CN106177955A - Bcl‑xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用 - Google Patents

Bcl‑xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN106177955A
CN106177955A CN201610688096.4A CN201610688096A CN106177955A CN 106177955 A CN106177955 A CN 106177955A CN 201610688096 A CN201610688096 A CN 201610688096A CN 106177955 A CN106177955 A CN 106177955A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bcl
abt
virus
oncolytic virus
inhibitor
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610688096.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106177955B (zh
Inventor
谭亚倩
邓静
林园
张海鹏
W.K.凯夫尼
高光坪
程世源
吕凌
林穗珍
龚守芳
胡骏
白雪涛
肖晓
李凯
梁剑开
蔡静
朱文博
银巍
颜光美
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Weirongte Pharmaceutical Technology Co Ltd
Original Assignee
Guangzhou Weirongte Pharmaceutical Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Weirongte Pharmaceutical Technology Co Ltd filed Critical Guangzhou Weirongte Pharmaceutical Technology Co Ltd
Priority to CN201610688096.4A priority Critical patent/CN106177955B/zh
Publication of CN106177955A publication Critical patent/CN106177955A/zh
Priority to US16/325,867 priority patent/US20190183948A1/en
Priority to JP2019509471A priority patent/JP6980763B2/ja
Priority to PCT/CN2017/097971 priority patent/WO2018033128A1/en
Priority to EP17841100.5A priority patent/EP3500304A4/en
Priority to TW106128178A priority patent/TWI732025B/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106177955B publication Critical patent/CN106177955B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
    • A61K35/768—Oncolytic viruses not provided for in groups A61K35/761 - A61K35/766
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/11—Aldehydes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/428—Thiazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/63—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide
    • A61K31/635—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide having a heterocyclic ring, e.g. sulfadiazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明属于生物医药领域，涉及Bcl‑xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用。本发明首次发现Bcl‑xL抑制剂可以用于制备溶瘤病毒抗肿瘤增效剂。发明同时涉及一种包含Bcl‑xL抑制剂以及溶瘤病毒的药物组合物，包含Bcl‑xL抑制剂及溶瘤病毒的药品套装，以及Bcl‑xL抑制剂与溶瘤病毒在治疗肿瘤，特别是对所述溶瘤病毒不敏感的肿瘤中的用途。

Description

Bcl-xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用
技术领域
本发明属于生物医药领域，涉及Bcl-xL抑制剂与溶瘤病毒的联合在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
溶瘤病毒(oncolytic virus)是一类靶向性感染并杀伤肿瘤细胞，而不破坏正常细胞的可复制病毒。溶瘤病毒疗法(oncolytic virotherapy)是一种创新的肿瘤靶向治疗策略，它利用天然的或经基因工程改造的病毒选择性的感染肿瘤细胞，并在肿瘤细胞中复制，达到靶向性溶解、杀伤肿瘤细胞的作用，但是对正常细胞没有损伤。
M1病毒(Alphavirus M1)属于甲病毒属(Alphavirus)，其在制备抗肿瘤药物方面具有较好的应用效果。例如中国发明专利申请201410425510.3公开了M1病毒能选择性引起肿瘤细胞死亡而不影响正常细胞存活。然而，不同肿瘤对M1病毒的敏感性不一，对于某些肿瘤，M1病毒单独用药时，溶瘤作用还不够理想。例如中国发明专利申请201410425510.3所记载的，M1作为抗肿瘤药物使用时，对于结直肠癌、肝癌、膀胱癌和乳腺癌的效果不如胰腺癌、鼻咽癌、前列腺癌和黑色素瘤明显；而胶质瘤、宫颈癌、肺癌则更其次；而胃癌则最不显著。
筛选增加溶瘤病毒肿瘤治疗效果的化合物有望增加溶瘤病毒的抗瘤谱及抗瘤强度。发明人此前申请的专利201510990705.7中，将大黄酚及其衍生生物作为溶瘤病毒的抗瘤增效剂，二者组合可以将肿瘤细胞的存活率降低至39.6％，但其抗癌强度存在很大的进步空间。本发明的目的在于提供一种溶瘤病毒抗瘤增效剂，能够起到更好的抗癌效果。
发明内容
本发明的目的之一在于提供Bcl-xl抑制剂在制备溶瘤病毒抗瘤增效剂方面的应用。
本发明的另一个目的在于提供一种抗瘤药物组合物，其可以使得溶瘤病毒发挥更好的抗瘤效果。
本发明的另一个目的在于提供一种针对溶瘤病毒不敏感的肿瘤，安全有效的溶瘤病毒增效药物。
发明通过以下技术方案实现上述目的：
发明人研究发现，Bcl-xL抑制剂可以增强溶瘤病毒的溶瘤效果。
所述的Bcl-xL抑制剂为抑制Bcl-xL蛋白活性的物质、或降解Bcl-xL蛋白的物质、或降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具。
Bcl-2家族基因表达的蛋白称为Bcl-2家族蛋白。Bcl-2家族成员是进化上相关的蛋白质。这些蛋白质控制线粒体外膜通透性(mitochondrial outer membranepermeabilization,MOMP)，目前已知Bcl-2家族总共由25个基因组成，其中Bax,BAD,Bak和Bok等成员可以产生促细胞凋亡作用，而bcl-2、Bcl-xL和Bcl-w等产生抗细胞凋亡作用。Bcl-2家族蛋白是细胞凋亡途径中一种重要的蛋白，在肿瘤的发生及转移中起着重要的作用。由于bcl-2、Bcl-xL和Bal-w等Bcl-2家族蛋白在癌细胞中高度表达，因此，Bcl-2家族蛋白抑制剂可以选择性地在肿瘤细胞中发挥抗肿瘤的作用。
然而，难以预见的是，并不是所有的Bcl-2家族蛋白的抑制剂均可以起到协同增强溶瘤病毒的溶瘤效果。
发明人通过用Bcl-xL和Bcl-w干扰片段(Si RNA)抑制这两个基因的表达，降低相应蛋白的表达量，结果发现，单独干扰Bcl-xL和Bcl-w和未干扰并未引起细胞形态病变，同时单独应用M1病毒也不引起细胞形态病变，只有干扰Bcl-xL联合应用M1病毒组引起了显著细胞形态病变，干扰Bcl-w联合应用M1病毒组不能引起显著细胞形态病变。此外，发明人采用单独bcl-2的抑制剂ABT-199联合溶瘤病毒处理肿瘤细胞，肿瘤细胞存活率并没有显著性差异，说明抑制Bcl-2不能引起M1病毒溶瘤效应的增加。
因此发明人推测，只有通过抑制Bcl-xL才可以显著增强溶瘤病毒的溶瘤效应。针对该推测，发明人采用了抑制Bcl-xL活性化合物ABT-263或ABT-737协同溶瘤病毒尤其是M1病毒作用于肿瘤细胞，实验结果发现，ABT-263或ABT737或其组合，均可以协同溶瘤病毒增强抗肿瘤效应。
ABT-263(Navitoclax)是Bcl-2家族蛋白抑制剂中的一种，它是Bcl-xL、Bcl-2和Bcl-w蛋白的抑制剂，Ki分别为≤0.5nM，≤1nM和≤1nM，但与Mcl-1和A1结合微弱。
ABT-737是一种BH3模拟抑制剂，作用于Bcl-xL、Bcl-2和Bcl-w，EC50分别为78.7nM、30.3nM和197.8nM；但对Mcl-1、Bcl-B及Bfl-1没有抑制作用。ABT-199(GDC-0199)是高效的Bcl-2选择性抑制剂，Ki为0.01nM，比对Bcl-xL和Bcl-w的抑制性高4800倍以上，对Mcl-1无活性。
本发明则首次发现，Bcl-xL抑制剂可以作为溶瘤病毒的抗瘤增效剂。
本发明提供了Bcl-xL抑制剂在制备溶瘤病毒抗瘤增效剂方面的应用。
所述的Bcl-xL抑制剂包括但不限于(S)-Gossypol acetic acid(式1)、Apogossypol(式2)、A-1155463(式3)、AT-101(R-(-)-gossypol acetic acid，(式4)、WEHI-539及其盐酸盐((WEHI-539and WEHI-539hydrochloride)，(式5))、Gambogic Acid(式6)、A-1210477(式7)、ABT-263(式8)和ABT-737(式9)等抑制Bcl-xl蛋白活性的化合物。化合物的获取方式可选但不限于：自己化学分离或合成或者从商业途径购买。
在本发明优选的实施例中，Bcl-xL抑制剂为ABT-263、ABT-737或他们的组合。
Bcl-xL抑制剂还包括针对Bcl-xl基因表达抑制工具，包括但不限于RNA干扰(RNAi)microRNA以及基因编辑或基因敲除等材料。
在本发明另一优选的实施例中，Bcl-xL蛋白抑制剂为Bcl-xL的干扰RNA片段。
所述的溶瘤病毒选自甲病毒中的至少一种；优选地甲病毒选自M1病毒和盖塔病毒中的至少一种。本发明所述的甲病毒(例如M1病毒、盖塔病毒)可以尤其地指目前已有的溶瘤病毒，但也不排除一些可能发生的自然变异或者进行了突变、修饰、序列增加、减少等的病毒，只要这些变异、突变、修饰、序列增加或减少等的变化并不影响所说的溶瘤病毒发挥本发明所述的作用，则属于本发明所述的同质的病毒。所述的Bcl-xL抑制剂为能起到敲低或影响Bcl-xL基因表达或者降低Bcl-xL蛋白量或蛋白活性的物质(例如化合物、或氨基酸序列、核苷酸序列等)或工具等。本领域技术人员可以对其抑制化合物或序列或者基因工具进行修饰、替换、改变等，但只要起到上述抑制Bcl-xL的作用的，则属于本发明的Bcl-xL抑制剂，属于上述物质、化合物或工具等的同质替换。
本发明还提供一种用于治疗肿瘤的药物组合物，其包含Bcl-xL抑制剂以及溶瘤病毒。本发明还提供用于治疗肿瘤的药品套装，其包含Bcl-xL抑制剂，以及溶瘤病毒。药品套装区别于组合物的地方在于，在药品套装中，Bcl-xL抑制剂未必、并且通常不与溶瘤病毒混合存在，而是通常地被分开包装。分开包装的溶瘤病毒与Bcl-xL抑制剂也可含有其各自的佐剂。所述的佐剂是指在药学中，可辅助药物疗效的手段。药品套装也可以包含独立包装的Bcl-xL抑制剂，以及独立包装的溶瘤病毒。药物套装中Bcl-xL抑制剂，以及溶瘤病毒的施用，可以是同时施用或者是以任意的前后顺序施用，其中患者先用一种药物治疗，然后再给以另一种药物。所述的患者是指哺乳动物受治疗者，尤其是人类。
所述的Bcl-xL蛋白抑制剂包括但不限于(S)-Gossypol acetic acid(式1)、Apogossypol(式2)、A-1155463(式3)、AT-101(R-(-)-gossypol acetic acid，(式4)、WEHI-539及其盐酸盐(WEHI-539and WEHI-539hydrochloride，(式5)、Gambogic Acid(式6)、A-1210477(式7)、ABT-263(式8)和ABT-737(式9)等抑制Bcl-xl蛋白活性的化合物。或者针对Bcl-xl基因表达抑制工具，包括但不限于RNA干扰(RNAi)microRNA以及基因编辑或敲除等工具手段。优选ABT-263、ABT-737或它们的组合。
所述的溶瘤病毒选自甲病毒中的至少一种；优选地甲病毒选自M1病毒和盖塔病毒中的至少一种。在组合物或药品套装中，ABT-263或ABT-737与溶瘤病毒的配比可选地为：0.01～15mg:103～109PFU；优选0.01～10mg:104～109PFU；进一步优选0.01～10mg:105～109PFU；
优选使用剂量为：ABT-263或ABT-737使用范围为0.01mg/kg至15mg/kg，同时溶瘤病毒使用滴度为MOI从103至109(PFU/kg)；优选ABT-263或ABT-737使用范围为0.01mg/kg至10mg/kg，同时溶瘤病毒使用滴度为MOI从104至109(PFU/kg)；更优选ABT-263使用范围为0.1mg/kg至10mg/kg，同时溶瘤病毒使用滴度为MOI从105至109(PFU/kg)。
在一个实施方式中，所述溶瘤病毒选自甲病毒中的至少一种。
优选地，所述溶瘤病毒为M1病毒和盖塔病毒中的至少一种。M1病毒属于盖塔相似病毒，据报道在已发现的相关病毒中，这两者的同源性高达97.8％。。在一个实施例中，采用的溶瘤病毒为保藏编号CCTCC V201423(具体信息如中国专利104814984A所记载)的M1病毒。
所述肿瘤可以为实体瘤或血液瘤。优选地所述实体瘤为肝癌、结直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胶质瘤、黑色素瘤、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌、或胃癌；或者优选地，所述的肿瘤为对溶瘤病毒不敏感的肿瘤；更优选地，所述肿瘤为对溶瘤病毒不敏感的肝癌、结直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胶质瘤、黑色素瘤、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌或胃癌。更更优选的实施方式中，所述肿瘤为对M1溶瘤病毒不敏感的肿瘤。
作为可选的实施方案，本发明所提供的ABT-263或ABT-737或其组合可以是注射剂、片剂、胶囊、贴剂、试剂盒等。作为优选的实施方案，本发明的增效药物是注射剂；优选地，可采用静脉注射。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明发现了Bcl-xL抑制剂，例如ABT-263和ABT-737可以增加溶瘤病毒的抗肿瘤效应，以提高溶瘤病毒作为抗肿瘤药物时的治疗有效性。细胞学实验证明M1病毒分别和ABT-263、ABT-737联合应用，可显著引起肿瘤细胞的形态学病变，从而显著增强对肿瘤细胞的抑制作用。
我们联合ABT-263或ABT-737与M1病毒作用于人肝细胞癌Hep3B株，出人意料的发现抗病毒化合物ABT-263或ABT-737和M1病毒联合应用时，显著增加肿瘤细胞形态病变，显著降低肿瘤细胞生存率。例如在本发明的一个实施例中，当M1病毒(MOI＝0.001)单独处理肝癌细胞时，肿瘤细胞存活率为81.5％，而当以100nM的ABT-263或ABT-737与同样MOI的M1病毒联用时，肿瘤细胞存活率大幅下降至25.2％。与单用M1病毒的抗肿瘤效果相比，ABT-263与M1联用时，溶瘤效果显著提升。
发明人此前将大黄酚及其衍生物作为M1病毒的抗癌增效剂，经试验发现，50uM的大黄酚与(MOI＝0.001)M1病毒联用后，肿瘤细胞的存活率下降至39.6％，而本发明发现，将100nM的ABT-263与M1病毒联用后，肿瘤细胞的存活率显著下降至25.2％。与大黄酚及其衍生物相比，本发明的M1抗肿瘤增效剂显著提高了肿瘤的杀伤率，同时，ABT-263在药物有效剂量上仅为大黄酚的千分之二，并且作用快速，用时为大黄酚的三分之二(大黄酚处理72h，ABT-263处理48h)，具备显著优越性。
尽管Bcl-2家族抑制剂如ABT-263、ABT-737、ABT-199等本身已经报道，可通过抑制肿瘤细胞内抗凋亡蛋白Bcl2，Bcl-xL，Bcl-w发挥抗肿瘤效应。然而，经本研究发现，并非所有的Bcl-2家族抑制剂均能协同增强溶瘤病毒的溶瘤效果。Bcl-xl抑制剂非显而易见的可以协同增强溶瘤病毒的抗肿瘤效应，而Bcl-2或Bcl-w的抑制剂则不能协同增强溶瘤病毒的抗肿瘤效应。
本发明发现，ABT-263或ABT-737与溶瘤病毒联合应用处理肿瘤细胞，对肿瘤细胞杀伤作用显著优于单用相同浓度的ABT-263或ABT-737，例如当同样例如以100nM的ABT-263处理肿瘤细胞时，肿瘤细胞存活率仍高达88.8％，当以100nM的ABT-263与M1病毒联用时，肿瘤细胞存活率大幅下降至25.2％。可见，ABT-263与M1联用时大幅提升的溶瘤效果，是得益于ABT-263与M1病毒之间的协同性机制，并非简单地通过ABT-263的抗肿瘤机制发挥作用。
附图说明
图1 ABT-263与M1病毒显著增加人肝细胞癌株形态学病变；
图2 ABT-263/ABT-737与M1病毒联合处理显著降低人肝细胞癌株生存率。
图3 Bcl-xL蛋白抑制剂在协同溶瘤病毒抗肿瘤的机理研究。
图4 ABT-263与M1病毒联合处理显著抑制人肝细胞癌株移植瘤生长。
图标说明：
ABT-263：ABT-263处理组；ABT-737：ABT-737处理组；M1+ABT-263：M1病毒与ABT-263联用处理组；M1+ABT-737：M1病毒与ABT-737联用处理组。
具体实施方式
以下实施方式是对本发明作进一步说明，但本发明的实施方式不局限于以下的实施例介绍，凡依照本发明的原理或理念所作的等同的变化或变通都应视为本发明保护的范畴。
在没有特别指明的情况下，本发明采用的材料及实验方法为常规材料及方法。
实施例1ABT-263与M1病毒显著增加人肝细胞癌株形态学病变
材料：
人肝细胞癌Hep3B，M1病毒，高糖DMEM培养基，倒置相差显微镜。
方法：
a)细胞的培养：人肝细胞癌Hep3B生长在含10％FBS、100U/ml青霉素及0.1mg/ml链霉素的DMEM完全培养基中；所有细胞株均置于5％CO2,37℃恒温密闭式孵箱(相对湿度95％)内培养传代，倒置显微镜观察生长情况。大约2～3天传代一次，取处于对数生长期的细胞用于正式实验。
b)细胞处理和形态学观察：选择对数生长期细胞，DMEM完全培养液(含10％胎牛血清、1％双抗)制成细胞悬液，细胞以2.5×104/孔的密度接种在24孔培养板内。用ABT-263(100nM)单独处理、M1病毒(MOI＝0.001)感染细胞、M1病毒(MOI＝0.001)联合ABT-263(100nM)处理细胞，以不加M1病毒和ABT-263为对照，48时后在倒置相差显微镜下观察细胞形态学的变化。
结果：
如图1所示,相差显微镜下观察细胞形态，Hep3B细胞是单层贴壁生长，并且细胞紧密排列，表型一致。而ABT-263(100nM)与M1病毒(MOI＝0.001)处理48h后，细胞的形态发生了明显改变，较对照组细胞，与M1单独处理组与单独处理组比较，联合处理组细胞数目明显减少，胞体收缩成球状，折光率明显增强，呈死亡病变样。
实施例2ABT-263或ABT-737与M1病毒联合处理显著降低人癌细胞株生存率
材料：
人肝细胞癌Hep3B，人膀胱细胞癌T24，人结直肠细胞癌LoVo，M1病毒，高糖DMEM培养基，自动酶联检测酶标仪。
方法：
a)接种细胞、给药处理：选择对数生长期细胞，DMEM完全培养液(含10％胎牛血清、1％双抗)制成细胞悬液，以每孔4×103/孔的密度接种在96孔培养板内。12小时后见细胞完全贴壁，实验分对照组，单独ABT-263组，M1感染组和ABT-263/M1联用组或者ABT-737/M1联用组。所用剂量为：M1病毒感染细胞；M1病毒设不同的剂量梯度。
b)MTT与细胞内的琥珀酸脱氢酶反应：培养至48h时，每孔加入MTT 20μl(5mg/ml)，继续孵育4小时，此时镜检可观察到、活细胞内形成的颗粒状蓝紫色甲臜结晶。
c)溶解甲臜颗粒：小心吸去上清，加DMSO 100μl/孔溶解形成的结晶，在微型振荡器上震荡5min，然后在酶联检测仪上用波长570nm检测各孔的光密度(OD值)。每组实验重复3次。细胞存活率＝药物处理组OD值/对照组OD值×100％。
结果:
如图2a所示，M1病毒单独处理对肿瘤细胞Hep3B具有较小的生存率抑制作用，肿瘤细胞存活率达到81.5％，100nM的ABT-263处理组肿瘤细胞存活率仍高达88.8％，然而，当低至100nM的ABT-263与同样MOI的M1病毒联用(ABT-263+M1)时，肿瘤细胞存活率大幅下降至25.2％。同样。与M1病毒单独处理组或单独的ABT-263处理组相比，各剂量组ABT-263/M1联合处理后的肿瘤细胞存活率均显著下降。类似的结果ABT-737/M1联合应用在Hep3B中同样观察到(图2b)，另外Bcl-xL抑制剂ABT-737与M1连用也显著降低肿瘤细胞T24(图2c和d)以及LoVo(图2e和2f)的存活率。
然而，与M1病毒单独处理组或单独的Bcl-2选择性抑制剂ABT-199处理组相比，各剂量组ABT-199/M1联合处理后的肿瘤细胞存活率并没有显著性差异，说明抑制Bcl-2不能引起M1病毒溶瘤效应的增加(图2g和2h)。
实施例3抑制Bcl-xL协同M1溶瘤病毒抗肿瘤效应
材料：
M1病毒，人肝癌细胞Hep3B，膀胱癌细胞T24，Bcl-xL和Bcl-w RNA干扰片段，MTT(甲基偶氮唑蓝)，相差显微镜。
Bcl-xL干扰片段(Si RNA)：
正义链(SEQ ID NO.1)
5’-GGAUACAGCUGGAGUCAGUdTdT-3’
反义链(SEQ ID NO.2)
5’-ACUGACUCCAGCUGUAUCCdTdT-3’；
Bcl-w干扰片段(Si RNA)：
正义链(SEQ ID NO.3)
5’-CAGCUGUAUUCCAUUACAUdTdT-3’
反义链(SEQ ID NO.4)
5’-AUCUAAUGGAAUACAGCUGdTdT-3’
方法：
选择对数生长期细胞，DMEM完全培养液调制成细胞悬液，细胞以1×105的密度接种在6孔板内。24小时后，加入脂质体包裹的Si RNA目标基因片段24时后，感染M1病毒。感染48小时后，处理样本。
(1)相差显微镜观察细胞形态学病变；
(2)收集蛋白质样本，进行Western blot检测干扰效率以及M1病毒蛋白E1、NS3。
(3)MTT法计算细胞存活率；
结果:
在分别干扰Bcl-xL和Bcl-w之后，Western blot检测发现Bcl-xL和Bcl-w(图3b)基因表达显著下降。但是单独干扰Bcl-xL和Bcl-w和未干扰(CTL)或乱码干扰组(NC)相比并未引起细胞形态病变，同时单独应用M1病毒也不引起细胞形态病变，只有干扰Bcl-xL联合应用M1病毒组((siBcl-xL+M1))引起了显著细胞形态病变，干扰Bcl-w联合应用M1病毒组(siBcl-w+M1)不能引起显著细胞形态病变(图3a)；同时，MTT检测表明(图3c)，数据进行ANOVA统计，***表示p<0.001，数据表明只有干扰Bcl-xL联合应用M1病毒组引起了人肝癌细胞Hep3B，以及膀胱癌细胞T24存活率显著下降。
以上表明，只有通过抑制Bcl-xL才可以显著增强M1的溶瘤效应，抑制Bcl-w并不能协同增强M1的溶瘤效应。
实施例4ABT-263与M1病毒联合应用显著抑制人肝细胞癌株移植瘤生长。材料：
M1病毒、肝癌细胞株Hep3B、结直肠癌细胞株LoVo、4周龄雌性BALB/c裸鼠。
方法：
本实验采用随机的、单盲的设计。将5×106Hep 3B或者LoVo细胞注入到4周龄BALB/c裸鼠背侧皮下。
当肿瘤大小达到50mm3时分组，包括不处理的对照组、单独应用ABT-263组(腹腔注射10mg/kg/d)、单独应用M1感染组(尾静脉注射M1病毒2×106PFU/次)和ABT-263/M1联用组(相同方式给予相同剂量的ABT-263和M1病毒)，连续注射3次。每两天测量肿瘤的长宽和体重，肿瘤的体积依据公式(长×宽2)/2。测量肿瘤体积后进行One way ANOVA统计，***表示p<0.001,**表示p<0.01。结果:
在两种肿瘤细胞移植瘤动物体内，病理解剖测定肿瘤体积表明，和对照组比较，单独应用ABT-263组和单独M1感染组只能引起肿瘤体积轻微的缩小，而ABT-263/M1联用组能引起肿瘤体积显著地缩小(图4b和4d)，并且One way ANOVA统计表明具有统计学差异(图4a和 4c)。这种协同性的作用在对单独用药敏感性低的肿瘤中被放大得尤其明显，肿瘤体积的减小幅度惊人(图4a)。
本发明所记载的实施方式仅为阐释性例子，本发明的实施方式并不受上述的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等同的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.Bcl-xL抑制剂在制备溶瘤病毒抗肿瘤增效剂方面的应用；优选地，所述的溶瘤病毒选自甲病毒中的至少一种；优选地，所述的甲病毒选自M1病毒和盖塔病毒中的至少一种。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的Bcl-xL抑制剂为抑制Bcl-xL蛋白活性的物质、或降解Bcl-xL蛋白的物质、或降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具；
优选地，所述的抑制Bcl-xL蛋白活性的物质选自化合物，更优选地，所述化合物选自(S)-Gossypol acetic acid、Apogossypol、A-1155463、AT-101、WEHI-539、WEHI-539hydrochloride、Gambogic Acid、A-1210477、ABT-263和ABT-737中的一种或几种；
或者优选地，所述的降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具为RNA干扰、microRNA、基因编辑或基因敲除材料。
3.一种治疗肿瘤的药物组合物，包含：
(a)Bcl-xL抑制剂；
所述的Bcl-xL抑制剂为抑制Bcl-xL蛋白活性的物质、或降解Bcl-xL蛋白的物质、或降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具；
优选地，所述的抑制Bcl-xL蛋白活性的物质选自化合物，更优选地，所述化合物选自(S)-Gossypol acetic acid、Apogossypol、A-1155463、AT-101、WEHI-539、WEHI-539hydrochloride、Gambogic Acid、A-1210477、ABT-263和ABT-737中的一种或几种；
或者优先地，所述的降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具为RNA干扰、microRNA、基因编辑或基因敲除材料。
(b)溶瘤病毒；所述的溶瘤病毒选自甲病毒中的至少一种；优选地，所述的甲病毒选自M1病毒和盖塔病毒中的至少一种。
4.一种药品套装，包含：
(a)Bcl-xL抑制剂；
所述的Bcl-xL抑制剂为抑制Bcl-xL蛋白活性的物质、或降解Bcl-xL蛋白的物质、或降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具；
优选地，所述的抑制Bcl-xL蛋白活性的物质选自化合物，更优选地，所述化合物选自(S)-Gossypol acetic acid、Apogossypol、A-1155463、AT-101、WEHI-539、WEHI-539hydrochloride、Gambogic Acid、A-1210477、ABT-263和ABT-737中的一种或几种；
或者优先地，所述的降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具为RNA干扰、microRNA、基因编辑或基因敲除材料。
(b)溶瘤病毒；所述的溶瘤病毒选自甲病毒中的至少一种；优选地，所述的甲病毒选自M1病毒和盖塔病毒中的至少一种；
在所述的药品套装中Bcl-xL抑制剂和溶瘤病毒被分开包装。
5.Bcl-xL抑制剂及溶瘤病毒的组合在制备治疗肿瘤药物中的应用；
所述的溶瘤病毒选自甲病毒中的至少一种；优选地，所述的甲病毒选自M1病毒和盖塔病毒中的至少一种；
所述的Bcl-xL抑制剂为抑制Bcl-xL蛋白活性的物质、或降解Bcl-xL蛋白的物质、或降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具；
优选地，所述的抑制Bcl-xL蛋白活性的物质选自化合物，更优选地，所述化合物选自(S)-Gossypol acetic acid、Apogossypol、A-1155463、AT-101、WEHI-539、WEHI-539hydrochloride、Gambogic Acid、A-1210477、ABT-263和ABT-737中的一种或其组合；
或者优选地，所述的降低Bcl-xL蛋白水平的基因工具为RNA干扰、microRNA、基因编辑或基因敲除材料。
6.如权利要求1-5任一所述的应用/组合物、药品套装，其特征在于所述的Bcl-xL蛋白抑制剂为ABT-263或ABT-737或它们的组合。
7.如权利要求1-5任一所述的应用/组合物/药品套装，其特征在于所述的溶瘤病毒为M1病毒或盖塔病毒或它们的组合。
8.如权利要求1-5任一所述的应用/组合物/药品套装，其特征在于所述的肿瘤为实体瘤或血液瘤；优选地，所述的实体瘤为肝癌、结直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胶质瘤、黑色素瘤、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌或胃癌；
或者优选地，所述的肿瘤为对溶瘤病毒不敏感的肿瘤；
更优选地，所述肿瘤为对溶瘤病毒不敏感的肝癌、结直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胶质瘤、黑色素瘤、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌或胃癌。
9.如权利要求3或4任一所述的组合物/药品套装，其特征在于所述的ABT-263或ABT-737与溶瘤病毒的配比为：0.01～15mg:103～109PFU；优选0.01～10mg:104～109PFU；进一步优选0.01～10mg:105～109PFU；
进一步优选地，使用剂量为：ABT-263或ABT-737使用范围为0.01mg/kg至15mg/kg，同时溶瘤病毒使用滴度为MOI从103至109(PFU/kg)；优选ABT-263或ABT-737使用范围为0.01mg/kg至10mg/kg，同时溶瘤病毒使用滴度为MOI从104至109(PFU/kg)；更优选ABT-263或ABT-737使用范围为0.1mg/kg至10mg/kg，同时溶瘤病毒使用滴度为MOI从105至109(PFU/kg)。
10.根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述药物组合物还包含药学上可接受的载体；所述载体优选地选自冻干粉针、注射剂、片剂、胶囊、试剂盒或贴剂。
CN201610688096.4A 2016-08-18 2016-08-18 Bcl‑xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用 Active CN106177955B (zh)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610688096.4A CN106177955B (zh) 2016-08-18 2016-08-18 Bcl‑xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用
US16/325,867 US20190183948A1 (en) 2016-08-18 2017-08-18 Use of bcl-xl inhibitor and oncolytic virus in preparation of antitumor drug
JP2019509471A JP6980763B2 (ja) 2016-08-18 2017-08-18 抗腫瘍薬の調製におけるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及び腫瘍溶解性ウイルスの使用
PCT/CN2017/097971 WO2018033128A1 (en) 2016-08-18 2017-08-18 Use of bcl-xl inhibitor and oncolytic virus in preparation of antitumor drug
EP17841100.5A EP3500304A4 (en) 2016-08-18 2017-08-18 USE OF A BCL-XL INHIBITOR AND ONCOLYTIC VIRUS IN THE MANUFACTURE OF ANTITUMUMPRODUCTIVE MEDICAMENT
TW106128178A TWI732025B (zh) 2016-08-18 2017-08-18 Ｂｃｌ-ｘＬ抑制劑和溶瘤病毒在製備抗腫瘤藥物中的應用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610688096.4A CN106177955B (zh) 2016-08-18 2016-08-18 Bcl‑xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106177955A true CN106177955A (zh) 2016-12-07
CN106177955B CN106177955B (zh) 2018-03-16

Family

ID=57523031

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610688096.4A Active CN106177955B (zh) 2016-08-18 2016-08-18 Bcl‑xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20190183948A1 (zh)
EP (1) EP3500304A4 (zh)
JP (1) JP6980763B2 (zh)
CN (1) CN106177955B (zh)
TW (1) TWI732025B (zh)
WO (1) WO2018033128A1 (zh)

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018033128A1 (en) * 2016-08-18 2018-02-22 Guangzhou Virotech Pharmaceutical Co., Ltd. Use of bcl-xl inhibitor and oncolytic virus in preparation of antitumor drug
CN108186642A (zh) * 2018-01-11 2018-06-22 广西师范大学 一种协同起作用治疗肺癌的药物组合物
CN108686221A (zh) * 2018-07-25 2018-10-23 广州威溶特医药科技有限公司 增效的抗肿瘤药物
WO2019129233A1 (zh) * 2017-12-29 2019-07-04 广州威溶特医药科技有限公司 Parp抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
WO2019129232A1 (zh) * 2017-12-29 2019-07-04 广州威溶特医药科技有限公司 Cdk抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
WO2019129235A1 (zh) * 2017-12-29 2019-07-04 广州威溶特医药科技有限公司 E3连接酶抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
CN111603562A (zh) * 2020-05-29 2020-09-01 中山大学 5-脂氧合酶抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用
WO2020215843A1 (zh) * 2019-04-25 2020-10-29 中国科学院化学研究所 醋酸棉酚和化疗药的联合用药物
WO2020239118A1 (zh) * 2019-05-31 2020-12-03 广州威溶特医药科技有限公司 M1病毒变异体及其应用
CN113038956A (zh) * 2018-12-05 2021-06-25 日东电工株式会社 癌处置用RNAi分子
CN113677373A (zh) * 2019-03-28 2021-11-19 日东电工株式会社 RNAi分子

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP4054585A1 (en) 2019-11-05 2022-09-14 Abbvie Inc. Dosing regimens for use in treating myelofibrosis and mpn-related disorders with navitoclax

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101820892A (zh) * 2007-10-22 2010-09-01 昂科利蒂克斯生物科技公司 增殖性疾病的治疗方案
CN103562202A (zh) * 2011-01-25 2014-02-05 密执安大学评议会 Bcl-2/bcl-xl抑制剂和使用它们的治疗方法
CN105246882A (zh) * 2013-01-16 2016-01-13 密执安大学评议会 BCL-2/Bcl-xL抑制剂和使用所述抑制剂的治疗方法

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070026076A1 (en) * 2003-02-24 2007-02-01 Tzyy-Choou Wu Molecular vaccines employing nucleic acid encoding anti-apoptotic proteins
US8624027B2 (en) * 2005-05-12 2014-01-07 Abbvie Inc. Combination therapy for treating cancer and diagnostic assays for use therein
WO2008001156A1 (en) 2006-06-26 2008-01-03 Centre Regional De Lutte Contre Le Cancer - Centre Francois Baclesse CANCER THERAPY USING BcI-XL-SPECIFIC siNA
CA2689707A1 (en) * 2009-11-16 2011-05-16 Jean-Simon Diallo Identification of the novel small molecule viral sensitizer vse1 using high-throughput screening
EP2829284A1 (en) * 2013-07-22 2015-01-28 Deutsches Krebsforschungszentrum Cancer therapy with a parvovirus combined with a Bcl-2 inhibitor
CN104814984B (zh) 2014-08-26 2017-09-15 广州威溶特医药科技有限公司 甲病毒在制备抗肿瘤药物方面的应用
CN106177955B (zh) * 2016-08-18 2018-03-16 广州威溶特医药科技有限公司 Bcl‑xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101820892A (zh) * 2007-10-22 2010-09-01 昂科利蒂克斯生物科技公司 增殖性疾病的治疗方案
CN103562202A (zh) * 2011-01-25 2014-02-05 密执安大学评议会 Bcl-2/bcl-xl抑制剂和使用它们的治疗方法
CN105246882A (zh) * 2013-01-16 2016-01-13 密执安大学评议会 BCL-2/Bcl-xL抑制剂和使用所述抑制剂的治疗方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KANG, S等: "Silencing Daxx increases the anti-tumor activity of a TRAIL/shRNA Bcl-xL-expressing oncolytic adenovirus through enhanced viral replication and cellular arrest", 《CELLULAR SIGNALLING》 *

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018033128A1 (en) * 2016-08-18 2018-02-22 Guangzhou Virotech Pharmaceutical Co., Ltd. Use of bcl-xl inhibitor and oncolytic virus in preparation of antitumor drug
TWI691333B (zh) * 2017-12-29 2020-04-21 大陸商廣州威溶特醫藥科技有限公司 Ｃｄｋ抑制劑和溶瘤病毒在製備抗腫瘤藥物的用途
WO2019129233A1 (zh) * 2017-12-29 2019-07-04 广州威溶特医药科技有限公司 Parp抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
WO2019129232A1 (zh) * 2017-12-29 2019-07-04 广州威溶特医药科技有限公司 Cdk抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
WO2019129235A1 (zh) * 2017-12-29 2019-07-04 广州威溶特医药科技有限公司 E3连接酶抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
CN108186642A (zh) * 2018-01-11 2018-06-22 广西师范大学 一种协同起作用治疗肺癌的药物组合物
CN108686221A (zh) * 2018-07-25 2018-10-23 广州威溶特医药科技有限公司 增效的抗肿瘤药物
CN108686221B (zh) * 2018-07-25 2022-02-22 广州威溶特医药科技有限公司 增效的抗肿瘤药物
CN113038956A (zh) * 2018-12-05 2021-06-25 日东电工株式会社 癌处置用RNAi分子
CN113677373A (zh) * 2019-03-28 2021-11-19 日东电工株式会社 RNAi分子
WO2020215843A1 (zh) * 2019-04-25 2020-10-29 中国科学院化学研究所 醋酸棉酚和化疗药的联合用药物
WO2020239118A1 (zh) * 2019-05-31 2020-12-03 广州威溶特医药科技有限公司 M1病毒变异体及其应用
CN111603562A (zh) * 2020-05-29 2020-09-01 中山大学 5-脂氧合酶抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
TW201808339A (zh) 2018-03-16
CN106177955B (zh) 2018-03-16
TWI732025B (zh) 2021-07-01
EP3500304A4 (en) 2019-07-17
JP2019524841A (ja) 2019-09-05
JP6980763B2 (ja) 2021-12-15
US20190183948A1 (en) 2019-06-20
EP3500304A1 (en) 2019-06-26
WO2018033128A1 (en) 2018-02-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106177955B (zh) Bcl‑xL抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用
CN106265764B (zh) Iap抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用
Dickman et al. Rotavirus alters paracellular permeability and energy metabolism in Caco-2 cells
CN106177961B (zh) Vcp抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用
Yang et al. Evaluation on the antiviral activity of ribavirin against Micropterus salmoides rhabdovirus (MSRV) in vitro and in vivo
CN105456302B (zh) 大黄酚或其衍生物和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
CN109985244A (zh) E3连接酶抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
CN102151256A (zh) 原儿茶酸在制备防治畜禽病毒感染性疾病的药物中的应用
CN108686221A (zh) 增效的抗肿瘤药物
CN106975078A (zh) 一种包含多钨酸钆的纳米材料作为增敏剂的用途
CN108635584A (zh) 蛋白酶体抑制剂和甲病毒在制备抗肿瘤药物中的应用
Yang et al. Natural product honokiol exhibits antiviral effects against Micropterus salmoides rhabdovirus (MSRV) both in vitro and in vivo
CN109985240A (zh) Parp抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
CN111544595B (zh) 泛素结合酶e2抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
CN101317835B (zh) 斑蝥素及其衍生物在制备肿瘤化疗增敏药物中的应用
CN102210668B (zh) 斑蝥素及其衍生物在制备肿瘤化疗增敏药物中的应用
CN104844606B (zh) 抗寄生虫吡嗪异喹啉衍生物
CN105233285B (zh) Epac直接或间接激动剂与溶瘤病毒的联合应用
CN107823215A (zh) 黄芩苷在制备防治寨卡病毒感染的药物中的应用
CN109985241A (zh) Cdk抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物的应用
Zhao et al. Drug delivery system based on metal-organic framework improved 5-Fluorouracil against spring viremia of carp virus
CN111632146A (zh) Oat抑制剂和溶瘤病毒在制备抗肿瘤药物中的应用
Li et al. Saikosaponin C as an antiviral agent inhibits the largemouth bass ranavirus in vitro and in vivo
CN104887681B (zh) 一种抑制肺癌细胞转移的组合药物以及检测方法
CN104873513B (zh) 一种抑制肺癌细胞转移的药物组合物以及检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant