CN106324154A - 一种分子印迹固相萃取‑液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法 - Google Patents
一种分子印迹固相萃取‑液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106324154A CN106324154A CN201610801161.XA CN201610801161A CN106324154A CN 106324154 A CN106324154 A CN 106324154A CN 201610801161 A CN201610801161 A CN 201610801161A CN 106324154 A CN106324154 A CN 106324154A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- detection
- phase extraction
- column
- solid
- solid phase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 title claims abstract description 14
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 22
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 claims description 25
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 claims description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 17
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims description 12
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 11
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 11
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 8
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims description 8
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 5
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 4
- XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;formic acid Chemical compound CC#N.OC=O XBJFCYDKBDVADW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 2
- 230000009514 concussion Effects 0.000 claims description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 abstract description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 abstract 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 6
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 6
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 6
- ARSXTTJGWGCRRR-XXKOCQOQSA-N Gonyautoxin 2 Chemical compound NC(=O)OC[C@@H]1N=C(N)N2C[C@@H](OS(O)(=O)=O)C(O)(O)[C@@]22N=C(N)N[C@@H]12 ARSXTTJGWGCRRR-XXKOCQOQSA-N 0.000 description 5
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 230000001769 paralizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 3
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 3
- 239000000238 shellfish toxin Substances 0.000 description 3
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 241000193882 Corbicula Species 0.000 description 1
- 241000200139 Gonyaulax Species 0.000 description 1
- 241000200287 Gymnodinium Species 0.000 description 1
- 101710138657 Neurotoxin Proteins 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 208000004891 Shellfish Poisoning Diseases 0.000 description 1
- 241000719329 Trentepohlia Species 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000004638 bioanalytical method Methods 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 description 1
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
本发明公开了一种分子印迹固相萃取‑液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法，属于生物样品前处理及化学分析检测领域。该方法利用分子印迹聚合构筑与印迹分子有高度相似性的三维孔穴和特定识别位点，从而实现对印迹分子的选择识别，提高了对目标物富集和去除干扰物的效率；并开发了以氰基柱为色谱分离柱的液质联用检测目标物的分析方法，利用氰基柱在反相使用时具有较强极性，可有效分离样品中的极性目标物和杂质，然后根据优化好的液质条件得到膝沟藻毒素在色谱柱上更好的分离效果及质谱检测效果。该方法具有样品需求量小,回收率和精密度高,检测限低，降低了检测时的基质效应等特点,适用于多种贝类样品的提取检测,有很好的通用性。
Description
技术领域
本发明属于生物样品前处理及化学分析检测领域，涉及一种分子印迹固相萃取-液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法。
背景技术
膝沟藻毒素GTX2&3是一种神经毒素，属于麻痹性贝毒(The paralytic shellfishpoisoning toxins，PSP)的一种，主要是由海洋浮游植物(亚历山大藻属、裸甲藻属)分泌产生。近年来，由于海洋环境污染导致有毒赤潮在我国附近海域频繁爆发，其分泌的藻毒素可以通过食物链传递经贝类富集导致人类中毒从而严重危害着海洋渔业及人类健康的发展。
针对麻痹性贝毒的危害，建立完善精确的检测方法、提高检测预防能力成为当务之急，现在得到广泛认可的检测方法是小白鼠生物法和液相色谱-荧光检测法，还有很多学者在细胞传感器、免疫分析学及电泳技术领域不断作出探索。这些检测方法虽然易于操作但对目标物定性定量分析的能力却有限。液质联用技术由于其特有的选择性、精密度、灵敏度高的特点成为近两年在检测分析麻痹性贝毒的热点，但由于目前已经建立的液质联用分析方法基质效应明显，检测限和定量限较高的原因难以在分析测试领域得到推广。
现代固相萃取技术集提取、净化与富集于一体，在样品前处理过程中越来越受到青睐。所以开发一种目标物回收率高，检测限、定量限和基质效应都较低固相萃取-液质联用分析方法成为在藻毒素分析领域的研究热点。目前方法的改进关键是固相萃取前处理贝类样品的纯化以及液质分析条件的优化。
发明内容
为了解决现有技术中生物分析方法(小白鼠生物法、酶联免疫法)和液相色谱-荧光检测法难以对藻毒素进行精确的定性定量分析，且固相萃取-液质联用检测方法具有检测限高、基质效应明显的问题。本发明提供了一种分子印迹固相萃取-液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法，利用分子印迹聚合构筑与印迹分子有高度相似性的三维孔穴和特定识别位点，从而实现对印迹分子的选择识别，提高了对目标物富集和去除干扰物的效率；并开发了以氰基柱为色谱分离柱的液质联用检测目标物的分析方法，利用氰基柱在反相使用时具有较强极性，可有效分离样品中的极性目标物和杂质，然后根据优化好的液质条件得到膝沟藻毒素在色谱柱上更好的分离效果及质谱检测效果。
本发明的具体技术方案是：
一种分子印迹固相萃取-液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法，包括如下步骤：
第一步，准备粗提取液；
取少量加标后的贝肉溶于一定比例的甲醇-水溶液，经涡旋震荡、超声、离心对目标物粗提取，得到贝肉粗提取液。
第二步，制备分子印迹固相萃取柱；
在空心固相萃取柱中采用湿法填柱法填入50～300mg的以咖啡因为虚拟模板制作的分子印迹微球，底部和上部分别用筛板封堵并压实。
第三步，进行分子印迹固相萃取；
①活化：先、后分别用甲醇、蒸馏水通过分子印记固相萃取柱进行活化；②上样：用盐酸溶液调节粗提取液的pH在4～7范围内、固相萃取仪控制上样流速在0.5～2ml/min；③淋洗：用体积比为95％～100％的甲醇-水溶液淋洗去除干扰物；④洗脱：用0.1mol/L冰醋酸-水溶液进行洗脱。
第四步，采用液质联用方法检测固相萃取后的洗脱液；
①液质联用的液相条件包括色谱柱、流动相A和流动相B，其中，色谱柱为氰基柱，流动相A为体积比0.1％甲酸-水溶液，流动相B为体积比0.05％甲酸-乙腈溶液；上样量为20ul，流速为0.6ml/min；②液质联用的质谱条件包括离子源为电喷雾电离源，扫描模式为正离子扫描，检测模式为选择性离子检测。
本发明的有益效果是：本发明通过建立的完整的分子印迹固相萃取-液质联用检测方法可对目标物精确的定量定性分析，提高了回收率，降低了检测限、定量限和基质效应。
附图说明
图1分子印记固相萃取过程示意图。
图2膝沟藻毒素GTX2&3标准品仪器上保留时间及峰形示意图。
图3膝沟藻毒素GTX2&3在一定浓度范围的标准曲线。
图4不同填料用量时对加标贝肉中目标物的提取回收率。
图5不同pH时对加标贝肉中目标物的提取回收率。
图6不同上样流速对加标贝肉中目标物的提取回收率。
图7不同比例甲醇-水淋洗时对加标贝肉中目标物的提取回收率。
图中：1下层筛板；2固相萃取柱；3上层筛板；4固相萃取填料；5分子印迹微球空穴；6粗提取液；7目标物；8杂质。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。
案例一：液质联用仪检测膝沟藻毒素GTX2&3方法的建立
本发明利用液相色谱质谱联用系统自动上样膝沟藻毒素GTX2&3标准溶液建立检测方法。经过优化后用到的液质联用检测条件是：①液相条件包括以氰基柱作为色谱柱，流动相A为体积比0.1％甲酸-水溶液，流动相B为体积比0.05％甲酸-乙腈溶液，上样量为20ul，流速为0.6ml/min，②质谱条件包括离子源为电喷雾电离源(ESI)，扫描模式为正离子扫描，检测模式为选择性离子检测(SIM)。根据优化后的方法上样检测浓度为1.2463μg/L标准品，可以得到峰形较好的液质图，如图2所示。
并配置不同浓度的膝沟藻毒素标准溶液，浓度分别为1.2463μg/L、3.11575μg/L、6.2315μg/L、9.34725μg/L、12.463μg/L于进样小瓶中，得到的标准曲线如图3所示。由图3可以看出在配制的浓度范围内标准方差大于0.999，线性关系良好。
案例二：分子印记固相萃取柱的制备
如图1所示，分子印迹固相萃取柱装置制备方法是：向3ml聚丙烯材质的空心固相萃取柱2中填入以咖啡因为虚拟模板制作的分子印迹微球作为填料，采用湿法填柱，两端以筛板1、3封堵压实。
由于样品基质较为复杂，不同填料用量对萃取溶液有发生侧漏和堵塞的可能，所以本发明考察填充不同质量的微球，质量分别为50mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg对目标物的回收率，结果如图4所示。由图4结果可以看出当填料用量在150～200mg时对目标物的回收率较高。
案例三：对黄蚬子贝肉加标后固相萃取及液质检测
取加标后的贝肉中溶解于50％甲醇-水溶液于50ml离心管中，经涡旋振荡1min，超声5min,10000转速下离心10min,提取上清液于50ml比色管中，重复3次，用蒸馏水定容至50ml为贝肉粗提取液。
粗提取液的分子印记固相萃取步骤是：先用5～10ml甲醇、后用5～10ml蒸馏水通过分子印记固相萃取柱进行活化，取10ml粗提取液用如图1所示的装置固相萃取。由于上样溶液的pH、上样流速会影响分子印迹材料对目标物的吸附效率，淋洗的目的是洗出杂质保留目标物，淋洗试剂的选取会影响目标物的保留效果。采用正交试验设计对萃取条件进行优化，用盐酸溶液调节粗提取液的pH 2-7、固相萃取仪控制上样流速0.5～2ml/min、用1ml体积比为90％～100％的甲醇-水溶液淋洗去除干扰物、取1ml的0.1mol/L冰醋酸-水溶液洗脱进行固相萃取条件优化，结果如图5、6、7所示。从实验结果可以看出当pH在4～7，流速在1～1.5ml/min，淋洗溶液为水中甲醇的体积百分比为96～98％时目标物的回收率最高。
Claims (3)
1.一种分子印迹固相萃取-液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：
第一步，准备粗提取液；
取少量加标后的贝肉溶于一定比例的甲醇-水溶液，经涡旋震荡、超声、离心对目标物粗提取，得到贝肉粗提取液；
第二步，制备分子印迹固相萃取柱；
在空心固相萃取柱中采用湿法填柱法填入50～300mg的以咖啡因为虚拟模板制作的分子印迹微球，底部和上部分别用筛板封堵并压实；
第三步，进行分子印迹固相萃取；
①活化：先、后分别用甲醇、蒸馏水通过分子印记固相萃取柱进行活化；②上样：用盐酸溶液调节粗提取液的pH在2～7范围内、固相萃取仪控制上样流速在0.5～2ml/min；③淋洗：用体积比为90％～100％的甲醇-水溶液淋洗去除干扰物；④洗脱：用0.1mol/L冰醋酸-水溶液进行洗脱；
第四步，采用液质联用方法检测固相萃取后的洗脱液；
①液质联用的液相条件包括色谱柱、流动相A和流动相B，其中，色谱柱为氰基柱，流动相A为体积比0.1％甲酸-水溶液，流动相B为体积比0.05％甲酸-乙腈溶液；上样量为20ul，流速为0.6ml/min；②液质联用的质谱条件包括离子源为电喷雾电离源，扫描模式为正离子扫描，检测模式为选择性离子检测。
2.根据权利要求1所述的一种分子印迹固相萃取-液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法，其特征在于，第二步中，分子印迹微球的填入量为150～200mg。
3.根据权利要求1或2所述的一种分子印迹固相萃取-液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法，其特征在于，第三步中的②上样：用盐酸溶液调节粗提取液的pH在4～7范围内、固相萃取仪控制上样流速在1～1.5ml/min；③淋洗：用体积比为96％～98％的甲醇-水溶液淋洗去除干扰物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610801161.XA CN106324154B (zh) | 2016-09-05 | 2016-09-05 | 一种分子印迹固相萃取-液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610801161.XA CN106324154B (zh) | 2016-09-05 | 2016-09-05 | 一种分子印迹固相萃取-液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106324154A true CN106324154A (zh) | 2017-01-11 |
| CN106324154B CN106324154B (zh) | 2018-07-03 |
Family
ID=57788084
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610801161.XA Expired - Fee Related CN106324154B (zh) | 2016-09-05 | 2016-09-05 | 一种分子印迹固相萃取-液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106324154B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108977506A (zh) * | 2018-08-08 | 2018-12-11 | 浙江海洋大学 | 一种快速筛选产生膝沟藻毒素微生物菌株的方法及所用的地高辛标记dna探针 |
| CN109061031A (zh) * | 2018-08-15 | 2018-12-21 | 浙江海洋大学 | 微小亚历山大藻代谢产物－膝沟藻毒素的分离纯化方法 |
| CN109682789A (zh) * | 2018-12-20 | 2019-04-26 | 大连理工大学 | 一种微塑料表面吸附污染物的原位检测方法 |
| CN117330552A (zh) * | 2023-11-27 | 2024-01-02 | 中国科学院烟台海岸带研究所 | 分子印迹传感纸芯片检测膝沟藻毒素1,4的方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004072640A1 (en) * | 2003-02-12 | 2004-08-26 | Cleveland Biosensors Pty Ltd | The detection and identification of saxiphilins using saxitoxin-biotin conjugates |
| CN104792852A (zh) * | 2015-04-09 | 2015-07-22 | 宁波大学 | 一种藻毒素分子印迹化学受体传感器及其制备方法和应用 |
| CN105259292A (zh) * | 2015-11-12 | 2016-01-20 | 上海市农业科学院 | 一种测定水产品中麻痹性贝类毒素的方法 |
-
2016
- 2016-09-05 CN CN201610801161.XA patent/CN106324154B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004072640A1 (en) * | 2003-02-12 | 2004-08-26 | Cleveland Biosensors Pty Ltd | The detection and identification of saxiphilins using saxitoxin-biotin conjugates |
| CN104792852A (zh) * | 2015-04-09 | 2015-07-22 | 宁波大学 | 一种藻毒素分子印迹化学受体传感器及其制备方法和应用 |
| CN105259292A (zh) * | 2015-11-12 | 2016-01-20 | 上海市农业科学院 | 一种测定水产品中麻痹性贝类毒素的方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| LIAN, ZI-RU; WANG, JIANG-TAO: "Study of molecularly imprinted solid-phase extraction of gonyautoxins 2,3 in the cultured dinoflagellate Alexandrium tamarense by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection", 《ENVIRONMENTAL POLLUTIO》 * |
| MEI, XIAO-QI; HE, XIU-PING; WANG, JIANG-TAO: "Molecularly imprinted polymer as efficient sorbent of solid-phase extraction for determination of gonyautoxin 1,4 in seawater followed by high-performance liquid chromatography-fluorescence detection", 《ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY》 * |
| 吴伟: "分子印迹固相萃取技术分析环境中的典型有机物", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 * |
| 梅晓颀: "分子印迹固相萃取联用高效液相色谱分离测定海水中的膝沟藻毒素GTX1，4", 《分析化学》 * |
| 连子如: "分子印迹固相萃取技术在海洋有机污染物和麻痹性贝毒分离检测中的应用", 《中国博士学位论文全文数据库》 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108977506A (zh) * | 2018-08-08 | 2018-12-11 | 浙江海洋大学 | 一种快速筛选产生膝沟藻毒素微生物菌株的方法及所用的地高辛标记dna探针 |
| CN108977506B (zh) * | 2018-08-08 | 2022-03-25 | 浙江海洋大学 | 一种快速筛选产生膝沟藻毒素微生物菌株的方法及所用的地高辛标记dna探针 |
| CN109061031A (zh) * | 2018-08-15 | 2018-12-21 | 浙江海洋大学 | 微小亚历山大藻代谢产物－膝沟藻毒素的分离纯化方法 |
| CN109682789A (zh) * | 2018-12-20 | 2019-04-26 | 大连理工大学 | 一种微塑料表面吸附污染物的原位检测方法 |
| CN117330552A (zh) * | 2023-11-27 | 2024-01-02 | 中国科学院烟台海岸带研究所 | 分子印迹传感纸芯片检测膝沟藻毒素1,4的方法 |
| CN117330552B (zh) * | 2023-11-27 | 2024-02-02 | 中国科学院烟台海岸带研究所 | 分子印迹传感纸芯片检测膝沟藻毒素1,4的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN106324154B (zh) | 2018-07-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106324154A (zh) | 一种分子印迹固相萃取‑液质联用检测膝沟藻毒素的分析方法 | |
| Mei et al. | Determination of trace bisphenol A in complex samples using selective molecularly imprinted solid-phase extraction coupled with capillary electrophoresis | |
| CN104297406B (zh) | 一种广谱鉴定β-受体激动剂类药物的方法 | |
| CN103336083B (zh) | 一种青霉素菌渣中青霉素g的高效液相色谱检测方法 | |
| CN105424825B (zh) | 一种分离富集测定水环境中12种残留药物的方法 | |
| CN105203654B (zh) | 一种用于测定中兽药散剂中11种非法添加药物含量的方法 | |
| CN107543876A (zh) | 一种固相萃取‑液相色谱串联质谱法同时检测水体中9种雌激素类物质的方法 | |
| CN101865898B (zh) | 一种测定土壤中酞酸酯的方法 | |
| CN103033596B (zh) | 磁性分子印迹技术在微流控分析系统手性识别中的应用 | |
| CN104833743A (zh) | 一种液质联用分析生物样品中卡西酮、甲卡西酮、4-甲基甲卡西酮的方法 | |
| CN104391061A (zh) | 免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱测定海洋生物中河豚毒素的方法 | |
| CN104568562A (zh) | 一种水样及其悬浮物中亚硝胺类化合物的预处理方法 | |
| CN103267820B (zh) | 一种污泥中多种雌激素的共检测方法 | |
| CN104155375B (zh) | 同步衍生超声乳化微萃取气相色谱法测定环境水样中苯胺类化合物的方法 | |
| CN104535548B (zh) | 一种管内固相微萃取技术用于牛奶中磺胺类抗菌药的快速检测方法 | |
| CN102692475B (zh) | 甲基苯胺类化合物的气相色谱-质谱检测法 | |
| CN103776879B (zh) | 一种分子印迹固相萃取技术-电位法联用检测有机污染物的方法 | |
| CN102507794A (zh) | 一种采用尿液快速检测所中毒物的方法 | |
| Lucy et al. | Simultaneous determination of phenylephrine hydrochloride and pheniramine maleate in nasal spray by solvent extraction-flow injection analysis using two porous-membrane phase separators and one photometric detector | |
| CN104713954B (zh) | 分散液液微萃取程序升温气相色谱/质谱在检测水样中卤代乙腈类物质含量的方法 | |
| CN102507820A (zh) | 一种同时检测敌百虫和久效磷的方法 | |
| CN106908547B (zh) | 油田地层水中硫氰酸根的离子色谱检测方法 | |
| CN104280491B (zh) | 一种检测土壤中11种离子液体阳离子的分析方法 | |
| CN104407085B (zh) | 应用液质-质联用仪测定淡水池塘底泥中氯霉素的方法 | |
| CN108414654A (zh) | 基于spe柱同时富集检测饮用水中喹诺酮类抗生素的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20230414 Address after: Room 604, Building 6, No. 8 Dongchuan Road, Licang District, Qingdao City, Shandong Province, 266199 Patentee after: Qingdao Aisotuopu Technology Co.,Ltd. Address before: 124221 No.2 Dagong Road, Liaodongwan New District, Panjin City, Liaoning Province Patentee before: DALIAN University OF TECHNOLOGY |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20180703 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |