CN1934989A - 一种微生物饲料添加剂 - Google Patents
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Abstract
一种微生物饲料添加剂，涉及含活性微生物的饲料添加剂。它是用木霉菌、曲霉菌、放线菌、芽孢杆菌、酿酒酵母菌Li1012(Saccharomyces cereIsiae Li1012)为菌种经纯种扩大培养、液体发酵培养、固体二级发酵培养等制备步骤得到的含细菌数5.0～6.0×107cfu/g、酵母菌数4.0～5.0×104cfu/g、霉菌数2.0～3.0×104cfu/g的添加剂，添加剂的含水量≤10％，产品无任何化学物质，无激素，有良好的安全性；制备方法简单，操作条件易控制，培养基原料来源广泛，价格低廉，生产周期短，生产成本低，有利推广应用；产品质量高，混入饲料后的稳定性好；产品使用、保存、运输方便。
Description
技术领域
本发明涉及含活性微生物的饲料添加剂。
背景技术
微生物饲料添加剂因具有安全、环保、无副作用和有抗病、促生长等优点，所以在国内外都得到广泛的应用。但是不同的厂商应用不同的菌种和不同的生产工艺得的饲料添加剂有不同的功效。CN1579200A所公开的一种多效微生物饲料添加剂用单一的乳酸芽孢杆菌为菌种发酵所得，且产品是液体的发酵液，产品在一定的温度可继续发酵，所以产品不稳定，难以控制质量。为此我们有必要开发新的适合我国广大农村需要的，不加任何化学物质和激素的饲料添加剂。
发明内容
本发明的目的是提供一种不加任何化学物质和激素的含活性微生物菌群的饲料添加剂。
为实现本发明的目的所采用的技术方案是：用木霉菌、曲霉菌、放线菌、芽孢杆菌、酿酒酵母菌Li1012(Saccharomyces cerevisiae Li1012)为菌种由以下制备步骤得到的含细菌数5.0～6.0×107cfu/g、酵母菌数4.0～5.0×104cfu/g、霉菌数2.0～3.0×104cfu/g的添加剂，添加剂的含水量≤10％，所述的制备步骤：
第一步纯种扩大培养：将麸皮100重量份、水70～80重量份组成的固体培养基A置于容器中，灭菌，分别取木霉菌、曲霉菌、放线菌、芽孢杆菌的菌种分别接种于固体培养基A中，在30～33℃恒温培养48小时～72小时，
第二步液体发酵培养：取酿酒酵母菌Li1012的菌种接种于液体培养基中，于30～32℃恒温培养18～20小时得发酵液，所说的液体培养基PH值为6.4～7.0，由下列重量百分比的原料组成：
酵母膏0.5～0.8％ 蛋白胨1.0～1.3％ 葡萄糖0.5～0.8％
白砂糖1.0～1.3％ 其余为水；
第三步固体二级发酵培养：一级发酵：在发酵罐中加入由麸皮90～95份、米糠10～5份、水45～50份重量份的原料组成的固体培养基B，取固体培养基B重量的0.06～0.2％的经第二步液体发酵培养所得的发酵液和各取固体培养基B重量的0.1～0.3％经第一步纯种扩大培养的木霉菌、曲霉菌、放线菌、芽孢杆菌接入发酵罐的固体培养基B中，于温度31～34℃，培养30～36小时得固体培养物，在70℃以下干燥，控制含水量≤10％；
二级发酵：取一级发酵所得的固体培养物，按固体培养基C重量的1％计，接入由麸皮50份、米糠48份、红糖2份、水份50～55份重量份组成的固体培养基C中进行培养，在温度45～60℃，培养72～96小时后在70℃以下干燥，控制组合物的含水量≤10％；
第四步取第三步所得的含活性微生物菌群的组合物8～10份、红糖2～3份、骨粉40～45份、豆粕20～25份、鱼粉25～35份、干净山土或页岩900～1000份、水40～50份重量混和均匀后置于发酵槽堆积发酵，自然发酵4～6天后在70以下干燥，即得饲料添加剂。
本发明所用的酿酒酵母菌号为Li1012，Saccharomyces cerevisiaeLi1012，2006年4月30日保藏于中国武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC NO：M206044，该菌株比啤酒酵母菌的菌株生长时的菌体厚实，湿润，保存期稳定，用于生产时进入产酒精状态比啤酒酵母菌的菌株快一倍以上。
酿酒酵母菌Li1012用于养殖对家畜起到很好的整肠作用，对有害菌在体内的活动有抑制和呆死作用，从而对保持健康起到很大的作用，由于含有活性微生物菌群的组合物及其酶类的作用，饲料在家畜的消化器官内容易很好地消化，提高了食物的消化率，降低粪便的臭味，减少畜舍，鸡舍臭味对环境的公害。酵素菌饲料添加剂在制作时采用科学的配方，经发酵制作后本身已含有充足均衡的多种营养和各种微量元素，使家畜肉质鲜美。
酿酒酵母菌Li1012为生产抑制病原菌的放线菌、乳酸杆菌提供了很好的营养源，从而高效地繁殖，用于制备肥料对农作物的健康生长有着极大的作用，使农作物的产量大大提高，产品的质量有所提高，口感得到改善。饲料添加剂对禽畜的健康生长也有着极大的作用。
木霉菌(Trichoderma)、曲霉菌(Aspergillus niger)、放线菌(Actinomyces)、芽孢杆菌(Bacillus subtilis Bacillus licheniformis)是公知的有益菌。
芽孢杆菌是一种需氧的非致病菌，它在肠道或储藏过程中都以内生子的形式存在，不消耗饲料养分，可保持饲料的质量，进入肠道后，在肠道迅速复活，复活率接近100％，它能使空肠内的PH值下降，氨浓度降低，并消耗大量的氧，维持肠道厌氧环境，抑制病菌的生长，维持肠道正常生态平衡，它能产生活性很高的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及多种氨基酸。芽孢杆菌的抗抑性强，具有耐高温、耐酸碱等特点。
曲霉菌在代谢过程中能产生多种活性很强的酶系如葡萄糖淀粉酶、α淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶等。能提高饲料的消化率和营养的转化率。
木霉菌是生产纤维素酶的重要菌种，能强烈分解纤维素和木质素等复杂物质，加速饲料中桔杆、稻壳、麸皮等纤维质的分解，提高饲料的消化率和利用率。
放线菌是天然抗生素的主要产生菌，能提高禽畜的抗病能力。本发明所提供的饲料添加剂含有一定量的活性微生物有益菌群，它能通过直接增强动物对肠内有害微生物菌的抑制作用，或者通过增强非特异性免疫功能来预防疾病，间接起到促进动物生长和提高饲料转化率的作用。
另外，本发明所用的培养基采用大量易得的干净山土或页岩，大大降低了生产成本，而且增加了饲料添加剂中大量微量元素，有益于禽蓄的生长。
本发明的有益效果；
1.产品无任何化学物质，无激素，有良好的安全性；
2.本发明的产品制备方法简单，操作条件易控制，培养基原料来源广泛，价格低廉，生产周期短，生产成本低，有利推广应用；
3.产品质量高，混入饲料后的稳定性好；
4.产品使用、保存、运输方便。
下面通过具体实施例进一步阐述本发明的技术方案和有益效果。
具体实施方式
实施例1 酿酒酵母菌Li1012(Saccharomyces cerevisiae Li1012)的来源、培养和保存
来源：从广东白云区种植的荔枝果园的土壤中分离选育而得的野生酵母菌。经中国武汉大学中国典型培养物保藏中心鉴定为酿酒酵母菌Li1012培养：
采用的培养基：将马铃薯去皮，切成小块，加水煮沸30～45分钟，过滤，将过滤后的马铃薯与葡萄糖和水按照重量比10∶1∶50混合在一个大气压下灭菌18～30分钟。
菌株培养：将酿酒酵母菌Li1012接种于上述培养基中，置于32～35℃的培养箱中培养3～5天得酵母菌种。
菌株保存：
斜面培养基配方：酵母膏0.5～0.8％、蛋白胨1.0～1.3％、葡萄糖0.5～0.8％ 白砂糖1.0～1.3％ 琼脂2％ PH＝6.4 其余为水。一个大气压下灭菌20分钟。
将培养基制作斜面试管，划线接种培养后，放置3～5℃冰箱保存。
实施例2 饲料添加剂的制备
步骤一：(1)纯种扩大培养：称取麸皮1000g、水700g搅拌混匀后作固体培养基A，分装在500ml的三角瓶中，每瓶装300g的培养基A，0.1MPa灭菌30分钟分别取木霉菌、曲霉菌、放线菌、芽孢杆菌的菌种在无菌条件下分别接种于装有培养基的三角瓶内，置于恒温箱培养中，在30～33℃培养72小时；
(2)液体发酵培养：
称取酵母膏5g、蛋白胨10g、萄糖8g、白砂糖12g、水965g搅拌溶解后PH值为6.5作液体培养基，分装在500ml的三角瓶中，每瓶装250ml，0.1MPa灭菌30分钟，取实施例1的酿酒酵母菌种在无菌条件下接种于装有液体培养基的三角瓶内，置于摇床，于30～32℃恒温振荡培养20小时得发酵液。
(3).用5M3发酵罐进行固体发酵培养：
称取麸皮450公斤、米糠50公斤、水量为250kg，置发酵罐中搅拌混匀后放置2小时作固体培养基，0.1MPa灭菌30分钟后，放冷至40度，在无菌条件下加入上述培养的300g木霉菌、300g曲霉菌、300g放线菌、300g芽孢杆菌和1000g的酿酒酵母菌的发酵液，搅拌、调节发酵罐通气量到0.5立方米/分钟，控制温度在31～34培养36小时，出料得固体培养物；
所得的固体培养物在70℃以下干燥，所得组合物的含水量为8.8％，按GB/T 4789-94和NY/T 227-94标准测定得该组合物的细菌数为4.0×108cfu/g，酵母菌数为8.0×105cfu/g，霉菌数为5.5×106cfu/g。
二级固体发酵：
称取米糠480公斤、麦麸500公斤、红糖20公斤、水550公斤作固体培养基C另称取上述(4)所得的组合物10公斤。
制备方法：
1.将红糖溶于20公斤90℃以上热水中，经搅拌使其全部溶解，再倒入配备的干净清水中备用。
2.将米糠、麦麸和原种倒入容器中充分混匀。
3.将红糖水均匀加入原料中充分混匀。
4.将拌和好的混合物倒入发酵槽内，料层厚度为40-50公分，将表面刮平，盖上麻袋进行自然发酵，控制温度不超过60℃。
5.在发酵过程中每24小时翻堆一次，共发酵120小时立即将物料在70℃以下干燥。所得的组合物测定含水量为5.8％，按GB/T4789-94和NY/T227-94标准测定得该组合物的细菌数为1.8×108cfu/g，酵母菌数为4.0×105cfu/g，霉菌数为2.8×106cfu/g
(4)1.称取经(3)固体发酵培养制得的微生物组合物8公斤、红糖3公斤、骨粉40公斤、豆粕20公斤、鱼粉30公斤干净山土1000公斤。
2.红糖加水450公斤煮开后凉至40℃以下，倒在混合均匀的米糠、微生物组合物上，并搅拌均匀再与骨粉40公斤、豆粕20公斤、鱼粉30公斤、山土1000公斤混匀。
3.将上边混匀的物料置于发酵槽堆积，料层的厚度为40～50公分以后每隔24小时翻堆一次，共发酵五天即可在70℃干燥
该发酵完成的饲料添加剂中含细菌数5.0×107cfu/g，酵母菌数4.0×104cfu/g、霉菌数2.0×104cfu/g。
实施例3 用饲料添加剂喂养小猪阶段试验情况
试验方法：小猪30头，随机分成三组，每组10头，其中公猪7头、母猪3头。喂养时间、方式、条件相同
试验组1：本发明实施例2发酵饲料添加剂2％、其他为玉米粉、麸皮、米糠、豆粕等任意比例的混合物作饲料喂养
试验组2：本发明实施例2发酵饲料添加剂4％，其他为玉米粉、麸皮、米糠、豆粕等任意比例的混合物作饲料喂养
对照组3：用玉米粉、麸皮、米糠、豆粕等任意任意比例的混合物作饲料喂养
试验结果：
喂养天数 小猪试验前总体重 试验后总体重 增重 平均每头日增重 腹泻
天 Kg Kg Kg g 头
试验组1 26 220.5 418.25 197.75 760.6 0
试验组2 26 217.0 421.00 204.00 784.6 0
对照组 26 220.5 398.50 178.00 685.0 4
结论：作为猪饲料添加剂喂养小猪，有效地防治仔猪的红白痢，降低腹泻率40％以上，提高仔猪食粮转化率17％，日增重提高20％，比对照组提高14％以上。
实施例4 用实施例2的饲料添加剂用于黄鸡产蛋试验
试验方法：分A.B二栏试验，饲料为鸡埸自配饲料米糠40％、玉米粉40％、麦麸10％、豆粕6％，A栏没有在饲料中添加饲料添加剂，B栏在饲料中添加4％饲料添加剂。旦鸡A.B二栏各1660只。
从2006年3月22日试验。
试验结果：29天黄鸡产蛋统计报告
| 日期2006年 | 产蛋总数 | 产蛋率 | 好蛋 | 差蛋 | |||||||
| 数量A | 数量B | B比A多 | A | B | 数量A | 数量B | B比A多 | 数量A | 数量B | B比A少 | |
| 03月22日 | 1503 | 1564 | 61 | 60 | 61 | 1303 | 1389 | 86 | 64 | 81 | 17 |
| 03月23日 | 1510 | 1597 | 87 | 61 | 62 | 1335 | 1409 | 65 | 79 | 87 | 8 |
| 03月24日 | 1489 | 1532 | 43 | 60 | 59 | 1297 | 1372 | 75 | 58 | 73 | 15 |
| 03月25日 | 1410 | 1622 | 212 | 57 | 63 | 1176 | 1470 | 294 | 84 | 42 | -42 |
| 03月26日 | 1468 | 1598 | 130 | 59 | 62 | 1260 | 1470 | 210 | 84 | 42 | -42 |
| 03月27日 | 1691 | 1571 | -20 | 64 | 61 | 1402 | 1470 | 68 | 68 | 42 | -42 |
| 03月28日 | 1436 | 1546 | 110 | 58 | 60 | 1260 | 1428 | 168 | 52 | 32 | -20 |
| 03月29日 | 1475 | 1485 | 10 | 59 | 58 | 1260 | 1344 | 84 | 84 | 42 | -42 |
| 03月30日 | 1469 | 1597 | 128 | 59 | 62 | 1260 | 1470 | 210 | 84 | 42 | -42 |
| 03月31日 | 1435 | 1463 | 28 | 58 | 57 | 1260 | 1344 | 84 | 62 | 22 | -40 |
| 04月01日 | 1442 | 1474 | 32 | 58 | 57 | 1218 | 1344 | 126 | 60 | 24 | -36 |
| 04月02日 | 1493 | 1501 | 8 | 60 | 58 | 1302 | 1386 | 84 | 84 | 42 | -42 |
| 04月03日 | 1502 | 1513 | 11 | 60 | 59 | 1260 | 1344 | 84 | 78 | 38 | -40 |
| 04月04日 | 1517 | 1542 | 25 | 61 | 60 | 1302 | 1386 | 84 | 71 | 32 | -39 |
| 04月05日 | 1533 | 1584 | 51 | 62 | 62 | 1302 | 1428 | 126 | 84 | 37 | -47 |
| 04月06日 | 1434 | 1558 | 124 | 58 | 61 | 1260 | 1428 | 168 | 54 | 33 | -21 |
| 04月07日 | 1457 | 1643 | 86 | 59 | 60 | 1260 | 1386 | 126 | 84 | 26 | -58 |
| 04月08日 | 1521 | 1576 | 55 | 61 | 62 | 1302 | 1428 | 126 | 84 | 42 | -42 |
| 04月09日 | 1424 | 1534 | 110 | 57 | 60 | 1218 | 1386 | 168 | 70 | 14 | -56 |
| 04月10日 | 1406 | 1420 | 14 | 57 | 56 | 1260 | 1302 | 42 | 52 | 32 | -20 |
| 04月11日 | 1514 | 1468 | -46 | 61 | 68 | 1302 | 1344 | 42 | 84 | 42 | -42 |
| 04月12日 | 1512 | 1658 | 146 | 61 | 65 | 1302 | 1512 | 210 | 84 | 32 | -52 |
| 04月13日 | 1472 | 1466 | -6 | 59 | 58 | 1260 | 1344 | 84 | 55 | 39 | -16 |
| 04月14日 | 1470 | 1668 | 198 | 59 | 66 | 1260 | 1512 | 252 | 84 | 42 | -42 |
| 04月15日 | 1599 | 1599 | 0 | 64 | 63 | 1386 | 1428 | 42 | 54 | 30 | -24 |
| 04月16日 | 1502 | 1564 | 62 | 61 | 62 | 1302 | 1428 | 126 | 84 | 42 | -42 |
| 04月17日 | 1509 | 1545 | 36 | 61 | 61 | 1302 | 1386 | 84 | 84 | 42 | -42 |
| 04月18日 | 1514 | 1582 | 68 | 63 | 63 | 1344 | 1428 | 84 | 46 | 38 | -8 |
| 04月19日 | 1491 | 1611 | 120 | 60 | 64 | 1302 | 1428 | 126 | 30 | 12 | -18 |
| TOTAL | 43098 | 44981 | 1883 | 60 | 61 | 37257 | 40785 | 3528 | 2045 | 1144 | -901 |
备注：B行为使用本发明饲料添加剂喂养。
根据以上报告得出使用发酵饲料添加剂的蛋鸡29天多产蛋1883个，好蛋增加3528个，差蛋减少901个。
本发明饲料添加剂用于家禽饲料，由于富含各种生物酶类，能帮助家禽消化和分解食物，从而提高饲料的转化和利用率，提高产蛋率，改善了蛋的营养成份，味道鲜美，同时减小了鸡蛋的怪味，减少了养殖成本，还能消除和预防家禽消化系统的多种疾病，使肉、蛋真正成为安全健康食品。
Claims (1)
1、一种微生物饲料添加剂，其特征在于：采用木霉菌、曲霉菌、放线菌、芽孢杆菌、酿酒酵母菌Li1012(Saccharomyces cerevisiae Li1012)为菌种由以下制备步骤得到的含细菌数5.0～6.0×107cfu/g、酵母菌数4.0～5.0×104cfu/g、霉菌数2.0～3.0×104cfu/g的添加剂，添加剂的含水量≤10％，所述的制备步骤：
第一步纯种扩大培养：将麸皮100重量份、水70～80重量份组成的固体培养基A置于容器中，灭菌，分别取木霉菌、曲霉菌、放线菌、芽孢杆菌的菌种分别接种于固体培养基A中，在30～33℃恒温培养48～72小时；
第二步液体发酵培养：取酿酒酵母菌Li1012的菌种接种于液体培养基中，于30～32℃恒温培养18～20小时得发酵液，所说的液体培养基PH值为6.4～7.0，由下列重量百分比的原料组成：
酵母膏 0.5～0.8％ 蛋白胨 1.0～1.3％ 葡萄糖 0.5～0.8％
白砂糖 1.0～1.3％ 其余为水；
第三步固体二级发酵培养：一级发酵：在发酵罐中加入由麸皮90～95份、米糠10～5份、水45～50份重量份的原料组成固体培养基B，取固体培养基B重量的0.06～0.2％的经第二步液体发酵培养所得的发酵液和各取固体培养基B重量的0.1～0.3％经第一步纯种扩大培养的木霉菌、曲霉菌、放线菌、芽孢杆菌接入发酵罐的固体培养基B中，于温度31～34℃，培养30～36小时得固体培养物，在70℃以下干燥，控制含水量≤10％；
二级发酵：取一级发酵所得的固体培养物，按固体培养基C重量的1％计，接入由麸皮50份、米糠48份、红糖2份、水份50～55份重量份组成的固体培养基C中进行培养，在温度45～60℃，培养72～96小时后在70℃以下干燥，控制组合物的含水量≤10％；
第四步取第三步所得的含活性微生物菌群的组合物8～10份、红糖2～3份、骨粉40～45份、豆粕20～25份、鱼粉25～35份、干净山土或页岩900～1000份、水40～50份重量混和均匀后置于发酵槽堆积发酵，自然发酵4～6天后在70以下干燥，即得饲料添加剂。
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