，提取完成后于90℃进行酶灭活10min，第二次提取中，加入甜茶质量8-10倍，温度为70-90℃的纯水对甜茶进行提取；

（2）微波醇提：将步骤（1）得到的提取液合并浓缩，与滤渣一起置于微波提取装置中，微波功率为300-400W，温度为30-70℃，用体积分数为70-90%的乙醇溶液提取30-40min，离心过滤；

（3）大孔树脂柱层析：将步骤（2）中的提取液减压浓缩，用体积分数为50-70%的丙酮溶液溶解，溶解液通过大孔树脂柱进行洗脱，收集洗脱液，浓缩成浸膏。

（4）聚酰胺树脂柱纯化：将浸膏与聚酰胺树脂搅拌均匀，装入聚酰胺树脂层析柱，先用纯水淋洗除杂，再用体积分数为10%-30%的乙醇溶液淋洗除杂，最后用体积分数为50%-70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得甜茶苷提取物。

以上所述步骤（1）中所述缓冲溶液是盐酸与磷酸二氢钠配置成的缓冲溶液。

以上所述步骤（4）中所述大孔树脂型号为AB-8、D101、HP20、HPD400、HPD-400A、HPD450或X-5。

以上所述甜茶苷提取物用于甜味剂，在医药上用于中药的复方制剂。

本发明通过将干燥过后的甜茶叶，粉碎过筛，酶解，水提，微波醇提，过大孔树脂吸附，丙酮洗脱，聚酰胺树脂纯化，喷雾干燥得到提取率不低于80%，纯度不低于99%的甜茶苷纯品。相对于现有技术具有以下技术效果的优势：

1）采用酶解法：纤维素酶可以破坏细胞壁结构，使细胞中的有效成分渗透出来，大大提高了产率，通过超声波震荡，加快了细胞壁的破裂，有利于活性成分的浸出与分离，提取速度大大加快，从而缩短了提取时间，提高了效率。

2）将浓缩物加入乙醇溶液沉淀出不溶物，能有效将氨基酸等不溶物除去，提高产品纯度。采用微波辅助提取方法又进一步提高了产率。

3）本发明中，采用的是非极性大孔树脂，由于该树脂具有相当大的比表面积和适宜的孔径，对苷类物质有特殊的选择性，能将甜茶中的黄酮类物质、酚性物质、氨基酸等分开，保证了产品纯度，丙酮作为洗脱剂的洗脱率最高80%以上洗脱效果更佳；

4）本发明中还采用了聚酰胺树脂层析，分三步分离纯化甜茶苷，先用水和低浓度乙醇淋洗去除极性低的杂质，再用高浓度乙醇洗脱出有效成分，保证了产品纯度，其分离操作简单，易控制。

5）该方法中采用的溶剂、树脂等都能循环使用，能降低物料损失，提高产品得率。

6）本发明工艺所得的甜茶苷的提取率不低于80%，纯度不低于99%，为纯白色结晶，是高含量高品质甜茶提取物，无苦味，甜度高，满足了市场对高品质甜茶苷产品的需求问题。

具体实施方式

实施例1

将500g甜茶洗净，粉碎到50-100目，加入4000g的盐酸与磷酸二氢钠配置成的缓冲溶液，pH为5.0，并加入纤维素酶，在40℃下超声波提取60min，提取完成后90℃进行酶灭活10min，离心分离，将滤渣进行第二次提取，提取液4500g的85℃纯水，超声波提取70min，离心分离，合并两次的提取液并浓缩，再与滤渣一起置于微波提取装置中，微波功率为300W，温度为50℃，用体积分数为90%的乙醇溶液提取30min，离心过滤，将提取液减压浓缩后，用体积分数为70%的丙酮溶液溶解，溶解液通过AB-8型大孔树脂柱进行洗脱，收集洗脱液，浓缩成浸膏。将浸膏与聚酰胺树脂搅拌均匀，装入聚酰胺树脂层析柱，先用纯水淋洗除杂，再用体积分数为10%的乙醇溶液淋洗除杂，最后用体积分数为60%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得甜茶苷提取物。

实施例2

将500g甜茶洗净，粉碎到50-100目，加入5000g 的盐酸与磷酸二氢钠配置成的缓冲溶液，pH为5.0，，并加入纤维素酶，在35℃下超声波提取70min，提取完成后90℃进行酶灭活10min，离心分离，将滤渣进行第二次提取，提取液为5000g的70℃纯水，超声波提取60min，离心分离，合并两次的提取液并浓缩，再与滤渣一起置于微波提取装置中，微波功率为350W，温度为70℃，用体积分数为80%的乙醇溶液提取30min，离心过滤，将提取液减压浓缩后，用体积分数为70%的丙酮溶液溶解，溶解液通过HPD400型大孔树脂柱进行洗脱，收集洗脱液，浓缩成浸膏。将浸膏与聚酰胺树脂搅拌均匀，装入聚酰胺树脂层析柱，先用纯水淋洗除杂，再用体积分数为20%的乙醇溶液淋洗除杂，最后用体积分数为50%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得甜茶苷提取物。

实施例3

将500g甜茶洗净，粉碎到50-100目，加入4500g 的盐酸与磷酸二氢钠配置成的缓冲溶液，pH为5.0，并加入纤维素酶，在30℃下超声波提取65min，提取完成后90℃进行酶灭活10min，离心分离，将滤渣进行第二次提取，提取液为4000g的85℃纯水，超声波提取70min，离心分离，合并两次的提取液并浓缩，再与滤渣一起置于微波提取装置中，微波功率为400W，温度为30℃，用体积分数为70%的乙醇溶液提取40min，离心过滤，将提取液减压浓缩后，用体积分数为70%的丙酮溶液溶解，溶解液通过X-5型大孔树脂柱进行洗脱，收集洗脱液，浓缩成浸膏。将浸膏与聚酰胺树脂搅拌均匀，装入聚酰胺树脂层析柱，先用纯水淋洗除杂，再用体积分数为30%的乙醇溶液淋洗除杂，最后用体积分数为70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥得甜茶苷提取物。

Claims

1.一种甜茶苷的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

（3）大孔树脂柱层析：将步骤（2）中的提取液减压浓缩，用体积分数为50-70%的丙酮溶液溶解，溶解液通过大孔树脂柱进行洗脱，收集洗脱液，浓缩成浸膏；

2.根据权利要求1所述的甜茶苷的提取方法，其特征在于：步骤（1）中所述缓冲溶液是盐酸与磷酸二氢钠配置成的缓冲溶液。

3.根据权利要求1所述的甜茶苷的提取方法，其特征在于：步骤（4）中所述大孔树脂型号为AB-8、D101、HP20、HPD400、HPD-400A、HPD450或X-5。

4.根据权利要求1所述的甜茶苷的提取方法，其特征在于：所述甜茶苷提取物在甜味剂或者医药上中药复方制剂中的应用。