CN105147723A - 一种温敏凝胶制剂、其制备方法及其在碎石术中防止结石转移中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种温敏凝胶制剂、其制备方法及其在碎石术中防止结石转移中的应用，制剂包括以下重量百分比的组分：泊洛沙姆16.5~26.5%、壳聚糖盐酸盐1.0~3.0%、甘油磷酸盐0.5~2.5%、增效辅料0.01~1%、中性缓冲溶液67.0~81.99%。本发明制备方法简单，所得产品在碎石术中使用具有很好的防止结石转移的作用，从而减轻碎石术对周围组织造成的损伤风险，且清洗方便，具有很高的应用价值。

Description

一种温敏凝胶制剂、其制备方法及其在碎石术中防止结石转移中的应用

技术领域

本发明涉及一种温敏凝胶及其制备方法和应用，具体涉及该温敏凝胶在碎石术中防止结石转移的应用。

背景技术

尿石症是泌尿外科的常见病之一,在泌尿外科住院病人中占居首位。欧美国家的流行病学资料显示,5％～10％的人在其一生中至少发生1次泌尿系结石,年新发病率约为100～300/10万人,复发率50％～70％。我国泌尿系结石发病率为1％～5％,南方高达5％～10％，年新发病率约为150～200/10万人，其中25％的患者需住院治疗。输尿管结石是尿石症的一种，其占泌尿系结石的33％～54％，目前的治疗方法主要有药物治疗、碎石术以及外科手术三种，其中药物治疗一般适用于病人自体可以排除碎石的情况，外科手术一般用于较严重的、不能用前两种方法解决的情况，最普遍的方法为体内碎石术。体内碎石术是通过激光或其他能量传递资源将输尿管结石碎成小的片段，然而病人采用体内碎石术时，结石或结石碎片容易向上移动到达肾脏，导致输尿管镜碎石术手术延长，增加手术风险，也增加了所有结石不能有效移除的几率，甚至还需要其他方式的介入对结石进行固定。

常用的防止结石移动的方式有网篮，网篮为不锈钢材质，体积压缩受到限制，在使用时，要通过结石和输尿管的间隙，通过后，网篮改为舒展状态，网篮内部有比较大的间隙，所以网篮会导致尿道的外伤，干扰碎石机，同时也会影响小的结石片段的位移，使用受到限制。

目前，有人公开了一种采用凝胶防止碎石后退的方法，例如中国专利文献CN102159143A公开了一种碎石术期间预防结石和结石碎片后退的方法，该方法是将第一种组合物和第二种组合物按顺序注射入结石远端的管腔内，这两者组合物在管腔内结合形成凝胶，相当于一种栓塞，防止了碎石的移动。其中，第一种组合物为阴离子、阳离子或非离子性交联聚合物，包括：胶原、明胶、弹性蛋白、白蛋白、鱼精蛋白、纤维蛋白、纤维蛋白原、角质素、颤蛋白、酪蛋白、透明质酸、壳聚糖、藻酸盐、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素、藻酸、吉兰糖胶钠、吉兰糖胶钾、羧甲基纤维素、聚乙烯醇等，第二种组合物为交联剂，包括：磷酸盐、柠檬酸盐、硼酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、己二酸盐、草酸盐、钙、镁、钡、锶或其组合。该凝胶制剂通过加入到输尿管，可以与很多种体内碎石术(例如激光和机械碎石术)兼容，有效的阻止了结石和结石片段的位移，使手术时间和复杂度降低，但经研究发现，该在管腔中形成的凝胶不具有可逆性，碎石术后清洗较为困难；该方案是将两种组合物依次注入管腔内并在管腔内凝胶，两次注射操作复杂，形成凝胶也需要一定的时间，且两种组合物在管腔内很难混合均匀，其形成的凝胶强度、粘聚性和粘度均较低，直接妨碍了其产品使用的方便性及有效性。因此，需要对凝胶进行进一步的改进才能更好的应用。

发明内容

针对背景技术中指出的不足，本发明提供了一种温敏凝胶制剂，该温敏凝胶制剂对温度敏感，根据温度变化可以实现液态和凝胶态的转化，易于清洗，此外该凝胶制剂的强度、粘聚性、粘度性能也较好。

本发明还提供了该温敏凝胶制剂的制备方法，其制备方法简单，便于操作实施。

本发明还提供了该温敏凝胶制剂在碎石术中防止结石转移中的应用，该温敏凝胶制剂用于碎石术中，可以防止碎石位移，易于清洗，与网篮等传统方式相比还能够明显减轻组织周围的损伤风险。

本发明还提供了一种碎石防转移支架，该支架的主要成分为本发明温敏凝胶制剂，其使用方便，便于清洗，安全性高，具有很好的推广价值。

本发明是通过以下方案实现的：

一种温敏凝胶制剂，包括以下重量百分比的组分：泊洛沙姆16.5～26.5％、壳聚糖盐酸盐1.0～3.0％、甘油磷酸盐0.5～2.5％、增效辅料0.01～1％、中性缓冲溶液67.0～81.99％。

上述温敏凝胶制剂中，所述泊洛沙姆可以为泊洛沙姆407、泊洛沙姆338、泊洛沙姆237和泊洛沙姆188中的任意一种，也可以是泊洛沙姆407、泊洛沙姆338、泊洛沙姆237和泊洛沙姆188中的任意两种或两种以上的组合。

上述温敏凝胶制剂中，所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407、泊洛沙姆338、泊洛沙姆237或泊洛沙姆188时，泊洛沙姆在凝胶制剂中的含量最好为16.5～19.0wt％；所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407、泊洛沙姆338、泊洛沙姆237和泊洛沙姆188中的两种或两种以上的组合时，泊洛沙姆在凝胶制剂中的含量最好为19.1～26.5wt％。

上述温敏凝胶制剂中，所述壳聚糖盐酸盐的分子量为5×10³～2×10⁶Da。分子量过低会使制剂的粘度性能降低，分子量过高，会使制剂溶解性降低。

上述温敏凝胶制剂中，所述甘油磷酸盐为甘油磷酸钠、甘油磷酸钙和甘油磷酸镁中的一种或多种。

上述温敏凝胶制剂中，所述增效辅料为海藻酸钠、海藻酸钾、卡波姆、透明质酸钠、泊洛沙胺1307、泊洛沙胺1107、羧甲基壳聚糖、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、淀粉、琼脂、明胶、葡聚糖、聚乙烯醇和聚丙烯酰胺中的一种或多种。该增效辅料的作用是：增加凝胶制剂的强度、粘聚性、粘度性能。增效辅料的成分中，其分子量对制剂性能影响不大，本领域技术人员可以根据需要进行选择和调整。

上述温敏凝胶制剂中，所述增效辅料优选为羟丙基纤维素和羧甲基壳聚糖的混合物，进一步的，当羟丙基纤维素和羧甲基壳聚糖的质量比为4:1时效果最好。

进一步的，上述温敏凝胶制剂中，各组分采用以下用量时效果更好：泊洛沙姆40719.0wt％、泊洛沙姆1882.5wt％、壳聚糖盐酸盐2.0wt％、甘油磷酸盐1.5wt％、增效辅料0.1wt％、中性缓冲溶液74.9wt％。

上述温敏凝胶制剂中，所述中性缓冲溶液为磷酸盐缓冲液。

上述温敏凝胶制剂中，所述中性缓冲溶液的pH值为6-8。

上述温敏凝胶制剂中，所述磷酸盐缓冲液为磷酸二氢盐和磷酸氢二盐组合配成的水溶液。

所述磷酸二氢盐为磷酸二氢钠或磷酸二氢钾，所述磷酸氢二盐为磷酸氢二钠或磷酸氢二钾。在本发明的优选实施例中，磷酸二氢盐在温敏凝胶制剂中的含量为0.0025-0.02wt％，磷酸氢二盐在温敏凝胶制剂中的含量为0.028-0.22wt％，在此优选含量内，温敏凝胶制剂的胶凝温度符合要求。

本发明还提供了该温敏凝胶制剂的制备方法，其特征是包括以下步骤：

(1)取中性缓冲溶液，控制其温度为2-4℃，然后在此温度、搅拌的条件下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料；

(2)增效辅料加入完毕后，将步骤(1)的混合物在2～4℃下静置，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物过微滤膜、分装、灭菌，得温敏凝胶制剂。

上述制备方法中，所得温敏凝胶制剂在常温下储藏。

上述制备方法中，优选将中性缓冲溶液先在2～4℃下放置3～12小时，然后再加入其他成分，以加快其他成分的溶解速度。

上述制备方法中，在搅拌条件下加入泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料，以使它们充分分散溶解。搅拌可以通过机械搅拌方式实现，在本发明的优选实施方式中，搅拌速度大于200rpm。

上述制备方法中，所述泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料缓慢加入中性缓冲溶液中，以使各成分充分分散，不凝结成块。缓慢加入表示各成分可以按照一定的速度加入中性缓冲溶液中，每种成分的加入速度控制在10g/min较好。

上述制备方法中，步骤(2)中，静置24～72h，优选72h。

上述制备方法中，步骤(2)中，混合物优选在4℃下静置。

上述制备方法中，混合物过微滤膜的目的是除去杂质，在本发明的优选实施例中，所用微滤膜材质为尼龙膜。

上述制备方法中，微滤膜的孔径优选为5μm，混合物在0.2～0.3MPa的压力下过膜。

上述制备方法中，步骤(2)中，过膜后的混合物可采用预灌封注射器、输送导管或注射助推器等器具进行分装，以便于后期的注射使用。

上述制备方法中，步骤(2)中，可以采用现有任意常规的灭菌方式进行灭菌，优选采用辐照方式进行灭菌。进行辐照灭菌时，辐照方式可为高能电子束射线或⁶⁰Coγ射线，辐照剂量为15K～25K，辐照时间为15～40min。

本发明温敏凝胶制剂包括泊洛沙姆、壳聚糖盐酸盐、甘油磷酸盐、增效辅料和中性缓冲溶液，其中中性缓冲溶液相当于溶剂，泊洛沙姆、壳聚糖盐酸盐、甘油磷酸盐、增效辅料相当于溶质，是形成凝胶、控制凝胶性能的有效成分，也可称为温敏凝胶基质。泊洛沙姆、壳聚糖盐酸盐等是能被水溶胀但不溶于水的具有三维网络结构的高分子聚合物，在水中溶胀可变为凝胶，并且泊洛沙姆还具有反向热敏胶凝性质，在低温时为可流动的液体状，在胶凝温度下从液态转变为不流动的固体凝胶状，温度再次降低后可再转变成可流动的液体状。本发明通过对各种成分的选择及其用量的搭配，使形成的温敏凝胶制剂在室温下呈液体状态，注入人体后，在人体温度(37℃)影响下，人体温度达到温敏凝胶制剂的胶凝温度，形成固态状凝胶，起到防止结石转移的目的，当使用结束时，通过冰水冲洗，使温敏胶凝温度降至胶凝温度以下，重新转化成液体状态，可以流出体外，使用方便。

本发明温敏凝胶制剂对温度敏感，在温度低于胶凝温度时温敏凝胶制剂为液态，在温度高于胶凝温度时温敏凝胶制剂发生胶凝，由液态变为不流动的固态状凝胶，温敏凝胶制剂主要性能指标如下：

本发明还提供了一种该温敏凝胶制剂在制备碎石术中防止结石转移的产品中的应用。

进一步的，该温敏凝胶制剂主要用于制备碎石术中防止泌尿系结石转移的产品，所述泌尿系结石可以为输尿管结石或尿道结石，优选用于制备碎石术中防止输尿管结石转移的产品。本发明温敏凝胶制剂的pH值为6～8，满足人体输尿管和尿道pH值环境，当其作为碎石防转移支架用于输尿管或尿道结石碎石术时，满足人体输尿管或尿道pH值环境，对输尿管或尿道无损伤。

本发明还提供了一种碎石术中防止结石转移的产品——碎石防转移支架，该产品的主要成分为该温敏凝胶制剂。

上述碎石防转移支架在用于人体输尿管结石碎石术时，将液体状态的产品注射入结石的近肾端，产品进入输尿管后，在人体温度(37℃)影响下，可以根据输尿管的形状0.5～3分钟后变为凝胶(固态)，适用性好，在碎石术中能够防止结石转移，从而减轻碎石术对周围组织造成的损伤的风险。手术结束后，通入冰水对凝胶进行冲洗，使其温度降至胶凝温度以下，重新变为液体状态，顺着输尿管流出体外，后处理方便。当用于人体尿道结石碎石术时，也采用相似的方法。本产品在输尿管或尿道结石碎石手术中使用，可以防止碎石上移，能够明显减轻组织周围的损伤风险。

本发明提供了一种温敏凝胶制剂，该制剂将具有反向热敏特性的泊洛沙姆与壳聚糖盐酸盐、甘油磷酸盐、增效辅料进行组合，不仅使制剂具有温敏性，并且粘附性、强度等性能也得到了提高。通过它们的用量搭配避免了单纯使用泊洛沙存在的粘聚性、粘度和强度差的缺点，使该制剂具有温敏性的同时具有更好的粘附性、粘度和凝胶强度，克服了现有凝胶制剂不具有温敏性、清洗较为困难，粘附性差、粘度较差、强度低的缺陷。此外，该凝胶制剂选用中性磷酸盐缓冲体系，在使用时可以避免对注入部位的刺激。

本发明制剂制备方法简单，便于工业化生产。所得制剂在碎石术中使用具有很好的防止结石转移的作用，例如可以用于人体输尿管或尿道结石碎石术，从而减轻碎石术对周围组织造成的损伤风险。本发明制剂使用方便，可以以液体状态一次注入体内，并在体内形成粘附性好、粘度大、强度高的凝胶，无需二次注射，使用完后清洗较为简单，只需冷的生理盐水冲洗即可变为液态。此外，该凝胶制剂无细胞毒性、无过敏性和无刺激性，使用安全。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。下述实施例是在本发明技术方案的基础上进行的，进一步给出了本发明详细的实施方式和具体的操作过程，实施例将有助于理解本发明，但是本发明的保护范围不限于下述的实施例。实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法，各组分的用量如无特别说明均为重量百分比。

实施例1

温敏凝胶制剂的配方为：泊洛沙姆40719.0wt％，泊洛沙姆1882.5wt％，壳聚糖盐酸盐2.0wt％，甘油磷酸钠1.5wt％，羟丙基纤维素0.08wt％，羧甲基壳聚糖0.02wt％，中性缓冲溶液74.9wt％；所述中性缓冲溶液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和水组成，这三种成分在温敏凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钠0.02wt％、磷酸氢二钠0.22wt％、水74.66wt％；其中，壳聚糖盐酸盐的分子量为5×10⁵Da。

温敏凝胶制剂的制备方法如下：

将中性缓冲溶液置于2～4℃下放置7小时，然后在剧烈搅拌(搅拌速度大于200rpm，下同)下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入(加入速度在10g/min左右，下同)泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料，加入时保证中性缓冲溶液的温度为2～4℃，加完增效辅料后将所得混合物在3℃下放置72小时，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物在0.2～0.3MPa的压力下过5微米的尼龙膜，然后用预灌封注射器、输送导管或助推器进行包装，每支5ml，最后进行辐照灭菌，辐照方式为电子束灭菌，辐照剂量为15K，灭菌后，在常温条件下进行储存，即得温敏凝胶制剂，其pH为7.2。

实施例2

温敏凝胶制剂的配方为：泊洛沙姆40716.5wt％，壳聚糖盐酸盐1.0wt％，甘油磷酸钠0.5wt％，海藻酸钠0.008wt％，卡波姆0.001wt％，透明质酸钠0.001wt％，中性缓冲溶液81.99wt％；所述中性缓冲溶液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和水组成，这三种成分在温敏凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钠0.0025wt％、磷酸氢二钠0.028wt％、水81.9595wt％；其中，壳聚糖盐酸盐的分子量为2×10⁶Da。

温敏凝胶制剂的制备方法如下：

将中性缓冲溶液置于2～4℃下放置3小时，然后在剧烈搅拌下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料，加入时保证中性缓冲溶液的温度为2～4℃，加完增效辅料后将所得混合物在4℃下放置24小时，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物在0.2～0.3MPa的压力下过5微米的尼龙膜，然后用预灌封注射器、输送导管或助推器进行包装，每支5ml，最后进行辐照灭菌，辐照方式为电子束灭菌，辐照剂量为25K，辐照时间为15-40min，灭菌后，在常温条件下进行储存，即得温敏凝胶制剂，其pH为7.0。

实施例3

温敏凝胶制剂的配方为：泊洛沙姆40719.0wt％，壳聚糖盐酸盐3.0wt％，甘油磷酸镁2.5wt％，泊洛沙胺13070.1wt％，中性缓冲溶液75.4wt％；所述中性缓冲溶液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和水组成，这三种成分在温敏凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钠0.01wt％、磷酸氢二钠0.11wt％、水75.28wt％；其中，壳聚糖盐酸盐的分子量为5×10⁴Da。

温敏凝胶制剂的制备方法如下：

将中性缓冲溶液置于2～4℃下放置3小时，然后在剧烈搅拌下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料，加入时保证中性缓冲溶液的温度为2～4℃，加完增效辅料后将所得混合物在4℃下放置24小时，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物在0.2～0.3MPa的压力下过5微米的尼龙膜，然后用预灌封注射器、输送导管或助推器进行包装，每支5ml，最后进行辐照灭菌，辐照方式为电子束灭菌，辐照剂量为20K，辐照时间为15-40min，灭菌后，在常温条件下进行储存，即得温敏凝胶制剂，其pH为7.2。

实施例4

温敏凝胶制剂的配方为：泊洛沙姆40719.0wt％，泊洛沙姆2370.5wt％，壳聚糖盐酸盐1.0wt％，甘油磷酸钠0.5wt％，淀粉0.2wt％，聚乙烯醇0.3wt％，中性缓冲溶液78.5wt％；所述中性缓冲溶液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和水组成，这三种成分在温敏凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钠0.02wt％、磷酸氢二钠0.22wt％、水78.26wt％；其中，壳聚糖盐酸盐的分子量为5×10³Da。

温敏凝胶制剂的制备方法如下：

将中性缓冲溶液置于2～4℃下放置12小时，然后在剧烈搅拌下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料，加入时保证中性缓冲溶液的温度为2～4℃，加完增效辅料后将所得混合物在2℃下放置72小时，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物在0.2～0.3MPa的压力下过5微米的尼龙膜，然后用预灌封注射器、输送导管或助推器进行包装，每支5ml，最后进行辐照灭菌，辐照方式为电子束灭菌，辐照剂量为25K，辐照时间为15-40min，灭菌后，在常温条件下进行储存，即得温敏凝胶制剂，其pH为6.4。

实施例5

温敏凝胶制剂的配方为：泊洛沙姆33823.0wt％，泊洛沙姆2373.5wt％，壳聚糖盐酸盐3.0wt％，甘油磷酸钠2.5wt％，葡聚糖0.6wt％，聚丙烯酰胺0.4wt％，中性缓冲溶液67.0wt％；所述中性缓冲溶液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和水组成，这三种成分在温敏凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钠0.02wt％、磷酸氢二钠0.22wt％、水66.76wt％；其中，壳聚糖盐酸盐的分子量为5×10⁵Da。

温敏凝胶制剂的制备方法如下：

将中性缓冲溶液置于2～4℃下放置12小时，然后在剧烈搅拌下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料，加入时保证中性缓冲溶液的温度为2～4℃，加完增效辅料后将所得混合物在2℃下放置72小时，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物在0.2～0.3MPa的压力下过5微米的尼龙膜，然后用预灌封注射器、输送导管或助推器进行包装，每支5ml，最后进行辐照灭菌，辐照方式为电子束灭菌，辐照剂量为15K，辐照时间为15-40min，灭菌后，在常温条件下进行储存，即得温敏凝胶制剂，其pH为7.6。

实施例6

温敏凝胶制剂的配方为：泊洛沙姆33819.0wt％，泊洛沙姆2372.5wt％，壳聚糖盐酸盐2.0wt％，甘油磷酸钠1.5wt％，琼脂0.08wt％，羧甲基纤维素钠0.02wt％，中性缓冲溶液74.9wt％；所述中性缓冲溶液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和水组成，这三种成分在温敏凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钠0.02wt％、磷酸氢二钠0.22wt％、水74.66wt％；其中，壳聚糖盐酸盐的分子量为1×10⁶Da。

温敏凝胶制剂的制备方法如下：

将中性缓冲溶液置于2～4℃下放置7小时，然后在剧烈搅拌下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料，加入时保证中性缓冲溶液的温度为2～4℃，加完增效辅料后将所得混合物在3℃下放置72小时，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物在0.2～0.3MPa的压力下过5微米的尼龙膜，然后用预灌封注射器、输送导管或助推器进行包装，每支5ml，最后进行辐照灭菌，辐照方式为电子束灭菌，辐照剂量为15K，辐照时间为15-40min，灭菌后，在常温条件下进行储存，即得温敏凝胶制剂，其pH为7.3。

比较例1

温敏凝胶制剂的配方为(wt％)：泊洛沙姆40719.0％，泊洛沙姆1882.5％，壳聚糖盐酸盐2.0％，甘油磷酸钠1.5％，中性缓冲溶液75.0％；所述中性缓冲溶液由磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和水组成，这三种成分在温敏凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钠0.02％，磷酸氢二钠0.22％，水74.76％，其中，壳聚糖盐酸盐的分子量为5×10⁵Da。

制备方法为：

将中性缓冲溶液置于2～4℃下放置7小时，然后在剧烈搅拌下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入泊洛沙姆、甘油磷酸盐和壳聚糖盐酸盐，加入时保证中性缓冲溶液的温度为2～4℃，加完后将所得混合物在3℃下放置72小时，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物在0.2～0.3MPa的压力下过5微米的尼龙膜，用预灌封注射器进行包装，每支5ml，最后进行辐照灭菌，辐照方式为电子束灭菌，辐照剂量为15K，辐照时间为15-40min，灭菌后，在常温条件下进行储存，即得温敏凝胶制剂，其pH为7.1。

比较例2

温敏凝胶制剂的配方为(wt％)：泊洛沙姆40719％，泊洛沙姆1882.5％，羟丙基纤维素0.08％，羧甲基壳聚糖0.02％，中性缓冲溶液78.4％，所述中性缓冲溶液由磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和水组成，这三种成分在温敏凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钠0.02％，磷酸氢二钠0.22％，水78.16％。

制备方法为：将中性缓冲溶液置于2～4℃下放置7小时，然后在剧烈搅拌下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入泊洛沙姆、羟丙基纤维素和羧甲基壳聚糖，加入时保证中性缓冲溶液的温度为2～4℃，加完后将所得混合物在3℃下放置72小时，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物在0.2～0.3MPa的压力下过5微米的尼龙膜，用预灌封注射器进行包装，每支5ml，最后进行辐照灭菌，辐照方式为电子束灭菌，辐照剂量为15K，辐照时间为15-40min，灭菌后，在常温条件下进行储存，即得温敏凝胶制剂，其pH为7.0。

比较例3

温敏凝胶制剂的配方为：泊洛沙姆40729.0wt％，泊洛沙姆1881.5wt％，壳聚糖盐酸盐5.0wt％，甘油磷酸钠5.0wt％，羟丙基纤维素2.0wt％，羧甲基壳聚糖1.0wt％，中性缓冲溶液56.5wt％；所述中性缓冲溶液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和水组成，这三种成分在温敏凝胶制剂中的含量为：磷酸二氢钠0.20wt％、磷酸氢二钠2.20wt％、水54.10wt％；其中，壳聚糖盐酸盐的分子量为3×10⁶Da。

温敏凝胶制剂的制备方法如下：

将中性缓冲溶液置于2～4℃下放置7小时，然后在剧烈搅拌(搅拌速度大于200rpm，下同)下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入(加入速度在10g/min左右，下同)泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料，加入时保证中性缓冲溶液的温度为2～4℃，加完增效辅料后将所得混合物在3℃下放置72小时，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物在0.2～0.3MPa的压力下过5微米的尼龙膜，然后用预灌封注射器、输送导管或助推器进行包装，每支5ml，最后进行辐照灭菌，辐照方式为电子束灭菌，辐照剂量为15K，辐照时间为15-40min，灭菌后，在常温条件下进行储存，即得温敏凝胶制剂，其pH为7.4。

为了对本发明温敏凝胶制剂进行测试，进行以下性能测试实验。

1、胶凝温度测定：取温敏凝胶制剂15mL，置于25mL小烧杯中，将温度计插入其中，并使其水银球始终浸在样品中，将烧杯置于恒温水浴锅中，水浴高度大于烧杯中样品的高度，水浴温度从20℃开始以1℃/min的速度逐渐上升，以恒定的速率缓慢搅拌样品，观察样品状态的变化，当样品呈现固态，且无流动时立即停止搅拌，此时的温度即为胶凝温度。

2、粘度测定：采用博力飞牌(BROOKFIELD)R/S型流变仪的椎板系统进行测定，选用P50转子，调节锥体与平板间的距离为1mm，取温敏凝胶样品2mL注入锥体和平板之间，通过温控装置控制温敏凝胶样品的温度，分别在20℃、剪切速率为100s^～1和37℃、剪切速率为2s^～1条件下测量。

3、凝胶强度和粘聚性测定：采用博力飞牌(BROOKFIELD)CT3型质构仪的Bloom系统进行测定，选用TA10探头，取温敏凝胶样品20mL置于25mL烧杯中，放入37℃烘箱中保温1h，让温敏凝胶充分胶凝。启动质构仪，选择模式为压缩，设定测试速度：0.5mm/s；返回速度：0.5mm/s；测试距离：4mm；感应力：Auto～4g。将保温好的温敏凝胶样品迅速放在工作台上进行测试。

4、凝胶制剂有效性研究：采用体重大小相似的成年家兔，用开腹法，根据成年家兔输尿管内径打入相同长度的样品，记录胶凝时间，通过激光法进行模拟碎石术记录凝胶有无破碎和移动，术后用冷的生理盐水进行冲洗，记录凝胶流出情况。

5、测试结果

5.1各实施例以及比较例的产品的胶凝温度见下表1。

表1

样品	胶凝温度(℃)
		实施例1	22.0
实施例2	26.0
		实施例3	20.5
实施例4	23.0
		实施例5	29.0
实施例6	27.6
		比较例1	22.5
比较例2	23

比较例3

15

5.2各实施例以及比较例的产品的粘度结果见下表2。

表2

5.3各实施例以及比较例的产品的粘聚性结果见下表3。

表3

样品	粘聚性(g)
		实施例1	126
实施例2	106
		实施例3	113
实施例4	119
		实施例5	121
实施例6	120
		比较例1	96
比较例2	73
		比较例3	98

5.4各实施例以及比较例的产品的凝胶强度结果见下表4。

表4

样品

胶凝强度(g)

实施例1	215
		实施例2	179
实施例3	186
		实施例4	191
实施例5	203
		实施例6	192
比较例1	146
		比较例2	167
比较例3	124

5.5各实施例以及比较例的产品的有效性研究结果见下表5。

表5

6、结论

6.1本发明温敏凝胶制剂的胶凝温度为20-30℃，在注入人体前为液态，注入人体后转变为固态，能够很好的顺应输尿管，形成栓塞，在碎石术中防止结石转移，从而减轻碎石术对周围组织造成的损伤的风险，在使用结束后可用冷的生理盐水冲洗，方便清洁。

6.2本发明20℃粘度在2Pa·S以下，37℃粘度在400Pa·S以上，粘聚性在100g以上，都大于比较例1、比较例2和比较例3，可很好的保证碎石术中温敏凝胶在输尿管中的牢固性。

6.3本发明凝胶强度在150g以上，强于比较例1、比较例2和比较例3，可更好的保证在碎石术中凝胶的完整性，能够更好的保护输尿管、肾等组织的安全性。

6.4本发明20℃粘度在2Pa·S以下，凝胶的胶凝时间都在0.5-3min范围内，流动性好，胶凝时间合适，便于注射，不会在体内过快的转变为凝胶，便于在合适位置形成栓塞，并且在模拟碎石术中未发生破损和移动，术后用冷的生理盐水也可使凝胶转化为液体流出，总体强于比较例1、比较例2和比较例3，具有更高的有效性。

6.5从以上数据显示可以看出，本发明温敏凝胶制剂完全可以用于碎石术中防止结石转移，可以作为碎石防转移支架。

进一步的，为了使温敏凝胶制剂能够用于人体，进行以下安全性试验

本发明的碎石术中防止结石转移的温敏凝胶制剂商品名称为“碎石防转移支架系统”，由山东省医疗器械产品质量检验中心按GB/T16886.5～2003和GB/T16886.10～2005标准实施细胞毒性试验、迟发型超敏反应和皮内刺激试验三项安全评价试验。

安全性试验检测标准如表6所示，实际检测结果如表7所示，检测结果表明本发明碎石术中防止结石转移的温敏凝胶制剂无细胞毒性、无过敏性和无刺激性，具有较高的安全性。

表6安全性试验检测标准

表7安全性试验结果

最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明范围中。

Claims (10)

1.一种温敏凝胶制剂，其特征是包括以下重量百分比的组分：泊洛沙姆16.5~26.5%、壳聚糖盐酸盐1.0~3.0%、甘油磷酸盐0.5~2.5%、增效辅料0.01~1%、中性缓冲溶液67.0~81.99%。

2.根据权利要求1所述的温敏凝胶制剂，其特征是：所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407、泊洛沙姆338、泊洛沙姆237和泊洛沙姆188中的一种或多种；所述壳聚糖盐酸盐的分子量为5×10³~2×10⁶Da；所述甘油磷酸盐为甘油磷酸钠、甘油磷酸钙和甘油磷酸镁中的一种或多种；所述增效辅料为海藻酸钠、海藻酸钾、卡波姆、透明质酸钠、泊洛沙胺1307、泊洛沙胺1107、羧甲基壳聚糖、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、淀粉、琼脂、明胶、葡聚糖、聚乙烯醇和聚丙烯酰胺中的一种或多种；所述中性缓冲溶液为磷酸盐缓冲液。

3.根据权利要求1或2所述的温敏凝胶制剂，其特征是：所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407、泊洛沙姆338、泊洛沙姆237或泊洛沙姆188时，泊洛沙姆的含量为16.5~19.0wt%；所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407、泊洛沙姆338、泊洛沙姆237和泊洛沙姆188中的两种或两种以上的组合时，泊洛沙姆的含量为19.1~26.5wt%；所述中性缓冲溶液的pH为6-8。

4.根据权利要求1、2或3所述的温敏凝胶制剂，其特征是：包括以下重量百分比的组分：泊洛沙姆40719.0%、泊洛沙姆1882.5%、壳聚糖盐酸盐2.0%、甘油磷酸盐1.5%、增效辅料0.1%、中性缓冲溶液74.9%。

5.根据权利要求1、2、3或4所述的温敏凝胶制剂，其特征是：所述增效辅料为羟丙基纤维素和羧甲基壳聚糖的混合物；所述磷酸盐缓冲液为磷酸二氢盐和磷酸氢二盐组合配成的水溶液，优选的，磷酸二氢盐在温敏凝胶制剂中的含量为0.0025-0.02wt%，磷酸氢二盐在温敏凝胶制剂中的含量为0.028-0.22wt%。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的温敏凝胶制剂，其特征是：所述温敏凝胶制剂的胶凝温度为20℃～30℃，在温度低于胶凝温度时温敏凝胶制剂为液态，温度高于胶凝温度时温敏凝胶制剂为固态，在20±0.2℃时的粘度小于或等于2Pa·s，在37±0.2℃时的粘度大于或等于400Pa·s，粘聚性大于或等于100g，凝胶强度大于或等于150g。

7.一种权利要求1～6中任一项所述的温敏凝胶制剂的制备方法，其特征是包括以下步骤：

（1）取中性缓冲溶液，控制其温度为2-4℃，然后在此温度、搅拌的条件下向中性缓冲溶液中依次缓慢加入泊洛沙姆、甘油磷酸盐、壳聚糖盐酸盐和增效辅料；

（2）增效辅料加入完毕后，将步骤（1）的混合物在2～4℃下静置，使混合物充分溶胀、消泡，然后将混合物过微滤膜、分装、灭菌，得温敏凝胶制剂。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征是：步骤（2）中，混合物在2～4℃下静置24～72h；步骤（2）中，微滤膜的孔径为5μm，混合物在0.2～0.3MPa的压力下过微滤膜。

9.一种权利要求1～6中任一项所述的温敏凝胶制剂在制备碎石术中防止结石转移的产品中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征是：所述结石为输尿管结石或尿道结石。