CN106176737A - 一种与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分及其非布司他组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分，所述活性成分为具有如式(I)所示结构的植物多酚及其药学上可接受的盐。本发明还提供了一种非布司他组合物，包括非布司他以及所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分。本发明的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分，可与现有技术中治疗高尿酸血症的药物共同作用，在降低该高尿酸血症药物的毒副作用的同时，保持理想的降尿酸效果，在高尿酸血症和高尿酸血症引起的痛风或痛风并发症的治疗过程中，协同发挥药效。

Description

一种与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分及其非布司他组 合物

技术领域

本发明属于化学医药领域，具体涉及一种与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分、用途，以及一种非布司他组合物及其用途。

背景技术

在化学医药领域中，尿酸是人类嘌呤化合物的终末代谢产物。嘌呤代谢紊乱导致高尿酸血症。在正常嘌呤饮食状态下，非同日两次空腹血尿酸水平男性高于416μmol/L，女性高于360μmol/L，即称为高尿酸血症(hyperuricemia)。通常，单纯的处于高尿酸血症状态并没有自觉症状，但是如果长时间放任该状态，血液中的尿酸盐将发生结晶，结晶的尿酸盐将沉积在关节、皮下组织、肾脏等部位，进而出现痛风及痛风并发症等一系列临床表现。随着人们饮食结构的改变和生活水平的提高，高尿酸血症的发病率逐年提高，根据近年各地高尿酸血症患病率的报道，目前我国约有高尿酸血症者1.2亿，约占总人口的10％，其中痛风患者超过了7500万人，而且正以每年0.97％的速度增加。作为高尿酸血症的代表，痛风已成为继糖尿病后的第二大代谢类疾病，并严重危害着人们的生命和健康。

目前，治疗高尿酸血症、高尿酸血症引起的痛风及痛风并发症，需要对血液中的尿酸进行控制；其实现途径主要有以下两种：

第一、抑制尿酸的生成。尿酸是由次黄嘌呤和黄嘌呤经黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)的作用而生成的；黄嘌呤氧化酶是催化上述反应、进而生成尿酸所必须的酶，因此，抑制黄嘌呤氧化酶活性就可有效的抑制尿酸的形成，进而起到治疗痛风等症状的作用；目前常用的抑制尿酸生成的药物有别嘌呤醇、非布索坦等。第二、促进尿酸的排泄。目前常用的促进尿酸排泄的药物有丙磺舒、苯溴马龙等。

上述两种方式均可起到降低血液中尿酸的作用，进而对高尿酸血症以及其引发的痛风、痛风并发症产生疗效，但是上述药物毒副作用通常较大，例如，别嘌呤醇可引发变态反应(发病率10-15％)、超敏综合症、骨髓抑制等严重的毒副作用；丙磺舒、苯溴马隆则具有刺激胃肠道、引发肾绞痛、激发痛风急性发作等副作用。加之上述药物耐受性普遍较低，因此，在一定程度上限制了这些药物的临床应用。

非布司他(Febuxostat，商品名：Uloric，武田北美制药公司)是一种非嘌呤类选择性黄嘌呤氧化酶抑制剂，2009年3月经美国FDA批准上市，用于长期治疗伴随痛风的高尿酸血症。相较于其他治疗高尿酸血症的药物，非布司他具有更高的选择性和更强的活性，是近50年来首个治疗痛风的高效新药。但是，相关研究及临床实践表明，非布司他也具有一定的不良反应：

非布司他常见的不良反应有肝功能异常(3.5％)、腹泻(2.7％)、头痛(1.8％)、恶心(1.7％)和皮疹(1.5％)等。例如，2009年首次报道的非布司他导致的过敏反应：1例69岁高尿酸血症伴痛风、有中度肾功能不全病史女性患者在服用非布司他几天后(剂量为80mg/d)，感觉疲劳并出现弥漫性皮肤瘙痒，舌部刺痛变红，停用非布司他后检测，血清尿酸值恢复正常[58mg/L(345μmol/L)]，但血清肌酐明显增加[28mg/L(248μmol/L)]，外周血嗜酸粒细胞明显增加(16％)。

随着非布司他临床应用的增加，越来越多的研究也显示出非布司他相关的心血管系统不良反应(主要包括高血压性心脏病、心动过缓、室上性心动过速、动脉粥样硬化及充血性心力衰竭等)的发生率增加。亦有文献显示，服用非布司他后除出现以上不良反应外，还可能会出现血管神经性水肿、急性肾衰竭、血红蛋白减少、关节-骨骼肌肉和结缔组织相关的症状和表现，严重者可出现Stevens-Johnson综合征。

植物多酚(Plant polyphenol)又名植物单宁(Vegetable tannin)，是植物中多羟基酚类化合物的总称，具有多元酚结构，为植物体内的复杂酚类的次生代谢物，主要存在于植物的皮、根、叶、果中。植物多酚的独特结构使其具有一系列独特的化学性质，表现出抗肿瘤、抗氧化、抗脉硬化、防治冠心病与中风等心脑血管疾病以及抗菌等多种药理功能，在食品、医药、化妆品、日用化学品以及保健品等方面均有一定的应用。随着天然产物开发的逐渐兴起，植物多酚因其在植物界分布的广泛性、生理功能的多样性以及来源的丰富性等特点，逐渐成为当前研究的热点，被形象地称为“一座有待开发的金矿”。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题在于现有技术中治疗高尿酸血症的药物普遍具有毒副作用的问题，进而提供一种与高尿酸血症药物具有协同作用的、可降低高尿酸血症药物的毒副作用并保持理想的降尿酸效果的活性成分。

本发明所要解决的第二个技术问题在于现有技术中的非布司他会引起诸多的不良反应的问题，进而提供一种在保持理想的降尿酸效果的同时，可降低非布司他的毒副作用的非布司他组合物。

本发明还提供了所述非布司他组合物的用途。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分，所述活性成分为具有如式(I)所示结构的植物多酚及其药学上可接受的盐：

其中：

R₁选自-H、-OH或＝O中的一种；

R₂选自-H，-OH或-O-糖苷链中的一种；

R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉、R₁₀彼此独立的选自-H、-OH、羧基、酯基、-OCH₃，-OCH₂CH₃，-O-糖苷链、取代或未取代的C₁-C₁₀烃基中的一种。

进一步地，所述-O-糖苷链为1-5个糖组成的-O-糖苷链。

优选地，所述活性成分具有如下所示结构：

所述高尿酸血症药物为非布司他。

本发明的用于治疗高尿酸血症药物或者保健品，包含本发明所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分。

本发明还提供了所述与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分在制备治疗高尿酸血症药物及保健品中的用途。

一种非布司他组合物，包括非布司他以及本发明所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分。

所述活性成分在所述非布司他组合物中所占的重量比大于或者等于0.5％。优选的，所述非布司他组合物中所占的重量比大于或者等于10％。

所述非布司他组合物还包括药学上可以接受的载体。

本发明的用于治疗高尿酸血症的药物，所述药物中含有本发明所述的非布司他组合物，所述药物为向所述非布司他组合物中加入常规辅料按照常规工艺制成临床上可接受的胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、膏剂、合剂、混悬剂。

所述的非布司他组合物在制备治疗高尿酸血症药物及保健品中的用途。

进一步地，所述高尿酸血症包括高尿酸血症引起的痛风及痛风并发症。所述痛风包括急性痛风及慢性痛风。

进一步地，所述痛风并发症包括痛风性关节炎、痛风发作、痛风性肾病、尿酸性肾石病。

本发明的优点在于：

(1)本发明所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分，可与现有技术中治疗高尿酸血症的药物共同作用，在降低该高尿酸血症药物的毒副作用的同时，保持理想的降尿酸效果，在高尿酸血症和高尿酸血症引起的痛风或痛风并发症的治疗过程中，协同发挥药效；

(2)本发明所述的非布司他组合物不仅对黄嘌呤氧化酶显示出较强的体外抑制作用，可起到与非布司他相当的降尿酸效果，更为重要的是，可明显降低非布司他的毒副作用，抑制不良反应，安全性更高，因此可作为黄嘌呤氧化酶抑制剂和降尿酸药物用于高尿酸血症和高尿酸血症引起的痛风或痛风并发症的治疗。

具体实施方式

实施例1：本发明的非布司他组合物

本实施例中的非布司他组合物，由重量比为0.5:9.5的非布司他与化合物1混合而成。本实施例中使用的所述化合物1为市售的二氢杨梅素，所述化合物1的结构式如下：

实施例2：本发明的非布司他组合物

本实施例中的非布司他组合物，由重量比为1:9的非布司他与化合物2混合而成。本发明中使用的化合物2为市售的二氢槲皮素，所述化合物2的结构式如下：

实施例3：本发明的非布司他组合物

本实施例中的非布司他组合物，由重量比为3:7的非布司他与化合物3混合而成。本发明中使用的化合物3为市售的表没食子儿茶素，所述化合物3的结构式如下：

实施例4：本发明的非布司他组合物

本实施例中的非布司他组合物，由重量比为5：5的非布司他与化合物4混合而成。本发明中使用的化合物4为市售的表儿茶素，所述化合物4的结构式如下：

实施例5：本发明的非布司他组合物

本实施例中的非布司他组合物，由重量比为1：9的非布司他与化合物5混合而成。本发明中使用的化合物5为市售的落新妇苷，所述化合物5的结构式如下：

实施例6：本发明所述的非布司他组合物片剂

【处方】

称取处方量的非布司他组合物、淀粉和L-HPC，混合，过60目筛三次，混合均匀；加入10％的淀粉浆适量制软材，制粒，干燥，整粒后，加入微粉硅胶、硬脂酸镁混合均匀，压片，包薄膜衣，即得。

实施例7：本发明所述的非布司他组合物片剂

【处方】

称取处方量的非布司他组合物、微晶纤维素、淀粉、乳糖、聚维酮和一半量的羧甲基淀粉钠，混合，过100目筛，混合均匀；加入聚乙烯吡咯烷酮水溶液适量制软材，过24目筛，制粒，干燥，加入微粉硅胶、硬脂酸镁混合均匀，整粒后，用异型冲压片，即得。

实施例8：本发明所述的非布司他组合物胶囊剂

【处方】

称取处方量的非布司他组合物、微晶纤维素、乳糖，分别过100目筛，再混合均匀；加入羟丙甲纤维素溶液适量制软材，过24目筛，制粒，于50-60℃的烘箱中干燥约2-3小时，加入微粉硅胶、硬脂酸镁混合均匀，整粒后，装入胶囊即得。

需要说明的是，本领域技术人员可以使用本领域中已知的任何方式施用本发明的药物组合物，包括但不限于口服、经鼻、胃肠外、局部、经皮或直肠的施用途径。本发明的药物组合物优选适用于口服或局部施用的剂型，例如，片剂、胶囊(包括硬胶囊、软胶囊)、丸剂、溶液、粉末或粒料、悬浮液、贴片等。且本发明的药物可以采用本领域中公知的方法制为相应剂型。

作为本实施例的可替代实现方式，上述微晶纤维素等药用辅料还可以替换为其他常用辅料，本发明中所述的“常规辅料”是指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂(如可可脂和栓蜡)、溶剂或包装材料。药学上可接受的载体是与组合物的其他成分、与施用的模式相容的并且对患者无害。药学上可接受的载体可以是水性或非水性的。常规辅料包括胶质，例如明胶；淀粉，例如玉米淀粉、马铃薯淀粉；糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；纤维素材料及其混合物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素。可用作药学上可接受的载体的材料包括但不限于，西黄蓍胶粉、麦芽、滑石粉、油(如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油、大豆油等)、醇类(如丙二醇、乙醇、甘油、山梨糖醇、甘露醇、聚乙二醇等)、酯类(如油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂)、缓冲剂(如氢氧化镁、氢氧化铝、硼酸和硼酸钠以及磷酸盐缓冲液)、褐藻酸、无热源的水、等渗盐水、林格氏液。

实验例

下面，为验证本发明的技术效果进行以下实验：

其中，本发明中使用的化合物1为市售的二氢杨梅素：

本发明中使用的化合物2为市售的二氢槲皮素：

本发明中使用的化合物3为市售的表没食子儿茶素：

本发明中使用的化合物4为市售的表儿茶素：

本发明中使用的化合物5为市售的落新妇苷：

发明人在研究开发治疗高尿酸血症药物的过程中，发现化合物1-5具有显著降低高尿酸血症模型小鼠血清尿酸水平的作用。这些化合物在小鼠灌胃剂量20mg/kg-50mg/kg时，其降低幅度可以跟目前市场上的一线药物非布司他(灌胃剂量2.5mg/kg)相当。当化合物1-5的灌胃剂量达到100mg/kg-150mg/kg时，其降低尿酸的效果要明显高于非布司他(灌胃剂量2.5mg/kg)。同时发明人还注意到，当非布司他的灌胃剂量达到2.5mg/kg时，已经出现了明显的肝肾毒性，可以大幅升高小鼠的丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酐(CRE)值，这一点与文献报道非布司他的副作用非常一致。但化合物1-5在灌胃剂量达到200mg/kg时，仍然为有ALT，AST和CRE的异常变化，因此其安全性要远远好于非布司他。

鉴于以上发现，发明人将化合物1-5跟非布司他进行组合，用一定剂量的化合物1-5代替非布司他，降低非布司他的用量。在保证降尿酸功效的同时，大幅降低了其对肝肾的毒副作用，抑制不良反应，安全性更高，因此可作为黄嘌呤氧化酶抑制剂和降尿酸药物用于高尿酸血症和高尿酸血症引起的痛风或痛风并发症的治疗，给高尿酸血症患者和痛风患者带来更大益处。

实验例1：本发明的非布司他组合物对黄嘌呤氧化酶的体外抑制作用

为评价本发明的非布司他组合物对黄嘌呤氧化酶的影响，以100％非布司他为阳性对照组，将非布司他和植物多酚类化合物(市售的纯度大于98％的化合物1-5)按9.5：0.5、9：1、7：3、5：5、1：9的不同比例组成样品组来考察。

本实验研究体外对黄嘌呤氧化酶的影响，具体方法如下：

溶液配制：

磷酸盐缓冲溶液：称取19.48g的K₂HPO₄.3H₂O和1.99g的KH₂PO₄溶于500mL蒸馏水中，配成浓度为0.2mmol/L的磷酸盐缓冲溶液(pH＝7.5)；

黄嘌呤底物溶液：称取黄嘌呤15.2mg，溶解于250mL蒸馏水中，配成浓度为0.4mmol/L的黄嘌呤底物溶液；

黄嘌呤氧化酶溶液：取黄嘌呤氧化酶5U，用上述磷酸盐缓冲溶液稀释至160mL，配成浓度为80U/L的黄嘌呤氧化酶溶液，4℃保存；

样品和阳性对照溶液：精密称取样品组(化合物1-5)、非布司他(作为阳性对照)，分别用二甲亚砜溶解、蒸馏水稀释，配成浓度为0.01-2μmol/L的不同浓度的溶液进行测试(其中二甲亚砜的最终浓度小于1％)。

抑制作用测试：

样品组测试：在2mL离心管中依次加入黄嘌呤底物溶液200μL、样品溶液100μL和黄嘌呤氧化酶溶液200μL，涡旋震荡5秒后置于25℃水浴锅中反应5分钟，反应完毕后加入1.5mL无水乙醇，涡旋震荡5秒终止反应。反应液经3500rpm离心5分钟，吸取200μL到1.5mL离心管中，用生化分析仪分别检测每个样品的UA值，每个样品平行操作三次取平均值。

空白对照组测试：在2mL离心管中依次加入黄嘌呤底物溶液200μL、磷酸盐缓冲溶液100μL和黄嘌呤氧化酶溶液200μL，同法检测空白对照组的UA值，平行操作三次取平均值。

阳性对照组测试：在2mL离心管中依次加入黄嘌呤底物溶液200μL、阳性对照溶液100μL和黄嘌呤氧化酶溶液200μL，同法检测阳性对照组的UA值，平行操作三次取平均值。

测试结果：

根据黄嘌呤氧化酶抑制率＝[(空白对照组UA值－样品组UA值)/空白对照组UA值]*100，计算抑制率；酶促反应中的药物浓度C＝C₀*0.1/3.1(C₀为样品溶液浓度)；将药物浓度与抑制率进行回归，得回归方程；根据回归方程计算抑制率为50％时的C值，即半数抑制浓度IC₅₀，结果如表1所示。

表1化合物1-4对黄嘌呤氧化酶的体外抑制作用(IC₅₀:mg/ml)

本发明所述非布司他组合物对黄嘌呤氧化酶显示出较强的体外抑制作用，但随着植物多酚含量的增加，抑制作用有所下降。然而其中包含化合物3的非布司他组合物随着植物多酚含量的增加，活性下降不明显，对黄嘌呤氧化酶的抑制作用与阳性药非布司他相当，可作为潜在的黄嘌呤氧化酶抑制剂用于高尿酸血症的治疗。

实验例2：本发明的非布司他组合物对降低高尿酸血症小鼠的血清尿酸水平的影响

本实施例通过动物实验验证本发明的非布司他组合物对高尿酸血症小鼠的影响，以100％非布司他为阳性对照组，非布司他和植物多酚类化合物(化合物1，化合物3)按不同比例组成样品组来考察。具体组成如下：

组合物1(化合物1按照灌胃剂量20mg/kg+非布司他2mg/kg)；

组合物2(化合物1按照灌胃剂量30mg/kg+非布司他1.5mg/kg)；

组合物3(化合物1按照灌胃剂量40mg/kg+非布司他1mg/kg)；

组合物4(化合物3按照灌胃剂量20mg/kg和非布司他2mg/kg)；

组合物5(化合物3按照灌胃剂量30mg/kg和非布司他1.5mg/kg)；

组合物6(化合物3按照灌胃剂量40mg/kg和非布司他1mg/kg)

取健康雄性KM小鼠80只，体重为15-18g，由上海灵畅生物科技有限公司提供；按每笼5只进行分笼处理后，在苏州凯祥生物科技有限公司的屏障系统内适应性饲养4天，从80只小鼠中选取体重集中的60只小鼠按体重随机平均分为6组，每组10只，分别为空白对照组，高尿酸血症模型组，阳性对照组，受试样品组。

高尿酸血症的造模：

适应期过后随即对小鼠进行灌胃给药，每天上午灌胃1次，其中受试组合物(组合物1-6)用纯水进行混悬，按照设定剂量进行灌胃；阳性对照非布司他用纯水进行混悬，按照2.5mg/kg进行灌胃；空白对照组和高尿酸血症模型组均用纯水灌胃进行对照，连续灌胃7天；

在第7天上午灌胃0.5小时后对小鼠进行腹腔注射造模，其中空白对照组腹腔注射0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液；高尿酸血症模型组、阳性对照组和受试化合物组注射氧嗪酸钾(OA)，用CMC-Na溶液进行溶解，注射量均为300mg/kg体重；

腹腔注射1.5小时后摘除小鼠的眼球进行采血，采血容量不低于0.5mL，血样采集后于室温放置约1小时，待血液完全凝固后于3500rpm/4℃条件下离心10分钟，取血清在同等条件下复离5分钟，而后取0.2mL血清使用生化分析仪检测UA值；

用Excel和SPSS对数据进行统计分析，计算平均数和SD，经单因素方差分析后比较各实验组的组间差异，与空白对照组相比，高尿酸血症模型组、阳性对照组和受试化合物组小鼠的血清尿酸水平显著提高，有显著性差异，表明造模成功。

结果如表2所示：

表2化合物1，3跟非布司他组合物对高尿酸血症小鼠血清尿酸，丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酐(CRE)水平的影响

(###表示和空白对照组相比P<0.001；**表示和模型组相比P<0.01；***表示和模型组相比P<0.001，^◆◆表示跟阳性对照相比有显著差异P<0.05)。

由表2结果看出，本发明所述非布司他组合物在各种用量比例下均显示出较强降尿酸作用，跟未降低剂量的阳性对照非布司他(2.5mg/kg灌胃剂量)无显著性差异。但是从安全性上来讲，用化合物1，化合物3跟非布司他进行组合，降低非布司他的灌胃剂量，可以显著降低由其导致的CRE和ALT的升高，显示出比非布司他单独用药更高的安全性。

显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (13)

1.一种与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分，其特征在于，所述活性成分为具有如式(I)所示结构的植物多酚及其药学上可接受的盐：

其中：

R₁选自-H、-OH或＝O中的一种；

R₂选自-H，-OH或-O-糖苷链中的一种；

R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉、R₁₀彼此独立的选自-H、-OH、羧基、酯基、-OCH₃，-OCH₂CH₃，-O-糖苷链、取代或未取代的C₁-C₁₀烃基中的一种。

2.根据权利要求1所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分，其特征在于，所述-O-糖苷链为1-5个糖组成的-O-糖苷链。

3.根据权利要求1所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分，其特征在于，所述活性成分具有如下所示结构：

4.根据权利要求1-3任一所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分，其特征在于，所述高尿酸血症药物为非布司他。

5.一种用于治疗高尿酸血症药物或者保健品，其特征在于，包含权利要求1-4中任一所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分。

6.一种权利要求1-4中任一所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分在制备治疗高尿酸血症药物及保健品中的用途。

7.一种非布司他组合物，其特征在于，包括非布司他以及权利要求1-4中任一所述的与高尿酸血症药物具有协同作用的活性成分。

8.根据权利要求7所述的非布司他组合物，其特征在于，所述活性成分在所述非布司他组合物中所占的重量比大于或者等于0.5％。

9.根据权利要求8所述的非布司他组合物，其特征在于，所述非布司他组合物还包括药学上可以接受的载体。

10.一种用于治疗高尿酸血症的药物，其特征在于，所述药物中含有权利要求7-9中任一所述的非布司他组合物，所述药物为向所述非布司他组合物中加入常规辅料按照常规工艺制成临床上可接受的胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、膏剂、合剂、混悬剂。

11.一种权利要求7-9中任一所述的非布司他组合物在制备治疗高尿酸血症药物及保健品中的用途。

12.根据权利要求11所述用途，其特征在于，所述高尿酸血症包括高尿酸血症引起的痛风及痛风并发症。

13.根据权利要求12所述用途，其特征在于，所述痛风包括急性痛风及慢性痛风；所述痛风并发症包括痛风性关节炎、痛风发作、痛风性肾病、尿酸性肾石病。