CN106459943A - 用于制造β淀粉酶的稳定水溶液的方法、所得水溶液及其用途 - Google Patents

用于制造β淀粉酶的稳定水溶液的方法、所得水溶液及其用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及用于稳定β淀粉酶的水溶液的方法，具体通过使用甘油、山梨酸钾和碳酸钠进行。所述添加剂的合剂随时间推移在维持β淀粉酶的酶活性方面特别有效。本发明的另一目的由使用所述合剂用于维持β淀粉酶的酶活性的特定功能组成。本发明的另一个目的是提供包含上述合剂的β淀粉酶的水溶液。本发明的最终目的由以下组成：使用所述β淀粉酶水溶液，用于在面包制作中，在麦芽工业中，作为食品添加剂，作为消化剂，用于增甜剂生产，在药学中，并且最后是用于麦芽糖和富含麦芽糖的糖浆的生产。

Description

用于制造β淀粉酶的稳定水溶液的方法、所得水溶液及其用途
本发明涉及一种用于制造β淀粉酶的水溶液(尤其是通过使用甘油，山梨酸钾和碳酸钠)的方法。添加剂的这种合剂证明具有目的在于维持β淀粉酶随时间的酶活性的特别高的性能。
本发明的另一个主题在于具有维持β淀粉酶的酶活性的特定功能的所述合剂的用途。本发明的另一个主题由包含上述合剂的β淀粉酶的水溶液组成。本发明的最后主题在于β淀粉酶的所述水溶液在面包制作中、在麦芽工业中，作为食品添加剂，作为消化剂，用于生产增甜剂，在药学中，并且最后是用于生产麦芽糖和富含麦芽糖的糖浆的用途。
β淀粉酶是从α1→4连接的葡萄糖聚合物或低聚物的非还原β端释放麦芽糖单元的外水解酶，该反应在遇到的第一个α1→6分支点停止。在发芽(谷粒的人工萌发)期间，“糖化力”(对应于α淀粉酶、β淀粉酶、α葡糖苷酶和脱支酶的组合活性)的主要组分，从这种酶合剂(cocktail)中分离的β淀粉酶活性对于生产麦芽糖或产生自淀粉的其他可发酵糖而言是必需的。
因此，单独的β淀粉酶的糖化活性用于大量的应用中：在面包制作中，在麦芽工业中，作为食品添加剂，或甚至作为消化剂，用于生产增甜剂，在药学中用于生产疫苗，并且最后是用于生产麦芽糖和富含麦芽糖的糖浆(麦芽糖醇的前体和麦芽糖醇糖浆)。
存在许多用于制造β淀粉酶的方法。因此，已知的是未萌发的大麦、黑麦或小麦的谷粒都是用于大规模商业制备β淀粉酶的生物材料的选择。此外，本领域的技术人员已知，可以从未萌发的大麦、小麦或黑麦谷粒中提取的一半β淀粉酶可以容易地通过用水和盐溶液提取以游离酶的形式获得。另一半部分处于“结合”形式，对于它的提取需要添加还原剂或蛋白水解酶。不能被直接提取的另一部分的β淀粉酶，称为“潜伏”的，也已经被描述：需要洗涤剂用来从谷粒中提取它。此外，取决于目标应用，将描述于现有技术中的用于提取β淀粉酶的方法进行了调整。
在此方面，本申请人在申请EP 2 414 379中已经研发并保护了一种用于生产β淀粉酶的原创方法，在这个意义上而言，它是依靠一种迄今为止几乎没有利用的起始原料：“可溶部分”。后者之前唯一被用作发酵中的氮源，并且被用作家畜的营养饲料，只要所述的部分富含纤维。
此类可溶部分是在湿法提取淀粉植物组分期间产生的，这些淀粉植物是诸如玉米、马铃薯、甘薯、小麦、水稻、豌豆、蚕豆、马蚕豆、木薯、高粱、魔芋、黑麦、荞麦以及大麦。在提取期间产生的称为“贵重的”组分尤其是淀粉、蛋白质或其他纤维。从一方面来说，“可溶部分”表示“非贵重的”成分：这些是产自所述提取的液体残余物，尽管这些残余物仍可以包含痕量的罕见不可溶物质，并且包含不同且多变的颗粒和胶体。
作为申请EP 2414379的主题的该方法是基于最初选择将要被处理的可溶部分，然后基于通过微滤进行澄清的一个步骤，并且最后基于通过超滤进行纯化的一个步骤。在这种情况下，证明了所获得的β淀粉酶非常好地适用于麦芽糖浆的制备，就像根据现有技术根据多种技术生产的β淀粉酶，但是使用更复杂并且更昂贵的方法。
在此之后，申请人还通过专利申请FR 2 994 440和法国专利申请号1356022保护了对这种方法的改进，在本申请的提交日期尚未公布。这些改进是尤其基于在微滤步骤期间使用蛋白酶，这使可能非常大地减少微滤膜的堵塞，并且因此在超滤步骤期间增加洗涤前的生产时间，并且也基于在超滤步骤期间使用果胶酶，这使可能限制超滤膜的堵塞，以减少在这个步骤结束时渗余物的粘度，同时增加在β淀粉酶中的其丰度。
现在，在已经被提到的应用中使用之前，包含浓缩形式的β淀粉酶的超滤渗余物能够被保存数周，或甚至数月。然后，似乎其酶活性随时间减小。可回想的是，酶的活性是通过定义每单位时间并且在酶的最佳操作条件(温度，pH、等)下转化的底物(或形成的产物)的量。因此这个值量化了酶的有效性。
常规地，酶活性是通过确定另一参数，糖化活性来测量的。后者表示为糖化力的度数(°DP)，定义为当在20℃下将所述样品置于100ml的底物中持续1h时，足以还原5ml的费林液(Fehling’s solution)的包含在0.1ml按重量计5％酶制剂的样品溶液中的酶的量。
目前已知有多个文件描述用于获得β淀粉酶的方法，以从其酶活性的角度，改进其稳定性。
文件CN 102965358披露了用于通过沉淀、然后排水、澄清和超滤从大豆获得β淀粉酶的方法。所述方法在沉淀步骤中使用氯化钙和硫酸的任选的盐。
文件CN 102399763描述了从糠生产β淀粉酶，其中添加氯化钙和磷酸氢钠，然后在山梨糖醇和山梨酸钾存在下浓缩并且稳定化，之后灭菌。
文件CN 101544967披露了用于通过沉淀、分离和离心，然后建议添加氯化钙、正磷酸、硅藻土和甘油，制造β淀粉酶的方法。
文件CN 1225943描述了用于制备β淀粉酶的方法，该方法包括超滤、浓缩和沉淀大豆粉的提取物的步骤，沉淀之前是添加硫酸钠并且调节pH在3.6和5之间。
文件US 2496261描述了用于从甘薯获得β淀粉酶的方法，它包括在硫酸铵存在下沉淀的步骤，然后用盐酸酸化。
文件US 4024000描述了用于制备β淀粉酶的方法，它使用选自氢氧化钙、氢氧化镁、氢氧化钡和氢氧化铝和它们的盐的二价或三价离子，并且调节pH在4.5和8之间的范围内。
然而，应该指出的是，这些解决方案中没有一个使可能获得水溶液的形式的β淀粉酶的制剂，从其酶活性的角度来看，该制剂随时间推移是足够稳定的，尤其经数周的时段，并且更具体为至少70天。在追求其研究中，申请人已经成功地证明，只有添加剂的非常具体的选择，才使可能实现这样的目标。添加剂的这种合剂由山梨酸钾，甘油和碳酸钠组成。
因此，本发明的第一主题由用于稳定获得自淀粉植物的可溶部分的β淀粉酶的水溶液的方法组成，该方法包括将以下项引入所述β淀粉酶的水溶液中的至少一个步骤：
a)山梨酸钾；
b)甘油；以及
c)碳酸钠。
有利地，将山梨酸钾、甘油和碳酸钠按以下比例引入所述β淀粉酶的水溶液：
a)从0.05％至0.5％，优先从0.1％至0.3％，以及非常优先大约0.2％山梨酸钾；
b)从30％至50％，优先从35％至45％，以及非常优先大约40％甘油；
c)从0.05％至0.5％，优先从0.1％至0.3％，以及非常优先大约0.2％碳酸钠；
这些％表示为按相对于所述水溶液的总重量计，每种成分的干重的％。
有利地，相对于所述水溶液的总重量，β淀粉酶的水溶液具有按干重计，5％和20％之间，优先10％和20％之间，非常优先等于大约15％的β淀粉酶的含量。
山梨酸钾、甘油和碳酸钠优先处于水溶液的形式。本领域的技术人员将知道，如何相对于产物的溶解度，调整这些溶液的固体提取物，而且以便限制这些溶液的粘度，并且以便使其易于处理，并且尤其是可泵送。
根据一个实施例，通过以下步骤获得β淀粉酶的水溶液，这些步骤在于：
-提供淀粉植物的可溶部分；
-对所述可溶部分进行微滤步骤，以获得微滤渗透物；
-对该微滤渗透物进行超滤步骤，以获得超滤渗余物。
因此，在此实施例中，向构成所述β淀粉酶的水溶液的所述超滤渗余物中引入了山梨酸钾、甘油和碳酸钠。
按一个更详细的方式，在根据本发明的方法的上游，适合选择待处理的淀粉植物的可溶部分。这一选择尤其是从下组进行的，该组由以下项的可溶部分组成：玉米、马铃薯、甘薯、小麦、水稻、豌豆、蚕豆、马蚕豆、木薯、高粱、魔芋、黑麦、荞麦以及大麦。
淀粉植物的可溶部分的微滤尤其具有消除不溶物质、胶体、和微生物学材料的目的，以获得包含β淀粉酶的透明组合物。因此，后一组合物是该微滤渗透物。根据本实施例的一个特别有利的变体，所述微滤步骤是在至少一种蛋白酶存在下进行。在微滤之前，该蛋白酶被放置为与将要被处理的淀粉植物的可溶部分接触：本领域的技术人员将知道如何调整酶作用必需的接触时间。
本发明中使用的蛋白酶是优选地选自丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、天冬氨酰蛋白酶和金属蛋白酶，并且更具体地是选自金属蛋白酶。按名称，在本发明中优选的蛋白酶是在以下名称下销售的产品：SumizymeTM APL，LypaineTM 6500L，NeutraseTM 0.8L，BrewlyveTMNP 900，Brewers ClarexTM。将优选使用一个相对于将被处理的淀粉植物的可溶部分的体积按体积计在0.01％和0.1％之间的量的蛋白酶。
本实施例的微滤步骤优先按照切向膜微滤进行。本申请公司更具体地推荐用具有0.1μm至1μm孔隙度的陶瓷膜进行切向微滤。
通过本领域的技术人员另外已知的任何技术，该微滤步骤之前任选地可以是包含在淀粉植物的可溶部分中的不溶颗粒的絮凝步骤。
对于这第一微滤步骤，本申请人推荐在pH为4和5之间，并且温度在40℃和50℃之间操作。
具体地，该微滤步骤是以一个固定的渗透流量通过随时间的跨膜压力(TMP)的升高来控制。
在本实施例中，微滤之后是超滤步骤，首先目的在于浓缩包含β淀粉酶的微滤渗透物，同时从它除去任何可能残留的污染的盐、糖和蛋白质。因此，超滤是以微滤渗透物进行的，以获得含有β淀粉酶的超滤渗余物。
本申请公司更具体地推荐借助具有10 000Da至50 000Da截留阈值，优选地具有30000Da截留阈值的膜进行超滤。可以例如在一个模块上超滤这些可溶部分，该模块配备有盒式(cassette)的实验室规模的具有30 000Da截留阈值的聚砜膜以及中试规模的具有30000Da截留阈值的聚砜螺旋膜。因此随时间推移酶在渗余物中浓缩。
此超滤可以在果胶酶存在下进行。在本申请中，术语果胶酶表示能够分解是多糖聚合物和植物细胞壁的成分之一的果胶的酶。它们由1-4连接的糖醛酸的主链构成。就此方面而言，它们不应该被连同纤维素酶和半纤维素酶一起分组，这样使得它们被错误地与此关联：纤维素酶是直接参与纤维素(D-葡萄糖分子的直链)的分解的反应的酶，而半纤维素酶水解半纤维素(一般是支链糖聚合物，例如葡萄糖，木糖，等)。
果胶酶典型地被引入微滤渗透物，之后进行超滤步骤，并且它被留下来发挥作用。
本领域的技术人员将知道如何调整酶的作用必需的的接触时间。果胶酶典型地留下来发挥作用持续从30分钟至4小时，优先从30分钟至2小时，在25℃和60℃之间，优先25℃和50℃之间的温度下。
特别适合于本发明的用途的果胶酶是产品RapidaseTM ADEX D(果胶酶；DSM公司)，PeclyveTM ESP(果胶酶；Lyven)，或SumizymeTM ARS(果胶酶和阿拉伯糖酶；Takabio)，这些实例不以任何方式进行限制。
优选的是，相对于微滤渗透物的总体积，引入按体积计0.05％和1％之间的果胶酶的量。
超滤步骤之后可以是超滤渗余物的透析步骤，以便减小所述渗余物中的杂质的浓度。
此外，希望的是，维持如在小于15℃的，优先在小于10℃的，理想地在大约5℃的温度下获得的所述β淀粉酶的溶液，以便进一步改进其酶活性的维持。
本发明的另一个主题是使用以下项，以维持在水溶液中β淀粉酶的酶活性：
a)山梨酸钾；
b)甘油；以及
c)碳酸钠。
“维持酶活性”意思是指，限制如在实验部分所指示的程度°DP下降的能力。典型地，如果在37℃的温度下70天后，程度°DP仍大于其初始值的至少70％，则参照“维持”。
本发明的另一个主题是由β淀粉酶的稳定化的水溶液组成，该溶液包含：
a)山梨酸钾；
b)甘油；以及
c)碳酸钠。
更具体地，β淀粉酶的这种稳定化的水溶液包含：
a)从0.05％至0.5％，优先从0.1％至0.3％，以及非常优先大约0.2％山梨酸钾；
b)从30％至50％，优先从35％至45％，以及非常优先大约40％甘油；
c)从0.05％至0.5％，优先从0.1％至0.3％，以及非常优先大约0.2％碳酸钠；
这些％表示为按相对于所述β淀粉酶的水溶液的总重量计，每种成分的干重的％。
相对于所述水溶液的总重量，它也具有按干重计，5％和20％之间，优先10％和20％之间，非常优先大约15％的β淀粉酶的含量。
本发明的最后主题由根据本发明所述的β淀粉酶的稳定化的水溶液在面包制作中，在麦芽工业中，作为食品添加剂，作为消化剂，用于生产增甜剂，在药学中用于生产疫苗，并且最后是用于生产麦芽糖和富含麦芽糖的糖浆(麦芽糖醇和麦芽糖醇糖浆的前体)的用途组成。
以下实例使得有可能更好地理解本发明，但不限制其范围。
实例
β淀粉酶的水溶液的制造
首先，在从小麦生产淀粉中，在可溶物蒸发器的入口处带走可溶部分，一旦浓缩，常规地进行该步骤以制造用于饲养家畜的产品。这些产品由本申请公司在名称下销售。这些可溶部分具有4和5之间的pH和30°DP/ml的级别的β淀粉酶活性。
在此，可溶小麦部分在中试规模的设备上进行微滤。微滤部件配备有由二氧化钛制造的陶瓷膜，其截留阈值等于0.2μm。将渗透流率固定在12L/(h m2)。体积浓缩系数等于1.5。该渗透物的温度和pH分别等于45℃和大约4.5。
将0.8L中性蛋白酶(诺维信公司)添加至该可溶部分，所述中性蛋白酶是以相对于所述组合物总体积按体积计以0.1％的浓度添加的。在室温下，此蛋白酶预先留下来发挥作用持续1小时。
然后如上所述，进行超滤。
1小时的微滤后，获得具有25°DP/ml的DP度的微滤渗透物，这一度数反映了包含β淀粉酶的溶液的酶活性。通过糖化活性来测量酶活性。后者表示为糖化力的度数(°DP)，定义为当在20℃下将所述样品置于100ml的底物中持续1h时，足以还原5ml的费林液(Fehling’s solution)的包含在0.1ml按重量计5％酶制剂的样品溶液中的酶的量。
该微滤步骤之后是以微滤渗透物进行超滤步骤。此步骤的主要目的是浓缩所述渗透物并且从它除去任何可能的残余的污染的盐、糖以及蛋白质。超滤中试设备配备有有机聚砜膜(阿法拉伐(Alfa Laval)膜)，该膜具有25kDa的截止阈值。过滤温度固定在25℃，以尽可能限制细菌生长和保持酶活性。跨膜压力(TMP)被固定在4巴的最大值。
由此获得β淀粉酶的水溶液，该溶液由超滤渗余物组成，具有按干重计，该超滤渗余物具有等于其总重量的15％的β淀粉酶的含量。
测试了如表1至3中所示的不同合剂。所有％表示为相对于水溶液的总重量，产物的干重的％。一旦已经生产制剂，根据在专利申请FR 2 994 440中描述的方法(β-淀粉酶活性的测量)，对每个样品(包含在无菌100毫升容器中)进行酶测定。这个值用作整个研究的参考。然后将不同样品放置在温度控制烘箱中，在37℃下，持续希望的时段；然后取出样品，从而测量在不同时间的残留β淀粉酶活性(取出样品的那些天在表1至3中指出)。结果在表1至表3中给出，并且表示为％残留β淀粉酶活性。选择37℃的温度，以便加速使酶活性下降引起的现象。
表1a证明，最好的结果是用40％甘油、0.2％山梨酸钾和0.2％Na2CO3的混合物获得的。这还证明，与使用其他成分的其他合剂相比，的确是根据本发明所述的的溶液使可能开发最佳的稳定度。因此，这的确是用来产生合剂的成分的非显而易见的选择，该合剂导致在限制酶活性的损失方面，出人意料的并且完全有利的结果。表1a证明，如本申请的权利要求1中所述的合剂使可能开发非常高程度的稳定性。此外，最大的稳定性是用此表中所描述的最后合剂获得的，用各成分的最佳剂量产生的，如本申请的权利要求2中所述。
表2证明，甘油(单独和甚至以高剂量使用)不会使可能实现令人满意的程度的稳定性。表3证明，用其他糖取代甘油也不会使可能实现令人满意的程度的稳定性。
表1
表1a
0％甘油 30％甘油 40％甘油 50％甘油
0 100 100 100 100
30 0 53 65 69
60 0 27 44 56
90 0 7 16 28
表2*
表3
PS：山梨酸钾
*在碳酸钙的情况下，还注意到大型不溶性沉积物的形成
麦芽糖浆的制造
进行两个测试，涉及从用根据本发明所述的合剂或不用根据本发明所述的合剂稳定化的两种β-淀粉酶的水溶液制造麦芽糖浆，这2种溶液在使用前，已经保持在25℃下90天。
在5.7至6.5的pH下，借助0.2％的α-淀粉酶(由诺维信公司销售的TERMAMYL120L)，将具有31％干物质的淀粉乳以常规方式液化，直至大约等于6的DE。
然后将反应介质在140℃下加热数秒，以抑制α-淀粉酶，然后将pH调节至5和5.5之间，并且将温度调节至55℃。
在支链淀粉酶(由ABM公司销售的PULLUZYME 750L)和产麦芽糖α-淀粉酶(由诺维信公司销售的MALTOGENASE 4000L)以及等于0.1％的干物质的剂量的β-淀粉酶的水溶液存在下，糖化在35％干物质或略微低于此下进行。
β-淀粉酶的水溶液由超滤渗余物组成，具有按干重计，等于其总重量的15％的α-淀粉酶的含量，如在以上实例中所述。
在不根据本发明的第一测试中，用根据表1的第二栏所述的合剂(50％甘油+0.2％PS+1％Na2HPO4)将此溶液稳定化。如上所述，溶液在使用之前保持在25℃的温度下90天。
在根据本发明的第二测试中，用根据表1a的最后一栏所述的合剂(40％甘油+0.2％PS+0.2％Na2CO3)将此溶液稳定化。如上所述，溶液在使用之前保持在25℃的温度下90天。
对于这两个测试，持续大约72小时的糖化给出示出以下构成的水解产物：
不根据本发明：
DP1：2％，DP2：77.9％，DP3：5.6％
根据本发明：
DP1：5％，DP2：88％，DP3<1.5％
麦芽糖浆的制造
然后进行4个测试，涉及从β-淀粉酶的4种稳定化的水溶液制造麦芽糖糖浆。进行根据本发明所述的3个测试和一个参考测试，使用已经在使用之前储存在25℃下90天的稳定化的溶液。
在5.7至6.5的pH下，借助0.2％的α-淀粉酶(由诺维信公司销售的TERMAMYL120L)，将具有31％干物质的淀粉乳以常规方式液化，直至大约等于6的DE。
然后将反应介质在140℃下加热数秒，以抑制α-淀粉酶，然后将pH调节至5和5.5之间，并且将温度调节至55℃。
在支链淀粉酶(由ABM公司销售的PULLUZYME 750L)和产麦芽糖α-淀粉酶(由诺维信公司销售的MALTOGENASE 4000L)以及等于0.1％的干物质的剂量的β-淀粉酶的水溶液存在下，糖化在35％干物质或略微低于此下进行。
β-淀粉酶的水溶液由超滤渗余物组成，具有按干重计等于其总重量的15％的β-淀粉酶的含量，如在以上实例中所述。
在不根据本发明的第一测试(CP)中，用根据表1的第二栏所述的合剂(50％甘油+0.2％PS+1％Na2HPO4)将此溶液稳定化。如上所述，溶液在使用之前保持在25℃的温度下90天。
在根据本发明的第二测试(EX1)中，用根据表1a的最后一栏所述的合剂(40％甘油+0.2％PS+0.2％Na2CO3)将此溶液稳定化。如上所述，溶液在使用之前保持在25℃的温度下90天。
在根据本发明的第三测试(EX2)中，用根据表1a的第四栏所述的合剂(40％甘油+0.4％PS+0.2％Na2CO3)将此溶液稳定化。如上所述，溶液在使用之前保持在25℃的温度下90天。
在根据本发明的第四测试(EX3)中，用根据表1的第三栏所述的合剂(40％甘油+0.2％PS+1％Na2CO3)将此溶液稳定化。如上所述，溶液在使用之前保持在25℃的温度下90天。
对于这些测试，对于这些实例中的每一个，持续大约72小时的糖化给出示出以下构成的麦芽糖浆：
麦芽糖浆CP：
葡萄糖：2％，麦芽糖：77.9％，麦芽三糖：5.6％
麦芽糖浆EX1：
葡萄糖：5％，麦芽糖：88％，麦芽三糖：<1.5％
麦芽糖浆EX2：
葡萄糖：3.2％，麦芽糖：82.1％，麦芽三糖：3.7％
麦芽糖浆EX3：
葡萄糖：2.8％，麦芽糖：81％，麦芽三糖：4.6％

Claims (10)

1.一种用于稳定获得自淀粉植物的可溶部分的β淀粉酶的水溶液的方法，该方法包括将以下项引入所述β淀粉酶的水溶液中的至少一个步骤：
a)山梨酸钾；
b)甘油；
c)碳酸钠。
2.如以上权利要求所述的方法，其特征在于将以下项引入所述β淀粉酶的水溶液：
a)从0.05％至0.5％，优先从0.1％至0.3％，以及非常优先大约0.2％山梨酸钾；
b)从30％至50％，优先从35％至45％，以及非常优先大约40％甘油；
c)从0.05％至0.5％，优先从0.1％至0.3％，以及非常优先大约0.2％碳酸钠；
这些％表示为按相对于所述水溶液的总重量计，每种成分的干重的％。
3.如以上权利要求之一所述的方法，其特征在于该水溶液具有按干重计，5％和20％之间的，优先10％和20％之间的，非常优先等于大约15％的其总重量的β淀粉酶的含量。
4.如以上权利要求之一所述的方法，其特征在于山梨酸钾、甘油和碳酸钠处于水溶液的形式。
5.如以上权利要求所述的方法，其中通过以下步骤获得β淀粉酶的水溶液，这些步骤在于：
-提供淀粉植物的可溶部分；
-对所述可溶部分进行微滤步骤，以获得微滤渗透物；
-对该微滤渗透物进行超滤步骤，以获得超滤渗余物。
6.使用以下项，以维持β淀粉酶在水溶液中的酶活性：
a)山梨酸钾；
b)甘油；以及
c)碳酸钠。
7.一种β淀粉酶的水溶液，包含：
a)山梨酸钾；
b)甘油；以及
c)碳酸钠。
8.如以上权利要求所述的水溶液，包含：
a)从0.05％至0.5％，优先从0.1％至0.3％，以及非常优先大约0.2％山梨酸钾；
b)从30％至50％，优先从35％至45％，以及非常优先大约40％甘油；
c)从0.05％至0.5％，优先从0.1％至0.3％，以及非常优先大约0.2％碳酸钠；
这些％表示为按相对于所述水溶液的总重量计，每种成分的干重的％。
9.如权利要求7和8中任一项所述的水溶液，具有按干重计5％和20％之间的，优先10％和20％之间的，非常优先大约15％的其总重量的β淀粉酶的含量。
10.如权利要求7至9之一所述的水溶液作为食品添加剂，作为消化剂，用于生产增甜剂，在药学中用于生产疫苗，并且最后是用于生产麦芽糖和富含麦芽糖的糖浆的用途。
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