CN106491874A - 一种抑制肠源性内毒素血症的中药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物在制备药物中的用途，所述中药组合物含有原料药材或所述原料药材的提取物，其中所述原料药材包括：熟地黄、黄连、泽泻、葛根、天花粉、生山楂、决明子、荷叶,所述药物用于抑制肠源性内毒素血症。本发明所采用的中药组合物对治疗T2DM具有明显疗效且其作用的分子靶点—JNK、NFКB为连接胰岛素抵抗和慢性炎症反应关键的信号蛋白。由于T2DM、心脑血管疾病之间在发病机制上存在着密切联系，本发明为这些疾病的防治提供广阔的市场前景。

Description

一种抑制肠源性内毒素血症的中药组合物

技术领域

本发明属于中医药领域，具体的，本发明涉及一种抑制肠源性内毒素血症的中药组合物。

背景技术

糖尿病是一种最常见的内分泌代谢疾病，具有遗传易感性，在环境因素的触发下发病。Ⅱ型糖尿病，又名非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)。特点是人体自身能够产生胰岛素，但细胞无法对其作出反应，使胰岛素的效果大打折扣。因此患者体内的胰岛素是一种相对缺乏，可以通过某些口服药物刺激体内胰岛素的分泌。但到后期仍有一些病人需要使用胰岛素治疗。多在35～40岁之后发病，占糖尿病患者90％以上。发病率在全球范围内呈逐年增高趋势，糖尿病现已成为继心血管病和肿瘤之后，第3位威胁人们健康和生命的非传染性疾病。

据报道中国有9240万Ⅱ型糖尿病患者，有1.48亿人处于糖尿病前期，这是诱发显性糖尿病和心血管疾病的一大因素，也是影响老年人身心健康的重要事件。因此，本领域技术人员致力于探索中医药对Ⅱ型糖尿病的疗效。

发明内容

本发明的目的是提供一种抑制肠源性内毒素血症的中药组合物及其应用。

本发明的第一方面提供了一种中药组合物，所述中药组合物含有原料药材或所述原料药材的提取物，其中所述原料药材包括：熟地黄、黄连、泽泻、葛根、天花粉、生山楂、决明子、荷叶；并且，所述的原料药材的重量份如下：

优选地，所述的原料药材的重量份如下

在另一优选例中，所述原料药材由熟地黄30g、黄连30-90g、泽泻30g、葛根30-120g、天花粉30-90g、生山楂30g、决明子30g、荷叶30g构成。

在另一优选例中，所述的提取物包括：水提取物或水性提取物(包括但不限于醇溶液提取物，所述醇为乙醇、甲醇或丙醇)。

在另一优选例中，所述的水性提取物是指用水性溶剂提取的提取物。

在另一优选例中，所述的水性溶剂指由水和与水相容的溶剂(如醇，包括乙醇)所构成的混合溶剂，其中水含量为10-99.5wt％，较佳地为50-90wt％。

在另一优选例中，所述原料药材包括：

在另一优选例中，所述的药物还含有药学上可接受的载体。

在另一优选例中，所述药学上可接受的载体的含量为5-99wt％，较佳地10-90wt％，按所述药物的总重量计。

在另一优选例中，所述的药学上可接受的载体包括：水、填料、矫味剂、甘油、其他合适的添加剂或其组合。

在另一优选例中，所述的药物的剂型包括汤剂。

在另一优选例中，所述的药物为汤剂，规格为50或100g/份。

在另一优选例中，所述的原料药材为粉末状。

在另一优选例中，所述的原料药材的粒径为1-10mm。

本发明的第二方面提供了一种中药组合物在制备药物中的用途，所述中药组合物含有原料药材或所述原料药材的提取物，其中所述原料药材包括：熟地黄、黄连、泽泻、葛根、天花粉、生山楂、决明子、荷叶；并且，所述的原料药材的重量份如下：

所述药物用于抑制肠源性内毒素血症。

在另一优选例中，所述药物还用于抑制JNK、和/或NFКB激酶。

另一优选例中，所述药物还用于治疗或预防糖尿病，优选为Ⅱ型糖尿病。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1显示了大鼠胰腺JNK1、p-JNK1、GRP78和NFκB蛋白的表达。

具体实施方式

本发明人经过长期广泛而深入的研究，经过系列研究证实，肠源性内毒素血症(IETM)是连接胰岛素抵抗与慢性炎症之间的桥梁，是T2DM发生与发展的重要机制之一。本申请的实验已证明IETM可引起NASH和胰岛素抵抗，从而把炎症和代谢障碍连接在一起。本发明人应用高糖高脂膳食喂养大鼠，发现从实验第二个月直到实验第十二月一直伴有IETM，并先后或同时出现脂肪肝、脂肪性肝炎、T2DM、动脉粥样硬化及心肌病、原发性老年痴呆等代谢综合征系列疾病。成功复制出MS及其疾病的动物模型。

在此模型上，对大量的中药组方进行了研究，最终发现了根据本发明的中药组合物，其治疗效果包括：⑴通过降低IETM，使浸润到肝、脂肪组织、胰岛的CD68阳性细胞(标志着巨噬细胞)明显减少，使致炎细胞因子和炎症介质TNFα、CRP、MCP-1、FFA等明显下降，致使动物胰岛素抵抗和慢性炎症得到明显改善；⑵Western blot检测表明，本发明中药组合物作用下胰腺细胞内JNK、NFКB激酶受到抑制使得信号转导通路受阻而出现胰岛素抵抗与炎症反应所导致的β细胞凋亡与功能障碍得以改善，进而发挥对T2DM的治疗作用。

本发明中药组合物

药物组方详细信息：

黄连(Coptis chinensis Franch)：双子叶植物纲，(根)苦，寒，无毒。归心、脾、胃、肝、胆、大肠经。清热燥湿，泻火解毒。用于湿热痞满，呕吐吞酸，泻痢，黄疸，高热神昏，心火亢盛，心烦不寐，血热吐衄，目赤，牙痛，消渴，痈肿疔疮；外治湿疹，湿疮，耳道流脓。

葛根(Pueraria lobata)：为豆科植物野葛的干燥根，习称野葛。秋、冬二季采挖，趁鲜切成厚片或小块；干燥。甘、辛，凉。有解肌退热，透疹，生津止渴，升阳止泻之功。常用于表证发热，项背强痛，麻疹不透，热病口渴，阴虚消渴，热泻热痢，脾虚泄泻。

天花粉(Trichosanthis Radix)葫芦科植物栝蒌的根，甘、微苦，微寒。归肺、胃经。秋、冬二季采挖，洗净，除去外皮，切段或纵剖成瓣，干燥。为清热泻火类药物，其具体功效是清热泻火，生津止渴，排脓消肿。主治:治热病口渴、消渴、黄疸、肺燥咳血、痈肿、痔痿。

泽泻(Alisma plantago-aquatica Linn.)泽泻科植物泽泻的干燥块茎，主产于福建、四川等地。泽泻性寒，味甘、淡，归肾、膀胱经，具有利水渗湿、泄热、化浊降脂的功效。

熟地黄(Rehmannia glutinosa(Gaetn.)Libosch.ex Fisch.et Mey.)玄参科、地黄属植物，中药材熟地黄为生地黄的炮制加工品，其表面乌黑有光泽，质软而柔韧，味甘，性微温，具有滋阴补血、益精填髓等功效。主治肝肾阴虚、腰膝酸软、骨蒸潮热、盗汗遗精、内热消渴、血虚萎黄、心悸怔忡、月经不调、眩晕耳鸣、须发早白等症。

生山楂(Crataegus pinnatifida Bunge)核果类水果，核质硬，果肉薄，味微酸涩。果可生吃或作果脯果糕，干制后可入药，是中国特有的药果兼用树种，具有降血脂、血压、强心、抗心律不齐等作用，同时也是健脾开胃、消食化滞、活血化痰的良药，对胸膈脾满、疝气、血淤、闭经等症有很好的疗效。

决明子，是豆科植物决明或小决明的干燥成熟种子，以其有明目之功而名之。秋季采收成熟果实，晒干，打下种子，除去杂质。决明子味苦、甘、咸，性微寒，入肝、肾、大肠经；润肠通便，降脂明目，治疗便秘及高血脂，高血压。清肝明目，利水通便，有缓泻作用，降血压降血脂。

荷叶(Nelumbo nucifera Gaertn)，为睡莲科植物莲Nelumbo nucifera Gaertn.的干燥叶。夏、秋二季采收，晒至七、八成干时，除去叶柄，折成半圆形或折扇形，干燥。荷叶味苦辛微涩、性凉，归心、肝、脾经。主治暑热烦渴，头痛眩晕，水肿，食少腹胀，泻痢，白带，脱肛，吐血，衄血，咯血，便血，崩漏，产后恶露不净，损伤瘀血。

本发明的主要优点包括：

(1)本发明的中药组合物具有安全无毒、药理作用明显，具有较好的临床应用前景。

(2)本发明所采用的各中药原料来源丰富、价廉、未见毒副作用，并可制作成口服剂使用。

(3)本发明所采用的中药组合物对治疗T2DM具有明显疗效且其作用的分子靶点—JNK、NFКB为连接胰岛素抵抗和慢性炎症反应关键的信号蛋白。由于T2DM、心脑血管疾病之间在发病机制上存在着密切联系，本发明为这些疾病的防治提供广阔的市场前景。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。

实施例1中药组合物的制备

本发明中药组合物制备方法如下：

以熟地黄30g、黄连60g、泽泻30g、葛根80g、天花粉60g、生山楂30g、决明子30g、荷叶30g为原料，水煮醇沉，取其上清液浓缩成稠膏，制成颗粒为冲剂。该药物具有减轻肠源性内毒素血症，同时又能抗肝损伤、改善肝功能的作用。

为了更好地理解本发明的实质，下面将用药理试验及结果来说明其在制药领域中的新用途。

实施例2中药组合物对高糖高脂饮食所致大鼠模型的治疗效果

实验方法

1.1动物分组及模型的建立

48只SD大鼠适应性饲养1周后，随机分为3组：正常对照组、高糖高脂组以及治疗组，分组16只。正常对照组以正常饮食(100％正常饲料)喂养；高糖高脂组和治疗组采用高糖高脂膳食(68.75％正常饲料+20％猪油+10％蔗糖+1％胆固醇+0.25％胆酸)喂养，同时治疗组喂服实施例1制备的中药组合物冲剂(10ml)。上述各动物均在天黑前投食，自由饮水。

1.2对高糖高脂饮食所致大鼠体重、内脏脂肪重量的影响

动态观察实验第3月末、第6月末上述各动物体重以及内脏脂肪组织的变化。实验结果见表1，经高糖高脂膳食喂养后的高糖高脂组和治疗组与正常对照组相比，体重和内脏脂肪重量明显增加(P<0.05)，但高糖高脂组大鼠的体重以及内脏脂肪组织从3月至6月增长明显，治疗组显著的降低了大鼠的体重以及内脏脂肪组织重量的增长。表1(表2、3、4、5)中3月正常对照组(normal control group of3months,3C)、6月正常对照组(normal controlgroup of 6months,6C)、3月高糖高脂组(high-sucrose and high-fat diet group of3months,3G)、6月高糖高脂组(high-sucrose and high-fat diet group of 6months,6G)、3月治疗组(3Y)、6月治疗组(6Y)(表1)。

表1大鼠体重、脏器重量及其所占百分比变化(x±s.n＝8)

^a与对应的正常组相比：P<0.05；^b与三月模型组相比：P<0.05；^c与六月模型组相比：P<0.05；

BW：体重(body weight)；VF：内脏脂肪(visceral fat)；LW：(liver weight).

采用本发明的中药组合物治疗可在3月、6月显著降低高糖高脂组体重及内脏脂肪的增长。

1.3对高糖高脂饮食所致大鼠血脂的影响

于实验第3月末、第6月末测定上述各动物血浆Tch、HDL、LDL、TG。实验结果见表2，高糖高脂组大鼠3月后出现高酯血症、高胆固醇血症及异常脂蛋白血症(LDL-c升高和HDL-c降低)治疗组在3月、6月显著降低高糖高脂膳食所致的血浆甘油三酯、胆固醇水平及血脂蛋白的异常。

研究发现高糖高脂组大鼠3月后出现高酯血症、高胆固醇血症及异常脂蛋白血症(LDL-c升高和HDL-c降低)。本发明中药组合物治疗可在3月、6月显著降低高糖高脂组血浆甘油三酯、胆固醇水平及血脂蛋白的异常(表2)。

表2血生化指标的变化

^a与对应的正常组相比：P<0.05；^b与三月模型组相比：P<0.05；^c与六月模型组相比：P<0.05；

1.4对高糖高脂饮食所致大鼠FINS、FPG、HOMA-IR、HOMA-β的影响

于实验第3月末、第6月末测定上述各动物血浆FINS、FPG，计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)：HOMA-IR＝(FINS×FPG)/22.5和β细胞功能指数(HOMA-β)：HOMA-β＝(20×FPI)/(FPG-3.5)。实验结果见表3，高糖高脂组以及治疗组的大鼠3月、6月血浆FINS、FPG明显升高(P<0.05)，发生明显的胰岛素抵抗(P<0.05)，而且反映胰岛β细胞功能的HOMA-β出现分泌功能降低。但是治疗组可显著降低高糖高脂饮食所致大鼠FINS、FPG、HOMA-IR水平，并改善β细胞的分泌功能(表3)。

表3大鼠FBS、FINS、HOMA-IR、HOMA-β的变化

^a与对应的正常组相比：P<0.05；^b与三月模型组相比：P<0.05；^c与六月模型组相比：P<0.05；

1.5对高糖高脂饮食所致大鼠胰腺组织的病理学观察

实验结果表明，高糖高脂组大鼠3至6月时胰岛体积逐渐增大，胰岛内血管扩张；苏丹Ⅳ染色显示3至6月时胰岛内有少量脂质沉积。治疗组胰岛体积肥大及血管扩张得到改善，胰岛内脂质沉积也有所减轻。

1.6胰岛细胞炎性浸润及凋亡率的观察

胰岛β细胞凋亡率实验结果(表4)，高糖高脂组3至6月胰岛β细胞凋亡率逐渐增加，而治疗组可显著降低6月高糖高脂组所致的胰岛β细胞凋亡率。胰腺CD68是反应胰腺炎症的特征指标。CD68免疫组化研究结果见表5，6月高糖高脂组所致的胰腺CD68阳性表达为2.60±0.74，而治疗组的胰腺CD68阳性表达为0.70±0.13(P<0.05)(表5)。

表4大鼠胰岛β细胞凋亡率的观察

^a与对应的正常组相比：P<0.05；^b与三月模型组相比：P<0.05；^c与六月模型组相比：P<0.05；

表5大鼠胰岛巨噬细胞浸润的观察

^a与对应的正常组相比：P<0.05；^b与三月模型组相比：P<0.05；^c与六月模型组相比：P<0.05；

上述结果说明，本发明中药组合物治疗高糖高脂饮食引起的T2DM有较好的疗效，反映在本发明中药组合物明显减轻体重、内脏脂肪的增长及血脂代谢的异常(如高甘油三酯血症)，可显著改善胰岛素抵抗及抑制β细胞的衰竭。可见本发明中药组合物治疗Ⅱ型糖尿病效果明显。

1.7本发明中药组合物治疗T2DM的作用机制及分子靶点。

在高糖高脂饮食诱导大鼠发生T2DM模型中，本发明人动态分析了大鼠血浆LPS、炎症因子及IR的变化，并检测胰腺p-JNK1/JNK1、NFκB蛋白的表达。研究结果证实，本发明中药组合物的上述治疗作用是通过降低IETM(表7)，进而减轻炎症(表7)改善胰岛素抵抗来实现的,而降低连接胰岛素抵抗和慢性炎症反应关键的信号蛋白p-JNK1/JNK1、NFκB的表达为其作用的分子靶点(表6，图1)。近年来，本发明人通过临床实验观测到T2DM患者血浆内毒素水平明显高于非T2DM患者(P<0.001)。这也再次证明T2DM发病与IETM相关。由于胰岛素抵抗是T2DM发病的病理生理基础，且又表现为慢性低度炎症反应。本发明人系列研究证实，IETM是连接胰岛素抵抗与轻度慢性炎症反应之间的桥梁。故IETM是上述疾病发生与发展的重要机制之一，本发明中药组合物降低IETM也成为治疗上述疾病的机制，且疗效十分显著。

表6大鼠胰腺p-JNK1/JNK1、GRP78、NFκB蛋白的表达

与对应的正常组相比：P<0.05；^b与三月模型组相比：P<0.05；^c与六月模型组相比：P<0.05；

表7 LPS及MS相关的炎症介质变化

与对应的正常组相比：P<0.05；^b与三月模型组相比：P<0.05；^c与六月模型组相比：P<0.05；

图1显示了大鼠胰腺JNK1、p-JNK1、GRP78和NFκ蛋白的表达。从图中可以看出，3Y和6Y治疗组中的p-JNK1、GRP78和NFκB蛋白显著减少，说明本发明的药物组合物能够显著抑制p-JNK1、GRP78和NFκB蛋白水平。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种中药组合物，其特征在于，所述中药组合物含有原料药材或所述原料药材的提取物，其中所述原料药材包括：熟地黄、黄连、泽泻、葛根、天花粉、生山楂、决明子、荷叶。

2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物含有原料药材或所述原料药材的提取物，其中所述原料药材包括：熟地黄、黄连、泽泻、葛根、天花粉、生山楂、决明子、荷叶；并且，所述的原料药材的重量份如下：

泽泻 20-40重量份

熟地黄 20-40重量份

黄连 30-90重量份

葛根 30-120重量份

天花粉 30-90重量份

生山楂 20-40重量份

决明子 20-40重量份

荷叶 20-40重量份。

3.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的原料药材的重量份如下：

泽泻 30g

熟地黄 30g

黄连 30-90g

葛根 30-120g

天花粉 30-90g

生山楂 30g

决明子 30g

荷叶 30g。

4.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述原料药材由熟地黄30g、黄连30-90g、泽泻30g、葛根30-120g、天花粉30-90g、生山楂30g、决明子30g、荷叶30g构成。

5.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的提取物包括：水提取物或水性提取物(包括但不限于醇溶液提取物，所述醇为乙醇、甲醇或丙醇)。

6.如权利要求4所述的中药组合物，其特征在于，所述的水性提取物是指用水性溶剂提取的提取物。

7.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的水性溶剂指由水和与水相容的溶剂(如醇，包括乙醇)所构成的混合溶剂，其中水含量为10-99.5wt％，较佳地为50-90wt％。

8.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的中药组合物还含有药学上可接受的载体。

9.一种中药组合物在制备药物中的用途，其特征在于，所述中药组合物含有原料药材或所述原料药材的提取物，其中所述原料药材包括：熟地黄、黄连、泽泻、葛根、天花粉、生山楂、决明子、荷叶；并且，所述的原料药材的重量份如下：

泽泻 20-40重量份

熟地黄 20-40重量份

黄连 30-90重量份

葛根 30-120重量份

天花粉 30-90重量份

生山楂 20-40重量份

决明子 20-40重量份

荷叶 20-40重量份

所述药物用于抑制肠源性内毒素血症。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述药物还用于抑制JNK、和/或NFКB激酶。