CN106172255B - 一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法 - Google Patents
一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106172255B CN106172255B CN201610630381.0A CN201610630381A CN106172255B CN 106172255 B CN106172255 B CN 106172255B CN 201610630381 A CN201610630381 A CN 201610630381A CN 106172255 B CN106172255 B CN 106172255B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- leech
- prime
- hibernation
- content
- days
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000545744 Hirudinea Species 0.000 title claims abstract description 150
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 230000006266 hibernation Effects 0.000 claims abstract description 79
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 241000237903 Hirudo Species 0.000 claims description 33
- 244000184734 Pyrus japonica Species 0.000 claims description 31
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 6
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 abstract description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 24
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 16
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N hirudin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(OS(O)(=O)=O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H]2CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2)=O)CSSC1)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(C)C)[C@@H](C)O)CSSC1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N 0.000 description 6
- 102000007625 Hirudins Human genes 0.000 description 5
- 108010007267 Hirudins Proteins 0.000 description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 5
- 229940006607 hirudin Drugs 0.000 description 5
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000237678 Hirudinidae Species 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010053615 Thermal burn Diseases 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000258623 Whitmania pigra Species 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- QEWYKACRFQMRMB-UHFFFAOYSA-N fluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)CF QEWYKACRFQMRMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- 206010000077 Abdominal mass Diseases 0.000 description 1
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 206010013786 Dry skin Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 102000005431 Molecular Chaperones Human genes 0.000 description 1
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 241000124033 Salix Species 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- 241000964941 Whitmania Species 0.000 description 1
- 241001431359 Whitmania acranulata Species 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 208000011279 abdominal lump Diseases 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000002300 anti-fibrosis Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxomagnesium;hydrate Chemical compound O.[Mg]=O.[Mg]=O.[Mg]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000008338 local blood flow Effects 0.000 description 1
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 125000001042 pteridinyl group Chemical class N1=C(N=CC2=NC=CN=C12)* 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000011003 system suitability test Methods 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/033—Rearing or breeding invertebrates; New breeds of invertebrates
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法,属于农副产品养殖领域。本发明方法打破了自然条件的限制,首次采用人工冬眠的方式刺激活体水蛭产生更多水蛭甲素。通过模拟冬眠环境使水蛭处于冬眠状态,从而提高了水蛭体内水蛭甲素的含量,可为市场提供更优质的水蛭药材。本发明水蛭人工冬眠方法操作简单,成本低廉,条件可控,具很强的实用性。
Description
技术领域
本发明涉及一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法,属于农副产品养殖领域。通过模拟冬眠环境使水蛭活体处于冬眠状态,从而提高了水蛭体内水蛭甲素的含量,可为市场提供更优质的水蛭药材。
背景技术
水蛭为水蛭科动物蚂蟥Whitmania pigra Whitman、水蛭Hirudo nipponicaWhitman或柳叶蚂蟥Whitmania acranulata Whitman的干燥全体,夏、秋两季捕捉,用沸水烫死,晒干或低温干燥,其味咸、苦,性平,归肝经,有小毒。中医认为,水蛭具有破血通经,逐瘀消瘕的作用,在治疗中风偏瘫、跌打损伤、癥瘕痞块、血瘀经闭,以及高血压、血瘀、闭经等方面具有显著的疗效。现代研究表明,水蛭不仅具有抗凝、溶栓、抗纤维化的作用,而且还可以改善局部血液循环、提高免疫力、改善肾功能、促进血管新生等,对肿瘤细胞也有一定抑制及杀灭作用,在临床上有着广泛的应用。
研究表明,水蛭中主要含有两类成分,一类是以水蛭素为代表的多肽及蛋白类大分子成分,另一类是蝶啶类等小分子活性成分。近年来,国内外许多学者对水蛭的药理作用及活性成分进行了深入研究,但这些研究多数集中在水蛭素类的多肽成分,对水蛭中小分子活性成分的研究鲜有报道。水蛭素在干燥状态下稳定存在,但在80℃下加热15min后即被破坏,且水蛭素仅存在于水蛭的唾液腺中,含量甚微。
应该注意到,临床使用的水蛭大多为干品及其炮制品,炮制方法包括清炒、砂烫、石灰炒、滑石粉烫、蜜炙、米炒等。研究表明,水蛭在炮制或干燥过程中水蛭素已被破坏,水蛭素仅存在其鲜品中,因此中药水蛭所具有的破血逐瘀作用,是否建立在水蛭素的基础上,尚需深入研究。基于此,发明人对水蛭中的小分子成分进行了研究,发现了具有抗缺氧活性的蝶啶类杂环新化合物,水蛭甲素即是其中一个代表。
《中国药典》2015年版一部规定水蛭的捕捉时间为夏、秋二季,用沸水烫死,晒干或低温干燥。发明人意外发现,捕捉后的活体水蛭经低温冷藏后,其水蛭甲素含量会大幅升高,究其原因是水蛭在环境温度低于10℃时会进入冬眠状态,冬眠状态的活体水蛭在受到外界低温刺激的情况下,机体在本能地适应外部环境的过程中,其体内水蛭甲素含量也会升高。为提高夏、秋二季捕捉的水蛭中水蛭甲素含量,发明人采用人工冬眠的方法,提高了水蛭中水蛭甲素的含量,可为市场提供更优质的水蛭药材。
发明内容
本发明的目的是提供一种提高水蛭中水蛭甲素含量的方法,具体是将水蛭置于低温清水中,使水蛭人工冬眠,以提高水蛭体内水蛭甲素含量。动物的冬眠行为是一项对付不利环境的保护性行动,引起动物冬眠的主要因素是环境温度的降低。当周围环境温度在15℃以下时,即可引起变温动物的冬眠现象。
本发明一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法,包括以下步骤:
1)将活体水蛭置于低温清水中人工冬眠;
2)每隔3-8天更换一次低温清水。
优选地,步骤1)所述水蛭为水蛭科动物蚂蟥(Whitmania pigra Whitman)、水蛭科动物日本医蛭(Hirudo nipponica Whitman)。
优选地,步骤1)所述低温清水的温度为0℃~10℃,最优为0℃~5℃时。
优选地,步骤1)所述人工冬眠的时间为5~90天,最佳为15~45天。
步骤2)中,所述每隔3-8天更换一次低温清水是指同温度的低温清水,目的是提供充足的氧气,保证水蛭的存活。
优选地,步骤2)每隔5天更换一次低温清水。
与现有技术相比,本发明方法打破了自然条件的限制,首次采用人工冬眠的方式刺激活体水蛭产生更多的有效成分,尤其是产生更多的水蛭甲素。用本方法对活体水蛭进行人工冬眠后,其水蛭干品中水蛭甲素的含量比没有经过人工冬眠的同一批次水蛭干品最多可提高0.178mg/g,从而大幅提高了水蛭药材的品质。本发明水蛭人工冬眠方法操作简单,成本低廉,条件可控,具很强的实用性。
附图说明
图1为水蛭甲素对照品的高效液相色谱图;
图2为水蛭样品的高效液相色谱图。
具体实施方式
以下通过具体实施方式对本发明作进一步说明,但这并非是对本发明的限制,本领域技术人员根据本发明的基本思想,可以做出各种修改或改进,但只要不脱离本发明的基本思想,均在本发明的范围之内。
实施例1 蚂蝗人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、蚂蝗人工冬眠
1)将活体蚂蝗置于5℃的清水中人工冬眠30天;
2)每隔3天更换一次温度为5℃的清水。
将冬眠后的蚂蝗加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.05%三氟乙酸溶液=8:92为流动相;检测波长为354nm。理论板数按水蛭甲素峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 精密称取于60℃干燥至恒重的水蛭甲素对照品适量,精密称定,用流动相制成每1ml约含0.005mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品适量,打粉过40目筛,称取2.0g,置于50ml容量瓶中,加入50%甲醇定容至刻度,超声(功率250W,频率50kHz)提取30min,冷却后用甲醇补足损失,离心(10000rpm)10min,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl,注入液相色谱仪,测定,用外标法计算,即得。水蛭甲素对照品及样品测定的HPLC图谱分别见图1、图2。
经测定,样品中水蛭甲素的含量为0.297mg/g。
实施例2 日本医蛭人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、日本医蛭人工冬眠
1)将活体日本医蛭置于0℃的清水中人工冬眠5天;
2)每隔3天更换一次温度为0℃的清水。
将冬眠后的日本医蛭加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.172mg/g。
实施例3 日本医蛭人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、日本医蛭人工冬眠
1)将活体日本医蛭置于2℃的清水中人工冬眠10天;
2)每隔4天更换一次温度为2℃的清水。
将冬眠后的日本医蛭加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.213mg/g。
实施例4 蚂蝗人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、蚂蝗人工冬眠
1)将活体蚂蝗置于4℃的清水中人工冬眠30天;
2)每隔5天更换一次温度为4℃的清水。
将冬眠后的蚂蝗加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.301mg/g。
实施例5 蚂蝗人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、蚂蝗人工冬眠
1)将活体蚂蝗置于3℃的清水中人工冬眠12天;
2)每隔4天更换一次温度为3℃的清水。
将冬眠后的蚂蝗加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.238mg/g。
实施例6 日本医蛭人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、日本医蛭人工冬眠
1)将活体日本医蛭置于7℃的清水中人工冬眠30天;
2)每隔6天更换一次温度为7℃的清水。
将冬眠后的日本医蛭加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.312mg/g。
实施例7 蚂蝗人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、蚂蝗人工冬眠
1)将活体蚂蝗置于10℃的清水中人工冬眠45天;
2)每隔7天更换一次温度为10℃的清水。
将冬眠后的蚂蝗加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.338mg/g。
实施例8 日本医蛭人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、日本医蛭人工冬眠
1)将活体日本医蛭置于6℃的清水中人工冬眠40天;
2)每隔3天更换一次温度为6℃的清水。
将冬眠后的日本医蛭加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.326mg/g。
实施例9 日本医蛭人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、日本医蛭人工冬眠
1)将活体日本医蛭置于9℃的清水中人工冬眠50天;
2)每隔8天更换一次温度为9℃的清水。
将冬眠后的日本医蛭加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.342mg/g。
实施例10 蚂蝗人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、蚂蝗人工冬眠
1)将活体蚂蝗置于10℃的清水中人工冬眠75天;
2)每隔5天更换一次温度为10℃的清水。
将冬眠后的蚂蝗加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.356mg/g。
实施例11 蚂蝗人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、蚂蝗人工冬眠
1)将活体蚂蝗置于5℃的清水中人工冬眠80天;
2)每隔4天更换一次温度为5℃的清水。
将冬眠后的蚂蝗加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.362mg/g。
实施例12 蚂蝗人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、蚂蝗人工冬眠
1)将活体蚂蝗置于8℃的清水中人工冬眠90天;
2)每隔3天更换一次温度为8℃的清水。
将冬眠后的蚂蝗加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.367mg/g。
实施例13 日本医蛭人工冬眠及水蛭甲素含量的测定
1、日本医蛭人工冬眠
1)将活体活体日本医蛭置于10℃的清水中人工冬眠60天;
2)每隔5天更换一次温度为10℃的清水。
将冬眠后的日本医蛭加工成干品,备用。
2、水蛭甲素含量的测定
按实施例1所述的HPLC条件进行测定,样品中水蛭甲素的含量为0.350mg/g。
实施例14 不同人工冬眠时间蚂蝗中水蛭甲素含量比较
1、试验材料
同一批活体蚂蝗,平均分成7份,每份1.0kg。
2、试验方法
将上述活体蚂蝗分别放于4℃清水中人工冬眠0天、10天、20天、30天、40天、50
天和60天,每隔6天更换一次温度为4℃的清水,人工冬眠结束按相同的方法加工成
干品,备用。
3、水蛭甲素含量的测定
取上述7份蚂蝗干品样品,每份随机抽取3份平行样,按实施例1所述的HPLC条件测定其水蛭甲素的含量,结果见表1。
表1不同人工冬眠时间蚂蝗中水蛭甲素含量比较
由表1可以看出,人冬眠时间越长,指标成分水蛭甲素的含量越高,但在40天以后提高的速度放缓,考虑生产效率及生产时间成本,一般人工冬眠时间控制在60天(2个月)以内比较适宜。
实施例15 不同人工冬眠时间日本医蛭中水蛭甲素含量比较
1、试验材料
同一批活体日本医蛭,平均分成7份,每份1.0kg。
2、试验方法
将上述活体日本医蛭分别放于7℃清水中人工冬眠0天、5天、10天、20天、30天、60天和80天,每隔4天更换一次温度为7℃的清水,人工冬眠结束按相同的方法加工成干品,备用。
3、水蛭甲素含量的测定
取上述7份日本医蛭干品样品,每份随机抽取3份平行样,按实施例1所述的HPLC条件测定其水蛭甲素的含量,结果见表2。
表2不同人工冬眠时间日本医蛭中水蛭甲素含量比较
由表2可以看出,人冬眠时间越长,指标成分水蛭甲素的含量越高,但在40天以后提高的速度放缓,考虑生产效率及生产时间成本,一般人工冬眠时间控制在60天(2个月)以内比较适宜。
Claims (2)
1.一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将水蛭置于0-5℃的低温清水中人工冬眠15-45天;
2)每隔5天更换一次低温清水。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的水蛭包括蚂蝗和日本医蛭。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610630381.0A CN106172255B (zh) | 2016-08-03 | 2016-08-03 | 一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610630381.0A CN106172255B (zh) | 2016-08-03 | 2016-08-03 | 一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106172255A CN106172255A (zh) | 2016-12-07 |
CN106172255B true CN106172255B (zh) | 2017-06-30 |
Family
ID=57498398
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610630381.0A Active CN106172255B (zh) | 2016-08-03 | 2016-08-03 | 一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106172255B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106581076A (zh) * | 2016-12-12 | 2017-04-26 | 王家龙 | 富含活性细胞的水蛭干加工方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102342263A (zh) * | 2011-08-10 | 2012-02-08 | 重庆多普泰制药有限公司 | 一种改善水蛭体内水蛭素含量的方法 |
CN103190380A (zh) * | 2013-04-16 | 2013-07-10 | 金成烈 | 一种医用水蛭的饲养方法 |
CN105594666A (zh) * | 2015-12-25 | 2016-05-25 | 贵州信邦制药股份有限公司 | 一种快速增加水蛭抗凝血酶活性的养殖方法 |
CN105684996A (zh) * | 2016-02-05 | 2016-06-22 | 吴铁明 | 一种医用级吸血水蛭养殖方法 |
-
2016
- 2016-08-03 CN CN201610630381.0A patent/CN106172255B/zh active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102342263A (zh) * | 2011-08-10 | 2012-02-08 | 重庆多普泰制药有限公司 | 一种改善水蛭体内水蛭素含量的方法 |
CN103190380A (zh) * | 2013-04-16 | 2013-07-10 | 金成烈 | 一种医用水蛭的饲养方法 |
CN105594666A (zh) * | 2015-12-25 | 2016-05-25 | 贵州信邦制药股份有限公司 | 一种快速增加水蛭抗凝血酶活性的养殖方法 |
CN105684996A (zh) * | 2016-02-05 | 2016-06-22 | 吴铁明 | 一种医用级吸血水蛭养殖方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN106172255A (zh) | 2016-12-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103800390B (zh) | 具有增强免疫力及保肝功能的保健品及其制备方法与应用 | |
CN103127215A (zh) | 具有抗关节炎活性的到手香萃取物 | |
CN106749729B (zh) | 一种鹿药多糖及其制备方法和应用 | |
CN106692342A (zh) | 一种解酒中药组合物及应用 | |
CN106172255B (zh) | 一种提高水蛭体内水蛭甲素含量的方法 | |
CN103830301A (zh) | 一种具有益肝作用的菊花及其应用 | |
CN103584091B (zh) | 一种具有提高免疫力、降血脂功能的保建食品及其制备方法 | |
CN104491048B (zh) | 一种枇杷叶总倍半萜苷提取物及其制备方法与应用 | |
CN104523933B (zh) | 一种治疗湿热黄疸症的中药及其制法与检测方法及其应用 | |
CN106551211A (zh) | 一种鹰嘴豆豆芽植物饮料及其制备方法 | |
JP7391204B2 (ja) | ワモンゴキブリの抽出物、製剤、調製方法およびその使用 | |
CN104116026A (zh) | 盐制巴戟天多糖在制备具有辅助抑制前列腺癌功效的功能食品中的应用 | |
CN110404021B (zh) | 一种黄精制剂及制备方法 | |
CN107056959A (zh) | 菊芋中抗hsv‑1、rsv、ev‑71成分及制备 | |
CN103599259B (zh) | 一种具有降血糖作用的傣药提取物制备及其应用 | |
CN106138240A (zh) | 一种荞麦总黄酮的提取方法 | |
CN106244462A (zh) | 一种灵芝菌丝体液体发酵培养方法 | |
CN102475201A (zh) | 一种具有保健功能的蛋白粉组合物 | |
CN105558350A (zh) | 一种含有中草药复合粗多糖的饲料及其制备方法 | |
CN107334946A (zh) | 一种石斛干细胞组合物及其口服制剂和应用 | |
CN108685978A (zh) | 一种用于提高免疫力的中药提取物及其制备方法 | |
CN104122347A (zh) | 一种药物刺激性的质谱检测方法 | |
CN116850231B (zh) | 一种用百合炮制生地黄的方法 | |
CN108743693A (zh) | 一种仔猪保健促生长中药组合物、制备方法及其应用 | |
CN107349338A (zh) | 一种石斛干细胞组合物及其口服制剂和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |