CN102475201A - 一种具有保健功能的蛋白粉组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有保健功能的蛋白粉组合物,该组合物针对免疫力低下人群,选择大豆分离蛋白、乳清蛋白为主要原料,同时添加辅料果糖、磷酸三钙和黄原胶制备而成的具有增强免疫力保健功能的蛋白粉。
Description
技术领域
本产品的研发目的是依据现代营养免疫的研究理论,针对免疫力低下人群,选择大豆分离蛋白、乳清蛋白为主要原料,同时添加辅料果糖、磷酸三钙和黄原胶,研制开发出具有增强免疫力保健功能的蛋白粉。
背景技术
大豆蛋白是营养价值最高的植物性蛋白质,而且豆类食物不含胆固醇,这是动物性食物所不具备的特点。但是大豆蛋白质有它的缺陷:蛋氨酸含量相对较少。因此,整粒大豆的氨基酸评分大约0.6-0.7。
乳清蛋白的必需氨基酸种类齐全,比例合理,比大豆蛋白更容易消化、吸收和利用,营养价值也相对高些。一般来说,乳清蛋白中的蛋白质,其氨基酸评分均在0.9-1.0的水平。
如果在大豆蛋白中添加适量的乳清蛋白后,大豆分离蛋白的氨基酸评分可达1.0,其营养价值与蛋、奶类蛋白质一致,非常接近标准的氨基酸模式,很容易被人体吸收利用。也就是说对优质的动物性蛋白和植物性蛋白进行了科学搭配才是最完美的全价蛋白质。此外,将动物蛋白与植物蛋白混合,因它们的消化吸收速度不同,所以能为人体提供稳定持续的氨基酸供给,效果之强甚至超过了纯乳清蛋白。
本蛋白粉同时添加果糖作为甜味剂,磷酸三钙作为抗结剂,黄原胶作为增稠剂,使产品整体具有低胆固醇、低糖、低热量、不含香精、无异味、口感好、溶解性好的特点。
发明内容
本发明提供一种具有保健功能的蛋白粉组合物,该组合物由以下重量百分比配比的原料制备而成:
大豆分离蛋白 4-95%,
乳清蛋白 4-94%,
果糖 0.5-30%,
磷酸三钙 0.1-10%,
黄原胶 0.1-20%。
优选的,该组合物由以下重量百分比配比的原料制备而成:
大豆分离蛋白 50-95%,
乳清蛋白 4-20%,
果糖 0.5-10%,
磷酸三钙 0.1-10%,
黄原胶 0.1-10%。
最优选的,该组合物由以下重量百分比配比的原料制备而成:
大豆分离蛋白 87%,
乳清蛋白 9%,
果糖 2.8%,
磷酸三钙 0.7%,
黄原胶 0.5%。
作为工业生产的投料,可以以最优选的配比进行投料,如用以下比例投料:
物料名称 投料量(kg)
大豆分离蛋白 8.7
乳清蛋白 0.9
果糖 0.28
磷酸三钙 0.07
黄原胶 0.05
总计 10
以上原料制成1000支,每支10g。
本发明还提供本发明的蛋白粉组合物的制备方法,包括将上述原料进行混合的步骤。优选的本发明的制备方法,包括以下步骤:
步骤1,原辅料的前处理
将原辅料在一般生产区拆除外包装后进入10万级洁净区。
将大豆分离蛋白、乳清蛋白、果糖、磷酸三钙、黄原胶分别过80目筛得细粉,备用。
步骤2,混合
混合步骤一:按照配方量比例称取过筛后的果糖和大豆分离蛋白以等量递增法进行混合,所得混合粉A备用。
混合步骤二:按照配方量比例称取过筛后的黄原胶与磷酸三钙于混合机中混合20分钟所得混合粉B备用。
混合步骤三:按照配方比例称取过筛后的乳清蛋白与混合粉B以等量递增法进行混合,所得混合粉C备用。
混合步骤四:混合粉A与混合粉C以等量递增法进行混合,所得总混合粉备用。以上制备得到的本发明的蛋白粉组合物根据需要可进行包装,如采用灌装:将总混合粉在粉剂包装机上进行灌装、热封,产品包装规格10g/支、40支/盒。
(等量递增混合是为了混合均匀)
本发明的蛋白粉组合物可以根据需要制备成任何可服用的形式,如片剂、胶囊剂、口含剂、颗粒剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂等,优选的是口服粉剂,必要时可加入辅料添加成分。
本发明的蛋白粉组合物具有意料不到的有益效果,即具有增强免疫力功能,以下通过实验数据说明本发明的有益效果:
本发明的蛋白粉组合物增强免疫力作用动物实验检验报告
1 材料和方法
1.1 样品:蛋白粉(根据本发明实施例1方法制备的蛋白粉组合物),所送样品为乳白色粉末,人拟用剂量为10g/60kg·BW·日,由金士力佳友(天津)有限公司提供。
1.2 实验动物:18~22g雌性SPF级昆明种小鼠160只,由中国医学科学院实验动物研究所繁育场提供,合格证号:SCXK-(京)2004-0001-0111732。
1.3 实验动物饲养环境:饲料由军科院实验动物中心提供。SPF级实验动物室,合格证号:津实动设施准第003号。温度:20~25℃,湿度:40~70%RH。
1.4 剂量选择:蛋白粉,人拟用剂量为10g/60kg·BW·日,本试验设计了低、中、高三个剂量组,分别为0.42g/kg·BW、0.84g/kg·BW、1.67g/kg·BW,即相当于人拟用剂量的2.5倍、5倍、10倍。分别称量取蛋白粉2.10g、4.20g、8.40g,均加蒸馏水至100mL,配制成粘稠状乳液,按0.2ml/10g.BW灌胃,对照组给予等量蒸馏水,每日一次,连续30天,末次给药后24小时测定各项指标。将实验动物分成4个大组,每组40只,然后每组40只动物又分成4个小组,每组10只。其中1组进行HC50测定、抗体生成细胞检测、迟发型变态反应(足跖增厚法);2组进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细包试验、脏/体比值测定;3组进行碳廓清试验。4组进行小鼠淋巴细胞转化试验、NK细胞活性测定试验。
1.5仪器与试剂:洁净工作台、无菌解剖器材、RPMI1640细胞培养液、刀豆蛋白、异丙醇、MTT、游标卡尺、SRBC、微量注射器、都氏试剂、印度墨汁、鸡红细胞、LDH基液、计时器、血色素吸管、722型可见分光光度计、离心机、生理盐水、Na2CO3、24孔培养板、二氧化碳培养箱、酶标仪等。
1.6实验方法
1.6.1脏器/体重比值测定:给药30天后,称取脾脏、胸腺,计算脏/体比。
1.6.2迟发型变态反应(足跖增厚法):给药30天,第25天腹腔注射2% SRBC,免疫4天后,测量左后足跖部厚度,同时在测量部位注射20% SRBC 20ul,24小时后再次测量。
1.6.3 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法):给药30天,无菌取脾,制成单细胞悬液,Hank’s液洗3遍,调整细胞浓度为3×106个/ml。将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中,每孔1ml,一孔加75ulConA液(100ug/ml),另一孔为对照,置5%CO2孵箱中培养72h。培养结束前4h,每孔吸去上清液0.7ml,加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液,同时加入MTT(5mg/ml)50ul/孔,继续培养4h。培养结束后,每孔加入1ml酸性异丙醇,吹打均匀,使紫色结晶完全溶解,以570nm波长测定光密度值。
1.6.4半数溶血值(HC50)的测定:给药30天,于第25天腹腔注射2%SRBC,免疫5天后,摘眼球收集血清,试管内加入300倍稀释的血清1ml、10%SRBC0.5ml、补体1ml,37℃水浴20分钟,冰浴终止反应,离心,取上清1ml,加都氏试剂3ml,10分钟后540nm比色。
1.6.5抗体生成细胞检测:给药30天,于第25天腹腔注射2% SRBC,免疫5天后,脱臼处死,取脾,200目筛网过滤,用Hanks液洗3次,每次1000r/min离心10min,将细胞悬浮于5mlRPM1640培养液中。将表层培养基加热溶解,45℃水浴保温,与等量2倍浓度Hanks液混合,分装小试管,每管0.5ml,加入50ul 10% SRBC,20ul脾细胞悬液,混匀,倒片,二氧化碳培养箱中培养1小时,加入用SA缓冲液稀释的补体(1∶10),继续培养1小时,计数溶血空斑数。
1.6.6小鼠碳廓清实验:给药30天后,尾静脉注射3.5倍稀释的印度墨汁(每10克体重0.1ml),分别于第2、10分钟内眦取血20ul,加入到3ml 1%碳酸钠溶液中,600nm比色。另取肝、脾称重,计算吞噬指数。
1.6.7小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法):给药30天后,每鼠腹腔注射20%鸡红细胞悬液1ml,间隔30min,颈椎脱臼处死动物,将其仰位固定于鼠板上,正中剪开腹壁皮肤,经腹腔注入生理盐水2ml,转动鼠板1min,吸出腹腔洗液1ml,平均分滴于2片载玻片上,放入垫有湿纱布的搪瓷盘内,于37℃孵箱温育30min,孵毕,生理盐水漂洗,晾干,以1∶1丙酮甲醇溶液固定,4%Giemsa染色3min。计数吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数及被吞噬的巨噬细胞数。
1.6.8 NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法):试验前24h将YAC-1细胞(靶细胞)进行传代培养,用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为4×105个/ml。无菌取脾,制成单细胞悬液,Hank’s液洗3遍,调整细胞浓度为2×107个/ml。取靶细胞和效应细胞各100ul(效靶比50∶1),加入U型96孔培养板,靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100ul,靶细胞最大释放孔加靶细胞和1%NP40各100ul,均设三个复孔,于37℃、5%CO2培养箱中培养4h,每孔吸取上清液100ul置平底96孔培养板中,同时加入LDH基液100ul,反应3min,每孔加入1mol/l的HCl30ul,在酶标仪492nm测定光密度值。
1.7结果统计:实验数据用SPSS11.5 for Windows进行统计检验,对照组与实验组采用方差分析及两两检验,如方差不齐者采用数据转换,转换后仍不齐则采用非参数统计。
2结果:
2.1蛋白粉对小鼠体重的影响(见表1-4)
表1 蛋白粉对免疫1组小鼠体重的影响(均值±标准差,g)
表2 蛋白粉对免疫2组小鼠体重的影响(均值±标准差,g)
表3 蛋白粉对免疫3组小鼠体重的影响(均值±标准差,g)
表4 蛋白粉对免疫4组小鼠体重的影响(均值±标准差,g)
由表1-4可见,经口给予不同剂量的蛋白粉30天后,各组动物生长活动良好,各剂量组动物增重与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。
2.2蛋白粉对小鼠脏器/体重比值的影响(见表5)
表5 蛋白粉对小鼠脏器/体重比值的影响(均值±标准差)
由表5可见,各剂量组小鼠脾脏、胸腺/体重比值与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。
2.3蛋白粉对小鼠细胞免疫功能的影响
2.3.1蛋白粉对小鼠迟发型变态反应的影响(足跖增厚法)(见表6)
表6 蛋白粉对小鼠迟发型变态反应(足跖增厚法)的影响(均值±标准差)
由表6可见,高剂量组小鼠攻击前后足跖厚度差值高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。
2.3.2蛋白粉对ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)的影响(见表7)
表7 蛋白粉对ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)的影响(均值±标准差)
由表7可见,中剂量组的光密度差值高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。
2.4蛋白粉对体液免疫的影响
2.4.1蛋白粉对小鼠半数溶血值(HC50)的影响(见表8)
表8 蛋白粉对小鼠半数溶血值(HC50)的影响(均值±标准差)
由表8可见,中、高剂量组小鼠半数溶血值(HC50)高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。
2.4.2蛋白粉对小鼠抗体生成细胞试验的影响(见表9)
表9 蛋白粉对小鼠抗体生成细胞的影响(均值±标准差)
由表9可见,高剂量组小鼠抗体生成细胞数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
2.5蛋白粉对单核-巨噬细胞功能的影响
2.5.1蛋白粉对小鼠碳廓清试验的影响(见表10)
表10 蛋白粉对小鼠碳廓清试验的影响(均值±标准差)
由表10可见,三个剂量组的吞噬指数与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。
2.5.2蛋白粉对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验的影响(见表11)
表11 蛋白粉对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验的影响(均值±标准差)
由表11可见,三个剂量组的吞噬百分率及吞噬指数与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。
2.6蛋白粉NK细胞活性的影响(见表12)
表12 蛋白粉对小鼠NK细胞活性的影响(乳酸脱氢酶测定法)(均值±标准差)
由表12可见,高剂量组NK细胞活性高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)
3小结:
经口给予不同剂量的蛋白粉30天后,各组动物生长活动正常。迟发型变态反应(足跖增厚法)中,高剂量组小鼠攻击前后足跖厚度差值高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)中,中剂量组的光密度差值高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);小鼠半数溶血值(HC50)测定中,中、高剂量组小鼠半数溶血值(HC50)高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);抗体生成细胞检测中,高剂量组小鼠抗体生成细胞数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);NK细胞活性试验中,高剂量组NK细胞活性高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);其它各项试验均未见免疫抑制现象。检验结果表明,本样品具有增强免疫力功能作用。
具体实施方式:
以下通过实施例进一步说明本发明,但不作为对本发明的限制。
实施例1,
物料名称 投料量(kg)
大豆分离蛋白 8.7
乳清蛋白 0.9
果糖 0.28
磷酸三钙 0.07
黄原胶 0.05
总计 10
以上原料可制成1000袋粉剂,每袋10g。
制备方法
1.原辅料的前处理
1.1将原辅料在一般生产区拆除外包装后进入10万级洁净区。
1.2将大豆分离蛋白、乳清蛋白、果糖、磷酸三钙、黄原胶分别过80目筛得细粉,备用。
2.混合
2.1混合步骤1:按照配方量比例称取过筛后的果糖和大豆分离蛋白以等量递增法进行混合,所得混合粉A备用。
2.2混合步骤2:按照配方量比例称取过筛后的黄原胶与磷酸三钙于混合机中混合20分钟所得混合粉B备用。
2.3混合步骤3:按照配方比例称取过筛后的乳清蛋白与混合粉B以等量递增法进行混合,所得混合粉C备用。
2.4混合步骤4:混合粉A与混合粉C以等量递增法进行混合,所得总混合粉备用。
3.灌装:将总混合粉在粉剂包装机上进行灌装、热封,产品包装规格10g/支、40支/盒。
4.质量检验:按照企业生产标准检验产品,合格后贴签。
5.成品入库:成品检验合格后,进入库房的检验合格区。
实施例2,
大豆分离蛋白 4%,
乳清蛋白 94%,
果糖 0.5,
磷酸三钙 0.5,
黄原胶 1.0。
制备方法同实施例1到所得总混合粉备用的步骤。
实施例3,
大豆分离蛋白 95%,
乳清蛋白 4%,
果糖 0.5%,
磷酸三钙 0.2%,
黄原胶 0.3%。
制备方法同实施例1到所得总混合粉备用的步骤。
实施例4,
大豆分离蛋白 50%,
乳清蛋白 20%,
果糖 10%,
磷酸三钙 10%,
黄原胶 10%。
制备方法同实施例1到所得总混合粉备用的步骤。
实施例5,
大豆分离蛋白 50%,
乳清蛋白 10%,
果糖 30%,
磷酸三钙 10%,
黄原胶 10%。
制备方法同实施例1到所得总混合粉备用的步骤。
实施例6,
颗粒剂
取实施例2-5任意一个蛋白粉组合物100份,加入1.5倍量的糊精,0.5%蔗糖,1.5%微晶纤维素,用适量乙醇溶解制成软材,制粒,60℃鼓风干燥,制粒,整粒,即得颗粒剂。
实施例7、滴丸
取实施例2-5任意一项蛋白粉组合物100份,加入1000份的聚乙二醇,混合均匀,熔融,上滴丸机,制成滴丸。
实施例8、口腔崩解片
取实施例2-5任意一项蛋白粉组合物100份,加入5%交联聚维酮,0.1%的硬脂酸镁,50%的微晶纤维素,用适量乙醇溶液制成软材,制粒,60℃鼓风干燥,制粒,整粒,压制成片,即得口腔崩解片。
实施例9、粉针剂
取实施例2-5任意一项蛋白粉组合物0.5份,葡萄糖4.5份、硫代硫酸钠0.9份和蒸馏水1ml,上述组分混合均匀后,冷冻干燥,分装500支,即得粉针剂。
实施例10、胶囊剂
取实施例2-5任意一项蛋白粉组合物100份,加入等量淀粉,蔗糖和硬脂酸镁,制粒,装入胶囊,即得胶囊剂。
实施例11、片剂
取实施例2-5任意一项蛋白粉组合物100份,与淀粉,羧甲基纤维素钠、滑石粉混合均匀,制粒,压片即得片剂。
实施例12、口服液
取实施例2-5任意一项药物活性物质2份,与糖浆4份、溶于100ml的纯净水中,均质,过滤,经过高温瞬时灭菌(135℃,4s)。无菌灌装、分装,制得口服液。
Claims (10)
1.一种具有保健功能的蛋白粉组合物,其特征在于,该组合物由以下重量百分比配比的原料制备而成:
大豆分离蛋白 4-95%,
乳清蛋白 4-94%,
果糖 0.5-30%,
磷酸三钙 0.1-10%,
黄原胶 0.1-20%。
2.根据权利要求1的蛋白粉组合物,其特征在于,该组合物由以下重量百分比配比的原料制备而成:
大豆分离蛋白 50-95%,
乳清蛋白 4-20%,
果糖 0.5-10%,
磷酸三钙 0.1-10%,
黄原胶 0.1-10%。
3.根据权利要求1的蛋白粉组合物,其特征在于,该组合物由以下重量百分比配比的原料制备而成:
大豆分离蛋白 87%,
乳清蛋白 9%,
果糖 2.8%,
磷酸三钙 0.7%,
黄原胶 0.5%。
4.根据权利要求1的蛋白粉组合物的制备方法,其特征在于,包括将原料进行混合的步骤。
5.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,原辅料的前处理
将大豆分离蛋白、乳清蛋白、果糖、磷酸三钙、黄原胶分别过80目筛得细粉,备用;步骤2,混合
混合步骤一:按照配方量比例称取过筛后的果糖和大豆分离蛋白以等量递增法进行混合,所得混合粉A备用;
混合步骤二:按照配方量比例称取过筛后的黄原胶与磷酸三钙于混合机中混合20分钟所得混合粉B备用;
混合步骤三:按照配方比例称取过筛后的乳清蛋白与混合粉B以等量递增法进行混合,所得混合粉C备用;
混合步骤四:混合粉A与混合粉C以等量递增法进行混合,所得总混合粉备用。
6.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,还包括以下步骤:蛋白粉组合物根据需要进行包装。
7.含有权利要求1所述的蛋白粉组合物的可服用的制剂形式。
8.根据权利要求7的制剂形式,其特征在于选自:片剂、胶囊剂、口含剂、颗粒剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂或粉剂。
9.根据权利要求7的制剂形式,其特征在于是口服粉剂,必要时可加入辅料添加成分。
10.根据权利要求1的蛋白粉组合物,具有增强免疫力的保健功能。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20120530 |