CN106172000A - 彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法 - Google Patents

彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法 Download PDF

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宋丽莉
何庆海
赵华强
白露
张志国
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    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008Methods for regeneration to complete plants
    • AHUMAN NECESSITIES
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    • A01H4/001Culture apparatus for tissue culture

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Abstract

本发明公开了彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,包括以下步骤:外植体消毒、不定芽诱导培养、增殖继代培养、芽苗生根培养和炼苗和移栽等步骤。本发明还分别公开了不定芽诱导培养基、增殖继代培养基和芽苗生根培养基的组成成分。本发明的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,通过运用植物组织培养技术,解决了对饴糖矾根进行大规模培养的问题,具有污染率低、成活率高等优点,适用于饴糖矾根种苗的规模化生产。

Description

彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养领域,特别涉及彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法。
背景技术
彩叶地被植物矾根是虎耳草科矾根属植物,为多年生常绿耐寒草本花卉。冬天可耐-34℃的低温,全光或半阴环境下均生长良好,且叶色丰富,亮色与暗色品种繁多,是多层次、多季相、多色相的生态景观不可多得的新优彩叶地被植物。
发明内容
本发明提供彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,通过运用植物组织培养技术,解决了对饴糖矾根进行大规模培养的问题,具有污染率低、成活率高等优点,适用于饴糖矾根种苗的规模化生产。
本发明的技术方案如下:
彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,包括以下步骤:
(1)外植体准备
取饴糖矾根的叶柄,经消毒、清洗后作为外植体;
(2)不定芽诱导培养
将所述的外植体接种于诱导培养基上培养,培养出愈伤组织,所述的愈伤组织分化出不定芽;
(3)增殖继代培养
将所述的不定芽分离出,接种于增殖继代培养基上培养,得到丛生芽;
(4)芽苗生根培养
将所述的丛生芽从其基部分离,接种于生根培养基上培养,得到饴糖矾根试管苗;
(5)炼苗和移栽
所述的饴糖矾根试管苗经炼苗、移栽,即完成所述的饴糖矾根组培快繁。
优选为,所述的饴糖矾根的叶柄依次经流水冲洗、酒精和次氯酸钠消毒、无菌水清洗获得所述的外植体。
优选为,所述的不定芽诱导培养、增殖继代培养和芽苗生根培养的培养温度均为23-25℃。
优选为,所述的炼苗步骤依次包括瓶内炼苗和瓶外基质炼苗,所述的瓶内炼苗为所述的饴糖矾根试管苗置于温度为23-25℃,光强为1200lx,光照为12h/d,相对湿度为75%条件下揭开培养瓶盖培养;所述的瓶外基质炼苗为经所述的瓶内炼苗后,再将试管苗栽植于基质炼苗室培养,所述的基质炼苗室的白天温度为23-25℃,晚间温度为14-16℃,光强为30-40klx,相对湿度为70%-85%。
优选为,所述的基质炼苗室的炼苗基质配方以质量比计算为草碳:蛭石:珍珠岩等于3:1:1。
优选为,所述的诱导培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4NO3、1900mgKNO3、440mg CaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水,所述的NAA的质量为0.01mg、0.03mg或0.05mg的其中之一。
优选为,所述的增殖继代培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4N03、1900mgKNO3、440mg CaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mgKH2PO4、6.2mg H3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.01mg NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水。
优选为,所述的生根培养基的各组分以升计算包括825mg NH4NO3、950mg KNO3、220mg CaCl2·2H2O、185mg MgSO4·7H2O、85mg KH2PO4、6.2mg H3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mgCoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、NAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水,所述的NAA的质量为0.3mg或0.5mg。
与现有技术相比,本发明的有益效果如下:
本发明的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,通过运用植物组织培养技术,采用所特有的不定芽诱导培养基、增殖继代培养基和丛芽生根培养基解决了对饴糖矾根进行大规模培养的问题,最终所得的不定芽最高的诱导率为90.6%,生根率为97.8%,试管苗成活率95%,具有污染率低、成活率高等优点,适用于饴糖矾根种苗的规模化生产。
当然,实施本发明的任一方法并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应该理解,这些实施例仅用于说明本发明,而不用于限定本发明的保护范围。在实际应用中本领域技术人员根据本发明做出的改进和调整,仍属于本发明的保护范围。
本发明的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,包括以下步骤:
(1)外植体准备
取饴糖矾根的叶柄,依次经流水冲洗、酒精和次氯酸钠消毒、无菌水清洗后获得所述的外植体;
(2)不定芽诱导培养
将所述的外植体接种于诱导培养基上培养,培养温度为23-25℃,25天后长出淡绿色愈伤组织,所述的愈伤组织分化出不定芽,所述的诱导培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4NO3、1900mgKNO3、440mg CaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mgCuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg 烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水,所述的NAA的质量为0.01mg、0.03mg或0.05mg的其中之一;
(3)增殖继代培养
将所述的不定芽切下,接种于增殖继代培养基上培养,培养温度为23-25℃,得到丛生芽,所述的增殖继代培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4N03、1900mg KNO3、440mgCaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mgKH2PO4、6.2mg H3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mgZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mgNa2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.01mg NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(4)芽苗生根培养
将所述的丛生芽从其基部切下,接种于生根培养基上培养,培养温度为23-25℃,20天后诱导芽苗生根,得到饴糖矾根试管苗,所述的生根培养基的各组分以升计算包括825mg NH4NO3、950mg KNO3、220mg CaCl2·2H2O、185mg MgSO4·7H2O、85mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mgCoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、NAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水,所述的NAA的质量为0.3mg或0.5mg;
(5)炼苗和移栽
所述的炼苗步骤依次包括瓶内炼苗和瓶外基质炼苗两步骤:首先,所述的饴糖矾根试管苗置于温度为23-25℃,光强为1200lx,光照为12h/d,相对湿度为75%下,打开培养瓶盖,培养8d,完成瓶内炼苗;然后将瓶内炼苗后的试管苗移入瓶外基质,,于基质炼苗室培养20d,即可完成瓶外基质炼苗,所述的基质炼苗室的白天温度为23-25℃,晚间温度为14-16℃,光强为30-40klx,相对湿度为70%-85%,所述的炼苗基质配方以质量比计算为草碳:蛭石:珍珠岩等于3:1:1;最后将完成瓶外基质炼苗的植株移栽到大田,即完成所述的饴糖矾根组织培养快速繁殖。
实施例1
彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,包括以下步骤:
(1)外植体的准备
取饴糖矾根的叶柄,经流水冲洗1h、75%酒精消毒15s和0.2%次氯酸钠消毒7min,无菌水冲洗干净后,获得所述外植体;
(2)不定芽诱导培养
将所述的外植体接种于诱导培养基上培养,培养温度为23-25℃,25天后长出淡绿色愈伤组织,所述的愈伤组织分化出不定芽,所述的诱导培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4NO3、1900mgKNO3、440mg CaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mgCuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.01mg NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(3)增殖继代培养
将所述的不定芽切下,接种于增殖继代培养基上培养,培养温度为23-25℃,得到丛生芽,所述的增殖继代培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4N03、1900mg KNO3、440mgCaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mgKH2PO4、6.2mg H3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mgZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mgNa2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.01mg NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(4)芽苗生根培养
将所述的丛生芽从其基部切下,接种于生根培养基上培养,培养温度为23-25℃,20天后诱导芽苗生根,得到饴糖矾根试管苗,所述的生根培养基的各组分以升计算包括825mg NH4NO3、950mg KNO3、220mg CaCl2·2H2O、185mg MgSO4·7H2O、85mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mgCoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.3mg NAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(5)炼苗和移栽
所述的炼苗步骤依次包括瓶内炼苗和瓶外基质炼苗两步骤:首先,所述的饴糖矾根试管苗置于温度为23-25℃,光强为1200lx,光照为12h/d,相对湿度为75%下,打开培养瓶盖,培养8d,完成瓶内炼苗;然后将瓶内炼苗后的试管苗移入瓶外基质,,于基质炼苗室培养20d,即可完成瓶外基质炼苗,所述的基质炼苗室的白天温度为23-25℃,晚间温度为14-16℃,光强为30-40klx,相对湿度为70%-85%,所述的炼苗基质配方以质量比计算为草碳:蛭石:珍珠岩等于3:1:1;最后将完成瓶外基质炼苗的植株移栽到大田,即完成所述的饴糖矾根组织培养快速繁殖。
实施例2
彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,包括以下步骤:
(1)外植体的制备
取饴糖矾根的叶柄,经流水冲洗1h、75%酒精消毒15s和0.2%次氯酸钠消毒7min,无菌水冲洗干净后,获得所述的外植体;
(2)不定芽诱导培养
将所述的外植体接种于诱导培养基上培养,培养温度为23-25℃,25天后长出淡绿色愈伤组织,所述的愈伤组织分化出不定芽,所述的诱导培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4NO3、1900mgKNO3、440mg CaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mgCuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.03mg NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(3)增殖继代培养
将所述的不定芽切下,接种于增殖继代培养基上培养,培养温度为23-25℃,得到丛生芽,所述的增殖继代培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4N03、1900mg KNO3、440mgCaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mgKH2PO4、6.2mg H3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mgZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mgNa2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.01mg NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(4)芽苗生根培养
将所述的丛生芽从其基部切下,接种于生根培养基上培养,培养温度为23-25℃,20天后诱导芽苗生根,得到饴糖矾根试管苗,所述的生根培养基的各组分以升计算包括825mg NH4NO3、950mg KNO3、220mg CaCl2·2H2O、185mg MgSO4·7H2O、85mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mgCoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.3mg NAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(5)炼苗和移栽
所述的炼苗步骤依次包括瓶内炼苗和瓶外基质炼苗两步骤:首先,所述的饴糖矾根试管苗置于温度为23-25℃,光强为1200lx,光照为12h/d,相对湿度为75%下,打开培养瓶盖,培养8d,完成瓶内炼苗;然后将瓶内炼苗后的试管苗移入瓶外基质,于基质炼苗室培养20d,即可完成瓶外基质炼苗,所述的基质炼苗室的白天温度为23-25℃,晚间温度为14-16℃,光强为30-40klx,相对湿度为70%-85%,所述的炼苗基质配方以质量比计算为草碳:蛭石:珍珠岩等于3:1:1;最后将完成瓶外基质炼苗的植株移栽到大田,即完成所述的饴糖矾根组织培养快速繁殖。
实施例3
彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,包括以下步骤:
(1)外植体的制备
取饴糖矾根的叶柄,经流水冲洗1h、75%酒精消毒15s和0.2%次氯酸钠消毒7min,无菌水冲洗干净后,获得所述的外植体;
(2)不定芽诱导培养
将所述的外植体接种于诱导培养基上培养,培养温度为23-25℃,25天后长出淡绿色愈伤组织,所述的愈伤组织分化出不定芽,所述的诱导培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4NO3、1900mgKNO3、440mg CaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mgCuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.05mg NAA、0.1mg 6-BA、
20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(3)增殖继代培养
将所述的不定芽切下,接种于增殖继代培养基上培养,培养温度为23-25℃,得到丛生芽,所述的增殖继代培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4N03、1900mg KNO3、440mgCaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mgKH2PO4、6.2mg H3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mgZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mgNa2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.01mg NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(4)芽苗生根培养
将所述的丛生芽从其基部切下,接种于生根培养基上培养,培养温度为23-25℃,20天后诱导芽苗生根,得到饴糖矾根试管苗,所述的生根培养基的各组分以升计算包括825mg NH4NO3、950mg KNO3、220mg CaCl2·2H2O、185mg MgSO4·7H2O、85mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mgCoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.3mg NAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水;
(5)炼苗和移栽
所述的炼苗步骤依次包括瓶内炼苗和瓶外基质炼苗两步骤:首先,所述的饴糖矾根试管苗置于温度为23-25℃,光强为1200lx,光照为12h/d,相对湿度为75%下,打开培养瓶盖,培养8d,完成瓶内炼苗;然后将瓶内炼苗后的试管苗移入瓶外基质,于基质炼苗室培养20d,即可完成瓶外基质炼苗,所述的基质炼苗室的白天温度为23-25℃,晚间温度为14-16℃,光强为30-40klx,相对湿度为70%-85%,所述的炼苗基质配方以质量比计算为草碳:蛭石:珍珠岩等于3:1:1;最后将完成瓶外基质炼苗的植株移栽到大田,即完成所述的饴糖矾根组织培养快速繁殖。
上述各实施例步骤(2)中,将所述的外植体接种于诱导培养基上培养25天后,得到如表1所示的不定芽诱导率。
表1不定芽诱导率
培养基 诱导率
实施例1 92%
实施例2 75%
实施例3 65%
从表1中可以得出,所述的外植体接种于诱导培养基上培养25天,不定芽的诱导率都较高,其中,以实施例1的诱导培养基的不定芽诱导率最高。
进一步的,上述各实施例步骤(4)中,将所述的丛生芽从其基部切下,接种于生根培养基上培养20天后,得到如表2所示的丛生芽生根率。
表2丛生芽生根率
培养基 生长率
实施例1 97.8%
实施例2 90%
实施例3 78%
从表1中可以得出,所述的丛生芽从其基部切下,接种于生根培养基上培养20天,丛生芽生根率都较高,其中,以实施例1的生根培
养基上培养的丛生芽生根率最高。
综上所述,本发明的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,所述的诱导培养基的最佳配方为,以升计算由1650mg NH4NO3、1900mgKNO3、440mg CaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mgNa2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mgFeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.01mgNAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成;生根培养基的最佳配方,以升计算由825mg NH4NO3、950mg KNO3、220mg CaCl2·2H2O、185mg MgSO4·7H2O、85mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mgCoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.3mg NAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水组成。
以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节,也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。显然,根据本说明书的内容,可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例,是为了更好地解释本发明的原理和实际应用,从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。

Claims (8)

1.彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)外植体准备
取饴糖矾根的叶柄,经消毒、清洗后作为外植体;
(2)不定芽诱导培养
将所述的外植体接种于诱导培养基上培养,培养出愈伤组织,所述的愈伤组织分化出不定芽;
(3)增殖继代培养
将所述的不定芽分离出,接种于增殖继代培养基上培养,得到丛生芽;
(4)芽苗生根培养
将所述的丛生芽从其基部分离,接种于生根培养基上培养,得到饴糖矾根试管苗;
(5)炼苗和移栽
所述的饴糖矾根试管苗经炼苗、移栽,即完成所述的饴糖矾根组培快繁。
2.根据权利要求1所述的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,其特征在于,所述的饴糖矾根的叶柄依次经流水冲洗、酒精和次氯酸钠消毒、无菌水清洗获得所述的外植体。
3.根据权利要求1所述的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,其特征在于,所述的不定芽诱导培养、增殖继代培养和芽苗生根培养的培养温度均为23-25℃。
4.根据权利要求1所述的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,其特征在于,所述的炼苗步骤依次包括瓶内炼苗和瓶外基质炼苗,所述的瓶内炼苗为所述的饴糖矾根试管苗置于温度为23-25℃;光强为1200lx,光照为12h/d,相对湿度为75%条件下,打开培养瓶盖进行培养;所述的瓶外基质炼苗为经所述的瓶内炼苗后,再将试管苗栽植于基质炼苗室培养,所述的基质炼苗室的白天温度为23-25℃,晚间温度为14-16℃,光强为30-40klx,相对湿度为70%-85%。
5.根据权利要求4所述的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,其特征在于,所述的基质炼苗室的炼苗基质配方以质量比计算为草碳:蛭石:珍珠岩等于3:1:1。
6.根据权利要求1所述的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,其特征在于,所述的诱导培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4NO3、1900mgKNO3、440mg CaCl2·2H2O、370mgMgSO4·7H2O、170mg KH2PO4、6.2mgH3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mgNa2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mgFeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水,所述的NAA的质量为0.01mg、0.03mg或0.05mg的其中之一。
7.根据权利要求1所述的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,其特征在于,所述的增殖继代培养基的各组分以升计算包括1650mg NH4N03、1900mg KNO3、440mg CaCl2·2H2O、370mg MgSO4·7H2O、170mgKH2PO4、6.2mg H3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mg Na2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mg CoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mg FeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、0.01mg NAA、0.1mg 6-BA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水。
8.根据权利要求1所述的彩叶地被植物饴糖矾根组培快繁方法,其特征在于,所述的生根培养基的各组分以升计算包括825mg NH4NO3、950mg KNO3、220mg CaCl2·2H2O、185mgMgSO4·7H2O、85mg KH2PO4、6.2mg H3BO3、22.3mg MnSO4·4H2O、10.6mg ZnSO4·7H2O、0.25mgNa2MoO4·2H2O、0.025mg CuSO4·5H2O、0.025mgCoCI2·6H2O、37.3mg Na2-EDTA、27.8mgFeSO4·7H2O、100mg肌醇、0.1mg维生素B1、0.5mg烟酸、0.5mg维生素B6、2.0mg甘氨酸、NAA、20g蔗糖、6g琼脂和余量的水,所述的NAA的质量为0.3mg或0.5mg。
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