CN105455122A - 螺旋藻片及其制备方法与应用 - Google Patents
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Classifications
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Abstract
本发明公开了螺旋藻片及其制备方法与应用。本发明所提供的螺旋藻片，主要由如下重量百分比的原料制成：螺旋藻粉75％-85％、玛咖粉3％-5％、枸杞提取物1％-3％、玉竹提取物1％-3％、白芷提取物1％-3％、肉豆蔻提取物1％-3％、枳椇子提取物1％-3％、栀子提取物1％-3％、聚维酮K301％-3％、十二烷基硫酸钠0.1％-0.5％、聚乙二醇40000.1％-0.5％和硬脂酸镁1％-3％。本发明针对天然保健食品原料纤维素含量高，弹性大，可压性差，粒子内部结合不紧密，易出现松片的特点，着重研究在配方中加入改善可压性的赋形剂，并优化出配比组合，片剂表面光滑完整，硬度适中，崩解效果好，适用于规模化生产。
Description
技术领域
本发明涉及功能食品领域，特别涉及螺旋藻片及其制备方法与应用。
背景技术
螺旋藻属于蓝藻门颤藻科低等植物，是35亿年前的稀有藻类生物，经研究证明，它含有60-75％蛋白质、含人体所需的八种氨基酸、多种维生素、十多种微量元素和矿物质、低糖、低脂肪，并具有多种生物活性物质：藻兰蛋白、β-胡萝卜素、藻多糖、亚麻酸。如何有效地、科学地利用其所含有的营养成分，是目前关于螺旋藻研究的热点。
现有的螺旋藻片，由于螺旋藻含有大量蛋白质，水分难以浸透，食用后由于其难以崩解而造成吸收率低。
发明内容
本发明为了克服以上现有技术的不足，提供一种崩解度好，易吸收，生物利用度高的螺旋藻片及其制备方法。
本发明所提供的螺旋藻片，主要由如下重量百分比的原料制成：螺旋藻粉75％-85％、玛咖粉3％-5％、枸杞提取物1％-3％、玉竹提取物1％-3％、白芷提取物1％-3％、肉豆蔻提取物1％-3％、枳椇子提取物1％-3％、栀子提取物1％-3％、聚维酮K301％-3％、十二烷基硫酸钠0.1％-0.5％、聚乙二醇40000.1％-0.5％和硬脂酸镁1％-3％。
所述螺旋藻片由如下重量百分比的原料制成：螺旋藻粉75％、玛咖粉5％、枸杞提取物3％、玉竹提取物3％、白芷提取物3％、肉豆蔻提取物3％、枳椇子提取物3％、栀子提取物2％、聚维酮K301％、十二烷基硫酸钠0.5％、聚乙二醇40000.5％和硬脂酸镁1％。
所述螺旋藻片由如下重量百分比的原料制成：螺旋藻粉80％、玛咖粉4％、枸杞提取物2％、玉竹提取物2％、白芷提取物2％、肉豆蔻提取物2％、枳椇子提取物2％、栀子提取物1％、聚维酮K303％、十二烷基硫酸钠0.2％、聚乙二醇40000.3％和硬脂酸镁1.5％。
所述螺旋藻片由如下重量百分比的原料制成：螺旋藻粉85％、玛咖粉3％、枸杞提取物1％、玉竹提取物1％、白芷提取物1％、肉豆蔻提取物1％、枳椇子提取物1％、栀子提取物3％、聚维酮K300.8％、十二烷基硫酸钠0.1％、聚乙二醇40000.1％和硬脂酸镁3％。
本发明还提供了所述的螺旋藻片的制备方法，包括如下步骤：
(1)将螺旋藻粉、玛咖粉、枸杞提取物、玉竹提取物、白芷提取物、肉豆蔻提取物、枳椇子提取物和栀子提取物分别过80目筛，得到细粉A；
(2)将十二烷基硫酸钠和聚维酮K30混合，加入60％乙醇溶解，配成8％的溶液，混合均匀，得到混合溶液；
(3)将所述步骤(2)得到混合溶液与所述步骤(1)制备得到的细粉A混合，制软材，18目筛制粒，得到湿颗粒；
(4)将所述步骤(3)得到的湿颗粒在60℃干燥，过16目筛整粒，得到干颗粒；
(5)将聚乙二醇4000与硬脂酸镁混合，过80目筛，得到细粉B；
(6)将所述步骤(4)得到的干颗粒与所述步骤(5)得到的细粉B置混合机中混合10min，混合均匀，得到混合颗粒；
(7)将所述步骤(6)得到的混合颗粒置压片机，压片，制备得到螺旋藻片。
所述螺旋藻片在制备增强免疫力的产品中的应用也属于本发明的保护范围。
本发明针对天然保健食品原料纤维素含量高，弹性大，可压性差，粒子内部结合不紧密，易出现松片的特点，着重研究在配方中加入改善可压性的赋形剂，并优化出配比组合，片剂表面光滑完整，硬度适中，崩解效果好，适用于规模化生产。
具体实施方式
实施例1、制备螺旋藻片
该实施例中所用的原料螺旋藻粉、玛咖粉、枸杞提取物、玉竹提取物、白芷提取物、肉豆蔻提取物、枳椇子提取物、栀子提取物、聚维酮K30、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇4000和硬脂酸镁均可从商业途径购买得到。
该实施例制备得到的螺旋藻片如表1所示：
表1实施例1制备得到的螺旋藻片
该实施例中螺旋藻片的制备方法如下：
一、制备原料提取物
该实施例所用到的枸杞提取物、玉竹提取物、白芷提取物、肉豆蔻提取物、枳椇子提取物、栀子提取物均可用以下方法制备得到：
(1)取原料药材，用水提取3次，每次1小时，10倍量水。
(2)水提液经200目筛过滤，弃去药渣，真空减压浓缩至膏状(70～75℃，0.03～0.06Mpa)。
(3)浓缩膏喷雾干燥，水分控制≤5.0％，塔内温度90～120℃，塔内真空－0.02～－0.04Mpa。
(4)干浸膏用粉碎机粉碎，过80目筛，混合均匀，取样检测，合格后包装，即得提取物(得率约为10％)。
二、制备螺旋藻片
(1)将螺旋藻粉、玛咖粉、枸杞提取物、玉竹提取物、白芷提取物、肉豆蔻提取物、枳椇子提取物和栀子提取物分别过80目筛，得到细粉A。
(2)将十二烷基硫酸钠和聚维酮K30混合，加入60％乙醇溶解，配成8％的溶液，混合均匀，得到混合溶液。
(3)将步骤(2)得到混合溶液与步骤(1)制备得到的细粉A混合，制软材，18目筛制粒，得到湿颗粒。
(4)将步骤(3)得到的湿颗粒在60℃干燥，过16目筛整粒，得到干颗粒。
(5)将聚乙二醇4000与硬脂酸镁混合，过80目筛，得到细粉B。
(6)将步骤(4)得到的干颗粒与步骤(5)得到的细粉B置混合机中混合10min，混合均匀，得到混合颗粒。
(7)将步骤(6)得到的混合颗粒置压片机，调节片重，压片，制备得到螺旋藻片剂。
三、崩解实验
仪器装置：采用升降式崩解仪，主要结构为一能升降的金属支架与下端镶有筛网的吊篮，并附有挡板。
升降的金属支架上下移动距离为55mm±2mm，往返频率为每分钟30-32次。
(1)吊篮：玻璃管6根，管长77.5mm±2.5mm，内径21.5mm，壁厚2mm；透明塑料板2块，直径90mm，厚6mm，板面有6个孔，孔径26mm；不锈钢板1块(放在上面一块塑料板上)，直径90mm，厚1mm，板面有6个孔，孔径22mm；不锈钢丝筛网1张(放在下面一块塑料板下)，直径90mm，筛孔内径2.0mm；以及不锈钢轴1根(固定在上面一块塑料板与不锈钢板上)，长80mm。将上述玻璃管6根垂直置于2块塑料板的孔中，并用3只螺丝将不锈钢板、塑料板和不锈钢丝筛网固定，即得。
(2)挡板：为一平整光滑的透明塑料块，相对密度1.18-1.20，直径20.7mm±0.15mm，厚9.5mm±0.15mm；挡板共有5个孔，孔径2mm，中央1个孔，其余4个孔距中心6mm，各孔间距相等；挡板侧边有4个等距离的V形槽，V形槽上端宽9.5mm，深2.55mm，底部开口处的宽与深度均为1.6mm。
检查法：将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入1000ml烧杯中，并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底部25mm，烧杯内盛有温度为37℃±1℃的水，调节水位高度使吊篮上升时筛网在水面下15mm处。
除另有规定外，取供试品6片，分别置上述吊篮的玻璃管中，启动崩解仪进行检查，各片均应在60分钟内全部崩解，如有1片不能完全崩解，应另取6片复试，均应符合规定。
崩解实验结果：
该实施例1制备得到的螺旋藻片A1，崩解时间为13min；
该实施例1制备得到的螺旋藻片A2，崩解时间为10min；
该实施例1制备得到的螺旋藻片A3，崩解时间为11min；
市场购买某品牌螺旋藻片1，崩解时间为71min；
市场购买某品牌螺旋藻片2，崩解时间为53min；
市场购买某品牌螺旋藻片3，崩解时间为64min；
市场购买某品牌螺旋藻片4，崩解时间为48min；
市场购买某品牌螺旋藻片5，崩解时间为45min。
由以上结果可见，本发明的螺旋藻片崩解性更好。
四、功能测试
本发明制备的螺旋藻片具有增强免疫力的功能。
以下是增强免疫力动物实验：
1实验方法
实验动物：18-22g雌性SPF级昆明种小鼠160只，由中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所提供，合格证号：SCXK(军)2009-0030000616。
实验动物饲养环境：SPF级实验动物室，合格证号：SYXK(津)2008-0004。温度：20-25℃，湿度：40-70％RH。饲料由天津市华荣实验动物科技有限公司提供，饲料生产许可证号：SYXK(津)2006-0001。
剂量选择：本试验设计了低、中、高三个剂量组，分别为0.25g/kg·BW、0.50g/kg·BW、1.00g/kg·BW，即相当于人拟用剂量的5倍、10倍、20倍。低、中、高剂量组分别取样品2.5g、5.0g、10.0g加蒸馏水至200ml。充分混匀，按0.2ml/10g·BW灌胃，对照组给予等量蒸馏水，每日一次，连续30天，末次给受试物后24小时测定各项指标。将实验动物分成4个大组，然后每组40只动物又分成4个小组，分别为对照和低、中、高三个剂量组，每组10只。其中1组进行HC50测定，抗体生成细胞检测、迟发型变态反应(足趾增厚法)；2组进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、脏/体比值测定；3组进行碳廓清试验；4组进行小鼠淋巴细胞转化试验、NK细胞活性测定试验。
1.1脏器/体重比值测定：给受试物30天后，称取脾脏、胸腺，计算脏/体比。
1.2迟发型变态反应(足趾增厚法)：给受试物第25天时腹腔注射2％SRBC，再连续给受试物至第30天时测量左后足趾部厚度，同时在测量部位注射20％SRBC20μl，24小时后再次测量。
1.3ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)：给受试物33天，无菌取脾，制成单细胞悬液，Hank’s液洗3遍，调整细胞浓度为3×106个/ml。将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔加75μlConA液(100μg/ml)，另一孔为对照，置5％CO2，37℃孵箱中培养72h。培养结束前4h，每孔吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT(5mg/ml)50μl/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，吹打均匀，使紫色结晶完全溶解，以570nm波长测定光密度值。
1.4半数溶血值(HC50)的测定：给受试物第25天腹腔注射2％SRBC，再连续给受试物至第30天时，内眦取血，离心集血清，试管内加入300倍稀释的血清1ml、10％SRBC0.5ml、补体1ml，37℃水浴20分钟，冰浴终止反应，离心，取上清1ml，加都氏试剂3ml，10分钟后540nm比色。
1.5抗体生成细胞检测：给受试物30天，于第25天腹腔注射2％SRBC，免疫5天后，脱臼处死，取脾，制成细胞悬液，200目筛网过滤，用Hanks液洗3次，每次1000r/min离心10min，将细胞悬浮于5mlRPMI1640培养液中，并调整细胞浓度为5×106个/ml。将表层培养基加热溶解，45℃水浴保温，与等量2倍浓度Hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，加入50μl10％SRBC，20μl脾细胞悬液，混匀，倒片，二氧化碳培养箱中培养1小时，加入用SA缓冲液稀释的补体(1:10)，继续培养1小时，计数溶血空斑数。
1.6小鼠碳廓清实验：给受试物30天后，尾静脉注射3.5倍稀释的印度墨汁(每10克体重0.1ml)，分别于第2、10分钟内眦取血20μl，加入到2.98ml0.1％碳酸钠溶液中，600nm比色。另取肝、脾称重，计算吞噬指数。
1.7小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)：给受试物30天后，每鼠腹腔注射20％鸡红细胞悬液1ml，间隔30min，颈椎脱臼处死动物，将其仰位固定于鼠板上，正中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml，转动鼠板1min，吸出腹腔洗液1ml，平均分滴于2片载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盘内，于37℃孵箱温育30min，孵毕，生理盐水漂洗，晾干，以1:1丙酮甲醇溶液固定，4％Giemsa染色10min。计数吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数及被吞噬的巨噬细胞数。
1.8NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法)：试验前24h将YAC-1细胞(靶细胞)进行传代培养，用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为4×105个/ml。无菌取脾，制成单细胞悬液，Hank’s液洗3遍，调整细胞浓度为2×107个/ml。取靶细胞和效应细胞各100μl(效靶比50:1)，加入U型96孔培养板，靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，靶细胞最大释放孔加靶细胞和1％NP40各100μl，均设三个复孔，于37℃、5％CO2培养箱中培养4h，每孔吸取上清液100μl置平底96孔培养板中，同时加入LDH基液100μl，反应3min，每孔加1mol/L的HCl30μl，在酶标仪492nm测定光密度值。
2结果统计：实验数据用SPSS11.5forWindows进行统计检测，对照组与实验组采用方差分析，如方差不齐者采用数据转换，转换后仍不齐则采用非参数统计。
3结果
3.1受试物对小鼠体重的影响
由表1-4可见，经口给予不同剂量的受试物30天后，各组动物生长活动良好，各剂量组动物增重与对照组比较，差异均无统计学意义(P﹥0.05)。
表1受试物对免疫1组小鼠体重的影响(g，均值±标准差)
表2受试物对免疫2组小鼠体重的影响(g，均值±标准差)
表3受试物对免疫3组小鼠体重的影响(g，均值±标准差)
表4受试物对免疫4组小鼠体重的影响(g，均值±标准差)
3.2受试物对小鼠脏器/体重比值的影响
由表5可见，各剂量组小鼠脾脏、胸腺/体重比值与对照组比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。
表5受试物对小鼠脏器/体重比值的影响(均值±标准差)
3.3受试物对小鼠细胞免疫功能的影响
3.3.1受试物对小鼠迟发型变态反应的影响(足趾增厚法)
由表6可见，中、高剂量组小鼠攻击前后足趾厚度差值高于对照组，且差异有统计学意义(P＜0.05)，低剂量组小鼠攻击前后足趾厚度差值与对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。
表6受试物对小鼠迟发型变态反应(足趾增厚法)的影响(均值±标准差)
*与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)
3.3.2受试物对ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)的影响
由表7可见，中、高剂量组小鼠脾淋巴细胞转化高于对照组，且差异有统计学意义(P＜0.05)，低剂量组与对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。
表7受试物对ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)的影响(均值±标准差)
*与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)
3.4受试物对体液免疫的影响
3.4.1受试物对小鼠半数溶血值(HC50)的影响
由表8可见，中、高剂量组的小鼠半数溶血值(HC50)高于对照组，且差异有统计学意义(P＜0.05)，低剂量组小鼠半数溶血值(HC50)与对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。
表8受试物对小鼠半数溶血值(HC50)的影响(均值±标准差)
*与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)
3.4.2受试物对小鼠抗体生成细胞试验的影响
由表9可见，高剂量组的小鼠抗体生成细胞数高于对照组，且差异有统计学意义(P＜0.05)，中、低剂量组小鼠抗体生成细胞数与对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。
表9受试物对小鼠抗体生成细胞的影响(均值±标准差)
3.5受试物对单核-巨噬细胞功能的影响
3.5.1受试物对小鼠碳廓清试验的影响
由表10可见，中、高剂量组的小鼠吞噬指数高于对照组，且差异有统计学意义(P＜0.05)，低剂量组的吞噬指数与对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。
表10受试物对小鼠碳廓清试验的影响(均值±标准差)
*与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)
3.5.2受试物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验的影响
由表11可见，三个剂量组小鼠的吞噬百分率及吞噬指数与对照组相比，差异均无统计学意义(P＞0.05)。
表11受试物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验的影响(均值±标准差)
3.6受试物对小鼠NK细胞活性的影响
由表12可见，高剂量组的NK细胞活性高于对照组，且差异有统计学意义(P＜0.05)，中、低剂量组的NK细胞活性与对照组，差异无统计学意义(P＞0.05)。
表12受试物对小鼠NK细胞活性的影响(乳酸脱氢酶测定法)(均值±标准差)
*与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)
小结：经口给予不同剂量的受试物30天后，各组动物生长活动正常。迟发型变态反应试验显示，中、高剂量组的足趾厚度差值高于对照组，且差异有统计学意义(P﹤0.05)；小鼠半数溶血值(HC50)影响试验显示，中、高剂量组的半数溶血值(HC50)高于对照组，且差异有统计学意义(P﹤0.05)；抗体生成试验显示，高剂量组的小鼠抗体生成细胞数高于对照组，且差异有统计学意义(P﹤0.05)；小鼠碳廓请试验显示，中、高剂量组小鼠吞噬指数高于对照组，且差异有统计学意义(P﹤0.05)；小鼠脾淋巴细胞转化试验显示，中、高剂量组小鼠脾淋巴细胞转化高于对照组，且差异有统计学意义(P﹤0.05)；NK细胞活性检测显示，高剂量组NK细胞活性高于对照组，且差异有统计学意义(P﹤0.05)。其它各项试验未见免疫抑制现象。结果表明，受试物具有增强动物免疫力功能作用。
Claims (6)
1.一种螺旋藻片，其特征在于：所述螺旋藻片主要由如下重量百分比的原料制成：螺旋藻粉75％-85％、玛咖粉3％-5％、枸杞提取物1％-3％、玉竹提取物1％-3％、白芷提取物1％-3％、肉豆蔻提取物1％-3％、枳椇子提取物1％-3％、栀子提取物1％-3％、聚维酮K301％-3％、十二烷基硫酸钠0.1％-0.5％、聚乙二醇40000.1％-0.5％和硬脂酸镁1％-3％。
2.根据权利要求1所述的螺旋藻片，其特征在于：所述螺旋藻片由如下重量百分比的原料制成：螺旋藻粉75％、玛咖粉5％、枸杞提取物3％、玉竹提取物3％、白芷提取物3％、肉豆蔻提取物3％、枳椇子提取物3％、栀子提取物2％、聚维酮K301％、十二烷基硫酸钠0.5％、聚乙二醇40000.5％和硬脂酸镁1％。
3.根据权利要求1所述的螺旋藻片，其特征在于：所述螺旋藻片由如下重量百分比的原料制成：螺旋藻粉80％、玛咖粉4％、枸杞提取物2％、玉竹提取物2％、白芷提取物2％、肉豆蔻提取物2％、枳椇子提取物2％、栀子提取物1％、聚维酮K303％、十二烷基硫酸钠0.2％、聚乙二醇40000.3％和硬脂酸镁1.5％。
4.根据权利要求1所述的螺旋藻片，其特征在于：所述螺旋藻片由如下重量百分比的原料制成：螺旋藻粉85％、玛咖粉3％、枸杞提取物1％、玉竹提取物1％、白芷提取物1％、肉豆蔻提取物1％、枳椇子提取物1％、栀子提取物3％、聚维酮K300.8％、十二烷基硫酸钠0.1％、聚乙二醇40000.1％和硬脂酸镁3％。
5.权利要求1-4中任一所述的螺旋藻片的制备方法，包括如下步骤：
(1)将螺旋藻粉、玛咖粉、枸杞提取物、玉竹提取物、白芷提取物、肉豆蔻提取物、枳椇子提取物和栀子提取物分别过80目筛，得到细粉A；
(2)将十二烷基硫酸钠和聚维酮K30混合，加入60％乙醇溶解，配成8％的溶液，混合均匀，得到混合溶液；
(3)将所述步骤(2)得到混合溶液与所述步骤(1)制备得到的细粉A混合，制软材，18目筛制粒，得到湿颗粒；
(4)将所述步骤(3)得到的湿颗粒在60℃干燥，过16目筛整粒，得到干颗粒；
(5)将聚乙二醇4000与硬脂酸镁混合，过80目筛，得到细粉B；
(6)将所述步骤(4)得到的干颗粒与所述步骤(5)得到的细粉B置混合机中混合10min，混合均匀，得到混合颗粒；
(7)将所述步骤(6)得到的混合颗粒置压片机，压片，制备得到螺旋藻片。
6.权利要求1-4中任一所述的螺旋藻片在制备增强免疫力的产品中的应用。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20160406 |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |