CN1063225C - 微生物、微生物棉饼脱毒剂及其制造方法 - Google Patents

Abstract

本发明属微生物及其产品的制备。它是以“文01”号为基础，再加上糖化菌和细菌AS.1.807组成的复合菌剂，简称微生物棉饼脱毒剂，胶毒工艺与作馒头相似，脱毒前每公斤棉饼含棉酚562ppm，粗蛋白为39.62%，脱毒后每公斤棉饼棉酚残留量为140ppm，比国家饲料标准400ppm低260ppm，可以代替90%以上的豆饼喂任何禽、畜；若全面推广微生物脱毒棉饼将立即缓解我国饲料蛋白的紧张状态。

Description

微生物、微生物棉饼脱毒剂及其制造方法

本发明属微生物及其产品的制备。

目前在我国养殖业已发展到一定规模。但与世界上发达国家相比，人均消费肉、蛋、奶的水平还是较低的，因而养殖业今后仍然需要有一个大发展。我国发展养殖业的瓶颈在于饲料蛋白源的缺乏，据估计我国每年生产混合饲料在3000万吨以上，需植物性蛋白饲料600多万吨，而我国年生产大豆饼不足400万吨，形成了200万吨的缺口，多少年来，许多科技工作者一直在努力寻求开辟新的饲料蛋白来源。我国是个产棉大国，每年可产棉籽饼350多万吨，由于棉籽饼中粗蛋白含量约在36-42％(相当于豆饼的80％，远高于小麦、玉米和大米的蛋白质含量)、所以众多的科技人员早在10多年前就将它作为潜在的饲料蛋白质源进行开发，但进展却进展十分缓慢。进展不快的主要原因是棉籽饼中含有毒物质一棉酚，它能严重地损伤畜、禽的消化、生殖和视力系统，棉酚的清除又是十分困难的，有些科技人员尽管从技术上找到多种脱酚技术，但由于成本高昂以及脱毒指标不稳，或其它营养成份遭到破坏等原因，因而可以说一直到1996年我国仍未找到一种可同时做到投资少、建设快、成本低、无污染、脱毒指标稳定，棉籽饼中营养成分不破坏，还能适应广大农户的脱毒技术。

本发明的目的是研制一种价廉、物美、脱毒效果好的脱毒剂，既不需贵重设备，也不需高温、高压，也不用化学药剂或添加剂，只要有5℃以上温度，不论在盆、缸或水泥地上，均能进行发酵脱毒，其工艺与制作馒头相似，脱毒时间3-5天，每公斤棉饼的脱毒率为117.3-140mg，大大低于400mg/公斤的国际标准，脱毒后粗蛋白达到的49.42％(较脱毒前升高9.86％)配成全价饲料可以喂任何畜、禽。经对比试验，用微生物脱毒棉饼可代替豆饼90-94％，对禽、畜的适口性良好，养殖畜禽均不受影响。

本发明的内容是：

一种微生物，名叫文01号，它是嗜热性侧孢霉(Sporotuichum thermophile)中的一种。

文01号菌种的来源及微生物特征：

文01号菌种是一种腐生性很强的霉菌，系用Co⁶⁰γ射线10万格瑞照射“301”菌种，经分离培养而成，定名为‘文01号’。在生物学系统中的位置为真菌门、半知菌纲、丛梗孢目、丛梗孢科、侧孢霉属、嗜热性侧孢霉种中的一个新菌种。文01号在PDA培养基上菌落常呈绒毯状、颜色为白色或浅黄色，菌丝比‘301’菌丝略短，宽度为3-10μm，有很多分枝，呈管状，每节为一个细胞，菌丝分营养菌丝和生殖菌丝两种，在生殖菌丝上着生孢子梗，在梗上侧生许多分生孢子形态各异。文01号既能用菌丝繁殖，也能用分生孢子繁殖，一般24小时繁殖一代。文01号是一种中温型菌种，适应性很强，最低要求5℃，最适温度为25-37℃，最高40-50℃，在零下10℃和短期90℃也不会死亡。文01号耐湿性强，要求培养基含水量在65-75％，它是一种好气性的真菌，需氧量较大，菌丝正常的CO₂含量为0.03％，菌丝生长阶段不需光照，在培养中适于中性至碱性环境，pH值为6.7-6.9，最佳碳氮比为30-40∶1，可在冷冻或干燥的条件下保藏。

糖化菌它是嗜热侧孢毒(SPorotrichum thermophile)，2000年6月19日保藏于CGMCC，保藏号为CGMCC NO 0459。

糖化菌的来源及其生物特性：

糖化菌与301菌种同源，系1994年用Co⁶⁰γ射线辐照2441菌种后的不同选系，是高温型菌种，能分泌糖化酶，使多糖分解成单糖，它的外部形态与301菌种近似，在琼脂培养基上呈绒毯状，颜色为黄白色，菌丝比301菌种短而弱，糖化菌的一、二、三级菌种的生产与文01号相同，三级菌种制成后，经晾干粉碎后即成糖化菌菌剂。

AS.1.807菌种的来源及其生物学特性：

AS.1087菌种是一种细菌，它能产生蛋白酶，1994年自科学院微生物所引入，它的各级菌种配方都是微生物所提供的。

一种微生物，其特征是嗜热性侧孢霉(sporotrichum thermophile)中的一种，名为‘文01’号，1998年二月九日保藏于CGMCC，保藏号为CGMCC №0339。

一种微生物棉饼脱毒剂其特征是以‘文01’号为基础，加上糖化菌和AS.1. 807细菌组成的复合菌剂，它的配方为(重量百分比)：

(1)‘文01’号菌种    50-70％

(2)糖化菌            15-20％

(3)AS.1.807          15-20％

一种微生物棉饼脱毒剂的制造方法，包括菌种培养和脱毒剂的制造，其特征在于：

㈠‘文01’号菌种生产的工艺过程：

(1)一级菌种培养：一级菌种由最原始斜面一级菌种扩繁而来，一支斜面菌种可扩接30～40支一级菌种，培养基为PDA或麦芽汁，PH值为6.7～6.9，培养温度为38°-42℃，培养时间为72小时。

(2)二级菌种培养：将一级菌种接种于麦粒培养基上，麦粒培养基的制作方法是：先称取麦粒5Kg，在清水中浸泡12小时，再放入锅内煮沸，直至麦粒无白心为止，涝出晾干，在通风处晾至无明水，再加入碳酸钙15克，石膏60克，将麦粒拌匀即可，麦粒用玻璃瓶分装，PH值为6.7～6.9，一支一级菌种可接两瓶，培养温度为38～42℃，培养时间为3～4天。

(3)三级菌种培养：可用二级菌种进行扩繁，培养基仍为麦粒，一般一瓶二级种可以扩接30～40瓶，将三级菌种从瓶内掏出，晾干后粉碎即成三级菌种。

㈡糖化菌菌种生产的工艺过程：

糖化菌与‘文01’号菌种同源，前者系高温型菌种，主要分泌糖化酶，其作用是将多糖分解为单糖，培养温度为43～45℃，而‘文01’号系中温型菌种，它分泌纤维素酶，其作用是分解纤维素和半纤维素，培养温度为38～42℃，一、二、三级菌种的生产过程和‘文01’号相同。

㈢AS.1. 807菌种生产的工艺过程：

AS.1.807菌种是一种细菌，它能产生蛋白酶，它的各级菌种生产配方如下：

(1)一级菌种培养基：牛肉膏5克，蛋白胨10克，Nacl0.5克，葡萄糖10克，琼脂18～20克，清水1000ml，PH值为7，培养温度为28～32℃，培养时间3～4天。

(2)二级菌种培养基：(液体培养)

葡萄糖10克，牛肉膏3克，蛋白胨10克，Nacl 0.5克，碳酸钙3-5克，清水1000ml，PH值为7。

制成液体培养基后，分装于250-300ml的三角瓶中，每瓶150ml，在105℃的压力下灭菌1.5小时，灭菌结束后，待冷至25℃，用无菌水稀释一级菌种，一般一支一级菌种接两瓶，每天摇瓶3-4次，培养温度为28～32℃，培养72小时，当液面出现少许白色菌丝即可。

(3)三级菌种培养：采用固体培养基，曲盘大量培养；

米糠20％，麦夫60％，豆饼10％，玉米面5％，骨粉5％(重量百分比)，另加清水25-30％。

按以上比例将料备足，用水将料拌匀，在105℃下灭菌2小时，趁热分装于曲盘中，在恒温室培养，当料温降至25℃时，按干料重的10％接入液体菌种，在28-32℃培养，每天翻料3-4次，培养料用消过毒的布或纤维袋复盖，培养5天，当料面长出白色菌丝，料温降至室温即可，将培养料取出烘干或阴干备用。

微生物脱毒剂的制造：

按玉米面30％，麦夫30％，棉饼35％，红糖5％(重量百分比)，再加原菌5％，原菌由三种菌合成，即‘文01’号50-70％，糖化菌15-20％，AS.1.80715-20％，另加水50％。

先将红糖溶于少量水中，再加入棉饼、玉米面和麦夫，然后将水加足，然后在盆、缸或水泥地上分三层发酵，在一、二层上各撒原种2％，盖上第三层后撒原种1％，堆成馒头状，顶部用手抹平，打上若干通风孔，盖上麻袋或布保湿，经3-4天发酵，白色菌丝布满料面，有甜香味即成。

本发明的优点：

一、投资少、成本低、用微生物脱毒剂对棉饼进行脱毒，既不用高温、高压或化学药剂，更不需贵重设备，只要室温保持5℃以上，可在农舍的盆、缸和水泥地上均能进行发酵脱毒，脱毒工艺与农村作馒头近似，一般农民均能掌握，每公斤棉饼脱毒费用0.1元。

二、脱毒效果好：据农业部农业品质量检测中心(河南山东)二处测定，脱毒前棉饼的粗蛋白为39.62％，棉酚含量为562mg/kg，脱毒后粗蛋白升至49.48％，棉酚降至117.3-140mg/kg，棉酚含量比国家饲料标准400mg/kg低260-282.7mg/kg，完全可以饲喂各种禽、畜；粗蛋白比豆饼高6.48％，根据一年多饲喂试验可以代替豆饼90-94％。目前每公斤豆饼值3.3元，每公斤棉饼值1.4元，每公斤差价为1.9元。从而可以大大节约原料成本。

三、适口性好：经微生物脱毒剂脱毒后，棉饼上布满了白色菌丝，即菌体蛋白，无任何异味，禽、畜都爱吃，经5000只种鸡，20000只肉鸡，13000只蛋鸡，15000只肉鸭，肉猪4000多只，肉牛537头，蛋鸡产蛋正常，肉鸡生长周期缩短5-7天，肉鸭生长周期缩短8-10天，种公鸡性成熟略早，种蛋育雏正常，在猪牛的饲养上也非常成功。

微生物棉饼脱毒剂实施例：

实施例一：先称取棉饼100kg，加水50kg，加棉饼脱毒剂1公斤，充分搅拌后，再在干净的水泥地上堆积，在一、二层上各撒脱毒剂0.4公斤，盖上第三层后撒脱毒剂0.2公斤，用手或木板抹平，打上若干通气孔，盖上麻袋或草帘，经3-5天发酵，白色菌丝布满料面，有甜香味，经晒干粉碎即成脱毒棉饼。

实施例二：先称取棉饼98kg，豆饼2kg，加水50kg，加棉饼脱毒剂1公斤，充分搅拌后，再在大缸中堆积，在一、二层上各撒脱毒剂0.4公斤，盖上第三层后撒脱毒剂0.2公斤，用手或木板抹平，打上若干通气孔，盖上麻袋或草帘，经3-5天发酵，白色菌丝布满料面，有甜香味，经晒干粉碎即成脱毒棉饼。

Claims (3)

1、一种微生物，其特征是嗜热性侧孢霉(sporotrichum thermophile)中的一种，名为‘文01’号，1998年二月九日保藏于CGMCC，保藏号为CGMCC№ 0339，另一种，糖化菌2000年6月19日保藏于CGMCC，保藏号为CGMCC NO.0459。

2、一种微生物棉饼脱毒剂其特征是以‘文01’号为基础，加上糖化菌和AS.1.807细菌组成的复合菌剂。

3、一种微生物棉饼脱毒剂的制造方法，包括菌种培养和脱毒剂的制造，其特征在于：

㈠‘文01’号菌种生产的工艺过程：

(1)一级菌种培养：一级菌种由最原始斜面一级菌种扩繁而来，一支斜面菌种可扩接30～40支一级菌种，培养基为PDA或麦芽汁，PH值为6.7～6.9，培养温度为38°-42℃，培养时间为72小时；

(2)二级菌种培养：将一级菌种接种于麦粒培养基上，麦粒培养基的制作方法是：先称取麦粒5Kg，在清水中浸泡12小时，再放入锅内煮沸，直至麦粒无白心为止，涝出晾干，在通风处晾至无明水，再加入碳酸钙15克，石膏60克，将麦粒拌匀即可，麦粒用玻璃瓶分装，PH值为6.7～6.9，一支一级菌种可接两瓶，培养温度为38～42℃，培养时间为3～4天；

(3)三级菌种培养：可用二级菌种进行扩繁，培养基仍为麦粒，一般一瓶二级种可以扩接30～40瓶，将三级菌种从瓶内掏出，晾干后粉碎即成三级菌种；

㈡糖化菌菌种生产的工艺过程：

糖化菌与‘文01’号菌种同源，前者系高温型菌种，主要分泌糖化酶，其作用是将多糖分解为单糖，培养温度为43～45℃，而‘文01’号系中温型菌种，它分泌纤维素酶，其作用是分解纤维素和半纤维素，培养温度为38～42℃，一、二、三级菌种的生产过程和‘文01’号相同；

㈢AS.1.807菌种生产的工艺过程：

AS.1.807菌种是一种细菌，它能产生蛋白酶，它的各级菌种生产配方如下：

(1)一级菌种培养基：牛肉膏5克，蛋白胨10克，Nacl 0.5克，葡萄糖10克，琼脂18～20克，清水1000ml，PH值为7，培养温度为28～32℃，培养时间3～4天；

(2)二级菌种培养基：(液体培养)

葡萄糖10克，牛肉膏3克，蛋白胨10克，Nacl0.5克，碳酸钙3-5克，清水1000ml，PH值为7；

制成液体培养基后，分装于250-300ml的三角瓶中，每瓶150ml，在105℃的压力下灭菌1.5小时，灭菌结束后，待冷至25℃，用无菌水稀释一级菌种，一般一支一级菌种接两瓶，每天摇瓶3-4次，培养温度为28～32℃，培养72小时，当液面出现少许白色菌丝即可；

(3)三级菌种培养：采用固体培养基，曲盘大量培养；

米糠20％，麦夫60％，豆饼10％，玉米面5％，骨粉5％(重量百分比)，另加清水25-30％；

按以上比例将料备足，用水将料拌匀，在105℃下灭菌2小时，趁热分装于曲盘中，在恒温室培养，当料温降至25℃时，按干料重的10％接入液体菌种，在28-32℃培养，每天翻料3-4次，培养料用消过毒的布或纤维袋复盖，培养5天，当料面长出白色菌丝，料温降至室温即可，将培养料取出烘干或阴干备用；

㈣微生物脱毒剂的制造：

按玉米面30％，麦夫30％，棉饼35％，红糖5％(重量百分比)，再加原菌5％，原菌由三种菌合成，即‘文01’号50-70％，糖化菌15-20％，AS.1.807 15-20％，另加水50％；

先将红糖溶于少量水中，再加入棉饼、玉米面和麦夫，然后将水加足，然后在盆、缸或水泥地上分三层发酵，在一、二层上各撒原种2％，盖上第三层后撒原种1％，堆成馒头状，顶部用手抹平，打上若干通风孔，盖上麻袋或布保湿，经3-4天发酵，白色菌丝布满料面，有甜香味即成。