CN103540624A

CN103540624A - 发酵虫草属真菌米基而制备γ-氨基丁酸的方法及其应用

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Publication number: CN103540624A
Application number: CN201210246991.2A
Authority: CN
Inventors: 蔡国珍; 洪依勤
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2012-07-17
Filing date: 2012-07-17
Publication date: 2014-01-29

Abstract

本发明提供一种发酵虫草属真菌米基而制备γ-氨基丁酸的方法及其应用，其步骤至少包括：将经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基制成悬浮液；以及通过米基中的虫草属真菌或额外添加的活体菌株发酵而产生γ-氨基丁酸；其中，以上述方法所产生的发酵液，可应用于保健食品或饮品上。

Description

发酵虫草属真菌米基而制备γ-氨基丁酸的方法及其应用

技术领域

本发明关于一种生产γ-氨基丁酸的方法及其应用，特别是关于一种发酵虫草属真菌米基而产生高浓度γ-氨基丁酸的方法及其应用。

背景技术

在分类学上，归类于虫草属(Cordyceps species)的物种为昆虫寄生型的真菌，种类繁多，其子实体及菌丝萃取物是东亚地区民族广泛食用的中药材及保健食品之一，如中医古书记载，具有养肺阴、补肾阳等调节体质的功效，有助于止咳化痰、改善肾阳虚引起的失眠及抑郁症情形等。其中，较广为人知且大量被使用的虫草属真菌包括冬虫夏草(Cordyceps sinensis)及北冬虫夏草(Cordyceps militaris)等。

虫草属真菌子实体的野生繁殖方式：夏季，昆虫产卵，卵孵化变成幼虫后钻入潮湿松软的土层中，被土壤中的虫草属真菌孢子感染；经过一个冬天，待第二年春天来临时，虫草属真菌孢子萌发而长出菌丝，开始吸收虫体内的物质作为其生存的养分，并不断繁殖而逐渐将虫体组织浸润、置换成真菌菌丝，终至虫体死亡；虫体死亡后，菌丝仍继续生长，到夏天时，即由虫体抽生出真菌子实体，外观似小草。

然而，由于虫草属真菌的生长地理特殊性及严格的寄生性，加上过度采收，使得野生的虫草属子实体资源极度匮乏。近年来，人工培育虫草属真菌子实体的方式蓬勃发展，以煮熟的米饭(例如大米、玉米、小米等)取代虫体，不但足以提供北冬虫夏草菌丝生长的营养物质，且北冬虫夏草菌丝确实能进一步地从米饭中抽生出真菌子实体。

请参阅图1，其是煮熟的米饭经培育出北冬虫夏草子实体后的整体状态示意图，包含米饭经北冬虫夏草菌丝全部或部分浸润、置换后所得米饭基质(称为米基1)，及由该米基1抽生出的北冬虫夏草子实体2。研究指出，以煮熟的米饭人工培育出的北冬虫夏草子实体，其生理活性物质(例如虫草素、虫草酸、麦角固醇、虫草多醣、超氧歧化酶等)与野生者相似，因而成为一种人工培养北冬虫夏草子实体的主要方法。然而，这种人工大量培养子实体的方式，也存在着一些问题。请参阅图2，其是图1经切除子实体后的残留米基状态示意图。厂商在割除子实体贩卖后，残留大量被真菌菌丝浸润的米基，若直接将米基丢弃，将造成当地生态环境及土壤污染等影响，另一方面而言，其仍含有许多具有保健价值的虫草属真菌菌丝体，整体营养价值及保健价值虽不若米饭或整株虫草属真菌子实体那样高，甚至带有一种馊味，但大量烧成灰烬后丢弃也是十分可惜的事情。因此，如何有效处理培养虫草属子实体后所残留的米基，如何再利用所述米基中的营养物及虫草属真菌菌丝，并通过更显着地提升其保健价值及可食用性，而达到善用培养虫草属子实体后所残留的大量米基，实为一件具有重要意义及商业价值的课题。

失眠及抑郁症是现在普遍的文明病，虫草属真菌不但有止咳化痰的功效，更能改善肾阳虚引起的失眠及抑郁症情形。但米基中的菌丝效益不如真菌的子实体高，因此保健价值及食用价值偏低。依发明人多年来的经验，认为应能开发出一种通过可食用益生菌发酵的方式，将米基的营养成分或浸润于其中的虫草属真菌菌丝内容物转换成具有更高附加价值的成分——γ-氨基丁酸(能改善大部分失眠情形，并有助于改善抑郁症情形)，以提供一种产生γ-氨基丁酸的新颖方式及其于食品上的应用。

发明内容

本发明的主要目的，在于提供一种发酵米基而制备γ-氨基丁酸的方法。

本发明的另一目的，在于将发酵米基而制备γ-氨基丁酸的方法应用于保健食品或饮品上。

本发明提供一种生产γ-氨基丁酸的方法，其包括将经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基制成悬浮液和将所述悬浮液经至少一种活体菌株发酵而生产γ-氨基丁酸。优选地，所述活体菌株具备生产γ-氨基丁酸的能力或具有谷氨酸脱羧酶活性。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中，将所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基经磨成粉末后加水而制成所述悬浮液。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中，所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基部分或全部被虫草属真菌菌丝浸润、置换。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中，所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基的粗蛋白质含量高于未经培养虫草属真菌子实体的同品系米基原料的粗蛋白质含量。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中，所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基的粗蛋白质含量为按干重计6%~30%。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中，在所述悬浮液中，所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基的浓度(米基的克数/水或其他合适溶液的毫升量×100%)小于或等于60%。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中所述活体菌株是乳酸菌(Lacticacid bacteria)。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中所述乳酸菌是短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。

本发明提供一种生产γ-氨基丁酸的方法，其包括将经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基制成悬浮液，和将所述悬浮液经残留于米基中的活体虫草属真菌和额外添加的活体虫草属真菌二者中的至少一者发酵而生产γ-氨基丁酸。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中，还添加至少一种乳酸菌，与所述残留于米基中的活体虫草属真菌和所述额外添加的活体虫草属真菌二者中的至少一者共发酵。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中，所述乳酸菌是短乳杆菌。

根据上述生产γ-氨基丁酸的方法，其中，所述额外添加的活体虫草属真菌的浓度(活体虫草属真菌的克数/米基悬浮液的毫升量×100%)小于或等于50%。

本发明提供一种富含γ-氨基丁酸的食品或饮品，其中所含γ-氨基丁酸是通过上述任一所述方法生产而来。

根据上述富含γ-氨基丁酸的食品或饮品，其中还包含至少一种具独特风味的食材，以达到调和米基异味和发酵异味二者中至少一者的效果。

根据上述富含γ-氨基丁酸的食品或饮品，其中所述具独特风味的食材是红枣、桂圆和其他可食性中草药中的至少一者。

附图说明

图1：是煮熟的米饭经培育出北冬虫夏草子实体后的整体状态示意图。

图2：是图1经切除子实体后的残留米基状态示意图。

图3：是本发明发酵米基而制备γ-氨基丁酸的方法的第一种优选实施方式的方块流程图。

图4：是本发明发酵米基而制备γ-氨基丁酸的方法的第二种优选实施方式的方块流程图。

图5：是10株具备γ-氨基丁酸生产潜力的乳酸菌株的薄层色谱分析图谱。

图6A：是将5株乳酸菌培养于12%米基悬浮液中，经发酵后其总菌数的直方图。

图6B：是将5株乳酸菌培养于12%米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图。

图7A：是将FPA 3709乳酸菌培养于不同浓度的米基悬浮液中，经发酵后其总菌数的直方图。

图7B：是将FPA 3709乳酸菌培养于不同浓度的米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图。

图8：是将FPA 3709乳酸菌培养于添加不同浓度北冬虫夏草子实体干粉的米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图。

图9：是将FPA 3709乳酸菌培养于添加不同浓度新鲜北冬虫夏草子实体的米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图。

图10A：是将FPA 3709乳酸菌培养于添加不同浓度的桂圆、红枣以及桂圆及红枣的米基悬浮液中，经发酵后其总菌数的直方图。

图10B：是将FPA 3709乳酸菌培养于添加不同浓度的桂圆、红枣以及桂圆及红枣的米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图。

具体实施方式

鉴于已知残留米基所造成的问题，本发明提供一种利用益生菌发酵而产生γ-氨基丁酸的方法及其应用，以达到处理大量残留米基及资源不浪费的目的。

以下通过实施例来详细描述本发明的技术及特点，然而这些实施例并非用以限定本发明，本领域技术人员可理解，在不脱离本发明的精神和范围内，可作各种更动与修饰。

请参见图3，其为本发明发酵米基而制备γ-氨基丁酸的方法的第一种优选实施方式的方块流程图。本发明制备γ-氨基丁酸的方法至少包括：

步骤31：开始；

步骤32：将水或其他合适溶液与经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基混合成悬浮液，使米基的浓度达第一浓度；

步骤33：经残留于米基中的虫草属真菌发酵所述悬浮液而产生γ-氨基丁酸；以及

步骤34：结束。

于该优选实施方式中，所述步骤32是将水或其他合适溶液与虫草属真菌的米基混合成米基悬浮液，以提供后续发酵所需的营养条件及环境。其中，其他合适溶液可以是例如含碳源的溶液、含氮源的溶液或含盐类的溶液，甚至是一般用于培养原核生物的培养液或用于培养真菌的培养液，但不以此为限；所述第一浓度(米基的克数/水或其他合适溶液的毫升量×100%)以小于或等于60%为佳。

上述步骤33通过残留于米基中的虫草属真菌发酵悬浮液而产生γ-氨基丁酸，其中，优选地，所述发酵的条件为15~37℃发酵8~120小时。

本发明还提供了第二种优选实施方式。请参阅图4，其为本发明发酵米基而制备γ-氨基丁酸的方法的第二种优选实施方式的方块流程图。本发明制备γ-氨基丁酸的另一优选实施方式至少包括：

步骤41：开始；

步骤42：将米基磨成粉末，以制成米基粉末；

步骤43：将水或其他合适溶液与米基粉末混合成悬浮液，使米基粉末的浓度达第二浓度；加入乳酸菌，使乳酸菌达第一菌量(即起始菌量)；

步骤44：添加虫草属真菌，其添加浓度是第三浓度；

步骤45：乳酸菌及虫草属真菌共发酵该悬浮液而产生γ-氨基丁酸；以及

步骤46：结束。

于该优选实施方式中，步骤42中将米基磨成粉末状，以加速后续发酵反应的进行，上述步骤43中将水或其他合适溶液与虫草属真菌的米基粉末混合而制成米基悬浮液，以提供后续发酵所需的营养条件及环境，并加入乳酸菌作为后续发酵的至少一种菌株。其中，乳酸菌可以是下列17属菌株中的任一者，但必须具有谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase，GAD)的活性：(1)乳酸杆菌属(Lactobacillus);(2)明串球菌属(Leuconostoc);(3)链球菌属(Streptococcus);(4)足球菌属(Pediococcus);(5)有孢子乳酸菌(Sporolactobacillus);(6)肠球菌属(Enterococcus);(7)乳酸球菌属(Lactococcus);(8)肉品杆菌属(Carnobacterium);(9)徘徊球菌属(Vagococcus);(10)四体球菌属(Tetragenococcus);(11)双歧杆菌属(Bifidobacterium);(12)奇异菌属(Atopobium);(13)魏斯氏菌属(Weissella);(14)乏养菌属(Abiotrophia);(15)颗粒链菌属(Granulicatella);(16)酒球菌属(Oenococcus);(17)Paralactobacillus；其他合适溶液可以是例如含碳源的溶液、含氮源的溶液或含盐类的溶液，甚至是一般用于培养原核生物的培养液或用于培养真菌的培养液，但不以此为限；优选地，所述第二浓度(米基粉末的克数/水或其他合适溶液的毫升量×100%)为小于或等于60%；所述第一菌量为以5.0~6.0log CFU/mL。

上述步骤44是添加虫草属真菌子实体干粉或新鲜虫草属真菌子实体，作为后续发酵的另一菌株。其中，优选地，所述第三浓度(添加的虫草属真菌克数/米基悬浮液的毫升量×100%)为小于或等于50%。

上述步骤45通过乳酸菌及虫草属真菌共发酵该悬浮液而产生γ-氨基丁酸。其中，所述发酵的条件为15~37℃发酵8~120小时。

以下将进一步提供针对本发明上述各实施方式的详细评估及测试结果，以对本发明进行更深入的说明，从而更容易理解本发明。

实施例一：米基组分分析

依美国官方分析化学学会(Association of Official Analytical Chemists，A.O.A.C.)于1980年公布的标准方法分析米基的水分、灰分、粗蛋白质、粗脂肪及粗纤维含量，共重复三次。

请参见下列表1，其是大米米饭培养出北冬虫夏草子实体后的米基组分分析。结果显示米基主要由碳水化合物组成，为83.59±0.56%，其次为粗蛋白质、粗纤维、粗脂肪及灰分，分别为9.24±0.10%、5.61±0.36%、1.31±0.03%及0.25±0.01%。其中，粗蛋白含量(9.24±0.10%，干重)明显高于台湾行政院卫生署统计并公布的一般大米蛋白质含量(约7%，干重)，显示煮熟的米饭经北冬虫夏草真菌菌丝浸润后的特征，会使得残留的米基内含有更大量的蛋白质，造成米基蛋白质含量显着高于原本米饭的结果，且米基经北冬虫夏草真菌菌丝浸润的程度越高，其粗蛋白组成应越趋近于北冬虫夏草真菌的粗蛋白质组成(36.36%，干重)。

由上述实验结果得知，米基经大量北冬虫夏草浸润而具备富含蛋白质的特质，应有以残留于米基中的活体虫草属真菌和/或例如乳酸菌这类的益生菌发酵产生高浓度γ-氨基丁酸的潜力。

表1、米基的一般成分分析

实施例二：筛选出具备生产γ-氨基丁酸能力的乳酸菌株

自126株乳酸菌分离株中筛选出具备γ-氨基丁酸生产潜力的10株乳酸菌。经进一步筛选后，挑出γ-氨基丁酸产量最高的5株菌株。请参见图5，其是该10株具备γ-氨基丁酸生产潜力的乳酸菌株的薄层色谱分析图谱。图谱由左至右分别为γ-氨基丁酸标准品、谷氨酸钠标准品、FPP 3713菌株、FPA3708菌株、FPA 3709菌株、FPM 3702菌株、FPS 2520菌株、FKR 2526菌株、FPAW 3778菌株、FKR 3737菌株、FKR 3739菌株、FKR 3741菌株。由实验结果可知，FPA 3709、FPP 3713、FKR 3737、FKR 3739及FKR 3741的γ-氨基丁酸产量最高，因此将以这五株菌作为后续实验用的菌株。

实施例三：测试乳酸菌发酵米基悬浮液的能力

以镊子将块状的北冬虫夏草米基夹入无菌保存袋中，并以经121℃高压灭菌15分钟的研磨钵粉碎米基，密封后储藏于4℃冰箱，供制备米基悬浮液使用(全程以无菌操作的方式进行)。

称取12g的米基粉末，添加100mL经121℃高压灭菌15分钟的蒸馏水，配制成12%的米基悬浮液(即100mL溶剂水中含有12g的米基)，加入乳酸菌株，使起始菌量为5.0~6.0log CFU/mL，37℃培养48小时。以平板计数法分析发酵液中的乳酸菌菌数，并以高效液相色谱技术(HPLC)分析发酵液中的γ-氨基丁酸含量。

请参见图6A，其是将5株乳酸菌培养于12%米基悬浮液中，经发酵后其总菌数的直方图。图6A的横轴依序为FPA 3709、FPP 3713、FKR 3737、FKR 3739及FKR 3741菌株，纵轴则为各该菌株的总菌数。请再参阅图6B，其是将5株乳酸菌培养于12%米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图。图6B的横轴与图6A一致，纵轴则为γ-氨基丁酸浓度。图6A及图6B中，若有相同字母则代表两组数据之间不具有显着差异。

图6A的实验结果显示，乳酸菌在米基悬浮液中发酵48小时后，FKR 3737菌株的总菌数为8.08±0.06log CFU/mL，显着高于其他4株分离株，其中FPA

3709与FPP 3713菌株的总菌数最低，分别为7.55±0.04log CFU/mL及7.55±0.01log CFU/mL)。此外，图6B的结果显示，FPA 3709菌株发酵米基悬浮液后的γ-氨基丁酸产量最高，为6.12±0.18mg/mL，而FKR 3739与FKR3741的产量则最低，分别为3.33±0.16mg/mL及2.99±0.24mg/mL。比较上述5株乳酸菌的γ-氨基丁酸产量，以FPA 3709最高，其次为FPP 3713，后续仅选用FPA 3709分离株进行条件探讨，但应理解的是，FPP 3713甚至是其他三株菌株，应会有类似的结果。其中，FPA 3709菌株经菌种鉴定后确认是短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。

实施例四：米基悬浮液的浓度对γ-氨基丁酸产量的影响

称取适量的米基粉末，放入经121℃高压灭菌15分钟的蒸馏水中，分别配制成5%、10%、15%、20%、25%及30%的米基悬浮液(100mL溶剂水中的米基克数)，加入FPA 3709乳酸菌株，使起始菌量为5.0~6.0logCFU/mL，37℃培养48小时。以平板计数法分析发酵液中的乳酸菌菌数，并以高效液相色谱技术分析发酵液中的γ-氨基丁酸含量。

请参见图7A，其是将FPA 3709乳酸菌培养于不同浓度的米基悬浮液中，经发酵后其总菌数的直方图。图7A的横轴为残留米基浓度，纵轴则为FPA3709乳酸菌的总菌数。请再参阅图7B，其是将FPA 3709乳酸菌培养于不同浓度的米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图。图7B的横轴与图7A一致，纵轴则为γ-氨基丁酸浓度。图7A及图7B中，若有相同字母则代表两组数据的间不具有显着差异。

图7A的实验结果显示，米基悬浮液的浓度越高，则发酵后的总菌数越多，且于20%米基浓度时达最高，即7.72±0.10log CFU/mL，若米基浓度继续上升至25%或30%，总菌数无明显变化。图7B显示γ-氨基丁酸产量亦随米基浓度的上升而增加，于30%米基浓度时达最高，即16.12±0.12mg/mL。

实施例五：虫草属真菌子实体干粉对γ-氨基丁酸产量的影响

称取适量的米基粉末，放入经121℃高压灭菌15分钟的蒸馏水中，配制成20%的米基悬浮液(即100mL溶剂水中含有20g的米基)，分装后分别加入适量的北冬虫夏草子实体干粉，使子实体干粉浓度分别为0.4%、0.8%、1.2%、1.6%及2.0%(即100mL米基悬浮液中含有的子实体干粉克数)。加入FPA 3709乳酸菌株，使起始菌量为5.0~6.0log CFU/mL，37℃培养48小时。以高效液相色谱技术分析发酵液中的γ-氨基丁酸含量。

请参见图8，其是将FPA 3709乳酸菌培养于添加不同浓度北冬虫夏草子实体干粉的米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图，横轴为子实体干粉浓度，纵轴则为γ-氨基丁酸浓度。实验结果显示，γ-氨基丁酸随着子实体干粉浓度的上升而增加，于2.0%子实体干粉浓度时达最高。

实施例六：新鲜的虫草属真菌子实体对γ-氨基丁酸产量的影响

称取适量的米基粉末，放入经121℃高压灭菌15分钟的蒸馏水中，配制成20%的米基悬浮液(即100mL溶剂水中含有20g的米基)，分装后分别加入适量的新鲜北冬虫夏草子实体，使新鲜子实体浓度分别为0%、2%、4%、6%、8%及10%(即100mL米基悬浮液中含有的新鲜子实体克数)。加入FPA3709乳酸菌株，使起始菌量为5.0~6.0log CFU/mL，37℃培养48小时。以高效液相色谱技术分析发酵液中的γ-氨基丁酸含量。

请参见图9，其是将FPA 3709乳酸菌培养于添加不同浓度新鲜北冬虫夏草子实体的米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图，横轴为新鲜子实体浓度，纵轴则为γ-氨基丁酸浓度。实验结果显示，γ-氨基丁酸随着新鲜子实体浓度的上升而增加，于10%新鲜子实体浓度时达最高。

实施例七：可食性中草药对γ-氨基丁酸产量的影响

将中草药及其5倍重量的蒸馏水放入电饭锅(TCA-10A)的内锅中，外锅加入附量杯两杯的水量(约340mL)，蒸煮40分钟。经四层纱布过滤后所得的滤液即为20%(中草药的克数/蒸馏水的毫升量×100%)中草药蒸煮液。将中草药蒸煮液装于无菌血清瓶，储存于4℃备用。于25%米基悬浮液中添加中草药蒸煮液，制成含1%~4%中草药蒸煮液的米基悬浮液，接种FPA 3709乳酸菌，使起始菌量为5.0~6.0log CFU/mL，于37℃培养48小时，以平板计数法分析发酵液中的乳酸菌菌数，并以高效液相色谱技术分析发酵液中的γ-氨基丁酸含量。

请参见图10A，其是将FPA 3709乳酸菌培养于添加不同浓度的桂圆、红枣或桂圆及红枣的米基悬浮液中，经发酵后其总菌数的直方图。图10A的横轴由左至右依序为对照组、添加桂圆蒸煮液、添加红枣蒸煮液、添加红枣及桂圆蒸煮液，且各种蒸煮液又分为1%、2%、3%及4%等不同浓度，纵轴则为FPA 3709乳酸菌的总菌数。请再参阅图10B，其是将FPA 3709乳酸菌培养于添加不同浓度的桂圆、红枣或桂圆及红枣的米基悬浮液中，经发酵后其γ-氨基丁酸浓度的直方图。图10B的横轴与图10A一致，纵轴则为γ-氨基丁酸浓度。图10A及图10B中，若有相同字母则代表两组数据之间不具有显着差异。

图10A的结果显示，各种不同浓度的中草药蒸煮液均明显提高FPA 3709发酵后的总菌数，而且三种中草药蒸煮液对菌量的影响相类似，均于添加2%蒸煮液时达最高，即8.54±0.05log CFU/mL~8.60±0.05log CFU/mL，添加量提高至4%则不会进一步造成总菌数的明显变化。图10B的实验结果显示，中草药蒸煮液的种类对γ-氨基丁酸的产量影响不大，此外，浓度虽可能使γ-氨基丁酸产量略有起伏，但整体观察并未呈现一定的趋势，显示适量的中草药蒸煮液不会对γ-氨基丁酸的产量造成显着影响。

此外，于发酵前或发酵后添加中草药蒸煮液对于发酵液的风味及酸度将会有不同程度的影响，但两者都能改善米基具有饭馊味的不利情形，使发酵液的整体风味更能被人们所接受。

根据上述可知，现今厂商处理剩余米基的方法，常造成生态环境及土壤污染的影响，并且浪费对人体具有保健价值的虫草属真菌菌丝资源。经本发明探究米基的组成后发现，米基因被大量虫草属真菌菌丝浸润而富含更多的蛋白质，若进一步以乳酸菌发酵将会产生高浓度的γ-氨基丁酸，成为一种新颖的产生γ-氨基丁酸的方法；此外，由于发酵过程能解决米基具有饭馊味的问题，提升整体的风味，因而该应用发酵米基而产生γ-氨基丁酸方法可进一步应用于制作含有虫草属真菌菌丝及γ-氨基丁酸等复合性保健价值的新颖健康食品、饮品。因此，本发明发酵米基而制备γ-氨基丁酸的方法有助于提升米基的工业应用价值、食品保健价值、解决米基废弃物的问题，且整个过程符合快速、大量、成本低廉的优势。

本发明所指的米基悬浮液浓度、添加虫草属真菌子实体干粉的浓度、添加新鲜虫草属真菌子实体的浓度、可食性中草药浓度的计算方式均为“溶质的克数/溶剂的毫升数×100%”，而非一般常用的重量体积浓度“溶质的克数/溶液的毫升数×100%”。例如，本发明提供的实施例以水配制米基悬浮液，因此浓度计算方式为“米基的克数/溶剂水的毫升数”，但应能理解的是，溶剂并不以水为限；在米基悬浮液中添加虫草属真菌子实体干粉或新鲜虫草属真菌子实体，因此其浓度计算方式为“所添加的虫草属真菌子实体干粉或新鲜虫草属真菌子实体克数/米基悬浮液的毫升数”，但应能理解的是，米基悬浮液并不以由米基及水配制者为限。本发明所指的浓度“溶质的克数/溶剂的毫升数×100%”可经由转换而成为一般常用的重量百分浓度“溶质的克数/溶液的克数×100%”，例如本发明实施例中，以水配制出12%的米基悬浮液，则其重量百分浓度相当于[12g/(12g+1g/mL×100mL)×100%]，即10.7%重量百分浓度。

本发明中所使用的北冬虫夏草及具有产生γ-氨基丁酸能力的乳酸菌(具有谷氨酸脱羧酶活性)属于“商业上公众可购得的生物材料”，依现行专利法的相关规定，不需保藏。米基、新鲜北冬虫夏草子实体及北冬虫夏草子实体干粉可购自台湾慕求富达国际股份有限公司(地址：台湾台北市大安区信义路四段107-1号1楼；电话：02-2708-6177；网址：http://www.muchoherb.com/CF_sec01.html)，产品名称为“生鲜冬虫夏草”及“中华黄金冬虫夏草子实体精华1号”。乳酸菌株可购自台湾欣泰安科技股份有限公司(地址：台湾台北市南港区三重路19-13号1楼；电话：02-2655-1551，或经由网络购物通路─“露天拍卖”购买，网址：class.ruten.com.tw/user/index00.php?s=cta8888)，产品编号分别为FPP3713、FPA3708、FPA3709、FPM3702、FPS2520、FKR2526、FPAW3778、FKR3737、FKR3739、FKR3741。

以上所述仅为本发明的优选实施例，并非用以限定本发明的申请专利范围，因此凡其它未脱离本发明所揭示的精神和范围下所完成的各种更动或修饰等，均应包含于本案的申请专利范围内。

Claims

1.一种生产γ-氨基丁酸的方法，其包括将经切除虫草属(Cordyceos species)真菌子实体后所剩余的米基制成悬浮液和将所述悬浮液经至少一种活体菌株发酵而生产γ-氨基丁酸。

2.如权利要求1所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中，将所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基经磨成粉末后加水而制成所述悬浮液。

3.如权利要求1所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中，所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基部分或全部被虫草属真菌菌丝浸润、置换。

4.如权利要求3所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中，所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基的粗蛋白质含量高于未经培养虫草属真菌子实体的同品系米基原料的粗蛋白质含量。

5.如权利要求4所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中，所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基的粗蛋白质含量为按干重计6%~30%。

6.如权利要求1所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中，在所述悬浮液中，所述经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基的浓度小于或等于60%。

7.如权利要求1所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中所述活体菌株是乳酸菌。

8.如权利要求7所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中所述乳酸菌是短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。

9.一种生产γ-氨基丁酸的方法，其包括将经切除虫草属真菌子实体后所剩余的米基制成悬浮液，经残留于米基中的活体虫草属真菌和额外添加的活体虫草属真菌二者中的至少一者发酵而生产γ-氨基丁酸。

10.如权利要求9所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中还添加至少一种乳酸菌，与所述残留于米基中的活体虫草属真菌和额外添加的活体虫草属真菌二者中的至少一者共发酵而生产γ-氨基丁酸。

11.如权利要求10所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中所述乳酸菌是短乳杆菌。

12.如权利要求11所述的生产γ-氨基丁酸的方法，其中所述额外添加的活体虫草属真菌的浓度小于或等于50%。

13.一种富含γ-氨基丁酸的食品或饮品，其中所含γ-氨基丁酸是通过权利要求1-12中任一项所述的方法生产而来。

14.如权利要求13所述的富含γ-氨基丁酸的食品或饮品，其中还包含至少一种具独特风味的食材。

15.如权利要求14所述的富含γ-氨基丁酸的食品或饮品，其中所述具独特风味的食材是红枣、桂圆和其他可食性中草药中的至少一者。