CN106243074A - 一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法 - Google Patents

一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，包括以下步骤：将白茅样品粉碎得到20~90目的白茅粉末；将去离子水和白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取30~90分钟，得到提取液；将提取液中加入乙醇，得到混合液，离心得到上清液和沉淀物；将上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品；本发明采用的提取溶剂亚临界水为典型的绿色溶剂，具有无毒无害，价格低廉，环境友好的优点，用本发明的亚临界水提取的白茅中有效成分苜蓿素、薏苡素和香草酸，杂质少，无毒，无污染，无残留，并且价格低廉，环境友好；本发明亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，提取率高和其它杂质成分容易分离。

Description

一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的 方法
技术领域
本发明涉及技术领域，具体说是一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法。
背景技术
白茅的活性成分主要有三萜类、糖类、内酯类、有机酸类、香豆素类等，并含有钾、铁、钙等多种元素，常以单味或复方治疗淋证血尿及乳糜尿，急慢性肾小球肾炎，水肿，黄疸型和无黄疸型肝炎等。 近年来又发现白茅根具有降血压增强免疫力抗肿瘤等作用。而起这些作用的是白茅中有效的药效成分，如何更科学准确的得到白茅中这些药效成分是一个重要的发展方向。
目前提取白茅中有效成分的方法主要有溶剂提取法和水煎煮法，其中溶剂提取法毒性较大，污染大，容易残留有机溶剂，所用时间长并且提取率低；由于白茅有效成分在水中的溶解度有限，因此水煎煮法提取有效成分含量少，成分复杂，除了有效成分外，部分脂溶性物质和杂质也有较多的浸出，不利于精制，并且浸出液粘稠，过滤困难，后期处理时有效成分的分离难度较大。
发明内容
为解决上述问题，本发明的目的是提供一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法。
本发明为实现上述目的，通过以下技术方案实现：
一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过20~90目筛，得到白茅粉末；
②将去离子水和步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取30~90分钟，得到提取液；白茅粉末与去离子水的质量体积比为1g:15~25ml；提取压力为1~3MPa，提取温度为120~200℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速3000~5000转/分下离心5~15分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：1~2；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，步骤②中白茅粉末与去离子水的质量体积比为1g:20ml。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，提取温度为160℃。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，提取时间为60分钟。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，白茅样品为白茅的根部或白茅的叶子。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品还要经过以下步骤的处理：
⑤将步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品加入丙酮-石油醚溶剂中，添加的质量体积比为1g：5~10ml，搅拌得到悬浊液，将悬浊液过滤得到滤液和沉淀，将所得滤液减压蒸馏得到薏苡素；丙酮-石油醚溶剂中丙酮和石油醚的体积比为1：1；
⑥将步骤⑤所得的沉淀加入乙酸乙酯中溶解，得到混合液，将所得混合液装入硅胶柱中，采用体积比为1：2的甲苯-乙酸乙酯冲洗液淋洗硅胶柱，得到苜蓿素和香草酸；步骤⑤所得的沉淀和乙酸乙酯的质量体积比为1g：10~15ml。
进一步优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过60目筛，得到白茅粉末；
②将去离子水和步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取60分钟，得到提取液；白茅粉末与去离子水的质量体积比为1g:20ml；提取压力为2MPa，提取温度为160℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速4000转/分下离心10分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：1；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品；
⑤将步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品加入丙酮-石油醚溶剂中，添加的质量体积比为1g：8ml，搅拌得到悬浊液，将悬浊液过滤得到滤液和沉淀，将所得滤液减压蒸馏得到薏苡素；丙酮-石油醚溶剂中丙酮和石油醚的体积比为1：1；
⑥将步骤⑤所得的沉淀加入乙酸乙酯中溶解，得到混合液，将所得混合液装入硅胶柱中，采用体积比为1：2的甲苯-乙酸乙酯冲洗液淋洗硅胶柱，得到苜蓿素和香草酸；所述的步骤⑤所得的沉淀和乙酸乙酯的质量体积比为1g：12ml。
本发明相比现有技术具有以下优点：
本发明采用的提取溶剂亚临界水为典型的绿色溶剂，具有无毒无害，价格低廉，环境友好的优点，用本发明的亚临界水提取的白茅中有效成分苜蓿素、薏苡素和香草酸，杂质少，无毒，无污染，无残留，并且价格低廉，环境友好；本发明的提取方法采用亚临界水提取白茅中的有效成分，不使用任何的有机溶剂，一次提取出其中的三种有效成分，解决了现有技术中存在的不能使用同一种原料提取不同有效成分的不足，大幅度减少了白茅原料的浪费；本发明亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，得到的苜蓿素、薏苡素和香草酸成分含量高，提取率高，杂质少，和其它杂质成分容易分离；申请人在研究中发现白茅中的苜蓿素、薏苡素和香草酸的提取率和温度、压力、时间均有相关性，并且不是简单的正相关，因而将提取苜蓿素、薏苡素和香草酸的温度、压力和时间设置了最佳阶段，使得提取率最高。
本发明优选的制备方法，经过反复探索发现苜蓿素、薏苡素和香草酸在丙酮-石油醚溶剂中的溶解度差别较大，薏苡素可以很好的溶解在其中，而苜蓿素和香草酸在其中的溶解度很小，因而能将薏苡素分离出来，然后采用柱层析法将苜蓿素和香草酸分离完全，实现了三种物质的完全分离，给临床上用药提供了方便。
具体实施方式
本发明的目的是提供一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，通过以下技术方案实现：
一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过20~90目筛，得到白茅粉末；
②将去离子水和步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取30~90分钟，得到提取液；白茅粉末与去离子水的质量体积比为1g:15~25ml；提取压力为1~3MPa，提取温度为120~200℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速3000~5000转/分下离心5~15分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：1~2；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，步骤②中白茅粉末与去离子水的质量体积比为1g:20ml。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，提取温度为160℃。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，提取时间为60分钟。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，白茅样品为白茅的根部或白茅的叶子。
优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品还要经过以下步骤的处理：
⑤将步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品加入丙酮-石油醚溶剂中，添加的质量体积比为1g：5~10ml，搅拌得到悬浊液，将悬浊液过滤得到滤液和沉淀，将所得滤液减压蒸馏得到薏苡素；丙酮-石油醚溶剂中丙酮和石油醚的体积比为1：1；
⑥将步骤⑤所得的沉淀加入乙酸乙酯中溶解，得到混合液，将所得混合液装入硅胶柱中，采用体积比为1：2的甲苯-乙酸乙酯冲洗液淋洗硅胶柱，得到苜蓿素和香草酸；步骤⑤所得的沉淀和乙酸乙酯的质量体积比为1g：10~15ml。
进一步优选的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过60目筛，得到白茅粉末；
②将去离子水和步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取60分钟，得到提取液；白茅粉末与去离子水的质量体积比为1g:20ml；提取压力为2MPa，提取温度为160℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速4000转/分下离心10分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：1；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品；
⑤将步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品加入丙酮-石油醚溶剂中，添加的质量体积比为1g：8ml，搅拌得到悬浊液，将悬浊液过滤得到滤液和沉淀，将所得滤液减压蒸馏得到薏苡素；丙酮-石油醚溶剂中丙酮和石油醚的体积比为1：1；
⑥将步骤⑤所得的沉淀加入乙酸乙酯中溶解，得到混合液，将所得混合液装入硅胶柱中，采用体积比为1：2的甲苯-乙酸乙酯冲洗液淋洗硅胶柱，得到苜蓿素和香草酸；所述的步骤⑤所得的沉淀和乙酸乙酯的质量体积比为1g：12ml。
以下结合具体实施例来对本发明作进一步的描述。
实施例1
亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过20~90目筛，得到白茅粉末；
②将150kg去离子水和10kg步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取90分钟，得到提取液；提取压力为1MPa，提取温度为120℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速3000转/分下离心5分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：1；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品，计算提取率为0.11%。
实施例2
一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过90目筛，得到白茅粉末；
②将250kg去离子水和10kg步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取30分钟，得到提取液；提取压力为3MPa，提取温度为200℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速5000转/分下离心15分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：2；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品，计算提取率为0.11%。
实施例3
一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过40目筛，得到白茅粉末；
②将180kg去离子水和10kg步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取50分钟，得到提取液；提取压力为2.5MPa，提取温度为140℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速3500转/分下离心8分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：1.5；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品，计算提取率为0.12%。
实施例4
一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过60目筛，得到白茅粉末；
②将200kg去离子水和10kg步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取60分钟，得到提取液；提取压力为2MPa，提取温度为160℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速4000转/分下离心10分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：1；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品，计算提取率为0.12%；
⑤将步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品加入丙酮-石油醚溶剂中，添加的质量体积比为1g：8ml，搅拌得到悬浊液，将悬浊液过滤得到滤液和沉淀，将所得滤液减压蒸馏得到薏苡素；丙酮-石油醚溶剂中丙酮和石油醚的体积比为1：1；
⑥将步骤⑤所得的沉淀加入乙酸乙酯中溶解，得到混合液，将所得混合液装入硅胶柱中，采用体积比为1：2的甲苯-乙酸乙酯冲洗液淋洗硅胶柱，得到苜蓿素和香草酸；步骤⑤所得的沉淀和乙酸乙酯的质量体积比为1g：12ml。
对比例
用无水乙醇提取白茅中的苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法：将目数为90目的10g白茅样品，加入200ml无水乙醇中，超声5小时，超声反应后取出样品，过滤，将过滤后的上清液减压蒸馏，得到白茅中的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品，计算提取率为0.05%。

Claims (7)

1.一种亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过20~90目筛，得到白茅粉末；
②将去离子水和步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取30~90分钟，得到提取液；白茅粉末与去离子水的质量体积比为1g:15~25ml；提取压力为1~3MPa，提取温度为120~200℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速3000~5000转/分下离心5~15分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：1~2；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品。
2.根据权利要求1所述的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，其特征在于：步骤②中白茅粉末与去离子水的质量体积比为1g:20ml。
3.根据权利要求1所述的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，其特征在于：提取温度为160℃。
4.根据权利要求1所述的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，其特征在于：提取时间为60分钟。
5.根据权利要求1所述的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，其特征在于：白茅样品为白茅的根部或白茅的叶子。
6.根据权利要求1所述的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，其特征在于：步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品还要经过以下步骤的处理：
⑤将步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品加入丙酮-石油醚溶剂中，添加的质量体积比为1g：5~10ml，搅拌得到悬浊液，将悬浊液过滤得到滤液和沉淀，将所得滤液减压蒸馏得到薏苡素；丙酮-石油醚溶剂中丙酮和石油醚的体积比为1：1；
⑥将步骤⑤所得的沉淀加入乙酸乙酯中溶解，得到混合液，将所得混合液装入硅胶柱中，采用体积比为1：2的甲苯-乙酸乙酯冲洗液淋洗硅胶柱，得到苜蓿素和香草酸；步骤⑤所得的沉淀和乙酸乙酯的质量体积比为1g：10~15ml。
7.根据权利要求1所述的亚临界水同时提取白茅中苜蓿素、薏苡素和香草酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：
①将白茅样品粉碎，过60目筛，得到白茅粉末；
②将去离子水和步骤①所得的白茅粉末装入亚临界水提取装置中提取60分钟，得到提取液；白茅粉末与去离子水的质量体积比为1g:20ml；提取压力为2MPa，提取温度为160℃；
③将步骤②所得提取液中加入乙醇，得到混合液，将混合液放入离心机的离心管中，在转速4000转/分下离心10分钟，取下离心管，得到上清液和沉淀物；步骤②所得提取液和乙醇体积比为1：1；
④将步骤③所得上清液减压蒸馏得到苜蓿素、薏苡素和香草酸产品；
⑤将步骤④所得的苜蓿素、薏苡素和香草酸产品加入丙酮-石油醚溶剂中，添加的质量体积比为1g：8ml，搅拌得到悬浊液，将悬浊液过滤得到滤液和沉淀，将所得滤液减压蒸馏得到薏苡素；丙酮-石油醚溶剂中丙酮和石油醚的体积比为1：1；
⑥将步骤⑤所得的沉淀加入乙酸乙酯中溶解，得到混合液，将所得混合液装入硅胶柱中，采用体积比为1：2的甲苯-乙酸乙酯冲洗液淋洗硅胶柱，得到苜蓿素和香草酸；所述的步骤⑤所得的沉淀和乙酸乙酯的质量体积比为1g：12ml。
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