CN106214705A - 五谷虫制品用于制备治疗肺鳞癌的药品、保健品或食品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种肿瘤治疗领域,尤其涉及五谷虫制品用于制备治疗肺鳞癌的药品、保健品或食品中的应用。本发明的五谷虫制品为一种天然的产品,五谷虫制品有效成分是五谷虫全虫,现代医学研究证明:五谷虫中含蛋白质、脂肪、几丁聚糖、含抗菌肽以及18种氨基酸。本发明的五谷虫干粉中包括了五谷虫全虫的所有有效成分,五谷虫提取物主要是以脂肪酸和/或蛋白质、多肽、氨基酸等。经研究发现,五谷虫制品可以有效抑制肺鳞癌生长,且五谷虫制品不具有临床上常用的化疗药的耐药及其毒副作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种肿瘤治疗领域,尤其涉及五谷虫制品用于制备治疗肺鳞癌的药品、保健品或食品中的应用。
背景技术
五谷虫为丽蝇科(Calliphoridae)昆虫大头金蝇(ChrysomyiamegacephalaFab.)或其他近缘昆虫的干燥幼虫体,在古代医书中就有记载,用于治疗小儿疳积、脓包疮。
目前记载五谷虫具有以下药理作用:1.平喘作用,五谷虫所含的总氨基酸是平喘的有效成分;2.对肠平滑的作用,五谷虫乙醇提取物和五谷虫总氨基酸粗提取物对组胺所致离体家兔和豚鼠的回肠平滑肌痉挛均有明显的争痉作用;3.毒性,五谷虫的毒性很小。
中国发明专利申请(申请号CN200510060277.4申请日2005.08.04)一种具有抗肿瘤生物活性蝇蛆的养殖方法。养殖的蝇蛆经过国家新药筛选中心几年来多次检测有对肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、胃癌、等肿瘤细胞生长有很强的抑制率,其抗肿瘤生物活性都在75%~97%。
中国发明专利申请(申请号CN200710067951.0申请日2007.04.10)公开了一类抗肿瘤化合物,该组份从外源物质诱导的蝇蛆中提取、分离获得,具有抑制人原髓细胞白血病HL-60和人肺腺癌A549细胞增殖生长的作用。
中国发明专利申请(申请号CN201310223817.0申请日2013.06.06)公开了一种五谷虫抗肿瘤新用途,通过五谷虫抑制小鼠肿瘤重量的作用来表现,五谷虫能抑制肿瘤细胞的生长,对肿瘤细胞具有杀伤作用,能够在制备抗肿瘤药物或保健品中应用,具体公开了小鼠肉瘤S180的生长抑制。
肺鳞癌又称肺鳞状上皮细胞癌,包括梭形细胞癌,是最常见的类型,占原发性肺癌的40%~51%。肺鳞癌多见于老年男性,与吸烟有密切关系。肺鳞癌以中央型肺癌多见,并有胸管腔内生长的倾向,肺鳞癌早期常引发支气管狭窄,或阻塞性肺炎。肺鳞癌生长缓慢,转移晚,手术切除机会较多,5年生存率较高,肺鳞癌对放疗、化疗不如小细胞未分化癌敏感。
发明内容
本发明的第一个目的是提供五谷虫制品用于制备治疗肺鳞癌的药品中的应用。
本发明的第二个目的是提供五谷虫制品用于制备抑制肺鳞癌的保健品中的应用。
本发明的第二个目的是提供五谷虫制品用于制备抑制肺鳞癌的食品中的应用。
作为优选,上述的五谷虫制品为五谷虫干粉和\或五谷虫提取物以及五谷虫干粉和\或五谷虫提取物制备的制剂。
作为再优选,所述的制剂为胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、复方颗粒剂、保健酒、蛋白粉、口服液或冻干粉。
作为优选,上述的五谷虫提取物包括五谷虫全虫或五谷虫干粉的水提取物和有机溶剂提取物中的一种或多种。
作为再优选,所述的有机溶剂提取物中的有机溶剂包括乙醇、石油醚或己烷中的一种或多种。
本发明的五谷虫制品为一种天然的产品,五谷虫制品有效成分是五谷虫全虫,现代医学研究证明:五谷虫中含蛋白质、脂肪、几丁聚糖、含抗菌肽以及18种氨基酸。本发明的五谷虫干粉中包括了五谷虫全虫的所有有效成分,五谷虫提取物主要是以脂肪酸和/或蛋白质、多肽、氨基酸等。经研究发现,五谷虫制品可以有效抑制肺鳞癌生长,且五谷虫制品不具有临床上常用的化疗药的耐药及其毒副作用。
具体实施方式
实施例1
1、种蝇选择
动物学鉴定:丽蝇科Calliphoridae昆虫大头金蝇Chrysomyia megacephala(Fab.)。成蝇体长8~11毫米,绿蓝色、头部宽,顶部黑色;复眼大,深红色,额中条褐红色,颜和颊部橙黄色,触角及小颚须褐色。胸、腹部绿蓝色,带有紫色光泽。第1腹节及第2,3腹节后缘黑色。雌蝇的额部及中条在中部处向外侧略为凸出。雄蝇复眼上部2/3有大形的小眼面,下方1/3则为小形的小眼面,二者界面清晰。前胸气门黑色,中胸气门浅褐色;有气门。腋瓣带棕色,上有小毛。幼虫成熟时黄白色,前端尖细,后端截平。体节14,头部1节,胸部3节,腹部10节,但通常只见8节。体表由小棘形成的环。后气门略高出表面,较扁于上方,气门环不完全;后气门间距不大于后气门的横径;第1气门裂垂直形;前气门具有10—13个指状突。
2、种蝇采集
(1)种蝇箱的制作:可以选用木质、玻璃、陶瓷制作,圆形或长方形均可,顶部留一个直径25厘米的口,并制作一个用透气的网状盖,以防种蝇逃逸。
(2)种蝇饲料配置:奶粉+红糖,1:1混合,加15%的水调和,放置于种蝇箱内。
(3)打开种蝇箱网状盖,置于28--38摄氏度,湿度小于65%的环境内。
让外界的大头金蝇进入箱内觅食,对不符合要求的蝇种进行分拣丢弃,并盖上网状盖,使其滞留于种蝇箱内觅食、产卵。
3、养殖硬件与养殖饲料
(1)蝇房建造:按养殖规模,可以选用砖石,玻璃、塑料、钢架结构材料,离地面2米左右的墙体上间隔1.5--2米设置通风窗,为防止其他苍蝇或昆虫进入,宜设有纱窗与外界隔离,在养殖箱上方一米制成可活动的通风管道,便于废气收集,防止异味散发污染环境,废气统一通过臭氧除臭装置处理后排出。为防止蝇种进入废气收集管道,宜在各进气口设置纱窗隔断。
(2)养殖箱制作:可以选用木质、陶瓷、水泥材料,制成长方形箱体,底部设置止水密封装置,箱体上方留一个直径30--40厘米的圆孔,即可。各养殖箱下方设有污水收集通道,统一进入污水池处理后排放。
(3)保温:为符合养殖产品的标准化要求,可以附设加温、降温设施。在炎热时季可在蝇房顶面设置防嗮遮阳设施。
(4)养殖饲料:猪内脏、淡水鱼、牛蛙、奶粉、蜂蜜。
4、养殖工艺步骤
(1)蝇种:采集的蝇种移植到提前一天放有淡水鱼的种蝇箱内,培养2天,待其在箱内产卵。
(2)收集蝇卵:待种蝇在蝇种箱内产卵,即可将蝇卵收集,转移到加有饲料的蝇房养殖箱内进行孵化、养殖,饲料和蝇卵的比例为每5克蝇卵,加入15公斤的饲料。
(3)孵化养殖:蝇卵孵化后,即可在养殖箱内获得所需的饲料,一般需要72小时,虫体长到长度1--1.2厘米,直径2.5--3毫米时。
(4)活性催化:在养殖箱内加入用200毫升预配的5%蔗糖(w/w)水溶液和1%的超氧化物歧化酶(LA-SOD)(酶系活力大于300万单位/克)500毫升,2小时后取出活体五谷虫,用清水反复冲洗干净,即刻放入—38摄氏度以下的冰柜内速冻。
(5)清洗干燥:低温速冻两天后,取出,在清水中融化,再仔细清洗,沥干水分,使用真空低温干燥设备干燥到水分含量低于10%。
试验例1
一、实验目的
评价冷冻干燥的蝇蛆全虫粉在20摄氏度条件下保存两年后,对人肺鳞癌细胞SK-MES-1的体外抗肿瘤作用。
二、主要实验仪器与材料
1.主要仪器
可调波长式微孔板酶标仪。
2.主要试剂
五谷虫经干燥、水提处理过的整体化合物,本公司培养并冷藏贮存两年,(其浓度梯度为干燥品的等效剂量);DMEM高糖液体培养基,购自南京凯基生物公司;FBS,GIBCO(澳大利亚);MTT。
三、实验方法和步骤
实验方法:
MTT原理:MTT,一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下,生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formazan),甲臜的多少可以用酶标仪在490nm处进行测定。在通常情况下,甲臜生成量与活细胞数成正比,因此可根据光密度OD值推测出活细胞的数目。由于死细胞中不含琥珀酸脱氢酶,因此加入MTT不会有反应。
实验步骤:
五谷虫样品处理。以1:5的比例,蒸馏水10摄氏度浸泡24小时,过滤去渣,每毫升相当于原料样品0.2克,备用。
1:收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入150ul,铺板使待测细胞调密度1*105/孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。
2:5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入3个浓度梯度的药物(0.25mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml),每孔50ul,设3个复孔.同时零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜);5%CO2,37℃孵育48小时,倒置显微镜下观察。
3:每孔加入20ulMTT溶液(5mg/ml),继续培养4h;终止培养,小心吸去孔内培养液每孔加入200ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。
4:按下列公式计算被测化合物对癌症细胞生长的抑制率。
抑制率=(1-对照组OD值/给药组OD值)×100%
四、实验结果:
表:各被测化合物对SK-MES-1细胞生长的抑制率
本次MTT实验检测结果表明:除样品4对抑制人肺鳞癌细胞的生长无法判定外,其他样品抑制效果非常显著。
试验例2
姓名:汪**,性别:女,年龄:49岁,住址:湖北宜昌。
起始时间:
2015年9月28日,患者因发热4天入院,影像表现:平扫肺窗显示右肺上叶见一结节状,直径约11mm。手术日期:2015-10-08,术中发现:中肺有一质硬结节,表面胸膜皱缩,上下肺其余部位未见明显异常,术后诊断:右肺中叶鳞状细胞癌。
病案简介:
2015年11月,患者开始服用五谷虫。2016-01-28宜昌市第一人民医院-三峡大学人民医院胸部CT平扫:平扫肺窗显示两肺实质未见明显渗出或占位性病变。右上肺少许结节及条索灶。纵隔窗显示两肺门无增大,气管支气管通常,纵隔未见明显肿大淋巴结。2016-05-10宜昌市第一人民医院-三峡大学人民医院胸部CT平扫:平扫肺窗显示两肺实质未见明显渗出或占位性病变。纵隔窗显示两肺门无增大,气管支气管通常,纵隔未见明显重大淋巴结。心脏形态、大小正常。双侧胸腔未见积液。右侧胸膜增厚。(期间患者未接受其他任何治疗)
患者整体精神状态良好,病情治疗效果明显,病人生活质量显著提高。
试验例3
姓名:张**,性别:男,年龄:58岁,住址:福建宁德,诊断:左上肺鳞癌。
起始时间:
2014年7月28日,左上肺气管狭窄,伴软组织肿块,大小2.3*1.9cm,阻塞性不张,纵膈肺门转移,新生物周围可见粘性分泌物,IIIB期,不考虑手术,患者及家属要求自动出院。2015年3月10日复查,病灶增大,4.2*3.6cm,右肺门及纵膈淋巴结PDG摄入增高,少许炎症,11月3日复查,肿块大小为6.7*5.6cm,心包少许积液,呼吸不畅。
病案简介:
2015年10月28日,患者开始服用五谷虫。半个月后患者自觉精神状态好转,食欲增加,2016年3月1日复查,左上肺肿块缩小为5.2*4.7cm,心包积液液性阴影部分明显缩小,50%以上,病人还在继续使用中。
Claims (7)
1.五谷虫制品用于制备治疗肺鳞癌的药品中的应用。
2.五谷虫制品用于制备抑制肺鳞癌的保健品中的应用。
3.五谷虫制品 用于制备抑制肺鳞癌的食品中的应用。
4.根据权利要求1~3任意一项权利要求所述的应用,其特征在于五谷虫制品为五谷虫干粉和\或五谷虫提取物以及五谷虫干粉和\或五谷虫提取物制备的制剂。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于制剂为胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、复方颗粒剂、保健酒、蛋白粉、口服液或冻干粉。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于五谷虫提取物包括五谷虫全虫或五谷虫干粉的水提取物和有机溶剂提取物中的一种或多种。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于有机溶剂提取物中的有机溶剂包括乙醇、石油醚或己烷中的一种或多种。
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