CN106046001A - 一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用 - Google Patents
一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106046001A CN106046001A CN201610390193.5A CN201610390193A CN106046001A CN 106046001 A CN106046001 A CN 106046001A CN 201610390193 A CN201610390193 A CN 201610390193A CN 106046001 A CN106046001 A CN 106046001A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- chloroform
- preparation
- extract
- och
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 43
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 title abstract description 8
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims abstract description 11
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 11
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 claims description 14
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 claims description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 11
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 claims description 10
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 claims description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 6
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 claims description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 3
- WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;methanol Chemical compound OC.ClCCl WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 3
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 3
- 239000011435 rock Substances 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims 1
- 241001145009 Sophora alopecuroides Species 0.000 abstract description 6
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 abstract 1
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N Isomatrine Natural products C1CCC2CN3C(=O)CCCC3C3C2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- ZSBXGIUJOOQZMP-BHPKHCPMSA-N sophoridine Chemical compound C1CC[C@@H]2CN3C(=O)CCC[C@@H]3[C@@H]3[C@H]2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-BHPKHCPMSA-N 0.000 description 4
- ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N Matrine Chemical compound C1CC[C@H]2CN3C(=O)CCC[C@@H]3[C@@H]3[C@H]2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 229930014456 matrine Natural products 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000002243 primary neuron Anatomy 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- LTTQKYMNTNISSZ-MWTRTKDXSA-N (2S)-(-)-kurarinone Chemical compound C1([C@H]2OC=3C(C[C@@H](CC=C(C)C)C(C)=C)=C(O)C=C(C=3C(=O)C2)OC)=CC=C(O)C=C1O LTTQKYMNTNISSZ-MWTRTKDXSA-N 0.000 description 1
- 206010002660 Anoxia Diseases 0.000 description 1
- 241000976983 Anoxia Species 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 235000011201 Ginkgo Nutrition 0.000 description 1
- 244000194101 Ginkgo biloba Species 0.000 description 1
- 235000008100 Ginkgo biloba Nutrition 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- AAGFPTSOPGCENQ-UHFFFAOYSA-N Sophocarpin I Natural products C1CCC2CN3C(=O)C=CCC3C3C2N1CCC3 AAGFPTSOPGCENQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IGXQFUGORDJEST-UHFFFAOYSA-N Sophocarpine Natural products O=C1C=CCC2C3CCCC4CCCC(CN12)C34 IGXQFUGORDJEST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000046101 Sophora japonica Species 0.000 description 1
- 235000010586 Sophora japonica Nutrition 0.000 description 1
- 102000019259 Succinate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010012901 Succinate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000007953 anoxia Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 230000009514 concussion Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000004459 forage Substances 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- XQVFLLMCNGKXSM-UHFFFAOYSA-N kurarinone Natural products COc1cc(O)c(C(CC=C(C)C)C(=C)C)c2OC(CC(=O)c12)c3ccc(O)cc3O XQVFLLMCNGKXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- KDADHLPROOOPIC-UHFFFAOYSA-N neokurarinol Natural products COc1cc(O)ccc1C1CC(=O)c2c(OC)cc(O)c(CC(CCC(C)(C)O)C(C)=C)c2O1 KDADHLPROOOPIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- AAGFPTSOPGCENQ-JLNYLFASSA-N sophocarpine Chemical compound C1CC[C@H]2CN3C(=O)C=CC[C@@H]3[C@@H]3[C@H]2N1CCC3 AAGFPTSOPGCENQ-JLNYLFASSA-N 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D471/18—Bridged systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/52—Adding ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用，所述化合物的分子式为C28H26N2O6，结构式如下：所述化合物的衍生物结构式如下：其中，R1为H、OCH3、OH、CH3或CF3；R2为H、OCH3或OH；R3为H、OCH3或OH，R4为H、OCH3、OH、CH3或CF3；所述化合物采用苦豆子植物的果实部位经打粉、乙醇提取、氯仿萃取后烘干得到氯仿部位浸膏；氯仿部位浸膏经硅胶柱反复分离纯化后得到黄色粉末，即为本发明的目标化合物；本发明通过对苦豆子植物进行提取、萃取和柱层析，得到一种黄色粉末化合物，该化合物及其衍生物制备方法便捷，采用天然来源制备，用途广泛，能用于制备神经元保护或脑缺血再灌注损伤的药物或功能食品，具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及化学领域，具体是一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用。
背景技术
苦豆子(学名Sophora alopecuroides L)，异名布亚(维名)，是宁夏的重要药用植物资源和自然植被组成部分，野生资源分布面积广，蕴藏量大，种群优势突出；由于其较高的药用价值和生态功能，苦豆子资源的合理保护与开发利用越来越引起人们的重视，宁夏回族自治区已将苦豆子列入重点保护的六大地道药材之一，纳入国家中药现代化科技产业行动计划中，生产基地建设和深层次开发都有长足的发展。
苦豆子是重要的药用植物资源和饲用植物资源，早在1914年国外就从苦豆子籽实中提出苦参总碱，世界性研究苦豆子始于20世纪30年代初，前苏联学者用提出的苦参总碱入药后，发现具有清热解毒，抗菌消炎等作用，又分离出槐定碱、槐安碱；此后，波兰、美国学者相继研究报导了苦豆子植物体内的多种化学成份，1930年被正式列入《美国药典》，在世界上广泛引起重视并用于医药界，随后美国抗癌研究中心发现苦参碱中槐果碱在临床上有抗癌效果；国内研究始于1971年，为了开发资源，1975年研制的苦豆子生物碱制剂——苦豆子片治疗腹泻新药，被正式载入1977年版《中国药典》，现改名为克泻灵片；1983年开发出“苦参碱制剂妇炎栓”，用于治疗妇科疾病；1984年国内建成了第一条苦豆子生物碱工业生产线，生产苦豆总碱、苦参素、苦参碱、槐定碱等，开始了苦豆子生物碱系列产品的批量生产；苦豆子的利用价值具有极大的研究和开发空间。
发明内容
本发明的目的在于提供一种采用苦豆子分离制备的具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种具有神经元保护作用的化合物，分子式为C28H26N2O6，结构式如下：
所述化合物的衍生物结构式如下：
其中，R1为H、OCH3、OH、CH3或CF3；R2为H、OCH3或OH；R3为H、OCH3或OH，R4为H、OCH3、OH、CH3或CF3。
作为本发明进一步的方案：所述具有神经元保护作用的化合物的制备方法，包括以下步骤：
1)化合物提取分离：
1.1)原料：取苦豆子植物的果实部位，打粉备用；
1.2)将步骤1.1制备的苦豆子粉放入提取罐中，加入质量分数为10-95％的乙醇溶剂，提取得到初提浸膏；
1.3)将步骤1.2中提取得到的初提浸膏用水溶解，加入氢氧化钠溶液调节pH＝1-3.5，再加入与溶解初提浸膏用水等体积的氯仿，置于分液漏斗中，摇晃，静置至分层清晰，氯仿部位在下层，取下层氯仿部位，用旋转蒸发器旋干溶剂得氯仿部位浸膏；回收氯仿，反复萃取，直至氯仿层无颜色；
2)生物碱单体的分离、纯化：
2.1)选用硅胶柱，将100-400目硅胶用二氯甲烷浸泡，搅拌无气泡，湿法装柱；
2.2)将步骤1.3制备氯仿部位浸膏用二氯甲烷-甲醇溶解，加入100-400目的硅胶搅拌并挥干溶剂，并碾磨直到完全均匀，干法上样；
2.3)选取洗脱系统为二氯甲烷:甲醇，洗脱梯度为100:1、50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、0:1；流出液用瓶子收集，然后用旋转蒸发仪浓缩，移入小样瓶，并加以编号，直到洗脱后TLC检测无生物碱时停止；根据TLC检测生物碱的分离情况，合并各洗脱溶剂液，得到28个流份；
3)化合物单体纯化：
3.1)在洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝50:1条件下，收集9个流分，对其中Fr8进行硅胶柱层析；
3.2)在洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝100:1条件下收集的流分，旋干进行凝胶柱层析，得黄色粉末，得到目标化合物。
作为本发明再进一步的方案：所述化合物用于制备具有神经元保护或脑缺血再灌注损伤的药物或功能食品。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过对苦豆子植物进行提取和萃取，得到一种黄色粉末化合物，该化合物制备方法便捷，用途广泛，能用于制备具有神经元保护或脑缺血再灌注作用的药物，或功能饮料，具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为本发明化合物对神经元细胞活力影响的研究柱形图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种具有神经元保护作用的化合物，分子式为C28H26N2O6，其结构式如下：
所述化合物的衍生物结构式如下：
其中，R1为H、OCH3、OH、CH3或CF3；R2为H、OCH3或OH；R3为H、OCH3或OH，R4为H、OCH3、OH、CH3或CF3。
所述化合物的制备方法包括以下步骤：
1)化合物提取分离：
1.1)原料：取苦豆子植物的果实部位，打粉备用；
1.2)将步骤1.1制备的苦豆子粉放入提取罐中，加入质量分数为10-95％的乙醇溶剂，提取得到初提浸膏；
1.3)将步骤1.2中提取得到的初提浸膏用水溶解，加入氢氧化钠溶液调节pH＝1-3.5，再加入与溶解初提浸膏用水等体积的氯仿，置于分液漏斗中，摇晃，静置至分层清晰，氯仿部位在下层，取下层氯仿部位，用旋转蒸发器旋干溶剂得氯仿部位浸膏；回收氯仿，反复萃取，直至氯仿层无颜色。
2)生物碱单体的分离、纯化：
2.1)选用硅胶柱，将100-400目硅胶用二氯甲烷浸泡，搅拌无气泡，湿法装柱；
2.2)将步骤1.3制备氯仿部位浸膏用二氯甲烷-甲醇溶解，加入100-400目的硅胶搅拌并挥干溶剂，并碾磨直到完全均匀，干法上样；
2.3)选取洗脱系统为二氯甲烷:甲醇，洗脱梯度为100:1、50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、0:1；流出液用瓶子收集，然后用旋转蒸发仪浓缩，移入小样瓶，并加以编号，直到洗脱后TLC检测无生物碱时停止；根据TLC检测生物碱的分离情况，合并各洗脱溶剂液，得到28个流份；
3)化合物单体纯化：
3.1)在洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝50:1条件下，收集9个流分，对其中Fr8进行硅胶柱层析；
3.2)在洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝100:1条件下收集的流分，旋干进行凝胶柱层析，得黄色粉末，即为本发明的化合物。
所述化合物用于制备具有神经元保护或脑缺血再灌注损伤的药物，以及制备功能饮料。
下面通过神经元保护实验进一步阐述本发明化合物的作用
请参阅图1，神经元保护实验
1.细胞处理方法
1)利用原代神经元制备氧糖剥夺复供OGD/R模型对本发明的化合物H以及其衍生物M、衍生物L样品的活性进行筛选，衍生物M的结构：R1为OH，R2为H，R3为OH，R4为H；衍生物L的结构为：R1为H，R2为OH，R3为OCH3，R4为OH；将样品在培养基中终浓度为1μM，每个样品设3个复孔(n＝1)，重复5次(n＝5)；
2)原代培养神经元细胞以2×105个/ml的密度种于96孔细胞培养板中，细胞分组如下：空白对照组(control)、模型组(Model)、阳性对照组、给药组；
3)细胞常规培养：48h后换以新鲜培养液并给药(给予筛选样品或者阳性对照药、空白对照组和模型组给予等量溶媒)，换液后于37℃、5％CO2培养箱中继续孵育12h后换以不含血清的培养基，MTT法进行细胞活力检测；其中除正常对照组外各组细胞都进行氧糖剥夺造模，即以无糖血清培养液在三气培养箱缺氧孵育4h，结束后换含糖含血清的新鲜培养液；阳性对照组加入银杏叶提取物；
2.细胞活力的检测方法：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶等分子能使外源性的MTT还原为难溶的蓝紫色结晶物甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞并无此功能，二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色结晶物，并在570nm有最大光吸收，测定吸光度值可以用来衡量细胞活力；给药继续培养12h，每孔弃去原培养基，无血清培养基清洗1次，加入终浓度为0.5mg/ml的MTT，于37℃、5％CO2条件下继续培养4h，4h后吸去上清液，每孔加入DMSO 150μl，震荡10min，使孔内颗粒完全溶解并混匀；测定波长570nm处的吸光度(A570nm)值，由公式计算存活率，150μlDMSO的吸光度值(A本底)做为本底在计算中扣除，公式如下：
Viability(％)＝模型组OD570nm/正常对照组OD570nm×100％；
计算结果如附图1所示：本发明样品对OGD/R损伤的细胞活力的影响，显示的是给与不同浓度的发明样品12h后，测定的各组相对细胞活力；本发明的H、M、L三种样品均明显减轻原代神经元的损伤，提高了神经元细胞活性，证明了本发明的神经元细胞保护活性；###P<0.01与空白对照组相比，***P<0.01，**P<0.05与OGD/R模型组相比。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (3)
1.一种具有神经元保护作用的化合物，所述化合物的分子式为C28H26N2O6，其特征在于：所述化合物的结构式如下：
所述化合物的衍生物结构式如下：
其中，R1为H、OCH3、OH、CH3或CF3；R2为H、OCH3或OH；R3为H、OCH3或OH，R4为H、OCH3、OH、CH3或CF3。
2.根据权利要求1所述的具有神经元保护作用的化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)化合物提取分离：
1.1)原料：取苦豆子植物的果实部位，打粉备用；
1.2)将步骤1.1制备的苦豆子粉放入提取罐中，加入质量分数为10-95％的乙醇溶剂，提取得到初提浸膏；
1.3)将步骤1.2中提取得到的初提浸膏用水溶解，加入氢氧化钠溶液调节pH＝1-3.5，再加入与溶解初提浸膏用水等体积的氯仿，置于分液漏斗中，摇晃，静置至分层清晰，氯仿部位在下层，取下层氯仿部位，用旋转蒸发器旋干溶剂得氯仿部位浸膏；回收氯仿，反复萃取，直至氯仿层无颜色；
2)生物碱单体的分离、纯化：
2.1)选用硅胶柱，将100-400目硅胶用二氯甲烷浸泡，搅拌无气泡，湿法装柱；
2.2)将步骤1.3制备的氯仿部位浸膏用二氯甲烷-甲醇溶解，加入100-400目的硅胶搅拌并挥干溶剂，并碾磨直到完全均匀，干法上样；
2.3)选取洗脱系统为二氯甲烷:甲醇，洗脱梯度为100:1、50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、0:1；流出液用瓶子收集，然后用旋转蒸发仪浓缩，移入小样瓶，并加以编号，直到洗脱后TLC检测无生物碱时停止；根据TLC检测生物碱的分离情况，合并各洗脱溶剂液，得到28个流份；
3)化合物单体纯化：
3.1)在洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝50:1条件下，收集9个流分，对其中Fr8进行硅胶柱层析；
3.2)在洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝100:1条件下收集的流分，旋干进行凝胶柱层析，得黄色粉末，得到目标化合物。
3.根据权利要求1所述的具有神经元保护作用的化合物，其特征在于，所述化合物及其衍生物用于制备具有神经元保护或脑缺血再灌注损伤的药物或功能食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610390193.5A CN106046001A (zh) | 2016-06-02 | 2016-06-02 | 一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610390193.5A CN106046001A (zh) | 2016-06-02 | 2016-06-02 | 一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106046001A true CN106046001A (zh) | 2016-10-26 |
Family
ID=57170124
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610390193.5A Pending CN106046001A (zh) | 2016-06-02 | 2016-06-02 | 一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106046001A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107184756A (zh) * | 2017-01-19 | 2017-09-22 | 吉林大学 | 一种修复神经血管的药物组合物及其制备方法 |
| CN109970738A (zh) * | 2019-02-27 | 2019-07-05 | 上海工程技术大学 | 一种金雀花碱n-异黄酮类化合物及其制备方法及应用 |
| CN110804056A (zh) * | 2019-11-06 | 2020-02-18 | 浙江工业大学 | 具有金雀花碱-黄酮类骨架的化合物及其合成方法与应用 |
| CN115322198A (zh) * | 2022-06-13 | 2022-11-11 | 上海工程技术大学 | 基于喹诺里西啶类衍生物的药物化合物及其制备方法和应用 |
-
2016
- 2016-06-02 CN CN201610390193.5A patent/CN106046001A/zh active Pending
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| S. P. BONDARENKO ET AL.: "SYNTHESIS OF CYTISINE DERIVATIVES OF FLAVONOIDS.2. AMINOMETHYLATION OF 7-HYDROXYISOFLAVONES", 《CHEMISTRY OF NATURAL COMPOUNDS》 * |
| 黄焕森 等: "《神经外科麻醉与脑保护》", 30 November 2012, 河南科学技术出版社 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107184756A (zh) * | 2017-01-19 | 2017-09-22 | 吉林大学 | 一种修复神经血管的药物组合物及其制备方法 |
| CN109970738A (zh) * | 2019-02-27 | 2019-07-05 | 上海工程技术大学 | 一种金雀花碱n-异黄酮类化合物及其制备方法及应用 |
| CN109970738B (zh) * | 2019-02-27 | 2021-07-09 | 上海工程技术大学 | 一种金雀花碱n-异黄酮类化合物及其制备方法及应用 |
| CN110804056A (zh) * | 2019-11-06 | 2020-02-18 | 浙江工业大学 | 具有金雀花碱-黄酮类骨架的化合物及其合成方法与应用 |
| CN110804056B (zh) * | 2019-11-06 | 2020-11-13 | 浙江工业大学 | 具有金雀花碱-黄酮类骨架的化合物及其合成方法与应用 |
| CN115322198A (zh) * | 2022-06-13 | 2022-11-11 | 上海工程技术大学 | 基于喹诺里西啶类衍生物的药物化合物及其制备方法和应用 |
| WO2023241290A1 (zh) * | 2022-06-13 | 2023-12-21 | 上海工程技术大学 | 基于喹诺里西啶类衍生物的药物化合物及其制备方法和应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106046001A (zh) | 一种具有神经元保护作用的化合物及其制备方法和应用 | |
| CN102048786B (zh) | 金鸡菊提取物的制备和应用 | |
| CN106937959B (zh) | 一种抗肿瘤海蟑螂提取物及其制备工艺与检测方法与用途 | |
| CN108840956A (zh) | 一种双水相萃取分离纯化铁皮石斛多糖的方法 | |
| CN103893258B (zh) | 含有广金钱草总黄酮的口服固体制剂及其应用 | |
| CN102641317B (zh) | 金鸡菊提取物及其在制备抗糖尿病药物中的应用 | |
| CN108530430B (zh) | 酯型儿茶素吡咯烷生物碱及其制备方法和应用 | |
| CN101214253B (zh) | 知母皂苷b-ⅱ用于制备抗抑郁产品的用途 | |
| CN102134225B (zh) | 一种三环倍半萜内酯及其制备方法和应用 | |
| CN101647905A (zh) | 小儿感冒舒颗粒的制备方法 | |
| CN115634259A (zh) | 一种优化酶解超声提取和大孔树脂纯化总黄酮的方法 | |
| CN112675210A (zh) | 一种用于降低补骨脂肝毒性的方法 | |
| CN102875518A (zh) | 京尼平甲醚、其制备方法及其医药用途 | |
| CN105601693A (zh) | 人参皂苷f1的制备及其抗肿瘤作用 | |
| CN103570795B (zh) | 一种雷公藤红素的制备方法 | |
| CN103877149A (zh) | 香青兰总黄酮磷脂复合物、香青兰总黄酮磷脂复合物自乳化剂及其制备方法 | |
| CN107365284A (zh) | 一种从红豆杉中提取紫杉醇的方法 | |
| CN105434338A (zh) | 一种银杏内酯b氯化钠注射液及其制备方法 | |
| CN107158090A (zh) | 夏天无粉直接口服中药饮片 | |
| CN106728436B (zh) | 过墙风总黄酮的提取方法及其在制备保肝药物中的应用 | |
| CN111592537A (zh) | 一种降高尿酸血症的定心藤吲哚类生物碱及其用途 | |
| CN106860771B (zh) | 一种天麻精制组分的制备方法及天麻精制组分和应用 | |
| CN109200048A (zh) | 坎库拉中角型呋喃香豆素的降血压应用 | |
| CN107382914A (zh) | 从红豆杉中提取紫杉醇的方法 | |
| CN115400159B (zh) | 火把花根及其提取物在制备治疗抗疲劳药物中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20161026 |