CN103191100A - 葛根素在制备治疗肺炎药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明旨在葛根素在开发治疗肺炎新型药物的应用,并且通过兔红细胞溶血试验、人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠金葡菌肺炎模型证明其对金葡菌所引起的肺炎具有较好的治疗效果。由于传统抗生素的滥用和细菌耐药性的不断加强,葛根素作具有治愈率高,无耐药性的特点,因此葛根素可以增加使用药物的选择性对开发新药和有着重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及葛根素在制备治疗肺炎药物中的应用,属于医药领域。
背景技术
葛根素是豆科属植物葛根的主要活性成分。葛根素具有改善心脑血管循环、降低血糖、抗高血压及动脉硬化、提高机体免疫力等多种生物活性,还具有提高视力、迅速醒酒及雌激素样作用。作为新型的天然功效因子,葛根素在食品工业、医药工业、日用化工工业等方面具有重要的作用。但截至目前国内外未见葛根素治疗细菌性肺炎的报道。
金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、化脓性链球菌等均能引起细菌性肺炎。细菌耐药性的不断增加,造成了许多难治疗的细菌性肺炎病例的出现,尤其在免疫能力较弱的儿童和老人以及免疫缺陷者中死亡率极高。其中以金葡菌感染所导致的肺炎病情较为严重,常规情况下人们使用苯唑西林和氯唑西林对此肺炎进行治疗,但是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的出现,导致治疗失败和较高的死亡率,给肺炎的治疗带来了更大的压力。因此,开发新的安全有效的药物具有十分重要的意义。葛根素是药用植物水飞蓟的主要活性成分,本发明研究表明了葛根素对细菌性肺炎,尤其是金葡菌引起的肺炎具有良好的治疗效果。
发明内容
葛根素的分子结构如下:
本发明通过家兔红细胞溶血试验、人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠金葡菌肺炎模型证实葛根素对金葡菌感染有治疗作用。
三、具体实施方式
1. 溶血试验
金葡菌ATCC 29213, ATCC 10832,BAA-1717, NCTC 8325-4分别于不同浓度的葛根素共培养至对数生长后期(OD600分别是2.5, 2.0, 2.0, 2.5)。取1.5ml共培养物,离心取上清;在1.5ml离心管中加入875μl溶血素缓冲液、100μl细菌上清和25μl脱纤维兔血,混匀后于37℃孵育15min,后离心取上清,并在543nm测其光密度。
加入不同浓度的葛根素后对α-溶血素的抑制作用如下表1
表1. 葛根素后对α-溶血素的抑制作用(%)
2.人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验
金葡菌NCTC 8325-4于TSB培养基中培养至OD600nm=0.5,取5ml的细菌培养物,离心并重悬于10ml的F12K培养基中。A549细胞用含10%胎牛血清F12K培养,以1.5×104个细胞/孔铺于96孔板中,37℃、5%CO2培养24小时。细胞贴壁后,加入100μl金葡菌悬液,并加入不同浓度的葛根素,置于细胞培养箱中于37℃、5%CO2共培养8h。加live (green)/dead (red)试剂,后于激光共聚焦显微镜(LSCM)下观察A549细胞的状态,活细胞显绿色,死细胞显红色。
结果表明,葛根素能够保护金葡菌α-溶血素介导的人肺上皮细胞(A549)损伤,该作用呈现剂量依赖性。
小鼠金葡菌肺炎的实验治疗学研究
3.1 小鼠金葡菌肺炎模型
C57BL/6J小鼠(雄性,18-22g)经乙醚麻醉后,经鼻给予30μl金葡菌悬液(金葡菌8325-4),小鼠平躺直至苏醒,建立小鼠金葡菌肺炎的模型。致死试验给予4×108 CFUs的金葡菌,而组织病理学考察给予2×108 CFUs的金葡菌。
3.2 保护率试验
小鼠接种金葡菌后2h分别皮下注射100、50和25mg/kg(100μl)的葛根素,每6h给药一次。不给药对照组给与100μl的生理盐水,每组30只小鼠。按给药方案给药后,分别记录小鼠感染金葡菌24h,48h,72h后的死亡率。
结果表明,经葛根素处理后,显著降低小鼠金葡菌肺炎的死亡率(P<0.05)。如表2.
表2. 葛根素对小鼠金葡菌肺炎死亡率的影响
Claims (4)
1.葛根素在制备治疗肺炎药物中的应用。
2.如权利要求1所述药物包括药学上可接受的剂型。
3.如权利要求1所述肺炎指细菌性肺炎和真菌性肺炎。
4.如权利要求3所述细菌性肺炎是指由金黄葡萄球菌引起的肺炎。
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