CN102872003B - 芹菜素在制备治疗肺炎药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及芹菜素在制备治疗肺炎药物中的应用，通过兔红细胞溶血试验、人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠金葡菌肺炎模型证实其对金葡菌感染的治疗作用。与用抗生素治疗相比较，使用芹菜素治疗具有无耐药性，治愈率高的特点。

Description

芹菜素在制备治疗肺炎药物中的应用
技术领域
本发明涉及芹菜素在制备治疗肺炎药物中的应用，属于医药领域。
一、背景技术
芹菜素(Apigenin)是从伞形科植物旱芹等植物中提取分离出来的一种黄酮类化合物，具有一定的抗菌活性，对痢疾杆菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌以及脑膜炎球菌等均有抑制作用，最低抑菌浓度(MIC)在64-256μg/ml之间。但目前为止国内外未见芹菜素用于治疗细菌性肺炎报道。
细菌性肺炎是由肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、军团菌等感染所引起的疾病，该病在儿童、老年人和免疫缺陷患者中病死率极高。近年来，抗生素的大量使用导致细菌耐药率增高，使得细菌性肺炎的治疗面临无药可治的局面。目前临床上以金黄色葡萄球菌所导致的肺炎病情较为严重，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)引起的肺炎病死率仍然较高。目前治疗金黄色葡萄球菌肺炎的药物通常使用苯唑西林和氯唑西林，但由于MRSA的出现，常常会导致治疗失败。因此，寻找新型、安全的治疗药物迫在眉睫。芹菜来自于来源广泛的旱芹及多数水果和蔬菜中的成分，本发明研究证实了芹菜素对细菌性肺炎，尤其是耐药性金黄色葡萄球菌引起的肺炎具有较好的治疗效果。
二、发明内容
芹菜素的分子结构如下：
本发明通过兔红细胞溶血试验、人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠金葡菌肺炎模型证实其治疗金葡菌感染作用。
三、具体实施方式
1.溶血试验
将不同浓度的芹菜素与金黄色葡萄球菌共培养至对数生长后期，高速离心收集菌液上清。取100μL菌液上清、875μL PBS及25μL脱纤维兔红细胞混合均匀，37℃孵育15min，观察不同浓度芹菜素处理的细菌上清溶血活性的变化。以不加芹菜素的细菌上清作为对照计算溶血比例。
表1.芹菜素对金葡菌α-溶血素溶血活性的作用
芹菜素(μg/ml) 溶血比例(％)
0 100
1 78.14
2 52.24
4 11.06
8 3.11
2.人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验
金葡菌NCTC 8325-4于TSB培养基中培养至取5ml的细菌培养物，离心并重悬于10ml的F12K培养基中。A549细胞于F12K培养基(加入10％胎牛血清)中于37℃，5％CO2培养24小时后，以1.5×104个细胞/孔铺于96孔细胞培养板中，每孔100μl。细胞贴壁后，加入100μl金葡菌悬液，并加入不同浓度的芹菜素，置于细胞培养箱中于37℃，5％CO2共培养8h。加入live(green)/dead(red)试剂，后于激光共聚焦显微镜(LSCM)下观察A549细胞的状态，活细胞显绿色，死细胞显红色。
结果表明，芹菜素能够保护金葡菌α-溶血素介导的人肺上皮细胞(A549)损伤，该作用呈现剂量依赖性。
3.小鼠金葡菌肺炎的实验治疗学研究
3.1小鼠金葡菌肺炎模型
C57BL/6J小鼠(雄性，18-22g)经乙醚麻醉后，经鼻给予30μl金葡菌悬液(金葡菌8325-4)，小鼠平躺直至苏醒，建立小鼠金葡菌肺炎的模型。致死试验给予4×108CFUs的金葡菌，而组织病理学考察给予2×108CFUs的金葡菌。
3.2保护率试验
小鼠接种金葡菌后2h分别皮下注射100、50和25mg/kg(100μl)的芹菜素，每6h给药一次。不给药对照组给与100μl的生理盐水，每组30只小鼠。按给药方案给药后，分别记录小鼠感染金葡菌24h，48h，72h后的死亡率。
结果表明，经芹菜素处理后，显著降低小鼠金葡菌肺炎的死亡率(P＜0.05)。如表2.
表2.芹菜素对小鼠金葡菌肺炎死亡率的影响

Claims (2)

1.芹菜素在制备治疗金黄色葡萄球菌引起的肺炎药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括药学上可接受的以下剂型，包括胶囊剂、注射剂、片剂。
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