CN106178111A

CN106178111A - 一种鼻科用温敏性填充凝胶制剂及其制备方法和在鼻腔鼻窦手术中的应用

Info

Publication number: CN106178111A
Application number: CN201610776563.9A
Authority: CN
Inventors: 张雯雯; 袁坤山; 刘连涛; 张旭东
Original assignee: SHANDONG SUCCESS PHARMACEUTICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: SHANDONG SUCCESS PHARMACEUTICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2016-08-31
Filing date: 2016-08-31
Publication date: 2016-12-07
Anticipated expiration: 2036-08-31
Also published as: CN106178111B

Abstract

本发明公开了一种鼻科用温敏性填充凝胶制剂及其制备方法和在鼻腔鼻窦手术中的应用，该制剂包括以下重量百分比的组分：壳聚糖3~20%、纤维素0.3‑3%、泊洛沙姆15~25%、碱性缓冲溶液52~81.7%。本发明制备的鼻科用填充凝胶制剂具有温敏性，在未进入人体时具有较低的粘度，这样能保证凝胶容易被推出，进入人体后，由于温度升高，凝胶粘度及粘附力增大，这样不易使凝胶从鼻腔中流出，能有效提高与创面作用时间，提高产品有效性。本发明制备方法简单，所得产品在鼻腔鼻窦手术中具有很好的填充作用，可以有效防止鼻腔粘膜表面的粘连，控制少量出血及预防感染辅助自然愈合，且7‑14天后可自然降解或被冲洗掉，使用方便。

Description

一种鼻科用温敏性填充凝胶制剂及其制备方法和在鼻腔鼻窦手术中的应用

技术领域

本发明涉及一种温敏性填充凝胶制剂，具体涉及一种鼻科用温敏性填充凝胶制剂及其制备方法，还涉及该温敏性填充凝胶制剂用于鼻腔鼻窦手术后发挥填充、支撑、防止鼻腔粘膜表面粘连作用的应用。

背景技术

慢性鼻炎是人类常见、高发的一种病症，据国家耳鼻喉专家统计，全国慢性鼻炎病发病率高达37％，临床上称之为不可治愈顽症，以前在医学预防治疗上不予以重视，加之没有相应的治疗方法和药物，使之在临床上治疗时仍沿用过去的一般抗炎治疗，不能取得良好的疗效。鼻炎绝非一般炎症，而是一种“非特异性组织性鼻炎”，用常规的消炎治疗不会取得良好的效果，加之慢性鼻炎的病症又和人的精神、情绪有很大关系，所以一味的消炎、抗菌，只会延误病情，对身体造成损害。

近年来，随着鼻窦内窥镜手术引入中国，功能性鼻内窥镜手术已经成为治疗慢性鼻窦炎最重要的方法，该方法具有创伤小、术中及术后痛苦小、手术彻底、操作精细等优点，但在手术后愈合的过程中仍不免伴有出血、粘连、疤痕形成等并发症，这些粘连、伤疤可能阻塞鼻窦，引发疾病。为了保护创面，防止粘连，通常采用的办法是通过填充材料对鼻腔进行填充，使用较广泛的鼻填充材料有明胶海绵、进口膨胀海绵等，该类鼻填充材料压迫止血效果好，但缺点是创面边角落海绵放置困难且术后需要取出，易造成对创面的二次伤害。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供了一种鼻科用温敏性填充凝胶制剂，该凝胶用于鼻腔中，具有填充、防粘连、止血、抑菌、保护创面的作用，且该凝胶具有温敏性，在未进入人体时具有较低的粘度，这样能保证凝胶在推出时阻力较小，容易经过输送导管等到达鼻腔所需部位，在进入人体后，由于温度升高，凝胶粘度及粘附力增大，这样能避免凝胶在使用过程中从鼻腔中流出，提高了产品的有效性。

本发明还提供了该鼻科用温敏性填充凝胶制剂的制备方法，其制备方法简单，便于操作实施。

本发明还提供了该鼻科用温敏性填充凝胶制剂在鼻腔和鼻窦手术中的应用，该温敏性鼻科用填充凝胶制剂用于鼻腔鼻窦手术中，具有填充、防粘连、止血、抑菌、保护创面的作用，且术后不需取出，避免了对鼻腔粘膜的二次伤害。

本发明具体技术方案如下：

本发明鼻科用温敏性填充凝胶制剂，包括以下重量百分比的组分：壳聚糖3～20％、纤维素0.3～3％、泊洛沙姆15～25％、碱性缓冲溶液52～81.7％。

优选的，上述鼻科用温敏性填充凝胶制剂包括以下重量百分比的组分：壳聚糖8-12％，纤维素1-1.8％，泊洛沙姆17-20.5％，碱性缓冲溶液65.7-74％；更优选的，包括以下重量百分比的组分：壳聚糖10％，纤维素1.5％，泊洛沙姆20％，碱性缓冲溶液68.5％。

上述凝胶制剂中，所述壳聚糖指的是水溶性壳聚糖及其衍生物，即水溶性壳聚糖及壳聚糖的水溶性衍生物，包括水溶性壳聚糖、壳聚糖季铵盐、壳聚糖盐酸盐、壳聚糖醋酸盐、壳聚糖乳酸盐、壳聚糖磷酸盐、壳聚糖柠檬酸盐和壳聚糖谷氨酸盐等中的一种或多种。

本发明凝胶制剂中，水溶性壳聚糖及其衍生物的分子量选择5×10³～2×10⁶Da，优选为3×10⁴～4×10⁵Da。

上述凝胶制剂中，所述纤维素指的是：纤维素及其衍生物，包括纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素等中的一种或多种。

上述凝胶制剂中，泊洛沙姆选择泊洛沙姆407、泊洛沙姆188，或者是泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的混合物。泊洛沙姆407和泊洛沙姆188是高分子反向热敏聚合物，具有温度敏感的特性，单独使用泊洛沙姆407或188时，其在凝胶制剂中的含量优选为15-19％，使用这两者的混合物时，其在凝胶制剂中的含量优选为20-25％。

本发明凝胶制剂中，所述的碱性缓冲溶液为磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐缓冲液包括以下有效组分：

组分A：磷酸二氢钾、磷酸二氢钠或磷酸；

组分B：磷酸氢二钾或磷酸氢二钠；

组分C：氯化钠、氯化钾和氢氧化钠的混合物。

进一步的，磷酸盐缓冲液中的各组分在鼻科用温敏性填充凝胶制剂中的重量百分含量如下：组分A的含量为0.01-2.0％，组分B的含量为0.01-2.0％，组分C中，氯化钠的含量为1-5％，氯化钾的含量为0.01-2.0％，氢氧化钠的含量为0.01-0.1％。

进一步的，所述磷酸盐缓冲液中还包括混合溶剂，所述混合溶剂由水和下述物质中的一种或多种混合而得：甘油、甘油磷酸酯二钠、丙二醇、聚乙二醇，混合溶剂优选为水、甘油和甘油磷酸酯二钠的混合物。所述聚乙二醇优选为聚乙二醇300-400。

本发明凝胶制剂中，所述的碱性缓冲体系的pH值为8-12。

本发明鼻科用温敏性填充凝胶制剂最终的pH值为4-10；其在25℃、剪切速率221s^-1条件下的粘度为0.5-5.0Pa·s，在37℃、剪切速率2s-¹条件下的粘度为100-400Pa·s；37℃条件下的生物粘附力为50-100N/cm²；抑菌率为50-100％。

本发明还提供了上述鼻科用温敏性填充凝胶制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)将碱性缓冲体系和壳聚糖混合均匀，然后在搅拌下向其中加入纤维素和泊洛沙姆，充分搅拌均匀；

(2)将混合物在室温下静置至充分溶胀，然后灭菌，得鼻科用温敏性填充凝胶制剂。

上述步骤(2)中，混合物在室温下静置72-100h。

本发明鼻科用温敏性填充凝胶制剂具有填充、防粘连、止血、抑菌、保护创面的作用，在鼻腔鼻窦手术后可以将该产品借助输送导管注入人体鼻腔中，因其优异的温敏特性，注入时易于推入，进入鼻腔后不易流出，能起到很好的填充作用，还可以有效防止鼻腔粘膜表面的粘连，控制少量出血及预防感染，保护创面同时辅助创面自然愈合，且7-14天后该产品可自然降解或被冲洗掉，使用方便，避免了被创面的二次伤害。因此，本发明对于该鼻科用温敏性填充凝胶制剂作为鼻填充材料的应用，或者在制备鼻填充材料中的应用也进行保护。

上述应用中，所述鼻科用温敏性填充凝胶制剂用作鼻填充材料时，优选采用一次性注射器进行包装，同时配套一次性输送导管。在使用时，将该凝胶制剂用输送导管送入鼻腔，进入鼻腔后，随着温度的变化，该凝胶制剂粘度和生物粘附力变大，起到了填充、防粘连、保护创面、抑菌的作用，使用方便。

本发明具有以下优点：

1、本发明凝胶制剂通过壳聚糖和纤维素溶液发生静电作用生成。纤维素是自然界最丰富的天然高分子，可用于制备生物可降解性、生物相容性以及可衍生化产品；壳聚糖是自然界中唯一带正电荷的碱性多糖，与纤维素分子结构相似，在C-2位置上取代纤维素的羟基具有氨基基团，具有促进伤口愈合和防腐抗菌等功能。本发明以壳聚糖为支撑骨架，构成无交联剂网状结构，可以赋予纤维素多孔材料抗菌、吸湿以及良好的生物相容性等性能。

2、本发明凝胶制剂中含有泊洛沙姆等温敏材料，具有温度敏感性，使之在未进入人体时具有较低的粘度，这样能保证凝胶在推出时阻力较小，容易经过输送导管等到达鼻腔所需部位，在进入人体后，由于温度升高，凝胶粘度及粘附力增大，这样能避免凝胶在使用过程中从鼻腔中流出，能有效提高与创面作用时间，提高了产品的有效性。

3、本发明凝胶制剂具有水溶性及生物可降解性，术后不用取出，可在7-14天内自然分解或可以经生理盐水冲洗掉，不会对创面造成二次伤害。

4、本发明制备方法简单，所得凝胶制剂通过输送导管由注射器注入到鼻腔、鼻窦术后部位，可以有效防止鼻腔粘膜表面的粘连，控制少量出血及预防感染、辅助自然愈合，具有很好的填充、防粘连、止血、抑菌、保护创面的作用，且7-14天后可自然降解或被冲洗掉，防止对创造的二次伤害，使用方便。

附图说明

图1生物粘附力测定方法实验装置，其中A：平衡支架，B：烧杯，C：玻璃安瓿瓶，D：凝胶制剂，E：鼻腔粘膜组织，F：可调支架。

具体实施方式

本发明提供了一种鼻科用温敏性填充凝胶制剂，该制剂组分包括：壳聚糖、纤维素、泊洛沙姆和碱性缓冲溶液。

本发明鼻科用温敏性填充凝胶制剂中，壳聚糖在填充凝胶制剂中的重量百分比含量为3-20％，例如3％、4％、6％、8％、10％、12％、15％、18％、20％，优选为8-12％。本发明壳聚糖指的是水溶性壳聚糖及其衍生物，可以是水溶性壳聚糖、壳聚糖季铵盐、壳聚糖盐酸盐、壳聚糖醋酸盐、壳聚糖乳酸盐、壳聚糖磷酸盐、壳聚糖柠檬酸盐、壳聚糖谷氨酸盐中的任意一种，也可以是它们的混合物，例如壳聚糖盐酸盐和壳聚糖醋酸盐的混合物，壳聚糖季铵盐和壳聚糖谷氨酸盐的混合物，壳聚糖磷酸盐和壳聚糖柠檬酸盐的混合物，水溶性壳聚糖和壳聚糖盐酸盐的混合物等。本发明对于壳聚糖的来源没有限制，可以从市场上购买得到。本发明壳聚糖的分子量可以选择5×10³～2×10⁶Da，例如5×10³Da、8×10³Da、1×10⁴Da、3×10⁴Da、3×10⁴Da、5×10⁴Da、7×10⁴Da、1×10⁵Da、2×10⁵Da、4×10⁵Da、6×10⁵Da、8×10⁵Da、1×10⁶Da、1.5×10⁶Da、2×10⁶Da，优选为3×10⁴～4×10⁵Da。

本发明鼻科用温敏性填充凝胶制剂中，纤维素在填充凝胶制剂中的重量百分比含量为0.3-3％，例如0.3％、0.8％、1.0％、1.5％、1.8％、2％、2.5％、2.8％、3％，优选为1-1.8％。本发明纤维素指的是纤维素及其衍生物，可以是纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素的任意一种，也可以是它们的混合物，例如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物，羟丙基甲基纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物，纤维素和羟丙基纤维素的混合物等。本发明对于纤维素及其衍生物的来源和分子量没有限制，可以从市场上购买得到。

本发明鼻科用温敏性填充凝胶制剂中，泊洛沙姆在填充凝胶制剂中的重量百分比含量为15～25％，例如15％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％，优选为17-20.5％。本发明泊洛沙姆可以是泊洛沙姆407或者是泊洛沙姆188，还可以是它们的混合物。当泊洛沙姆为泊洛沙姆407或者是泊洛沙姆188时，其在填充凝胶制剂中的重量百分比含量为15-19％，当为它们的混合物时，其在填充凝胶制剂中的重量百分比含量为20-25％。

本发明鼻科用温敏性填充凝胶制剂中，碱性缓冲溶液在填充凝胶制剂中的重量百分比含量为52～81.7％，例如52％、55％、58％、60.8％、65％、70％、76.5％、79％、81.7％，优选为65.7-74％。本发明碱性缓冲溶液是碱性磷酸盐缓冲液，由盐和溶剂组成，缓冲液的pH为8-12。具体的，磷酸盐缓冲液的盐分为三类：第一类为磷酸二氢钾、磷酸二氢钠或磷酸的任一种；第二类为磷酸氢二钾或磷酸氢二钠；第三类为氯化钠、氯化钾和氢氧化钠的混合物。第一类盐(磷酸二氢钾、磷酸二氢钠或磷酸的任一种)在凝胶制剂中的重量百分比含量为0.01-2.0％，例如0.01％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.08％、0.10％、0.12％、0.15％、0.16％、0.18％、0.20％、0.30％、0.50％、0.80％、1.0％、1.2％、1.5％、1.8％、2.0％，优选为0.04-0.2％。第二类盐(磷酸氢二钾或磷酸氢二钠)在凝胶制剂中的重量百分比含量为0.01-2.0％，例如0.01％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.08％、0.10％、0.12％、0.15％、0.16％、0.18％、0.20％、0.30％、0.40％、0.45％、0.50％、0.54％、0.60％、0.80％、1.0％、1.2％、1.5％、1.8％、2.0％，优选为0.1-0.6％。第三类盐在凝胶制剂中的重量百分比含量为：氯化钠1-5％、氯化钾的含量为0.01-2.0％、氢氧化钠0.01-0.1％，具体的，氯化钠在凝胶制剂中的重量百分含量可以为1％、2％、3％、4％、5％，优选1-4％；氯化钾在凝胶制剂中的重量百分含量可以为0.01％、0.03％、0.06％、0.08％、0.10％、0.12％、0.15％、0.20％、0.50％、0.80％、1.0％、1.5％、2.0％，优选0.01-0.2％；氢氧化钠在凝胶制剂中的重量百分含量可以为0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％。在实际操作中，可以从上述含量范围中选择合适的各盐的含量，以使磷酸盐缓冲液pH在8-12之间。

本发明中，磷酸盐缓冲液的溶剂为混合溶剂，具体为水和下述物质中的一种或多种混合而得：甘油、甘油磷酸酯二钠、丙二醇、聚乙二醇，所述聚乙二醇优选为聚乙二醇300-400。例如，混合溶剂可以是水和甘油的混合物，可以是水和丙二醇的混合物，可以是水和聚乙二醇的混合物，可以是水、甘油、甘油磷酸酯二钠的混合物等，优选为水、甘油和甘油磷酸酯二钠的混合物。当甘油、甘油磷酸酯二钠、丙二醇、聚乙二醇中的一种与水混合时，甘油、甘油磷酸酯二钠、丙二醇或聚乙二醇在凝胶制剂中的重量百分比含量可为0.8-2％，例如0.8％、1.0％、1.2％、1.5％、1.8％、2.0％。当甘油、甘油磷酸酯二钠、丙二醇、聚乙二醇中的多种与水混合时，它们中的任意一种在凝胶制剂中的重量百分比含量可为0.8-2％，例如当甘油、甘油磷酸酯二钠和水组成形成混合溶剂时，甘油在凝胶制剂中的重量百分比含量可以从0.8-2％范围内选取，甘油磷酸酯二钠在凝胶制剂中的重量百分比含量也可以从0.8-2％范围内选择。

本发明的鼻科用温敏性填充凝胶制剂，其最终pH值为4-10，优选为6-9；粘度在25℃、剪切速率221s^-1条件下为0.5-5.0Pa·s，优选为2.0-3.0Pa·s，在37℃、剪切速率2s^-1条件下为100-400Pa·s，优选为300-380Pa·s；37℃条件下的生物粘附力为50-100N/cm²，优选为60-90N/cm²；抑菌率为50-100％。本发明凝胶制剂具有温敏特性，粘度会随温度产生变化，能用于鼻腔鼻窦手术后，起到填充、止血、抑菌、护创等功效。

本发明鼻科用温敏性填充凝胶制剂的制备方法简单，包括以下步骤：

上述方法中，先按照配方配成碱性缓冲体系，然后再将壳聚糖和碱性缓冲体系混合均匀，然后再在搅拌下加入纤维素和泊洛沙姆，搅拌混合致它们充分分散溶解。

上述步骤(2)中，混合物在室温下静置72-100h，以充分溶胀。

上述步骤(2)中，混合物溶胀后可以采用工业上使用的任意方法进行灭菌，优选使用辐照灭菌，辐照方式可为高能电子束射线或⁶⁰Coγ-射线。辐照剂量可以为10K～70K，例如10K、30K、50K、70K，辐照时间可以为10～40min，例如10min、20min、30min、40min。

上述步骤(2)中，灭菌后的产品在常温下储藏。该凝胶制剂还可以采用单剂量一次性的注射器进行包装，同时配套一次性输送导管，以便于使用。

下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。下述实施例是在本发明技术方案的基础上进行的，进一步给出了本发明详细的实施方式和具体的操作过程，实施例将有助于理解本发明，但是本发明的保护范围不限于下述的实施例。实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法，各组分的用量如无特别说明均为重量百分比。

实施例1

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量为400KDa的壳聚糖盐酸盐3％，羟丙基纤维素0.3％，泊洛沙姆40715％，碱性缓冲体系81.7％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为8，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.04％、磷酸氢二钠0.45％、氯化钠2％、氯化钾0.06％、氢氧化钠0.01％、聚乙二醇4000.8％、水78.34％。

温敏性鼻科用填充凝胶制剂的制备方法为：

(1)按配方分别称取各所需原料；

(2)将碱性缓冲体系各组分按配比混合，配成碱性缓冲体系；

(3)将壳聚糖盐酸盐加入碱性缓冲体系中，搅拌均匀；

(4)将羟丙基纤维素和泊洛沙姆407在搅拌的条件下加入上述步骤(3)的混合物中中，并充分搅拌均匀；

(5)将上述步骤(4)的混合物在室温下静置72h，充分溶胀后进行辐照灭菌，辐照方式可以为高能电子束射线或60Coγ-射线，辐照剂量为20K，辐照时间为30min；

(6)灭菌后，即得温敏性鼻科用填充凝胶制剂，其pH为6.3。将该制剂用单剂量一次性的注射器进行包装，同时配套一次性输送导管，待用。

实施例2

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量为400KDa的壳聚糖醋酸盐6％，羟丙基纤维素0.6％、羧甲基纤维素0.2％，泊洛沙姆40719％，碱性缓冲体系74.2％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为9，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.06％、磷酸氢二钠0.54％、氯化钠3.0％、氯化钾0.10％、氢氧化钠0.05％、丙二醇1.5％、水68.95％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为7.5。

实施例3

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量400KDa的壳聚糖盐酸盐5％，壳聚糖醋酸盐3％，羧甲基纤维素1.0％，泊洛沙姆40717％，碱性缓冲体系74％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为10，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.10％、磷酸氢二钠0.12％、氯化钠4.0％、氯化钾0.15％、氢氧化钠0.1％、甘油1％、甘油磷酸酯二钠1.5％、水67.03％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为7.9。

实施例4

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量400KDa的壳聚糖盐酸盐10％，羟丙基甲基纤维素1.5％，泊洛沙姆40718％，泊洛沙姆1882％，碱性缓冲体系68.5％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为11，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.04％、磷酸氢二钠0.45％、氯化钠2％、氯化钾0.06％、氢氧化钠0.01％、甘油1％、水64.94％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为8.6。

实施例5

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量400KDa的壳聚糖乳酸盐12％、羟丙基甲基纤维素1.8％，泊洛沙姆40718.5％、泊洛沙姆1882.0％，碱性缓冲体系65.7％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为10，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.18％、磷酸氢二钠0.30％、氯化钠1.0％、氯化钾0.01％、氢氧化钠0.03％、甘油1.2％、甘油磷酸酯二钠1.8％、水61.18％。

实施例6

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量400KDa的壳聚糖盐酸盐13％、壳聚糖乳酸盐2％，甲基纤维素2％，泊洛沙姆40719.5％、泊洛沙姆1882.5％，碱性缓冲体系61％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为10，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.10％、磷酸氢二钠0.12％、氯化钠4.0％、氯化钾0.15％、氢氧化钠0.1％、甘油1％、甘油磷酸酯二钠1.5％、水54.03％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为7.6。

实施例7

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量400KDa的壳聚糖醋酸盐20％，羟丙基纤维素2％、羟乙基纤维素1％，泊洛沙姆40722％、泊洛沙姆1883％，碱性缓冲体系52％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为12，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.06％、磷酸氢二钠0.54％、氯化钠3.0％、氯化钾0.10％、氢氧化钠0.05％、甘油1％、水47.25％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为9.0。

实施例8

鼻科用温敏性填充凝胶制剂的配方和制备方法同实施例4，不同的是：壳聚糖盐酸盐的分子量为30KDa。

实施例9

鼻科用温敏性填充凝胶制剂的配方和制备方法同实施例4，不同的是：壳聚糖盐酸盐的分子量为5KDa。

实施例10

鼻科用温敏性填充凝胶制剂的配方和制备方法同实施例4，不同的是：壳聚糖盐酸盐的分子量为2000KDa。

比较例1

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量为400KDa的壳聚糖盐酸盐1％，羟丙基纤维素0.3％，泊洛沙姆40715％，碱性缓冲体系83.7％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为8，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.04％、磷酸氢二钠0.45％、氯化钠2％、氯化钾0.06％、氢氧化钠0.01％、聚乙二醇4000.8％、水80.34％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为6.2。

比较例2

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量为400KDa的壳聚糖盐酸盐3％，羟丙基纤维素0.1％，泊洛沙姆40715％，碱性缓冲体系81.9％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为8，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.04％、磷酸氢二钠0.45％、氯化钠2％、氯化钾0.06％、氢氧化钠0.01％、聚乙二醇4000.8％、水78.54％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为6.5。

比较例3

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量为400KDa的壳聚糖盐酸盐5％，壳聚糖醋酸盐3％，羧甲基纤维素1％，泊洛沙姆40714％，碱性缓冲体系77％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为10，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.10％、磷酸氢二钠0.12％、氯化钠4.0％、氯化钾0.15％、氢氧化钠0.1％、甘油1％、甘油磷酸酯二钠1.5％、水70.03％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为8.0。

比较例4

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量为400KDa的壳聚糖醋酸盐20％，羟丙基纤维素2％、羟乙基纤维素1％，泊洛沙姆40723％，泊洛沙姆1883％，碱性缓冲体系51％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为12，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.06％、磷酸氢二钠0.54％、氯化钠3.0％、氯化钾0.10％、氢氧化钠0.05％、甘油1％、水46.25％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为8.9。

比较例5

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量400KDa的壳聚糖醋酸盐20％，羟丙基纤维素3％、羟乙基纤维素2％，泊洛沙姆40722％、泊洛沙姆1883％，碱性缓冲体系50％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为12，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.06％、磷酸氢二钠0.54％、氯化钠3.0％、氯化钾0.10％、氢氧化钠0.05％、甘油1％、水45.25％。

比较例6

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量400KDa的壳聚糖乳酸盐12％、羟丙基甲基纤维素1.8％，泊洛沙姆40718.5％、泊洛沙姆1882.0％，碱性缓冲体系65.7％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为10，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.18％、磷酸氢二钠0.30％、氯化钠0％、氯化钾0％、氢氧化钠0.03％、甘油1.2％、甘油磷酸酯二钠1.8％、水62.19％。

比较例7

鼻科用温敏性填充凝胶制剂配方为：分子量为400KDa的壳聚糖盐酸盐25％，甲基纤维素2％，泊洛沙姆40719.5％、泊洛沙姆1882.5％，碱性缓冲体系51％。其中，碱性缓冲体系为磷酸盐缓冲液，pH为10，缓冲液成分及在凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钾0.10％、磷酸氢二钠0.12％、氯化钠4.0％、氯化钾0.15％、氢氧化钠0.1％、甘油1％、甘油磷酸酯二钠1.5％、水44.03％。

制备方法参照实施例1，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH为7.2。

对上述实施例和对比例的鼻科用温敏性填充凝胶制剂的粘度、生物粘附力及抑菌性进行测定，方法如下：

一、测试方法

1、粘度测定方法：采用博力飞牌(BROOKFIELD)R/S型流变仪的椎板系统进行测定，选用P50转子，调节锥体与平板间的距离为1mm，取鼻科用温敏性填充凝胶制剂样品2mL注入锥体和平板之间，分别在(25±0.2)℃、剪切速率为221s^-1条件下和在(37±0.2)℃、剪切速率为2s^-1条件下测量。

2、生物粘附力测定方法：实验装置如图1，取大耳新西兰白兔新鲜鼻腔粘膜组织两段，分别将它们紧固于玻璃安瓿两端E位置(粘膜面向外)，将玻璃安瓿瓶在37℃下保持10min后，将本发明的温敏性鼻科用填充凝胶制剂0.15g涂在两段鼻腔粘膜组织上再在37℃下保持10min，然后立即将一个安瓿瓶固定连接在平衡架上，另一个固定在可调支架上，调节支架F的高度，使左右保持平衡。在B处放入已称重的烧杯并匀速缓慢往烧杯内滴加自来水，直至使通过凝胶粘附的两段组织恰好分开，称量烧杯及水的总质量，每份样品重复三次，取其平均值。单位面积的剥离力即为生物粘附力，单位N/cm²。

3、抑菌性测定方法：根据《GB 15979－2002一次性使用卫生用品卫生标准附录C4溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能试验方法》进行测定。

①准备试验材料：PBS、营养琼脂、沙氏琼脂培养基等、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、试管、一次性平皿、培养箱等；

②试验菌与菌液制备：

试验菌：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌；

菌液制备：将事先准备好的菌悬液，用PBS稀释至要求浓度(要求浓度为：用100μl滴于对照样品上，回收菌数为1×10⁴～9×10⁴/片)。

③操作步骤：

取被试样品(5g)和对照样品(与试样同质材料，同等质量，但不含抗菌材料，且经灭菌处理)各4管(置于灭菌试管内)。

取上述菌悬液，分别在每个被试样品和对照样品上滴加100μl，均匀混合，开始计时，作用20min，投入含5ml PBS的试管内，充分混匀，作适当稀释，然后取其中2～3个稀释度，分别吸取0.5ml，置于两个平皿，用凉至40～45℃的营养琼脂培养基(细菌)或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动平皿，使其充分均匀，琼脂凝固后翻转平板，在35±2℃培养箱中培养48h(细菌)72h(酵母菌)，作活菌菌落计数。

④计算方法

试验重复3次，按下式计算抑菌率：

X₄＝(A-B)/A×100％

式中：X₄――抑菌率，％；

A――对照样品平均菌落数；

B――被试样品平均菌落数。

⑤评价标准

抑菌率≥50％～90％，产品有抑菌作用，抑菌率≥90％，产品有较强抑菌作用。

二、测试结果

1、各实施例和比较例温敏性鼻科用填充凝胶制剂的粘度和生物粘附力测定结果，如下表1所示。

表1各实施例以及比较例样品的粘度、生物粘附力情况

2、各实施例和比较例温敏性鼻科用填充凝胶制剂的抑菌效果，如下表2所示。

表2各实施例以及比较例的样品的抑菌率测试结果

本发明通过壳聚糖与纤维素之间的静电作用，构成无交联剂网状结构，生成凝胶状制剂。从表1看，在一定范围内增大纤维素重量百分比，例如在0.3-3％含量范围内可使形成的凝胶在25℃、37℃条件下的粘度及37℃条件下的生物粘附性变大，但是从比较例5可以看出，当纤维素重量百分比超出一定范围，形成的凝胶在25℃条件下粘度过大，且37℃条件下的生物粘附性反而减小，这会增加凝胶注射的难度和影响填充的效果，这是由于加入过多的纤维素使生成的凝胶制剂性状发生改变，导致凝胶变硬、变脆的结果。但如果纤维素的重量百分比过小(小于0.3％)，如比较例2所示，会使凝胶在25℃、37℃条件下的粘度及37℃条件下的生物粘附性变小，直接影响凝胶的填充效果。泊洛沙姆为高分子反向热敏聚合物，从表1看，实施例1-10中的泊洛沙姆含量在15～25％范围内，所得凝胶制剂具有较好的温敏性；比较例3中的泊洛沙姆407含量为14％，所得凝胶制剂在37℃下的粘度与25℃下的粘度相差不大，这是因为泊洛沙姆含量低于15％时凝胶制剂便不再具有温敏性，即粘度不会随着温度升高而增大。但从比较例4看，如果加入的泊洛沙姆浓度太高也不利，当浓度超过25％时，会使25℃下凝胶的粘度升高，最终导致凝胶在推出时阻力变大，不易推出。综合粘度和生物粘附力数据可以看出，实施例4的凝胶产品配方最佳，在该配方条件下，所得鼻科用温敏性填充凝胶制剂在25℃、剪切速率为221s^-1条件下粘度仅为2.7Pa·s，在37℃、剪切速率为2s^-1条件下凝胶粘度为372Pa·s，且生物黏附力为89N/cm²，既能顺利通过输送导管达到鼻腔所需部位，又能保证凝胶进入鼻腔后不易流出，提高作用时间，更好的保护鼻腔创面。

对上述实施例和对比例的样品的安全性进行测试，方法如下：

本发明的鼻科用温敏性填充凝胶制剂，又名“鼻填充材料”，由山东省医疗器械产品质量检验中心按GB/T16886.5～2003和GB/T16886.10～2005标准实施细胞毒性试验、迟发型超敏反应和皮内刺激试验三项安全评价试验。

安全性试验检测标准如表3所示，实际检测结果如表4所示，检测结果表明本发明鼻科用温敏性填充凝胶制剂无细胞毒性、无过敏性和无刺激性，具有较高的安全性。但从比较例1和比较例7中可以看出，由于壳聚糖盐酸盐为强阳离子抑菌剂，如果加入壳聚糖盐酸盐百分含量过低，会直接导致凝胶的抑菌效果变差，如果加入壳聚糖盐酸盐百分含量过高，超出一定范围，会导致该凝胶制剂生物相容性能变差，造成一定的细胞毒性及皮内刺激性。同时，磷酸盐缓冲液中含有的氯化钠及氯化钾可以调节壳聚糖盐酸盐在凝胶中的溶解度，凝胶中氯化钠及氯化钾浓度减小，会使壳聚糖盐酸盐在凝胶中的溶解度升高，当凝胶中氯化钠及氯化钾浓度过小，如比较例6所示氯化钠和氯化钾百分含量为0时，由于壳聚糖盐酸盐在凝胶中溶解度过高，也会导致一定的细胞毒性及皮内刺激性。

表3安全性试验检测标准

表4安全性试验结果

最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，但本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，在不脱离本发明技术方案的精神和范围的情况下，这些修改和等同替换也均应涵盖在本发明范围中。

Claims

1.一种鼻科用温敏性填充凝胶制剂，其特征是：包括以下重量百分比的组分：壳聚糖3~20%、纤维素0.3~3%、泊洛沙姆15~25%、碱性缓冲溶液52~81.7%；

优选的，包括以下重量百分比的组分：壳聚糖8-12%，纤维素1-1.8%，泊洛沙姆17-20.5%，碱性缓冲溶液65.7-74%；

更优选的，包括以下重量百分比的组分：壳聚糖10%，纤维素1.5%，泊洛沙姆20%，碱性缓冲溶液68.5%。

2.根据权利要求1所述的鼻科用温敏性填充凝胶制剂，其特征是：所述壳聚糖为水溶性壳聚糖及壳聚糖的水溶性衍生物，包括水溶性壳聚糖、壳聚糖季铵盐、壳聚糖盐酸盐、壳聚糖醋酸盐、壳聚糖乳酸盐、壳聚糖磷酸盐、壳聚糖柠檬酸盐和壳聚糖谷氨酸盐中的一种或多种；所述纤维素为纤维素及其衍生物，包括纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素中的一种或多种；所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407和/或泊洛沙姆188。

3.根据权利要求1或2所述的鼻科用温敏性填充凝胶制剂，其特征是：所述的水溶性壳聚糖及其衍生物的分子量为5×10³~2×10⁶Da，优选为3×10⁴~4×10⁵Da；所述碱性缓冲溶液的pH为8-12。

4.根据权利要求1或3所述的鼻科用温敏性填充凝胶制剂，其特征是：所述的碱性缓冲溶液为磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐缓冲液包括以下有效组分：组分A：磷酸二氢钾、磷酸二氢钠或磷酸；组分B：磷酸氢二钾或磷酸氢二钠；组分C：氯化钠、氯化钾和氢氧化钠的混合物；

优选的，各组分在鼻科用温敏性填充凝胶制剂中的重量百分含量如下：组分A的含量为0.01-2.0％，组分B的含量为0.01-2.0％，组分C中，氯化钠的含量为1-5%，氯化钾的含量为0.01-2.0%，氢氧化钠的含量为0.01-0.1%。

5.根据权利要求4所述的鼻科用温敏性填充凝胶制剂，其特征是：所述磷酸盐缓冲液中，还包括混合溶剂，所述混合溶剂由水和下述物质中的一种或多种混合而得：甘油、甘油磷酸酯二钠、丙二醇、聚乙二醇，混合溶剂优选为水、甘油和甘油磷酸酯二钠的混合物。

6.根据权利要求1-5所述的鼻科用温敏性填充凝胶制剂，其特征是：所述鼻科用温敏性填充凝胶制剂的pH值为4-10；粘度在25℃、剪切速率221s^-1条件下为0.5-5.0Pa·s，在37℃、剪切速率2s^-1条件下为100-400Pa·s；37℃条件下的生物粘附力为50-100N/cm²；抑菌率为50-100%。

7.一种权利要求1～6中任一项所述的鼻科用温敏性填充凝胶制剂的制备方法，其特征是包括以下步骤：

（1）将碱性缓冲体系和壳聚糖混合均匀，然后在搅拌下向其中加入纤维素和泊洛沙姆，充分搅拌均匀；

（2）将混合物在室温下静置至充分溶胀，然后灭菌，得鼻科用温敏性填充凝胶制剂。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征是：步骤（2）中，混合物在室温下静置72-100h。

9.权利要求1-7中任一项所述的鼻科用温敏性填充凝胶制剂作为鼻填充材料或者在制备鼻填充材料中的应用。

10.权利要求9所述的应用，其特征是：所述鼻科用温敏性填充凝胶制剂采用一次性注射器进行包装，配套一次性输送导管。