CN106265630A - 穗花杉双黄酮在研发治疗肺炎药物中的应用 - Google Patents

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赵小然
王建峰
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Abstract

本发明涉及穗花杉双黄酮在研发治疗肺炎药物中的应用，通过兔红细胞溶血试验、人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠肺炎链球菌肺炎模型证实其对肺炎链球菌感染的治疗作用。与用抗生素治疗相比较，使用穗花杉双黄酮治疗具有无耐药性，保护性高的特点。

Description

穗花杉双黄酮在研发治疗肺炎药物中的应用
技术领域
本发明涉及穗花杉双黄酮在研发治疗肺炎药物中的应用，属于医药领域。
背景技术
穗花杉双黄酮(Amentoflavone)是一种多酚类化合物,自然界广泛存在于卷柏属植物中。穗花杉双黄酮的抗炎、抗肿瘤、抗辐射、清除自由基和神经保护等方面的生物活性越来越引起人们的关注。但目前为止国内外未见穗花杉双黄酮用于治疗细菌性肺炎报道。
细菌性肺炎是由肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、军团菌等感染所引起的疾病，该病在儿童、老年人和免疫缺陷患者中病死率极高。近年来，抗生素的大量使用导致细菌耐药率增高，使得细菌性肺炎的治疗面临无药可治的局面。目前临床上肺炎链球菌引起的肺炎病情在儿童和老年人群中较为严重，尤其是已经出现了耐青霉素甚至耐万古霉素的肺炎链球菌。目前治疗肺炎链球菌肺炎的药物通常使用β－内酰胺类抗生素，但由于耐青霉素和耐万古霉素的肺炎链球菌的出现，常常会导致治疗失败。因此，寻找新型、安全的治疗药物迫在眉睫。穗花杉双黄酮是来源于我国传统中药卷柏的成分，本发明研究证实了穗花杉双黄酮对细菌性肺炎，尤其是肺炎链球菌引起的肺炎具有较好的治疗效果。
发明内容
本发明通过兔红细胞溶血试验、人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠肺炎链球菌肺炎模型，证实穗花杉双黄酮(附图1)治疗肺炎链球菌感染的作用。
附图说明
附图1 穗花杉双黄酮的分子结构。
附图2 穗花杉双黄酮抑制肺炎链球菌溶血素引起的A549细胞损伤。
附图3 穗花杉双黄酮对肺炎链球菌肺炎的肺组织保护。
具体实施方式
溶血试验
纯化的肺炎链球菌溶血素ply于96孔板中作连续的二倍稀释，每个孔中加入107个绵羊红细胞，于37℃中孵育10min后离心。使红细胞溶解的最高稀释倍数视为溶血滴度(Hemolysis titre)
不加穗花杉双黄酮和加入不同浓度的穗花杉双黄酮后溶血素ply的溶血滴度如下(表1)：
表1.穗花杉双黄酮对肺炎链球菌溶血素溶血活性的抑制作用
人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验
A549细胞在DEMED培养基(含10％胎牛血清)中于37℃，通入5％CO2培养，以1.5×104个细胞/孔铺于96孔细胞培养板中，每孔100μl。细胞贴壁后，加入0.5μl纯化后的肺炎链球菌溶血素蛋白，并加入不同浓度的穗花杉双黄酮，置于细胞培养箱中于37℃，5％CO2共培养6h。加入乳酸脱氢酶(LDH)试剂，后于酶标仪490nm测量吸光值。
结果(附图2)表明，穗花杉双黄酮能够保护肺炎链球菌溶血素介导的人肺上皮细胞(A549)损伤，该作用呈现剂量依赖性。
小鼠肺炎链球菌肺炎的实验治疗学研究
小鼠肺炎链球菌肺炎模型
C57BL/6J小鼠(雌性，18-22g)经乙醚麻醉后，经鼻给予20μl含有5×107CFU的菌悬液(肺炎链球菌D39)，小鼠平躺直至苏醒，建立小鼠肺炎链球菌肺炎的模型。
保护率试验
小鼠接种肺炎链球菌后2h皮下注射50mg/kg(100μl)的穗花杉双黄酮，每12h给药一次。不给药对照组给予100μl的DMSO，每组30只小鼠。按给药方案给药后72h，取各组小鼠肺脏组织进行病理组织学检查。
结果表明，经穗花杉双黄酮治疗后，可显著提高小鼠肺炎链球菌肺炎的保护率缓解炎症(附图3)。

Claims (4)

1.穗花杉双黄酮在研发治疗肺炎药物中的应用。
2.如权利要求1“穗花杉双黄酮在研发治疗肺炎药物中的应用”所述，包括穗花杉双黄酮药学上可接受的剂型。
3.如权利要求1“穗花杉双黄酮在研发治疗肺炎药物中的应用”所述，肺炎指细菌性肺炎。
4.如权利要求3“穗花杉双黄酮在研发治疗肺炎药物中的应用”所述，细菌性肺炎是指由肺炎链球菌引起的肺炎。
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