TWI460272B - 發酵蟲草屬真菌米基而製備γ－胺基丁酸的方法及其應用 - Google Patents

Description

發酵蟲草屬真菌米基而製備γ-胺基丁酸的方法及其應用

本發明係關於一種生產γ -胺基丁酸的方法及其應用，特別是關於一種發酵蟲草屬真菌米基而產生高濃度γ -胺基丁酸的方法及其應用。

在分類學上，歸類於蟲草屬(Cordyceps species)的物種為昆蟲寄生型的真菌，種類繁多，其子實體及菌絲萃取物是東亞地區民族廣泛食用的中藥材及保健食品之一，應用於例如中醫古書記載具有養肺陰、補腎陽等調節體質之效，而有助於止咳化痰、改善腎陽虛引起的失眠情形等。其中，較廣為人知且大量被使用的蟲草屬真菌包括冬蟲夏草(Cordyceps sinensis )及北冬蟲夏草(Cordyceps militaris )等。

蟲草屬真菌子實體之野生繁殖方式：夏季，昆蟲產卵，卵孵化變成幼蟲後鑽入潮濕鬆軟的土層中，被土壤中的蟲草屬真菌孢子感染；經過一個冬天，待第二年春天來臨時，蟲草屬真菌孢子萌發而長出菌絲，開始吸收蟲體內的物質作為其生存的養分，並不斷繁殖而逐漸將蟲體組織浸潤、置換成真菌菌絲，終至蟲體死亡；蟲體死亡後，菌絲仍繼續生長，到夏天時，即由蟲體抽生出真菌子實體，外觀像是一根小草。

然而，由於蟲草屬真菌之生長地理特殊性及嚴格的寄生性，加上過度採收，使得野生之蟲草屬子實體資源極度匱乏。近年來，人工培育蟲草屬真菌子實體的方式蓬勃發展，以煮熟的米飯(例如白米、玉米、小米等)取 代蟲體，不但足以提供北冬蟲夏草菌絲生長之營養物質，且北冬蟲夏草菌絲確實能進一步地從米飯中抽生出真菌子實體。請參閱圖1，其係煮熟之米飯經培育出北冬蟲夏草子實體後之整體狀態示意圖，係包含米飯經北冬蟲夏草菌絲全部或部份浸潤、置換後所得之一米飯基質，稱為米基1，及由該米基1抽生出的北冬蟲夏草子實體2。研究指出，以煮熟之米飯人工培育出的北冬蟲夏草子實體，其生理活性物質(例如蟲草素、蟲草酸、麥角固醇、蟲草多醣、超氧歧化酶等)與野生者相似，因而成為一種人工培養北冬蟲夏草子實體的主要方法。然而，這種人工大量培養子實體的方式，也存在著一些問題。請參閱圖2，其係圖1經切除子實體後之殘留米基狀態示意圖。廠商在割除子實體販售後，殘留大量被真菌菌絲浸潤之米基，若直接將米基丟棄，將造成當地生態環境及土壤汙染等影響，另一方面而言，其仍含有許多具有保健價值的蟲草屬真菌菌絲體，整體營養價值及保健價值雖不若米飯或整株蟲草屬真菌子實體那樣高，甚至帶有一種餿味，但大量地燒成灰燼後丟棄也是十分可惜的事情。因此，如何有效處理殘留之米基，如何再利用米基中的營養物及蟲草屬真菌菌絲，並藉由更顯著地提升其保健價值及可食用性，而能善用培養蟲草屬子實體後所殘留的大量米基，實為一件具有重要意義及商業價值的課題。

已知蟲草屬真菌為常見的養肺陰，補腎陽之保健食品，有止咳化痰、改善腎陽虛引起的失眠情形等保健價值，唯米基中之菌絲效益不如真菌之子實體高，因此保健價值及食用價值偏低。依發明人多年來之經驗，認為應能開發出一種藉由可食用益生菌發酵之方式，將米基的營養成分或浸潤於其中的蟲草屬真菌菌絲內容物轉換成具有更高附加價值之成分-γ -胺基丁酸，以提供一種產生γ -胺基丁酸的新穎方式及其於食品上的應用。

本發明之主要目的，在於提供一種發酵米基而製備γ-胺基丁酸的方法。

本發明之另一目的，在於將發酵米基而製備γ-胺基丁酸的方法應用於保健食品或飲品上。

本發明提供一種生產γ -胺基丁酸的方法，其係一經切除蟲草屬真菌子實體後所剩餘之米基製成之一懸浮液，經至少一活體菌株發酵而生產γ -胺基丁酸之方法。

根據上述發明，其中該經切除蟲草屬真菌子實體後所剩餘之米基係經磨成粉末後，加水而製成該懸浮液。

根據上述發明，其中該經切除蟲草屬真菌子實體後所剩餘之米基係部分或全部被蟲草屬真菌菌絲浸潤、置換。

根據上述發明，其中該經切除蟲草屬真菌子實體後所剩餘之米基之粗蛋白質含量，高於未經培養蟲草屬真菌子實體之同品系米基原料之粗蛋白質含量。

根據上述發明，其中該經切除蟲草屬真菌子實體後所剩餘之米基之粗蛋白質含量係介於乾重6%~30%。

根據上述發明，其中該懸浮液中，該經切除蟲草屬真菌子實體後所剩 餘之米基之重量體積濃度(w/v)係小於或等於60%。

根據上述發明，其中該活體菌株係一乳酸菌。

根據上述發明，其中該乳酸菌係短乳桿菌(Lactobacillus brevis)。

本發明提供一種生產γ -胺基丁酸的方法，其係一經切除蟲草屬真菌子實體後所剩餘之米基製成之一懸浮液，經一殘留於米基中之活體蟲草屬真菌或一額外添加之活體蟲草屬真菌之至少一者發酵而生產γ -胺基丁酸之方法。

根據上述發明，其中更添加至少一乳酸菌，與該殘留於米基中之活體蟲草屬真菌或該額外添加之活體蟲草屬真菌之至少一者共發酵而生產γ -胺基丁酸。

根據上述發明，其中該乳酸菌係短乳桿菌(Lactobacillus brevis)。

根據上述發明，其中該額外添加之活體蟲草屬真菌之重量體積濃度(w/v)係小於或等於50%。

本發明提供一種富含γ -胺基丁酸之食品或飲品，其係以一經切除蟲草屬真菌子實體後所剩餘之米基為基質，再經至少一活體菌株發酵，使γ -胺基丁酸濃度提升而成。

根據上述發明，其中更包含至少一具獨特風味之食材，以達到調和米基異味或發酵異味之至少一者之效果。

根據上述發明，其中該具獨特風味之食材係一紅棗、一桂圓、或一其 他可食性中草藥之至少一者。

鑒於習知殘留米基所造成的問題，本發明提供一種利用益生菌發酵而產生γ -胺基丁酸的方法及其應用，以達到處理大量殘留米基及資源不浪費的效益。

以下係提供利用本發明之實施例詳細說明書、本發明之技術及特點，然本實施例並非用以限定本發明，任何熟悉此技術者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可作各種之更動與潤飾。

請參見圖3，其為本發明一種發酵米基而製備γ -胺基丁酸的方法於第一較佳實施例中之方塊流程圖。本發明一種發酵米基而製備γ -胺基丁酸的方法至少包括：步驟31：開始；步驟32：將溶液及米基混合成一懸浮液，使米基之濃度達第一重量體積濃度；以及步驟33：殘留於米基中的蟲草屬真菌發酵該懸浮液而產生γ -胺基丁酸；步驟34：結束。

於本較佳實施例中，步驟32係將溶液及蟲草屬真菌之米基混合而製成米基懸浮液，以提供後續發酵所需之營養條件及環境。其中，該溶液可 以是純水或其他液態之溶液，但不以此為限；該第一重量體積濃度(米基之克數/水之毫升量)以小於或等於60%為佳。

上述步驟33藉由殘留於米基中的蟲草屬真菌發酵該懸浮液而產生γ -胺基丁酸。其中，該發酵條件以15~37℃發酵8~120小時為佳。

本發明更提供一第二較佳實施例。請參閱圖4，其為本發明一種發酵米基而製備γ -胺基丁酸的方法於第二較佳實施例中之方塊流程圖。本發明一種發酵米基而製備γ -胺基丁酸的另一較佳實施方法至少包括：步驟41：開始；步驟42：將米基磨成粉末，以製成米基粉末；步驟43：將溶液及米基粉末混合成一懸浮液，使米基粉末之濃度達第二重量體積濃度；加入乳酸菌，使乳酸菌達第一菌量；步驟44：添加蟲草屬真菌，其添加濃度係第三重量體積濃度；以及步驟45：乳酸菌及蟲草屬真菌共發酵該懸浮液而產生γ -胺基丁酸；於本較佳實施例中，步驟42係將米基磨成粉末狀，以加速後續發酵反應之進行；步驟46：結束。

其中，上述步驟43係將溶液及蟲草屬真菌之米基粉末混合而製成米基懸浮液，以提供後續發酵所需之營養條件及環境，並加入乳酸菌作為後 續發酵之至少一菌株。其中，該溶液可以是純水或其他液態之溶液，但不以此為限；該第二重量體積濃度(米基之克數/水之毫升量)以小於或等於60%為佳；該第一菌量則以5.0~6.0 log CFU/mL為佳。

上述步驟44係添加蟲草屬真菌子實體乾粉或新鮮蟲草屬真菌子實體，作為後續發酵之另一菌株。其中，該第三重量體積濃度(子實體之克數/米基懸浮液之毫升量)以小於或等於50%為佳。

上述步驟45藉由乳酸菌及蟲草屬真菌共發酵該懸浮液而產生γ -胺基丁酸。其中，該發酵條件以15~37℃發酵8~120小時為佳。

以下將進一步提供針對本發明上述各實施例之詳細評估及測試結果，俾對本發明有一更深入之說明與理解。

實驗一：米基組成份分析

依A.O.A.C.(1980)方法分析米基之水分、灰份、粗蛋白質、粗脂肪及粗纖維含量，共三重覆。

請參見下列表1，其係白米米飯培養出北冬蟲夏草子實體後之米基組成份分析。結果顯示米基主要由碳水化合物組成，為83.59±0.36%，其次為粗蛋白質、粗纖維、粗脂肪及灰分，分別為9.24±0.1%、5.61±0.36%、1.31±0.03%及0.25±0.01%。其中，粗蛋白含量(9.24%，乾重)明顯高於行政院衛生署統計並公佈之一般白米蛋白質含量(約7%，乾重)，顯示煮熟之米飯經北冬蟲夏草真菌菌絲浸潤後之特徵，係會使得殘留之米基內含有更大量之蛋白質，造成米基蛋白質含量顯著高於原本米飯的結果，且米基經北 冬蟲夏草真菌菌絲浸潤的程度越高，其粗蛋白組成應越趨近於北冬蟲夏草真菌之粗蛋白質組成(36.36%，乾重)。

由上述實驗結果得知，米基經大量北冬蟲夏草浸潤而具備富含蛋白質之特質，應有以例如乳酸菌這類的益生菌發酵產生高濃度γ -胺基丁酸之潛力。然而，米基中含有大量的真菌菌絲及高濃度之菌絲代謝廢物，卻也可能成為影響乳酸菌生理活性、生長活性之變數，真菌菌絲也可能與乳酸菌發生競爭、消長等情形，或是直接抑制、分解γ -胺基丁酸。因此，以乳酸菌發酵方式將米基轉換為高濃度γ -胺基丁酸的可行性及方式，需更進一步地評估及測試。以下進一步提供本發明實施例之詳細評估及測試結果。

實驗二：篩選出具備生產γ -胺基丁酸能力的乳酸菌株

自126株乳酸菌分離株中篩選出具備γ -胺基丁酸生產潛力的10株乳酸菌。經進一步篩選後，挑出γ -胺基丁酸產量最高的5株菌株。請參見圖5，其係該10株具備γ -胺基丁酸生產潛力的乳酸菌株之薄層色層分析圖譜。圖譜由左至右分別為γ -胺基丁酸標準品、麩胺酸鈉標準品、FPP 3713 菌株、FPA 3708菌株、FPA 3709菌株、FPM 3702菌株、FPS 2520菌株、FKR 2526菌株、FPAW 3778菌株、FKR 3737菌株、FKR 3739菌株、FKR 3741菌株。由實驗結果可知，FPA 3709、FPP 3713、FKR 3737、FKR 3739及FKR 3741之γ -胺基丁酸產量最高，因此將以這五株菌作為後續實驗用之菌株。

實驗三：測試乳酸菌發酵米基懸浮液之能力

以鑷子將塊狀之北冬蟲夏草米基夾入無菌保存袋中，並以經121℃滅菌15分鐘之研磨缽粉碎米基，密封後儲藏於4℃冰箱，供製備米基懸浮液使用(全程以無菌操作之方式進行)。

秤取12 g之米基粉末，放入經121℃滅菌15分鐘之100 mL蒸餾水中，配製成12%之米基懸浮液，加入乳酸菌株，使起始菌量為5.0~6.0 log CFU/mL，37℃培養48小時。以平板計數法分析發酵液中的乳酸菌菌數，並以高效液相層析技術(HPLC)分析發酵液中的γ -胺基丁酸含量。

請參見圖6A，其係將5株乳酸菌培養於12%米基懸浮液中，經發酵後其總菌數之長條圖。圖6A之橫軸依序為FPA 3709、FPP 3713、FKR 3737、FKR 3739及FKR 3741菌株，縱軸則為各該菌株之總菌數。請再參閱圖6B，其係將5株乳酸菌培養於12%米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖。圖6B之橫軸與圖6A一致，縱軸則為γ -胺基丁酸濃度。圖6A及圖6B中，若有相同字母則代表兩組數據之間不具有顯著差異。

圖6A之實驗結果顯示，乳酸菌在米基懸浮液中發酵48小時後，FKR 3737菌株之總菌數為8.08±0.06 log CFU/mL，顯著高於其他4株分離株，其中又以FPA 3709與FPP 3713為最低，分別為7.55±0.04 log CFU/mL及7.55±0.01 log CFU/mL)。此外，圖6B之結果顯示，FPA 3709發酵米基懸浮液後之γ -胺基丁酸產量最高，為6.12±0.18 mg/mL，而FKR 3739與FKR 3741之產量則最低，分別為3.33±0.16 mg/mL及2.99±0.24 mg/mL。比較上述5株乳酸菌之γ -胺基丁酸產量，以FPA 3709最高，其次為FPP 3713，後續僅選用FPA 3709(短乳桿菌，Lactobacillus brevis)分離株進行條件探討，但應理解的是，FPP 3713甚至是其他三株菌株，應會有類似的結果。

實驗四：米基懸浮液之濃度對γ -胺基丁酸產量的影響

秤取適量之米基粉末，放入經121℃滅菌15分鐘之蒸餾水中，分別配製成5%、10%、15%、20%、25%及30%(米基之克數/水之毫升量)之米基懸浮液，加入FPA 3709乳酸菌株，使起始菌量為5.0~6.0 log CFU/mL，37℃培養48小時。以平板計數法分析發酵液中的乳酸菌菌數，並以高效液相層析技術分析發酵液中的γ -胺基丁酸含量。

請參見圖7A，其係將FPA 3709乳酸菌培養於不同濃度之米基懸浮液中，經發酵後其總菌數之長條圖。圖7A之橫軸為殘留米基濃度(%，米基之克數/水之毫升量)，縱軸則為FPA 3709乳酸菌之總菌數。請再參閱圖7B，其係將FPA 3709乳酸菌培養於不同濃度之米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖。圖7B之橫軸與圖7A一致，縱軸則為γ -胺基丁酸濃度。圖7A及圖7B中，若有相同字母則代表兩組數據之間不具有 顯著差異。

圖7A之實驗結果顯示，米基懸浮液之濃度越高，則發酵後之總菌數越多，且於20%米基濃度時達最高，即7.72±0.10 log CFU/mL，若米基濃度繼續上升至25%或30%，總菌數無更進一步之變化。圖7B顯示γ -胺基丁酸產量亦隨米基濃度之上升而增加，於30%米基濃度時達最高，即16.12±0.12 mg/mL。

實驗五：蟲草屬真菌子實體乾粉對γ -胺基丁酸產量之影響

秤取適量之米基粉末，放入經121℃滅菌15分鐘之蒸餾水中，配製成20%之米基懸浮液，分裝後分別加入適量之北冬蟲夏草子實體乾粉，使子實體乾粉濃度分別為0.4%、0.8%、1.2%、1.6%及2.0%(子實體乾粉之克數/米基懸浮液之毫升量)。加入FPA 3709乳酸菌株，使起始菌量為5.0~6.0 log CFU/mL，37℃培養48小時。以高效液相層析技術分析發酵液中的γ -胺基丁酸含量。

請參見圖8，其係將FPA 3709乳酸菌培養於添加不同濃度北冬蟲夏草子實體乾粉之米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖，橫軸為子實體乾粉濃度，縱軸則為γ -胺基丁酸濃度。實驗結果顯示，γ -胺基丁酸隨著子實體乾粉濃度之上升而增加，於2.0%子實體乾粉濃度時達最高。

實驗六：新鮮之蟲草屬真菌子實體對γ -胺基丁酸產量之影響

秤取適量之米基粉末，放入經121℃滅菌15分鐘之蒸餾水中，配製成20%之米基懸浮液，分裝後分別加入適量之新鮮北冬蟲夏草子實體，使新鮮子實體濃度分別為0%、2%、4%、6%、8%及10%(新鮮子實體之克數/米基懸浮液之毫升量)。加入FPA 3709乳酸菌株，使起始菌量為5.0~6.0 log CFU/mL，37℃培養48小時。以高效液相層析技術分析發酵液中的γ -胺基丁酸含量。

請參見圖9，其係將FPA 3709乳酸菌培養於添加不同濃度新鮮北冬蟲夏草子實體之米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖，橫軸為新鮮子實體濃度，縱軸則為γ -胺基丁酸濃度。實驗結果顯示，γ -胺基丁酸隨著新鮮子實體濃度之上升而增加，於10%新鮮子實體濃度時達最高。

實驗七：可食性中草藥對γ -胺基丁酸產量之影響

將中草藥及其5倍重量之蒸餾水放入電鍋(TCA-10A)之內鍋中，外鍋加入附量杯兩杯之水量(約340 mL)，蒸煮40分鐘。經四層紗布過濾後所得之濾液即為20%(w/v)中草藥蒸煮液。將中草藥蒸煮液裝於無菌血清瓶，儲存於4℃備用。於25%米基懸浮液中添加中草藥蒸煮液，製成含1%~4%中草藥蒸煮液之米基懸浮液，接種FPA 3709乳酸菌，使起始菌數為5.0~6.0 log CFU/mL，於37℃培養48小時，以平板計數法分析發酵液中的乳酸菌菌數，並以高效液相層析技術分析發酵液中的γ -胺基丁酸含 量。

請參見圖10A，其係將FPA 3709乳酸菌培養於添加不同濃度之桂圓或紅棗之米基懸浮液中，經發酵後其總菌數之長條圖。圖10A之橫軸由左至右依序為對照組、添加桂圓蒸煮液、添加紅棗蒸煮液、添加紅棗及桂圓蒸煮液，且各種蒸煮液又分為1%、2%、3%及4%等不同濃度，縱軸則為FPA 3709乳酸菌之總菌數。請再參閱圖10B，其係將FPA 3709乳酸菌培養於添加不同濃度之桂圓或紅棗之米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖。圖10B之橫軸與圖10A一致，縱軸則為γ -胺基丁酸濃度。圖10A及圖10B中，若有相同字母則代表兩組數據之間不具有顯著差異。

圖10A之結果顯示，各種不同濃度之中草藥蒸煮液均明顯提高FPA 3709發酵後之總菌數，而且三種中草藥蒸煮液對菌量之影響為相類似，均於添加2%蒸煮液時達最高，即8.54±0.05 log CFU/mL~8.60±0.05 log CFU/mL，添加量提高至4%則不會進一步造成總菌數之變化。圖10B之實驗結果顯示，各種濃度及種類之中草藥蒸煮液均不會顯著影響γ -胺基丁酸之產量。

此外，於發酵前或發酵後添加中草藥蒸煮液對於發酵液之風味及酸度將會有不同程度之影響，但兩者都能改善米基具有飯餿味之不利情形，使發酵液之風味更能被人們所接受。

根據上述可知，現今廠商處理剩餘米基之方法，常造成生態環境及土壤汙染之影響，並且浪費對人體具有保健價值之蟲草屬真菌菌絲資源。經本發明探究米基之組成後發現，米基因被大量蟲草屬真菌菌絲浸潤而富含 更多的蛋白質，若進一步以乳酸菌發酵將會產生高濃度的γ -胺基丁酸，成為一種新穎之產生γ -胺基丁酸之方法；此外，由於發酵過程能解決米基具有飯餿味的問題，提升整體之風味，因而該應用發酵米基而產生γ -胺基丁酸方法可進一步應用於製作含有蟲草屬真菌菌絲及γ -胺基丁酸等複合性保健價值之新穎健康食品、飲品。因此，本發明一種發酵米基而製備γ -胺基丁酸的方法有助於提升米基的工業應用價值、食品保健價值、解決米基廢棄物之問題，且整個過程符合快速、大量、成本低廉的優勢。

本發明關於利用北冬蟲夏草(Cordyceps militaris)及具有產生γ -胺基丁酸能力之乳酸菌(Lactic acid bacteria with glutamate decarboxylase activity)係屬「商業上公眾可購得之生物材料」及「申請前業已保存於具有公信力之寄存機構且已可自由分讓之生物材料」，依現行專利法第三十條第一項但書之規定，不須寄存。

以上所述僅為本發明之較佳實施例，並非用以限定本發明之申請專利範圍，因此凡其它未脫離本發明所揭示之精神下所完成之各種更動或潤飾等，均應包含於本案之申請專利範圍內。

1‧‧‧米基

2‧‧‧北冬蟲夏草子實體

31~34、41~46‧‧‧步驟

圖1：係煮熟之米飯經培育出北冬蟲夏草子實體後之整體狀態示意圖。

圖2：係圖1經切除子實體後之殘留米基狀態示意圖。

圖3：係本發明一種發酵米基而製備γ -胺基丁酸的方法於第一較佳實施例中之方塊流程圖。

圖4：係本發明一種發酵米基而製備γ -胺基丁酸的方法於第二較佳實施例中之方塊流程圖。

圖5：係10株具備γ -胺基丁酸生產潛力的乳酸菌株之薄層色層分析圖譜。

圖6A：係將5株乳酸菌培養於12%米基懸浮液中，經發酵後其總菌數之長條圖。

圖6B：係將5株乳酸菌培養於12%米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖。

圖7A：係將FPA 3709乳酸菌培養於不同濃度之米基懸浮液中，經發酵後其總菌數之長條圖。

圖7B：係將FPA 3709乳酸菌培養於不同濃度之米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖。

圖8：係將FPA 3709乳酸菌培養於添加不同濃度北冬蟲夏草子實體乾粉之米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖。

圖9：係將FPA 3709乳酸菌培養於添加不同濃度新鮮北冬蟲夏草子實體之米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖。

圖10A：係將FPA 3709乳酸菌培養於添加不同濃度之桂圓或紅棗之米 基懸浮液中，經發酵後其總菌數之長條圖。

圖10B：係將FPA 3709乳酸菌培養於添加不同濃度之桂圓或紅棗之米基懸浮液中，經發酵後其γ -胺基丁酸濃度之長條圖。

41~46‧‧‧步驟

Claims (14)

1. 一種生產γ-胺基丁酸的方法，其係一經切除北冬蟲夏草(Cordyceps militaris )子實體後所剩餘之塊狀米基製成之一懸浮液，經至少一乳酸菌發酵而生產γ-胺基丁酸之方法；其中，該乳酸菌具有麩氨酸脫羧酶活性(Glutamate decarboxylase activity)。
2. 如申請專利範圍第1項所述之生產γ-胺基丁酸的方法，其中該經切除北冬蟲夏草子實體後所剩餘之塊狀米基係經磨成粉末後，加水而製成該懸浮液。
3. 如申請專利範圍第1項所述之生產γ-胺基丁酸的方法，其中該經切除北冬蟲夏草子實體後所剩餘之塊狀米基係部分或全部被北冬蟲夏草菌絲浸潤、置換。
4. 如申請專利範圍第3項所述之生產γ-胺基丁酸的方法，其中該經切除北冬蟲夏草子實體後所剩餘之塊狀米基之粗蛋白質含量，高於未經培養北冬蟲夏草子實體之同品系塊狀米基原料之粗蛋白質含量。
5. 如申請專利範圍第4項所述之生產γ-胺基丁酸的方法，其中該經切除北冬蟲夏草子實體後所剩餘之塊狀米基之粗蛋白質含量係介於乾重6%~30%。
6. 如申請專利範圍第1項所述之生產γ-胺基丁酸的方法，其中該懸浮液中，該經切除北冬蟲夏草子實體後所剩餘之塊狀米基之重量體積濃度(w/v)係小於或等於60%。
7. 如申請專利範圍第1項所述之生產γ-胺基丁酸的方法，其中該乳酸菌 係短乳桿菌(Lactobacillus brevis)。
8. 一種生產γ-胺基丁酸的方法，其係一經切除北冬蟲夏草子實體後所剩餘之塊狀米基製成之一懸浮液，經一殘留於米基中之活體北冬蟲夏草或一額外添加之活體北冬蟲夏草之至少一者發酵而生產γ-胺基丁酸之方法。
9. 如申請專利範圍第8項所述之生產γ-胺基丁酸的方法，其中更添加至少一乳酸菌，與該殘留於米基中之活體北冬蟲夏草或該額外添加之活體北冬蟲夏草之至少一者共發酵而生產γ-胺基丁酸；其中，該乳酸菌具有麩氨酸脫羧酶活性(Glutamate decarboxylase activity)。
10. 如申請專利範圍第9項所述之生產γ-胺基丁酸的方法，其中該乳酸菌係短乳桿菌(Lactobacillus brevis)。
11. 如申請專利範圍第8項所述之生產γ-胺基丁酸的方法，其中該額外添加之活體北冬蟲夏草之重量體積濃度(w/v)係小於或等於50%。
12. 一種富含γ-胺基丁酸之食品或飲品，其係以一經切除北冬蟲夏草子實體後所剩餘之塊狀米基為基質，再經至少一乳酸菌株發酵，使γ-胺基丁酸濃度提升而成；其中，該乳酸菌具有麩氨酸脫羧酶活性(Glutamate decarboxylase activity)。
13. 如申請專利範圍第12項所述之富含γ-胺基丁酸的食品或飲品，其中更包含至少一具獨特風味之食材，以達到調和米基異味或發酵異味之至少一者之效果。
14. 如申請專利範圍第13項所述之富含γ-胺基丁酸的食品或飲品，其中該具獨特風味之食材係一紅棗、一桂圓、或一其他可食性中草藥之至少一 者。