CN106244461A

CN106244461A - 红缘拟层孔菌固体发酵最佳配方及条件

Info

Publication number: CN106244461A
Application number: CN201510321005.9A
Authority: CN
Inventors: 包海鹰; 孙琦; 田昊
Original assignee: Jilin Agricultural University
Current assignee: Jilin Agricultural University
Priority date: 2015-06-11
Filing date: 2015-06-11
Publication date: 2016-12-21

Abstract

本发明公开了红缘拟层孔菌固体发酵的最佳配方及条件：将干净的玉米用清水侵泡24h备用，将红缘拟层孔菌一级菌种接种到一级液体培养基中进行摇瓶培养5天，温度23℃，转速130r/min。培养好的一级液体菌种转接到二级液体培养基中培养条件同一级液体菌种培养。将培养好的二级液体菌种接种到玉米培养基中，接种量为每20g培养基接种1ml菌种，然后放到固体培养室中进行避光培养23-25天，温度为23℃-26℃，湿度为40%-50%，二氧化碳浓度为350PPM-500PPM。

Description

红缘拟层孔菌固体发酵最佳配方及条件

技术领域

本发明公开了红缘拟层孔菌固体发酵的最佳配方和条件，发酵的最佳培养基为玉米培养基，培养温度为23℃-26℃，湿度为40%-50%，发酵最佳时间为23-25天。

背景技术

红缘拟层孔菌Fomitopsis pinicola (Sw.:Fr.)P. Karst.，又名“红缘层孔菌”、“松生拟层孔菌”、“红带菌”、“红缘树舌”等，隶属于担子菌纲（Basidiomycetes）非褶菌目（Aphyllophorales）多孔菌科(Polyporaceae)，拟层孔菌属(Fomitopsis) 红缘拟层孔菌是一种“桑黄”类药用真菌，在世界各地均有分布。味微苦、性平。它的化学成分主要包括类固醇化合物，倍半萜烯和三萜类化合物，据报道它的药理作用主要包括抗肿瘤，抗菌，抗炎，抗氧化等。红缘拟层孔菌固体发酵菌质具有很好的药理活性，红缘拟层孔菌发酵菌质、中、高剂量组对H₂₂荷瘤小鼠肿瘤的生长均有抑制作用，发酵产物在剂量为400mg/kg时的抑瘤率最大，可达65.88%。固体发酵菌质还具有提高免疫力的作用。

发明内容

本发明公开了红缘拟层孔菌固体发酵的最佳配方和条件，并制定了质量标准。1 材料与方法

1.1 材料

红缘拟层孔菌菌种（吉林农业大学菌物所提供）酵母浸粉，蛋白胨，葡萄糖，硫酸镁，磷酸二氢钾，玉米

1.2 仪器

电子分析天平（SHIMADZUAUY220型），医用型洁净工作台（DL-CJ-1N），水浴恒温振动器（SHA-CA）电子计数天平（MARK MW3型），高效液相色谱仪（Agilent Technologies 1100）等。

2 实验内容与方法

2.1 制备一级液体培养基精确称量酵母浸粉2.4g、葡萄糖8g、蛋白胨2g、硫酸镁0.1g、磷酸二氢钾0.4g两份。放入1000ml摇瓶中加清水400ml。高压蒸汽灭菌121℃,30min。

2.2 制备二级液体培养基精确称量酵母浸粉300g、葡萄糖1000g、蛋白胨250、硫酸镁25、磷酸二氢钾50、维生素B15g。放入100L发酵罐中，加水定容到50L。

2.3 固体培养基的处理玉米用清水洗净除去杂质，用清水侵泡24小时。

2.4 一级液体菌种的制备取8到10块母钟菌块，每块0.25cm²，接到2个1000ml摇瓶内，每瓶装300ml培养基，放入23℃恒温培养箱中，转速为130r/min，PH自然，摇瓶培养5天。

2.5 二级液体菌种的制备将一级液体菌种接种到二级液体培养基中，在菌种培养室中培养5天。

2.6 接种将液体菌种按每20g培养基接种1ml菌种的比例接种。

2.7 培养将接种好的培养基放到固体培养室中进行避光培养23-25天，温度为23℃-26℃，湿度为40%-50%，二氧化碳浓度为350PPM-500PPM。

3 质量

3.1 感官指标

色泽：发酵菌丝为纯白色

口感：微涩

气味：带有玉米和蘑菇混合香味儿

组织结构：菌丝为纯白色，玉米为浅黄色，白色菌丝包裹着玉米粒

3.2 微生物指标

细菌总数≤100个/g；致病菌不得检出。

3.3薄层层析化学成分检识

通过薄层层析对照的方法，检测红缘拟层孔菌固体发酵菌质中特征性成分，即对照标准品3-乙酰氧基-8,24-羊毛甾二烯-21-酸若斑点Rf值相同，则表明为红缘拟层孔菌固体发酵菌质。

3.4 有效成分含量测定

通过高效液相方法，检测红缘拟层孔菌固体发酵菌质中3-乙酰氧基-8,24-羊毛甾二烯-21-酸含量，检测标准为 ≥0.03mg/g。

4 结论

通过大量的实验研究发现了红缘拟层孔菌最佳的固体发酵培养基为玉米，培养温度为23℃-26℃，湿度为40%-50%，发酵最佳时间为23-25天。红缘拟层孔菌固体发酵菌质无毒副作用具有很多的药理活性，如抗肿瘤、抗氧化、提高免疫力等。红缘拟层孔菌固体发酵菌质可以被开发为保健食品，可以使红缘拟层孔菌发酵菌质广泛应用于社会，受益于人类。

Claims

1.红缘拟层孔菌Fomitopsis pinicola (Sw.:Fr.)P. Karst.固体发酵菌质具有提高免疫力和抗肿瘤等药理作用，适合开发保健产品。

2.根据权利要求1所述的应用，其中红缘拟层孔菌固体发酵的制备方法包括如下步骤：

一制备一级液体培养基精确称量酵母浸粉2.4g、葡萄糖8g、蛋白胨2g、硫酸镁0.1g、磷酸二氢钾0.4g两份，放入1000ml摇瓶中加清水400ml。高压蒸汽灭菌121℃,30min；

二制备二级液体培养基精确称量酵母浸粉300g、葡萄糖1000g、蛋白胨250、硫酸镁25、磷酸二氢钾50、维生素B15g，放入100L发酵罐中，加水定容到50L；

三固体培养基的处理玉米用清水洗净除去杂质，用清水侵泡24小时；

四一级液体菌种的制备取8到10块母钟菌块，每块0.25cm²，接到2个1000ml摇瓶内，每瓶装300ml培养基，放入23℃恒温培养箱中，转速为130r/min，PH自然，摇瓶培养5天；

五二级液体菌种的制备将一级液体菌种接种到二级液体培养基中，在菌种培养室中培养5天；

六接种将液体菌种按每20g培养基接种1ml菌种的比例接种；

七培养将接种好的培养基放到固体培养室中进行避光培养23-25天，温度为23℃-26℃，湿度为40%-50%，二氧化碳浓度为350PPM-500PPM。